Effekter av et frukt- og grønnsaksbasert næringsmiddel på biomarkører for betennelse og oksidativ status i plasmaet til en sunn befolkning: en placebokontrollert, dobbeltblind og randomisert klinisk studie

Kontakt Eposttina.xiang@wecistanche.comfor mer informasjon

Abstrakt: Det er vitenskapelig bevis på den positive effekten avpolyfenolerfra plantemat og viderebetennelse ogoksidativtstatus. Målet med denne studien var å undersøke om behandling med et høypolyfenolisk næringsmiddel reduserer plasmakonsentrasjonen av visseoksidativtoginflammatoriskbiomarkører i en sunn befolkning. Ett hundre og åtte forsøkspersoner ble valgt og stratifisert etter kjønn i intervensjonsgruppen (n {{0}}) og placebogruppen (n=55). Nittito forsøkspersoner fullførte studien etter to 16-ukers behandlingsperioder atskilt av en fire ukers utvaskingsperiode. Resultatene avslørte statistisk signifikante forskjeller hos personer behandlet med polyfenolekstraktet sammenlignet med placebo: En reduksjon i homocystein, oksidert lavdensitetslipoprotein (OxLDL), TNF- , sTNFR1 og C-reaktivt protein (CRP). Den mest signifikante reduksjonen ble observert for OxLDL (fra 78,98 ± 24,48 til 69,52 ± 15,64; p < 0.05)="" og="" crp="" (fra="" 1,50="" ±="" 0.="" 33="" til="" 1,39="" ±="" 0,37;="" p="">< 0,05),="" begge="" viser="" signifikante="" forskjeller="" sammenlignet="" med="" placebo="" (p="">< 0,001).="" dessuten="" økte="" katekolaminene="" etter="" administrering="" av="" produktet="" som="" undersøkes,="" spesielt="" når="" det="" gjelder="" dopamin="" (fra="" 15,43="" ±="" 2,66="" til="" 19,61="" ±="" 5,73;="" p="">< 0,05).="" derfor="" ser="" det="" ut="" til="" at="" inntak="" av="" et="" næringsmiddel="" basert="" på="" frukt="" og="" grønnsaker="" med="" høyt="" polyfenolinnhold="" forbedrer="" parametrene="" knyttet="" til="" helsefordeler="">oksidativtoginflammatoriskbiomarkører), inkludert bemerkelsesverdige endringer i uttrykket av katekolaminer.

Nøkkelord: polyfenol; biomarkører; oksidativt stress; frukt; grønnsak; næringsmiddel

1. Introduksjon

Den vitenskapelige litteraturen har dokumentert kostens rolle i forebygging av ikke-smittsomme sykdommer som fedme, hjerte- og karsykdommer, kreft og alle dødsårsaker, spesielt gjennom inntak av frukt og grønnsaker på grunn av deres høye innhold av bioaktive forbindelser, hovedsakelig polyfenoler [1 ,2]. Det er et omvendt forhold mellom middelhavsdietten, preget av høyt forbruk av produkter rike på polyfenoler, gjennom inntak av mat og drikke rike på polyfenoler som frukt, grønnsaker, kakao, te og kaffe, og risikoen for alle årsaker dødelighet [3,4]. Til tross for at det er påvist at inntak av 800 g/dag frukt og grønt reduserer risikoen for hjerte- og karsykdommer og dødelighet av alle årsaker, og 600 g/dag reduserer risikoen for kreft, har WHO og flere kostholdsråd fortsatt anbefaler 400 g/dag [5]. Imidlertid når mesteparten av befolkningen ikke engang det minimum som er fastsatt av helsemyndighetene, som tilsvarer fem porsjoner frukt og grønnsaker om dagen [6,7]. Fordelene knyttet til en sunn livsstil er kjent over hele verden, med nye produkter som dukker opp som gir mulighet for å inkorporere de nevnte bioaktive forbindelsene gjennom kosttilskudd/næringsmidler, noe som bidrar til å nå ernæringsanbefalingene [8].

I tillegg, på grunn av den progressive aldring av befolkningen, blant andre faktorer som kosthold og livsstil, er det en akselerert økning i nevrodegenerative sykdommer, med AD som hovedeksponent, hvis prevalens dobles hvert 20. år. På grunn av virkningen og sosiale kostnader som det genererer, er det utført mange studier på forholdet mellom forbruk av frukt og grønnsaker som et bidrag av antioksidanter som redusereroksidativtskade på hjernenivå [9].

Polyfenoler produseres som sekundære metabolitter av planter som en forsvarsmekanisme mot ugunstige forhold (parasitter, klima eller forurensning, blant annet) [10] og danner en bred gruppe bioaktive fytokjemikalier, inkludert fenolsyrer, stilbener, lignaner, fenolalkoholer og flavonoider [11,12]. De gir potensielle effekter i forebygging og behandling av flere patologier, som kardiovaskulære sykdommer, kreft, diabetes mellitus og aldring og nevrodegenerative sykdommer [13] gjennom flere bioaktiviteter (kardiobeskyttende aktivitet, anti-inflammatoriskaktivitet, antialdringsaktivitet, antioksidantaktivitet, antikreftaktivitet, antimikrobielle effekter, nevrobeskyttende effekter, lungebeskyttende effekter, nyrebeskyttende effekter, forebygging av osteoporose og beskyttelse mot UV-bestråling) [14]. Polyfenoler svekkesbetennelseved å undertrykke pro-inflammatorisktranskripsjonsfaktorer fra interaksjon med proteinene involvert i genuttrykk og cellesignalering [15]. Den vasodilaterende, vasobeskyttende, antitrombotiske, antilipemiske, antisklerotiske, anti-inflammatoriske og anti-apoptotiske kapasiteten til polyfenoler er en konsekvens av deres sunne egenskaper [12], med tanke på at polyfenoler er hovedkilden til antioksidanter (10 ganger høyere enn vitamin). C og 100 ganger høyere enn vitamin E og karotenoider) [16]. Faktisk er quercetin, myricetin og kaempferol flavanoler, flavonoidene med den høyeste frie radikal-nøytraliserende kapasiteten, ettersom deres fenolgruppestruktur er i stand til å fange opp de uparrede elektronene til ROS, og generere nøytraliserte reaktive arter [17]. Konsentrasjonen av polyfenoler i plasma er imidlertid svært avhengig av den kjemiske strukturen og diettkilden, så langsiktig inntak er tilrådelig for å oppnå alle de relaterte fordelene [12].

Målet med den nåværende kliniske studien var å evaluere om langsiktig inntak av et stort utvalg av polyfenoler gjennom et frukt- og grønnsaksbasert næringsmiddel er i stand til å forbedre biomarkørene knyttet tilbetennelseogoksidativtstatus hos friske personer som ikke inntar de anbefalte mengder frukt og grønnsaker. I tillegg har den friske ikke-eldre befolkningen vært gjenstand for få intervensjonsstudier som relaterer frukt- og grønnsakforbruk og katekolaminnivåer som variabler relatert til kognisjon [27,28,34].

2. Resultater

2.1. Studiebefolkning

Totalt 108 personer ble inkludert i denne studien (tabell 1 viser deres demografiske data), delt inn i to homogene grupper (N1 og N2). Til slutt, etter cross-over og tap til oppfølging, fullførte 92 forsøkspersoner (N1=48, N2=44) ​​intervensjonen og ble inkludert i den endelige statistiske analysen, som vist i figur 1.

2.2. Plasmatiske biomarkører

Gjennomsnittene og standardavvikene for alle biomarkørene som ble analysert i alle forsøkspersoner, både ved baseline og ved slutten av intervensjonen etter polyfenolekstraktinntaket (EXT) eller placeboinntaket (PLA), er avbildet i tabell 2.

Når det gjelder lipidprofilen, var variasjonen i høydensitetslipoprotein(HDL)kolesterol avhengig av typen produkt som ble konsumert bemerkelsesverdig. HDL-verdiene reduserte betydelig etter PLA-forbruk (∆4,52mg/dL;p<0.05),while increased="" significantly="" in="" the=""><0.05).additionally, the="" difference="" between="" both="" groups="" was="" also="" statistically="" significant="" at="" the="" end="" of="" the=""><0.05). finally,="" total="" cholesterol="" and="" triglycerides="" values="" did="" not="" show="" significant="" differences="" throughout="" the="" intervention="" after="" pla="" or="" ext="">
Regarding the vitamins analyzed, a slight increase in vitamin B12 was observed in both groups, as well as small non-significant variations in vitamin E values, as shown in Table2(p>0.05). For eksempel varierte vitamin B12 etter inntaksbehandlingen i både PLA- og EXT-gruppene; Signifikante forskjeller ble imidlertid ikke funnet (henholdsvis p=0.43 og p=0.20). Når det gjelder vitamin E varierte verdiene i PLA(p=0.98)- og EXT(p=0.91)-gruppene. Dessuten, sammenlignet mellom grupper ved slutten av intervensjonen, ikke Signifikante forskjeller ble observert for enten vitaminB12(p=0.205) eller vitamin E (p=0.974).

Når det gjelder katekolaminverdiene, var hovedfunnet den signifikante økningen i dopamin (∆4,18pg/mL;p<0.001)after consumption="" of="" ext="" with="" respect="" to="" pla="" (p="0.22)," showing="" significant="" differences="" between="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" intervention=""><0.001). a="" significant="" increase="" in="" norepinephrine="" values="" was=""><0.05), with="" an="" increase="" of="" ∆="" 39.21="" pg/ml="" in="" the="" ext="" group,="" not="" observed="" in="" the="" pla="" group="" (p="0.72)." there="" was="" no="" signifificant="" difference="" between="" the="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" study.="" analyzing="" the="" cortisol="" and="" adrenaline="" values,="" no="" signifificant="" differences="" were="" observed="" in="" any="" group="" during="" the="" intervention,="" nor="" at="" the="" end="" of="" the="">

Skjoldbruskfunksjonen ble bestemt av hormonene T3, T4 og TSH. Under intervensjonen ble det observert at T3-hormonverdiene sank signifikant i begge gruppene (p < 0.05).="" t4-hormonverdiene="" varierte="" på="" forskjellige="" måter,="" og="" økte="" betydelig="" i="" pla-gruppen="" (∆="" 0.57="" mcg/l;="" p="">< 0.001)="" og="" avtok="" ikke-signifikant="" i="" ext-gruppen="" (∆="" 0,47="" mcg="" ).="" i="" mellomtiden="" forble="" tsh-hormonverdiene="" konstante="" etter="" inntak="" av="" begge="" produktene.="" ved="" å="" sammenligne="" utviklingen="" av="" de="" tre="" hormonene="" mellom="" grupper="" ved="" slutten="" av="" studien,="" ble="" det="" ikke="" observert="" noen="" signifikante="" forskjeller="" for="" t3="" (p="0.195)," t4="" (p="0.195)" eller="" tsh="" (p="">

For å bestemme sikkerheten til produktene som undersøkes, ble transaminaser (GOT, GPT og GAMMA GT) analysert for å vurdere leverfunksjonen til forsøkspersonene, uten å observere signifikante endringer (p > 0.05) i noen av de nevnte leverenzymer etter inntak av enten produktet eller placebo. Derfor kan det antas at inntaket av produktene er trygt.

3. Diskusjon

Som kommentert ovenfor, gjenspeiler dataene innhentet i dette manuskriptet noen forskjeller mellom behandlinger. Under basale forhold ble det imidlertid ikke observert signifikante forskjeller mellom gruppene, noe som forsterker de signifikante endringene som ble oppnådd etter inntak av produktet.

Plasmatisk homocystein regnes som en indikator på kardiovaskulær risiko som kan modifiseres gjennom trening og kosthold. I tillegg er dens høye nevrobeskyttende effekt velkjent [35,36]. Imidlertid ser det ut til at mat gir en konstant tilførsel av næringsstoffer for å opprettholde optimal homocysteinmetabolisme [37]. I vår studie sank homocystein signifikant etter produktforbruk, som i tidligere studier [22,38]. Derfor bidrar inntak av polyfenoler i høye doser til å redusere homocystein, som kan betraktes som kardiobeskyttende kapasitet. På sin side ble ikke lipidprofil, totalt kolesterol og triglyserider påvirket gjennom hele intervensjonen. Det var imidlertid bemerkelsesverdig at det plasmatiske HDL-kolesterolet økte betydelig etter inntak av produktet og sank etter inntak av placebo. Disse endringene i plasmatiske lipoproteiner forsterker ideen om den kardiobeskyttende kapasiteten til produktet som undersøkes.

Hovedfunnet i denne forskningen var den signifikante reduksjonen i OxLDL, sammen med økningen i HDL-kolesterol etter kronisk inntak av det polyfenolrike ekstraktet i forhold til placebo. Disse resultatene er i samsvar med tidligere studier som støtter at polyfenolene viser beskyttelse mot aterosklerose, og derved hemmer vaskulær glattmuskelproliferasjon [12,39,40]. OxLDL er en av få parametere som er anerkjent av European Food Safety Authority (EFSA), innenfor rammen av funksjonspåstandene, og ser ut til å være en passende utfallsvariabel for å underbygge helsepåstander knyttet til reduksjon i oksidativ skade på lipider [ 41,42]. Dessuten fremmer OxLDL adhesjonen av monocytter til endotelceller gjennom en mekanisme uavhengig av uttrykket av ICAM-1 og VCAM-1, og genererer skummende celler [43]. Dette skjer imidlertid ikke med LDL [44]. Denne bindingen utføres gjennom visse reseptorer, for eksempel CD36. OxLDL er en ligand for PPAR og oppregulerer uttrykket av CD36, favoriserer opptak av OxLDL til makrofager [45] og bidrar følgelig til utviklingen av åreforkalkning gjennom immunsystemaktivering [46]. Interessant nok fremmer OxLDL endoteldysfunksjon og aterosklerose, og reduserer dermed kardiovaskulær risiko [47,48].

I sin tur førte behandlingen med produktet som ble undersøkt til plasmatisk reduksjon av CRP, et akuttfaseprotein syntetisert i leveren, mediert av andre cytokiner, spesielt IL-1 og IL-6 [49]. Høye nivåer av CRP er korrelert med økt risiko for kardiovaskulære hendelser, selv hos friske individer [50]. Flere studier har funnet en sammenheng mellom CRP-konsentrasjoner og kardiovaskulære hendelser som akutt hjerteinfarkt, hjerneslag og progresjon av den perifere arterielle okklusive sykdommen [51,52]. Selv om nivåene oppnådd i CRP er innenfor normalområdet for en frisk person, viser reduksjonen i disse nivåene gyldigheten av polyfenoler i denne forbindelse.

Dessuten ble den immuninflammatoriske markøren TNF- betydelig redusert etter inntak av ekstraktet. TNF- er et pro-inflammatorisk cytokin som er signifikant uttrykt i fettvev, så vel som i leukocytter, endotelceller og muskelceller [53], som deltar i endotelial dysregulering, stimulerer monocytt- og makrofagmigrasjon og induserer ekspresjonen av adhesjonsmolekyler [54]. Faktisk kan en økning i TNF- forekomme i en diett med lav konsentrasjon av karotener, noe som kan forklare reduksjonen observert i TNF-nivåene [55]. Derfor er det fornuftig at det i vår studie reduserer verdien etter produktforbruk på grunn av den høye tilstedeværelsen av karotener i produktet.

Det polyfenoliske ekstraktet som ble brukt i denne undersøkelsen har blitt testet i flere intervensjonsstudier, med ulike forbrukstider og i ulike befolkningsgrupper, noe som har ført til inkonsistente resultater. I en {{0}}ukes intervensjon hos trente menn som tilhører de østerrikske spesialpolitistyrkene, ble det rapportert signifikante reduksjoner (p < 0,001)="" i="" konsentrasjonen="" av="" karbonylgrupper="" i="" proteiner="" og="" tnf-="" i="" uke="" 16="" og="" 28.="" .="" en="" forskjell="" med="" vår="" studie="" var="" at="" i="" deres="" studie="" ble="" prøver="" tatt="" i="" uke="" 4,="" 8,="" 16="" og="" 28.="" spesielt="" økte="" verdiene="" opp="" til="" uke="" 8="" og="" sank="" fra="" uke="" 16="" og="" utover="" [56].="" i="" en="" åtte="" ukers="" intervensjon="" hos="" overvektige="" og="" overvektige="" personer="" over="" 40="" år="" ble="" det="" rapportert="" signifikante="" reduksjoner="" i="" totalkolesterol,="" ldl-kolesterol="" og="" tnf-,="" som="" ikke="" ble="" oppnådd="" med="" placebo;="" likevel="" ble="" det="" ikke="" funnet="" noen="" signifikante="" forskjeller="" i="" crp,="" stnfr1="" eller="" oxldl="" [57].="" begge="" resultatene="" ser="" ut="" til="" å="" bekrefte="" at="" langsiktig="" polyfenolinntak,="" som="" i="" vår="" studie="" (16="" uker),="" er="" assosiert="" med="" større="" effektivitet="" mot="" betennelse.="" i="" en="" annen="" åtte="" ukers="" intervensjon="" hos="" overvektige="" kvinner="" ble="" det="" observert="" signifikante="" forbedringer="" i="" flere="" proteinoksidasjonsmarkører="" som="" karbonylproteiner,="" oxldl="" (p="0.015)," og="" total="" lipidoksidasjon="" av="" alle="" lipider.="">inflammatoriskmarkører ble signifikante reduksjoner i TNF- (p=0.011) lagt merke til. Ved baseline var TNF-verdiene over det etablerte området i placebo- og ekstraktgruppene; ved slutten av intervensjonen forble de forhøyet i placebogruppen og sank til normale verdier i gruppen som konsumerte produktet [58]. Til slutt har effektiviteten av ekstraktet også blitt testet hos ikke-friske personer, og rapporterer en reduksjon i OxLDL etter en tre måneders forbruksperiode av storrøykere [59].

Når det gjelder katekolaminer, ble det observert signifikant økning i noradrenalin og spesielt dopamin etter inntak av produktet som undersøkes. Imidlertid ble ingen signifikante endringer observert for kortisol og adrenalin i noen gruppe. Til tross for at noen tidligere studier har rapportert en reduksjon i kortisol i plasma [60] eller spytt [61] etter polyfenolinntak, er dette ikke vanlig, og verdiene viser sjelden signifikante endringer [62–64] når det gjelder polyfenolinntak. Det faktum at både adrenalin- og kortisolverdiene ikke økte, innebærer at en adrenerg respons knyttet til inntak av produktet ikke utviklet seg. Noradrenalin og dopamin øker også hos eldre pasienter med nevrodegenerative sykdommer [65,66] og er relatert til angst [67] og kognitiv forbedring [68]. Dessuten er noradrenalin nært knyttet til oppmerksomhet, samt årvåkenhet [69,70]. Resultatene oppnådd i denne studien når det gjelder dopamin og noradrenalin kan være relatert til forbedringene på det kognitive nivået observert i en annen publikasjon [71]. Vi kan bekrefte at inntak av polyfenoler derfor øker nivåene av årvåkenhet og oppmerksomhet, som korrelerer med resultater på nivået av kognisjonstester [71]

En begrensning av den nåværende kliniske studien, som beskrevet av Di Lorenzo et al. [10] i en systematisk studie om polyfenols biotilgjengelighet, er at inkludering av friske forsøkspersoner i kliniske studier gjør det vanskelig å vurdere signifikante forskjeller i biomarkører, som endres under patologiske forhold. Andre begrensninger i denne studien inkluderer det faktum at metabolittene av fenoliske forbindelser i produktet ikke ble bestemt utover vitamin E-innholdet eller individuell respons, noe som kan påvirke polyfenols biotilgjengelighet og bioaktivitet [72].

Det er viktig å huske at de frivillige i denne studien er friske forsøkspersoner og betennelsesbiomarkørene som vi har bestemt er mellom normale verdier i plasma. Derfor er forskjellene som er observert innenfor området for normale verdier for disse biomarkørene, til tross for at de er statistisk signifikante, ikke slående fra et klinisk synspunkt. Imidlertid, hvis produktet som studeres har oppnådd statistisk signifikante endringer hos friske mennesker, kan disse endringene være enda større hos pasienter med unormale verdier [73,74], siden polyfenolene i produktet vil bidra til å i det minste delvis bekjempe midlet som forårsaker denne forstyrrelsen av plasmanivå [75].

Derfor kan fremtidig forskning fokusere på å vurdere disse aspektene i både friske og ikke-friske populasjoner.

4. Materialer og metoder

4.1. Prøvedesign

Denne studien besto av en randomisert, cross-over, dobbeltblind, kjønnsstratifisert og placebokontrollert klinisk studie for å vurdere effektiviteten av daglig inntak av et innkapslet næringsmiddel (Juice Plus plus Premium®, The Juice Plus plus Company, Collierville , TN, USA) basert på forskjellige frukter og grønnsaker på blodplasma biomarkører for betennelse og oksidativ status. Intervensjonen hadde en varighet på 36 uker – to perioder på 16 uker adskilt av en utvaskingsperiode på 4 uker. Under intervensjonen kom forsøkspersonene til laboratoriet fire ganger (i begynnelsen og slutten av hver fase), og tok blodprøver under fastende forhold. I begynnelsen av hver fase ble produktet (EXT eller PLA) levert til forsøkspersonene, og på slutten av hver fase ble forsøkspersonene pålagt å returnere pakkene slik at forskerne kunne kvantifisere de gjenværende produktene.

Hvert forsøksperson signerte et informert samtykkedokument og ble tildelt en numerisk kode i rekkefølge for ankomst; Deretter utførte en ekstern forsker randomiseringen ved hjelp av en datamaskingenerator (Epidat v4.1 Epi-dat, Spania) og tilordnet forsøkspersonene til en av gruppene. Verken forskerne eller forsøkspersonene visste hvilke grupper forsøkspersonene tilhørte. Både produktet og placeboet ble merket med koder gitt av det distribuerte selskapet og klassifisert i A og B, og først på slutten av studien ble forskerne varslet om hvilken kode som tilsvarte produktet og hvilken til placebo. Protokollen ble godkjent av den institusjonelle vurderingskomiteen ved det katolske universitetet San Antonio i Murcia (UCAM) (dato: 24. november 2017; kode: CE111072). Denne studien ble utført i henhold til standarder for god klinisk praksis og ble utført i henhold til Helsinki-erklæringen. Forsøket ble registrert på www.clinicaltrials.gov (åpnet 11. juni 2020) (identifikator CFE/JU/44-17.) Studien ble utført i farmasiavdelingen ved Fakultet for helsevitenskap ved det katolske universitetet i San. Antonio av Murcia (UCAM). Gjeldende europeisk lovgivning om beskyttelse av personopplysninger ble overholdt (forordning (EU)2016/679).

4.2. Deltakere

Forsøkspersonene måtte oppfylle alle kriteriene for inkludering (signere på skjemaet for informert samtykke, BMI mellom 18,5 og 35 kg/m2, ikke ha en kronisk sykdom, ikke innta mer enn tre porsjoner frukt og grønnsaker per dag, og alder mellom 18 år og 65 år) og ikke oppfyller noen av eksklusjonskriteriene (å være på medisiner eller under farmakologisk behandling, ta multivitaminer, allergisk mot frukt eller grønnsaker, være på diett, være vegetarianer eller veganer, røyke, innta mer enn 3 glass alkohol ( vin eller øl) om dagen, gravid, gjennomgått en større operasjon de siste tre månedene, hatt søvnproblemer og donert 0,5 L blod de siste tre månedene). Etter å ha sjekket inklusjons-/eksklusjonskriteriene startet totalt 108 personer av begge kjønn studien. Verifikasjon ble utført for å sikre at forsøkspersonene fortsatte å oppfylle kriteriene gjennom alle besøkene til enheten ved hjelp av en Mediterranean lifestyle index (MEDLIFE) undersøkelse for å vurdere kostholdsvaner og fysisk aktivitet [76]. Under intervensjonen gikk 16 forsøkspersoner tapt for oppfølging, så

antall personer som fullførte studien var 92, hvis demografiske data er vist i tabell 1.

4.3. Testtillegg

Produktet som ble undersøkt og placeboet hadde de samme egenskapene, og begge ble produsert og levert av The Juice Plus plus Company, Collierville, TN, USA. Presentasjonen var i form av hvite innkapslede farmasøytiske produkter, gitt i flasker kun differensiert med en kode. Når studien var fullført, ble etterforskerne gitt hvilken kode som tilhørte produktet og hvilken til placebo. Forskjellene i det kommersielle produktet var at det besto av et inntak av tre forskjellige typer kapsler per dag - to av blandede bær, to av blandede frukter og to av blandede grønnsaker, hver gitt i en separat flaske. Av denne grunn, og for å kunne produsere et lignende produkt og placebo, ble det besluttet å produsere kapsler som inneholder en blanding av de tre nevnte kapslene (bær, frukt og grønnsaker), hvor det daglige forbruket for denne studien var seks kapsler - tre før frokost og tre midt på ettermiddagen, ledsaget av vann.

Produktet som ble undersøkt ble levert i ugjennomsiktige hvite kapsler og inneholdt frukt-, grønnsak- og bærjuicepulver og fruktkjøtt fra eple, appelsin, ananas, tranebær, fersken, acerola kirsebær, rødbeter, sviske, daddel, mango, gulrot, persille, grønnkål, brokkoli, kål, spinat, riskli, tomat, artisjokkblader, blåbær, bjørnebær, solbær, blåbær, tyttebær, concord druer, hyllebær, druekjerneekstrakt, grønn teekstrakt, ingefærrot, bringebær, kakao, granateple, naturlig tokoferolblanding ( , δ, , -tokoferoler, solsikke-tokoferol), naturlig karotenoidblanding (lutein, -karoten, lykopen, astaxanthin), sitruspektin, sitrusbioflavonoider, sitronskall, kalsiumkarbonat, hvitløkspulver, spirulina, naturlig enzymblanding, silisiumdioksyd , vegetabilsk-avledet magnesiumstearat, tangeretin og Lactobacillus acidophilus. En daglig dose på 6 kapsler ga 2,91 mg -karoten, 18,7 mg vitamin E, 159 mg vitamin C, 318 µg folat, 6,1 mglutein, 1 mg lykopen og 0,15 mg astaxanthin. Placeboen besto av mikrokrystallinsk cellulose, risstivelse, vegetarisk kapsel (cellulose), magnesiumstearat og kunstige farger (FD&C gul #6 og FD&C blå #1).

Den polyfenoliske karakteriseringen av produktet ble utført i en tidligere studie av Bresciani et al. gjennom UHPLC-QqQ-MS, som viser totalt 119 polyfenoliske forbindelser av forskjellige fenoliske familier, inkludert flavonoler som kaempferol og quercetin, antocyaniner og flavoner [77]. Når det gjelder biotilgjengelighet, er kunnskap om den biotilgjengelige mengden polyfenoler mer interessant enn den totale mengden, siden i mange situasjoner er de mest rikelig med polyfenoler ikke de mest aktive for organismen [78]. Av denne grunn har Bresciani et al. evaluerte biotilgjengeligheten til produktet, og fant at av de 92 molekylene som ble overvåket, ble bare 20 sirkulerende metabolitter identifisert i plasma, alle som rester av sulfat, glukuronid eller glycin, som opptrådte til forskjellige tider i plasma avhengig av absorpsjonsstedet i fordøyelseskanalen [79].

4.4. Studer variabler

Alle variablene ble analysert fire ganger i løpet av studien: Ved begynnelsen og slutten av hver 16-ukes produktforbruksfase. I løpet av studien fikk forsøkspersonene ikke begynne eller modifisere noen hormonbehandling, og heller ikke gjøre noen vesentlige endringer i kosthold eller fysisk aktivitet som kunne påvirke studievariablene.

Blodprøvemålinger

Forsøkspersonene måtte ankomme etter en 12 timers fasteperiode, og tillot kun vanninntak de siste 3 timene. Trening med moderat høy intensitet var ikke tillatt 24 timer før ekstraksjon. Blodprøver ble tatt fra den antecubitale venen i et k3E/K3EDTA-blodprøvetakingsrør (3 mL) og Serum Gel og Clot Activator blodprøvetakingsrør (5 mL) *3. Før de ble sendt til laboratoriet (Laboratorios MUNUERA SL Murcia, Spania), ble bare Serum Gel og Clot Activator blodprøverør sentrifugert (4500 rpm, 5 min, 4 ◦C). Biomarkørene som ble analysert for hver variabel var: (a) Pro-inflammatoriske biomarkører: OxLDL (ng/mL) ved ELISA-analyse i serumprøver, TNF- (pg/mL) og sNTFR1 (ng/mL) ved konkurrerende ELISA (DRG diagnostisk merke), CRP (mg/L) ved turbidi metrisk immunoassay (PETIA) og homocystein (pg/mL) på en BN ProSpec®-analysator (i henhold til protokollen gitt i Siemens N Latex HCYOPAX 03-settet); (b) vitaminer: Vitamin E (mcg/ml) ved HPLC med en JASCO-kromatograf (PU-980 IntelligentPLC-Plus) og en Betasil-C18-kolonne (partikkelstørrelse 5 µm, 250 × 4,6 mm) koblet til en JASCO-fluorescens detektor (FP-920 Intelligent Fluorescense Detector) og vitaminB12 (pg/mL) ved kjemiluminescens med kommersielle immunanalyser ved bruk av Centaur XPSiemens Diagnostics automatisert utstyr (Siemens Healthcare SA); (c) katekolaminer: kortisol (mcg/l) ved bruk av kjeminesiscensteknikken med Immulite 2000 immunoassay (DPC, Gwynedd, RU), og noradrenalin (pg/mL), adrenalin (pg/mL) og dopamin (pg/mL) av HPLC med en strømning på 0,5 ml/min, Tº på 35 ◦C, følsomheten på 20, potensialet på 0,7, en mobil fase av acetonitril-vann og omvendt fase av C18 ved bruk av en elektrokjemisk detektor; (d) skjoldbruskkjertelhormoner: T3 (mcg/L), T4 (mcg/L) og TSH (mU/l) ved bruk av CentaurXP Siemens Diagnostics automatisert utstyr (Siemens Healthcare SA); (e) immunstatus: IgA (mg/L) ved bruk av turbidimetriteknikken med Monolab-testen. Som reagenser ble Tris-buffer (20 mmol/L), PEG 8000 og pH 8,3 brukt som fortynningsmiddel og geiteserum, anti-humant IgA og pH 7,5 som antistoff.

4.5. Statistisk analyse

De kontinuerlige variablene presenteres som gjennomsnitt ± standardavvik (SD) ved baseline og i deres utvikling, ved å bruke Kolmogorov-Smirnov-testen for å verifisere normalfordelingen av de diskontinuerlige dataene. Analysen ble utført for alle forsøkspersonene som deltok i studien, i perioden med både produkt- og placeboforbruk. For de kvantitative variablene ble det utført en Students t-test sammenligning mellom de to grenene av studien. For å analysere forskjellene mellom gruppene (EXT og PLA) i utviklingen av de forskjellige variablene, ble det utført en variansanalyse med gjentatte mål med tid som intrasubjektfaktor. På denne måten ble det etablert forskjeller for hver variabel som ble analysert, tatt i betraktning disse faktorene. En Bonferroni-test ble utført for post-hoc-analysen. Signifikante forskjeller ble sammenlignet (med mulighet for å anta varianslikhet eller ikke). I settet med statistiske tester var det valgte signifikansnivået 0.05. Statistisk analyse ble utført med SPSS 24 programvare (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA).

5. Konklusjoner

Vår forskning viste at kronisk inntak av et polyfenolekstrakt basert på bær, frukt og grønnsaker i en sunn befolkning som ikke spiser de anbefalte mengder frukt og grønnsaker per dag forbedrer oksidativ status og betennelse gjennom en forbedring av flere blodbiomarkører, spesielt OxLDL, CRP og HDL-kolesterol, forbedrer også verdiene av katekolaminer - spesielt dopamin.

Forfatterbidrag: Finansieringsanskaffelse, MPZ og JM; etterforskning, RA og JM; metodikk, RA, J.Á.C., RX-M., BC, DV, MPZ og JM; prosjektadministrasjon, JM; tilsyn, JM; validering, JM; skriving – gjennomgang og redigering, RA, J.Á.C. og JM Alle forfattere har lest og godtatt den publiserte versjonen av manuskriptet.
Finansiering: Denne studien ble finansiert av Juice Plus Company. Selskapet har ikke på noe tidspunkt samarbeidet i utformingen eller forvaltningen av de innhentede dataene.
Uttalelse fra institusjonell vurderingskomité: Denne studien ble utført i henhold til retningslinjene i Helsinki-erklæringen, godkjent av Etikkkomiteen ved det katolske universitetet San Antonio i Murcia (UCAM) (dato: 24. november 2017; kode: CE111702).
Informert samtykkeerklæring: Informert samtykke ble innhentet fra alle forsøkspersonene som var involvert i studien.

Datatilgjengelighetserklæring: Ikke nødvendig.
Takk: Forfatterne takker forsøkspersonene for å delta i studien, samt JuicePlus Company for støtten og promoteringen av forskningen.
Interessekonflikter: Forfatterne erklærer at de ikke har noen interessekonflikter angående dette manuskriptet.
Prøvetilgjengelighet: Ikke aktuelt.

Referanser

1. Aune, D.; Giovannucci, E.; Boffetta, P.; Fadnes, LT; Keum, N.; Norat, T.; Greenwood, DC; Riboli, E.; Vatten, LJ; Tonstad, S. Frukt- og grønnsaksinntak og risikoen for hjerte- og karsykdommer, total kreft og dødelighet av alle årsaker - En systematisk oversikt og dose-respons metaanalyse av prospektive studier. Int. J. Epidemiol. 2017, 46, 1029–1056. [CrossRef] [PubMed]
2. Slavin, JL; Lloyd, B. Helsefordeler med frukt og grønnsaker. Adv. Nutr. 2012, 3, 506–516. [CrossRef]
3. Tresserra-Rimbau, A.; Rimm, EB; Medina-Remón, A.; Martínez-González, MA; López-Sabater, MC; Covas, MI; Corella, D.; Salas-Salvadó, J.; Gómez-Gracia, E.; Lapetra, J.; et al. Polyfenolinntak og dødelighetsrisiko: En re-analyse av PREDIMED-studien. BMC Med. 2014, 12, 77. [CrossRef]
4. Tresserra-Rimbau, A.; Rimm, EB; Medina-Remón, A.; Martínez-González, MA; de la Torre, R.; Corella, D.; Salas-Salvadó, J.; Gómez-Gracia, E.; Lapetra, J.; Arós, F.; et al. Invers assosiasjon mellom vanlig polyfenolinntak og forekomst av kardiovaskulære hendelser i PREDIMED-studien. Nutr. Metab. Cardiovasc. Dis. 2014, 24, 639–647. [CrossRef]
5. Blomhoff, R.; Andersen, LF; Iversen, PO; Johansson, L.; Smeland, S. Kostråd for å fremme folkehelsen og forebygge kroniske sykedommer. Metodol. Vitensk. kunnskapsgrunnlag 2011. Tilgjengelig på nett: https://www.helsedirektoratet.no/rapporter/kostrad for-a-fremme-folkehelsen-og-forebygge-kroniske-sykdommer-metodologi-og-vitenskapelig-kunnskapsgrunnlag/Kostr prosent C3 prosent A5d prosent 2{{52 }}for prosent 20 prosent C3 prosent A5 prosent 20fremme prosent 20folkehelsen prosent 20og prosent 20forebygge prosent 20kroniske prosent 20sykdommer prosent 20 prosent E2 prosent 80 prosent 93 prosent 2 0metodologi prosent 20og prosent 20vitenskapelig prosent 20pkunnskap/grunnlag /attachment/inline/2a6293e0-169e-41bd-a872-f3952dbb22c2:0d09926111d614e6059e804b7f9b21c17bd0c1cd/5 Kostr prosent C220 prosent Afremogelsen 320 prosent Afremogelsen 300 prosent C 220 prosent Afremogelsen forebygge prosent 20kroniske prosent 20sykdommer prosent 20 prosent E2 prosent 80 prosent 93 prosent 20metodologi prosent 20og prosent 20vitenskapelig prosent 20kunnskapsgrunnlag.pdf (søkt 11. januar 2021).
6. Benton, D.; Ung, HA Rollen til fruktjuice i å oppnå 5-anbefalingen om dagen for frukt- og grønnsaksinntak. Nutr. Rev. 2019, 77, 829–843. [CrossRef] [PubMed]
7. Li, Y.; Zhang, D.; Pagán, JA Sosiale normer og forbruket av frukt og grønnsaker i New Yorks nabolag. J. Urban Health 2016, 93, 244–255. [CrossRef] [PubMed]
8. Sachdeva, V.; Roy, A.; Bharadvaja, N. Current Prospects of Nutraceuticals: A Review. Curr. Pharm. Bioteknologi. 2020, 21, 884–896. [CrossRef]
9. Román, GC; Jackson, RE; Gadhia, R.; Román, AN; Reis, J. Mediterranean diet: Rollen til langkjedede ω-3 fettsyrer i fisk; polyfenoler i frukt, grønnsaker, frokostblandinger, kaffe, te, kakao og vin; probiotika og vitaminer i forebygging av hjerneslag, aldersrelatert kognitiv svikt og Alzheimers sykdom. Rev. Neurol. 2019, 175, 724–741. [CrossRef]
10. Di Lorenzo, C.; Colombo, F.; Biella, S.; Stockley, C.; Restani, P. Polyphenols, and Human Health: Rollen til biotilgjengelighet. Næringsstoffer 2021, 13, 273. [CrossRef]
11. Manach, C.; Williamson, G.; Morand, C.; Scalbert, A.; Rémésy, C. Biotilgjengelighet og bioeffektivitet av polyfenoler hos mennesker. I. Gjennomgang av 97 biotilgjengelighetsstudier. Er. J. Clin. Nutr. 2005, 81, 230S–242S. [CrossRef]
12. Quiñones, M.; Miguel, M.; Aleixandre, A. Polyfenoler, naturlig forekommende forbindelser med gunstige effekter på kardiovaskulær sykdom. Nutr. Hosp. 2012, 27, 76–89. [CrossRef]
13. Li, S.; Tan, HY; Wang, N.; Cheung, F.; Hong, M.; Feng, Y. Potensialet og handlingsmekanismen til polyfenoler i behandling av leversykdommer. Oksyd. Med. Celle. Longev. 2018, 2018, 8394818. [CrossRef]
14. Li, A.; Li, S.; Zhang, Y.; Xu, X.; Chen, Y.; Li, H. Ressurser og biologiske aktiviteter av naturlige polyfenoler. Næringsstoffer 2014, 6, 6020–6047. [CrossRef]
15. EFSA Panel for Food Additives and Nutrient Sources Added to Food (ANS). Risikovurdering for peri- og postmenopausale kvinner som tar kosttilskudd som inneholder isolerte isoflavoner. EFSA J. 2015, 13, 4246. [CrossRef]
16. Rice-Evans, CA; Miller, NJ Antioksidantaktiviteter av flavonoider som bioaktive komponenter i mat. Biochem. Soc. Trans. 1996, 24, 790–795. [CrossRef] [PubMed]
17. Korkina, LG; Afanas' Ev, IB Antioksidant og chelaterende egenskaper av flavonoider. Adv. Pharmacol. 1996, 38, 151–163.
18. Dorjgochoo, T.; Gao, Y.-T.; Chow, W.-H.; Shu, X.; Yang, G.; Cai, Q.; Rothman, N.; Cai, H.; Li, H.; Deng, X.; et al. Hovedmetabolitten av F2-isoprostan i urin kan være en mer følsom biomarkør for oksidativt stress enn isoprostan i seg selv. Er. J. Clin. Nutr. 2012, 96, 405–414. [CrossRef] [PubMed]
19. Santilli, F.; D'Ardes, D.; Davì, G. Oksidativt stress ved kronisk vaskulær sykdom: Fra prediksjon til forebygging. Vascul. Pharmacol. 2015, 74, 23–37. [CrossRef] [PubMed]
20. McGuire, S. US Department of Agriculture og US Department of Health and Human Services, kostholdsretningslinjer for amerikanere, 2010. Washington, DC: US ​​Government Printing Office, januar 2011. Adv. Nutr. 2011, 2, 293–294. [CrossRef] [PubMed]

21. Baroni, L.; Bonetto, C.; Rizzo, G.; Bertola, C.; Caberlotto, L.; Bazzerla, G. Association Between Cognitive Impairment and Vitamin B12, Folate, and Homocysteine ​​Status in Elderly Adults: A Retrospective Study. J. Alzheimers. Dis. 2019, 70, 443–453. [CrossRef]
22. Samman, S.; Sivarajah, G.; Mann, JC; Ahmad, ZI; Petocz, P.; Caterson, ID Et blandet frukt- og grønnsakskonsentrat øker plasmaantioksidantvitaminer og folat og senker plasmahomocystein hos menn. J. Nutr. 2003, 133, 2188–2193. [CrossRef] [PubMed]
23. Meng, H.; Li, Y.; Zhang, W.; Zhao, Y.; Niu, X.; Guo, J. Forholdet mellom kognitiv svikt og homocystein i en B12- og folatmangelpopulasjon i Kina: En tverrsnittsstudie. Medisin 2019, 98, e17970. [CrossRef]
24. Lin, F.; Pei, L.; Zhang, Q.; Han, W.; Jiang, S.; Lin, Y.; Dong, B.; Cui, L.; Li, M. Ox-LDL induserer endotelcelleapoptose og makrofagmigrasjon ved å regulere caveolin-1-fosforylering. J. Cell. Physiol. 2018, 233, 6683–6692. [CrossRef] [PubMed]
25. Calder, PC; Albers, R.; Antoine, J.-M.; Blum, S.; Bourdet-Sicard, R.; Ferns, GA; Folkerts, G.; Friedmann, PS; Frost, GS; Guarner, F. Inflammatoriske sykdomsprosesser og interaksjoner med ernæring. Br. J. Nutr. 2009, 101, 1–45. [CrossRef]
26. Karlsen, A.; Paur, I.; Bøhn, SK; Sakhi, AK; Borge, GI; Serafini, M.; Erlund, I.; Laake, P.; Tonstad, S.; Blomhoff, R. Blåbærjuice modulerer plasmakonsentrasjonen av NF-KB-relaterte inflammatoriske markører hos personer med økt risiko for CVD. Eur. J. Nutr. 2010, 49, 345–355. [CrossRef] [PubMed]
27. Gonçalves, CFL; Santos, MC; Ginabreda, MG; Fortunato, RS; Carvalho, DPd; Freitas Ferreira, AC Flavonoid rutin øker thyreoideajodidopptaket hos rotter. PLoS ONE 2013, 8, e73908. [CrossRef]
28. Mancini, A.; Martorana, GE; Magini, M.; Festa, R.; Raimondo, S.; Silvestrini, A.; Nicolotti, N.; Mordente, A.; Mele, MC; Miggiano, GAD; et al. Oksidativt stress og metabolsk syndrom: Effekter av naturlig antioksidantberiket kosthold på insulinresistens. Clin. Nutr. ESPEN 2015, 10, e52–e60. [CrossRef]
29. Giuliani, C.; Noguchi, Y.; Harii, N.; Napolitano, G.; Tatone, D.; Bucci, I.; Piantelli, M.; Monaco, F.; Kohn, LD Flavonoidet quercetin regulerer vekst og genuttrykk i rotte-FRTL-5-skjoldbruskceller. Endokrinologi 2008, 149, 84–92. [CrossRef]
30. Kanazawa, K.; Sakakibara, H. Høyt innhold av dopamin, en sterk antioksidant, i cavendish banan. J. Agric. Food Chem. 2000, 48, 844–848. [CrossRef]
31. Parmar, HS; Kar, A. Beskyttende rolle av Mangifera indica, Cucumis melo og Citrullus vulgaris skrellekstrakter i kjemisk indusert hypotyreose. Chem. Biol. Samhandle. 2009, 177, 254–258. [CrossRef]
32. Rahman, MM; Ichiyanagi, T.; Komiyama, T.; Sato, S.; Konishi, T. Effekter av antocyaniner på psykologisk stressindusert oksidativt stress og nevrotransmitterstatus. J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 7545–7550. [CrossRef]
33. Graumann, R.; Paris, I.; Martinez-Alvarado, P.; Rumanque, P.; Perez-Pastene, C.; Cardenas, SP; Marin, P.; Diaz-Grez, F.; Caviedes, R.; Caviedes, P. Oksidasjon av dopamin til aminokrom som en mekanisme for nevrodegenerasjon av dopaminerge systemer ved Parkinsons sykdom. Mulig nevrobeskyttende rolle for DT-diaforase. Pol. J. Pharmacol. 2002, 54, 573–580. [PubMed]
34. Jiang, X.; Huang, J.; Song, D.; Deng, R.; Wei, J.; Zhang, Z. Økt forbruk av frukt og grønnsaker er relatert til en redusert risiko for kognitiv svikt og demens: Metaanalyse. Front. Aldrende Neurosci. 2017, 9, 18. [CrossRef] [PubMed]
35. Borai, IH; Ezz, MK; Rizk, MZ; Aly, HF; El-Sherbiny, M.; Matloub, AA; Fouad, GI Terapeutisk påvirkning av polyfenoler av drueblader på visse biokjemiske og nevrologiske markører i AlCl(3)-indusert Alzheimers sykdom. Biomed. Pharmacother. 2017, 93, 837–851. [CrossRef] [PubMed]
36. Zeng, Q.; Li, F.; Xiang, T.; Wang, W.; Ma, C.; Yang, C.; Chen, H.; Xiang, H. Påvirkning av matvaregrupper på totalt plasmahomocystein for spesifikke MTHFR C677T-genotyper i kinesisk befolkning. Mol. Nutr. Mat Res. 2017, 61. [CrossRef] [PubMed]
37. Ganguly, P.; Alam, SF Rollen til homocystein i utviklingen av kardiovaskulær sykdom. Nutr. J. 2015, 14, 6. [CrossRef]
38. Upadya, H.; Prabhu, S.; Prasad, A.; Subramanian, D.; Gupta, S.; Goel, A. En randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert, multisenter klinisk studie for å vurdere effektiviteten og sikkerheten til Emblica Officinalis-ekstrakt hos pasienter med dyslipidemi. BMC-komplement. Altern. Med. 2019, 19, 27. [CrossRef] [PubMed]
39. Bulotta, S.; Celano, M.; Lepore, SM; Montalcini, T.; Pujia, A.; Russo, D. Gunstige effekter av olivenoljefenolkomponentene oleuropein og hydroksytyrosol: Fokus på beskyttelse mot kardiovaskulære og metabolske sykdommer. J. Transl. Med. 2014, 12, 219. [CrossRef]
40. Osakabe, N.; Baba, S.; Yasuda, A.; Iwamoto, T.; Kamiyama, M.; Takizawa, T.; Itakura, H.; Kondo, K. Daglig kakaoinntak reduserer følsomheten til lipoprotein med lav tetthet for oksidasjon, som vist hos friske frivillige. Free Radic. Res. 2001, 34, 93–99. [CrossRef] 41. Martini, D.; Rossi, S.; Biasini, B.; Zavaroni, I.; Bedogni, G.; Musci, M.; Pruneti, C.; Passeri, G.; Ventura, M.; Di Nuzzo, S.; et al. Påståtte effekter, utfallsvariabler og målemetoder for helsepåstander foreslått under EU-forordning 1924/2006 innenfor rammen av beskyttelse mot oksidativ skade og kardiovaskulær helse. Nutr. Metab. Cardiovasc. Dis. 2017, 27, 473–503. [CrossRef] [PubMed]
42. Turck, D.; Bresson, J.-L.; Burlingame, B.; Dean, T.; Fairweather-Tait, S.; Heinonen, M.; Hirsch-Ernst, KI; Mangelsdorf, I.; McArdle, HJ; Naska, A.; et al. Veiledning for de vitenskapelige kravene til helsepåstander knyttet til antioksidanter, oksidativ skade og kardiovaskulær helse: (Revisjon 1). EFSA J. Eur. Mat Saf. Auth. 2018, 16, e05136. [CrossRef]
43. Dwivedi, A.; Anggård, EE; Bærer, MJ Oksidert LDL-mediert monocyttadhesjon til endotelceller involverer ikke NFkappaB. Biochem. Biofys. Res. Commun. 2001, 284, 239–244. [CrossRef]
44. Quinn, MT; Parthasarathy, S.; Fong, LG; Steinberg, D. Oksidativt modifiserte lipoproteiner med lav tetthet: En potensiell rolle i rekruttering og retensjon av monocytter/makrofager under aterogenese. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1987, 84, 2995–2998. [CrossRef] [PubMed]