Abnormiteter i B-celler og T-celler hos pasienter med selektiv IgA-mangel

Abstrakt

Bakgrunn

Selektiv IgA-mangel (SIgAD) er den mest utbredte medfødte immunitetsfeilen med nesten ukjent etiologi. Denne studien hadde som mål å undersøke de kliniske diagnostiske og prognostiske verdiene til lymfocyttundergrupper og funksjon hos symptomatiske SIgAD-pasienter.

Metoder

Totalt 30 tilgjengelige SIgAD-pasienter fra det iranske registeret og 30 friske kontroller med alderskjønn ble inkludert i denne studien. Vi analyserte B- og T-cellers perifere undergrupper og T-celleproliferasjonsanalyse ved flowcytometri hos SIgAD-pasienter med milde og alvorlige kliniske fenotyper.

Resultater

Resultatene våre indikerte en signifikant økning i naive og overgangsmessige B-celler og en sterk reduksjon i marginalsone-lignende og byttet minne B-celler hos SIgAD-pasienter. Vi fant at naive og sentrale minne CD4+ T-celleundersett, så vel som Th1, Th2 og regulatoriske T-celler, har redusert betydelig. På den annen side var det en signifikant reduksjon i sentral- og effektorminne CD8+ T-celleundersett, mens proporsjoner av begge (CD4+ og CD8+) terminalt differensierte effektorminne T-celler (TEMRA) var signifikant forhøyet hos våre pasienter. Selv om noen T-celleundergrupper i alvorlig SIgAD var like, var en reduksjon i B-celler i marginalsone og byttet minne og en økning i CD21low B-celler hos alvorlige SIgAD-pasienter litt fremtredende. Dessuten var spredningsaktiviteten til CD{10}} T-celler sterkt svekket hos SIgAD-pasienter med en alvorlig fenotype.

Konklusjon

SIgAD-pasienter har varierte cellulære og humorale mangler. Derfor kan vurdering av T-celler og B-celler hjelpe til bedre å forstå den heterogene patogenesen og prognoseberegningen av sykdommen.

Nøkkelord

Medfødte immunitetsfeil, Primær immunsvikt, Selektiv IgA-mangel, B-celleundergrupper, T-celleundergrupper, Flowcytometri, Proliferasjonanalyse

cistanche tubulosa-forbedre immunsystemet

cistanche ekstrakt

Introduksjon

Selektiv IgA-mangel (SIgAD) er den mest utbredte primære immunsviktlidelsen (PID) eller medfødte immunitetsfeil (IEI), identifisert ved serumkonsentrasjon av IgA under 7 mg/dL og normale konsentrasjoner av IgG og IgM hos pasienter over fire år . Flertallet av SIgAD-pasienter er asymptomatiske, selv om noen av dem viser forskjellige kliniske manifestasjoner, inkludert gastrointestinale og luftveisinfeksjoner, allergiske sykdommer og autoimmune lidelser. Sykdomsprogresjonen til vanlig variabel immunsvikt (CVID) hos en utvalgt gruppe SIgAD-pasienter med IgG-underklassemangel eller autoimmune lidelser er rapportert [1]. Ingen spesifikke årsaker til patogenesen av SIgAD er ennå ikke rapportert. Imidlertid har defekter i prosessen med IgA-klassesvitsjrekombinasjon (CSR), IgA-produksjon og -sekresjon, samt langtidsoverlevelse av IgA, byttet minne B-celler og plasmaceller fra SIgAD-pasienter blitt identifisert i uløste tilfeller [2 ]. Defekter i disse immunologiske prosessene er assosiert med abnormiteter i lymfocyttene til SIgAD-pasienter. Derfor kan vurderingen av lymfocyttene, spesielt B-celle- og T-celleundergrupper, være verdifull og nyttig. Flere studier har vist B-celle- og T-celleabnormiteter hos noen grupper av SIgAD-pasienter [3, 4]. Når det gjelder B-celleundergrupper, er det rapportert en reduksjon i antall byttede minne B-celler, IgA-plasmaceller og overgangs-IL-10+-regulatoriske B-celler fra SIgAD-pasienter [5–8]. På den annen side er det rapportert om defekter i noen T-celleundersett av SIgAD-tilfeller som er knyttet til utilstrekkelig IgA-produserende B-celler [5, 8, 9]. Flowcytometrisk immunfenotyping kan spille en viktig rolle i diagnostisering, prognose, klassifisering og behandling av pasienter med SIgAD. Derfor tok vi for første gang sikte på å undersøke hovedsubpopulasjonene av B- og T-lymfocytter sammen med en evaluering av T-cellefunksjon, for å klargjøre korrelasjonen mellom immunologiske egenskaper og kliniske manifestasjoner hos symptomatiske pasienter med SIgAD.

Materialer og metoder

Pasienter

Totalt 30 tilgjengelige symptomatiske SIgAD-pasienter (fra det iranske IEI-registeret [10, 11]) og 30 alderskjønnsmatchede friske kontroller (HC) ble inkludert i denne studien. HC-er ble bekreftet etter kliniske og laboratorieevalueringer å ikke ha noen immunsvikt eller noen underliggende sykdom. Pasientene hadde blitt henvist til Children's Medical Center (Pediatrics Center of Excellence tilknyttet Teheran University of Medical Sciences, Teheran, Iran). Alle pasienter ble diagnostisert med SIgAD i henhold til European Society for Immunodeficiency [12]. Studien ble godkjent av den etiske komiteen ved Teheran University of Medical og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle individene (IR.TUMS.VCR.REC.1396.2018). Demografiske, kliniske manifestasjoner og immunologiske data til pasientene ble dokumentert i et spørreskjema.

Klassifisering av pasienter

For å sammenligne demografiske, kliniske og immunologiske data ble pasientene kategorisert i to grupper alvorlige og milde (basert på kliniske manifestasjoner) samt consanguine og ikke-consanguine grupper (basert på foreldrenes consanguinitet). Minimumsinklusjonskriteriene for at en pasient skulle anses som symptomatisk, var ti advarselstegn fra Jeffrey Modell Foundation. Pasientene ble delt inn i to grupper milde og alvorlige, ettersom pasienter med alvorlige infeksjoner (f.eks. blodbanen, sentralnervesystemet og dyptliggende infeksjoner som osteomyelitt og leddgikt), autoimmunitet eller malignitet ble kategorisert i den alvorlige gruppen, og andre komplikasjoner ble ansett som en mild gruppe. Siden lungebetennelse og andre luftveisinfeksjoner er vanlig hos SIgAD-pasienter og vi ønsket å sjekke det som en parameter mellom alvorlige og milde grupper, så vi kategoriserte det ikke i den alvorlige gruppen.

cistanche supplement fordeler-hvordan styrke immunforsvaret

Klikk her for å se Cistanche Enhance Immunity-produkter

【Be om mer】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Lymfocytt-undersettanalyse

Perifere mononukleære blodceller (PBMCs) ble separert fra 8 ml blodprøver samlet i natriumheparinrør ved bruk av en Ficoll-Hypaque tetthetsgradientsentrifugering ved 600 g i 25 minutter ved 22 grader. For ekstracellulær farging ble PBMC-er delt i 5-panelfraksjoner og farget i 20 minutter ved 2–8 grader på et mørkt sted med hver cocktail som inneholdt de monoklonale antistoffene i optimale konsentrasjoner. B1-panelet ble brukt til å bestemme naivt (CD19+CD27−IgM+IgD+), kun IgM-minne (CD19+CD27+ IgM++IgD−), byttet minne (CD19+CD27+IgM−IgD−) og marginale sone-lignende B-celler (CD19+CD27+IgM++IgD+). B2-panelet ble brukt til å identifisere CD21low B-celler (CD19+CD21−/lowCD38−/lowIgM+++), plasmablast (CD19+CD21−/lowCD38++/{ {34}}IgM−) og overgangs B-celler (CD19+CD21+CD38++IgM+). T1-panelet ble brukt til å klassifisere naivt (CD4+ eller CD8+ og CD45RA+CCR7+), effektorminne (CD4+ eller CD8+ og CD45RA−CCR7−), sentralminne (CD4+ eller CD8+og CD45RA−CCR7+) og TEMRA (terminalt differensiert effektorminne) T-celler (CD4+ eller CD8+ og CD45RA+CCR7−). T2-panelet ble brukt til å klassifisere regulatoriske T-celler (TregsCD4+CD25+FOXP3+CD127−/low). For intracellulær farging, etter overflatemolekylfarging, ble de fiksert og permeabilisert gjennom FOXP3/Permeabiliseringsbuffer (eBioscience, USA) i henhold til produsentens instruksjoner for følgende: Anti-Human FOXP3 (PE), Anti-Human IL{{67} } (PE), Anti-Human IL-4 (APC) og Anti-Human IFN- (FITC). Alle antistoffer og isotypekontroller ble kjøpt fra eBioscience, et amerikansk selskap. For å vurdere T-hjelpeceller (inkludert T1, T2 og T17), ble 1 × 106 (celle/ml) PBMC-er dyrket i Roswell Park Memorial Institute (RPMI 1640) cellekulturmedium, etterfulgt av stimulering med phorbolmyristatacetat (PMA) , 50 ng/ml, Sigma-Aldrich, USA) / ionomycin (1 ug/ml, Sigma-Aldrich), og i nærvær av brefeldin (5 ug/mL, eBioscience). Deretter ble cellene inkubert ved 37 grader i en inkubator med 5 % CO2 og 95 % fuktighet i 5 timer. De stimulerte cellene ble vasket med fosfatbufret saltvann (PBS), og overflatefarging med anti-human CD4 (PerCp)-Cy5.5 ble utført. Intracellulære cytokinfargingsantistoffer (anti-IFN-FITC, anti-IL-17 PE og anti-IL-4 APC for evaluering av T-undersett og anti-FoxP3 PE for evaluering av Treg) ble tilsatt og inkubert ved romtemperatur i 30 min. Celler ble vasket med permeabiliseringsbuffer og resuspendert i kald fargebuffer, og tellingene ble bestemt ved å bruke et BD FACSCalibur Flow Cytometer (BD Biosciences) (Tilleggsfil 1: Tabell S1). Gatestrategien ligner på vår forrige studie [13, 14].

T-celleproliferasjonsanalyse

For å vurdere T-celleproliferasjon ble PBMC-er dyrket med fluorescerende 5,6-karboksyfluoresceinsuccinimidylester (CFSE, Biolegend, USA). En CFSE-stamløsning ble fremstilt ved å oppløse CFSE i dimetylsulfoksid (DMSO) i en konsentrasjon på 5 mM/L, basert på produsentens instruksjoner. Denne bestanden ble frosset i små alikvoter for å forhindre overdreven fryse- og tinesykluser. CFSE ble tilsatt et tverrgående falkerør som inneholdt 500 μL PBMC-suspensjon (5 × 106 celler/ml) i RPMI 1640 cellekulturmedium inneholdende 10 % FBS (fetal bovint serum, Biosera, Frankrike) med en sluttkonsentrasjon på 5 μM og 2 mM L-glutamin, 100 U/ml penicillin og 100 ug/ml streptomycin (Lymphosep; Biosera, Frankrike). Røret dreide seg raskt og vortexet for å sikre homogen spredning. Etter merking ble cellesuspensjonen inkubert i 5 minutter ved 37 grader. Deretter ble 9 ml RPMI1640 inneholdende 10 % FBS tilsatt til cellesuspensjonen og den ble sentrifugert ved 500 g i 5 minutter. Cellene ble vasket tre ganger og 1 ml RPMI1640 med 10 % FBS ble tilsatt. Når det gjelder spesifikk T-cellestimulering og proliferasjon, ble et anti-CD3-antistoff (1 µg/ml) tilsatt 500 μL steril PBS, og platen ble inkubert ved 37˚C i 2 timer. Den belagte platen ble vasket to ganger med steril PBS og de merkede cellene ble direkte tilsatt, og til slutt ble et anti-CD28-antistoff (2 µg/ml) tilsatt som et stimulerende middel for T-celler. Platen ble inkubert ved 37 ºC i en inkubator med 5 % CO2 og 95 % fuktighet i 96 timer [15–17]. En ustimulert brønn ble betraktet som en kontroll for ikke-proliferative celler. Etter 96 timer ble cellene høstet og vasket. Etter farging med Anti Human CD4 (PerCPCy5.5), ble cellene til slutt analysert med BD FACSCalibur™ Flowcytometer og CellQuest Pro-programvare (BD, Biosciences, San Jose, CA, USA). Spredningsanalyse ble utført ved å sammenligne tre kriterier, inkludert prosentandelen av celler delt (%delt), gjennomsnittlig antall celledelinger som en celle gjennomgår (divisjonsindeks), og gjennomsnittlig antall celledelinger som forekommer i hele primærcellepopulasjonen (Spredningsindeks) av FlowJo 7.6-programvare.

Statistisk analyse

SPSS-programvare (Windows versjon 16.0; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) ble brukt for statistisk analyse. Vi brukte Kolmogorov-Smirnov-testen for å estimere om data var normalfordelt. Funnene ble presentert som median (interkvartilområde [IQR], presentert som et område med 25.–75. persentil) verdier. En kjikvadrattest eller Fishers eksakte test ble brukt for sammenligninger. For sammenligning av mer enn to grupper, hvis datafordelingen var normal, ble ANOVA brukt, og hvis datafordelingen var ikke-normal ble Kruskal Wallis sin test benyttet. Forskjellene ble ansett som statistisk signifikante for P-verdier som var<0.05.

cistanche fordeler for menn styrker immunforsvaret

Resultater

Demografiske, immunologiske og kliniske funn

Blant alle registrerte iranske SIgAD-pasienter ble 30 tilgjengelige pasienter (23 menn og syv kvinner) rekruttert i denne studien. Medianalderen (IQR) til pasientene var 11 (7,3–16) år på studietidspunktet. Foreldres slektskap var tilstede hos 16 (53,3 % av) pasienter. Lungebetennelse (42,3 %) var den hyppigste kliniske manifestasjonen hos de studerte pasientene, og malignitet ble ikke diagnostisert i denne kohorten. De demografiske, kliniske og immunologiske egenskapene til pasienter er oppsummert i tabell 1. Etter å ha kategorisert pasienter basert på alvorlige og milde fenotyper, ble demografiske, kliniske og immunologiske data sammenlignet (tabell 1, fig. 1). Pasientene med alvorlige fenotyper manifesterte flere respiratoriske komplikasjoner enn den milde gruppen. Andre parametere har ikke vist noen signifikant forskjell. De samme sammenligningene ble utført hos pasienter med og uten slektskap, og ingen av dem hadde signifikant forskjell. Derimot presenterte pasienter med milde fenotyper en litt høyere grad av allergi og gastrointestinale manifestasjoner med økt serum-IgE-nivå, noe som tyder på en økt overgang mot IgE-produksjon.

Tabell 1 Sammenligning av demografiske, kliniske og immunologiske data for SIgAD-pasienter med alvorlige og milde fenotyper

Fig. 1 Sammenligning av kliniske manifestasjoner blant alvorlig og mild SIgAD

B-celle undersett

SIgAD-pasienter viste signifikant økt frekvens av CD{{0}} B-celler [11,2 % (9,4–13.07 %) vs. 7,2 % (6–8,6 %), p < 0.001], med økte naive B-celler [71 % (63,7–80 %) vs. 66,5 % (56,2–71,1 %), p=0.036] og overgangsmessige B-celler [ 8 % (3,6–13,5 %) vs. 4,8 % (2,6–9,5 %), p=0.032] sammenlignet med HC. I kontrast er prosentandelen av marginalsone-lignende [2,3 % (2–3,5 %) vs. 3,4 % (2,3–4,8 %), p=0.022) og byttet minne B-celler [3,5 % (1,9 –5,5 %) vs. 6 % (3,5–8,4 %), p=0.006] var signifikant lavere enn HC. Imidlertid var redusert IgM-kun minne og plasmablaster og økte CD21low B-celler hos pasienter enn de i HCs ikke signifikante (fig. 2). Interessant nok var noen sammenligninger signifikante mellom pasientenes kliniske grupper. Prosentandelen av CD19+ B-celler i både milde og alvorlige fenotyper var signifikant høyere enn HCs [11,6 % (8,7–13) vs. 7,2 % (6–8,6), p < 0,0001, 10,8 % (9,6–13,2) ) mot henholdsvis 7,2 % (6–8,6), p < 0,0001. Alvorlige SIgAD-pasienter viste en signifikant økning i prosentandelen av CD21lave B-celler [1,5 % (1–2,2) vs. 2,7 % (1,6–5,6), p=0.025], og en signifikant nedgang i prosentandelen av både marginalsone og byttet minne B-celleundersett [3,4 % (2,3–4,8) vs. 2,2 % [2, 3], p=0.040, 6 % (3,5–8,4) vs. 2,7 % ( 1.7–4.7), henholdsvis p=0}.003]. Prosentandelen av overgangsmessige B-celler hos pasienter med mild SIgAD var høyere enn HCs [10,7 % (3,9–13,8) vs. 4,8 % (2,6–9,5), p=0.047] (fig. 3). Prosentandelen av bare IgM-minne var signifikant høyere hos pasienter med slektskap enn hos de uten slektskap. Vi kategoriserte også frekvensen av B-celleundersett av SIgAD-pasienter i tre kategorier: normal, redusert og økt basert på normalområdet for HC-er (tabell 2). Basert på denne analysen er den største reduksjonen i B-celleundersett relatert til byttet minne B-celler (23 %), mens den største økningen er relatert til naive B-celler (27 %) hos SIgAD-pasienter. Bortsett fra økte CD21low B-celler hos alvorlige SIgAD-pasienter sammenlignet med milde SIgAD-pasienter.

Fig. 2 Kvantitativ analyse av B-celle- og T-celledelprosentandeler i SIgAD-pasienter og friske kontroller. Medianen er representert med en horisontal linje. Data ble analysert ved hjelp av Mann–Whitney U-testen. *s<0.05, statistical significance between patients and HCs. HC Healthy control

T-celle undersett

Undergruppeseparasjonen av CD4+ T-celler avslørte en signifikant reduksjon i totalt antall CD4+ T-celler [36,5 % (30,8–41,2 %) vs. 40,1 % (37,3–47,2 %), p{{14 }}.038)], sentrale minneceller [11 % (7,3–13,1 %) vs. 24,5 % (16–29 %), p.<0.0001), T1 [7.7% (5.2–9.9%) vs. 12% (7.8–16%), p=0.002], T2 [0.3% (0.2–0.4%) vs. 0.6% (0.4–1.3%), p<0.0001] and Tregs [0.3% (0.03–0.7%) vs. 1.4% (1.1– 1.6%), p<0.0001] in patients compared with HCs. Oppositely, the percentage of TEMRA [9.5% (5.7–16.4%) vs. 2% (1.3–6.2%), p<0.0001] was meaningfully higher than HCs. Moreover, decreased effector memory and T17, and increased naïve helper T cells in patients in comparison with HCs were not significant (Fig.  2). Regarding the percentage of CD8+ T cell subsets, central memory [0.6% (0.3–0.8%) vs. 3% (2–6%), p<0.0001] and effector memory [12.3% (7.6–22.1%) vs. 23.9% (19.5– 27.2%), p<0.0001] were markedly diminished in patients compared with HCs. On the other hand, the percentage of cytotoxic TEMRA [44.1% (28.4–55.7%) vs. 24.4% (20– 31%), p<0.0001] was significantly higher than HCs. However, increased total CD8+ T cells and decreased naïve CD8+ T cells were not significant in patients compared to those in HCs (Fig. 2). Regarding the comparison of the percentage of CD8+ T cells subsets between severe SIgAD patients with HCs, naïve T cells, effector, and central memory cells demonstrated a significant reduction. Also, there was a significant decrease in the percentage of total CD4+ T-cells, central memory, T1, T2, and regulatory T cells, whereas TEMRA in both CD4+ and CD8+ T cells demonstrated an increase. On the other hand, the percentage of effector and central memory cells within CD8+ T cells, as well as central memory, TEMRA, T1, and regulatory T cells within CD4+ T cell subsets demonstrated a significant decrease in mild forms of SIgAD compared to HCs. In contrast, we found an increase in TEMRA CD8+ T cells and T2 CD4+ T cells in mild patients compared to controls (Fig.  3). Comparisons of the percentages of all T cell subsets between SIgAD patients with and without consanguinity have not indicated any significant difference. We also categorized the frequency of T cell subsets of SIgAD patients into three categories: normal, decreased, and increased based on a normal range of HCs (Table  2). Based on this analysis, the most decrease in T cell subsets is related to Tregs (67%), while the most increase is related to CD8+ TEMRA (37%) in SIgAD patients. Flow cytometry results of B cell and T cell subsets in 30 SIgAD patients have shown separately in Additional file 1: Tables S2 and S3. To evaluate the impact of the T cell subset on the switching process of B cells and the production of different Ig subtypes we performed a correlation analysis. Surprisingly only IgG but not IgM and IgE were significantly associated with specific T cell subsets (negative association with naïve CD4 and naïve CD8 T cells and positive association with CD4+ TEM and T17 cells, Additional file 1: Table S4) indicating the independent association of IgM to IgE from co-stimulation of T cell subsets in our patient cohorts. Moreover, correlation analysis of absolute counts and percentage of subsets should significant direct correlation in all measured parameters (Additional file 1: Table S5).

Fig. 3 Kvantitativ analyse av B-celle- og T-celledelprosentandeler hos alvorlige og milde SIgAD-pasienter. Medianen er representert med en horisontal linje. Data ble analysert ved hjelp av Mann–Whitney U-testen. *s<0.05, statistical signifcance between severe and mild patien

Tabell 2 Fordeling av normale, økte og reduserte andeler av T-celle- og B-celleundergrupper hos alle SIgAD-pasienter. N=30

T-celleproliferasjon

Dataene generert av CFSE-merkede kulturer ble analysert for å kvantifisere CD4+ T-celleproliferasjon. Det var ingen signifikant forskjell i divisjonsindeks (DI), proliferasjonsindeks (PI) og prosent delt (PD) mellom SIgAD-pasienter og HC-er (fig. 4). Interessant nok, når vi sammenlignet disse indeksene mellom SIgAD-pasienter med alvorlige og milde fenotyper, fant vi at median DI og PD hos alvorlige SIgAD-pasienter sammenlignet med milde tilfeller ble betydelig opphevet [0.1 (0 .08–0.4) vs. 0.5 (0.3–0.8), p=0.019 og 12.2 (8.4– 26.4) vs. 42.5 (26.8–52.6), henholdsvis p=0.009]. Det var imidlertid ingen signifikant forskjell i PI mellom alvorlige og milde grupper (fig. 4). På den annen side var sammenligninger av DI, PI og PD mellom SIgAD-pasienter med og uten konsanguinitet ikke signifikante.

Fig. 4 Sammenligning av T-lymfocyttproliferasjonsindekser hos alvorlige og milde SIgAD-pasienter. Medianen er representert med en horisontal linje. *s<0.05, statistical significance between severe and mild patients

Diskusjon

SIgAD er den mest utbredte IEI med ulike kliniske manifestasjoner. Disse pasientene har et annet spekter av kliniske manifestasjoner. Følgelig er immunologiske undersøkelser hos pasienter med et annet spekter av kliniske manifestasjoner nyttige. Den mest utbredte kliniske manifestasjonen ved IEI, spesielt ved SIgAD, er tilbakevendende luftveisinfeksjoner [18–20]. Vi fant lungebetennelse som den hyppigste komplikasjonen hos våre registrerte symptomatiske pasienter. Tilbakevendende luftveisinfeksjoner manifesterer seg vanligvis i form av øvre luftveisinfeksjoner og kan forbli udiagnostisert i flere år; Imidlertid viser noen SIgAD-pasienter mer alvorlige fenotyper som bronkiektasi eller utslettet bronkiolitt som tvinger immunologisk undersøkelse hos disse pasientene [21]. Gitt at tilbakevendende luftveisinfeksjoner har blitt rapportert som den viktigste årsaken til sykelighet og død hos barn med IEI, spesielt primære antistoffmangler [22, 23], er tidlig diagnose og behandling av luftveislidelser assosiert med SIgAD svært viktig [24, 25] . Det har blitt indikert at abnormiteter i B-celleundergrupper er observert hos noen SIgAD-pasienter [3, 4]. Resultatene våre indikerte en signifikant økning i naive og overgangsmessige B-celler og en sterk reduksjon i marginalsone-lignende og byttet minne B-celler. Dette unormale B-cellemønsteret antyder defekter i de terminale stadiene av B-celledifferensiering, lik CVID-pasienter [26]. Gitt at CVID og SIgAD deler nesten lik genetisk bakgrunn og kan akkumuleres som flere tilfeller i en familie, er denne likheten forutsigbar. Generelt har mer enn halvparten av IEI-pasienter registrert i det iranske registeret foreldres slektskap, men denne frekvensen er fortsatt mindre vanlig hos SIgAD-pasienter. Hos iranske SIgAD-pasienter sammenlignet med vestlige pasienter er slektskap mer utbredt. Selv om monogenetiske årsaker kan eksistere, er det ennå ikke identifisert til tross for neste generasjons sekvensering hos flere pasienter [27]. Vi oppdaget en reduksjon i marginalsone-lignende og byttet minne B-celler, spesielt hos alvorlige SIgAD-pasienter, som tidligere har blitt rapportert [28]. Nylig rapporterte vi en lignende reduksjon i marginalsone-lignende og byttet minne B-celler hos CVID-pasienter [14].

cistanche supplement fordeler-øke immunitet

På den annen side, selv om vi observerte en signifikant reduksjon i byttet minne hos pasienter med Ataxia Telangiectasia (AT), men en kraftig økning i de marginale sone-lignende B-cellene ble observert [29]. SIgAD-pasienter, spesielt en gruppe pasienter med alvorlige kliniske manifestasjoner (tilbakevendende og intensiv infeksjon og autoimmunitet), har lavere byttet minne B-celler [28, 30, 31]. Det har blitt antydet at reduksjonen i svitsjet minne B-celle subpopulasjon skyldes defekter i nivået av antistoffklassebytte rekombinasjonsprosessen (CSR), forårsaket av enzymatisk mangel, eller abnormiteter i cytokinnettverkene og deres reseptorer [28]. Noen SIgAD-pasienter med alvorlig fenotype-fremgang til CVID, noe som gjenspeiler denne undergruppen av SIgAD kan dele felles immunpatogenese med CVID, spesielt i utviklingen av CSR-trinnet. Følgelig betraktes byttet minne B-celler som en diagnostisk biomarkør hos pasienter [28]. Imidlertid er frekvensen av byttet minne B-celler normal blant barn i vår studiepopulasjon, og reduksjonen ble observert mer hos voksne pasienter; antyder at aldring sannsynligvis fører til progresjon av SIgAD til CVID, spesielt hos pasienter med alvorlige kliniske manifestasjoner (data ikke vist). På den annen side er marginalsone B-celler en spesialisert populasjon av B-celler som produserer IgM for beskyttelse mot infeksjoner, spesielt innkapslede bakterier [32]. Selv om tidligere studier har vist at antallet marginalsone-lignende B-celler hos SIgAD-pasienter ikke var forskjellig sammenlignet med normale kontroller [33], oppnådde vi likevel en signifikant reduksjon i marginalsone-lignende B-celler i våre tilfeller, lik en tidligere rapport hos CVID-pasienter [34]. Redusering av marginale B-cellesubsett hos andre pasienter med antistoffproduksjonsdefekter kan være assosiert med økt risiko for infeksjon som lungebetennelse og en reduksjon i serum-IgM-nivåer, tilsvarende CVID-pasienter [35]. Vi fant økte CD21low B-celler sammenlignet med kontroll, hovedsakelig hos alvorlige SIgAD-pasienter. Tidligere studier har rapportert en økning i CD21low B-celler i både SIgAD [3] og CVID pasienter [36], og andre autoimmune sykdommer [37]. Nylig har det også blitt rapportert en økning i CD21low hos AT-pasienter [29]. En økning i antall CD21low-celler er direkte relatert ikke bare til autoimmunitet, men også til infeksjon [36]. På den annen side kan kronisk eksponering for virusinfeksjon føre til konvertering av antigenreaktive B-celler til CD21low B-celler som ikke reagerer [38]. For å avklare årsaken til utvidede CD21low B-celler; det er nødvendig å foreta ytterligere undersøkelser for denne B-celle subpopulasjonen. Gitt den høye subpopulasjonen av CD21low B-celler i CVID-pasienter og progresjonen til noen pasienter med SIgAD til CVID, vil den alvorlige gruppen av SIgAD-pasienter med økte CD21low B-celler mer sannsynlig utvikle CVID. Derfor trenger de en mer regelmessig oppfølging for å vurdere sykdomsforløpet. Overgangs B-celler er på et mellomstadium i utviklingen mellom umodne benmargsceller og modne B-celler i milten [39]. I denne studien observerte vi signifikant økte overgangs-B-celler hos våre SIgAD-pasienter, spesielt hos alvorlige SIgAD-pasienter, selv om antallet overgangs-B-celler hos barn med SIgAD var normalt (data ikke vist). Vi har nylig observert en betydelig reduksjon i overgangs B-cellene AT [29]. I motsetning til tidligere studier som viste reduserte overgangs-B-celler [8, 28, 40], indikerte voksne pasienter noe økte overgangs-B-celler. Dessuten har Lemarquis et al. viste en nedgang i den funksjonelle aktiviteten til overgangs-B-celler basert på IL-10-produksjon og CpG-stimulering [40]. Gitt defekten i de terminale stadiene av B-celler i SIgAD, ser det ut til at en økning i overgangs B-celler og naive B-celler hos våre pasienter skyldes en kompenserende mekanisme som forsterker tidlig B-celleutvikling. Når det gjelder ulike resultater mellom vår studie og andre, ser det ut til at denne forskjellen skyldes ulike seleksjonsprosesser, da alle våre pasienter var symptomatiske, mens andre studerte heterogent asymptomatiske og symptomatiske SIgAD-pasienter. Når det gjelder undergrupper av T-celler, observerte vi redusert totalt antall CD4+ T-celler, T1-, T2- og Treg-celler, og økt TEMRA i både CD4+- og CD8+-celler. I samsvar med resultatene våre har tidligere studier vist en økning og reduksjon i henholdsvis CD8+ og CD4+ T-lymfocytter [4]. Vi fant også at sentralt minne i både CD4+ og CD8+ T-celler og effektorminne i CD8+ T-lymfocytter var redusert hos SIgAD-pasienter sammenlignet med HC. Vi observerte en signifikant økning i TEMRA-celleundergruppen i både CD4+- og CD8+-lymfocyttpopulasjonen, spesielt hos alvorlige SIgAD-pasienter. TEMRA er en tredje undergruppe av T-celleminne i perifert inflammatorisk vev som uttrykker CD45RA, men som mangler uttrykk for CCR7 eller CD27. Hos mennesker påvirkes TEMRA-celleakkumulering av kroniske infeksjoner, slik som CMV [41, 42]. En økning i disse terminerte T-celleundergruppene kan skyldes kronisk cellulær respons på infeksjoner hos disse pasientene; Det må imidlertid utføres ytterligere studier angående dette fenomenet. I samsvar med våre resultater, Nechvatalova et al. demonstrerte utvidede CD4+ og CD8+ TEMRA-celler hos SIgAD-pasienter som var relatert til CMV-infeksjon [43]. Vi undersøkte ikke CMV-infeksjon hos SIgAD-pasienter, men en økning i antall TEMRA-celler hos våre pasienter kan være relatert til kroniske infeksjoner. Vi har nylig evaluert spesifikke antistoffresponser mot PPSV-23 hos pasienter med SIgAD og AT og avslørte at 18,6 % av SIgAD-pasientene og 81,3 % av AT-pasientene hadde en utilstrekkelig respons. Antall plasmablaster, marginalsone B-celler, overgangs-B-celler, naive CD8+ T-celler og prosentandelen av CD8+ T-celler, IgM-minne B-celler og byttet minne B-celler hos SIgAD-pasienter var betydelig lavere i en ikke-responderende gruppe enn respondergruppe. Selv om spesifikk antistoffmangel er hyppigere hos AT-pasienter enn SIgAD-pasienter [44]. Regulatoriske T-celler spiller en viktig rolle i produksjonen av IgA-antistoffer ved å transformere vekstfaktor-beta (TGF-) sekresjon [45–47]. Vi fant signifikant reduserte Tregs hos våre pasienter i samsvar med tidligere publiserte studier [48], selv om en studie rapporterte økt Tregs hos SIgAD-pasienter [43]. Det er også rapportert en korrelasjon mellom reduserte Treg-celler og alvorlighetsgraden av SIgAD-sykdom, spesielt hos personer med autoimmunitet, og IgA CSR-mangel hos pasienter med alvorlige kliniske manifestasjoner [30, 48]. Den lave frekvensen av Treg-celler og andre undergrupper av T-celler, inkludert T1 og T2 hos våre pasienter, kan skyldes lave tymiske emigranter forårsaket av defekt thymopoiesis og eller økt apoptose av disse cellene [49]. T-celle funksjonell analyse ved mitogen eller antigen stimulering er et viktig trekk ved diagnostisering av ulike immunforstyrrelser og immunsvikt [50]. Tradisjonelt er det én protokoll for å evaluere funksjonen til T-celler basert på opptak av [3H] tymidin etter PHA-stimulering ved bruk av radioaktive komponenter som trenger spesifikke laboratorieforhold, og den er heller ikke T-cellespesifikk da den kan stimulere flere andre immunceller som vi vil. På den annen side er den viktigste svakheten at ingen informasjon om spesifikke celleundersett kunne oppnås. CFSE-proliferasjonsanalyse er et praktisk valg for å evaluere T-celleresponser på et antigen eller mitogen hos IEI-pasienter, spesielt SIgAD for å målrette ytterligere potensielle T-celledefektanalyser hos disse pasientene [51]. Så langt er det få rapporter om T-celleresponsdefekter hos SIgAD-pasienter. Som forventet avslører ikke vår studie noen signifikant forskjell i T-cellerespons mellom pasienter og kontroller. Men når vi kategoriserte pasienter i to grupper basert på alvorlige og milde fenotyper, indikerte alvorlige pasienter redusert T-celleproliferasjon sammenlignet med milde pasienter. Dette resultatet kan være et viktig funn for å kategorisere SIgAD-pasienter for å kjenne prognosen til pasienten. Vi rapporterte nylig at T-celleproliferasjon var markert svekket sammenlignet med de friske kontrollene hos CVID-pasienter og AT-pasienter [29, 52]. Dessuten indikerer dette at SIgAD-pasienter med defekt T-celleproliferasjon bør følges videre for presis medisinsk behandling. Vi anbefaler ytterligere studier for å evaluere virkningen av T-cellefunksjon for SIgAD-pasienter basert på alvorlige og milde fenotyper i andre studier. Begrensninger av eksperimentet inkluderte det lille antallet symptomatiske pasienter, utilgjengelighet for mange av dem og e, og til og med forbedringen av noen pasienter.

Konklusjoner

Resultatene våre indikerte betydelige skader i B-cellemønstre som ligner på CVID-pasienter. Gitt at CVID og alvorlige former for SIgAD deler nesten like kliniske og immunologiske fenotyper og mest sannsynlig genetisk bakgrunn, er denne oppfatningen forutsigbar. Basert på fenotypeanalyser, observerte vi noen flere abnormiteter hos SIgAD-pasienter med alvorlige fenotyper som en høy subpopulasjon av CD21low B-celler og T-celleproliferasjonsdefekt. Følgelig manifesterer alvorlige pasienter et høyere antall luftveisinfeksjoner sammenlignet med mild SIgAD, med et stort antall personer som lider av bihulebetennelse, otitt, lungebetennelse og b, bronkiektasi, noe som tyder på ytterligere oppfølging og mer presis behandling hos disse pasientene. Fedrene til denne studien antyder at undersøkelsen av B- og T-celleundergrupper kan være nyttig for en bedre forståelse av patogenesen og prognosen til sykdommen.

Referanser

1. Aghamohammadi A, Mohammadi J, Parvaneh N, Rezaei N, Moin M, Espanol T, et al. Progresjon av selektiv IgA-mangel til vanlig variabel immunsvikt. Int Arch Allergy Immunol. 2008;147(2):87–92.

2. Bagheri Y, Sanaei R, Yazdani R, Shekarabi M, Falak R, Mohammadi J, et al. Den heterogene patogenesen av selektiv immunglobulinmangel. Int Arch Allergy Immunol. 2019;179(3):232–46.

3. Nechvatalova J, Pikulova Z, Stikarovska D, Pesak S, Vlkova M, Litzman J. B-lymfocyttsubpopulasjoner hos pasienter med selektiv IgA-mangel. J Clin Immunol. 2012;32(3):441–8.

4. Litzman J, Vlková M, Pikulová Z, Štikarovská D, Lokaj J. T- og B-lymfocyttsubpopulasjoner og aktiverings-/differensieringsmarkører hos pasienter med selektiv IgA-mangel. Clin Exp Immunol. 2007;147(2):249–54.

5. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Overgangs B-celler og TLR9-responser er defekte i selektiv IgA-mangel. Front Immunol. 2018;9:909.

6. Celiksoy M, Yildiran A. En sammenligning av B-celleundergrupper i primære immundefekter utvikler seg med antistoffmangel-matchede friske barn. Allergol Immunopathol. 2016;44(4):331–40.

7. Marasco E, Farroni C, Cascioli S, Marcellini V, Scarsella M, Giorda E, et al. B-celleaktivering med CD40L eller CpG måler funksjonen til B-celleundergrupper og identifiserer spesifikke defekter hos immundefekte pasienter. Eur J Immunol. 2017;47(1):131–43.

8. Lemarquis AL, Theodors F, Einarsdottir HK, Ludviksson BR. Kartlegging av signalveier knyttet til sIgAD avslører svekket IL-21-drevet STAT3 B-celleaktivering. Front Immunol. 2019;10:403.

9. Borte S, Pan-Hammarstrom Q, Liu C, Sack U, Borte M, Wagner U, et al. Interleukin-21 gjenoppretter immunglobulinproduksjonen ex vivo hos pasienter med vanlig variabel immunsvikt og selektiv IgA-mangel. Blod. 2009;114(19):4089–98.

10. Abolhassani H, Kiaee F, Tavakol M, Chavoshzadeh Z, Mahdaviani SA, Momen T, et al. Fjerde oppdatering om det iranske nasjonale registeret for primære immunsvikt: integrering av molekylær diagnose. J Clin Immunol. 2018;38(7):816–32.

11. Aghamohammadi A, Rezaei N, Yazdani R, Delavari S, Kutukculer N, Topyildiz E, et al. Konsensusregisteret i Midtøsten og Nord-Afrika om medfødte immunitetsfeil. J Clin Immunol. 2021;41(6):1339–51.

12. Seidel MG, Kindle G, Gathmann B, Quinti I, Buckland M, van Montfrans J, et al. European Society for Immunodeficiency (ESID) register arbeidsdefinisjoner for klinisk diagnose av medfødte immunitetsfeil. J Allergy Clin Immunol Practice. 2019;7(6):1763–70.

13. Shad TM, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, et al. Variable abnormiteter i undergrupper av T- og B-celler ved ataksi telangiectasia. J Clin Immunol. 2020:1–13.

14. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Bagheri Y, et al. Lymfocyttundergrupper i korrelasjon med en klinisk profil hos CVID-pasienter uten monogene defekter. Ekspert Rev Clin Immunol. 2021;17(9):1041–51.

15. Moeini Shad T, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, et al. Variable abnormiteter i undergrupper av T- og B-celler ved ataksi telangiectasia. J Clin Immunol. 2021;41(1):76–88.

16. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Ghanavatinejad A, Noorbakhsh F, et al. Ubalansen mellom sirkulerende T-hjelperundergrupper og regulatoriske T-celler hos pasienter med LRBA-mangel: Korrelasjon med sykdommens alvorlighetsgrad. J Cell Physiol. 2018;233(11):8767–77.

17. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Jafarnezhad-Ansariha F, Shaghaghi M, et al. Sirkulerende hjelpe-T-celleundersett og regulatoriske T-celler hos pasienter med vanlig variabel immunsvikt uten den kjente monogene sykdommen. J Investig Allergol Clin Immunol. 2018;28(3):172–81.

18. Reisi M, Azizi G, Kiaee F, Masiha F, Shirzadi R, Momen T, et al. Evaluering av lungekomplikasjoner hos pasienter med primære immunsviktforstyrrelser. Eur Ann Allergy Clin Immunol. 2017;49(3):122.

19. Cerutti A, Chen K, Chorny A. Immunoglobulinresponser ved slimhinnegrensesnittet. Annu Rev Immunol. 2011;29:273–93.

20. Bagheri Y, Babaha F, Falak R, Yazdani R, Azizi G, Sadri M, et al. IL-10 induserer TGF-sekresjon, TGF-reseptor II-oppregulering og IgA-sekresjon i B-celler. Eur Cytokine Netw. 2019;30(3):107–13.

21. Ozkan H, Atlihan F, Genel F, Targan S, Gunvar T. IgA- og/eller IgG-underklassemangel hos barn med tilbakevendende luftveisinfeksjoner og dets forhold til kronisk lungeskade. J Investig Allergol Clin Immunol. 2005;15(1):69–74.

22. Tavakol M, Jamee M, Azizi G, Sadri H, Bagheri Y, Zaki-Dizaji M, et al. Diagnostisk tilnærming til pasienter med mistanke om primær immunsvikt. Endocr Metab Immune Disord Drug Targets. 2020;20(2):157–71.

23. Resnick ES, Moshier EL, Godbold JH, Cunningham-Rundles C. Sykelighet og dødelighet i vanlig variabel immunsvikt over 4 tiår. Blod. 2012;119(7):1650–7.

24. Yazdani R, Abolhassani H, Asgardoon M, Shaghaghi M, Modaresi M, Azizi G, et al. Infeksiøse og ikke-smittsomme lungekomplikasjoner hos pasienter med primære immunsviktforstyrrelser. J Investig Allergol Clin Immunol. 2017;27(4):213–24.

25. Ahmadi M, Nouri M, Babaloo Z, Farzadi L, Ghasemzadeh A, Hamdi K, et al. Intravenøs immunglobulin (IVIG) behandling modulerer perifert blod Th17 og regulatoriske T-celler hos pasienter med tilbakevendende abort: en ikke-randomisert, åpen klinisk studie. Immunol Lett. 2017;192:12–9.

26. Yazdani R, Seify R, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Eskandari N, Golsaz-Shirazi F, et al. Sammenligning av ulike klassifikasjoner for pasienter med vanlig variabel immunsvikt (CVID) ved bruk av måling av B-celle undersett. Allergol Immunopathol (Madr). 2017;45(2):183–92.

27. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Rezaei N. Primære immunsviktsykdommer i Iran: fortid, nåtid og fremtid. Arch Iran Med. 2021. https://doi. org/10.34172/aim.2021.18.

28. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Biglari M, Abolmaali S, Moazzami K, Tabatabaeiyan M, et al. Analyse av byttet minne B-celler hos pasienter med IgA-mangel. Int Arch Allergy Immunol. 2011;156(4):462–8.

29. Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, Abolhassani H, et al. Variable abnormiteter i undergrupper av T- og B-celler ved ataksi telangiectasia. J Clin Immunol. 2020. https://doi.org/10.1007/s10875-020-00881-9.

30. Abolhassani H, Gharib B, Shahinpour S, Masoom SN, Havaei A, Mirminachi B, et al. Autoimmunitet hos pasienter med selektiv IgA-mangel. J Investig Allergol Clin Immunol. 2015;25(2):112–9.

31. Arkwright PD, Abinun M, Cant AJ. Autoimmunitet ved primære immunsviktsykdommer hos mennesker. Blod. 2002;99(8):2694–702.

32. Cerutti A, Cols M, Puga I. Marginalsone B-celler: fordeler med medfødte antistoff-produserende lymfocytter. Nat Rev Immunol. 2013;13(2):118–32.

33. Bukowska-Straková K, Kowalczyk D, Baran J, Siedlar M, Kobylarz K, Zembala M. B-cellerommet i det perifere blodet til barn med ulike typer primær humoral immunsvikt. Pediatr Res. 2009;66(1):28–34.

34. Karaman SBES, Gülez N, Genel F. Betydningen av B-celle undergrupper hos pasienter med uklassifisert hypogammaglobulinemi og assosiasjon med krav om intravenøs immunglobulinerstatning. Iran J Immunol. 2018;15(1):1–13.

35. Patuzzo G, Mazzi F, Vella A, Ortolani R, Barbieri A, Tinazzi E, et al. Immunfenotypisk analyse av B-lymfocytter hos pasienter med vanlig variabel immunsvikt: identifisering av CD23 som en nyttig markør i definisjonen av sykdommen. ISRN Immunol. 2013. https://doi.org/10. 1155/2013/512527.

36. Patuzzo G, Barbieri A, Tinazzi E, Veneri D, Argentino G, Moretta F, et al. Autoimmunitet og infeksjon ved vanlig variabel immunsvikt (CVID). Autoimmun Rev. 2016;15(9):877–82.

37. Rakhmanov M, Keller B, Gutenberger S, Foerster C, Hoenig M, Driessen G, et al. Sirkulerende CD21low B-celler med vanlig variabel immunsvikt ligner vevssøkende, medfødte B-celler. Proc Natl Acad Sci. 2009;106(32):13451–6.

38. Isnardi I, Ng YS, Menard L, Meyers G, Saadoun D, ​​Srdanovic I, et al. Komplementreseptor 2/CD21-human-naive B-celler inneholder for det meste autoreaktive ikke-responsive kloner. Blod. 2010;115(24):5026–36.

39. Sims GP, Ettinger R, Shirota Y, Yarboro CH, Illei GG, Lipsky PE. Identifikasjon og karakterisering av sirkulerende menneskelige overgangs-B-celler. Blod. 2005;105(11):4390–8.

40. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Overgangs B-celler og TLR9-responser er defekte i selektiv IgA-mangel. Front Immunol. 2018. https://doi.org/10.3389/fmmu.2018. 00909.

41. Willinger T, Freeman T, Hasegawa H, McMichael AJ, Callan MF. Molekylære signaturer skiller menneskelig sentralminne fra effektorminne CD8 T-celleundergrupper. J Immunol. 2005;175(9):5895–903.

42. Martin MD, Badovinac VP. Definere minne CD8 T-celle. Front Immunol. 2018;9:2692.

43. Nechvatalova J, Pavlik T, Litzman J, Vlkova M. Terminalt differensierte minne T-celler økes hos pasienter med vanlig variabel immunsvikt og selektiv IgA-mangel. Cent Eur J Immunol. 2017;42(3):244–51.

44. Khanmohammadi S, Shad TM, Delavari S, Shirmast P, Bagheri Y, Azizi G, et al. Evaluering av spesifikke antistoffresponser hos pasienter med selektiv IgA-mangel og ataksi telangiectasia. Endocr Metab Immune Disord Drug Targets. 2022;22(6):640–9.

45. Cazac BB, Roes J. TGF-reseptor kontrollerer B-cellerespons og induksjon av IgA in vivo. Immunitet. 2000;13(4):443–51.

46. ​​Van Vlasselaer P, Punnonen J, De Vries J. Transformerende vekstfaktor-beta styrer IgA-bytte i humane B-celler. J Immunol. 1992;148(7):2062–7.

47. Cerutti A, Rescigno M. Biologien til intestinale immunoglobulin A-responser. Immunitet. 2008;28(6):740–50.

48. Soheili H, Abolhassani H, Arandi N, Khazaei HA, Shahinpour S, Hirbod Mobarakeh A, et al. Evaluering av naturlige regulatoriske T-celler hos personer med selektiv IgA-mangel: fra senioridé til nye muligheter. Int Arch Allergy Immunol. 2013;160(2):208–14.

49. Yazdani R, Fatholahi M, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Azizi G, Hamid KM, et al. Rolle av apoptose i vanlig variabel immunsvikt og selektiv immunglobulin A-mangel. Mol Immunol. 2016;71:1–9.

50. McCusker C, Warrington R. Primær immunsvikt. All Asth Clin Immun. 2011;7(Suppl 1):S11.

51. Marits P, Wikström AC, Popadic D, Winqvist O, Thunberg S. Evaluering av T- og B-lymfocyttfunksjon i klinisk praksis ved bruk av en flowcytometri-basert proliferasjonsanalyse. Clin Immunol. 2014;153(2):332–42.

52. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Mahdaviani SA, et al. Immunfenotypisk og funksjonell analyse av lymfocyttundergrupper hos vanlige pasienter med variabel immunsvikt uten monogene defekter. Scand J Immunol. 2022;96(1):e13164.