Effekt av Ramipril på nyre, lunge og hjerte ACE2 i en diabetisk musemodell
Mar 28, 2022
ABSTRAKTBakgrunn: Alvorlig akutt respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) er ansvarlig for den nåværende koronavirussykdommen 2019 (COVID-19). Hovedorganet som påvirkes av denne infeksjonen er lungen og viruset bruker det angiotensin-konverterende enzymet 2 (ACE2) som reseptor for å komme inn i målcellene. I denne sammenhengen ble det reist en kontrovers angående bruken av renin-angiotensin-system (RAAS)-blokkere, siden disse legemidlene kan øke ACE2-ekspresjonen i enkelte vev og potensielt øke risikoen for SARS-CoV-2-infeksjon. Dette er spesielt bekymringsfullt hos diabetespasienter siden diabetes er en risikofaktor for covid-19. Metoder: 12-uke gamle diabetiske mus (db/db) ble behandlet med ramipril eller vehikelkontroll i 8 uker. Ikke-diabetiske db/m mus ble inkludert som kontroller. ACE2 uttrykk og aktivitet ble studert i lungene,nyrerog hjertene til disse dyrene. Resultater:NyreACE2-aktiviteten ble økt hos db/db-musene sammenlignet med db/m (143,2 prosent ± 23 prosent vs 100 prosent ± 22,3 prosent, p=0.004), mens ramipril ikke hadde noen signifikant effekt. I lungen ble det ikke funnet forskjeller i ACE2 ved sammenligning av db/db mus med db/m og ramipril hadde heller ingen signifikant effekt. I hjertet reduserte diabetes ACE2-aktivitet (83 prosent ± 16,8 prosent, vs 100 prosent ± 23,1 prosent p=0.02), og ramipril økte ACE2 signifikant (83 prosent ± 16,8 prosent vs. 98,2 prosent ± 15 prosent, p.=0.04). Konklusjon: I en musemodell av type 2-diabetes hadde ramipril ingen signifikant effekt på ACE2-aktivitet i noen avnyreeller i lungene. Derfor er det lite sannsynlig at RAAS-blokkere eller i det minste angiotensin-konverterende enzymhemmere øker risikoen for SARS-CoV-2-infeksjon ved å øke ACE2.
Nøkkelord:COVID-19; Diabetes; RAAS blokade; Lunge; nyresykdommer; nyre
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE/NYRESYKDOM
IntroduksjonPandemien forårsaket av alvorlig akutt respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) som startet i desember 2019 i Wuhan, Kina, har ført til en verdensomspennende sanitærkrise. Lungen er det viktigste berørte organet ved koronavirussykdom-19 (COVID-19). SARS-CoV-2 bruker det transmembrane proteinet angiotensin-konverterende enzym 2 (ACE2) som en av reseptorene for å gå inn i målcellene (Hoffmann et al., 2020), en funksjon som deles med SARS-CoV (viruset som forårsaket SARS-epidemien i 2002) (Li et al., 2003). ACE2 er en karboksypeptidase som transformerer angiotensin-I (Ang-I) og angiotensin-II (Ang-II) til angiotensin-1-9 (Ang-1-9) og angiotensin-1-7 (Ang{{23 }}), henholdsvis. Dette enzymet er en del av den alternative veien til renin-angiotensin-aldosteron-systemet (RAAS). Dens aktivering har vasodilatoreffekter i seg selv og regulerer på en negativ måte den klassiske armen til RAAS (vasokonstriktor) (Obukhov et al., 2020; Romero et al., 2015). ACE2 er mye uttrykt i de proksimale tubulære cellene inyre(Lely et al., 2004). I mindre grad kommer det også til uttrykk i lungen (i pneumocytter type 2) (Hamming et al., 2004; Serfozo et al., 2020) og hjertet (i kardiomyocytter) (Oudit et al., 2009). Innsikten som ble gitt av den første SARS-CoV-pandemien i 2002, avslørte at SARS-CoV-infeksjon induserte en reduksjon i ACE2-ekspresjon i lungene. Ved akutt lungeskade har ACE2-mangel vært relatert til økt vevsskade, noe som kan tilskrives en overaktivering av vasokonstriktorarmen til RAAS (ACE/Ang-II/Angiotensin-II type 1 reseptorakse) (Kuba et al. , 2006). Derfor ser RAAS ut til å spille en viktig rolle i alvorlighetsgraden av lungeskade relatert til SARS-CoV-2-infeksjon. Videre er deregulering av RAAS klassisk sett ved diabetes, og endringer i ACE2-ekspresjon er identifisert inyreog hjertet til diabetespasienter (Reich et al., 2008). Metaanalysedata har avslørt at SARS-CoV-2-infiserte pasienter ikke har en høyere forekomst av diabetes, selv om diabetespasienter viser en økt risiko for å lide av alvorlige former for SARS-CoV-2-infeksjon og verre utfall (Fadini et al., 2020). Omtrent 40 prosent av type 2-diabetespasienter er hypertensive ("Hypertension in diabetes study (HDS): I. Prevalence of hypertension in newly presenting type 2 diabetic patients and the association with risk factors for cardiovascular and diabetic complications," 1993) og er derfor behandles med RAAS-blokkere: angiotensin-konverterende enzymhemmere (ACEis) eller angiotensin-II type 1 reseptorblokkere (ARB). I tillegg er disse medisinene også mye brukt til å behandle ikke-diabetisk hypertensjon og proteinuri hos flerenyresykdommer(García-Carro et al., 2019).
Under den første bølgen av COVID-19-pandemien ble det reist en kontrovers angående bruken av RAAS-blokkere ettersom noen studier i eksperimentelle modeller har vist at behandlingen med disse legemidlene økte ACE2-ekspresjonen i hjertevev (Ferrario et al., 2005) ; Ishiyama et al., 2004; Ocaranza et al., 2006) og inyrevaskulatur (Soler et al., 2009). På grunn av dette prekliniske beviset har det blitt antydet at behandling med RAAS-blokkere kan øke mottakelighet for SARS-CoV-2-infeksjon og skape et paradoks ettersom økte ACE2-nivåer normalt anses som vevsbeskyttende (Aleksova et al., 2020) ; Sparks et al., 2020; Wang et al., 2020). Til tross for resultatene fra de nevnte studiene (Ferrario et al., 2005; Ishiyama et al., 2004; Ocaranza et al., 2006; Soler et al., 2009) er det ikke nok bevis til å bekrefte at disse legemidlene fremmer ACE2-ekspresjon som andre forfattere som bruker lignende eksperimentelle modeller har ikke observert ACE2-modulasjon indusert av RAAS-blokkere (Burchill et al., 2012; Burrell et al., 2005). Videre er effekten av RAAS-blokkere på lunge-ACE2-modulasjon knapt evaluert. I en fersk rapport beskrev Wysocki og samarbeidspartnere ACE2-modulasjon inyreog lunge fra mus (C57BLKS/J) behandlet med RAAS-blokkere (telmisatan eller captopril) (Wysocki et al., 2020). Her studerer vi effekten av en ACEi (ramipril) pånyre, lunge og hjerte ACE2 i en musemodell av type 2 diabetes.
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE-/NYREINFEKSJON
2. Materialer og metoder
2.1.DyreprosedyrerÅtte uker gamle mannlige leptinreseptormangel diabetiske mus (db/db) og de ikke-diabetiske heterozygote kullkameratene (db/ plus ) ble kjøpt fra Charles River (BKS.Cg-Dock7m plus/plus Lepr"J. Stammekode: 607 ). Musene ble plassert i grupper på 4 per bur som maksimum med ad libitum tilgang til vanlige mus Chow og vann under en 12 timers lys:12 timers mørk syklus. Etter 4 uker (12-ukegamle mus) en gruppe med db/db (n =7) ble behandlet med ramipril (8 mg/kg/dag) fortynnet i drikkevann (20 mg/L) i 8 uker. Kjøretøy db/db (n=7 )og db/m (n=7) ble brukt som kontroller. Vekt og blodsukker ble overvåket annenhver uke og blodtrykk før og etter behandlingen (se tilleggsmetoder). Etter behandlingsperioden ble dyrene avlivet under natrium pentobarbital anestesi.Mus ble deretter perfusert med kald PBS 1x og fullblod ble oppnådd ved hjertepunktur Blodprøvene ble samlet i rør med koagulasjonsaktivatorgel (41.1378.005, Sarstedt, Tyskland) for å oppnå s erum. Etterpå, dennyre,hjerte og lunge ble fjernet, hurtigfryst i flytende nitrogen og holdt ved -80 grader C frem til bruk. I tillegg en del avnyreog hjertet ble fiksert i 10 prosent formalin og parafin innebygd for histologiske analyser. Den eksperimentelle protokollen ble godkjent av de etiske komiteene for dyreforsøk ved Vall d'Hebron Research Institute (47.18 CEEA). Alle prosedyrer ble utført i henhold til retningslinjene til Generalitat de Catalunya innenfor rammen av Det europeiske råds direktiver for beskyttelse og stell av dyrene som brukes til forskning og andre vitenskapelige formål (2010/63/EU).
2.2. ACE2-analyseACE2-gen og proteinuttrykk, samt ACE2-aktivitet, ble analysert inyre, lunge- og hjerteekstrakter. I serum ble kun ACE2-aktivitet vurdert. ACE2-genuttrykk ble målt ved RT-qPCR og A△Cr-metoden ble brukt for relativ kvantifisering ved bruk av Hypo-xanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT) som et husholdningsgen. ACE2-proteinnivåer ble vurdert ved hjelp av Western blot og ACE2-aktivitet ble bestemt via en fluorescerende enzymatisk analyse ved bruk av et ACE2-stoppet fluorogent substrat (Mca-Ala-Pro-Lys (Dnp)-OH: Enzo Life-Sciences) som beskrevet tidligere (Riera et al.2016). I tillegg, inyreog i hjertet oppdaget vi ACE2 ved immunhistokjemi. Metodikken er detaljert i tilleggsmetodene.
2.3. statistiske analyserNormalfordelingen ble kontrollert ved å sammenligne våre data med den anslåtte normalfordelingen etter kvantil-kvantil (QQ) plott og bekreftet med normalitetstester (Shapiro-Wilk og/eller Kolmogorov-Smirnov). Gruppene ble sammenlignet (db/m vs db/db). og db/db vs db/db pluss Ramipri) av Welch t-tester når normaliteten ble oppfylt eller ved Mann-Whitney-testen når dataene fulgte en ikke-normal fordeling. Data er alwavs uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD). P-verdiene er detaljert for å estimere konfidensen til sammenligningene, og statistisk signifikans ble vurdert når p Mindre enn eller lik 0.05. Alle statistiske analyser og grafer ble utført med GraphPad Prism versjon 8.2.1.
3. Resultater
3.1. Ramipril senker blodtrykket hos db/db musDe endelige målene med denne studien var å vurdere (1) hvordan den diabetiske konteksten modulerernyre, lunge- og hjerte-ACE2(SARS-CoV-2-reseptor for å infisere målceller), og (2) om ACEi-behandlingen kan endre ACE2-atferden ved diabetes. For dette formål ble12-ukegamle diabetiske mus (db/db) behandlet med ramipril (8 mg/kg/dag), en ACEi, i løpet av 8 uker. Vehikel db/db og ikke-diabetiske mus (db/m) ble inkludert som kontroller. Som forventet viste alle diabetiske mus, både behandlet med ramipril og bæreren, hyperglykemi og økt vekt ved slutten av eksperimentet sammenlignet med todb/m-mus (tabell 1). I vår eksperimentelle setting viste db/db-musene redusert systolisk og diastolisk blodtrykk sammenlignet med kontroll-db/m-musene (se tabell 1). Som forventet reduserte administrering av Ramipril i 8 uker det systoliske blodtrykket signifikant sammenlignet med vehikel-db/db og/eller db/m-gruppen (tabell 1), noe som viste at behandling med ramipril var effektiv.
3.2. ACE2 er økt i nyrene til db/db-musene som ikke ble modifisert av ramiprilVi studerte moduleringen av ACE2 inyrefra db/m, bærer db/db og db/db-musene behandlet med ramipril ved bruk av to fremgangsmåter: (1) ekspresjon av ACE2-genet ved qPCR og (2)ACE2-aktivitetsanalyse ved bruk av et fluorescerende substrat. Vehikel-db/db-musene viste økt renal ACE2-genekspresjon sammenlignet med db/m(1.011 ± 0.16 vs 1582 ± 0.18, p<0.0001), this="" effect="">
reversert med administrering av ramipril (1,280 ± 0,18, p=0.01) (Fig. 1, A). Renal ACE2-aktivitet (100 prosent ± 14,2 prosent vs 114 prosent ± 31,9 prosent , p=0.2) hadde også en tendens til å øke i vehikel db/db, men ramipril endret ikke aktiviteten (114 prosent ± 31,9 prosent vs. 109,3 prosent ± 18,6 prosent) (fig. 1D)). I membrananrikede proteinekstrakter ble det tydelig at db/db-dyrene hadde økt ACE2-aktivitet sammenlignet med db/m (100 prosent ± 22,3 prosent vs 143,2 prosent ± 23,1 prosent , p=0.004) og , igjen, ramipril endret ikke ACE2-aktivitet inyremembrananrikede ekstrakter (fig. 2A). Inyrevevssnitt ble ACE2-ekspresjon lokalisert i børstekanten til de rørformede cellene og fargingen var mer fremtredende i db/db sammenlignet med db/m (fig. 3). Vi noterte ingen store endringer i ACE2-distribusjonen inyreav ramipril-behandlede dyr sammenlignet med ubehandlet db/db (fig. 3).
3.3. Ramipril modifiserte ikke lunge-ACE2 i db/db-musene I lungen utførte vi samme tilnærming som inyreå studere ACE2. Vi fant ingen forskjeller mellom db/m og vehikel db/db angående ACE2-genekspresjonen (fig. 1, B) hovedsakelig relatert til den høye variasjonen i ACE2 mRNA-ekspresjon (0.97 ± {{6} }.8 vs. 1.07 ± 0,71, p=0.63). Vi var ikke i stand til å finne forskjeller mellom lunge- og ACE2-aktiviteten (heller ikke i totale proteinekstrakter eller i membrananrikede ekstrakter) (fig. 1E og 2B, og tilleggsfigur 1 og 2, henholdsvis). Videre, i lungen til db/db, induserte ikke ramiprilbehandling endringer i ACE2-genekspresjon og aktivitet (fig. 1B og E, fig. 2B og tilleggsfigur 1 og 2).
3.4 ACE2 er redusert i hjertet av d/d og ramipril normaliserer ACE2-nivåeneVi analyserte også ACE2 i hjertet I hjertevev, ACE2 reduserte signifikant i db/db vs. db/m som ivaretok begge mRNA-nivåene(1.01±0.12ws {{8 }}.84±0.16,p=0.05)(Fig.1C)ogACE2aktivitet （100 prosent ±23.1 prosent ws 83 prosent ±16.8 prosent ,p=0.02）（臣g.1F） .I membrananrikede ekstrakter reduserte ACE2-aktiviteten også signifikant i db/db sammenlignet med db/m (fig.2O. Ramipril-behandling gjenopprettet signifikant ACE2-aktiviteten til de observerte kontroll-db/m-musene (83 prosent ±16,8 prosent v 98,2) prosent ±15 prosent ,p=0.04)(Fig.1E). Ramipril var imidlertid ikke i stand til å modifisere ACE2-genekspresjonen i hjertet(Fig,IC). Videre vurderte vi ACE2-fordeling i hjertevev der ACE2 farging viste en diffus fordeling med økt ACE2-farging i noen områder.Vi bemerket at intensiteten av fargingen var mildere i db/db sammenlignet med db/m. Ramipril så ut til å gjenopprette fargeintensiteten (Hig 3).
3.5 Serum ACE2 aktivitet er økt i db/db og den ble ikke modifisert av ramiprilTil slutt målte vi ACE2-aktivitet i serumprøver av db/m, db/db og db/db behandlet med ramipril. ACE2-aktivitet i serum var signifikant økt i db/db sammenlignet med db/m (99,9 prosent ± 29,3 prosent ws 146 prosent ±57,2 prosent, p= 0.03) og ramipril dempet ikke denne effekten (146 prosent) ±57,2 prosent vs 128 prosent ±55,7 prosent ,p= 0.5)(fig.4).
4. Diskusjon
Den nåværende pandemien forårsaket av SARS-CoV-2 har oppstått en kontrovers knyttet til bruken av RAAS-blokkere hos COVID-19-pasienter. Til tross for de påviste fordelene ved bruk av ACEi eller ARB hos kardiovaskulære pasienter (Fegan et al, 2000; Romero et al., 2015) har det blitt foreslått at disse legemidlene kan øke ekspresjonen av ACE2, reseptoren for SARS-CoV{{ 7}}, og dermed øke risikoen og alvorlighetsgraden av COVID-19 (Aleksova et al, 2020; Sparls et al, 2020; Wang et al, 2020).
Med denne studien hadde vi som mål å kaste lys over denne kontroversen, og for dette formål analyserte vi ACE2 i nyre-, lunge-, hjerte- og serumprøver fra en diabetisk musemodell (db/db) behandlet med ramipril i 8 uker. Vi brukte en diabetisk modell for å bestemme effekten av RAAS-blokkering ettersom det diabetiske miljøet er per sjø risikofaktor for dårlig prognose hos COVID-19-pasienter (Fadini et al, 2020; Williamson et al, 2020). Vi fant økt nyre-ACE2-genuttrykk og aktivitet i membranekstrakter i db/db-musene (henholdsvis fig. 1A og 2A). Tidligere studier har også vist tubulær renal ACE2 økning i db/db diabetiske mus (Wysocki et al, 2006; Yeet al, 2004,2006) så vel som i andre diabetiske musemodeller (Riera et al, 2016; Wysocki et al, 2006 ). Ramipril var i stand til å reversere økningen av ACE2 på genekspresjonsnivå, noe som tyder på at administreringen var beskyttende mot den skadelige effekten av diabetes i nyrene. Funnene våre i nyrene står i kontrast til resultatene publisert i den nylige rapporten fra Wysocki og medarbeidere (Wysocldi et al.2020) ettersom de beskrev RAAS-blokaden i C57BLKS/J-mus fremmer en reduksjon av ACE2-ekspresjon sammen med internalisering av proteinet. I vår studie med db/db-musemodellen fant vi ikke at ramipril reduserte ACE2-aktivitet i nyrene (fig. 1Dand2A), og vi observerte heller ikke proteininternalisering (fig. 3). Likevel fant vi at ramipril-behandling induserte en reduksjon av ACE2-genekspresjon i db/db (fig, 1A). Gen- og proteinuttrykk korrelerer kanskje ikke på grunn av forskjellig tidspunkt mellom proteinsyntese og nedbrytning, men resultatene oppnådd i ACE2-genekspresjon(Fg.1A) antyder at RAAS-blokkering vil fremme en reduksjon av ACE2 i nyrene som foreslått av Wysocki og samarbeidspartnere( Wysocldi et al.2020). Vår tilnærming, i motsetning til studien av Wysocki og cols.(Wysocldi et al.2020), etterlignet pasientene med diabetes som vanligvis mottar RAAS-blokkere for å forsinke progresjonen av diabetisk nefropati (Garcia-Carro et al..2019). Inline, en nylig wark av Batchu et al. har tydelig vist i nyrer og lunger hos komorbide diabetesmus (aldring, fettrik diett og streptozotocin-indusert diabetes) at ACE2 er oppregulert. RAAS-blokaden var imidlertid i stand til å modifisere den (Batchu et al.2020). Og dermed. i hvert fall for nyrene. resultatene våre opprettholder ikke ideen om at RAAS-blokaden ville favorisere ACE2-overuttrykk. Hos mennesker beskrev to uavhengige studier at tubulært ACE2-gen og proteinuttrykk ble redusert hos diabetikere
nefropati sammenlignet med friske individer (Mizuiri et al, 2008; Reich et al, 2008), selv om en annen forfatter ikke var i stand til å finne noen forskjeller (Lelyet al. 2004). Når det gjelder effekten av RAAS-blokkering hos mennesker, er det noen bevis for at det påvirker ACE2-ekspresjon i nyrene (Lely et al, 2004; Reich et al, 2008).
Vi analyserte også ACE2 i lunge- og hjertevev der ACE2-tilstedeværelsen er mye lavere enn i nyrene (Supplemental Figur S1 og S2). Når det gjelder lungen, oppnådde vi høy interindividuell variasjon i ACE2-genuttrykk (fig.1) som delvis kan forklares av det faktum at ACE2-ekspresjon i lungen er svært lav og begrenset til pneumocytter type 2 (Ziegler et al, 2020). Vi oppnådde gode resultater når ACE2 ble estimert ved enzymaktivitetsmåling. Lunge ACE2-aktivitet var lik mellom kontroll db/m og diabetiker db/db, og ingen forskjeller ble sett i db/db behandlet med ramipril sammenlignet med vehikel db/db(Fgs.IE og 2B). Selv om ACE2 i lunge ikke er mye studert i dyremodeller, har det blitt rapportert at NOD-musene og deres ikke-diabetiske kullkamerater har lignende ACE2-aktivitet i lungen (Roca-Ho et al.2017). Motsatt viste streptozotocin og diettinduserte mus med høyt fettinnhold økt ACE2-aktivitet i lungene sammenlignet med ikke-diabetiske mus (Batchu et al., 2020). Når det gjelder effekten av RAAS-blokaden på lunge-ACE2, er resultatene våre i samsvar med rapportene til Wysockiet al og Batchu et al. da de verken fant forskjeller inkludert ACE2-aktivitet når musene ble behandlet med ARB eller ACEi (Batchu et al.2020; Wysocldi et al.2020). Hos mennesker viste en studie med 1051 pasienter at lunge-ACE2-genuttrykk ble nedregulert av langvarig ACEi-behandling mens den ikke ble endret av ARB (Milne et al, 2020), selv om ingen data angående ACE2-proteinnivåer eller aktivitet var tilgjengelig.
Hjerte ACE2-genekspresjon og aktivitet ble signifikant redusert i db/db-mikrofonen sammenlignet med db/m (henholdsvis fig. 1C og F). I dette tilfellet økte behandlingen med ramipril ACE2-aktiviteten (fig. 1F. Disse resultatene antyder). at i db/db-modellen fremmer den diabetiske profilen en reduksjon av hjerte-ACE2 som gjenopprettes under RAAS-blokkering. Hos db/db diabetiske mus ser det ut til at reduksjonen av hjerte-ACE2 skjer over tid, slik yngre dyr (8 uker gamle) gjør viser ikke redusert ACE2-aktivitet i hjertet (Ye et al., 2004). Hjerte-ACE2 har også redusert hos streptozotocin-induserte diabetiske rotter (Qiao et al., 2015; Shin et al. 2017) selv om andre diabetiske musemodeller viser økning av hjerte-ACE2 sammenlignet med deres ikke-diabetiske kullkamerater (Patel et al, 2012; Roca-Ho et al., 2017). Likevel tyder in vitro eksperimenter på at glukose direkte kan nedregulere ACE2 i glatte muskelceller i hjertekar (Lavrentyev og Malik) , 2009). ACE2-modulasjon i hjertet så vel som effekten av RAAS-blokken kade har for det meste blitt studert i hjerteinfarkt (MI) både i rottemodeller og hos mennesker. I en MI-rottemodell viste Ocaranza og samarbeidspartnere at hjertets ACE2-aktivitet ble redusert i MI og RAAS-blokaden
med enalapril reverserte det (Ocaranz et al, 2006), på samme måte som det som skjer i vår studie. Andre studier utført i lignende MI-rottemodeller har imidlertid ikke kommet til de samme konklusjonene (Burrell et al.2005; Ishiyama et al, 2004). Hos mennesker ser det ut til at ACE2 er økt i hjertet etter MI (Burrell et al., 2005) og ved idiopatisk og iskemisk kardiomyopati (Goulter et al, 2004). Så vidt vi vet, er effekten av RAAS-blokkering på hjerte-ACE2-ekspresjon ikke studert hos mennesker. Til slutt analyserte vi ACE2-aktivitet i serum. ACE2 kan finnes både i cellemembraner i vevscellene og løselig (sACE2); som stammer fra utskillelse av membranbundet ACE2 av ADAM metallopeptidase domene 17 (ADAM17) (Lambert et al, 2005). ACE2 fungerer bare som en reseptor for SARS-CoV-2 på organnivå, men det har blitt antydet at sACE2 kan redusere infeksjonskapasiteten til viruset ved å fungere som et lokkemiddel (Balle et al, 2020; Monteil et al, 2020; Wysocl et al, 2021), selv om de lave sACE2-blodnivåene neppe ville gi denne gunstige effekten. Likevel er det interessant å vite om serum ACE2-nivåer er modulert (eller ikke) ved diabetes eller av RAAS-blokkere, da det kan være et signal om variasjoner i ACE2 i vev I denne forstand har det blitt postulert at ADAM17 kan spille en viktig motvirkende rolle ved å konkurrerer om ACE2-spaltning med serinproteasen Transmembrane Serine Protease 2 (TMPRSS2), en grunnleggende protease for SARS-CoV-2 internalisering (Palau et al.2020). Vi fant at serum ACE2 ble økt i db/db sammenlignet med db/m og ramipril reverserte ikke denne effekten (Fg,.3). Andre studier har også beskrevet økningen av blod ACE2 i diabetiske musemodeller (Riera et al.2016; Roca-Hoet al,2017;
Wysocki et al., 2013) og hos type 1-diabetespasienter (Soro-Paavonen et al. 2012), selv om effekten av RAAS-blokade ikke er mye studert. I denne forbindelse er bevisene ikke homogene hos mennesker. I studiet av Soro-Paavonen og cols. (Soro-Paavonen et al, 2012), ACEi-behandling økte ACE2-blodnivået hos både mannlige og kvinnelige pasienter og ARB-behandling kun hos kvinner. I kontrast, i et nylig preprint, ble en liten reduksjon av blod ACE2 notert med ARB-behandling, men ACEi induserte ingen endring (Emilsson et al, 2020).
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE-/NYRESMERTER
På grunn av de ovennevnte avvikene angående ACE2-modulasjon blant forskjellige diabetiske dyremodeller og hos mennesker, er det vanskelig å få et definitivt svar på spørsmålet: "Induserer RAAS-blokaden overekspresjon av ACE2?". I en samlet oversikt, med tanke på våre data og bevis fra andre forfattere, er inntrykket at den diabetiske konteksten i de fleste tilfeller endrer ACE2-uttrykk både i nyrene og i hjertet (ned- eller oppregulerer, avhengig av modell eller art ) og at RAAS-blokkering: (1) reduserer eller ikke modifiserer nyre-ACE2 (både i eksperimentelle modeller og umenneskelig), (2) ikke modifiserer lunge-ACE2 (selv om mer bevis er nødvendig her), (3) fremmer ACE2-ekspresjon i hjertet (i de fleste eksperimentelle modeller) og (4) har varierende effekter på blodets ACE2-nivåer (avhengig av kohorten og typen RAAS-blokker). Derfor forblir det laget flypremisset "RAAS-blokaden induserer ACE2-overuttrykk og øker følgelig risikoen for SARS-CoV-2-infeksjon" ikke sant for hjertet, nyrene, og, enda viktigere, ikke for lungen . Selv om denne antagelsen er et omstridt poeng da den bare gir en forenklet visjon om reguleringen av ACE2-uttrykk og ikke tar hensyn til at ACE2 er beskyttende i de fleste sammenhenger (Batlle et al, 2012; Oudit et al, 2010; Zhong et al. , 2010). Det er vist at ACE2 er gunstig i eksperimentelle modeller av lungeskade indusert av H7N9-influensaviruset (Yang et al, 2015) eller LPS (Ye og Liu, 2020). I en musemodell med lungeskade, SARS -CoV-infeksjon reduserte ACE2-ekspresjonen i lungene, men behandling med losartan forbedret lungeskaden og ACE2-ekspresjonen økte samtidig (Kuba et al, 2005), noe som tyder på at ACE2 var fordelaktig for å løse virusinfeksjonen. Dessuten kan den inflammatoriske konteksten som cytokinstormen som skjer i en undergruppe av corvid-19 pasienter (Mehta et al., 2020) også regulere ACE2-ekspresjon, selv om det er uklart i hvilken retning (de Lang et al., 2006 ; Wet al.2020). Uansett kan både oppregulering og nedregulering av ACE2 potensielt være skadelig under SARS-CoV-2-infeksjon, noe som antyder at ACE2-nivåer bør være innenfor et likevektsområde (South et al.2020).
Avslutningsvis demonstrerer vi her i en diabetisk musemodell at ACE-hemming bare produserer ACE2-oppregulering i det diabetiske hjertet, hvor ACE2 er redusert sekundært til diabetes. Dette skjer ikke i nyrene eller i lungene, noe som forsterker ideen om at RAAS-blokkaden i de fleste vev ikke øker ACE2-ekspresjonsnivåene. Selv resultatene vi oppnådde i hjertet, kan det diskuteres om behandlingen med ARB eller ACEi gir en reell risiko for økt COVID-19-infeksjon og forverret prognosen. RAAS-blokkering har klare kardiovaskulære fordeler (Fegan et al, 2000; Romero et al, 2015), mens det er usannsynlig at lave nivåer av ACE2 er fordelaktig for covid-19-oppløsning.
