Acteosid: Forskning på antioksidanter og antihypertensiv aktivitet

Ta kontakt med:joanna.jia@wecistanche.com

Antioksidanter og antihypertensive aktiviteter av akteosid og dets analoger

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,* og Miao-Lin HU1,*

Abstrakt. Acteosid(Act), et fenyletanoidglykosid, er en aktiv forbindelse i flere planter og tradisjonelle urtemedisiner. Virker sammen med dens strukturelle isomer,isoakteosid(Isoact), og en analog, 6-O-acitet-lakteosid (6-O-acetylakt), ble brukt i studien for å undersøkeantioksidant, anti-angiotensin-konverterende enzym (ACE) og hemolysehemmende aktiviteteri vitroog antihypertensiv aktivitet mot spontant hypertensive rotter (SHR)i vivo. Vi viste at Act, Isoact og 6-O-acetylakt fjernet effektivt 1,1-difenyl-2-pikrylhydrazylradikaler (med IC50 ved henholdsvis 11,4, 9,48 og 9,55 μM) og superoksidradikaler (med IC50 ved 686,5, 686,5) henholdsvis 39,1 μM). Som Isoact og 6-O-acetylakt hadde lignende radikalfjernende aktiviteter, bare Act og Isoact ble brukt for følgende studier. Både Act og Isoact hemmet xantinoksidaseaktivitet med IC50 ved henholdsvis 53,3 og 62,2 μM. Både Act og Isoact hemmet også betydelig ACE-aktivitet og hemolysen indusert av 2,2'-azo-bis(2-amidinopropan)dihydroklorid, men effekten av Act var sterkere enn Isoact. Vi administrerte deretter oralt en enkelt dose Act eller Isoact (10 mg/kg kroppsvekt) til SHR og målte endringene i systolisk blodtrykk (SBP) og diastolisk blodtrykk (DBP) over 24 timer. Act, men ikke Isoact, viste antihypertensiv aktivitet for å senke SBP og DBP. Resultatene tyder på den potensielle nytten av loven som helsekostprodukt forantioksidantbeskyttelse og blodtrykksregulering.

Nøkkelord: Acteosid; Antihypertensiv aktivitet; Angiotensin-konverterende enzym (ACE); Antioksidant; Hemolyse.

aktiv ingrediens akteosid i cistanche

Introduksjon

Acteosid(Act), et fenyletanoidglykosid som inneholder koffeinsyre, 3',4'-dihydroksyfenyletanol, glukose og rhamnose, ble først isolert fra blomster avSyringa Vul- garis(Birkofer et al., 1968), og sammen med den strukturelle isomeren avisoakteosid(Isoact) og derivatet av6-O-acetylakteosid(6-O-acetylakt), er funnet i mange planter og urtemedisiner, som f.eksLigstrum purpurascens(Wong et al., 2001),Callicarpa dikotom(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),Cistanche deserticolaogBoschniakia rossica(Wu et al., 2006),Scrophularia ningpoenis(Huang et al., 2008),Rehmannia glutinosa(Li et al., 2006). Handlingen ble rapportert å vise antimetastatisk aktivitet på B16 melanomceller i C57BL/6 musemodeller (Ohno et al., 2002). Act, Isoact og 6-O-acetylact ble nylig vist å hemme IL-1 -aktivert ekspresjon av intercellulær CAM-1 og vaskulær CAM-1 i humane endotelceller fra navlestrengen (Chen et al., 2009). Act beskytter også bovine lunge-endotelceller fra hydroksylradikal-indusert oksidativt stress (Chiou et al., 2004) og hemmer nitrogenoksid og TNF-produksjon gjennom blokkering av AP-1-aktivering i lipopolysakkarid-stimulerte makrofager (Rao et al. , 2009). Act og Isoact viser nevrobeskyttende aktiviteteri vitro(Koo et al., 2005). Koo et al. (2006) rapporterte at Act og dens aglykoner effektivt fjerner 1,1-difenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) og nitrogenoksidi vitro. Imidlertid har få studier sammenlignet side ved sidei vitro antioksidantaktiviteter til Act og dets strukturelt beslektede forbindelser som Isoact og 6-O- acetylakt.

Flere klasser av farmakologiske midler har blitt brukt i behandlingen av hypertensjon (Mark og Davis, 2000). En klasse antihypertensiva, kjent som angiotensin I-konverterende enzym (ACE)-hemmere (dvs. peptidasehemmere), har lav forekomst av uønskede bivirkninger og er den foretrukne klassen av antihypertensiva.

midler ved behandling av pasienter med samtidige sekundære sykdommer (Fotherby og Panayiotou, 1999). ACE (peptidyl-dipeptid hydrolase EC 3.4.15.1) er en dipeptidfrigjørende Zn-holdig eksopeptidase, som fjerner et dipeptid fra C-terminalen av angiotensin I for å danne angiotensin II, en svært hypertensiv forbindelse. Flereantioksidantpeptider (redusert glutation og karnosin-relaterte peptider) viser ACE-hemmende aktiviteter (Hou et al., 2003). Den første klinisk tilgjengelige, oralt aktive ACE-hemmeren, kaptopril, ble utviklet for hypertensive behandlinger (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). Handlingen er rapportert å utøve nitrogenoksid-mediert avslappende effekter på endotelintakte aortaringer til SD-rotter (Wong et al., 2001). Ahmad et al. (1995) har rapportert at Act induserer en doseavhengig reduksjon i systolisk blodtrykk (SBP) og diastolisk blodtrykk (DBP) etter intravenøs injeksjon i normotensive bedøvede Wistar-rotter. Det er imidlertid uklart om oral administrert Act og/eller dens relaterte isomerer er antihypertensivei vivo. I denne studien har vi undersøkti vitro antioksidantkapasitet og ACE-hemmende aktiviteter samti vivoantihypertensiv aktivitet av Act, Isoact og/eller 6-O-acetylakt ved bruk av spontane hypertensive rotter (SHR). Disse studiene forventes å gi nyttige data for utviklingen av Act som et helsekostprodukt.

Materialer og metoder

Materialer

2,2'-azo-bis(2-amidinopropan)dihydroklorid (AAPH), ACE (I-enhet, kaninlunge), butylert hydroksytoluen (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}furyl]akryloyl)-Phe-Gly-Gly (FAPGG), NADH, fenazinmetosulfat (PMS), xantin og xanthinoksidase ble kjøpt fra Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Captopril ble kjøpt fra Calbiochem Co. (CA, USA). Act, Isoact og 6-O-acetylakt (figur 1) ble kjøpt fra Equal Corp. (renheter > 98 prosent, Shanghai, Kina). Andre kjemikalier og reagenser var fra Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA).

Rensing aktivitet av Handling, Isoact, og 6-O- acetylakt imot dPPH radikaler av spektrofotometri

Et volum (0,3 mL) av Act, Isoact og 6-O-acetylakt (endelige konsentrasjoner var 1,56 til 50 µM), BHT og askorbinsyre (sluttkonsentrasjoner var 2,4 til 60 µM) ble tilsatt 0,1 ml 1 M Tris-HCl-buffer (pH 7,9 ) og deretter blandet med 0,6 mL 100 µM DPPH i metanol til en sluttkonsentrasjon på 60 µM i 20 minutter under lysbeskyttelse ved romtemperatur (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Reduksjonen av absorbans ved 517 nm ble målt og uttrykt som ΔA517 nm. Avionisert vann ble brukt som et blindeksperiment. Fjerningsaktiviteten til DPPH-radikal (prosent) ble beregnet med ligningen: (ΔA517blank − ΔA517prøve) ÷ ΔA517blank × 100. IC50 står for konsentrasjonen av halv-inhibering.

Hemmende aktivitet av Handling og Isoact imot xantin oksidase

Xantinoksidaseaktiviteten ble målt ved å bestemme urinsyredannelse ved 295 nm ved bruk av xantin som substrat (Kalckar, 1947). De forskjellige mengdene Act og Isoact (de endelige konsentrasjonene var 25, 50 og 75 µM) ble forhåndsblandet med 50 μL 1 mU/mL xantinoksidase ved 4 grader i 1 time, og deretter 300 μL 1 mM xanthin ble lagt til. Endringene i absorbans ved 295 nm ble registrert over 2 minutter og uttrykt som AA295 nm/min. Den xantinoksidasehemmende aktiviteten (prosent) ble beregnet som følger: (ΔA295 nm/min svart − ΔA295 nm/min prøve) ÷ ΔA295 nm/min svart × 100. Avionisert vann ble brukt i stedet for prøveløsning som et blindeksperiment. IC50 står for konsentrasjonen av halv-inhibering.

Rensing aktivitet av Handling, Isoact, og 6-O- acetylakt imot superoksid radikaler av spektrofotometri

Superoksidradikalet ble generert av PMS-NA-DH-systemet (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Alle 0,2 mL prøver, som inneholder forskjellige mengder Act, Isoact og 6-O-acetylat (endelig konsentrasjon var 15,6, 31,3, 62,5, 125 og 250 µM), ble tilsatt i rekkefølge til 0,2 ml 630 µM nitroblått tetrazolium, 0,2 ml 33 µM PMS og 0,2 ml 156 µM NADH i 100 mM fosfatbuffer (pH 7,4). Avionisert vann ble brukt i stedet for prøveløsning som et blindeksperiment. Askorbinsyre (sluttkonsentrasjonen var 6, 9, 12 og 24 µM) ble brukt som en positiv kontroll. Endringene i absorbans ved 560 nm ble registrert i løpet av 2 minutter og uttrykt som ΔA560 nm/min. Oppfangningsaktiviteten til superoksidradikaler (prosent) ble beregnet som følger: (ΔA560 nm/min svart − ΔA560 nm/min prøve) ÷ ΔA560 nm/min svart × 100. IC50 står for konsentrasjonen av halv-inhibering.

besluttsomhet av Ess hemmende aktivitet av Handling og Isoact av HPLC

Hver 50 µL Act (0.2, 0.4, 0.5 og 2.0 µmol) og Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0 og 2.0 µmol) ble forhåndsblandet med 15 µL 1U/mL ACE i 5 minutter, og deretter ble 200 µL 0,5 mM FAPGG tilsatt og reagert ved romtemperatur i 10 minutter (Anzenbacherova et al., 2001). 800 ul metanol ble tilsatt for å stoppe reaksjonen. Blankeksperimentet var bare FAPGG. I kontrolleksperimentet reagerte ACE med FAPGG under de samme forholdene. Kromatografisk separasjon av FAPGG og FAP ble utført på Hitachi (Japan) kromatografisystem med en 10 µL-løkke. HPLC-analysen ble utført på en Biosil Aqua-ODS-W 5 µ kolonne (Biotic Chemical Co., Ltd., Taiwan, 250 × 4,6 mm id), partikkelstørrelse 5 µm. Den reagerte blandingen ble separert isokratisk med en mobil fase bestående av 0,02 M nonylamin (justert til pH 2,4 med fosforsyre) og acetonitril i et forhold på 67,5:32,5 (V/V) (Anzenbacherova et al., 2001). Strømningshastigheten var 1 ml/min.; injeksjonsvolumet var 10 ul; detektoren ble satt til 345 nm. ACE-hemmingene (prosent) av Act og Isoact ble beregnet som følger: [(Area of ​​FAPGGblank − Area of ​​FAPGGcontrol) − (Area of ​​FAPGGblank − Area of ​​FAPGGsample) ÷ (Area of ​​FAPGGblank − Area of ​​FAPGGcontrol) × 100.

Hemmende aktivitet av Handling og Isoact imot AAPH-mediert hemolyse

Friradikalkjedeoksidasjon av røde blodceller fra rotter (RBC) gjennom AAPH-mediert hemolyse (Miki et al., 1987). Rotteblod ble plassert i hepariniserte rør og sentrifugert ved 1000 xgi 10 min. Etter å ha blitt vasket med 0,15 M NaCl tre ganger, ble den pakkede RBC oppnådd ved sentrifugering ved 1000 ×gi 10 min. De forskjellige mengdene Act og Isoact (de endelige konsentrasjonene var 2, 5 og 10 µM) ble blandet 25 μL 20 prosent RBC-suspensjon (V/V, i 10 mM PBS) og 25 μL 500 mM AAPH-løsning ved 37 grader i 0 , 1, 1,5, 2, 2,5, 3 og 3,5 timer med forsiktig risting. Hver blanding ble sentrifugert ved 1000 xgi 10 minutter, og supernatanten ble målt ved 536 nm. Avionisert vann ble brukt i stedet for henholdsvis AAPH-løsning eller prøveløsning, som en blank gruppe eller som en kontrollgruppe. Hemolysehemmingen (prosent) av Act og Isoact ved 3 timer eller ved 3,5 timer ble beregnet som følger: (ΔA536 nmkontroll − ΔA536 nmprøve) ÷ ΔA536 nmkontroll × 100.

Antihypertensiv effekter av Handling og Isoact på SHr

Effekten av oral administrert Act, Isoact og captopril ved ernæringsrør (2,0 × 80 mm) på redusert SBP og redusert DBP ble bestemt i henhold til metoden i tidligere rapporter (Lin et al., 2006; Lin et al., 2008; Han et al., 2011). Alle dyreforsøksprosedyrer fulgte publiserte retningslinjer (National Science Council, 1994). SHR-hannene (8 uker gamle, National Laboratory Animal Center, Taipei) ble plassert individuelt i stålbur holdt ved 24 grader med en 12-t lys-mørke syklus og hadde fri tilgang til en standard mus/rottemat ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) og vann. SHR-er ble tilfeldig delt inn i kontroll- og prøvebehandlinger for SBP- og DBP-bestemmelser (seks rotter per gruppe). For et kortvarig antihypertensivt eksperiment ble 0,5 ml 10 mg Act eller Isoact/Kg SHR eller 5 mg captopril/Kg SHR administrert oralt én gang, og haleblodtrykket ble målt til 2, 4, 6 og 24 h etter en enkelt oral administrering. Det 0,5 ml destillerte vannet ble brukt til et blindeksperiment. En indirekte blodtrykksmåler (BP-98A, Softron Co. Ltd. Tokyo, Japan) ble brukt til å måle SBP og DBP fire ganger ved hver bestemmelse for hver behandling.

data analyse

Verdiene presenteres som gjennomsnitt ± SD og analyseres ved bruk av enveis ANOVA, etterfulgt av post hoc Tukeys test for flere gjennomsnittlige sammenligninger. Studentenet-test ble utført, da kun to grupper av data ble sammenlignet (som mellom Act og Isoact i samme konsentrasjon). En p-verdi < 0.05="" anses="" som="" statistisk="" signifikant.="" den="" statistiske="" analysen="" ble="" utført="" ved="" bruk="" av="" spss="" for="" windows,="" versjon="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="">

akteosidi cistanche for å forbedre hukommelsen

Resultater

Rensing aktivitet av PPH og superoksid radikaler

Act, Isoact og 6-O-acetylact viste doseavhengige DPPH-fjernende aktiviteter ved pH 7,9 (figur 2). IC50-verdiene var henholdsvis 11,4, 9,48 og 9,55 µM for Act, Isoact og 6-O-acetylakt. IC50-verdiene for positive kontroller av askorbinsyre og BHT var henholdsvis 13,1 og 18,5 µM.

Hemming av xantin oksidase aktivitet

Act og Isoact ble vist å vise doseavhengig hemming av xantinoksidase (figur 3). IC50 ble beregnet til å være henholdsvis 53,3 og 62,2 µM for Act og Isoact.

Hemming av superoksid dismutase aktivitet

Fordi både Act og Isoact hemmet xantinoksidaseaktivitet, brukte vi PMS-NADH-systemet til å generere superoksidradikaler (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Handling,

Isoact og 6-O-acetylakt viste doseavhengige superoksidradikal-fjernende aktiviteter (figur 4). IC50-verdiene var henholdsvis 66,0, 38,5 og 39,1 µM for Act, Isoact og 6-O-acetylakt. IC50-verdiene for den positive kontrollen av askorbinsyre var 9,0 µM. Fra resultatene i figur 2 og 4 var det klart at Isoact og 6-O-acetylat hadde lignende radikalfjernende aktiviteter mot DPPH og superoksidradikaler, og derfor ble bare Act og Isoact valgt for ytterligere biologisk aktivitetsscreeninger.

Ess hemmende aktiviteter av Handling og Isoact

I den foreløpige testen fant vi at Act og Isoact interfererte med absorbansen til ACE-substratet FAPGG og dets hydrolyserte produkt FAP ved 345 nm som brukt for kontinuerlig spektrofotometrisk analyse (Holmquist et al., 1979). Derfor ble separasjonen kombinert med deteksjon av Act eller Isoact og FAPGG ved HPLC brukt til å overvåke ACE-hemmende aktiviteter. Figur 5A til figur 5D er typiske HPLC-kromatogrammer fra 10 ul reaksjonsblandinger av en blindprøve (kun FAPGG, figur 5A); kontrolltest (ACE reagerte med FAPGG for å produsere FAP, figur 5B); 0.5 µmol Act (312,5 µg), ACE og FAPGG (figur 5C); og 0,5 µmol Isoact (312,5 µg), ACE og FAPGG (figur 5D). Arealet til FAPGG i figur 5B var det laveste og det i figur 5A det høyeste av fire typiske HPLC-kromatogrammer. Områdene til FAPGG i figurene 5C og 5D er avhengige av de ACE-hemmende aktivitetene til forskjellige konsentrasjoner av Act og Isoact. De beregnede ACE-hemmingene av Act og Isoact er vist i figur 5E. Akten viste høyere ACE-hemmende aktiviteter enn Isoact, og IC50 for førstnevnte ble beregnet til å være 472 µM etter areal i HPLC-kromatogrammene.

Hemmende aktivitet av Handling og Isoact imot AAPH-mediert hemolyse

De hemmende aktivitetene til Act og Isoact mot AAPH-mediert hemolyse ved konsentrasjoner på 2, 5 og 10 µM ble evaluert over 3,5 timer (Miki et al., 1987). Resultatene i figur 6A viser at hemolysen i RBC fra rotter økte dramatisk (uttrykt som ΔA536 nm) etter 3-t eller 3.{11}}h reaksjoner i nærvær av AAPH-radikaler (som kontrollgrupper, hvitt syklussymbol ). Lite eller ingen hemolyse ble observert i fravær av AAPH-radikaler i løpet av 3.5-t-reaksjonen (som tomme grupper, svart syklussymbol). Derfor ble hemolysehemmingen av Act og Isoact ved 3 timer eller ved 3,5 timer beregnet som følger: (ΔA536 nmkontroll − ΔA536 nmprøve) ÷ ΔA536 nmkontroll × 100. Figur 6B

viser at både Act og Isoact ved 2, 5 og 10 µM viste konsentrasjonsavhengig hemming på AAPH-indusert hemolyse, med de hemmende effektene av Act betydelig sterkere enn de av Isoact ved hver konsentrasjon som ble brukt.

Antihypertensiv effekter av Handling og Isoact på SHr

SHRer mottok en enkelt oral administrering av Act og Isoact (10 mg/kg SHR), og endringer i SBP og DBP ble registrert over 24 timer. Vi har tidligere rapportert at blodtrykket (SBP og DBP) til SHR kunne endres i løpet av 24- timer (Lin et al., 2006; Han et al., 2011). Derfor ble det brukt en sammenligning på et fast tidspunkt (som 2, 4, 6, 8 og 24 timer) mellom blindprøve og prøve i stedet for før og etter selve oral administrering. Det ble funnet at Act, men ikke Isoact, effektivt reduserte SBP og DBP av SHR sammenlignet med blank (destillert vann) gruppen. SBP ble signifikant redusert i Act-gruppen etter 2, 4 og 6 timer med henholdsvis 18,8, 16,5 og 14,9 mmHg, men reduksjonen av SBP (3,3 mmHg) 24 timer etter Act-behandling var ikke stabil.

kunstnerisk betydningsfull (Figur 7A). Som vist i figur 7B ble DBP redusert i Act-gruppen etter 2, 4 og 6 timer (med henholdsvis 8,5, 7,6 og 12,{10}} mmHg), selv om bare resultatet oppnådd etter 6 timer var statistisk signifikant (P< 0.05).="" det="" ble="" bemerket="" at="" act="" og="" captopril="" (som="" positiv="" kontroll)="" hadde="" lignende="" effekter="" på="" sbp="" i="" tidlige="" stadier="" (2,="" 4="" og="" 6="" timer)="" etter="" oral="">

akteosidi cistanche har gode effekter på antioksidant

DISKUSJON

Aktive oksygenarter og frie radikal-medierte reaksjoner er involvert i degenerative eller patologiske prosesser som aldring, kreft, koronar hjertesykdom og Alzheimers sykdom (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). Flere rapporter har fokusert på screeningantioksidantaktiviteter fra naturressurser. I denne studien sammenlignet vi førstantioksidantaktiviteter til Act, Isoact og 6-O-acetylat. Act og Isoact er strukturelle isomerer der komponenten i koffeinsyredelen er bundet til C-4-hydroksylgruppen i glukose i førstnevnte og til C-6-hydroksylgruppen i glukose i sistnevnte. Mens bestanddelene av henholdsvis rhamnose og 3',4'-dihydroksyfenyletanol er bundet til C-3- og C-1-hydroksylgruppene i glukosedelen i samme Act- og Isoact-molekyl, { {8}}O-acetylact er et Act-derivat der eddiksyre er bundet til C-6-hydroksylgruppen i glukosedelen (Figur 1). Koo et al. (2006) rapporterte at Act og dens aglykoner viste DPPH-fjernende aktiviteter, og rekkefølgen på disse aktivitetene (uttrykt som IC50) var Act (1,28 µM) > koffeinsyre (2,22 µM) > 3',4'-dihydroksyfenyletanol ( 7,72 uM) > -tokoferol (15,1 uM). I denne rapporten (figur 2) er rekkefølgen på DPPH-renseaktiviteter (uttrykt som IC50) 6-O-acetylat (9,55 µM) ≈ Isoact (9,48 µM) > Act (11,4 µM). Disse verdiene var sammenlignbare med eller bedre enn de for askorbinsyre (IC50 på 13,1 µM) og BHT (IC50 på 18,5 µM) for å fjerne DPPH-radikaler. Den høyere IC50 av Act i denne rapporten kan være fra den endelige konsentrasjonen på 60 µM DPPH i stedet for 30 µM brukt av Koo et al. rapportert (2006). Ettersom DPPH-radikal assay tilhører elektronoverføringsreaksjonen (Huang et al., 2005), spekuleres det i at derivatet i C-6 hydroksylgruppen i glukosedelen, slik som acetylgruppen i {{21 }}O- acetylat- og koffeinsyredelen i Isoact kan lettere gi en elektronoverføringsreaksjon enn de til den frie hydroksylgruppen C-6 i glukosedelen i Act for DPPH-renseanalysen.

Act, 6-O-acetylat og Isoact har blitt rapportert å ha superoksidfjernende aktivitet in vitro ved bruk av xantin/xanthin-oksidase-systemet for å generere superoksidradikaler (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Imidlertid indikerte vår nåværende studie at Act viste xantinoksidasehemmende aktiviteter (figur 3). Derfor ble superoksidradikalet generert ved å bruke PMS-NADH-systemet i denne rapporten (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) i stedet for xantin/xanthin-oksidase-systemet. Faktisk, ved å bruke xanthin/xanthine oxidase-systemet for å generere superoksidradikaler, Wang et al. (1996) oppnådde en IC50 på 63 µM Act mot superoksidradikaler, og denne verdien er nær den for inhibering av xantinoksidaseaktivitet ved Act, som rapportert i denne studien (53,3 µM). Det ble rapportert at koffeinsyre utviste xantinoksidasehemmende aktiviteter (Chiang et al., 1994). Det kan spekuleres i at de superoksidfjernende aktivitetene ved å bruke xantin/xantinoksidase-genererende system til noen fytokjemikalier med strukturer assosiert med koffeinsyrer, slik som Act eller Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999), kan ha vært bidratt, i det minste delvis, på xanthinoksidase-hemminger. Interessant nok, Wang et al. (1996) fant at Act (0,5 og 2,5 mM) ikke hemmet xantinoksidaseaktivitet som ble bestemt av en oksygenelektrode for oksygenforbruk under xantinoksidasjon. Derfor er det viktig å huske på at forskjellige metoder for å analysere superoksyd-fjernende aktivitet kan gi motstridende data.

Li et al. (1993) har rapportert en lignende grad av hemming av Act og Isoact mot AAPH-mediert hemolyse i RBC hos mus. Imidlertid viste vi her at Act viste mye høyere hemmende aktivitet mot AAPH-indusert hemolyse i RBC hos rotter enn Isoact (figur 6). Det er uklart om slik inkonsekvens kan ha vært på grunn av forskjellen i gnagerarter.

Kang et al. (2003) rapporterte at Act viste ACE-hemmende aktiviteter, og IC50 var 373,3 µg/mL som ble beregnet til å være 598 µM ved bruk av Hip-His-Leu som underlag. I denne rapporten viste loven høyere ACE-hemmende aktiviteter enn Isoact, og IC50 for førstnevnte ble beregnet til å være 472 µM etter areal i HPLC-kromatogrammene (Figur 5). Handlingen har blitt rapportert å utøve nitrogenoksid-mediert avslappende effekter på endotel-intakte aortaringer til SD-rotter (Wong et al., 2001). Selv om Act har vist seg å være antihypertensiv hos Wistar-rotter,

studien brukte intravenøs injeksjon av Act i en bedøvet rotte for å utelukke adsorpsjonsfaktoren (Ahmad et al., 1995). Her administrerte vi Act oralt til SHR-er og bestemte endringer i blodtrykket. Vi fant at oral administrering, men ikke av Isoact, viste antihypertensive effekter ved å senke SBP og DBP over 24 timer etter en enkelt administrering (figur 7). Virke ved en dose på 10 mg/kg kroppsvekt hadde en effekt nær den av kaptopril i dosen på 5 mg/kg SHR for å senke SBP og var bedre enn kaptopril til å senke DBP.

Avslutningsvis stilte Act utantioksidantaktiviteter, ACE-hemmende aktiviteter og antihypertensive effekter på SHR. Resultatene som presenteres her vil være til nytte for arbeidet med å utvikle urtemedisiner eller relaterte produkter ved å bruke loven, som er funnet i mange planter og urtemedisiner, for antioksidantbeskyttelse og terapeutiske effekter i fremtiden.

Cistancheakteosidfor antioksidasjon og anti-aldring

1 Institutt for matvitenskap og bioteknologi, National Chung Hsing University, Taichung, Taiwan

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Tao-Yuan, Taiwan

3 School of Pharmacy, Taipei Medical University, Taipei, Taiwan

4Graduate Institute of Biomedical Materials and Engineering, Taipei Medical University, Taipei, Taiwan

5 Forskningssenter for tradisjonell urtemedisin, Taipei Medical University Hospital, Taipei, Taiwan

6 Graduate Institute of pharmacognosy, Taipei Medical University, Taipei, Taiwan

(Mottatt 12. mars 2012; Godtatt 20. april 2012)

SITERT LITTERATUR

Ahmad, M., GH Rizwani, K. Aftab, VU Ahmad, AH Gilani og SP Ahmad. 1995.Acteosid: et nytt antihypertensivt legemiddel. Phytother. Res. 9: 525-527.

Ames, BN 1983. Karsinogener i kostholdet og antikarsinogener: oksygenradikaler og degenerative sykdommer. Science 221:1256-1264.

Anzenbacherova, E., P. Anzenbacher, K. Macek og J. Kvetina. 2001. Bestemmelse av enzym (angiotensin convertase) hemmere basert på enzymatisk reaksjon etterfulgt av HPLC.J. Farmasøyt. Biomed. Anal. 24: 1151-1156.

Birkofer, L., C. Kaiser og U. Thomas. 1968.Acteosidog neoacteosid: Zuckerester aus Syringa vulgaris. Naturforsc- hang 23B: 1051-1058.

Borer, JS 2007. Angiotensin-konverterende enzymhemming: et landemerke fremskritt i behandling for kardiovaskulære sykdommer. Eur. Hjerte J. Suppl. 9(Suppl. E): E2-E9.

Chen, CH, TY Song, YC Liang og ML Hu. 2009.Acteosidog 6-O-acetylakteosid nedregulerer celleadhesjonsmolekyler indusert av IL-1 gjennom hemming av ERK og JNK i humane vaskulære endotelceller. J. Agric. Mat

Chem. 57: 8852-8859.

Chiang, HC, YJ Lo og FJ Lu. 1994. Xanthine oxidase-hemmere fra blader av Alsophila spinulosa (Hook) Tryon. J. Enzyme Inhibit. 8: 61-71.

Chiou, WF, LC Lin og CF Chen. 2004.Acteosidbeskytter endotelceller mot frie radikaler-indusert oksidativt stress. J. Pharm. Pharmacol. 56: 743-748.

Fotherby, MD og B. Panayiotou. 1999. Antihypertensiv terapi i forebygging av hjerneslag: hva, når og for hvem? Narkotika 58: 663-674.

Gao, JJ, K. Igalashi og M. Nukina. 1999. Radikal rensende aktivitet av fenylpropanoidglykosider i Caryopteris incana. Biosci. Bioteknologi. Biochem. 63: 983-988.

Gey, KF 1990. Theantioksidanthypotese om kardiovaskulær sykdom: epidemiologi og mekanismer. Biochem. Soc. Trans. 18: 1041-1045.428 Botanical Studies, Vol. 53, 2012

Han, CH, JC Liu, KH Chen, YS Lin, CT Chen, CT Fan, HL Lee, DZ Liu og WC Hou. 2011. Antihypertensive aktiviteter av behandlet hvitløk på spontant hypertensive rotter og hypertensive mennesker. Bot. Stud. 52: 277-283.

Holmquist, B., P. Bunning og JF Riordan. 1979. En kontinuerlig spektrofotometrisk analyse for angiotensin-konverterende enzym. Anal. Biochem. 95: 540-548.

Hou, WC, HJ Chen og YH Lin. 2003. Antioksidantpeptider med angiotensin-konverterende enzym-hemmende aktiviteter og applikasjoner for angiotensin-konverterende enzymrensing. J. Agric. Food Chem. 51: 1706-1709.

Huang, D., B. Ou og RL Prior. 2005. Kjemien bakantioksidantkapasitetsanalyser. J. Agric. Food Chem. 53: 1841-1856.

Huang, CG, YJ Shang, J. Zhang, JR Zhang, WJ Li og BH Jiao. 2008. Hypourisemiske effekter av fenylpropanoidglykosiderakteosidav Scrophularia ningpoenis på serumurinsyrenivåer hos kaliumoksonat-forbehandlede mus. Amer. J.

Hake. Med. 36: 149-157.

Lee, KY, EJ Jeong, HS Lee og YC Kim. 2006.Acteosidav Callicarpa dichotoma demper skopolamin-indusert hukommelsessvikt. Biol. Pharm. Okse. 29: 71-74.

Li, J., P. Wang, R. Zheng, Z. Liu og Z. Jia. 1993. Beskyttelse av fenylpropanoidglykosider fra Pedicularis mot oksidativ hemolyse in vitro. Planta Med. 59: 315-317.

Li, H., GX Chou, ZT Wang og ZB Hu. 2006. HPLC-bestemmelse avakteosidi Radix Rehmanniae. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31: 822-824.

Lin, SY, CC Wang, YL Lu, WC Wu og WC Hou. 2008.Antioksidant, anti-semikarbazid-sensitiv aminoksidase og antihypertensive aktiviteter av geraniin isolert fra Phyllanthus urinaria. Food Chem. Toxicol. 46: 2485-2492.

Liu, DZ, YS Lin og WC Hou. 2004. Monohydroksamater av asparaginsyre og glutaminsyre viserantioksidantog angiotensin-konverterende enzym-hemmende aktiviteter. J. Agric. Food Chem. 52: 2386-2390.

Kalckar, HM 1947. Differensiell spektrofotometri av purinforbindelser ved hjelp av et spesifikt enzym. J. Biol. Chem.167: 429-443.

Kang, DG, YS Lee, HJ Kim, YM Lee og HS Lee. 2003. Angiotensin-konverterende enzym-hemmende fenylpropanoidglykosider fra Clerodenron trichotomum. J. Ethnopharmacol. 89: 151-154.

Koo, KA, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee og YC Kim. 2005. In vitro nevrobeskyttende aktiviteter av fenyletanoidglykosider fra Callicarpa dichotoma. Planta Med.71: 778-780.

Koo, KA, SH Kim, TH Oh og YC Kim. 2006.Acteosidog dets aglykoner beskytter primærkulturer av rottebarkceller fra glutamatindusert eksitotoksisitet. Life Sci. 79:709-716.

Lin, CL, SY Lin, YH Lin og WC Hou. 2006. Effekter av knolllagringsprotein fra yam (Dioscorea alata cv. Tainong No.1) og dets peptiske hydrolysater på spontant hypertensive rotter. J. Sci. Food Agric. 86: 1489-1494.

Mark, KS og TP Davis. 2000. Hjerneslag: utvikling, forebygging og behandling med peptidasehemmere. Peptider 21:1965-1973.

Miki, M., H. Tamai, M. Mino, Y. Yamamoto og E. Niki. 1987. Friradikalkjedeoksidasjon av røde blodceller fra rotter ved molekylært oksygen og dets hemming av -tokoferol. Arch Biochem. Biofys. 258: 373-380.

Nasjonalt vitenskapsråd. 1994. Veileder for stell og bruk av forsøksdyr. National Science Council, Taiwan.

Ohno, T., M. Inoue, Y. Ogihara og I. Saracoglu. 2002. Den antimetastatiske aktiviteten tilakteosid, et fenyletanoidglykosid.Biol. Pharm. Okse. 25: 666-668.

Vendetti, MA, B. Rubin, DW Cushman. 1977. Design av spesifikke hemmere av angiotensin-konverterende enzym: en ny klasse av oralt aktive antihypertensiva. Science 196: 441-444.

Rao, YK, SH Fang, SC Hsieh, TH Yeh og YM Tzeng. 2009. Bestanddelene av Anisoles India og deres antiinflammatoriske aktiviteter. J. Ethnopharmacol. 121: 292-296.

Smith, MA, G. Perry, PL Richey, LM Sayre, VE Anderson, MF Beal og N. Kowal 1996. Oksidativ skade ved Alzheimers. Natur 382: 120-121. Wang, P., J. Kang, R. Zheng, Z. Yang, J. Lu, J. Gao og Z. Jia.

1996. Oppfangende effekter av fenylpropanoidglykosid fra Pedicularis på superoksidanion og hydroksylradikal ved spinnfangstmetoden. Biochem. Pharmacol. 51: 687- 691.

Wong, IYF, Y. Huang, ZD He, CW Lau og ZY Chen. 2001. Avslappende effekter av Ligstrum purpurascens ekstrakt og rensetakteosidi aortaringer hos rotter. Planta Med. 67:317-321.

Wu, YT, LC Lin, JS Sung og TH Tsai. 2006. Fastsettelse avakteosidi Cistanche deserticola og Boschniakia rossica og dens farmakokinetikk i fritt bevegelige rotter ved bruk av LC-MS/MS. J. Chromatogr. B 844: 89-95.