Abstrakt

For å oppnå høyverdig utnyttelse av polysakkarider fraCistanche deserticolarester, brukte denne studien resten som var igjen etter ekstraksjonen av fenyletanoidglykosider (en industriell prosess basert på den patenterte membranseparasjonsteknologien,Patent nr. ZL200710102756.7, held by Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., https://www.xjcistanche.com/about-us) as the raw material. We systematically investigated the differences in chemical structural characteristics and antioxidant activities among various polysaccharide fractions obtained through membrane separation. The results indicated significant variations in chemical composition and activity among polysaccharide fractions with different molecular weights. Utilising ultrafiltration membranes of varying molecular weight cutoffs (300 kDa, 50 kDa, 10 kDa) combined with alcohol precipitation, four distinct polysaccharide fractions were successfully prepared: >300 kDa (kalt CTP 1), 50–300 kDa (CTP 2), 10–50 kDa (CTP 3), og<10 kDa (CTP 4). Monosaccharide composition analysis indicated that all four fractions primarily contained mannose, rhamnose, galacturonic acid, glucose, galactose, and arabinose, but their proportional ratios differed. Fourier-transform infrared spectroscopy confirmed that all fractions exhibited typical characteristic polysaccharide absorption peaks. Scanning electron microscopy results demonstrated that ultrafiltration membranes with different pore sizes significantly altered the aggregation state and surface roughness of the polysaccharides by retaining components of varying molecular weights. This morphological difference may be related to intermolecular interactions and the sieving effect during ultrafiltration. In antioxidant activity assays, CTP 1 showed the optimal performance, achieving DPPH radical scavenging rates exceeding 61% and ABTS⁺ radical scavenging rates surpassing 95% at 8 mg/mL. All four fractions demonstrated appreciable antioxidant activity. This study confirms that membrane separation technology can effectively fractionate polysaccharides from Cistanche deserticolarest. Forskningen gir et teoretisk grunnlag og data som støtter resirkulering av urtemedisinrester og høyverdiutvikling av polysakkaridkomponenter.

Nøkkelord: Cistanche deserticola; polysakkarider; antioksidant aktivitet; membranseparasjonsteknologi; strukturell analyse

 

Membrane Separation Technology Patent Hold av Wecistanche Headquarters

 

 

 

 

 

 

Introduksjon

Cistanches Herba(Cistanche), den tørkede kjøttfulle stilken med skjellblader avCistanche deserticolaYC Ma (ørken cistanche) ellerCistanche tubulosa(Schenk) Wight (CTP), er først spilt inn iShennong Bencao Jing (Shennongs klassiker av Materia Medica). Som en typisk representant for tradisjonelle toniske kinesiske medisiner i Kina og et homologt stoff for matmedisin, produseres det hovedsakelig i nordvestlige ørken- og ørkenområder som Xinjiang og Indre Mongolia, noe som gir det ryktet om "Desert Ginseng". Det har effekten av å tonifisere nyre-yang, nærende nyre-yin, fordele essens og blod, og fukte tarmene for å lindre forstoppelse [2-3]. Fenyletanoidglykosidene inneholdt i den har betydelige biologiske aktiviteter og er hovedstoffene som utvinnes i dagens industrielle produksjon. Imidlertid forblir det en stor mengde utnyttbare stoffer i resten etter utvinning, som kastes som avfall, ikke bare forårsaker ressursavfall, men også potensielt medfører en miljøbelastning. Derfor er det å oppnå høyverdig resirkulering av restene av stor betydning for effektiv utvikling av kinesiske medisinske ressurser og miljøvennlig utvikling.

Polysakkarider, som viktige aktive komponenter iCistanche, viser ulike farmakologiske aktiviteter som antioksidant, anti-aldring, hepatobeskyttende, antiinflammatorisk, immunmodulerende og antitumoreffekter [4-7], og kan brukes mye i legemiddelutvikling, så vel som i mat- og helseprodukter. Tidligere studier har i stor grad optimalisert utvinningsprosessen og gjennomført foreløpige aktivitetsevalueringer avCistanchepolysakkarider, men systematisk forskning på polysakkarider i restene etter ekstraksjon av fenyletanoidglykosid er fortsatt knappe, spesielt mangler det dybdeanalyse av effektive separasjons- og fraksjoneringsteknologier for restpolysakkarider og aktivitetsforskjeller mellom ulike fraksjoner, noe som i stor grad begrenser forbedringen av utnyttelsesverdien avCistancheressurser.

Innen polysakkaridforskning har ugraderte råpolysakkarider problemer som blandede komponenter, uklare aktivitetsbidrag og tvetydige mål, noe som gjør det vanskelig å nøyaktig avsløre det materielle grunnlaget for deres antioksidant-, immunmodulerende og andre funksjoner. I mellomtiden forstyrrer urenheter som proteiner, pigmenter og uorganiske salter i rå polysakkarider også deres aktivitetsevaluering og applikasjonsutvikling. Tradisjonelle metoder som kolonnekromatografi har høy oppløsning, men er vanskelig å skalere opp, mens alkoholutfellingsfraksjonering er grov og har miljørisiko. Membranseparasjonsteknologi, med sine fordeler høy effektivitet, miljøvennlighet og presis fraksjonering, viser et stort potensial i separasjon og rensing av polysakkarider. Den muliggjør presis fraksjonering av polysakkaridkomponenter gjennom membraner med forskjellige molekylvektavskjæringer, og gir en ideell teknisk støtte for å avsløre "molekylvekt-aktivitet"-struktur-aktivitetsforholdet til polysakkarider [8]. Tang et al. [9] vellykket renset tre polysakkaridkomponenter direkte fraLentinus edodesvannekstrakter ved bruk av en kombinasjon av 2,5 kDa, 5 kDa og 10 kDa ultrafiltreringsmembraner. Spesielt er membranseparasjonsteknologien som brukes i denne studien beskyttet av et oppfinnelsespatent (Patent nr. ZL200710102756.7) holdt av Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. (https://www.xjcistanche.com/about-us), som fokuserer på produksjon av fenyletanoidglykosidholdige råvarer fraCistancheved hjelp av membranseparasjon, som gir et robust industrielt grunnlag for forskningen vår. Produktene utviklet av vår forskningsgruppe basert på systematiske studier av fenyletanoidglykosider fraCistanche tubulosa[10] har gått inn i pilotproduksjonsfasen. Basert på dette bruker denne studien resten avCistancheetter ekstraksjon av fenyletanoidglykosid som råmateriale, bruker ultrafiltreringsmembraner kombinert med alkoholutfelling for å fraksjonere og rense polysakkarider i resten, og analyserer systematisk forskjellene i kjemiske strukturelle egenskaper og antioksidantaktiviteter til polysakkaridfraksjoner med forskjellig molekylvekt. Målet er å åpne opp nye veier for resursgjenvinning avCistancherester, forbedre industrikjeden, og legge et teoretisk og eksperimentelt grunnlag for utvikling av nye funksjonelle matvarer eller antioksidanter basert på naturlige polysakkarider.

 

50 % Echinacoside 10 % Acteosid Cistanche Extract Supplements ekstrahert med membranseparasjonsteknologi

Sjekk oppføringen

Supportive Service Of Wecistanche-For mer informasjon om samarbeid
E-post:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

1 Materialer og metoder

1.1 Materialer og instrumenter

Cistanche deserticolarest ble levert avHotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. (Hotan, Kina), generert fra industriell ekstraksjon av fenyletanoidglykosider via den patenterte membranseparasjonsteknologien (Patent nr. ZL200710102756.7; https://www.xjcistanche.com/about-us). Glucose standard was purchased from Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute. m-Hydroxybiphenyl (98 %), Coomassie Brilliant Blue G-250, dialyseposer (MD44), DPPH-analysesett for radikalfjernende kapasitet, ABTS-analysesett for radikalfjernende kapasitet, analysesett for superoksidanion-fjernende kapasitet og analysesett for total antioksidantkapasitet ble alle kjøpt fra Beijing Galuronic, Ltd. (9%). bovint serumalbumin (98%) og askorbinsyre (Vc) ble kjøpt fra Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd. Andre kjemiske reagenser var av analytisk kvalitet.

UV-19001 UV-Vis spektrofotometer (Shimadzu Instruments Co., Ltd.); YP10002 elektronisk balanse (Shanghai Hengji Scientific Instruments Co., Ltd.); SQP elektronisk balanse (Sartorius Scientific Instruments Co., Ltd.); EYELA vannbad (SB-1200); CA-1111 kjølevannsirkulasjonsanordning (Shanghai Ailang Instruments Co., Ltd.); SHZ-D sirkulerende vannvakuumpumpe (Shanghai Jinfu Experimental Instrument Equipment Co., Ltd.); N-1100 rotasjonsfordamper; XCLD-10FE frysetørker (Shanghai Xingchuang Scientific Instrument Equipment Co., Ltd.); BONA-GM-18C organisk membranseparasjon eksperimentell maskin; 300 kDa, 50 kDa, 10 kDa ultrafiltreringsmembraner (polyetersulfon, Jinan Bona Co., Ltd., Shandong); TGL-16A sentrifuge (Changsha Pingfan Instruments); BT25S analytisk balanse (Sartorius Scientific Instruments); Dionex U3000 høyytelses væskekromatograf (Thermo Fisher Scientific, USA); LC-DCY-12GK nitrogenblåser (Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.); UPH-I-10T ultrarent vannsystem (Chengdu Ultra Pure Technology Co., Ltd.); DF-101S infrarødt spektrometer (Shimadzu Instruments Co., Ltd.); Zeiss Supra55VP skanningselektronmikroskop (Carl Zeiss (Shanghai) Management Co., Ltd.).

 

Cistanche-spesifikasjoner

1.2 Eksperimentelle metoder

1.2.1 Utvinning av råoljeCistanchePolysakkarider

I henhold til ekstraksjonsprosessen oppnådd fra foreløpige fortester, 150 g avCistanche deserticolaresten ble veid, ekstrahert ved 100 grader i 3 timer med et faststoff-væskeforhold på 1:20 g/ml, sentrifugert ved 4000 r/min i 10 minutter, og supernatanten (polysakkaridinnhold: 4,4 mg/ml) ble samlet for å oppnå polysakkaridekstraktet.

1.2.2 Fraksjonering og separering avCistanchePolysakkarider

Det vandige ekstraktet avCistanchepolysakkarider ble utsatt for ultrafiltreringsfraksjonering ved bruk av 300 kDa, 50 kDa og 10 kDa ultrafiltreringsmembraner under betingelser med 0,18 MPa trykk og 40 graders temperatur. Retentatene og permeatene ble samlet opp separat, konsentrert ved rotasjonsfordampning, og 95 % etanol ble tilsatt for å oppnå en endelig etanolkonsentrasjon på 80 %. Blandingen ble plassert ved 4 grader i 24 timer, deretter sentrifugert ved 4000 rpm i 10 minutter, og supernatanten ble kastet for å oppnå bunnfallet. Bunnfallet ble gjenoppløst i vann, dialysert mot en 3500 Da dialysepose i 48 timer og frysetørket for å oppnåCistanche polysaccharides. Four fractions were obtained by collecting retentates and permeates: >300 kDa (kalt CTP 1), 50–300 kDa (CTP 2), 10–50 kDa (CTP 3), og<10 kDa (CTP 4).

1.2.3 Bestemmelse av polysakkarid kjemiske komponenter

1.2.3.1 Bestemmelse av totalt sukkerinnhold

Fenol-svovelsyremetoden ble brukt for å bestemme polysakkaridinnholdet i prøvene [11]. En standardkurve ble fremstilt ved bruk av glukose, med en 0,1 mg/ml glukosestandardløsning. Nøyaktige volumer på 0,4 ml, 0,8 ml, 1,2 ml, 1,6 ml og 2,0 ml av standardløsningen ble overført til 10 ml proppte reagensrør, og vann ble tilsatt til et totalt volum på 2,0 ml. Deretter ble 1,0 ml nylaget 6 % fenolløsning tilsatt, blandet godt, og 5,0 ml konsentrert svovelsyre ble raskt tilsatt langs rørveggen. Blandingen ble ristet, oppvarmet i et 90 graders vannbad i 15 minutter, deretter fjernet og avkjølt til romtemperatur. Ved å bruke destillert vann som blindprøve ble absorbansen målt ved 490 nm med et UV-Vis spektrofotometer. Standardkurven som ble oppnådd var y=16.196x+0.0834, med R2=0.999. En 0,1 mg/ml polysakkaridløsning ble fremstilt, og absorbansen til hver polysakkaridfraksjon ble målt ved bruk av samme metode. Det totale sukkerinnholdet i hver fraksjon ble beregnet ved å erstatte inn i standardkurven.

1.2.3.2 Bestemmelse av proteininnhold

Coomassie Brilliant Blue-metoden ble brukt for å bestemme proteininnholdet i prøvene [12]. En standardkurve ble fremstilt ved bruk av bovint serumalbumin, med en 0,1 mg/ml standard proteinløsning. Standardproteinløsningen ble fortynnet til konsentrasjoner på 0,02, 0,03, 0,05, 0,07 og 0,09 mg/ml. Deretter ble 1 mL av hver konsentrasjon av standardproteinløsningen tilsatt til reagensrør, etterfulgt av 5,0 mL Coomassie Brilliant Blue kromogent reagens, og blandet ved risting. Ved å bruke destillert vann som blindprøve ble absorbansen målt ved 595 nm etter 10 minutters reaksjon. Standardkurven som ble oppnådd var y=0.0034x+0.7673, med R2=0.996. Absorbansen til hver polysakkaridfraksjon ble målt ved bruk av samme metode, og proteininnholdet til hver fraksjon ble beregnet ved å substituere inn i standardkurven.

1.2.3.3 Bestemmelse av uronsyreinnhold

m-hydroksybifenylmetoden ble brukt for å bestemme uronsyreinnholdet i prøvene [13]. En standardkurve ble fremstilt ved bruk av galakturonsyre, med en 0,1 mg/ml galakturonsyrestandardløsning. Standardløsningen ble fortynnet til konsentrasjoner på 0,01, 0,02, 0,03, 0,05 og 0,1 mg/ml. Deretter ble 1 mL av hver konsentrasjon av standardløsningen tilsatt til reagensglass, og 6 mL natriumtetraborat-svovelsyreløsning ble tilsatt under isvannsbadbetingelser, blandet ved risting, oppvarmet i kokende vann i 5 min, avkjølt til romtemperatur, og 0,1 mL m-hydroksybifenylreagens ble tilsatt, blandet i minst 30 minutter, blandet i romtemperatur. Ved å bruke destillert vann som blindprøve ble absorbansen målt ved 525 nm. Standardkurven som ble oppnådd var y=7.5339x+0.0494, med R2=0.995. En 0,1 mg/ml polysakkaridløsning ble fremstilt, og absorbansen til hver polysakkaridfraksjon ble målt ved bruk av samme metode. Uronsyreinnholdet i hver fraksjon ble beregnet ved å substituere inn i standardkurven.

 

Wecistanche produsent

1.2.4 Bestemmelse av monosakkaridsammensetning

Kromatografiske forhold: Thermo U3000 væskekromatografisystem, utstyrt med en Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 kolonne (4,6 mm × 250 mm, 5 μm). Den mobile fasen var acetonitril:fosfatbuffer (12 g/l kaliumdihydrogenfosfat, pH justert til 6,8 med 2 mol/L NaOH) i et volumforhold på 17:83, med isokratisk eluering. Strømningshastigheten var 0,8 mL/min, kolonnetemperaturen var 30 grader, deteksjonsbølgelengden var 250 nm, og injeksjonsvolumet var 10 μL.

Utarbeidelse av standardløsning: 5 mg hver av rhamnose, arabinose, galaktose, glukose, xylose, mannose, galakturonsyre, glukuronsyre, glukosaminhydroklorid og galaktosaminhydroklorid, og 10 mg fukose ble veid sekvensielt, løst opp og fylt opp til 10 ml for å fremstille standardstamoppløsningen i en volumetrisk flaske.

Tilberedning av prøveløsning: 5 mg av hver av de fire polysakkaridfraksjonene ble veid, tilsatt til 1 ml 2 mol/L TFA-løsning og oppvarmet til 121 grader i 2 timer. Nitrogen ble spylt for å tørke løsningen. Deretter ble 3 ml metanol tilsatt for vasking, og løsningen ble tørket igjen; Dette metanolvasketrinnet ble gjentatt 2–3 ganger. Resten ble oppløst i 1 ml sterilt vann og overført til et kromatografisk hetteglass for testing. Deretter ble 0,2 mL av polysakkaridhydrolysatet tilsatt til et konisk sentrifugerør med propp, etterfulgt av 0,2 mL 0,5 mol/L natriumhydroksidløsning og 0,5 mL 0,5 mol/L PMP-metanolløsning. Blandingen ble vortexet og reagert i et 70 graders vannbad i 1 time. Etter reaksjonen ble 0,2 ml 0,5 mol/l saltsyre tilsatt for å nøytralisere natriumhydroksidet, 1 ml kloroform ble tilsatt, og blandingen ble vortexet for ekstraksjon tre ganger for å fjerne overskudd av PMP. Kloroformlaget ble kastet, 0,3 ml av det vandige laget ble tatt, og vann ble tilsatt for å gjøre opp til 1 ml. Deretter ble 0,2 ml av hver av de 11 monosakkaridstandardene derivatisert ved bruk av samme metode [14-15].

1.2.5 Fourier-transform infrarød spektroskopi (FT-IR) analyse

En passende mengde av hver av de fire polysakkaridfraksjonene ble plassert på prøvetrinnet til ATR-tilbehøret til det infrarøde spektrometeret, og FT-IR-målinger ble utført ved bruk av et Fourier-transform infrarødt spektrofotometer i frekvensområdet 4000–400 cm⁻¹ [16].

1.2.6 Analyse av skanningselektronmikroskopi (SEM).

Morfologien til de fire polysakkaridfraksjonene ble analysert ved bruk av SEM [17]. En liten mengde av hver polysakkaridfraksjon ble jevnt festet på en tynn kobberplate, og et lag med gullpulver ble fordampet på prøveoverflaten ved bruk av en ionesputter. Overflatemorfologien ble observert ved 5,00 kV.

1.2.7 Bestemmelse av in vitro antioksidantaktivitet

1.2.7.1 Bestemmelse av DPPH· Radical Scavenging Kapasitet

Konsentrasjonene av de fire polysakkaridfraksjonene ble satt til 1, 2, 3, 4 og 8 mg/ml, og den positive kontrollgruppen (Vc) ble også satt til de samme konsentrasjonene. Bestemmelsen ble utført i henhold til instruksjonene til DPPH·-radikalfangende kapasitetsanalysesettet.

1.2.7.2 Bestemmelse av superoksidanionfangende kapasitet

Konsentrasjonene av de fire polysakkaridfraksjonene ble satt til 0,5, 1, 2, 4 og 8 mg/ml, og den positive kontrollgruppen (Vc) ble også satt til de samme konsentrasjonene. Bestemmelsen ble utført i henhold til instruksjonene til analysesettet for superoksidanionfangende kapasitet.

1.2.7.3 Bestemmelse av total antioksidantkapasitet

Konsentrasjonene av de fire polysakkaridfraksjonene ble satt til 0,5, 1, 2, 4 og 8 mg/ml, og den positive kontrollgruppen (Vc) ble også satt til de samme konsentrasjonene. Bestemmelsen ble utført i henhold til instruksjonene til assaysettet for total antioksidantkapasitet.

1.2.7.4 Bestemmelse av ABTS⁺ radikal rensekapasitet

Konsentrasjonene av de fire polysakkaridfraksjonene ble satt til 0,5, 1, 2, 4 og 8 mg/ml, og den positive kontrollgruppen (Vc) ble også satt til de samme konsentrasjonene. Bestemmelsen ble utført i henhold til instruksjonene til ABTS-analysesettet for radikalfangende kapasitet.

1.3 Databehandling

Hvert eksperiment ble gjentatt tre ganger under de samme forholdene, og resultatene ble uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik. SPSS 21.0 programvare ble brukt for signifikansanalyse, med enveis ANOVA for enkeltfaktoranalyse; P < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Origin 2024 og GraphPad Prism 10.1.2 ble brukt til graftegning.

 

Råvarer av høy kvalitet

Referanser

[1] Statens farmakopékommisjon.Farmakopéen til Folkerepublikken Kina, bind I[M]. Beijing: China Pharmaceutical Technology Press, 2020.

[2] GUO Y, CAO L, ZHAO Q, et al. Foreløpige karakteriseringer, antioksidant og hepatobeskyttende aktivitet av polysakkarid fraCistanche deserticola [J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2016, 93: 678-685.

[3] ZHANG XY, JIANG QW, YANG SH, et al. Kjemometrisk analyse og integrert farmakologisk tilnærming for å dechiffrere effekten og mekanismen mellom rå og bearbeidetCistanche tubulosa [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 328.

[4] CHENG N, WANG H, HAO H, et al. Forskningsfremgang på polysakkaridkomponenter avCistanche deserticolasom potensielle farmasøytiske midler [J].European Journal of Medicinal Chemistry, 2023, 245.

[5] TAO J, ZHONG X, LIN H, et al. Potensialet, utfordringene og utsiktene til polysakkarider fra slektenCistanchesom terapeutiske midler for aldringsrelaterte sykdommer: En gjennomgang [J].International Journal of Biological Macromolecules, 2025, 312.

[6] ZHOU S, FENG D, ZHOU Y, et al. Analyse av de aktive ingrediensene og helseanvendelser avCistanche [J]. Grenser i ernæring, 2023, 10.

[7] ZHANG X, LIU Z, LI Z, et al. Ferroptose-veier: Avduking av den nevrobeskyttende kraften tilCistanche deserticolafenyletanoidglykosider [J].Journal of Ethnopharmacology, 2024, 333.

[8] CAI M, XING H, TIAN B, et al. Kjennetegn og antifatigue aktivitet av graderte polysakkarider fraGanoderma lucidumseparert av kaskademembranteknologi [J].Karbohydratpolymerer, 2021, 269: 118329.

[9] TANG W, LIU C, LIU J, et al. Rensing av polysakkarid fraLentinus edodesvannekstrakt ved membranseparasjon og dets kjemiske sammensetning og strukturkarakterisering [J].Mat Hydrokolloider, 2020, 105.

[10] Ainur Memetiturxun, GAO L, HUO SX, et al. Optimalisering av sentrifugalekstraksjonsprosess for Verbascoside ved bruk av Box-Behnken Response Surface Methodology [J].Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2022, 39(23): 3086-3091.

[11] JIN W, ZHOU H, ZHAO H, et al. Isolering, in vitro antioksidantkapasitet, hypoglykemisk aktivitet og immunaktivitetsvurdering av polysakkarider fraCoriandrum sativumL [J/OL].Antioksidanter, 2025, 14(2): 149. https://doi.org/10.3390/antiox14020149

[12] SPLITTGERBER AG, SOHL J. Ikke-linearitet i proteinanalyser ved Coomassie blue-fargebindingsmetoden [J].Analytisk biokjemi, 1989, 179(1): 198-201.

[13] CAI M, XING HY, XU J, et al. Gradert Separasjon avGanoderma lucidumRå polysakkarider ved bruk av membranteknologi og sammenligning av deres antioksidantaktiviteter [J].Matindustrivitenskap og teknologi, 2021, 42(10): 29-35.

[14] GUO Y, WANG L, LIU K, et al. En rask og nøyaktig UHPLC-metode for bestemmelse av monosakkarider i polysakkarider fra forskjellige kilder tilRadix Astragaliog dens immunaktivitetsanalyse [J/OL].Molekyler, 2024, 29(10): 2287. https://doi.org/10.3390/molecules29102287

[15] DU C, LIU X, ALGADI H, et al. Optimalisering av polysakkaridekstraksjon, monosakkaridsammensetning og antioksidantaktivitetsanalyse av forskjellige varianter avGastrodia elataBl. antennedeler [J].Biomassekonvertering og bioraffineri, 2023, 14(23): 29353-29365.[16] HONG T, YIN JY, NIE SP, et al. Anvendelser av infrarød spektroskopi i polysakkaridstrukturanalyse: Fremgang, utfordring og perspektiv [J].Matkjemi: X, 2021, 12. [17] ZHOU S, HUANG G. Ekstraksjon, strukturkarakterisering og biologisk aktivitet av polysakkarid fra kokosnøttskall [J].Kjemiske og biologiske teknologier i landbruket, 2023, 10(1).