Cistanche Tubulosa Fenylethanoid Glycosider induserer apoptose i H22 hepatocellulære karsinomceller gjennom både ytre og indre signalveier
Mar 15, 2022
For mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com
Pengfei Yuan1 et al
Abstrakt
Bakgrunn: Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight er en tradisjonell kinesisk medisin som parasitterer røttene til Tamarix-planten og har blitt brukt til å behandle mannlig impotens, sterilitet, kroppssvakhet og som et styrkende middel. Imidlertid er dens antitumoreffekt på hepatocellulært karsinom fortsatt unnvikende. Her undersøkte vi antitumoreffekten avCistanche tubulosa fenyletanoidglykosider(CTPG) på H22 hepatocellulære karsinomceller både in vitro og in vivo og dets mekanismer.
Metoder:Morfologien, levedyktigheten,apoptose, cellesyklus og mitokondriell membranpotensial (Δψm) til H22-celler ble analysert ved henholdsvis invertert mikroskopi, MTT-analyse og flowcytometri. Uttrykket og aktiveringen av proteiner iapoptosevei ble oppdaget ved Western blot. In vivo antitumoreffekten ble evaluert i en tumormusemodell etablert ved bruk av Kunming hannmus.
Resultater:CTPG-behandling undertrykte H22-cellevekst betydelig på en dose- og tidsavhengig måte, som var korrelert med den økteapoptoseog cellesyklusstans ved G0/G1- og G2/M-faser. Dessuten ble kromosomal kondensasjon observert i CTPG-behandlede H22-celler. CTPG-behandling økte Bax/Bcl-2-forholdet betydelig, reduserte Δψm og økte frigjøringen av cytokrom c. Nivåene av spaltet caspase-8 og caspase-9 i både ekstrinsiske og indre signalveier ble betydelig økt som sekvensielt aktiverte caspase-7 og-3 for å spalte PARP. Til slutt hemmet CTPG veksten av H22-celler i mus og forbedret overlevelsesraten til tumormus.
Konklusjoner: Disse resultatene antydet at CTPG undertrykte H22-cellevekst gjennom både ytre og indreapoptosestier.
Nøkkelord: Cistanche tubulosa, Fenyletanoide glykosider, Apoptose, Signalvei, Tumormusemodell
Klikk til organiske Cistanche tubulosa phenylethanoid glykosider
Bakgrunn
Leverkreft rangert som sjette for kreftforekomst og fjerde for kreftdødsfall over hele verden. Dessuten rangerte den fjerde for kreftforekomst og først for kreftdødelighet i land med lav sosiodemografisk indeks [1]. I Kina er leverkreft den tredje ledende årsaken til kreftrelatert død i 2015 [2]. Mer enn 90 prosent av primær leverkreft er hepatocellulært karsinom (HCC) i verden [3]. For tiden er leverreseksjon hovedalternativet for behandling av HCC. Imidlertid oppfylte mindre enn 30 prosent av pasientene med HCC kriteriene for kurativ leverreseksjon, og den totale overlevelsesraten for 5-år er fortsatt så lav som 35-50 prosent på grunn av den høye residivfrekvensen [4, 5] . Tilgjengeligheten av behandlingsalternativer for pasienter med middels til avansert HCC er svært begrenset. Sorafenib, et molekylært målrettet legemiddel, har blitt godkjent av FDA som førstelinjebehandling for avansert HCC. Sorafenib forlenger imidlertid bare ca. 3 måneders overlevelse og responsraten er mindre enn 4 prosent [6, 7]. Det haster med å utvikle nye legemidler eller strategier mot HCC.
Tradisjonell kinesisk medisin (TCM) alene eller kombinert med andre strategier har blitt brukt til å behandle HCC og vist de kliniske fordelene inkludert forlenget overlevelsestid, forbedret livskvalitet, reduserte bivirkninger, og så videre [8, 9]. Cistanche, en slags TCM, har ulike biologiske funksjoner, som antioksidasjon, anti-inflammasjon, anti-aldring og nevrobeskyttelse [10, 11].Fenyletanoide glykosiderhar blitt ansett som de viktigste aktive komponentene i Cistanche, som har forskjellige aktiviteter inkludert antioksidasjon, anti-inflammasjon, leverbeskyttelse og nevrobeskyttelse [12–15]. Vår gruppe har rapportert detCistanche tubulosa fenyletanoidglykosider(CTPG) kan indusereapoptosei melanom B16-F10-celler og hemmer veksten av svulster hos mus [16]. I denne studien målte vi antitumoreffekten av CTPG på HCC H22-celler både in vitro og in vivo og undersøkte dens mekanismer. Vi fant ut at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)indusertapoptosei H22-celler gjennom både ytre og indre signalveier og undertrykte veksten av H22-svulster hos mus.
Metoder
Cellelinje
Muse H22 hepatocellulære karsinomceller ble hentet fra Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, Xinjiang University (Urumqi, Xinjiang, Kina) og dyrket i RPMI 1640 medium (Gibco) supplert med 100 U/ml penicillin og 100 ug/ml streptomycin, og 10 prosent varmeinaktivert føtalt bovint serum (Gibco) ved 37 grader i en fuktet atmosfære på 5 prosent CO2.
MTT-analyse
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)ble kjøpt fra Hetian Dichen Biotech Co., Ltd. (Hetian, Xinjiang, Kina), og hovedforbindelsene av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)ble kvalifisert og kvantifisert ved høyytelses væskekromatografi [16]. Cellelevedyktighet ble evaluert av 3-(4, 5-dimetyltiazol-2-yl)-2, 5-difenyltetrazoliumbromid (MTT) (Sigma, St. Louis, MO, USA , USA) analyse. H22-celler ble inokulert i 96-brønnplater med en tetthet på 2 × 104 celler i 100 ul medium per brønn og dyrket ved 37 grader. Etter 24 timer ble cellene behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG (0,100, 200, 300 og 400 ug/ml) eller 0,3 prosent DMSO (likt det i 400 ug/ml CTPG) i henholdsvis 24, 48 og 72 timer. Etter sentrifugering ved 1000 rpm i 7 minutter ble supernatanten kastet og 100 ul MTT-løsning (5 mg/ml i PBS) ble tilsatt til hver brønn. Platene ble inkubert ved 37 grader i 4 timer og 100 ul DMSO ble tilsatt for å løse opp de dannede formazankrystallene. OD490-verdiene ble oppdaget av en 96-brønnmikroplateleser (Bio-Rad Laboratories, CA, USA). Cellelevedyktigheten ble beregnet i henhold til formelen: Cellelevedyktighet (prosent)=(ODbehandlet/ODubehandlet) x 100 prosent.
Cistanche tubulosa fenylethanoid glykosider
Påvisning av apoptose
H22-celler ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)({{0}}, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eller 0,3 prosent DMSO i 24 timer, og deretter farget med Annexin VFITC/Propidium iodide (PI)ApoptoseDeteksjonssett (YEASEN, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner. Prøver ble analysert ved flowcytometri (BD FACSCalibur, USA).
Påvisning av mitokondriell membranpotensial
H22-celler ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)(0, 200 og 400 ug/ml) i 24 timer, og deretter farget med det membranpermeable JC-1-fargestoffet (Beyotime, Kina) i 20 minutter ved 37 grader. Etter vask to ganger med JC-1-buffer, ble prøvene resuspendert med 300 ul JC-1-buffer og analysert med flowcytometri (BD FACSCalibur, USA).
Analyse av cellesyklus
H22-celler ble inokulert i 60 mm kulturskåler og behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG (0, 100,200, 300 og 400 ug/ml) eller 0,3 prosent DMSO i 24 timer . Alle celler ble samlet og vasket to ganger med PBS. Celler ble fiksert i 70 prosent iskald etanol ved -20 grader i 2 timer og vasket to ganger med PBS, deretter resuspendert i 300 ul propidiumjodid/RNase-fargebuffer (BD Biosciences). Etter 10 minutter ved romtemperatur ble prøver samlet ved flowcytometri (BD FACSCalibur, USA), og cellesyklusfordeling ble analysert med ModFit LT 3.0-programvaren.
fenyletanoidglykosideriCistanche tubulosa
Hoechst 33.258 farging
De morfologiske endringene av H22-cellekjerner ble analysert ved membranpermeabel DNA-bindende farge Hoechst 33,258-farging. H22-celler ble sådd i en 6-brønnplate i en konsentrasjon på 1 × 105 celler/brønn i et 2 ml medium. Etter 60 prosent ~ 70 prosent konfluens ble cellene behandlet med CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)(0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) i 24 timer. Cellene ble samlet og fiksert med 4 prosent iskald Paraformaldehyd ved 4 grader i 10 minutter. Etter vask med PBS ble cellene farget med Hoechst 33,258 (Beyotime, Kina) ved 4 grader i 10 minutter. Prøver ble observert med et invertert fluorescensmikroskop (Nikon Eclipse Ti-E, Japan).
Western blot
Anti-caspase-3, anti-spaltet caspase-3, Anti-Bcl-2 og anti-Bax ble kjøpt fra Beyotime Biotech Co., Ltd. (Shanghai, Kina). Anti-kaspase-7, anti-spaltet-kaspase-7, anti-kaspase-8, anti-spaltet-kaspase-8, anti-kaspase-9, anti-kaspase spaltet-kaspase-9, anti-PARP, anti-spaltet PARP, antimuse-IgG-HRP og anti-kanin-IgG-HRP ble kjøpt fra Cell Signaling Technology. Anti- -aktin ble kjøpt fra Beijing ComWin Biotech Co., Ltd. (Beijing, Kina).
H22-celler ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)({{0}}, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eller 0,3 prosent DMSO i 24 timer. Celler ble samlet og lysert med Cell Lysis Solution RIPA (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd) i 30 minutter på is. Prøver ble snurret ned (12,000 g i 15 minutter ved 4 grader) for å samle supernatantene og proteinkonsentrasjoner ble målt med BCA-sett (Thermo Fisher Scientific, USA). En lik mengde protein i hver prøve ble isolert med 12 prosent SDS-PAGE og overført til PVDF-membraner (Biosharp, Kina). Etter blokkering med TBST-buffer inneholdt 5 prosent fettfri melk, ble membraner inkubert med henholdsvis tilsvarende primære antistoffer og sekundære antistoffer konjugert til pepperrotperoksidase (HRP). Etter vasking med TBST ble målproteinene detektert med ECL-analysesett (Beyotime, Kina).
Dyr og etikkerklæring
6-8 uker gamle Kunming-hannmus ble kjøpt fra Animal Laboratory Center, Xinjiang Medical University (Urumqi, Xinjiang, Kina). Mus ble holdt i et standard temperaturkontrollert, lett-syklet dyreanlegg ved Xinjiang University. Alle dyrestudier ble utført i henhold til retningslinjene fra Animal Care and Use Committee ved Xinjiang University. Protokollen ble godkjent av komiteen for etikk av dyreforsøk ved Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering (BRGE-AE001), Xinjiang University.
Tumormusstudie
For induksjon av tumormusemodell ble Kunming-hannmus subkutant injisert med 1 × 1 06 H22-celler i 100 ul PBS i høyre flanke. Etter 3 dager ble mus tilfeldig delt inn i 3 grupper (7 mus/gruppe). Kontrollgruppen ble injisert med 0,1 ml DMSO subkutant rundt svulsten. CTPG-200- og CTPG-400-gruppene ble subkutant injisert med 200 eller 400 mg/kg CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)i 0,1 ml DMSO rundt svulsten. Mus ble behandlet annenhver dag i opptil 21 dager. Tumorstørrelser ble målt ved bruk av skyvelære opptil 25 dager og tumorvolum ble beregnet i henhold til formelen: tumorvolum (mm3)=(lengde×bredde2)/2. Etter 25 dager ble overlevelsen av tumormus overvåket hver dag til slutten av denne studien.
Statistisk analyse
Statistisk signifikans ble beregnet ved enveis variansanalyse blant behandlings- og kontrollgruppene. Alle data ble uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD). p < 0.05="" ble="" ansett="" som="" statistisk="">
Resultater
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)reduserte levedyktigheten til H22-celler in vitro
For å utforske antitumoreffekten av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)på HCC ble H22-celler behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) in vitro. Etter 24 timer ble morfologien til H22-celler observert ved bruk av et invertert mikroskop. Vi fant at morfologien til H22-celler ble dramatisk endret ved CTPG-behandling. Med økende CTPG-konsentrasjon ble cellene små og runde og celleantallet ble også sterkt redusert (fig. 1a). MTT-analyse ble brukt til å analysere levedyktigheten til H22-celler etter CTPG-behandling i henholdsvis 24, 48 og 72 timer. CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)signifikant redusert H22-cellelevedyktighet på en doseavhengig og tidsavhengig måte (fig. 1b). CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)ved 300 ug/ml oppnådde den beste inhiberingshastigheten (fig. 1c). Verdiene av IC50 for CTPG for H22-celler er 236 ug/ml ved 24 timer og 169,8 ug/ml ved 48 timer.
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)indusert apoptose i H22-celler
For å undersøke om den reduserte levedyktigheten til H22-celler er mediert av induksjon avapoptose, ble H22-celler behandlet med forskjellige konsentrasjoner av CTPG (0,100, 200, 300 og 400 ug/ml) i 24 timer og farget med PI og Annexin V. Flowcytometriresultatene viste at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)betydelig indusertapoptoseav H22-celler (inkludert tidlig og sentapoptose) på en doseavhengig måte (fig. 2a). Selv om den høye dosen av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)også betydelig økt nekrose av H22-celler, spiller nekrose en mindre rolle i hemming av H22-cellevekst på grunn av dens lavere andel (8,3 prosent) sammenlignet medapoptose(52,6 prosent ). Videre ble totale proteiner av H22-celler isolert etter CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling og uttrykk for anti-apoptotisk B-celle lymfom 2 (Bcl-2) og proapoptotisk BCL-2-assosiert X-protein (Bax) ble påvist ved Western blot. Gråtoneskanningsdata viste at uttrykksnivåene til Bax og Bcl-2 ble henholdsvis økt og redusert. Bax/Bcl-2-forholdet ble betydelig økt (fig. 2b). Disse resultatene tyder på at CTPG indusererapoptosei H22-celler.
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)induserer kromosomal kondensasjon og cellesyklusstans i H22-celler
Det har blitt rapportert at DNA-skade og cellesyklusstans indusert av legemidler kan hemme tumorcellevekst og forårsakeapoptosei tumorceller [17, 18]. For å oppdage morfologien til kjerner i H22-celler etter CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling i 24 timer, H22-celler ble farget av Hoechst 33.342 og observert ved bruk av invertert fluorescerende mikroskopi. CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandlede celler viste en doseavhengig økning av sterkt kondensert kromatin av kjerner, mens de ubehandlede cellene viste homogent fargede kjerner (fig. 3a). Cellesyklusfordeling i H22-celler ble videre analysert ved PI-farging etter CTPG-behandling i 24 timer. Som vist i fig. 3b, CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling økte andelen G0/G1-- og G2/M-faseceller betydelig og reduserte andelen S-faseceller betydelig, noe som tyder på at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)indusert G0/G1- og G2/M-fasestopp i H22-celler. Den høye dosen av CTPG økte også andelen sub G1-celler betydelig.
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)redusert mitokondriemembranpotensial og økt frigjøring av cytokrom c
mitokondrieavhengig vei spiller en viktig rolle i induksjonen avapoptose[19, 20]. Endringene i mitokondriell membranpotensial (Δψm) kan være
overvåket av JC-1-farging på grunn av JC-1-aggregat (rød fluorescens) kan desintegreres til monomer (grønn fluorescens) med reduksjon av Δψm [21]. Etter CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling i 24 timer ble H22-celler farget med JC-1-fargestoff. Strømningscytometridataene viste at den røde fluorescensen i FL-2-kanalen og den grønne fluorescensen i FL-1-kanalen ble betydelig redusert og økt ved CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling. Andelen av PE−FITC pluss-celler ble betydelig økt (fig. 4a), noe som tyder på at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)reduserte Δψm i H22-celler. Dette samsvarer med det økte Bax/Bcl-2-forholdet. Følgelig observerte vi at frigjøringen av cytokrom c ble betydelig økt ved CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling (fig. 4b). Disse resultatene indikerte at CTPG delvis kan indusereapoptosei H22-celler via en mitokondrieavhengig (intrinsic) vei.
CTPG aktiverte caspase-banen og forhindret DNA-reparasjon
Deretter aktivering av caspase indusert av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)via både ytre og indre signalveier ble analysert. Etter CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling i 24 timer, totale proteiner ble isolert fra H22-celler og nivåene av pro- og spaltede kaspaser ble påvist ved Western blot. Sammenlignet med den ubehandlede eller DMSO-kontrollen, CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling oppregulerte ikke bare nivået av spaltet caspase-8 (ekstrinsisk vei), men også nivået av spaltet caspase-9 (egenvei) (fig. 5). Sekvensielt spaltet aktivert caspase-8 og -9 nedstrøms pro-caspase-3 og -7 som ble observert i fig. 5. Aktivert caspase-3 spaltet DNAet reparere enzym av poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) for å forhindre DNA-reparasjon og akkumulere DNA-skade som observert i fig. 3a. Disse resultatene indikerte at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)indusertapoptosei H22-celler gjennom både ytre og indre signalveier.
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)undertrykker veksten av H22 HCC in vivo og forbedrer overlevelsesraten til tumormus
Til slutt antitumoreffekten av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)på HCC ble evaluert i en tumormusemodell, som ble etablert ved subkutan injeksjon av H22-celler. Etter 3 dager med H22-celleinjeksjon ble tumormus behandlet med CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)8 ganger. Kroppsvekten til mus og tumorstørrelser ble overvåket på angitte tidspunkter. Som vist i fig. 6a har kroppsvekten til mus i hver gruppe ingen signifikant forskjell, noe som tyder på at de valgte dosene av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)har ingen åpenbare bivirkninger. Interessant nok ble tumorveksten hos mus behandlet med både 200 mg/kg og 400 mg/kg CTPG signifikant hemmet (fig. 6b). Dessuten er de to dosene av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling forbedret overlevelsen av tumormus (3/7, 3/7) betydelig sammenlignet med kontrollgruppen (0/7) ved slutten av eksperimentet (fig. 6b). Vi fant også at CTPG betydelig forbedret splenocytter isolert fra Kunming hannmus på en doseavhengig måte (fig. 6c), noe som tyder på at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)har en immunstimulerende effekt.
Diskusjon
TCM har blitt brukt til å behandle ulike sykdommer inkludert kreft i en lang historie. Det er rapportert at TCM kan indusereapoptosei ulike typer tumorceller gjennom både ekstrinsiske (dødsreseptormediert) og indre (mitokondrieravhengige) signalveier for å utøve antitumoreffekter [22–25]. De to banene kan aktivere henholdsvis caspase-8 og -9 [24, 26]. Her fant vi at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)betydelig undertrykt H22-cellevekst gjennom induksjon av apoptose og cellesyklusstans. Nivåene av spaltet kaspase-8 og -9 ble betydelig oppregulert av CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)behandling, noe som tyder på at både ytre og indre signalveier var involvert i induksjonen avapoptose. Vår forrige studie viste at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)indusert apoptose i melanom B16-F10-celler ved en mitokondrieavhengig vei som økte nivået av spaltet caspase-9 men ikke caspase-8 [16]. CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)kan aktivere distinkte signalveier i forskjellige typer tumorceller.
Mitokondriell membranintegritet er tett regulert av medlemmene av BCL-2-proteinfamilien inkludert Bax og Bcl-2 [27, 28]. Forholdet mellom Bax og Bcl-2 spiller en kritisk rolle i mitokondrieavhengigeapoptosevei [29]. I H22-celler behandlet med CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider), Bax/Bcl-2-forholdet ble betydelig oppregulert, noe som kan forårsake reduksjonen av Δψm og frigjøringen av cytokrom c observert i denne studien. Følgelig ble pro-kaspase-9 spaltet og aktivert. Til slutt aktiverte initiatorene av aktiv caspase-8 og -9 bøddelen av caspase-3 for å spalte PARP for å forhindre DNA-reparasjon. Til sammen antydet disse resultatene at CTPG induserteapoptosei H22-celler gjennom både ytre og indre signalveier. I en tumormusemodell undertrykte CTPG veksten av H22 HCC betydelig og forbedret overlevelsen til tumormus betydelig. Interessant nok, CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)doseavhengig fremmet splenocytter fra Kunming-mus, noe som stemmer overens med vår tidligere studie [16]. Disse resultatene antydet at CTPG kan undertrykke veksten av H22 HCC hos mus gjennom både direkte antitumoreffekt og indirekte immunforsterkning.
Cistanche tululosaProdukter
Konklusjoner
CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)undertrykte veksten av H22-celler både in vitro og in vivo og induserteapoptosei H22-celler gjennom både ytre og indre signalveier. Disse dataene indikerte at CTPG(Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider)kan være en potensiell kandidat for behandling av HCC.
Forkortelser
Bax: BCL-2-assosiert X-protein; Bcl-2: B-celle lymfom 2; CTPG:Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosider; HCC: hepatocellulært karsinom; HRP: pepperrotperoksidase; MTT: 3-(4, 5-dimetyltiazol-2-yl)-2, 5-difenyltetrazoliumbromid; PARP: DNA-reparasjonsenzym av poly (ADP-ribose)polymerase; TCM: tradisjonell kinesisk medisin; Δψm: mitokondriell membranpotensial
Finansiering
Dette arbeidet ble støttet av High-Level Talent Introduction Project fra Xinjiang Uygur Autonomous Region til JL, Chinese National Natural Science Foundation Grant (31460241) til JL, og Doctoral Start-up Fund ved Xinjiang University (BS160261 til XW og BS150236 til YL).
Tilgjengelighet av data og materialer
Rådataene for denne studien er tilgjengelig etter rimelig forespørsel til den tilsvarende forfatteren.
Forfatteres bidrag
JL og JL designet eksperimentene. PY, JL, AA og YY utførte eksperimentene. LX, XW og YL analyserte dataene. PY, JL og JL skrev manuskriptet. Alle forfattere bidro og godkjente det endelige manuskriptet.
Etikkgodkjenning
Dyrestudien ble godkjent av komiteen for etikk av dyreforsøk ved Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, Xinjiang University
Konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer at de ikke har noen konkurrerende interesser.
Utgivers notat
Springer Nature forblir nøytral med hensyn til jurisdiksjonskrav i publiserte kart og institusjonelle tilknytninger.
Forfatterdetaljer
1Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, 666 Shengli Road, Urumqi, Xinjiang 830046, Kina.2College of Life Science, Xinjiang Normal University, 102 Xinyi Road, Urumqi 830054, Xinjiang, Kina.3Tilknyttet svulstsykehus ved Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Kina.
Cistanche tululosaProdukter
Fra: 'Cistanche tubulosa fenyletanoidglykosiderindusereapoptosei H22 hepatocellulære karsinomceller gjennom både ekstrinsiske og indre signalveier ' av Pengfei Yuan1 et al.
---Yuan et al. BMC Complementary and Alternative Medicine (2018) 18:275 https://doi.org/10.1186/s12906-018-2201-1
Referanser
1. Global Burden of Disease Cancer Collaboration, Fitzmaurice C, Allen C, Barber RM, Barregard L, Bhutta ZA, Brenner H, Dicker DJ, Chimed-Orchir O, Dandona R, et al. Global, regional og nasjonal kreftforekomst, dødelighet, tapte leveår, år levd med funksjonshemming og funksjonshemmingsjusterte leveår for 32 kreftgrupper, 1990 til 2015: en systematisk analyse for studien av den globale sykdomsbyrden. JAMA Oncol. 2017;3:524–48.
2. Chen W, Zheng R, Baade PD, Zhang S, Zeng H, Bray F, Jemal A, Yu XQ, He J. Kreftstatistikk i Kina, 2015. CA Cancer J Clin. 2016;66:115–32.3. Europeisk forening for studier av leveren, Europeisk organisasjon for forskning og behandling av kreft. EASL-EORTC retningslinjer for klinisk praksis: behandling av hepatocellulært karsinom. JHepatol. 2012;56:908–43.
4. Roayaie S, Obeidat K, Sposito C, Mariani L, Bhoori S, Pellegrinelli A, Labow D, Llovet JM, Schwartz M, Mazzaferro V. Reseksjon av hepatocellulær kreft Mindre enn eller lik 2 cm: resultater fra to vestlige sentre. Hepatologi. 2013;57:1426–35.
5. Ting CT, Cheng YY, Tsai TH. Urte-legemiddelinteraksjon mellom den tradisjonelle leverbeskyttende formuleringen og Sorafenib på hepatotoksisitet, histopatologi og farmakokinetikk hos rotter. Molekyler. 2017;22:E1034.
6. Llovet JM, Ricci S, Mazzaferro V, Hilgard P, Gane E, Blanc JF, de Oliveira AC, Santoro A, Raoul JL, Forner A, et al. Sorafenib ved avansert hepatocellulært karsinom. N Engl J Med. 2008;359:378–90.
7. Cheng AL, Kang YK, Chen Z, Tsao CJ, Qin S, Kim JS, Luo R, Feng J, Ye S, Yang TS, et al. Effekt og sikkerhet av sorafenib hos pasienter i Asia-Stillehavsregionen med avansert hepatocellulært karsinom: en fase III randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert studie. Lancet Oncol. 2009;10:25–34.
8. Shi Z, Song T, Wan Y, Xie J, Yan Y, Shi K, Du Y, Shang L. En systematisk gjennomgang og metaanalyse av tradisjonelle kinesiske insektmedisiner kombinert kjemoterapi for ikke-kirurgisk hepatocellulær karsinomterapi. Sci Rep.2017;7:4355.
9. Yang Z, Liao X, Lu Y, Xu Q, Tang B, Chen X, Yu Y. Tilleggsbehandling med tradisjonell kinesisk medisin forbedrer resultatene og reduserer uønskede hendelser i hepatocellulært karsinom: en metaanalyse av randomiserte kontrollerte studier. Evid-basert komplement Alternat Med. 2017;2017:3428253.
10. Lin LW, Hsieh MT, Tsai FH, Wang WH, Wu CR. Anti-nociceptiv og antiinflammatorisk aktivitet forårsaket av Cistanche deserticola hos gnagere. J Etnopharmacol. 2002;83:177–82.
11. Wu CR, Lin HC, Su MH. Reversering av vandige ekstrakter avCistanche tubulosafra atferdsmessige mangler i Alzheimers sykdomslignende rottemodell: relevans for amyloidavsetning og sentral nevrotransmitterfunksjon. BMC-komplement Altern Med. 2014;14:202.
12. Jiang Y, Tu PF. Analyse av kjemiske bestanddeler i Cistanche-arter. JChromatogr A. 2009;1216:1970–9.
13. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Acylerte fenylethanoid oligoglykosider med hepatobeskyttende aktivitet fra ørkenplantenCistanche tubulosa.Bioorg Med Chem. 2010; 18:1882–90.
14. Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y, Tu PF.Fenyletanoide glykosidermed anti-inflammatoriske aktiviteter fra stilkene til Cistanche deserticola dyrket i Tarim-ørkenen. Fitoterapia.2013;89:167–74.
15. Deng M, Zhao J, Tu P, Jiang Y, Li Z, Wang Y. Echinacoside gjenoppretter de SHSY5Y-nevronale cellene fra TNF-indusertapoptose. Eur J Pharmacol. 2004;505:11–8.
16. Li J, Li J, Aipire A, Gao L, Huo S, Luo J, Zhang F.Fenyletanoide glykosiderfraCistanche tubulosahemmer veksten av B16-F10-celler både in vitro og in vivo ved induksjon avapoptosevia en mitokondrieavhengig vei. J Kreft. 2016;7:1877–87.
17. Shang HS, Chang CH, Chou YR, Yeh MY, Au MK, Lu HF, Chu YL, Chou HM, Chou HC, Shih YL, et al. Curcumin forårsaker DNA-skade og påvirker assosiert proteinuttrykk i HeLa humane livmorhalskreftceller. Oncol Rep. 2016;36:2207–15.
18. Wang R, Zhang Q, Peng X, Zhou C, Zhong Y, Chen X, Qiu Y, Jin M, Gong M, Kong D. Stellettin B induserer G1-arrest,apoptose, og autofagi i humane ikke-småcellet lungekreft A549-celler via blokkerende PI3K/Akt/mTOR-vei. Sci Rep. 2016;6:27071.
19. Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Oksidativt stress: de mitokondrieavhengige og mitokondrieuavhengige banene tilapoptose. Arch Toxicol. 2013; 87:1157–80.
20. Zhang YS, Shen Q, Li J. Tradisjonell kinesisk medisin rettet mot apoptotiske mekanismer for behandling av esophageal cancer. Acta Pharmacol Sin. 2016; 37:295–302.
21. Chong ZZ, Lin SH, Li F, Maiese K. Sirtuinhemmeren nikotinamid forbedrer nevroncelleoverlevelse under akutt anoksisk skade gjennom AKT, BAD, PARP og mitokondrieassosierte "anti-apoptotiske" veier. Curr Neurovasc Res. 2005;2:271–85.
22. Hu B, Wang SS, Du Q. Tradisjonell kinesisk medisin for forebygging og behandling av hepatokarsinom: fra benk til seng. World J Hepatol. 2015;7:1209–32.
23. Hu B, An HM, Wang SS, Chen JJ, Xu L. Forebyggende og terapeutiske effekter av kinesiske urteforbindelser mot hepatocellulært karsinom. Molekyler. 2016;21:142.
24. Xu H, Zhao X, Liu X, Xu P, Zhang K, Lin X. Antitumoreffekter av tradisjonell kinesisk medisin rettet mot den cellulære apoptotiske banen. Drug Des Devel Ther. 2015;9:2735–44.
25. Li-Weber M. Målrettingapoptoseveier i kreft ved kinesisk medisin. Kreft Lett. 2013;332:304–12.
26. Xu G, Shi Y.Apoptosesignalveier og lymfocytthomeostase. Cell Res. 2007;17:759–71.
27. Tait SW, Green DR. Mitokondrier og celledød: ytre membranpermeabilisering og utover. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11:621–32.
28. Galluzzi L, Kepp O, Kroemer G. Mitokondrier: masterregulatorer for faresignalering. Nat Rev Mol Cell Biol. 2012;13:780–8.
29. Martinou JC, Youle RJ. Mitokondrier iapoptose: Bcl-2 familiemedlemmer og mitokondriell dynamikk. Dev Cell. 2011;21:92–101.
