En bivalent levende svekket influensavirusvaksine beskytter mot drevne H1N2 og H3N2 kliniske isolater i svin del 2

2.5. Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA)

For å lage beleggantigener ble SD435 og SD467 propagert i MDCK-celler og renset ved bruk av sukrosegradient-ultrasentrifugering. Inaktivering av virusene skjedde ved å tilsette 97 prosent -propiolakton til viruset i en konsentrasjon på 1:1000 (v/v) (Thermo Fisher Scientific, AAB2319703). Denne blandingen ble rystet ved 4 ◦C over natten, inkubert ved 37 ◦C i to timer for å lette hydrolyse av -propiolakton, deretter lagret ved -80 ◦C frem til bruk.

Antigener og immunitet er uatskillelige. Antigen refererer til ethvert stoff som kan gjenkjennes av immunsystemet og forårsake en immunrespons, inkludert bakterier, virus, tumorceller osv., mens immunitet refererer til kroppens evne til å reagere på disse antigenene.

Forholdet mellom antigener og immunitet kan illustreres med en enkel metafor: Akkurat som trening krever tilstrekkelig trening og kosttilskudd, avhenger forbedring av immuniteten også av gjentatt kontakt med antigener og de tilsvarende immuncellene og immunmolekylene. produsere. Når immunsystemet møter et antigen, angriper det ved å produsere spesifikke antistoffer, eller immunceller, sammen med minneceller for å beskytte oss mot reinfeksjon.

Vitenskapen har bekreftet at å utvikle gode leve- og spisevaner kan bidra til å forbedre immuniteten. For eksempel kan det å holde seg rent, ikke røyke, moderat trening og sovevaner bidra til å redusere invasjonen av antigener som bakterier og virus. Samtidig kan det å spise mat som er rik på antioksidanter, vitaminer og mineraler, som grønnsaker og frukt, fullkorn og fisk, også bidra til å forbedre immuniteten.

Kort sagt, forholdet mellom antigen og immunitet er veldig nært. Bare gjennom gjentatt kontakt med antigener og riktige levevaner kan immuniteten kontinuerlig forbedres, og ulike sykdommer kan forebygges og behandles. Derfor bør vi opprettholde en positiv holdning og utvikle gode levevaner for å beskytte oss mot sykdommer. Det kan sees at vi trenger å forbedre immuniteten vår. Cistanche kan hjelpe oss med å forbedre immuniteten vår, fordi Cistanche er rik på en rekke antioksidantstoffer, som vitamin C, karotenoider, etc. Disse ingrediensene kan rense frie radikaler og redusere oksidativt stress, forbedre motstanden til immunsystemet.

Klikk cistanche deserticola supplement

For å måle de swIAV-spesifikke IgG-nivåene indusert ved vaksinasjon og utfordring, ble griseserum tatt etter første (dag 20) og andre (dag 30) vaksinasjon, og før obduksjon (dag 36).

Renset -propiolakton-inaktiverte virus SD435 (1 µg/ml) og SD467 (2 µg/ml), fortynnet i karbonat/bikarbonatbeleggbuffer, (pH 9,6) ble påført Immulon-2 96-brønnplater ved 1{{ 12}}0 µL/brønn (Thermo Labsystems, Ottawa, ON, Canada, 3655) og inkubert over natten ved 4 ◦C. Etter inkubering over natten ble de belagte platene vasket fire ganger med TBST (0,1 M Tris, 0,17 M NaCl og 0,05 prosent Tween 20), hvortil fire ganger seriefortynninger av serumet eller BALF ble tilsatt. platen i duplikat, etterfulgt av en to-timers inkubering ved romtemperatur. Serum ble tilsatt ved en startfortynning på 1:10, og BALF ble tilsatt ufortynnet. Prøver av tidligere definerte positive kontrollsera og passende negative kontroller, serum og BALF fra uvaksinerte griser i en tidligere studie ble kjørt på hver plate [14].

Platene ble vasket fire ganger med TBST, hvoretter geit-anti-svin IgG (H pluss L) fosfatasemerket affinitetsrenset antistoff (1:5000) (Sigma Aldrich, SAB3700435) eller muse-anti-grise IgA (Serotec, MCA658) ( 1:300) fortynnet i TBST ble tilsatt og inkubert ved romtemperatur i én time. IgA ELISA-ene ble utviklet ved tilsetning av biotinylerte geit-anti-muse IgG (H pluss L) antistoffer (CALTAG, Burlingame, CA, USA, M30015) og streptavidin alkalisk fosfataseløsning (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) begge i én time i romtemperatur.

Etter inkubering ble både IgG- og IgA-plater vasket fire ganger med TBST, hvortil p-nitrofenylfosfatsubstrat (PNPP) [10 mg/ml p-nitrofenylfosfat di(tris) saltkrystallinsk (Sigma-Aldrich) 1 prosent dietanolamin (Sigma-Aldrich), 0,5 mg/ml MgCl2 og pH 9,8] (1 mg/ml) ble tilsatt og inkubert ved romtemperatur i to timer.

Reaksjonen ble stoppet ved tilsetning av 0.3 M etylendiamintetraeddiksyre (EDTA), og platene ble avlest i et spektrofotometer ved 405 nm med en referanse på 490 nm. Titeren til prøven ble definert som den høyeste fortynningen der OD for den prøven var høyere enn den definerte grensen (gjennomsnittlig OD for en kjent negativ prøve pluss to ganger standardavviket).

2.6. Virusnøytraliseringsanalyse (VN).

MDCK-celler (3,5 × 104) ble sådd ut i 96-brønnplater. Serum og BALF ble varmeinaktivert ved 56 ◦C i 30 min. To gangers fortynninger av serumet og BALF ble tilsatt til platen i fire eksemplarer, og 60 µL fortynnet serum eller BALF ble inkubert med et likt volum av SD435 eller SD456 inneholdende 100 TCID50 ved 37 ◦C i 1 time. 100 µL av blandingen ble deretter tilsatt til MDCK-cellene, og den cytopatogene effekten (CPE) ble dokumentert 48 timer og 72 timer etter infeksjon (pi). Nøytraliseringsantistofftiteren var den høyeste fortynningen av hver serumprøve som fullstendig beskyttet cellene mot CPE i minst 2 av 4 brønner.

2.7. Viral bestemmelse

Etter innsamling ble lungeprøvene umiddelbart plassert på is og frosset ved -80 ◦C inntil behandling. For prosessering ble hvert lungevev veid og en 10 prosent (w/v) konsentrasjon av MEM supplert med 1 x antibiotika-antimykotisk (Thermo Fisher Scientific, 15240-062) ble tilsatt. Lungevev ble homogenisert i TissueLyser II (Qiagen, Hilden, Tyskland) ved 30 Hz i 5 minutter, etterfulgt av sentrifugering ved 5000 × g i 10 minutter ved 4 ◦C. Den homogeniserte supernatanten ble samlet og lagret ved -80 ◦C inntil videre analyse. Neseprøvene ble vortexet i 15 sekunder og sentrifugert ved 1600 × g i 25 minutter ved 4 ◦C. Supernatantene ble samlet og lagret ved -80 ◦C inntil videre analyse. De virale titrene ble bestemt ved TCID50-analyse for lunge og kvantitativ RT-PCR for neseprøvene.

2.8. RNA-ekstraksjon og kvantitativ RT-PCR (qRT-PCR)

For å bestemme virale RNA-nivåer av SD467 og SD435 i neseprøvene etter utfordring, ble qRT-PCR utført. En standardkurve ble laget ved å bruke RNA ekstrahert fra SD435 og SD467 med en kjent titer. Kort fortalt ble RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Toronto, ON, Canada, 74136) brukt til å ekstrahere vRNA fra 200 µL nesevask. RNA ble omdannet til cDNA ved bruk av den universelle influensaprimeren Uni12 og SuperScript III Transcriptase (Invitrogen, Burlington, ON, Canada) [19]. qPCR ble utført i tre eksemplarer på et StepOnePlusTM sanntids PCR-system (Applied Biosystems, CA, USA) med Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems), 5 µL cDNA og 1 µL 10 µM forover- og reversprimere. PCR-reaksjoner ble kjørt ved en annealingstemperatur på 58 ◦C i 40 sykluser. Alle sekvenser av qPCR-primere er tilgjengelige på forespørsel.

2.9. Statistisk analyse

Statistisk analyse ble utført ved bruk av GraphPad Prism 8-programvare. Mann-Whitney og Kruskal-Wallis ikke-parametriske tester ble brukt. Signifikante forskjeller er angitt med * (p < 0.05), ** (p < 0.01), *** (p < 0,001) , eller **** (p < 0,0001). ns=ikke signifikant.

3. Resultat

3.1. Vaksinasjon med den bivalente vaksinen ga beskyttelse mot nye kliniske isolater

Vi målte den fysiske responsen på utfordrende virus så vel som viral replikasjon i luftveiene for å vurdere beskyttelsen gitt av den bivalente vaksinen mot disse nye kliniske isolatene. Temperaturen ble registrert daglig i fem dager etter virusutfordring i alle grupper. Griser som ble spottvaksinert og utfordret med SD435 (H3N2) (MEM/SD435) eller SD467 (H1N2) (MEM/SD467) viste en typisk temperaturøkning på dag 1 post-viral utfordring, med mediantemperaturer på 40,6 ◦C og 41,1 ◦ C, henholdsvis. Denne toppen ble ikke sett i de vaksinerte gruppene som ble utfordret med SD435 (bivalent/SD435) eller SD467 (bivalent/SD467), som hadde mediantemperaturer på henholdsvis 39,4 ◦C og 39,6 ◦C. På dag 2–5 etter utfordringen hadde både vaksinerte og uvaksinerte grupper temperaturer rundt 39 ◦C (Figur 2A).

Fem dager etter utfordringen ble alle griser obducert, med lungene fjernet intoto og analysert for å kvantifisere mengden lesjoner som var tilstede. Bivalent/SD435-gruppen viste minimale eller ingen lesjoner, med en median på 0,65 prosent totale lungelesjoner. MEM/SD435-gruppen hadde signifikant høyere lesjoner enn den vaksinerte motparten, med en median på 5,1 prosent (p=0.0025) (Figur 2B). I Bivalent/SD467-gruppen hadde fem av syv griser lave mengder lesjoner (<2%), one had minor lesions (3.75%), and one outlier had high lesions (31%), with a group median of 1.9%. Compared with the vaccinated group, the MEM/SD467 group had a higher degree of lesions with a median of 4.55% (p = 0.0417) (Figure 1C).

I lungene hadde gruppene Bivalent/SD435 og Bivalent/SD467 begge lave titere av viruset, med gjennomsnitt på henholdsvis 8,6 PFU/mL/gr og 3.0 PFU/mL/gr. Motsatt hadde MEM/SD435- og MEM/SD467-gruppene høyere mengder virus, med gjennomsnitt på henholdsvis 656,1 og 9118,2 PFU/mL/gr (p=0.0025 for begge) (Figur 3A, B). Lignende trender ble sett i neseprøvene. I Bivalent/SD435-gruppen var nesetitere lave på dag 1, 3 og 5 etter utfordring (dpc), mens i MEM/SD435-gruppen var titerne litt forhøyet og økte etter hvert som dagene gikk (ns) (Figur 3C). I Bivalent/SD467-gruppen var nasale titere også lave, i gjennomsnitt under 5 PFU/mL på dag 1 og 5, og 10,0 PFU/mL på dag 3 etter utfordring. Titere var høyere i MEM/SD467-gruppen hver dag, i gjennomsnitt 4123,6 PFU/mL/gr på 1dpc (p=0.0278), 77233.1 PFU/mL/gr (p=0.0009) på 3dpc og 65,2 PFU/mL/gr på 5dpc (ns) (Figur 3D).

Alt i alt tyder disse resultatene på at den bivalente vaksinen ga en betydelig grad av beskyttelse mot utfordringsstammer, og reduserte lungelesjoner og viral replikasjon knyttet til infeksjon med disse to swIAV-isolatene i lunge- og nesegangene.

3.2. Den bivalente vaksinen induserer immunresponser mot utfordringsstammer

Vi målte antistoffresponsen i serum og lungespesifikk for begge utfordringsstammene etter prime-boost-vaksinasjon med den bivalente vaksinen. Serum ble samlet inn fra griser etter den første vaksinen (dag 20) og etter den andre vaksinen (dag 30). Utfordringsvirusene SD435 (H3N2) og SD467 (H1N2) ble brukt som fangeantigener for å måle den virusspesifikke IgG-antistoffresponsen i serumet. Med SD435 var det ingen signifikant forskjell mellom antistofftitere i MEM og de bivalente vaksinerte gruppene etter første vaksinasjon (dag 20). Imidlertid var antistofftitere mot SD467 signifikant høyere i den vaksinerte gruppen på dag 20 (p=0.0321). Etter den andre vaksinen (dag 31) var antistofftitere signifikant høyere i den vaksinerte gruppen mot både SD435 og SD467 enn i MEM-mock-vaksinegruppene (p < 0,0001) (Figur 4A, B). Spesifikt, mot fangstantigen SD435, var serum-IgG-titere i den MEM-mock-vaksinerte gruppen i gjennomsnitt 52 på dag 20 og 30, mens de var 311 (dag 20) og 4852 (dag 30) i den bivalente vaksinegruppen (Figur 3A). Mot SD467 var serum-IgG-titere i den falske vaksinerte MEM-gruppen 39 (dag 20) og 38 (dag 30), mens de i den bivalente vaksinegruppen var 219 (dag 20) og 3509 (dag 30) (Figur 3B).

Lignende trender ble sett når nøytraliserende antistofftitere ble målt i serumet mot de to utfordringsstammene. Igjen var det ingen signifikant forskjell mellom nøytraliserende antistofftitere i MEM- og bivalent vaksinerte grupper mot SD435 etter én dose vaksine (dag 20) ​​(Figur 5A, B). Mot SD467 var antistoffnivåene signifikant høyere på dag 20, etter én vaksine (p=0.0069). Mot begge virusene var det en økning i antistofftitere i de bivalente vaksinegruppene etter andre dose dag 30) (p < 0,0001). Titere i den MEM-mock-vaksinerte gruppen ble utfordret med SD435 i snitt 1 (dag 20) og 3 (dag 30), mens titere i den bivalente gruppen var gjennomsnittlig på 10 (da20) og 77 (dag 30) (Figur 5A). Titere i den MEM-mock-vaksinerte gruppen utfordret med SD467 var i gjennomsnitt 0 (dag 20) og 2 (dag 30), mens titere i den bivalente vaksinegruppen var gjennomsnittlig 10 (dag 20) og 54 (dag 30) (Figur 5B).

Ved obduksjon (dag 36) ble BALF samlet fra hver av grisene slik at antistoffnivåer kunne måles i lungene. Utfordringsvirusene SD435 og SD467 ble brukt som fangeantigener for å måle den virusspesifikke IgA- og IgG-responsen. Mot SD435 var IgA-nivåene i MEM-mock-vaksinegruppene i gjennomsnitt 17, mens titerne i den bivalente vaksinegruppen var signifikant høyere, med et gjennomsnitt på 95 (p=0.0014) (Figur 6A). For SD467 var IgA-nivåene i gjennomsnitt 18 i den falske vaksinegruppen og var signifikant høyere ved 158 i den bivalente vaksinegruppen (p=0.0185) (Figur 6B). Når det gjelder IgG, var titere mot SD435 i MEM-mock-vaksinegruppen i gjennomsnitt 3, mens de i den bivalente gruppen var signifikant høyere ved et gjennomsnitt på 138 (p < 0,0001) (Figur 6C). IgG-antistoffer mot SD467 var i gjennomsnitt 16 i MEM-mock-vaksinegruppene, mens de i den bivalente vaksinegruppen var signifikant høyere, med et gjennomsnitt på 259 (p < 0,0001) (Figur 6D).

Når det gjelder nøytraliserende antistoffer i BALF, var trendene lik de som ble sett i IgA- og IgG-ELISA-ene. Mot SD435 var nøytraliserende antistofftitere upåviselige i MEM-mock-vaksinegruppene, og de var i gjennomsnitt signifikant høyere ved 13,2 i den bivalente vaksinegruppen (p < 0.0001) (Figur 7A). Tilsvarende var antistofftitere spesifikke for SD467 i gjennomsnitt 0,7 i MEM-mock-vaksinegruppene og var signifikant høyere i den bivalente vaksinegruppen med en gjennomsnittlig titer på 10,9 (p=0.0002) (Figur 7B). Til sammen viser disse dataene at to doser av den bivalente vaksinen induserer en potent systemisk humoral respons, så vel som en lokal immunrespons i lungen mot disse to ikke-homologe kliniske isolatene.

4. Diskusjon

Vi har tidligere vist at elastaseavhengige virus SD191-R342V og SD69.K345V var fullstendig svekkede og ikke-virulente hos griser, og at to vaksinasjoner med denne bivalente LAlV utløste en robust immunrespons og ga beskyttelse mot infeksjon med homolog SD191 ( H1N2) og SD69 (H3N2) stammer [14). I denne nåværende studien ønsket vi å teste om den bivalente vaksinen ville holde seg in vivo mot nyere kliniske isolater som har gjennomgått antigendrift. SD467 er, i likhet med SD191, et medlem av Ho-3-antigengruppen som har dukket opp i Canada, men den har ervervet en rekke mutasjoner i viktige antigene steder (12,15]. På samme måte representerer SD435 H3N2 IV-E-klyngen som er tilstede i det vestlige Canada og har flere aminosyresubstitusjoner i viktige H3 antigene steder fra de som er tilstede i SD69 (17].

Den bivalente LAlV reduserte lesjoner signifikant hos vaksinerte griser når de ble utfordret med enten SD435 (H3N2) eller SD467 (H1N2) og forhindret en temperaturøkning som ble sett i MEM (mock)-vaksinerte grupper én dag etter utfordring. Det førte også til en reduksjon av viral replikasjon av begge stammer i lungene og en reduksjon av SD467 (H1N2) i neseprøvene. Interessant nok var nasale titere av SD435 (H3N2) lave i både vaksinerte og uvaksinerte grupper, til tross for identiske prøvetakingsmetoder, noe som tyder på at denne stammen kanskje ikke har så mye tropisme for nesegangene. Med hensyn til den ytterste grisen i gruppen som hadde en høy lungelesjonsscore på 31, viste temperaturmålinger ingen topp ved utfordringen, og virustitere i lungen var under 10 PFU/g/ml. Antistoffnivåer i serum og den lokale lungeresponsen var også den samme som i alle andre vaksinerte griser. Dette får oss til å spekulere i at lesjonene ikke var influensarelaterte. Seroanalyse viste at en sterk immunrespons ble montert mot begge stammer etter to doser av vaksinen, og det samme viste seg å være sant med hensyn til lokal analyse i lungen. Antistoffrettede overflateglykoproteiner er avgjørende for å beskytte mot IAV-infeksjon, så det høye nivået av nøytraliserende antistoffer samt lgG og lgA funnet i vaksinerte griser støtter beskyttelsen sett in vivo [20].

Helinaktivert virus (WIV) vaksiner er de mest tilgjengelige for svin som er tradisjonelt formulert med adjuvans, de anses som en trygg tilnærming siden det ikke er noen risiko for reassortering med sirkulerende stammer. Imidlertid gir de begrenset effekt mot feilmatchede stammer og har vist seg å føre til vaksine-assosiert forbedret respiratorisk lidelse (VAERD) når de brukes mot feilmatchede stammer. Effektiviteten deres reduseres også i nærvær av maternalt avledede antistoffer (MDA) [4]. De kommersielt tilgjengelige i Nord-Amerika inkluderer FluSure XP®, som er tilgjengelig som en tetravalent formulering i USA med H1N1-, H1N2- og H3N2-klynger IV-A og IV-B [21]. En eldre formulering av Flusure XP® er tilgjengelig i Canada med to stammer av H1N1 og én H1N2-stamme, isolert mellom 2000 og 2005 [22]. I begge de nordamerikanske landene er FluSure® Pandemic tilgjengelig, en monovalent vaksine som består av H1N1pdm09-stammen, samt Pneumostar SIV Complete (Elanco, Greensboro, North Carolina, US Inc.), som inneholder H1N1, H1N2 og H3N2, og Pneumostar SIV, med H1N1 og H3N2 subtype stammer (GOC, USDA) [23,24]. Disse kommersielt tilgjengelige vaksinene står for rundt 50 prosent av svineinfluensavaksine i Nord-Amerika, og de andre 50 prosent av vaksinene er autogene vaksiner [4].

Når det gjelder alternative vaksineplattformer, ble en rekombinant alfavirus-avledet replikonpartikkelvaksine lisensiert i USA [4]. Denne vaksineplattformen bruker et alfavirus med et endret genom, hvor virale strukturelle gener erstattes av et valgfritt gen, noe som gjør alfavirusreplikasjonen defekt. Dette RNA er selvreplikerende, så vaksineplattformen fører til høy ekspresjon av genet av interesse, og for influensa er både HA og nukleoprotein (NP) testet som antigener [25]. Studier har vist at bruken av denne plattformen beskytter mot antigenisk HA-matchede og -mismatchede utfordringer, så vel som NP-mismatchede stammer, selv om plattformen ikke var i stand til å beskytte mot tilstedeværelsen av MDA.

Den første LAIV for svineinfluensa ble godkjent av US Department of Agriculture (USDA) i 2017. Ingelvac Provenza™ er en bivalent H3N2- og H1N1-vaksine, med HA og NA fra to stammer isolert i USA, uttrykt på TX98-ryggraden, svekket gjennom trunkering av det ikke-strukturelle proteinet (NS1) [14,26]. LAIV-er etterligner naturlig infeksjon og fører til økt slimhinneimmunitet i de øvre luftveiene når de leveres intranasalt. Der inaktiverte vaksiner hovedsakelig fører til produksjon av systemiske IgG-antistoffer, kan levende svekkede vaksiner indusere slimhinne-IgA i luftveiene, samt økt cellemediert respons på grunn av eksponering av immunsystemet for indre influensaproteiner, som inneholder mer T. celleepitoper [27]. Dette fører til bedre beskyttelse mot mismatchede stammer.

De har vist delvis beskyttelse i nærvær av MDAer. Hele IgG-antistoffer er mer utbredt i de nedre luftveiene, og polymere IgA-antistoffer er dominerende i de øvre luftveiene hos griser, oftest som dimerer [28]. Disse antistoffene produseres lokalt og transporteres over epitelcellelaget der de forblir i slimet, hjulpet av en sekretorisk komponent som motstår nedbrytning av proteaser [28,29]. IgA-antistoffer er det adaptive immunsystemets første forsvarslinje mot innkommende patogener, og jobber for å blokkere viral binding til sialinsyrereseptorer [30]. Polymere IgA-antistoffer er mer bredt kryssreaktive enn monomere IgG-antistoffer, potensielt på grunn av multivalent binding [31]. Studier har også vist at disse antistoffene kan forhindre frigjøring av nydannet IAV fra infiserte celler mye mer effektivt enn IgG eller monomert IgA, som kan finnes i svineserum, noe som tyder på at den polymere strukturen til IgA er fordelaktig for tverrbinding av det virale avkommet til HA uttrykt på den infiserte celleoverflaten [31–33]. Den lokale IgA-antistoffresponsen er derfor integrert i beskyttelsen mot infeksjon med IAV og har blitt foreslått å være en korrelat av beskyttelse hos mennesker [34].

Risikoen med LAIV er imidlertid potensialet for resortiment med sirkulerende stammer. En fylogenetisk studie i USA fant nye stammer i sirkulasjon som hadde kombinert med vaksinestammene inkludert i Ingelvac Provenza™ [26]. Den elastaseavhengige LAIV-plattformen reduserer denne risikoen, ettersom elastaseproteinet er svært lite i luftveiene hos svin, så replikering av vaksinevirus er svært begrenset, og det samme er tidsrammen for reassortering skal skje. Fremtidige studier vil inkludere evaluering av denne bivalente vaksinens reassorteringsrisiko, samt hvordan denne vaksinen holder seg i nærvær av MDA. Det ville også vært interessant å teste den cellemedierte responsen til denne vaksinen, da dette er en av de største fordelene med LAIV. Avslutningsvis utvidet den bivalente elastase-avhengige LAIV beskyttelsen til nye kliniske isolater funnet i det vestlige Canada, og ville fylle noen hull i markedet for svineinfluensavaksine.

Forfatterbidrag:

Konseptualisering, YZ; metodikk, YZ og LA; formell analyse, LA; etterforskning, LA og UB-C.; ressurser, SD; skriving – originalutkast, LA; skriving— anmeldelse og redigering, YZ, UB-C., og SD; tilsyn, YZ; finansieringsoppkjøp, YZ Alle forfattere har lest og godtatt den publiserte versjonen av manuskriptet.

Finansiering:

Denne forskningen ble finansiert av Agriculture Development Fund (ADF), Ministry of Saskatchewan Agriculture. LA er delvis støttet av Vaccinology and Immunotherapeutics (V&I) Scholarship fra School of Public Health, University of Saskatchewan. VIDO mottar driftsmidler fra regjeringen i Saskatchewan gjennom Innovation Saskatchewan og Landbruksdepartementet og fra Canada Foundation for Innovation gjennom Major Science Initiatives for sitt CL3-anlegg (InterVac).

Uttalelse fra institusjonell revisjonskomité:

Ikke aktuelt.

Datatilgjengelighetserklæring:

Dataene og analysene fra denne studien er alle rapportert i denne artikkelen.

Anerkjennelser:

Vi vil takke VIDOs veterinærer og dyreteknikere for å utføre alt dyrearbeid til våre dyreforsøk. Dette verket er publisert med tillatelse fra direktøren for VIDO som manuskriptserie #1005.

Interessekonflikter:

Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.

Referanser

Webster, RG Influensavirus: Overføring mellom arter og relevans for fremveksten av den neste menneskelige pandemien. Arch. Virol. Suppl. 1997, 13, 105–113. [PubMed]

2. Li, Y.; Robertson, I. Epidemiologien til svineinfluensa. Anim. Dis. 2021, 1, 21. [CrossRef] [PubMed]

3. Donovan, T. Influensas rolle på voksende griseprestasjoner; University of Minnesota: Minneapolis, MN, USA, 2005.

4. Gracia, JCM; Pearce, DS; Masic, A.; Balasch, M. Influensa et virus hos svin: epidemiologi, utfordringer og vaksinasjonsstrategier. Front. Vet.-Sci. 2020, 7, 647. [CrossRef] [PubMed]

5. Ma, W. Svineinfluensavirus: Nåværende status og utfordring. Virus Res. 2020, 288, 198118. [CrossRef]

6. Suzuki, Y.; Ito, T.; Suzuki, T.; Holland, RE; Chambers, TM; Kiso, M.; Ishida, H.; Kawaoka, Y. Sialinsyrearter som en determinant for vertsområdet for influensa A-virus. J. Virol. 2000, 74, 11825–11831. [CrossRef]

7. Sun, H.; Xiao, Y.; Liu, J.; Wang, D.; Li, F.; Wang, C.; Li, C.; Zhu, J.; Song, J.; Sun, H.; et al. Utbredt eurasisk fuglelignende H1N1-svineinfluensavirus med pandemiske virusgener fra 2009 som letter menneskelig infeksjon. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2020, 117, 17204–17210. [CrossRef]

8. Henritzi, D.; Petric, PP; Lewis, NS; Graaf, A.; Pessia, A.; Starick, E.; Breithaupt, A.; Strebelow, G.; Luttermann, C.; Parker, LMK; et al. Overvåking av europeiske tamgrisepopulasjoner identifiserer et voksende reservoar av potensielt zoonotiske svineinfluensa A-virus. Cell Host Microbe 2020, 28, 614–627.e6. [CrossRef]

9. Vincent, AL; Ma, W.; Lager, KM; Janke, BH; Richt, JA Svineinfluensavirus: Et nordamerikansk perspektiv. Adv. Virus Res. 2008, 72, 127–154.

10. Rajao, DS; Anderson, TK; Kitikoon, P.; Stratton, J.; Lewis, NS; Vincent, AL Antigen og genetisk utvikling av moderne svine-H1-influensavirus i USA. Virology 2018, 518, 45–54. [CrossRef]

11. Mena, I.; I Nelson, M.; Quezada-Monroy, F.; Dutta, J.; Cortes-Fernández, R.; Lara-Puente, JH; Castro-Peralta, F.; Cunha, LF; Trovão, NS; Lozano-Dubernard, B.; et al. Opprinnelsen til H1N1-influensapandemien i 2009 hos svin i Mexico. Elife 2016, 5, e16777. [CrossRef]

12. Nelson, MI; Culhane, MR; Trovão, NS; Patnayak, DP; Halpin, RA; Lin, X.; Shilts, MH; Das, SR; Detmer, SE Fremveksten og utviklingen av influensa A (H1) virus hos svin i Canada og USA. J. Gen. Virol. 2017, 98, 2663–2675. [CrossRef] [PubMed]

13. Chauhan, RP; Gordon, ML En systematisk gjennomgang som analyserer forekomsten og sirkulasjonen av influensavirus i svinepopulasjonen over hele verden. Patogener 2020, 9, 355. [CrossRef]

14. Landreth, S.; Detmer, S.; Gerdts, V.; Zhou, Y. En bivalent levende svekket influensavirusvaksine beskytter mot H1N2 og H3N2 virusinfeksjon hos svin. Vet. Microbiol. 2020, 253, 108968. [CrossRef] [PubMed]

15. McCormick, K.; Jiang, Z.; Zhu, L.; Lawson, SR; Langenhorst, R.; Ransburgh, R.; Brunick, C.; Tracy, MC; Hurtig, HR; Mabee, LM; et al. Konstruksjon og immunogenisitetsevaluering av rekombinante influensa A-virus som inneholder kimære hemagglutinin-gener avledet fra genetisk divergerende influensa A H1N1-subtypevirus. PLoS ONE 2015, 10, e0127649. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com