Abstrakt

Etterspørselen etter naturlige stoffer med anti-melanogen aktivitet øker på grunn av den nylige interessen for hudbleking. Intensiv undersøkelse av kulturbuljongen til Streptomyces sp. SCO-736, en marin bakterie fra Antarktiskysten, har ført til isolering av et nytt naturprodukt kalt asteroide (1). Den kjemiske strukturen ble etablert gjennom tolkning av MS-, UV- og NMR-spektroskopiske data. Antaroide er et ni-leddet makrolid med lakton- og laktamgrupper. For å undersøke dens anvendelighet i hudblekende kosmetikk, ble dens anti-melanogene aktivitet i B16F10 murine melanomceller undersøkt. Som et resultat viste asteroiden sterke hemmende aktiviteter mot melaninsyntese og svekket også dendrittdannelsen indusert av det -melanocyttstimulerende hormonet (-MSH). Antaroide undertrykte mRNA-ekspresjonen av melanogene enzymer som tyrosinase, TRP-1 og TRP-2. Dette antyder at det kan tjene som en transkripsjonsregulator av melanogenese. Samlet kan oppdagelsen av dette nye naturlige ni-ledde makrolidet og dets anti-melanogene aktivitet gi ny innsikt i utviklingen av hudblekende midler

I følge relevante studier er cistanche en vanlig urt som er kjent som "mirakelurten som forlenger livet". Hovedkomponenten er cistanosid, som har forskjellige effekter som antioksidanter, anti-inflammatorisk og immunfunksjonsfremmende. Mekanismen mellom cistanche og hudbleking ligger i antioksidanteffekten av cistanche-glykosider. Melanin i menneskelig hud produseres ved oksidasjon av tyrosin katalysert av tyrosinase, og oksidasjonsreaksjonen krever deltakelse av oksygen, så oksygenfrie radikaler i kroppen blir en viktig faktor som påvirker melaninproduksjonen. Cistanche inneholder cistanosid, som er en antioksidant og kan redusere dannelsen av frie radikaler i kroppen, og dermed hemme melaninproduksjonen.

Klikk på Desert Cistanche Benefits

For mer info:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Stikkord:Streptomyces sp., Ni-leddet makrolid, Marint naturprodukt, Melaninsyntesehemmer, Hudblekingsmiddel

INTRODUKSJON

Hudpigmentering er avgjørende for å beskytte huden, som er det ytterste laget av kroppen. Spesielt absorberer melaninet det ultrafiolette (UV) og slukker skadelige reaktive oksygenarter, som er skadelige for fysiologien til keratinocytter og melanocytter (Costin og Hearing, 2007). Foruten hudbeskyttelse, bestemmer melanin fargene på hår, hud og øyne. Dets unormale innhold eller distribusjon kan forårsake estetiske problemer som albinisme, fregner og melasma (Briganti et al., 2003; Lee et al., 2015).

Bruken av hudblekemidler til kosmetiske formål vokser raskt, spesielt i Asia, hvor hvit og plettfri hud symboliserer skjønnhet og edelhet. Mange hudblekende stoffer har blitt utviklet og brukt, både terapeutisk og kosmetisk, inkludert hydrokinon, arbutin og kojinsyre. Langvarig eksponering for disse midlene forårsaker imidlertid ofte uønskede reaksjoner som hudirritasjon, okronose og kontakteksem (DeCaprio, 1999; García-Gavín et al., 2010). Derfor kreves det sikrere og mer potente hudblekende midler (Zhu og Gao, 2008; Atanasov et al., 2015; Aydogmus-Ozturk et al., 2018).

Forskere legger stadig større vekt på mikroorganismer i unike marine miljøer, som er fruktbare kilder til bioaktive forbindelser med interessante strukturelle stillaser, for å oppdage nye sekundære metabolitter (Haefner, 2003; Fenical og Jensen, 2006).

Som en del av vårt søk etter bioaktive marine naturprodukter, en bakterie som lever i kaldt vann, Streptomyces sp. SCO-736 har blitt isolert fra de marine sedimentene på Antarktiskysten. Denne bakterien produserte antarktisk, en trisyklisk zizaentype sesquiterpen med en fenylgruppe som er cytotoksisk for A549, H1299 og U87 kreftceller ved å indusere cellesyklusstans (Kim et al., 2018). Videre har HPLC-UV-styrt isolering av kulturbuljongen til denne stammen gitt en ny bioaktiv forbindelse, asteroide (1, fig. 1). Her rapporterer vi detaljer om dens isolasjon, strukturbelysning og anti-pigmentære aktivitet av asteroide for å gi innsikt for å utvikle en ny klasse av hudblekingsmidler.

MATERIALER OG METODER

Generelle eksperimentelle prosedyrer

Den optiske rotasjonen ble bestemt ved å bruke et Kruss Optronic P{{0}} polarimeter (Krüss Optronic, Hamburg, Tyskland) med en 5-cm celle. UV-spektrene ble oppnådd med et UV-synlig spektrofotometer (1260 Infinity Series, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) ved bruk av en banelengde på 0,1 cm. IR-spektrene ble målt med et Varian Scimitar Series-spektrometer (Agilent Technologies). NMR-spektrene ble innhentet med 800 MHz Varian Inova-spektrometre (Agilent Technologies) ved bruk av deuterert dimetylsulfoksid (DMSO-d6) for Android. Den høyoppløselige hurtigatombombardementmassespektrometri (HRFABMS)-analysen ble utført ved bruk av et JEOL JMS-AX505WA-system (JEOL, Tokyo, Japan). Fraksjonene ble renset med en Waters 616 kvaternær HPLC-pumpe (Waters, Milford, MA, USA) og en Waters 996 photodiode array (PDA)-detektor (Waters). -Melanocyttstimulerende hormon (-MSH), arbutin og DMSO ble kjøpt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Cellekulturmediet og midlene ble levert av Thermo Scientific (Waltham, MA, USA).

Strekkisolering og fermentering 

Actinomycete-stammen SCO-736 ble isolert fra marine sedimenter ved den antarktiske kysten og identifisert som et medlem av slekten Streptomyces med 99,7 prosent likhet. Dens 16s rRNA-gensekvens ble deponert i GenBank (aksesjonsnummer KY087980). Denne bakteriestammen ble dyrket i 100 2.5-L Ultra Yield Flasks, hver inneholder 1 L av kulturmediet (10 g/L løselig stivelse, 2 g/L gjær, 4 g/ L pepton, 10 g/L CaCO3, 20 g/L KBr, 8 g/L Fe2(SO4)3•4H2O oppløst i 750 mL naturlig sjøvann, og 250 mL destillert vann), ved 25 grader under risting ved 150 rpm. Etter 7 dager ble buljongen ekstrahert med etylacetat (EtOAc, 100 1 totalt) for å gi 3,5 g EtOAc-ekstrakt.

Ekstraksjon og rensing 

EtOAc-ekstraktet ble oppløst i et lite volum metanol (MeOH) og fraksjonert via silikavakuumkolonnekromatografi under eluering med en trinngradient fra 10 prosent til 100 prosent MeOH i metylenklorid. Fraksjonen med 10 prosent MeOH (618 mg) ble utsatt for revers-fase HPLC med 48 prosent vandig acetonitril (Watchers 120 ODS-BP, 250×10 mm, 5 µm, 2,0 ml/min, UV=210 nm) for å gi asteroide (1, 6,7 mg), med retensjonstider på 30 min.

Antaroid (1): brun olje; []D21 pluss 19,8 (c 0.45, MeOH); UV (MeOH) λmax (log e) 225 (4,1), 245 (3,6), 310 (3,2) nm; IR (KBr) vmax 3365, 2936, 2872, 2348, 1660, 1475, 1376, 1197, 761 cm-1; 1H, 13C og 2D-NMR (800 MHz, DMSO-d6), se tabell 1; HRFABMS [M pluss H] pluss m/z 362,1972 (beregnet for C20H28NO5 plus, 362,1962).

Cellekultur

B16F10-cellelinjen fra C57BL/6-mus ble kjøpt fra ATCC (Manassas, VA, USA). Cellene ble opprettholdt under standard kulturbetingelser, i fenolrødt-fritt Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) supplert med antibiotika (100 U/mL penicillin A og 100 U/mL streptomycin) og 10 prosent føtalt bovint serum (FBS) ved 37 grader i en fuktet atmosfære som inneholder 5 prosent CO2. Ved 80 prosent cellesammenløp ble de adherente cellene løsnet ved å bruke en løsning av trypsin (Hyclone, South Logan, UT, USA).

Melaninanalyse

En dag før eksperimentet ble B16F10-cellene sådd inn i 48-brønnplater med 2×104 celler/brønn, som beskrevet andre steder (Kim et al., 2017a). De serumsultne cellene ble eksponert i 72 timer for forskjellige konsentrasjoner av asteroider i et kulturmedium inneholdende 0,5 prosent DMSO og 200 nM -MSH, -MSH ble brukt for å indusere melaninsyntesen. Cellene behandlet kun med -MSH og arbutin ble brukt som henholdsvis negative og positive kontroller. Melaninet inne i cellene ble oppløst i 200 µL 1 M NaOH ved 60 grader i 1 time i mørket, deretter ble det totale melanininnholdet vurdert via absorbansmålinger ved 405 nm med en mikroplateleser (Spectra max 190, Molecular Devices, Sunnyvale , CA, USA).

Cellelevedyktighetsanalyse

{{0}}(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid (MTT) ble brukt for å evaluere levedyktigheten til B16F1 0 celler (Song et al., 2018). For å analysere mitokondriell reduksjon av MTT, ble cellene inkubert med 0,25 ml 0,5 mg/ml MTT-løsning i DMEM i 2 timer ved 37 grader. Det blå formazanfargestoffet ble oppløst i 300 µL DMSO i 30 minutter, og 150 µL av den resulterende supernatanten ble samlet for å måle absorpsjonen ved 540 nm. Alle målingene ble utført i tre eksemplarer. Resultatene ble normalisert med den negative kontrollen (DMSO-behandlede celler), ved å ta kontrollverdiene som 100 prosent sammenlignet vi cellelevedyktigheten til hver asteroidekonsentrasjon.

Sanntids transkripsjonspolymerasekjedereaksjon (RT-PCR)

For å bestemme effekten av asteroider på uttrykket av det melanogenese-relaterte genet, tok vi i bruk sanntids transkripsjons-PCR-teknikken. B16F10-cellene ble behandlet med -MSH og med eller uten asteroide. Etter 24 timers inkubering ble det totale RNA isolert ved bruk av et RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Germantown, MD, USA). For å bestemme tyrosinase-mRNA-nivåene ble cDNA amplifisert med 1250 ng totalt RNA med oligo dT (Elpis-Biotech, Seoul, Korea) ved bruk av en qPCR-maskin (Applied Biosystem, Grand Island, NY, USA). Sekvensene til PCR-primerne var som følger. Tyrosi nase 5'- ATC GGC CAA CGA TCC CAT TT -3' (fremover) og 5'- TAG GTG CAT TGG CTT CTG GG -3' (revers). TRP-1 5'- CTT TCT CCC TTC CTT ACT GG-3' (fremover) og 5'-TCG TAC TCT TCC AAG GAT TCA-3' (revers). TRP-2 5'- TTA TAT CCT TCG AAA CCA GGA – 3' (fremover) og 5' – GGG AAT GGA TAT TCC GTC TTA – 3' (revers). Sykkelparametrene var 50 grader i 2 minutter, 95 grader i 10 minutter, 40 sykluser ved 95 grader i 15 s og 50 grader i 1 minutt.

Statistisk analyse

Den statistiske signifikansen av forskjellene ble evaluert ved Students t-test eller ANOVA etterfulgt av Bon Ferroni post-hoc analyse. Vesentlig forskjellig fra kontrollverdien: *s<0.05, **p<0.01, ***p<0.001.

RESULTATER

Kjemisk strukturbelysning

Antaroid ble isolert som en brun olje, og dens molekylformel ble utledet som C2{{20}}H27NO5 basert på analyse av (pluss)-HRFABMS pseudomolekylære iontoppen ved m/z 362.1972 [M pluss H] Plus . IR-spekteret viste tilstedeværelsen av et amin (3365 cm-1) ​​og en ketongruppe (1,660 cm-1). 1H NMR-spekteret viste 1,2-disubstituerte benzenprotoner [H-3 (δH 7,99, 1H, d, J=8.0 Hz), H{{21 }} (δH 7,41, 1H, dd, J=8.0, 8.0 Hz), H-5 (δH 7.79, 1H, dd, J{{ 33}}.0, 8.0 Hz), H-6 (δH 7,95, 1H, d, J=8.0 Hz)], én dublett [H-20 (δH 0,92, 3H, d, J=6,8 Hz)], og én metylsinglett [H-19 (δH 2,04, 3H, s)]. 1H-, 13C- og HSQC-spektroskopiske data avslørte to metyler [C-19 (δC 27,9), C-20 (δC 15,7)], syv metylen [C-9 (δC 29,0) , C-10 (δC 28,5), C-12 (δC 36,3), C-13 (δC 22,6), C-14 (δC 29,1), C{{76} } (δC 26,1), C-16 (δC 31,8)], fire metin sp2 [C-3 (δC 129,7), C-4 (δC 125,7), C-5 (δC 135,6), C-6 (δC 120,9)], en metan sp3 [C-17 (δC 45,9)], tre karbonyler [C-1 (δC 161,1), C{{ 102}} (δC 172,2), C-18 (δC 211,8)], to kvaternære sp2 [C-2 (δC 116,3), C-7 (δC 136,0)], og en kvartær sp3-karboner [C-11 (δC 97,2)] (tabell 1).

Tolkningen av 2D NMR-resultatene tillot oss å definere strukturen til asteroiden. De KOSELIGE krysstoppene (H- 9/H-10 og H-12/H-13/H-14/H-15/H{ {8}}/H-17/H{{10}}) avslørte to spinnsystemer som består av henholdsvis to og syv karbonenheter. En acetylgruppe ble identifisert basert på langdistanse HMBC-signalet fra metylsingletten H-19 til C-18. Tilknytningen av denne acetylgruppen til C-17 ble bekreftet av trebindings-HMBC-signalene fra H-19 til C-17 og fra H-20 til C{{19} }. Forbindelsene til karbonylgruppene C-1 og C-8 ved henholdsvis C-2 og C-9 ble også etablert basert på trebindings-HMBC-signalene fra H{ {25}} til C-1 og fra H-10 til C-8. Langdistanse HMBC-korrelasjonene til H-12 og H-10 til C-11 tillot C-10/C-11/C-12-vedlegget . De KOSELIGE krysstoppene (H-3/H-4/H-5/H-6) avslørte en 1,2 disubstituert benzenringdel koblet til C{{43} } gjennom NH, i henhold til de kjemiske karbonskiftene til C-7 (δC 136.0) og C-8 (δC 172.2). De kjemiske karbonskiftene til C-1 (δC 161.1) og C-11 (δC 97.2) antydet at disse karbonene skulle festes gjennom et oksygenatom i molekylet. Til slutt avslørte det kjemiske skiftet av C-11 og molekylformelen til asteroiden tilknytningen til en hydroksygruppe ved C-11. Dermed ble bruttostrukturen til asteroiden bestemt som vist i fig. 2.

For å bestemme stereokjemien til asteroider, utførte vi først et elektronisk sirkulær dikroisme (ECD) eksperiment. Dessverre viste ikke asteroider noen signifikant bomullseffekt i bølgelengdeområdene som ble undersøkt (tilleggsfig. 6). Vi kunne ikke bestemme den absolutte konfigurasjonen for det stereogene senteret til C-17 på grunn av mangelen på relevante forbindelser med en tilordnet stereokjemi i litteraturen.

Bioaktiviteter

Ulike naturprodukter fra marine kilder har blitt undersøkt for bruk i kosmetikk (Kim et al., 2017a). For å vurdere anvendeligheten av asteroider som blekemiddel, ble deres effekter på melanogenese studert ved å bruke -MSH-stimulerte B16F10 murine melanomceller.

Antaroid viste kraftig anti-melanogen aktivitet, som reduserte det intracellulære melanininnholdet i B16F10-cellene på en doseavhengig måte. Det var sammenlignbart med arbutin, et velkjent hudblekingsmiddel, mens den ekstracellulære melaninfrigjøringen ikke ble påvirket (fig. 3).

Mikroskopiske observasjoner avslørte svekket dendrittdannelse av B16F10 aktivert av -MSH, noe som bekreftet undertrykkelsen av melanocyttaktivering av en asteroide (fig. 4). I det samme forsøket viste evalueringen av cellenes levedyktighet at den anti-melanogene effekten av asteroiden ikke skyldtes cytotoksisitet (fig. 5). Mekanismen som ligger til grunn for den anti-melanogene aktiviteten til asteroiden ble videre undersøkt ved å evaluere mRNA-ekspresjonen av nøkkelenzymer for melanogenese som tyrosinase, TRP-1 og TRP-2 via sanntids-PCR (fig. 6) ). Resultatene antydet at asteroide kan undertrykke uttrykket av disse melanogene enzymene.

DISKUSJON

Naturprodukter kan gi innsikt for utvikling av bioaktive stoffer med nye stillaser og virkemåter. Ni-leddede sekundære metabolitter som innehar både lakton- og laktamgrupper har aldri tidligere blitt rapportert i mellomstore heterosykliske naturprodukter. Naturlige produkter som inneholder mellomstore laktoner eller laktamer har vært utfordrende mål i de syntetiske feltene i lang tid (Shiina, 2007; Ferraz et al., 2008). Spesielt er det bare rapportert om et lite antall ni-leddede lakton- eller laktam-naturprodukter, slik som halikolaktoner (Niwa et al., 1989), topsentolider (Luo et al., 2006) og antimyciner (van Tamelen et al. , 1961). Ni-leddede laktoner, halikolaktoner og topsentolider har blitt isolert fra marine svamper, mens ni-leddede dilaktoner og antimyciner ble isolert fra Streptomyces sp. Videre har metodikkutviklingen av slike forbindelser møtt vanskeligheter på grunn av ugunstige kinetiske og termodynamiske faktorer sammenlignet med de til større laktonslektninger (Dräger et al., 1996; Parenty et al., 2013). Samtidig tilstedeværelse av lakton- og laktamgrupper i ringsystemet er bare observert i 15-leddede azalider, som ble syntetisk fremstilt fra erytromycin (Mutak, 2007). Gitt det begrensede antallet ni-leddede naturlige produkter med lakton- og laktamgrupper rapportert så langt, er asteroiden et enestående eksempel på denne klassen av forbindelser.

Melanin syntetiseres fra L-tyrosin av melanogene enzymer som tyrosinase, TRP-1 og TRP-2 (Lee et al., 2013, 2015). Siden tyrosinase er nøkkelen i melanogenese-hemmingen i melanocytter, ble dens hemmere ansett som lovende kandidater som hudblekingsmidler i kosmetikk (Pillaiyar et al., 2017). Imidlertid kan tyrosinasehemmere som hydrokinon, rhododendron eller bringebærketoner forårsake uønskede effekter som leukodermi ved å påvirke melanocyttintegriteten (Kim et al., 2016, 2017b, 2019). Derfor kreves det nye hudblekemidler med en ny virkemåte og nye stillaser. Mange nyere studier har rapportert om naturlige stoffer som viser anti-melanogen aktivitet gjennom transkripsjonell regulering av melanogene enzymer (Kim et al., 2017a). Denne studien avslørte at den anti-melanogene aktiviteten til asteroider virker ved å modulere mRNA-nivåene av tyrosinase, TRP-1 og TRP-2, noe som indikerer dets potensiale som et hudblekingsmiddel, noe som krever ytterligere undersøkelser i fremtiden.

INTERESSEKONFLIKT

Det er ingen interessekonflikter å erklære.

TAKK

Denne forskningen ble støttet av Basic Science Research Program gjennom National Research Foundation of Korea finansiert av departementet for vitenskap og IKT under stipend nr. NRF-2019R1F1A1059033 (til Yang I), 2018R1A5A2025286 (til Lim KM), 2017R1D1A1B720202020 (til Nam SJ).

REFERANSER

1. Atanasov, AG, Waltenberger, B., Pferschy-Wenzig, EM, Linder, T., Wawrosch, C., Uhrin, P., Temml, V., Wang, L., Schwaiger, S., Heiss, EH , Rollinger, JM, Schuster, D., Breuss, JM, Bochkov, V., Mihovilovic, MD, Kopp, B., Bauer, R., Dirsch, VM og Stuppner, H. (2015) Oppdagelse og gjenforsyning av farmakologisk aktive planteavledede naturlige produkter: en anmeldelse. Bioteknologi. Adv. 33, 1582-1614.

2. Aydogmus-Ozturk, F., Günaydin, K., Öztürk, M., Jahan, H., Duru, ME og Choudhary, MI (2018) Effekt av Sideritis leptoclada mot HT-144 malignt melanom hos mennesker. Melanoma Res. 28, 502-509.

3. Briganti, S., Camera, E. og Picardo, M. (2003) Kjemiske og instrumentelle tilnærminger for å behandle hyperpigmentering. Pigment Cell Res. 16, 101-110.

4. Costin, GE og Hearing, VJ (2007) Menneskelig hudpigmentering: melanocytter modulerer hudfarge som svar på stress. FASEB J. 21, 976-994.

5.DeCaprio, AP (1999) Hydrokinons toksikologi - relevans for yrkesmessig og miljømessig eksponering. Crit. Rev. Toxicol. 29, 283-330.

6. Dräger, G., Kirschning, A., Thiericke, R. og Zerlin, M. (1996) Decanolides, 10-leddede laktoner av naturlig opprinnelse. Nat. Prod. Rep. 13, 365-375.

7. Fenical, W. og Jensen, PR (2006) Utvikling av en ny ressurs for medikamentoppdagelse: marine actinomycete-bakterier. Nat. Chem. Biol. 2, 666-673.

8. Ferraz, HMC, Bombonato, FI, Sano, MK og Longo Jr., LS (2008) Naturlig forekomst, biologiske aktiviteter og syntese av åtte-, ni- og elleve-leddede ringlaktoner. Quim. Nova 31, 885-900.

9.García-Gavín, J., González-Vilas, D., Fernández-Redondo, V. og Toribio, J. (2010) Pigmentert kontaktdermatitt på grunn av kojic acid. En paradoksal bivirkning av en hudlysner. Kontakt Derm. 62, 63- 64.

10. Haefner, B. (2003) Legemidler fra dypet: marine naturprodukter som medikamentkandidater. Drug Discov. I dag 8, 536-544.

11. Kim, D., Lee, EJ, Lee, J., Leutou, AS, Shin, YH, Choi, B., Hwang, JS, Hahn, D., Choi, H., Chin, J., Cho, SJ, Hong, YD, Ko, J., Seong, CN, Maloney, KN, Oh, DC, Yang, I., Hwang, H. og Nam, SJ (2018) Antartin, en cytotoksisk zizaane-type sesquiterpenoid fra en Streptomyces sp. isolert fra antarktisk marint sediment. Mars Drugs 16, 130.

12. Kim, K., Leutou, AS, Jeong, H., Kim, D., Seong, CN, Nam, SJ og Lim, KM (2017a) Anti-pigmentær effekt av (-)-4-hydroksysattabacin fra den marin-avledede bakterien Bacillus sp. Mars Drugs 15, 138.

13. Kim, SE, Lee, CM og Kim, YC (2017b) Anti-melanogen effekt av Oenothera laciniata metanolekstrakt i melan-a-celler. Toxicol. Res. 33, 55-62.

14. Kim, M., Baek, HS, Lee, M., Park, H., Shin, SS, Choi, DW og Lim, KM (2016) Rhododendron og bringebærketon svekker normal spredning av melanocytter gjennom reaktive oksygenarter- avhengig aktivering av GADD45. Toxicol. In Vitro 32, 339-346.

15. Kim, M., Lee, CS og Lim, KM (2019) Rhododenol aktiverer melanocytter og induserer morfologiske endringer på subcytotoksiske nivåer. Int. J. Mol. Sci. 20, 5665.

16. Lee, CS, Jang, WH, Park, M., Jung, K., Baek, HS, Joo, YH, Park, YH og Lim, KM (2013) Et nytt adamantylbenzylbenzamidderivat, AP736, undertrykker melanogenese gjennom hemming av cAMP-PKA-CREB-aktivert mikroftalmiassosiert transkripsjonsfaktor og tyrosinaseekspresjon. Exp. Dermatol. 22, 762-764.

17. Lee, M., Park, H., Jeon, SW, Bang, JK, Chung, KY, Choi, DW, Kim, EJ og Lim, KM (2015) Novel anti-melanogenic hexapeptides, PAL-10 og PAL-12. Arch. Dermatol. Res., 307, 249-257.

18. Luo, X., Li, F., Hong, J., Lee, CO, Sim, CJ, Im, KS og Jung, JH (2006) Cytotoksiske oksylipiner fra en marin svamp Topsentia sp. J. Nat. Prod. 69, 567-571.

19. Mutak, S. (2007) Azalider fra azitromycin til nye azalidderivater. J. Antibiot. 60, 85-122.

20. Niwa, H., Wakamatsu, K. og Yamada, K. (1989) Halicholakton og neohalikolakton, to nye fettsyremetabolitter fra den marine svampen Halichondria okadai Kadota. Tetrahedron Lett. 30, 4543-4546.

21. Parenty, A., Moreau, X., Niel, G. og Campagne, JM (2013) Oppdatering 1 av: makrolaktoniseringer i den totale syntesen av naturlige produkter. Chem. Rev. 113, PR1-PR40.

22. Pillaiyar, T., Manickam, M. og Jung, SH (2017) Nedregulering av melanogenese: medikamentoppdagelse og terapeutiske alternativer. Drug Discov. I dag 22, 282-298.

23. Shiina, I. (2007) Total syntese av naturlige 8- og 9-leddede laktoner: nylige fremskritt i en middels stor ringformasjon. Chem. Rev. 107, 239-273.

24. Song, I., Gu, H., Han, H., Lee, N., Cha, J., Son, Y. og Kwon, J. (2018) Effekter av 7-MEGATM 500 på oksidativt stress, betennelse og hudregenerering i H2O2-behandlede hudceller. Toxicol. Res. 34, 103- 110.

25. van Tamelen, EE, Dickie, JP, Loomans, ME, Dewey, RS og Strong, FM (1961) The chemistry of antimycin AX structure of the antimycins. J. Am. Chem. Soc. 83, 1639-1646.

26. Zhu, W. og Gao, J. (2008) Bruken av botaniske ekstrakter som aktuelle hudlysende midler for forbedring av hudpigmenteringsforstyrrelser. J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 13, 20-24.

For mer informasjon: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501