Sammenligning av innhold av fenyletanolglykosider i to forskjellige vertscistancher Herba etter forskjellige tørkebehandlinger

De sammenlignet innholdet ifenyletanolglykosideri to forskjellige vertCistanchesHerbaetter forskjelligetørkebehandlingerGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11(Agronomy College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Kina)2(State Key Laboratory of Aridland Crop Science, Lanzhou 730070, Kina)

AbstraktFor å sammenligne innholdet av 10 fenyletanoidglykosider i forskjellige behandlede Cistanches Herba fra forskjellige verter ved bruk av ultrahøy ytelse væskekromatografi-trippel kvadrupol massespektrometri (UPLC-QQQ-MS). Den tørkede Cistanches Herba ble knust, siktet gjennom en 60-nettsikt og ekstrahert ved ultralyd med 50 % metanol. Separasjon ble utført på en Agilent Eclipse Plus C18-kolonne (2,1 mm×150 mm, 1,8 μm) ved bruk av gradienteluering med mobil fase A (0,1 % vandig maursyreløsning) og B (acetonitril). Deteksjon ble utført i dynamisk flerreaksjonsovervåkingsmodus ved bruk av en elektrospray-ioniseringskilde i UPLC-QQQ-MS.

Resultatene viste at det ble observert betydelige variasjoner i sammensetningen av10 fenyletanoidglykosiderblantCistanches Herba dyrket på forskjellige verterog utsatt for ulike tørkebehandlinger. Frysetørrede Cistanches Herba viste det høyeste innholdet av disse forbindelsene for begge vertsplanter, etterfulgt av tørking ved 80 grader. Selv om frysetørking bevarte det maksimale innholdet av 10 fenyletanoidglykosider i Cistanches Herba, var tørking ved 80 grader mer kostnadseffektivt for storskala produksjon.

Nøkkelord:ultrahøy ytelse væskekromatografi-trippel kvadrupol massespektrometri; Cistanches Herba;Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) Nutt; fenyletanoidglykosider; tørkemetode

Cistanche Raw material

KLIKK HER FOR Å FÅ NATURLIG ORGANISK CISTANCHE TUBULOSA EKSTRAKT MED 30 % ECHINACOSIDE OG 12 % ACTEOSIDE

Cistanches Herbaer den tørre kjøttfulle stilken med skjellete blader avCistanche deserticola YCMaellerCistanche tubulosa(Schenk) Wight. Den ble først sett i "Shen Nong's Materia Medica" og rangerer blant toppkarakteren. Det er en dyrebar kinesisk urtemedisin som kan brukes både som medisin og mat. Fordi den for det meste vokser i tørre områder som Indre Mongolia, Xinjiang, Gansu og Ningxia, er den også kjent som "ørken ginseng." Cistanche deserticola er søt, salt og varm og går tilbake til nyre- og tykktarmens meridianer; den har effekten avnærende nyre yang, fylle på essens og blod, fukte tarmen og avføringsmiddel osv., og brukes ofte til å behandle sykdommer som f.eks.utilstrekkelig nyre yang, mangel på essens og blod, impotens og infertilitet, ogsvakhet i muskler og bein [1 -4].Fenyletanolglykosiderer de viktigste aktive ingrediensene iCistanche deserticola, og de er også de mest rapporterte stoffene i forskningen på Cistanche deserticola [5]

Den tradisjonelle vertsplanten tilCistanche deserticolaer Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge i familien Chenopodiaceae. Imidlertid vokser Haloxylon ammodendron sakte og har lav økonomisk verdi. Haloxylon ammodendron-planter under 3 år er vanskelige å bruke til å dyrke Cistanche deserticola. For å lindre motsetningen mellom tilbud og etterspørsel i Cistanche deserticola medisinske marked, øke produksjonen av Cistanche deserticola, og oppnå storskala og standardisert dyrking av Cistanche deserticola. Vitenskapelige forskere har med suksess introdusert Atriplex canescens (Pursh) Nutt i Gansu, men hvorvidt denne trearten kan brukes som en ny vertsplante for Cistanche deserticola og om dens vekstevne er bedre enn Haloxylon ammodendron, har blitt et stort problem med utbredt bekymring [6] . Hvorvidt Atriplex truncatula fullstendig kan erstatte Haloxylon ammodendron ved dyrking av Cistanche deserticola, må fortsatt støttes av bredere, mer omfattende og dyptgående grunnleggende forskningsresultater. I mitt land, selv om omfattende forskning har blitt utført på Atriplex truncatula fra aspektene ved introduksjon, frøplantedyrking og komponentanalyse [7-10], er det svært få rapporter om inokulering av Atriplex truncatula med Cistanche deserticola. Tidligere har forskning hovedsakelig fokusert på utviklingen og bruksegenskapene til Cistanche deserticola [11-14]. Forskningen på de aktive ingrediensene til to verts Cistanche deserticola har imidlertid ikke blitt rapportert, spesielt de to vertene Cistanche deserticola etter bruk av forskjellige tørkeprosesser. Det er få studier på forskjeller i oppbevaring av aktive ingredienser.

Ultrahøy ytelse væskekromatografi-trippel kvadrupol massespektrometri (UPLC-QQQ-MS) bruker UPLC som kromatografisk separasjonssystem og trippel kvadrupol (QQQ) som analysator i serie. Det er en væskemassespektrometriteknologi som har god separasjonseffekt på multi -komponent komplekse systemer og kan raskt og nøyaktig kvantitativt analysere de komplekse komponentene i tradisjonell kinesisk medisin [15-16]. I dette eksperimentet ble UPLC-QQQ-MS-teknologi brukt til å kvantitativt analysere 10 fenyletanolglykosider, inkludert echinaceaside, verbascoside, isorbascoside og antocyanoside A, i de tørkede produktene til to vertsarter av Cistanche deserticola etter forskjellige tørkebehandlinger. Sammenligning av innholdet av disse komponentene i Cistanche deserticola under forskjellige tørkemetoder og forskjellige verter gir et teoretisk grunnlag for utvikling og presis utnyttelse av fenyletanolglykosider i Cistanche deserticola.

Cistanche extract can reduce Inflammatory hyperplasia (2)

1 Materialer og instrumenter

Haloxylon ammodendron Cistanches og Cistanches tetrapteraner ble samlet inn fra Cistanche deserticola-plantebasen i Jingtai County, Gansu-provinsen. Høstetiden var mars 2023. Professor Guo Yehong ved Gansu Agricultural University identifiserte de kjøttfulle stilkene til Cistanche deserticola med skjellete blader. Referansestoffer echinacea side (C35H46O20, CAS-nr.: 82854-37-3, renhet 98,30%), verbascoside (C29H36O15, CAS-nr.: 61276-17-3, renhet 99,35%), tuberose A (C37H48O21, CAS-nr.: 112516-05-9, renhet 99,74 %), isomuraskosid (C29H36O15, CAS-nr.: 61303-13-7, renhet 97,77 %), hageiposid (C17H24O10, CAS-nr.: 24512-63-8, renhet 99,11 %), 2 '-acetylverbascosid (C31H38O16, CAS-nummer: 94492-24-7, renhet 97,12%), salidrosid

(C14H20O7, CAS-nr.: 10338-51-9, renhet 98,43%), morurt (C15H24O9, CAS-nr.: 52949-83-4, renhet 97,64%), Cistancheside A (C36H48O20, CAS-nr.: {{15} }, renhet 93,24 %), angiosid B (C31H38O16, CAS-nummer: 112516-04-8, renhet 98,57 %), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; metanol og acetonitril er kromatografisk rene, Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; maursyre; Tianjin Comeo Chemical Reagent Co, Ltd; vann var ultrarent vann.

DESKTOP-T2G6S78\6460 ultrahøy ytelse væskekromatografi-trippelt kvadrupol tandemmassespektrometer, Agilent Company i USA; AL104 elektronisk analytisk balanse, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., Sveits; LyoQuest-85 frysetørker, Telstar, Spania.

2 Eksperimentelle metoder

2.1 Klargjøring av Cistanche deserticola prøver med forskjellige tørkeprosesser

Skjær ferske Cistanche deserticola-produkter fra forskjellige verter i 3 mm tykke skiver og bearbeid dem som følger.

(1) Soltørking: Damp skivene i 5 minutter og legg dem deretter flatt på et solrikt sted for å tørke. Sjekk endringene i fuktighetsinnholdet. Når fuktighetsinnholdet er mindre enn 10 %, legg dem bort for senere bruk.

(2) Tørking: Damp skivene i 5 minutter og legg dem deretter i en ovn på 40, 60 eller 80 grader for å tørke til fuktighetsinnholdet er mindre enn 10 % og legg dem bort for senere bruk.

(3) Vakuum frysetørking: Plasser skivene i et -80 graders kjøleskap i 2 timer før forkjøling, og legg dem deretter i en vakuum frysetørker (vakuumgrad 650Pa, frysetemperatur -55 grad ) , tørk i 48 timer, og sett bort for senere bruk.

Cistanche tubulosa (5)

2.2 Kromatografiske forhold

Agilent Eclipse Plus C18 kolonne (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm); strømningshastighet: 0,3 mL/min; injeksjonsvolum 1 μL; mobil fase: fase A er 0,1 % maursyre vandig løsning, og fase B er kromatografisk acetonitril. Elueringshastigheten til mobil fase A og B er 0~1,5 min, 10%~15% B; 1,5~2 tommer, 15%~20% B; 2~3 min, 20%~25% B; 3~4 min, 25%~30% B; 4~5 min, 30%~32% B; 5~6 min, 32%~34% B; 6~7 min, 34%~36% B; 7-8 min, 36 %-38 % B; 8~9 min, 38%~40% B; 9~9,5 min, 0%~45% B; 9,5-9,6 min, 45%-10% B; 9,6~10 min, 10 % B .

2.3 Optimaliserte massespektrometriforhold

Ionekildetype: elektronisk sprayionekilde; skannemetode: skanning av negative ioner; ionekildetemperatur: 350 grader; forstøver: 35 psi; flerreaksjonsovervåkingsmodus og dynamisk multippelreaksjonsmodus for å overvåke og analysere hver forbindelse. De optimaliserte betingelsene for massespektrometri av 10 stoffer er vist i tabell 1.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE

2.4 Klargjøring av referanseløsning og standard kurveløsning

Nøyaktig veie standard pulver avechinacoside,verbascoside, anortositt A, isolebascosid, gardeniposid, 2'-acetylverbascosid, salidrosid, leonin, avstandene A og anortositt B., tilsett 50% metanol for å lage en blandet referanseløsning som inneholder 0,2 mg per 1 ml; fortynnes med 50 % metanol i en standardserie med blandede løsninger på 40.96, 102.4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/L, trykk på "Betingelsene under 2.2" og 2.3" injiseres sekvensielt fra lav konsentrasjon til høy konsentrasjon, og deretter brukes den kvantitative programvaren (agilent massejeger) for å behandle deteksjonsresultatene ved å bruke standardkurven som passerer origo. Utfør lineær regresjon med stoffkonsentrasjonen X (ng/ml) som abscisse og ion responsverdi Y som ordinat, og beregn regresjonsligningen og korrelasjonskoeffisienten, som vist i tabell 2. Det er en god lineær sammenheng med ioneresponsverdien innenfor området.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE