Effektivitet og mekanisme for cistanches Herba-ekstrakt ved behandling av reproduktiv dysfunksjon hos rotter med nyre-yang mangel basert på metabolomics ⅱ

3.2 Effekt av cistancheekstrakt på den generelle tilstanden av rotter med nyre yang -mangel

Før eksperimentet var rotter i hver gruppe i godt humør, med normalt hår og normal spising og drikking. Under eksperimentet ble det ikke funnet noen abnormiteter i de normale grupprottene, og kroppsvekten deres økte jevnlig med forlengelsen av fôringstiden; Etter hvert som adenin -modelleringstiden forlenget, falt modellgruppens rotter av og ble grovt, humøret deres var lave, reaksjonene deres var treg, de krøllet seg sammen og buet ryggen, urinvolumet økte, kroppsvekten deres falt betydelig, og deres rektal temperatur falt betydelig (p <0. 001), viste tydelig symptomer av kyrde (0.Cistanche -ekstrakt og LC -intervensjonsbehandlingkan lindre ovennevntesymptomer i ulik grad, blant dem rektal temperaturen ble betydelig justert (p <0. 001), se figur 1.

Fig.1 Effekt av Cistanches Herba Extract på kroppsvekten og rektal temperaturen til rotter med nyre-yang-mangel (𝑥̅ ± S (n =10 (

3.3 Effekt av cistancheekstrakt på visceral-hjerne-forholdskoeffisienten hos rotter med nyre-yang-mangel

Sammenlignet med den normale gruppen ble de viscerale-hjerne-forholdskoeffisientene til testis og epididymis i modellgruppen betydelig redusert (p <0. 0 0 1); Sammenlignet med modellgruppen ble koeffisientene for visceral-hjerne-forholdet til testis og epididymis i hver dosegruppe av cistancheekstrakt betydelig økt (p <0. 0 5, p <{13}}. 01, p <0.001) og visalen til}}. LC -gruppen ble også betydelig økt (p <0,01, p <0,001), se figur 2.

Tabell 2 Effekt av Cistanches Herba-ekstrakt på sædmotilitetsparametrene hos rotter med nyre-yang-mangel (𝑥̅ ± s, n =10)

3.5 Effekt av cistancheekstrakt på sædtelling, bevegelighet og deformitetsrate hos rotter med nyre yang -mangel

Normal sæd har et sigdformet hode, en slank kropp, en naturlig buet hale og en jevn generell form. Morfologien til annen deformert sæd er vist i figur 3.<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.001); compared with the model group, the sperm density and motility of the rats in each dose group of Cistanche extract and the LC group were significantly increased (P<0.05, P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.001), as shown in Figure 4.

3.6 Effekt av cistancheekstrakt på testikkel- og epididymal vevsmorfologi hos rotter med nyre yang -mangel
Den testikulære seminiferøse tubuli av rotter i normalgruppen var intakte, med regelmessig arrangement av spermatogene celler på alle nivåer og klare lag. Rike spermatocytter og langstrakte spermatider var synlige i lumen. Sammenlignet med den normale gruppen økte andelen lesjonerte seminiferøse tubuli hos rotter i modellgruppen betydelig (P<0.001), which was manifested as irregular structure of seminiferous tubules, thinning of tubular walls, enlargement of lumen, increased number of exfoliated cell blocks in the lumen, decreased number of linear sperm, and disordered arrangement of spermatogenic cells. Compared with the model group, the proportion of testicular seminiferous tubule lesions in rats in all dose groups of Cistanche extract and LC group was significantly reduced (P<0.05, P<0.01), among which the low dose group of Cistanche extract had better improvement effect, which was equivalent to the LC group, as shown in Figure 5.

Få flere detaljer om Cistanche for å forbedre seksuell funksjon

Epididymale tubuli av rotter i normal gruppe var intakte, epitelcellene ble pent anordnet, og jevnt fordelt sæd kunne observeres; Epididymale tubuli av rotter i modellgruppen var hovne, epitelcellene ble uordnet anordnet, og antallet sæd i lumen ble betydelig redusert; Sammenlignet med modellgruppen, de epididymale lumen -lesjonene av rotter i cistanche -ekstraktgruppene og LC -gruppen ble betydelig forbedret, var epitelcellene tett og pent anordnet, og antallet normalt sæd i lumen økte og ble jevnt fordelt, som vist i figur 6.

4 Diskusjon

Kidney Yang -mangelssyndrom er en syndromtype i tradisjonell kinesisk medisin, som refererer til mangelen på nyres yang og kroppens manglende evne til å varme opp. Moderne medisin mener at nyre yang-mangel er relatert til dysfunksjon av den hypothalamiske hypofysemålkjertelen (hovedsakelig binyrekjertler, gonader og skjoldbruskkjertel) aksen [11]. Adenin kan virke på HPG -aksen til rotter, forårsake dens dysfunksjon, og dermed forstyrre homeostasen i kroppens hormonnivå, og viser symptomer som ligner på nyresmangel. T -nivå kan brukes som en av deteksjonsindikatorene for denne modellen [12]. De andre generelle diagnostiske kriteriene for nyre -yang -mangel blir brukt på modellrotter, nemlig redusert kroppstemperatur, vekttap, krølling, sparsomt hår, økt urinvolum, løs avføring, etc. [9,13]. Cistanche Deserticola er et av de mest brukte medikamentene i tradisjonelle resepter for kinesisk medisin for å tonifisere nyre Yang. Det viktigste aktive stoffet, fenyletanoidglykosider, har også blitt rapportert å ha funksjonene til å regulere HPG-aksen homeostase og anti-fatetigue [14]. I denne studien ble rotter med adeninmangel brukt som modell for nyre yang -mangel. Forbedringseffekten av Cistanche Deserticola -ekstrakt på rotter med nyre yang -mangel ble evaluert fra de generelle manifestasjonene av rotter og endringene i hormoner relatert til HPG -aksen. Resultatene viste at alle doser av Cistanche Deserticola -ekstrakt kan forbedre symptomene på nyre yang -mangel hos rotter forårsaket av adenin og redusere HpG -aksens hemmende effekt av adenin.

Oligospermia og Asthenospermia kan klassifiseres i kategoriene "barnløshet", "infertilitet", "kald sæd" og "sædblokkering" i tradisjonell kinesisk medisin. Hovedpatogenesen inkluderer nyre yang -mangel, fuktig varme, yinmangel og hyperaktivitet av ild, Qi -stagnasjon og blodstase, blant dem Nyresykefeil er den vanligste [15-16]. Kidney yang -mangel kan ikke varme sædpalasset, noe som resulterer i kald sæd og qi, og dermed barnløshet [17]. Effekten av oppvarming og tonifisering av resepter for nyre Yang for nyre Yang -mangel og infertilitet har også blitt rapportert mye [18]. Resultatene fra dette eksperimentet viste at ekstraktene av Cistanche Deserticola i alle doser, en tradisjonell kinesisk medisin for forfriskende nyre Yang, kunne lindre reduksjonen i forholdet mellom testikkel- og epididymale organer og hjernen forårsaket av adenin; Resultatene av sæddynamikkparameteranalyse viste at ekstraktene av cistanche ørkenicola i alle doser betydelig kan forbedre sæddynamikkparametrene inkludert VCL og VAP, og øke sædens bevegelighet og sædkonsentrasjon; Resultatene av sædfluorescens viste at ekstraktene av Cistanche Deserticola kunne forbedre reduksjonen i sædmotilitet betydelig forårsaket av adenin; Resultatene fra HE -farging viste at ekstraktene av Cistanche Deserticola betydelig kunne lindre sæddeformiteten forårsaket av adenin, og lindre de morfologiske endringene av testis og epididymis forårsaket av adenin; Resultatene fra ELISA viste at ekstraktene av Cistanche Deserticola betydelig justerte serumnivået til T, som er nødvendig for testikulær spermatogenese, og lavdoseekstraktene til Cistanche Deserticola viste bedre resultater. Resultatene ovenfor viser at ekstraktene av Cistanche Deserticola har en forbedrende effekt på reproduksjonsskaden til rotter med nyre Yang -mangel.

LC, også kjent som L-karnitin, er et essensielt energimetabolismestoff i menneskekroppen. Det eksisterer vanligvis i det mannlige reproduktive systemet i to former: fritt og acetylert. Det gir energi for bevegelse og modning av sæd i epididymis ved å fremme oksidasjon av fettsyrer og er mye brukt i behandlingen av mannlige reproduktive systemsykdommer [19]. Studier har vist at LC kan lindre HPG-akseforstyrrelsen forårsaket av glutamin, regulere nivåene av luteiniserende hormon og follikkelstimulerende hormon, og øke T-nivået ved å regulere ekspresjonsnivåene til gener som Cyp1a, CytochReMe P450 Family 11Subfamily A Member 1 (Cyp1aA1), CytochReMe P455 enzymer i T -syntese [20]. I tillegg kan LC fjerne overdreven reaktive oksygenarter i testisene forårsaket av varicocele, redusere oksidativ stressskade og dermed gjenopprette testikulær spermatogenese [21]. I dette eksperimentet ble LC valgt som en positiv kontroll. Resultatene viste at LC effektivt kunne lindre reproduksjonsskaden av rotter forårsaket av adenin, noe som var i samsvar med de tidligere forskningsresultatene; og Cistanche Deserticola -ekstraktet viste en terapeutisk effekt som var sammenlignbar med LC.

Metabolomics kan kvalitativt og kvantitativt analysere små molekylmetabolitter i kroppen som helhet, og deretter kombinere informasjonsintegrasjonen av flere databaser for flerdimensjonal statistisk analyse, som kan karakterisere det komplekse forholdet mellom fysiologi, patologi og medikamentell handling [{{{0}}]. Basert på LC-MS-teknologi gjennomførte dette eksperimentet metabolomics-analyse av serumprøver av rotter i normal gruppe, modellgruppe og lavdose cistanche ørkeniske gruppe, og hadde som mål å utforske den metabolske mekanismen til cistanche ørkenen i mellomliggende å gripe inn i reproduktiv skade forårsaket av adenin hos rotter med nyre Yang. Resultatene viste at totalt 22 relaterte differensielle metabolitter og 3 metabolske veier ble screenet. Cistanche Deserticola-ekstrakt påvirker hovedsakelig nivåene av 13- hPode, 20- karboksy-arachidonsyre (20- cooh, pant, pic ({{{1 {{}}}}: {{{0}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}} { Metabolske veier som lipidmetabolisme, pantotensyre og koenzym en biosyntese, og utøver dermed en reproduktiv beskyttende effekt.

Lipider spiller en viktig rolle i signaloverføring, energiproduksjon og opprettholdelse av cellehomeostase [24]. Lipidmolekyler kan deles inn i åtte kategorier basert på deres strukturer: fettsyrer, glyserolipider, fosfolipider, sfingolipider, steroler, forhåndsalkoholer, glykolipider og polyketider. Forstyrrelser i fettsyremetabolisme er nært knyttet til unormal sædkapasitasjon [25] og kronisk nyreskade [26]. 13- hPode og 20- cooh-aa er metabolitter av henholdsvis linolsyre og arachidonsyre som deltar i lipidperoksydasjonsreaksjoner. Når nivåene øker, indikerer det at kroppen er mer følsom for oksidativt stress. Dette kan føre til overdreven produksjon av reaktive oksygenarter, som igjen fører til redusert mannlig reproduktiv funksjon [27]. LPC er den mest tallrike typen lysoglyserofosfolipid i humant blod og kan indusere oksidativt stress i testikulære celler, forårsake reproduktiv skade [28]. Noen forskere har funnet ut at LPC (O -18: {{1 0}}/0: 0) induserer stress og apoptose av nyre vevsceller ved å aktivere uttrykk for peroxom -proliferator aktivert reseptor delte ( Funksjonsforringelse [29]. Det antyder at Cistanche Deserticola -ekstrakt kan spille en reproduktiv beskyttende rolle hos rotter med nyre -yang -mangel ved å nedregulere lipidperoksydasjonsnivåer og hemme oksidativt stress. Pantotensyre har en viktig effekt på testosteronsekresjon og sædmotilitet. Dens metabolitt -pantetin er råstoffet for syntese av koenzym A, som videre deltar i reguleringen av energimetabolisme og fettsyremetabolisme [30]. Cistanche Deserticola -ekstrakt kan fremme kroppens energimetabolisme og redusere skaden av oksidativt stress til reproduksjonssystemet til rotter med nyre yang -mangel ved å justere nivået av pantetin. Dette indikerer at Cistanche Deserticola -ekstrakt kan spille en antioksidantrolle ved å regulere lipidmetabolismen, biosyntesen av pantotensyre og koenzym A, og dermed beskytte reproduksjonsfunksjonen til rotter med nyre Yang -mangel.
I tillegg er Leydig -celler hovedstedet for T -produksjon, og dannelsen av T -forløper gravenolon avhenger av mitokondriell funksjon i Leydig -celler. Studier har vist at overdreven akkumulering av reaktive oksygenarter i Leydig -celler er assosiert med T -syntese lidelser. Overdreven reaktive oksygenarter induserer mitokondriell skade, noe som resulterer i hemming av adenosintrifosfat (ATP) og adenosin-cyklofosfat (CAMP) syntese, og hemmer derved uttrykket av T-synteserelaterte enzymer og fører til en reduksjon i T-nivåer [31]. Resultatene fra dette eksperimentet viste at Cistanche Deserticola-ekstrakt vendte den adenininduserte reduksjonen betydelig i serum T-nivåer. Resultatene fra metabolomics -analyse var lik de som ble rapportert i litteraturen, det vil si at Cistanche Deserticola -ekstrakt kan fremme T -syntese ved å lindre Leydig -celleoksidativ skade.

Resultatene av innholdsbestemmelsen av Cistanche Deserticola -ekstrakt viste at echinacoside, verbascoside, salidrosid, betain og cistancheside A kan være potensielle aktive ingredienser. Tidligere studier har vist at echinacoside kan beskytte testiklene mot oksidativ stressskade ved å aktivere antioksidantenzymer og mitogenaktivert proteinkinase (MAPK) signalrelaterte faktorer [32]; Salidrosid kan oppregulere kroppens antioksidantfaktorer for å motvirke skaden på blodtestisbarrieren forårsaket av oksidativt stress, og dermed fremme spermatogenese [33]; Verbascosid kan forbedre spredningsaktiviteten til hydrogenperoksydbehandlede TM3-celler, delvis beskytte dem mot oksidativ stressskade [34]; Betain kan oppregulere ekspresjonsnivåene til antioksidantrelaterte gener i testis av blyeksponerte mus, inkludert superoksyd-dismutase 1, glutathione peroxidase 1 og katalase, og forbedrer testikulær Johnson-poengsummen [35]; Cistancheside A er også rapportert å redusere den unormale økningen av reaktive oksygenarter i spermatogonia indusert av hypoksi og redusere celleapoptose [36]. Alle disse antyder at echinacoside, verbascoside, salidroside, betain og cistancheside A kan være det viktige materialgrunnlaget for cistanche å lindre symptomene på nyre yang -mangel hos rotter indusert av adenin. Oppsummert kan cistanche -ekstrakt lindre symptomene på nyresykefeil hos rotter indusert av adenin, så vel som den patologiske skaden av testis og epididymis, gjenopprette den skadede HPG -aksen, forbedrer den reduserte sædkvaliteten og forbedrer dermed reproduksjonsfunksjonen til rotter med nyre Yang -defiency; Handlingsmekanismen kan være relatert til regulering av lipidmetabolisme, biosyntese av pantotensyre og koenzym A, etc. Echinacoside, verbascoside, salidroside, betaine og cistancheside A er det mulige potensielle bioaktive materialbasis, som trenger ytterligere eksperimentell verifisering.