Utforsker de terapeutiske effektene og mekanismene til Yishen Tonglong-avkok på godartet prostatahyperplasi hos rotter via IL-6/STAT3-signalveien
Dec 17, 2025
Abstrakt
Objektiv:For å undersøke, gjennom interleukin (IL)-6/signaltransduser og aktivator for transkripsjon (STAT)3 signalvei, de forbedrende effektene og mekanismene til Yiqi Wenshen Tonglong Decoction (her forkortet som Yishen Tonglong Decoction) på benign prostatahyperplasi (BPH) hos rotter.
Metoder:Sprague-Dawley (SD) hannrotter ble kastrert og deretter subkutant injisert med testosteronpropionat for å etablere en BPH-modell. Rotter ble tilfeldig tildelt følgende grupper (n=12/gruppe): modell; Yishen Tonglong Decoction lav- og høydosegrupper (15 og 30 g/kg); STAT3 aktivatorgruppe (Colivelin, 1 mg/kg); og kombinert høydose Yishen Tonglong Decoction (30 g/kg) + Colivelin (1 mg/kg) gruppe. Ytterligere 12 SD-hannrotter tjente som en sham-operert gruppe. Etter gruppespesifikke behandlinger med Yishen Tonglong Decoction og/eller Colivelin, vurderte vi prostataindeks (PI) og østradiol (E2)/testosteron (T)-forhold; evaluert prostatahistomorfologi og fibrose med hematoxylin-eosin (HE) og Massons trikromfarging; målt Ki-67-ekspresjon ved immunhistokjemi; kvantifiserte IL-6 og IL-1 nivåer i prostatavev og serum ved ELISA; og oppdaget kollagen I/III og IL-6/STAT3-relaterte proteiner ved Western blotting.
Resultater:Sammenlignet med sham, viste modellgruppen markert prostatahyperplasi og fibrose, med signifikante økninger i PI, Ki-67 optisk tetthet, vev/serum IL-6 og IL-1, kollagen I/III, IL-6 protein og p-STAT3/STAT3, sammen med en signifikant reduksjon i E2/0,5 P <.05). I motsetning til modellgruppen, både lave og høye doser av Yishen Tonglong Decoction lindret hyperplasi og fibrose, reduserte PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 protein og p-STAT3/STAT3, og økt E2/T (alle P < 0,05). Høydoseavkoket ga større forbedringer enn lavdosen (P < 0,05). Colivelin alene forverret hyperplasi og fibrose og økte ytterligere PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 og p-STAT3/STAT3 mens E2/T reduserte (P < 0,05). Samtidig administrering av Colivelin svekket fordelene ved høydoseavkok, og forverret alle ovennevnte indekser signifikant sammenlignet med høydoseavkok alene (P < 0,05).
Konklusjon:Yishen Tonglong Decoction reduserer betennelse og forbedrer BPH-patologi hos rotter, i det minste delvis ved å undertrykke aktivering av IL-6/STAT3-signalveien.
Nøkkelord:IL-6/STAT3-signalering; Yishen Tonglong avkok; godartet prostatahyperplasi; urt for helbredelse av prostatittproblemer
Urte Cistanche kosttilskudd
Flere detaljer om ny tcm-urt for prostatahelse
Introduksjon
Benign prostatahyperplasi (BPH) er en vanlig obstruktiv tilstand i nedre urinveier hos middelaldrende og eldre menn, preget av epitel- og stromal proliferasjon og prostataforstørrelse, noe som fører til urinnøling, hyppighet og hastverk som betydelig svekker livskvaliteten [1,2]. Betennelse er en nøkkeldriver for BPH-patogenesen; det fremmer epitel- og stromal glattmuskelproliferasjon og fibrotisk remodellering. Anti-infeksiøse og antiinflammatoriske strategier er derfor effektive for forebygging og behandling av BPH [3,4].
IL-6 er et pleiotropt proinflammatorisk cytokin som er bredt uttrykt i vevsceller. Den aktiverer STAT3 for å utløse inflammatoriske programmer [5]. Hemming av IL-6/STAT3-aktivering reduserer nedstrøms proinflammatoriske mediatorer, avbryter inflammatoriske kaskader, reduserer hypertrofi-assosiert immuninfiltrasjon og fibrose, og bremser til slutt BPH-progresjon [6,7]. Derfor er IL-6/STAT3 et rasjonelt terapeutisk mål i BPH.
Yishen Tonglong Decoction er en klassisk kinesisk urteformel med tradisjonelle funksjoner for å nære Yin og støtte Yang, tonifisere Qi og nyrer, og fremme blodsirkulasjonen med fuktavlastning. Klinisk brukes det for dysuri på grunn av fuktig varme og blodstase med nyre-Qi-mangel, og det er rapportert å dempe prostatabetennelse og hyperplastiske endringer i BPH [8]. Utover BPH hemmer det proliferasjon av prostatakreftceller hos mennesker, fremmer apoptose og undertrykker invasjon og migrasjon [9]. Nettverksfarmakologi og molekylær docking antyder at nøkkelmål som er relevante for modulering av prostatasykdom inkluderer blant andre AKT1, IL-6 og VEGFA [10]. Basert på denne teoretiske begrunnelsen og tidligere bevis, antok vi at Yishen Tonglong Decoction forbedrer BPH via undertrykkelse av IL-6/STAT3-signalering. Vi testet denne hypotesen i en rotte BPH-modell.
Materialer og metoder
Dyr
SD-hannrotter, SPF-grad, 200–230 g, 6–7 uker gamle, ble hentet fra Daoke Pharmaceutical Technology (Guangdong) Co., Ltd. (SCXK [Yue] 2022-0060). Rotter ble holdt ved mindre enn eller lik 4 per bur under 12 timers lys/mørke sykluser, 50–60 % fuktighet og 23–25 grader.
Reagenser og instrumenter
Yishen Tonglong Decoction rå urter: Anemarrhena asphodeloides (Zhi Mu), Phellodendron chinense (Huang Bai), Cinnamomum cassia (Rou Gui), Rehmannia glutinosa tilberedt rot (Shu Di Huang), Cornus officinalis (Shan Zhu Yu), Dioscorea opposita (Shaningco Yango), Poriauco Yango (Shan Co. suffruticosa-bark (Mu Dan Pi), Achyranthes bidentata (Niu Xi), Aconitum carmichaeli-bearbeidet siderot (Fu Zi), Sparganium stoloniferum (San Leng), Curcuma zedoaria (E Zhu), Prunus persica-frø (Tao Ren), Vaccaria segetalis-frø (Xing-Zinga-Liicaa-plante). Kommer fra Beijing Tongrentang (Anguo) Chinese Herbal Slices Co., Ltd.
Colivelin (HY-P1061), MCE (USA).
Testosteronpropionat (renhet 98 %, T7260); ELISA-sett for rotte IL-1 (SEKR-0002), E2 (SEKR-0107), T (SEKSM-0003), Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.
HE-fargesett (ab245880), anti-p-STAT3 (ab76315), Masson's kit (ab150669), anti-STAT3 (ab68153), anti-kollagen I (ab270993), anti-Ki-67 (ab16649), anti-kollagen (ab16649), anti-kollagen anti-IL-6 (ab259341), HRP-esel anti-kanin sekundær (ab205722), rotte IL-6 ELISA (ab234570), Abcam (USA).
Anti-aktin (AF5003), Beyotime (Shanghai).
Parafinmikrotom HS-2205 (Olabao, Jinan), KP-PH100S mikroskop (Shenzhen KEPUS), UMR-9600 mikroplateleser (Hangzhou Youmi), PowerPac Basic 1645050 og PROTEAN strømforsyninger (Bio-Rad, USA).
BPH-modell og gruppering
Rotter ble bedøvet med natriumpentobarbital (45 mg/kg, 3 % w/v, intraperitoneal), testiklene ble utvendig og kirurgisk fjernet. Etter 3 dagers bedring fikk rottene daglige subkutane injeksjoner av testosteronpropionat (5 mg/kg i olivenolje) i 21 dager. Grov forstørrelse og histopatologisk hyperplasi bekreftet BPH-modelleringssuksess [11]. Sham-rotter gjennomgikk scrotal-snitt uten orkidektomi og fikk vehikelolivenolje.
Forberedelse og administrasjon
En resept på Yishen Tonglong Decoction inneholdt: Zhi Mu, Huang Bai, Shan Zhu Yu, Shan Yao, Fu Ling, Mu Dan Pi, Wang Bu Liu Xing, Ze Xie (hver 15 g); Niu Xi, Shu Di Huang, Tao Ren (hver 20 g); Fu Zi, San Leng, E Zhu, Rou Gui (hver 10 g). Urter ble avkokt to ganger med vann, filtrater kombinert og konsentrert til 1,5 eller 3,0 g/ml. Colivelin ble oppløst i saltvann til 0,1 mg/ml.
Lav- og høydose avkoksgrupper: sonde 15 eller 30 g/kg (10 mL/kg ved 1,5 eller 3,0 g/mL), pluss intraperitonealt saltvann (10 mL/kg).
Colivelin-gruppe: sondesaltvann (10 mL/kg) pluss intraperitoneal Colivelin 1 mg/kg (10 mL/kg av 0,1 mg/mL).
Høydose + Colivelin gruppe: sonde 30 g/kg avkok pluss Colivelin 1 mg/kg ip
Sham- og modellgrupper: sondesaltvann og ip-saltvann (10 ml/kg).
Alle behandlinger var en gang daglig i 21 dager.
Prostataindeks og E2/T; Prøvesamling
24 timer etter den siste behandlingen ble rottene bedøvet (som ovenfor). Kroppsmasse og prostata våtvekt ble registrert for å beregne PI=prostata våtvekt/kroppsmasse. Abdominalt aortablod ble samlet, sentrifugert (2000 rpm, 15 min) for å oppnå serum. E2 og T ble målt ved ELISA og E2/T beregnet; gjenværende serum ble lagret ved -80 grader. Omtrent 0,7 g prostatavev ble hurtigfrosset i flytende nitrogen for proteinanalyser; resten ble fikset, dehydrert, parafininnstøpt og seksjonert ved ~5 μm.
HE og Masson's Staining
Avparafinisering i xylen og graderte etanoler (100 %, 90 %, 80 %, 75 %) ble fulgt av hydratisering. Snittene ble farget med HE og Massons sett i henhold til produsentens instruksjoner (3 lysbilder hver), deretter vasket, dehydrert, renset og montert for mikroskopi.
Immunhistokjemi for celleproliferasjon
Etter avparafinisering/hydrering ble seksjoner behandlet med 3 % H2O2, blokkert med geiteserum og inkubert over natten med anti-Ki-67 (1:150). Deteksjon brukte et SP-sett med DAB-kromogen. Bilder ble innhentet og Ki-67 optisk tetthet kvantifisert av ImageJ.
ELISA for IL‑6 og IL‑1 i prostata og serum
Frosset prostatavev ble hakket, homogenisert i RIPA-buffer og sentrifugert (3000 rpm, 20 min) for å oppnå totale proteinlysater. Proteinkonsentrasjoner ble bestemt ved BCA. Alikvoter (0,2 ml) av vevslysat og tint serum ble analysert for IL-6 og IL-1 ved hjelp av ELISA.
Western blot for kollagen I/III og IL-6/STAT3 pathway proteiner
Denaturerte prøver (100 grader) ble separert ved SDS-PAGE og overført til nitrocellulose. Membraner ble seksjonert etter molekylvekt for kollagen I, kollagen III, ‑aktin, IL‑6, STAT3 og p‑STAT3. Etter 3 % BSA-blokkering ble primære antistoffer påført, etterfulgt av HRP-konjugert sekundært antistoff. Bånd ble visualisert ved kjemiluminescens og kvantifisert med ImageJ.
Statistikk
Data ble analysert med SPSS 26.0 med enveis ANOVA og SNK-q post hoc-tester.
Resultater
BPH-modelleringssuksess: Sammenlignet med sham, viste modellgruppen åpenbare økninger i prostatastørrelse og histologisk hyperplasi og fibrose. PI, Ki‑67 optisk tetthet, prostata/serum IL‑6 og IL‑1, kollagen I/III, IL‑6 og p‑STAT3/STAT3 var alle signifikant forhøyet, mens E2/T var redusert (P < 0,05).
Terapeutiske effekter av Yishen Tonglong Decoction: Både 15 og 30 g/kg doser dempet prostataforstørrelse og fibrose. Disse behandlingene reduserte signifikant PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6-protein og p-STAT3/STAT3, og økte E2/T (P < 0,05). Den høye dosen ga overlegne effekter enn den lave dosen (P < 0,05).
Effekter av STAT3-aktivering: Colivelin forverret prostatahyperplasi og fibrose og økte ytterligere inflammatoriske og fibrotiske markører samtidig som E2/T reduserte mot modellen (P < 0,05).
Antagonisme av Colivelin: Samtidig behandling med Colivelin svekket fordelene ved høydoseavkok, hevet inflammatoriske/fibrotiske indekser og reduserte E2/T sammenlignet med høydoseavkok alene (P < 0,05).
Diskusjon
Mekanistisk begrunnelse: IL-6/STAT3-aksen er en sentral betennelsesvei involvert i remodellering av prostatavev. IL-6-binding aktiverer JAK/STAT3-signalering, driver transkripsjon av proinflammatoriske og profibrotiske gener, fremmer epitel-/stromal proliferasjon, immuncelleinfiltrasjon og ekstracellulær matriseavsetning. Våre funn – forbedring med urteformelen og forringelse med en STAT3-aktivator – støtter en kausal mekanistisk sammenheng der Yishen Tonglong Decoction lindrer BPH ved å dempe IL-6/STAT3-aktivering.
Urteformelperspektiv (urt for helbredelse av prostatittproblemer): Urtekomponentene gir komplementære virkninger som er relevante for BPH og prostatittlignende betennelse:
Fukt-varme-rensende og anti-inflammatorisk: Zhi Mu (Anemarrhena), Huang Bai (Phellodendron), Mu Dan Pi (Paeonia bark), Ze Xie (Alisma).
Qi/nyre-tonifisering og endokrin modulering: Shu Di Huang (Rehmannia), Shan Zhu Yu (Cornus), Shan Yao (Dioscorea), Fu Ling (Poria).
Blodaktivering og antifibrotisk potensial: San Leng (Sparganium), E Zhu (Zedoary), Tao Ren (ferskenkjerne), Wang Bu Liu Xing (Vaccaria).
Varmer Yang og forbedrer mikrosirkulasjonen: Rou Gui (kanel), Fu Zi (akonitt, bearbeidet).
Sene/benstøtte og bekkensirkulasjon: Niu Xi (Achyranthes).
Denne synergien kan kollektivt redusere inflammatoriske cytokiner (IL-6, IL-1), proliferasjon (Ki-67) og fibrose (kollagen I/III), i samsvar med undertrykkelse av IL-6/STAT3-signalering observert i Western blots. Økningen i E2/T antyder delvis rebalansering av sex-steroidmiljøet, som også kan påvirke prostatavekstdynamikken.
Klinisk oversettelse og begrensninger: Selv om disse prekliniske dataene er lovende for BPH og potensielt for prostatittlignende betennelse, krever ekstrapolering til mennesker forsiktighet. Dosekonvertering, kvalitetskontroll av multi-urt-preparater og urt-legemiddelinteraksjoner trenger ytterligere studier. Ikke desto mindre styrker det banesentriske beviset (fordel med avkok, skade ved STAT3-aktivering og baneavlesninger) det teoretiske grunnlaget for klinisk utforskning av denne urtebaserte tilnærmingen til å helbrede prostatittproblemer og BPH.
Konklusjon
Yishen Tonglong Decoction lindrer prostatahyperplasi og fibrose hos BPH-rotter ved å hemme IL-6/STAT3-aktivering og redusere inflammatorisk og profibrotisk signalering, med doseavhengig effekt. Disse funnene gir mekanistisk støtte for dens tradisjonelle bruk og en moderne, veibasert begrunnelse for videre utvikling som en urtebasert terapi for BPH og prostatitt-relaterte tilstander.
Referanser
[1–13] As cited in the original text.
