Påvisning av MUC1-varianter hos pasienter som er klinisk patologisk diagnostisert med autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom

Introduksjon

Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom (ADTKD)-MUC1 er hovedsakelig forårsaket av rammeskifte-mutasjoner på grunn av en enkeltbase-innsetting i variabel nummer tandem-repetisjon (VNTR)-regionen i MUC1. På grunn av kompleksiteten til varianten hotspot, er identifisering ved hjelp av kortlest sekvensere (SRS) utfordrende. Selv om nyere studier har avslørt nytten av long-read sequencers (LRS), er prevalensen av MUC1-varianter hos pasienter med klinisk mistenkt ADTKD fortsatt ukjent. Vi hadde som mål å avklare denne utbredelsen og de genetiske egenskapene og kliniske manifestasjonene til ADTKD-MUC1 i en japansk populasjon ved å bruke en SRS og en LRS.

Metoder

Fra januar 2015 til desember 2019 ble genetisk analyse utført ved bruk av en SRS hos 48 pasienter med klinisk mistenkt ADTKD. Ytterligere analyser ble utført ved bruk av en LRS hos pasienter med negative SRS-resultater.

Resultater

Kortleste sekvenseringsresultater avslørte MUC1-varianter hos 1 pasient som hadde en cytosininnsetting i den andre gjentatte enheten i VNTR-regionen; dypere VNTR-regioner kunne imidlertid ikke leses av SRS. Derfor utførte vi langlest sekvenseringsanalyse av 39 tilfeller og oppdaget MUC1 VNTR-varianter hos 8 pasienter (totalt 9 pasienter fra ubeslektede familier). Med inkludering av familiepåvirkede pasienter (n ¼ 31), var medianalderen ved utvikling av sluttstadium nyresykdom (ESKD) 45 år (95 prosent KI: 40–40 år).

Konklusjon

I Japan var deteksjonsraten for MUC1-varianter hos pasienter med klinisk mistenkt ADTKD 18,8 prosent. Mer enn 20 prosent av pasientene med negative SRS-resultater hadde MUC1-varianter påvist av en LRS.

Nøkkelord

ADTKD; ADTKD-MUC1; langlest sekvensering; MCKD; NGS; SMRT-sekvensering.

Klikk her for å fåCistanche-fordeler

ADTKD er en gruppe av arvelige nyresykdommer karakterisert ved progressiv tubulointerstitiell fibrose og tubulær atrofi som fører til ESKD. ADTKD kan deles inn i undertyper basert på de underliggende forårsakende genetiske defektene, inkludert abnormiteter i UMOD, MUC1, REN, HNF1B og SEC61A1. Gitt uspesifisiteten til de vanlige samlende egenskapene til ADTKD, inkludert milde urinsedimentavvik og mild til negativ proteinuri, antas ADTKD å være svært underdiagnostisert.

MUC1 er et transmembrant glykoprotein sterkt uttrykt i den apikale membranen til den tykke stigende delen av Henles løkke, distale innviklede tubuli og samlekanaler. Den vanligste genetiske årsaken til ADTKD-MUC1 er en rammeskiftvariant forårsaket av innsetting av en enkelt base i VNTR-polymorfismen til MUC1 (OMIM 158340; 1q22) i ekson 2.5. Denne mutasjonen avslutter syntesen av MUC1-proteinet etter VNTR-regionen og skaper et nytt forkortet protein (MUC1fs) som mangler et C-terminalt domene (figur 1a). MUC1fs akkumuleres deretter i cytoplasmaet på grunn av unormal intracellulær proteintransport. VNTR-regionen viser betydelig interindividuell variasjon fordi den er sammensatt av 60-nukleotidenheter som gjentas 20 til 125 ganger, hvor hver allel har unike repetisjoner (figur 1b). Derfor har det å oppdage genvarianter ved bruk av SRS-er vært utfordrende på grunn av kompleksiteten til variant-hotspot.

Tidligere studier har brukt alternative metoder, inkludert massespektrometri og probeforlengelse som sier, for å oppdage årsaksvarianter; disse metodene er imidlertid teknisk krevende. Nyere studier har funnet nytten av LRS-er, som bruker en enkelt molekyl sanntids (SMRT) sekvenseringsmetode for å identifisere MUC1 VNTR-varianter. Likevel har MUC1 VNTR-varianter ennå ikke blitt karakterisert i den japanske befolkningen. I tillegg forblir prevalensen av MUC1-varianter hos pasienter med klinisk mistenkt ADTKD ukjent. Derfor var målet med denne studien å avklare denne prevalensen, inkludert genetiske egenskaper og kliniske manifestasjoner, av ADTKD-MUC1 i den japanske befolkningen. Her diagnostiserte vi 9 pasienter med ADTKD-MUC1 som hadde VNTR-varianter påvist ved bruk av enten en SRS (n ¼ 1) eller en LRS (n ¼ 8) blant 48 klinisk mistenkte ADTKD-tilfeller.

Metoder

1. Deltakere

Mellom januar 2015 og desember 2019 utførte vi genetisk analyse hos 48 pasienter med klinisk mistenkt ADTKD. Deltakerne hadde nedsatt nyrefunksjon av ukjente årsaker, med milde til negative urinavvik. Pasienter ble klinisk diagnostisert med ADTKD hvis de hadde en positiv familiehistorie med kronisk nyresykdom og/eller hyperurikemi eller hvis patologiske funn på nyrebiopsi avslørte enten medullær cystisk nyresykdom (den forrige betegnelsen for ADTKD-MUC1 og ADTKD-UMOD), tubulointerstitiell nefritt eller kronisk interstitiell skade. Vi ekskluderte pasienter med nyremisdannelser og/eller ekstrarenale symptomer. DNA-prøver ble først analysert ved bruk av en SRS. Ytterligere undersøkelser ble deretter utført på pasienter med negative SRS-resultater (n ¼ 39) ved bruk av en LRS. Alle prøver og klinisk informasjon ble hentet fra japanske henvisningssykehus. Genetiske analyser ble utført etter å ha innhentet skriftlig informert samtykke fra pasienter og/eller deres foresatte dersom pasienten var mindreårig. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board ved Kobe University School of Medicine (godkjenningsnummer 301).

2. Kortlest sekvensering

Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes using the QuickGene Mini 80 system (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Tokyo, Japan). For targeted sequencing using an SRS, samples were prepared using HaloPlex (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) according to the manufacturer's instructions. Paired-end sequencing was performed on the MiSeq platform (Illumina, San Diego, CA). HaloPlex was used for targeted sequencing of 128 genes (version 2, Supplementary Table S1), 172 genes (version 4, Supplementary Table S2), 159 genes (version 5, Supplementary Table S3), 164 genes (version 6, Supplementary Table S4), 181 genes (version 7, Supplementary Table S5), and 183 genes (version 8, Supplementary Table S6) associated with congenital anomalies of the kidney and urinary tract, cystic kidneys, ADTKD, and nephronophthisis. The HaloPlex version used for each patient is found in Supplementary Table S7. Reads were aligned to the reference human genome (GRCh37/Hg19) using SureCall 4.0, which is a desktop application combining algorithms for end-to-end next-generation sequencing data analysis from alignment to categorization of mutations (Agilent Technologies). We excluded called variants with minor allele frequencies >1 prosent i offentlig tilgjengelige databaser for menneskelige variasjoner, for eksempel følgende: Human Genetic Variation Database (http://www.genome.med.kyoto-u.ac.jp/SnpDB/), gnomAD (https://gnomad.broadinstitute) .org/), og 1000 Genomes Project (1000G) databaser (https://www. internationalgenome.org/data). Kandidatvarianter ble valgt ved å bruke programvaren for beregningsprediksjon, SIFT (https://sift.bii.astar.edu.sg/), PolyPhen-2 (http://genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) , Mutation Taster (http://www.mutationtaster.org/) og CADD (https://cadd.gs.washington.edu/snv), og deretter klassifisert som patogen, sannsynlig patogen eller usikker betydning, ifølge retningslinjer fra American College of Medical Genetics and Genomics.9

3. Bibliotekforberedelse og langlest sekvensering (SMRT-sekvensering)

Amplikonene ble slått sammen i ekvimolare forhold og forberedt for SMRTbell-sekvensbiblioteker ved bruk av et SMRTbell Express Template Prep Kit 2.0 (Pacific Biosciences, Menlo Park, CA) i henhold til produsentens instruksjoner. Deretter ble en sekvensmal konstruert ved å feste sekvensprimerversjon 2 og DNA-polymerase til adapterne i begge ender av sekvensbiblioteket, og malen ble lastet på en SMRT-celle. SMRT-sekvensering ble utført ved å bruke PacBio Sequel II System med Sequel II Sequencing Kit 2.0. De sekvenserte dataene ble analysert med SMRT Link versjon 9.0.0, og svært nøyaktige konsensussekvenser ble oppnådd. Deretter ble sekvensclustering utført ved bruk av analyseverktøyet "pbaa", som er egnet for å analysere repeterende sekvenser. Bibliotekforberedelse, sekvensering og bioinformatikkanalyser av SMRT-sekvensering ble utført av Takara Bio (Kusatsu, Shiga, Japan). Nukleotidsekvensen, antall avlesninger og allelfrekvens ble kompilert i en Excel-fil for hver pasient (data ikke avslørt). For hver identifisert sekvens rekonstruerte vi manuelt sekvensen hver 60. base per linje, som beskrevet av Kirby et al.5 (Figur 1b). På grunn av potensielle PCR-feil i den komplekse VNTR-sekvensen, ble flere sekvenser oppdaget i hver pasient. De riktige sekvensene ble identifisert ved å sammenligne LRS-resultatene med elektroferogrammer av amplikonene oppnådd ved bruk av en bioanalyzer (tilleggstabell S8). I de fleste tilfeller ble de 2 øverste sekvensene med det høyeste antallet avlesninger bestemt til å være korrekte. I noen tilfeller ble imidlertid sekvenser med det tredje eller lavere vanligste antallet avlesninger bestemt til å være korrekte hvis størrelsene deres ble matchet med elektroforesetoppene som ble oppdaget av bioanalyzeren (SC449, SC511, SC534, SC560, SC566, SC593, SC616, og SC639) på grunn av ineffektiviteten til PCR-amplifisering av lange alleler når størrelsen på VNTR-regionen til de 2 allelene var signifikant forskjellig.

Cistanche-pulver og Cistanche-ekstrakt

Diskusjon

Så vidt vi vet, er dette den første rapporten om en genetisk analyse av MUC1 VNTR-varianter oppdaget ved bruk av en kombinasjon av SRS og LRS i en japansk kohort. Vi identifiserte MUC1 VNTR-mutasjoner hos 9 pasienter fra ubeslektede familier. Videre var deteksjonsraten for MUC1-varianter blant pasienter med klinisk mistenkt ADTKD 18,8 prosent.

På grunn av kompleksiteten til variant-hotspot, er det utfordrende å oppdage MUC1 VNTR-varianter ved rutinemessig genetisk analyse ved bruk av en SRS, og andre metoder, som snapshot-metoden eller massespektrometri, er vanligvis påkrevd. Dessverre er disse metodene teknisk krevende og utføres kun ved noen få laboratorier over hele verden.5,6 Wenzel et al.7 gjennomførte SMRT-sekvensering og bekreftet alle diagnoser hos europeiske deltakere fra 9 familier med tidligere påviste MUC1 VNTR-varianter ved bruk av snapshot-metoden. Wang et al.8 avslørte også nytten av SMRT-sekvensering for å påvise MUC1 VNTR-mutasjoner i en stor kinesisk familie. Ikke desto mindre, på grunn av studiedesignet, bestemte disse 2 studiene ikke deteksjonsraten for MUC1 VNTR-varianter hos pasienter med klinisk mistenkt ADTKD. I denne studien avklarte vi at den diagnostiske frekvensen av MUC1-varianter hos pasienter med klinisk mistenkt ADTKD var 18,8 prosent, noe som kan lette mer nøyaktige sannsynligheter, spesielt under genetisk veiledning.

Data om prevalensen av ADTKD-MUC1 er begrenset, selv om tidligere studier har avslørt en prevalens på 0,7 til 4 per million i USA og Irland.3,13 En studie i England avslørte en estimert prevalens av ADTKD -UMOD på 9 per million, noe som tyder på at ADTKD-UMOD er ​​den hyppigste ikke-polycystiske nyresykdommen.14 I vår studie hadde 9 pasienter MUC1-varianter, mens 6 hadde UMOD-varianter, noe som tyder på at ADTKD-MUC1 kan være en av de vanligste sykdomssubtypene av ADTKD.

Til tross for den strukturelle kompleksiteten til MUC1 VNTR-regionen, kunne SRS oppdage varianter hos 3 pasienter, som alle hadde samme mutasjon: et cytosin satt inn i 7 påfølgende cytosiner på slutten av 60-nukleotidenheten i den andre gjentagelsen av VNTR. Det ble antatt at varianter i den grunne delen av MUC1 VNTR (inntil den tredje repetisjonen av VNTR) ville være detekterbare selv om DNA var fragmentert (100–200 basepar per avlesning) som en del av prøveforberedelsen for SRS-analyse. Yamamoto et al.15 identifiserte en annen rammeskiftmutasjon lokalisert før MUC1 VNTR-regionen ved å bruke en SRS (hele eksomsekvensen). Denne mutasjonen genererer også et unormalt avkortet protein på samme måte som mutasjonen posisjonert i VNTR.15 Disse resultatene antyder at SRS-analyse kan være nyttig for å påvise varianter plassert før eller innenfor den grunne regionen av VNTR.

I vår studie hadde 7 av de 9 pasientene med MUC1 VNTR-varianter den samme 60-nukleotidenhetssekvensen som inneholdt det innsatte cytosinet (tabell 2). I tidligere studier hvor det ble utført langlest sekvenseringsgenetisk analyse for MUC1 VNTR, ble samme variant påvist i 9 familier i en europeisk kohort7 og en stor kinesisk familie.8 I tillegg er denne mutasjonen påvist ved hjelp av snapshot-metoden og ble definert som "27dupC."12 Olinger et al.16 rapporterte at prevalensen av 27dupC-varianten var 93,5 prosent i 2 registre av ADTKD i Europa og USA. Ved disse funnene indikerte dataene våre at 27dupC-varianten var den vanligste MUC1-mutasjonen i en japansk kohort.

Cistanche kosttilskudd

Antall VNTR-repetisjoner er rapportert å være 20 til 253; I vår studie varierte imidlertid VNTR-repetisjonstallet fra 30 til 82, med 80 prosent av allelene med 30 til 36 repetisjoner. En tidligere studie i Europa rapporterte at prosentandelen av alleler med 30 til 36 gjentakelser var 39 prosent, noe som kan være underbygget av den etniske homogeniteten til den japanske befolkningen. Denne studien viste at medianalderen ved utvikling av ESKD var 45 år (95 prosent KI: 40–50 år) hos pasienter med ADTKD-MUC1, inkludert familiært berørte pasienter i en japansk kohort (9 familier, n ¼ 31). En tidligere studie evaluerte 147 individer, inkludert pasienter med MUC1-mutasjoner og deres berørte familiemedlemmer, og avslørte at gjennomsnittsalderen ved utvikling av ESKD var 44,9 15,4 år.17 Derimot indikerte nyere forskning med forskjellige kohorter at mediantiden for nyreoverlevelse i 104 pasienter med ADTKD-MUC1 var 36 år (interkvartilt område: 30–46 år), noe som kan forklares med utelukkelse av berørte familiemedlemmer som ikke gjennomgikk genetisk analyse.16 I tillegg er interfamiliære og intrafamiliære variasjoner rapportert hos pasienter med MUC1-varianter,8,17,18 selv om eksistensen av modifiseringsgener eller andre faktorer forblir ukjent. I samme studieperiode oppdaget vi også mutasjoner i HNF1B, et forårsakende gen for ADTKD, hos 19 pasienter. Ikke desto mindre ble pasienter med klinisk mistenkte HNF1B-mutasjoner ekskludert fra vår studie ved registrering, fordi de fleste av disse pasientene var klinisk å skille fra de med ADTKD-MUC1 på grunn av morfologiske abnormiteter i nyrenes urinveier og/eller en autosomal-dominant familiær historie med tidlig innsettende diabetes og/eller hypomagnesemi, og vi har tidligere rapportert om denne pasientpopulasjonen.19 Konsensusrapport om forbedrede globale utfall og nylig gjennomgang av ADTKD antydet faktisk at begrepet ADTKD-HNF1B bare skulle være forbeholdt de tilfellene i hvilken tubulointerstitiell fibrose i nyrene er den ledende manifestasjonen fordi bare noen få tilfeller har tubulointerstitiell sykdom.1,20 Barneanemi, mild hypotensjon og mild hyperkalemi antas å være spesifikke trekk ved ADTKD-REN. Ikke desto mindre rapporterte en nylig internasjonal kohortstudie av kliniske karakteristikker av 111 ADTKD-REN-pasienter at omtrent 70 prosent av pasientene oppsøkte medisinske institusjoner for kronisk nyresykdom eller gikt.21 Ifølge denne rapporten var barneanemi tilstede hos 75,8 prosent av pasientene. pasienter, men alvorlighetsgraden var relativt mild; gjennomsnittlige hemoglobinnivåer var 9,6, 10,1 og 10,5 g/dl for aldre<10 years, 10 to <15 years, and 15 to <20 years, respectively.21 Although hypotension was not reported in the article, the severity of hyperkalemia was mild and the mean serum potassium level in patients who were not taking fludrocortisone was 4.8 mEq/l.21 Childhood anemia, hypotension, or hyperkalemia may often be overlooked, and they are not always specific to ADRKD-REN; thus, we did not exclude participants with these findings. ADTKD-SEC61A1 is much rare than other ADTKD subtypes, with 6 families reported as of date.22 Patients harboring SEC61A1 mutation present with specific features, such as intrauterine growth retardation, cleft palate, congenital anemia, neutropenia, and immunodeficiency.3,22 Although the clinical manifestations of ADTKD-REN have not been completely clarified owing to the small number of reported cases, patients presenting with these specific features can be clearly distinguished from those with ADTKD-MUC1.

Cistanche tubulosa

Nyere studier på de molekylære og cellulære mekanismene til ADTKD-MUC1 har avslørt at denne tilstanden er en giftig proteinopati forårsaket av intracellulær akkumulering av feilfoldet MUC1-protein.11,23 Dvela-Levitt et al.24 rapporterte bruken av et lite molekyl, BRD4780 , for å omdirigere den sekretoriske veien til lysosomer, ble avslørende MUC1fs eliminert i knock-in mus og pasientorganoider og fremhevet det terapeutiske potensialet til BRD4780. Følgelig kan en nøyaktig diagnose av MUC1-varianter være avgjørende for utviklingen av effektive terapeutiske midler. Vår studie hadde flere begrensninger. For det første var alle studiedeltakerne våre japanske, og utvalgsstørrelsen var liten på grunn av den korte studievarigheten. Gitt den retrospektive karakteren til denne studien, var vi heller ikke i stand til å få longitudinell klinisk informasjon, for eksempel nyreprognose. For det andre ble enkeltbaseinnsettinger observert selv i alleler uten mutasjoner. På grunn av høy feilrate var det utfordrende å oppnå høykvalitetsmontering for å oppdage enkeltnukleotidvarianter eller indeler ved bruk av en LRS. Det var nødvendig å kombinere sekvenseringsteknologier for å oppdage alle de ulike typene genetiske variasjoner, noe som øker kostnadene og kompleksiteten til prosjekter. Dermed utviklet PacBio et nytt sekvenseringssystem, kalt sirkulær konsensussekvensering. Sirkulær konsensussekvensering produserer høykvalitetsavlesninger med 99,8 prosent nøyaktighet og en gjennomsnittlig lengde på 13,5 kilobase, noe som drastisk reduserer sekvenseringsfeilraten.25 Denne sekvenseringsmetoden ble også brukt i vår studie. Derfor, med tanke på forbedringer i sekvenseringsnøyaktigheten, var enkeltbaseinnsettinger muligens forårsaket av PCR-feil. Selv om KOD Hot Start DNA-polymerase ble optimalisert for amplifikasjon av de vanskeligste målene, kan 26 andre DNA-polymeraser, hvis troverdighet er høyere enn KOD (f.eks. Phusion), bidra til å redusere PCR-feilraten.27 Nylig studier har funnet en amplifikasjonsfri protokoll for målrettet berikelse ved bruk av de grupperte, regelmessige, korte palindromiske repetisjonene/Cas9-systemet.28,29 Denne nye metoden vil sannsynligvis gi bedre resultater. For det tredje har vi ikke validert en alternativ metode som kan lette en diagnose, for eksempel immunfarging av nyreprøver eller urinavledede celler. Kirby et al., 5 som først rapporterte årsaksmutasjonen for ADTKD-MUC1, utførte en immunhistokjemisk analyse av nyreprøver fra pasienter med MUC1-mutasjoner. De rapporterte at selv om immunfarging i normale kontroller resulterte i ikke-spesifikk farging, viste pasienter med MUC1-mutasjoner et spesifikt intracellulært fargemønster i løkken til Henle, distale tubuli og samlekanaler.5 Lignende immunfargingsanalyser av det mutante MUC1-proteinet er rapportert. 11,13,18,30 Yamamoto et al.15 påviste mutant MUC1-protein i urineksosomer. Selv om de kliniske manifestasjonene av ADTKD-MUC1 er uspesifikke, kan disse ikke-genetiske analysene støtte den kliniske diagnosen. Dermed er det nødvendig å verifisere nytten av disse ikke-genetiske analysene i forbindelse med resultatene av vår studie. Avslutningsvis avslører studien vår at genetisk kombinasjonsanalyse med SRS og LRS er nyttig for å oppdage MUC1 VNTR-varianter i en japansk kohort og at forekomsten av ADTKD-MUC1 kan være høy i denne populasjonen. Kombinasjonsgenetisk analyse ved bruk av SRS og LRS vil sannsynligvis forbedre diagnosehastigheten for ADTKD-MUC1 og kan bidra til utvikling av optimale behandlingsmetoder.

REFERANSER

1. Eckardt KU, Alper SL, Antignac C, et al. Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom: diagnose, klassifisering og behandling - en konsensusrapport fra KDIGO. Nyre Int. 2015;88:676–683. https://doi.org/10. 1038/ki.2015.28

2. Bolar NA, Golzio C, Zivná M, et al. Heterozygote tap av funksjon SEC61A1-mutasjoner forårsaker autosomal-dominant tubulo-interstitiell og glomerulocystisk nyresykdom med anemi. Am J Hum Genet. 2016;99:174–187. https://doi.org/ 10.1016/j.ajhg.2016.05.028

3. Devuyst O, Olinger E, Weber S, et al. Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom. Nat Rev Dis Primere. 2019;5: 60. https://doi.org/10.1038/s41572-019-0109-9

4. Patton S, Gendler SJ, Spicer AP. Epitelmucin, MUC1, av melk, brystkjertel og annet vev. Biochim Biophys Acta. 1995;1241:407-423. https://doi.org/10.1016/0304-4157 (95)00014-3

5. Kirby A, Gnirke A, Jaffe DB, et al. Mutasjoner som forårsaker medullær cystisk nyresykdom type 1 ligger i en stor VNTR i MUC1 savnet av massiv parallell sekvensering. Nat Genet. 2013;45: 299–303. https://doi.org/10.1038/ng.2543

6. Ekici AB, Hackenbeck T, Morinière V, et al. Nyrefibrose er det vanlige trekk ved autosomal dominante tubulointerstitielle nyresykdommer forårsaket av mutasjoner i mucin 1 eller uromodulin. Nyre Int. 2014;86:589–599. https://doi.org/10.1038/ki. 2014.72

7. Wenzel A, Altmueller J, Ekici AB, et al. Enkeltmolekyls sanntidssekvensering i ADTKD-MUC1 tillater fullstendig montering av VNTR og nøyaktig posisjonering av kausative mutasjoner. Sci Rep. 2018;8:4170. https://doi.org/10.1038/s41598-018-22428-0

8. Wang GQ, Rui HL, Dong HR, et al. SMRT-sekvensering viste seg å være en effektiv metode for ADTKD-MUC1-diagnose gjennom oppfølgingsanalyse av en kinesisk familie. Sci Rep. 2020;10:8616. https://doi.org/10.1038/s41598-020-65491-2

9. Richards S, Aziz N, Bale S, et al. Standarder og retningslinjer for tolkning av sekvensvarianter: en felles konsensusanbefaling fra American College of Medical Genetics and Genomics og Association for Molecular Pathology. Genet Med. 2015;17:405–424. https://doi.org/10.1038/ gim.2015.30

10. Kanda Y. Undersøkelse av den fritt tilgjengelige lett-å-bruke programvaren "EZR" for medisinsk statistikk. Beinmargstransplantasjon. 2013;48:452–458. https://doi.org/10.1038/bmt.2012.244

11. Robinson JT, Thorvaldsdóttir H, Winckler W, et al. Integrativ genomikkseer. Nat Biotechnol. 2011;29:24–26. https://doi. org/10.1038/nbt.1754

12. Zivná M, Kidd K, P ristoupilová A, et al. Ikke-invasiv immunhistokjemisk diagnose og nye MUC1-mutasjoner som forårsaker autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom [publisert korreksjon vises i J Am Soc Nephrol. 2020;31:892]. J Am Soc Nephrol. 2018;29:2418–2431. https://doi.org/ 10.1681/ASN.2018020180

13. Cormican S, Connaughton DM, Kennedy C, et al. Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom (ADTKD) i Irland. Ren Fail. 2019;41:832–841. https://doi.org/10.1080/ 0886022X.2019.1655452

14. Gast C, Marinaki A, Arenas-Hernandez M, et al. Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom - UMOD er ​​den hyppigste ikke-polycystiske genetiske nyresykdommen. BMC Nephrol. 2018;19:301. https://doi.org/10.1186/s12882-018- 1107-y

15. Yamamoto S, Kaimori JY, Yoshimura T, et al. Analyse av en ADTKD-familie med en ny rammeskiftmutasjon i MUC1 avslører karakteristiske trekk ved mutant MUC1-protein. Nephrol-skivetransplantasjon. 2017;32:2010–2017. https://doi.org/10. 1093/ndt/gfx083

16. Olinger E, Hofmann P, Kidd K, et al. Kliniske og genetiske spektre av autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom på grunn av mutasjoner i UMOD og MUC1. Nyre Int. 2020;98:717–731. https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.04.038

17. Bleyer AJ, Kmoch S, Antignac C, et al. Variabel klinisk presentasjon av en MUC1-mutasjon som forårsaker medullær cystisk nyresykdom type 1. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:527– 535. https://doi.org/10.2215/CJN.06380613

18. Ayasreh N, Bullich G, Miquel R, et al. Autosomal dominant tubulointerstitiell nyresykdom: klinisk presentasjon av pasienter med ADTKD-UMOD og ADTKD-MUC1. Am J Kidney Dis. 2018;72:411–418. https://doi.org/10.1053/j.ajkd.2018.03. 019

Eri Okada1,2 , Naoya Morisada1,3 , Tomoko Horinouchi1 , Hideki Fujii4 , Takayuki Tsuji5 , Masayoshi Miura6 , Hideyuki Katori7 , Masashi Kitagawa8 , Kunio Morozumi9 , Takanobu Toriyama10, Yushi1ki Naiiday , Atsushi Kondo1 , Yuya Aoto1 , Shinya Ishiko1 , Rini Rossanti1 , Nana Sakakibara1 , China Nagano1 , Tomohiko Yamamura1 , Shingo Ishimori1 , Joichi Usui2 , Kunihiro Yamagata2 , Kazumoto Iijima13,14, Toshiyuki Imasawa15 og Kandai Nozu1