Ta kontakt med:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Abstrakt:Druestokker er avfallsbiomasse fra vindyrking som inneholder bioaktive polyfenoler verdifulle inkosmetikk. Mens flere studier rapporterte de kosmetiske aktivitetene til E-resveratrol, beskrev bare noen få potensialet til E-ε-vinifera, den andre hovedbestanddelen av druestokkekstrakter (GCE), og ingen av dem undersøkte GCE som en naturlig blanding av polyfenoler for kosmetiske bruksområder. . I denne studien vurderte vi potensialet til GCE fra polyfenolrike druesorter som multifunksjonelle kosmetiske ingredienser. HPLC-analyse ble utført for å kvantifisere hovedpolyfenoler i GCE, dvs. katekin, epikatekin, E-resveratrol, E-piceatannol, ampelopsin A, E-ε-vinifera, hopeafenol, isohopeafenol, E-miyabenol C og E-vitamin B fra utvalgte kultivarer . Hudblekingpotensial gjennomtyrosinaseinhiberingsanalyse og aktiveringskapasiteten til cellelengdeprotein (SIRT1) til GCE ble sammenlignet med ren E-resveratrol og E-ε-vinifera. Medikamentlikhet til GCE-polyfenoler ble beregnet, noe som muliggjorde forutsigelse av hudpermeabilitet og biotilgjengelighet. Til slutt gjorde de nåværende dataene det mulig å vurdere GCE fra polyfenolrike varianter som multifunksjonelle kosmetiske ingredienser i samsvar med grønnkjemipraksis.

Nøkkelord:ekstrakter av druestokk; naturlige ingredienser; polyfenoler; E-resveratrol; E-e-vinifera; sirtuinaktivering;tyrosinaseinhibering; narkotika-lignelse

cistanche er en tyrosinasehemmer

1. Introduksjon

Bevisst design av nye hudpleieformuleringer basert på naturlige ingredienser har blitt et nøkkelspørsmål i kosmetikkindustrien, i samsvar med miljøansvar. Botaniske ekstrakter velges i henhold til deres sammensetning, biologiske aktivitet, stabilitet og hudpermeabilitet. Disse faktorene bestemmer den totale effektiviteten til ingrediensen og dens kosmetiske potensial. I dag er det en økende etterspørsel etter nye naturressurser med effektive hudpleiekomponenter som beskytter mot stresskilder, inkludert miljøforurensning, skadelig stråling samt feil kosthold og stressende livsstil [1]. I tillegg leter kunder etter miljøvennlig naturlig kosmetikk, og resirkulerte biomolekyler av planterester tilbyr nye perspektiver mot bærekraftig innkjøp.

Vindyrking (og vinsektoren) er en av de eldste og mest utviklede næringene i verden, hvor omtrent 80 prosent av grapefruktene brukes til vinproduksjon [2]. Det er velkjent at grapebær er en rik kilde til verdifulle forbindelser med helsemessige fordeler som antocyaniner, fenolsyrer, flavan-3-oler, flavonoler, proantocyanidiner, stilbenoider, melanin, fettsyrer, mineraler og vitaminer [2]. Vinproduksjon genererer forskjellige biomolekylrike biprodukter, inkludert avfall (skinn og frø), bunnfall, så vel som annet fast avfall som druestokker [3]. Blant dem representerer druevedbiomasse, som kastes etter vinterbeskjæring, et stort potensial for utvikling av nye naturlige kosmetiske ingredienser på grunn av en stor overflod og tilstedeværelsen av polyfenoler inkludert stilbenoider [2,4]. Tidligere studier rapporterte at valg av druesort er avgjørende når man utvikler polyfenolrik GCE [4–6].

E-resveratrol, en velkjent drueforsvarsforbindelse, viser flere biologiske aktiviteter, inkludert antioksidant [7], antikreft [8,9], soppdrepende [10] og anti-inflammatoriske egenskaper [11]. Det viser også betydelig aktivitet mot huden aldringsprosessen gjennomtyrosinasehemming [12,13], som er en nøkkelmekanisme for å hemme misfarging av huden. Prosessen med hudpigmentering er relatert til tilstedeværelsen av melanin og lipofuscin, hvorav overflødig og unormal fordeling i huden forårsaket mørke flekker. Ujevn hudtone er et av de viktigste symptomene på denne aldringsprosessen. Melanin dannes under påvirkning avtyrosinaseunder melanogenese, regulerer biosyntesen av vitamin D3, og øker hudens motstand mot solbrenthet og svulster [13,14]. Når lokal hyperpigmentering oppstår, kan det i tillegg til estetiske problemer også øke risikoen for melanom. Derfor kan tyrosinasehemmere som E-resveratrol være attraktive i kosmetikk- og medisinindustrien som depigmenteringsmidler [15].

I tillegg kan nedbremsingen av hudens aldringsprosesser også skje gjennom aktivering av naturlige celle-reparasjonsmekanismer. Det kan oppnås ved å bruke sirtuin-aktiverende forbindelser [1]. En stimulering av SIRT1-aktivitet, som opprettholder cellelevetid, transkripsjonsfaktorer og andre DNA-reparasjonsproteiner [16], har blitt rapportert å være avgjørende i kontrollen av oksidativt stress og i regulering av aldringsprosessen [17]. Sirtuiner reguleres normalt på transkripsjonsnivå, translasjon, proteinstabilitet og oksidasjon av naturlige hemmere som nikotinamid. Pattedyrsirtuiner som SIRT1 fungerer som transkripsjonsregulatorer for de utvalgte reseptorene og DNA-reparasjonsproteinene. De kontrollerer også energimetabolisme, celleoverlevelse, DNA-reparasjon, vevsregenerering, betennelsesmekanismer så vel som nevronal signalering [1].

Tilstedeværelsen av E-resveratrol og dets derivater i druestokker gir en flott mulighet for bruk av denne naturlige kosmetiske ingrediensen i kosmetikkindustrien som effektive antialdringsmidler viasirtuin-aktiverende ogtyrosinase-hemmende aktiviteter [1,16].

Kravene til moderne kosmetiske ingredienser inkluderer deres multifunksjonalitet, sikkerhet og effektivitet. Den bekreftede biologiske effekten av et aktivt molekyl er vanligvis ikke tilstrekkelig for å oppnå den innovative kosmetiske formuleringen. Tallrike fysisk-kjemiske egenskaper til en biologisk aktiv forbindelse er avgjørende for å sikre en generell nytte etter topisk applikasjon [18]. Biotilgjengelighet og hudpermeabilitet er begrensende faktorer for kosmetisk bruk av mange potensielle aktive stoffer [19]. Anvendelsen av naturlige forbindelser som kosmetiske ingredienser får en ny betydning når det gjelder naturlige ekstrakter, som inneholder en blanding av molekyler med forskjellige fysisk-kjemiske egenskaper. til dette faktum er det fortsatt et spørsmål om sammenligningen av hudabsorpsjon av rene forbindelser som E-resveratrol eller E-ε-vinifera med blandinger rike på stilbenoider (f.eks. GCE). Den fysisk-kjemiske karakteren til et rent stoff er det avgjørende. parameter som kan begrense dens permeabilitet. Fra et annet synspunkt vil bruken av slike blandinger sikre et bredt spekter av biologiske aktiviteter fra overflaten av stratum corneum, gjennom epidermis til dype lag av dermis.

I denne studien evaluerte vi det kosmetiske potensialet til GCE fra tidligere utvalgte polyfenolrike kultivarer [20] som multifunksjonelle foryngende midler gjennom to forskjellige mekanismer; (1) hudblekingviatyrosinaseinhibering ved bruk av enzymatiske analyser og dokkingdata, (2) forsinkelse av cellulær senescens ved bruk av sirtuin-aktiveringsanalyser. Aktivitetene til rene bestanddeler av GCE som E-resveratrol og E-ε-vinifera ble sammenlignet med GCE, en naturlig biokildeblanding av stilbenoider. Til slutt evaluerte vi tilgjengeligheten av hovedbestanddelene av GCE og deres evne til å trenge gjennom hudbarrieren.

2. Resultater og diskusjon

2.1. Konsentrasjon av polyfenoler i GCE

Konsentrasjonen av hovedpolyfenoler tilstede i GCE fra fem tidligere utvalgte kultivarer ble kvantifisert ved HPLC-analyser (tabell 1) [20]. Ti hovedforbindelser ble identifisert: to flavonoider (katechin, epicatechin) samt åtte stilbenoider (ampelopsin A, E-resveratrol, E-piceatannol, hopeaphenol, isohopeafenol, E-ε-vinifera, E-miyabenol C og E-vitamin B ). De kjemiske strukturene til forbindelsene er presentert i figur 1.

Åtte polyfenoler ble identifisert ved deres sammenligning med rene standarder, dvs. E-resveratrol, E-piceatannol, catechin, epicatechin, E-ε-vinifera, hopeafenol, ampelopsin A og E-vitisin B. To forbindelser (isohopeaphenol og E-miyabenol C) ble tildelt i henhold til elueringsrekkefølge, UV-spektra og MS-data fra litteraturen [21]. HPLC-analyser viste svært høye konsentrasjoner av totale polyfenoler i GCE fra de fem utvalgte kultivarer fra 16,8 prosent ± 7,4 prosent for Sauvignon til 39,4 prosent ± 3 prosent for Villard Noir. Savagnin blanc GCE inneholdt den høyeste konsentrasjonen i E-resveratrol (12,0 prosent ± 4,4 prosent ), mens Villard Noir GCE var preget av det høyeste innholdet i E-ε-vinifera (3,6 prosent ± 0 0,2 prosent) og E-vitisin B (17,2 prosent ± 1 prosent). Disse variantspesifikke polyfenolsammensetningene kan drive ulike nivåer av kosmetiske aktiviteter.

2.2. Sirtuin-aktivering

Som et første trinn evaluerte vi antialdringsvirkningen til GCE fra de fem kultivarer (Villard Noir, Sauvignon, Savagnin, Riesling og Magdeleine Noire des Charentes). Figur 2A presenterer resultatene av aktivering av sirtuin av to rene stilbenoider (E-resveratrol og E-ε-viniferin) i et konsentrasjonsområde på 1–100 µM sammenlignet med nikotinamid som negativ kontroll.

Som vist i figur 2A, sammenlignet med kontrollprøven, var den effektive konsentrasjonen av begge sirtuinaktivatorene (E-resveratrol og E-ε-viniferin) minst 5 µM og nådde en 3- ganger økning ved 100 µM.E- resveratrol ble bedt om litt høyere SIRT1-aktivering (fra 130 prosent ± 13 prosent for 5 µM til 307 prosent ± 30 prosent for 100 µM) sammenlignet med E-ε-viniferin (henholdsvis 95 prosent ± 15 prosent og 280 prosent ± 24 prosent).

Det er allerede kjent at E-resveratrol viser en gunstig aktivitet for den menneskelige organismen gjennom aktiveringen av SIRT1. Horwitz et al., 2003 [16] rapporterte at E-resveratrol senker MichaelisMenten-konstanten til SIRT1 og øker celleoverlevelsen ved å stimulere SIRT1-avhengig deacetylering av p53. I gjær etterligner E-resveratrol kalorirestriksjon ved stimulering av SIR2, øker DNA-stabiliteten og forlenger levetiden med 70 prosent. Stacchiotti et al. (2016) [22] bekreftet at den første funksjonen til E-resveratrol er å redusere betennelse og begrense oksidativ skade i vev. Antialdringsegenskapene til E-resveratrol via SIRT1-aktivering er også assosiert med forbedring av oksidativ metabolisme i viktige organer som hjerte, kar, muskler og nyrer [22]. I andre studier, i nærvær av en SIRT1-hemmer som nikotinamid, stimulerte E-resveratrol SIRT1 [16]. Dessuten ble konsentrasjonsavhengige effekter observert for aktiviteten. Dessuten, ved stimulering av SIRT1-avhengig deacetylering av p53, øker E-resveratrol-molekylet celleoverlevelse under ugunstige forhold [16]. Det har også blitt vist at E-resveratrol har evnen til å beskytte menneskelige celler mot lipidskader, noe som kan ha betydning for å forhindre nedbrytning av lipofile hudbarrierestrukturer. Selv om den fullstendige mekanismen for E-resveratrol-aktivitet fortsatt gjenstår å bli fullstendig forklart av ytterligere studier, er sirtuin-aktiveringen hovedaktiviteten til E-resveratrol når det gjelder å etablere de ulike helsefordelene [23]. Til tross for en godt beskrevet sirtuin-aktivering av E-resveratrol [1,16], svært lite er fortsatt kjent om effekten av E-ε-viniferin. Den beskyttende rollen til E-ε-viniferin ble beskrevet av Fu et al. (2012) [24] i Huntingtons sykdomscellemodeller. Det ble demonstrert at E-ε-viniferin reduserer nivået av reaktive oksygenarter (ROS) og forhindrer tap av mitokondriell membranpotensial i celler som uttrykker mutantHuntington-proteinet. Ekspresjonen av dette proteinet resulterer i den reduserte deacetylaseaktiviteten til SIRT3, og fører som et resultat til en reduksjon i cellulære NAD(pluss)-nivåer og mitokondriell biogenese i cellene. I følge studiene aktiverer E-ε-viniferin AMP-aktivert kinase og forbedrer mitokondriell biogenese [24]. I vår forskning demonstrerte vi at E-ε-viniferin var en sirtuin-aktivator ekvivalent med E-resveratrol. Vi testet videre potensialet til GCE polyfenolrikt naturlig ekstrakt for å aktivere SIRT1. Det meste av GCE (Riesling, Magdeleine Noire, Villard Noir og Savagnin) viste en relativt høy SIRT1-aktivering sammenlignet med kontrollprøven. Riesling var den mest lovende kultivaren, med 171 prosent SIRT1-aktivering, etterfulgt av Magdeleine Noire (165 prosent), Villard Noir (162 prosent) og Savagnin (142 prosent). Bare GCE fra Sauvignon viste ingen induksjonseffekt for SIRT1. SIRT1-aktivering av GCE fra Magdeleine Noire, Villard Noir og Savagnin var minst ekvivalent med aktivering med 5 µME-resveratrol. De første sirtuin-aktivatorene ble oppdaget for SIRT1 i 2003, og den mest potente var E-resveratrol [1]. Flere studier beskrev også SIRT1-aktivering av botaniske ekstrakter. Corbi et al., (2018) rapporterte lovende resultater for sitronbikost (Lippia citriodora), reddik (Raphanus sativus) og tomat (Solanum Lycopersicum) ekstrakter [25]. Wang et al. rapporterte også sirtuin-induksjonsaktiviteten til tradisjonelle kinesiske medisiner. Milkvetch (Astragalus membranaceus), kinesisk ginseng (Panax ginseng) og tre-syv rot (Panax notoginseng) er rapportert å ha beskyttende effekter mot oksidativ stress i mitokondrier. Resultatene viste at disse ekstraktene forbedret den deacetylerte aktiviteten til SIRT1 og hemmet dannelse av intracellulær reaktive oksygenarter [26]. Da representerer GCE lovende naturlige ingredienser for hudforyngelse, spesielt sammenlignet med de sterke SIRT1-aktivatorene som E-resveratrol og E-ε-viniferin. Det har blitt vist at sirtuin-regulering av E-resveratrol og dets derivater virker via komplekse direkte interaksjoner på en isoformspesifikk måte [27]. Resveratrol hemmer menneskelig SIRT3 og stimulerer SIRT5 og SIRT1 avhengig av komplekse bindinger med den katalytiske lommen.

2.3. Tyrosinase-hemming

2.3.1. Enzymanalyse

Figur 3A visertyrosinaseinhibering av to rene stilbenoider (E-ε-viniferin og E-resveratrol) og figur 3B viser tyrosinaseinhibering av GCE fra utvalgte kultivarer sammenlignet med kojinsyre, E-resveratrol og E-ε-viniferin som positive referanseforbindelser.

Som vist i figur 3B, er alle testede GCE så vel som E-resveratrol, E-ε-viniferin relativt aktive tyrosinasehemmere. Det høyeste potensialet ble vist for E-ε-viniferin (76 prosent ±2 prosent) og E-resveratrol (75 prosent ± 4 prosent). GCE presenterte ulike kapasiteter til å hemmetyrosinase. Riesling og Villard Noir GCE var de mest aktive med hemmingsnivåer på henholdsvis 62,5 prosent og 58,5 prosent. Magdeleine Noire des Charente GCE (42,5 prosent) og Savagnin GCE (39,5 prosent) viste også relativt sterketyrosinasehemmingsaktivitet, mens Sauvignon GCE var mindre effektiv, men med et ganske effektivt hemmingsnivå (30,4 prosent ). Vitis vinifera L. bladekstrakter ble allerede nevnt i litteraturen som naturlige kilder til tyrosinasehemmere [28]. Et E-resveratrol-derivat, oksyresveratrol, ble vist å hemme brunfarging i grumsete eplejuice ved en konsentrasjon så lav som 0.01 prosent. Det ble funnet at denne stilbenoid var omtrent 0,2 prosent kraftigere enn kojinsyre [29].

Selv om druestokker akkumulerte mye mer stilbenoider enn drueblader, er tyrosinaseinhiberingsanalyser på druestokker uten sidestykke. Tyrosinaseinhibering av GCE sammenlignet med referanseforbindelser med kjenteblekingaktivitet som E-resveratrol og E-ε-viniferin bekreftet potensialet til GCE som nye kosmetiske aktive ingredienser. Den nåværende studien viste at alle GCE-testede var svært kraftige tyrosinasehemmere, noe som er avgjørende for å vurdere deres potensiale som hudblekingsmidler.

2.3.2. IC50 Bestemmelse

Den kinetiske oppførselen til sopptyrosinaseunder inhibering av E-resveratrol og E-ε-viniferin ble studert. De kinetiske parameterne for sopptyrosinase hentet fra et Lineweaver-Burkplot for hemming av E-resveratrol (Figur 4A, linje 1) viser at Km var lik 1.02 (0 µM, kontroll) til 3,43 (100 µM) mM og Vmax var lik 74,63 µM/min (0 µM, kontroll) mot et gjennomsnitt lik 66,38 ± 6,44 µM/min for de forskjellige testede E-resveratrolene konsentrasjoner. Et Lineweaver-Burk-plott for inhibering av E-ε-viniferin (Figur 4B, linje 2) viser at Km var lik 1,02 (0 µM, kontroll) til 7,63 (100 µM) mM og Vmax var lik 74,63 µM/min (0) µM, kontroll) versus et gjennomsnitt lik 73,01 ± 1,14 µM/min for de forskjellige testede E-resveratrol-konsentrasjonene. Resultatene presentert i figur 4 viste at både E-resveratrol og E-ε-viniferin er konkurrerende hemmere fordi økning av konsentrasjonen av forbindelsene resulterte i en linje med felles avskjæring på 1/v-aksen, men med forskjellige skråninger. Inhiberingskonstantene for hver inhibitor, KI for binding til det frie enzymet (for å danne EI-komplekset), og KIS for bindingen til enzym-substratkomplekset (for å danne ESI-komplekset) ble bestemt ved å bruke det sekundære plottet og det sekundære replotten (Figur 4), hhv. De sekundære plottene som representerte helninger (Km/Vmax) av de doble resiproke plottene mot inhibitorkonsentrasjonen tillot oss å beregne en EI-dissosiasjonskonstant (KI) på 46,25 og 24,22 µM for henholdsvis E-Resveratroland E-ε-viniferin. De sekundære replottene, som representerte avskjæringer av den doble gjensidige forholdet mot inhibitorkonsentrasjonene, tillot oss å beregne en ESI-dissosiasjonskonstant (KIS) på 364.86 og 2355.73 µM for henholdsvis E-resveratrol og E-ε-viniferin. Derfor, hvis disse beregningene foreslo en antatt binding som kunne oppstå enten til det frie tyrosinase-enzymet eller til tyrosinaseenzymet assosiert med dets substrat (nåværende resultater med 7.9- og 97.3- ganger høyere verdier av KIS for E -resveratrol og E-ε-viniferin, henholdsvis), antydet disse resultatene sterkt en mye svakere bindingsaffinitet til tyrosinase-enzym-substratkomplekset i stedet for til det frie tyrosinase-enzymet, og indikerer dermed at den dominerende hemmingsmekanismen til hver inhibitor er konkurransedyktig.

Vi beregnet IC50-verdier på 52,93 µM for E-ε-viniferin og 60,75 µM for E-resveratrol. Disse IC50-verdiene var innenfor områdene til de som er rapportert i litteraturen [13].

Den nåværende studien viste at E-resveratrol og E-ε-viniferin hemmer enzymet veldig effektivt. GCE stilte også uttyrosinasehemming på et relativt høyt nivå. Tidligere rapporter viste at E-ε-viniferin er den mest aktive tyrosinasehemmeren, med en IC 50=4.1 µM. Den er fire ganger sterkere enn kojinsyre (IC50=16.9 µM), og 62- ganger mer aktiv enn askorbinsyre (IC50=255 µM) til å hemme tyrosinase. E-resveratrol har en moderat hemmende aktivitet (IC50=52.8 µM), ganske lik toarbutin (IC50=55.1 µM) [12].

2.4. Molekylær dokking for binding av E-resveratrol og E-ε-viniferin med Tyrosinase2.4. Molekylær dokking for binding av E-resveratrol og E-ε-viniferin med tyrosinase

Figur 5 viser dokkingdataene laget for E-resveratrol og E-ε-viniferin. Resultatene av dokkingdataene indikerer tydelig at E-resveratrol og E-ε-viniferin utviste tyrosinaseinhiberingspotensial. Imidlertid er affiniteten for E-ε-viniferin litt høyere med en beregnet affinitet på -7,73 versus -5,95 kcal/mol som en konsekvens av interaksjoner med His85 og His244 gjennom hydrogenbundne og π-π-stabling versus kun én hydrogenbundet interaksjon med Met280 for henholdsvis E-ε-viniferinversus E-resveratrol. Begge affinitetene var sterkere for disse to stilbenoidene enn den som ble observert for kojinsyre (-5,7 kcal/mol [30]), så vel som for glabridin (-7,15 kcal/mol [31]) ved bruk av en lignende tilnærming. Sammenlignet med l-DOPA binder disse to stilbenoidene seg tiltyrosinasepå samme sted, og bekrefter dermed deres kompetitive hemmingsmekanisme [31]. Affiniteter for disse to stilbenoidene var i området som ble observert for l-DOPA (dvs. -6,98 kcal/mol [31]).

Resultatene bekreftet de tidligere enzymanalyseresultatene, der E-ε-viniferin var en mer potent tyrosinasehemmer enn E-resveratrol.

TyrosinaseDysfunksjoner utvikler seg med aldring og kan føre til malignt melanom, samt pigmentforstyrrelser som fregner eller melisma [17]. E-resveratrol og E-ε-viniferin-rik GCE er et godt alternativ som en naturlig kilde til disse stilbenoidene for forebygging av enkelte pigmenteringssykdommer.

2.5. Biotilgjengelighet og hudpermeabilitetspotensial

Figur 6 viser de avgjørende fysisk-kjemiske egenskapene til hovedbestanddeler av GCE som bestemmer deres totale biotilgjengelighet og hudpermeabilitet.

Permeabilitetsevalueringen evaluerer ved første øyekast evnen til hudpenetrering av et molekyl. Rosa sentrale soner i radarkartene i figur 6 representerer den optimale rekkevidden for hver eiendom. Fordelingskoeffisienten logaritmen logP (lipofilisitet) skal oppnå verdier mellom −0.7 og pluss 5.0, molekylvekt (molekylstørrelse) skal være mellom 150 og 500 g/M , polaritet (topologisk polar overflateareal, TPSA) bør ligge mellom 20 og 130 Å2, løselighet (log S) bør ikke være høyere enn 6, metning (fraksjon av karboner i sp3-hybridiseringen) bør ikke være mindre enn 0,25 og fleksibilitet ikke mer enn 9 roterbare bindinger [32]. Basert på disse beregningene ble det evaluert at GCE-molekyler som mest sannsynlig vil bli absorbert i kroppen er katekin og epicatechin (med samme fysisk-kjemiske egenskaper), E-resveratrol, E-piceatannol samt ampelopsin A. Disse molekylene ble karakterisert av propermolekylær størrelse , elektronfordeling, polaritet og molekylkarakter. Molekyler karakterisert av høyere molekylvekt som E-miyabenol C, E-vitisin B, samt hopeafenol og isohopeafenol (med de samme fysisk-kjemiske egenskapene), fra et fysisk-kjemisk synspunkt, er bemerkelsesverdige å bli assimilert ettersom de knapt overvinner de fysiske barrierene som f.eks. membraner, så vel som dermis. E-ε-vinifera oppfyller flertallet av reglene som kreves for god hudpermeabilitet. Polariteten, lipofilisiteten, uløseligheten, fleksibiliteten og molekylstørrelsen til molekylene ble estimert ved matematiske ligninger. Verdt å påpeke er det faktum at beregningene kun er estimeringsmetoder for den totale hudpermeabiliteten, og dermale penetrasjonstester vil være nødvendig for å bekrefte forutsigelser.

I løpet av de siste tiårene ble det etablert forskjellige regelsett, som bidro til å definere passende spådommer om medikamentabsorpsjon. De mest populære kriteriene er Lipinskis regel om fem [33], men flere andre tilnærminger er også tilgjengelige [34–37]. Tabell 2 presenterer informasjonen om GCE-polyfenolers samsvar med vanlige kjente biotilgjengelighetsregler: Lipinski (MW < 500,="" logp="">< 4,15,="" antall="" nor="" o-atomer="">< 10,="" antall="" n-="" eller="" oh-grupper="">< 5)="" [="" 33],="" ghose="" (160="">< mw="">< 480,="" −0,4="">< logp="">< 5,6,40="">< mw="">< 130,="" 20="">< antall="" atomer="">< 70)="" [34],="" veber="" (antall="" roterbare="" bindinger="">< 10,="">< 140)="" [35],="" egan="" (logp="" <="" 5.88,="" tpsa="" <="" 131.6)="" [36]="" and="" muegge="" (200="" <="" mw="" <="" 600,="" −2="" <="" logp="" <="" 5,="" tpsa="">< 150,="" numbers="" of="" rings="" <="" 7,="" number="" of="" carbons="" >="" 4,="" number="" of="" heteroatoms="" >="" 1,="" number="" of="" rotatable="" bonds="" <="" 15,="" nha="" <="" 10,="" nhd="" <="" 5)="">

Basert på disse beregningene kan det med relativt stor sannsynlighet angis hvilke strukturer som mest sannsynlig trenger gjennom hudbarrieren. GCE polyfenoler karakterisert med MW over 500 g/mol (hopeafenol, isohopeafenol, E-miyabenol C og E-vitisin B) er samtidig for lipofile (logP > 5) og karakterisert ved feil elektronfordeling (TPSA > 140) samt hydrogenbindingsegenskaper (NHD > 5 eller NHA > 10). Videre kan molekylære volumer av disse molekylene begrense deres hudabsorpsjon, og fra et romlig synspunkt vil deres molekylære bindingsbrudd i tillegg begrense deres evne til å være aktive i hudstrukturene. Slike forbindelser, etter topisk påføring, forblir som en rest på overflaten eller, avhengig av hudforhold, penetrerer de bare ytre lag av det hydrofobe stratum corneum. Hudbarriereegenskaper er basert på lipid-dobbeltlag. De vellykkede transdermale legemidlene har blitt begrenset av parameterterskler som er enda mer restriktive enn femteregelen [19]. Derfor forklarer nylig tilgjengelige statistiske beregninger svært nøyaktige regler for transdermale ruter for aktive stoffer. Basen er hovedsakelig på deres fysisk-kjemiske parametere. De nye tersklene for gjeldende transdermale legemidler er MW < 335,="" nhd="" mindre="" enn="" eller="" lik="" 2,="" nha="" mindre="" enn="" eller="" lik="" 5,="" og="" logp="">< 5="">

Til tross for deres manglende evne til å overvinne stratum corneum-barrieren, er høymolekylære stilbenoider (trimere og tetramerer av resveratrol) fortsatt av høy interesse på grunn av deres gunstige aktiviteter for huden. Som allerede vist i mange studier, viser disse metabolittene sterke antioksidantegenskaper [38], og parallelt, på grunn av deres karakter, utmerker de seg ved høy kompartment til intercellulære komponenter og den lipofile beskyttende barrieren i huden. I tilfeller av skadelige forhold og overtørket hud, kan disse polyfenolene spille en viktig rolle som aktive mykgjøringsmidler med regenererende og antioksidantevne på hudens overflate [39].

Tatt i betraktning de ovennevnte reglene for hudpenetrering, er de mest potente kandidatene for kosmetiske aktive ingredienser katekin, epicatechin, E-piceatannol, E-resveratrol og E-ε-vinifera. Våre beregninger forutsier at disse polyfenolene kan overvinne hudbarrierer og virke innenfor strukturen til dermis, noe som er spesielt viktig med hensyn til deres aktivitet for enzymatiske funksjoner i huden. Bekreftet evne til å moduleretyrosinaseog sirtuin-aktivitet og deres gode prediksjon for hudpenetrering gjør at lavmolekylære stilbenoider (monomerer og dimerer av resveratrol) som E-resveratrol og E-ε-vinifera kan fungere som foryngende ogblekingagenter. I tillegg sikrer deres høye antioksidantaktivitet effekter på flere nivåer for hudceller. GCE er blandinger av polyfenoler, som viser forskjellige biologiske aktiviteter og er preget av forskjellige fysisk-kjemiske egenskaper. Derfor sikrer ekstraktene flerveis terapeutiske effekter samt effektiv beskyttelse for menneskelig hud.

Derfor kan det hevdes at polyfenolrik GCE vil være mer fordelaktig i hudpleiebehandlinger enn innkapslede rene stilbenoider [22]. Ytterligere eksperimenter på hudmodeller er fortsatt nødvendig for å bekrefte potensialet til GCE som en naturlig multifunksjonell ingrediens for miljøvennlig dermo-kosmetikk.

3. Materialer og metoder

3.1. Kjemikalier og reagens

E-resveratrol og andre standarder ble kjøpt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). E-ε-vinifera ble renset fra druestokker som tidligere beskrevet [40]. Sopptyrosinaseløsning og L-DOPA ble oppnådd fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Ultrarent vann ble oppnådd fra et Millipore Milli-Q vannrensesystem (Merck Millipore, by, Tyskland).

3.2. Plantemateriale

Druestokker fra fem utvalgte varianter (Villard Noir, Sauvignon, Savagnin, Riesling og Magdeleine Noire des Charentes) ble høstet i januar 2016 på INRA druelageret "Domaine de Vassal" (34340 Marseillan-Plage, Frankrike: http://www. .1.montpellier.inra.fr/vassal).Tjuefem druestilker ble høstet for hver sort etter beskjæring av fem stilker fra fem forskjellige vinstokker. Druestilker ble kuttet i 10 cm lange seksjoner og lagret i 10 uker ved 20 ◦C i mørket, noe som muliggjorde akkumulering av E-resveratrol og E-piceatannol etter høsting. Deretter ble druestilkene først malt med en avkjølt analytisk kvern (Ika-Werke, Staufen, Tyskland) og i tillegg med en skjærekvern (Polymic PX-MFC 90 D, Kinematica AG, Luzern, Sveits) for å oppnå 1 mm store partikler. Pulveret ble lyofilisert og lagret ved -20 ◦C inntil ekstraksjon [41]. Totalt ble 20 g tørket pulver ekstrahert med 500 ml etanol/vann-blanding (60/40; v/v). Prøver ble ekstrahert i 45 minutter under tilbakeløp ved 83 ◦C og filtrert. Deretter ble supernatanter fordampet ved bruk av en Heidolph 94200 rotavapor (Bio-blokk, Schwabach, Tyskland) kombinert med en vakuumpumpe (Vacuubrand PC500-serien, Wertheim, Tyskland). De resulterende ekstraktene ble lyofilisert, noe som ga tørket GCE tilgjengelig for ytterligere in vitro-analyser.

3.3. HPLC-analyser

HPLC-systemet var laget av en Waters 717 pluss autosampler, en Waters 996 fotodiodearraydetektor og en Waters 600-kontrollerpumpe (Waters, Milford, MA, USA) og ble kontrollert av Empower 2-programvaren (Waters , Milford, MA, USA). Vi oppnådde analyttseparasjon gjennom injeksjon av 20 µL ekstrakter på en kolonne pakket med 3 µm partikler (250 × 4 mm, Multospher 120 RP18HP;CS-Service, Langerwehe, Tyskland) ved 24 ◦C. Den mobile fasen var laget av 0,1 prosent fosforsyre (løsningsmiddel A) og acetonitril (løsningsmiddel B) pumpet ved 0,5 ml min−1. Vi brukte en lineær gradient som startet på 5 prosent B og økte til 72,5 prosent på 60 minutter. Kvantifisering ble gjort ved bruk av ren standard ved bruk av en fempunkts kalibreringskurve (0–100 ppm) i Maxplot-deteksjonsmodus. Isohopeafenolen ble kvantifisert ved å bruke hopeafenolkalibreringskurven.

3.4. Sirtuin-aktivering

Evaluering av Sirtuin-aktivering (SIRT1) ble utført ved bruk av GCE ved 50 µg/ml sammenlignet med 10 µM rent E-resveratrol og E-ε-viniferin (som aktivatorer) og nikotinamid (som inhibitor). SIRT1-aktivitet ble bestemt ved bruk av SIRT1 Analysesett (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) følger produsentens instruksjoner og bruker et fluorescerende spektrometer (Biorad VersaFluor, Marnes-la-Coquette, Frankrike) satt med 340 nm eksitasjon og 430 nm emisjonsbølgelengder. Den relative SIRT1-aktiviteten ble avslørt som en relativ prosentandel til den tilsvarende kontrollen (tilsetning av samme volum av ekstraksjonsløsningsmiddel) for hvert ekstrakt.

3.5. Tyrosinase-hemming

3.5.1. Enzymanalyse

Tyrosinaseinhiberingsanalysen ble målt som beskrevet av Neely et al. (2009) [42]. Hver 1 mLassay inneholdt en sluttkonsentrasjon på 100 mM natriumfosfat (pH 6,5) og 2 mM L-DOPA. Til slutt ble 0,2 mg/ml sopp-tyrosinase-løsning (Sigma-Aldrich) tilsatt til blandingen. Kontroll, med en lik mengde av ekstraksjonsløsningsmiddel som erstatter ekstraktet, ble rutinemessig utført. Reaksjonsprosesser ble sporet ved å bruke en mikroplateleser (BioTek ELX800; BioTek Instruments Inc., Winooski, VT, USA) ved en bølgelengde på 475 nm. Detyrosinaseinhiberende effekt ble uttrykt som en prosent av inhibering i forhold til den tilsvarende kontroll for hvert ekstrakt. Standardforbindelseskonsentrasjoner brukt i en studie var 100 µM og konsentrasjonen av testede ekstrakter var 50 µg/ml. Eksperimentene ble gjentatt tre ganger og gjennomsnittsresultatene med standardavviksverdier ble gitt i figur 3B.

Cistanche hemmer tyrosinaseekspresjon

3.5.2. IC50 Bestemmelse

For å anta omfanget av inhibitormengder som trengs for beregning av IC50-verdien, ble forskjellige konsentrasjoner av E-resveratrol og E-ε-viniferin brukt. Analysene som ble brukt for beregningene ble utarbeidet innenfor området for inhibitorer fra 1 til 100 µM. Ved en betydelig endring i formen på aktivitetstidskurven, ble ratene beregnet basert på steady-state rateregioner. Konsentrasjonen av inhibitor som forårsaket 50 prosent hemming av tyrosinaseaktivitet ble ekstrapolert fra prosent aktivitet-hemmerkurver [42]. Eksperimentene ble gjentatt tre ganger og gjennomsnittet av IC50-verdiene ble gitt i figurene 4A og 4B.

3.6. Dokkingdata for binding av E-resveratrol og E-ε-viniferin med tyrosinase

Molekylær dokkingsimulering av E-resveratrol og E-ε-viniferin ble utført med Ligplot plus-programvare (European Bioinformatics Institute, Cambridge, Storbritannia), autodock Vina (The Scripps ResearchInstitute, La Jolla, CA, USA) og Pymol v2.1.1 ( Schrodinger, New York, NY, USA) for å forutsi konformasjonen av disse molekylligandene innenfor det passende målbindingsstedet tiltyrosinase(PDB: 2Y9X).

3.7. Biotilgjengelighet og hudpermeabilitetspotensial

Potensial for medikamentlikhet så vel som hudpermeabilitet, som avgjørende faktorer for aktiv molekyleffektivitet, kan defineres som en kompleks balanse mellom ulike fysisk-kjemiske egenskaper og strukturelle egenskaper som avgjør om molekylet ligner de kjente medikamentene. Disse egenskapene, hovedsakelig hydrofobicitet, elektronisk distribusjon, hydrogenbindingsegenskaper, molekylstørrelse, fleksibilitet og tilstedeværelsen av ulike farmakoforiske egenskaper, påvirker oppførselen til molekyler i en levende organisme, inkludert biotilgjengelighet, transportegenskaper, affinitet til proteiner, reaktivitet, toksisitet, metabolsk stabilitet og mange andre [43]. Enkle tellekriterier (som grenser for molekylvekt, logP eller antall hydrogenbindingsdonorer eller akseptorer) har også relativt begrenset anvendelighet og er kun nyttige for å forkaste noen av de potensielle aktive molekylene fra videre forskning [19]. Verdiene for Molecular PolarSurface Area (TPSA) for alle strukturene ble beregnet basert på metodikken publisert av Ertl et al. [44] som en sum av fragmentbidrag i hele molekylet. O- og N-sentrerte polarfragmenter ble også vurdert. Metode for beregning av molekylvolum samt partisjonskoeffisient logaritme (log) verdier ble utviklet ved bruk av SwissADME [32]. 3D molekylære geometrier for et treningssett ble fullstendig optimalisert ved den semi-empiriske AM1-metoden [45,46]. Lipinskis "Rule ofFive" sier at de fleste "medikamentlignende" molekyler har logP Mindre enn eller lik 5, molekylvekt Mindre enn eller lik 500, antall hydrogenbindingsakseptorer Mindre enn eller lik 10, og antall hydrogenbindingsgivere Mindre enn eller lik 5. Molekyler som bryter mer enn én av disse reglene kan ha svært lav eller ingen biotilgjengelighet i det hele tatt [33]. Biologisk aktivitetsprediksjonsberegninger er basert på Bayesiansk statistikk for å sammenligne strukturer av representative ligander aktive på det bestemte målet med strukturer av inaktive molekyler og for å identifisere understrukturtrekk (som igjen bestemmer fysisk-kjemiske egenskaper) typiske for aktive molekyler [47].

4. Konklusjoner

Polyfenol-anriket GCE var i stand til å aktivere SIRT1 på lignende nivåer som 5 µM E-resveratrol eller E-ε-viniferin. Hudblekingpotensial viatyrosinaseinhiberingsanalyse viste at GCE-kapasiteten var sammenlignbar med ren E-resveratrol og E-ε-viniferin. Spesielt Villard Noir og Riesling GCE kan være nyttige som hudlysende midler og kan brukes mot mørke flekker i dermo-kosmetikk. I tillegg viste medikamentlikhet til GCE-komponenter forskjellige evner i hudgjennomtrengning, noe som ga tilstrekkelig effektivitet i forskjellige dermisstrukturer. Hudfysiologiske prosesser støttet av disse aktive forbindelsene sikrer de riktige hudbarrierefunksjonene samt effektiv gjenoppretting av hudvev. Avslutningsvis er den potensielle anvendelsen av GCE av enorm interesse, ikke bare for industrien, men også for forbrukere som i økende grad etterspør naturlige ingredienser, som kreves i den såkalte "økokosmetikken".

Referanser

1. Bonkowski, MS; Sinclair, DA Bremse aldring ved design: Fremveksten av NAD pluss og sirtuin-aktiverende forbindelser. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2016, 17, 679–690. [CrossRef]

2. Nunes, MA; Rodrigues, F.; Oliveira, MBPP Druebehandling av biprodukter som aktive ingredienser for kosmetiske forslag. I Handbook of Grape Processing Bi-Products: Sustainable Solutions; Elsevier Inc.: Wien, Østerrike, 2017; s. 267–292. ISBN 9780128098714.

3. Piñeiro, Z.; Guerrero, RF; Fernandez-Marin, MI; Cantos-Villar, E.; Palma, M. Ultralydsassistert utvinning av stilbenoider fra druesteng. J. Agric. Food Chem. 2013, 61, 12549–12556. [CrossRef]

4. Houillé, B.; Besseau, S.; Delanoue, G.; Oudin, A.; Papon, N.; Clastre, M.; Simkin, AJ; Guérin, L.;Courdavault, V.; Giglioli-Guivarc'H, N.; et al. Sammensetning og vevsspesifikk distribusjon av stilbenoidsin-druestokker påvirkes av dunet muggtrykk i vingården. J. Agric. Food Chem. 2015, 63.[CrossRef]

5. Lambert, C.; Richard, T.; Renouf, E.; Bisson, J.; Waffo-Téguo, P.; Bordenave, L.; Ollat, N.; Mérillon, J.-M.; Cluzet, S. Comparative Analyzes of Stilbenoids in Canes of Major Vitis vinifera L. Cultivars. J. Agric. Food Chem.2013, 61, 11392–11399. [CrossRef] [PubMed]

6. Çetin, ES; Altinöz, D.; Tarçan, E.; Göktürk Baydar, N. Kjemisk sammensetning av druestokker. Ind. Avlinger Prod.2011, 34, 994–998. [CrossRef]

7. Torres, P.; Avila, JG; De Vivar, AR; García, AM; Marín, JC; Aranda, E.; Céspedes, CL Antioksidant- og insektvekstregulerende aktiviteter av stilbener og ekstrakter fra Yucca periculosa. Phytochemistry 2003,64, 463–473. [CrossRef]

8. Xue, YQ; Di, JM; Luo, Y.; Cheng, KJ; Wei, X.; Shi, Z. Resveratrol-oligomerer for forebygging og behandling av kreft. Oksyd. Med. Celle. Longev. 2014, 2014. [CrossRef]

9. Jang, M.; Cai, L.; Udeani, GO; Bremse, KV; Thomas, CF; Beecher, CWW; Fong, HHS; Farnsworth, NR; Kinghorn, AD; Mehta, RG; et al. Kreft kjemopreventive aktivitet av resveratrol, et naturlig produkt avledet fra druer. Science 1997, 275, 218–220. [CrossRef]

10. Adrian, M.; Jeandet, P.; Veneau, J.; Weston, LA; Bessis, R. Biological Activity of Resveratrol, a Stilbenic Compound from Grapevines, Against Botrytis cinerea, the Causal Agent for Grey Mold. J. Chem. Ecol. 1997,23, 1689–1702. [CrossRef]

11. Liu, F.; Tsai, Y.; Tsai, H.; Yu, H. Antiinflammatoriske og organbeskyttende effekter av resveratrol ved traume-hemoragisk skade. Mediators Inflammation 2015, 2015, 38–42. [CrossRef]

12. Morel-Salmi, C.; Julia, A.; Vigor, C.; Vercauteren, J. En enorm PVDF-adsorpsjonsforskjell mellom resveratrol og ε-vinifera gjør det mulig å rense dem kvantitativt og vurdere deres antityrosinase-egenskap.Chromatographia 2014, 77, 957–961. [CrossRef] [PubMed]

13. Honisch, C.; Otto, A.; de Matos, AD; Vincenzi, S.; Ruzza, P. Isolering av en tyrosinaseinhibitor fra umodne druerjuice: En spektrofotometrisk studie. Food Chem. 2019, 305, 125506. [CrossRef] [PubMed]

14. Skoczy ´nska, A.; Budzisz, E.; Trznadel-Grodzka, E.; Rotsztejn, H. Melanin og lipofuscin som kjennetegn på hudaldring. Postep. Dermatologi og Alergol. 2017, 34, 97–103. [CrossRef] [PubMed]

15. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Hassan Khan, MT; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AAA omfattende gjennomgang av tyrosinasehemmere. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 279–309. [CrossRef]

16. Howitz, KT; Bitterman, KJ; Cohen, HY; Lamming, DW; Lavu, S.; Wood, JG; Zipkin, RE; Chung, P.; Kisielewski, A.; Zhang, LL; et al. Små molekylaktivatorer av sirtuiner forlenger Saccharomyces cerevisiae levetid. Nature 2003, 425, 191–196. [CrossRef]

17. Abbasi, BH; Siddiquah, A.; Tungmunnithum, D.; Bose, S.; Younas, M.; Garros, L.; Drouet, S.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Hano, C. Isodon rugosus (Wall. ex Benth.) torsk in vitro kulturer: Etablering, fytokjemisk karakterisering og in vitro antioksidant- og antialdringsaktiviteter. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20.[CrossRef]

18. Malinowska, M.; Miroslaw, B.; Sikora, E.; Ogonowski, J.; Wojtkiewicz, AM; Szaleniec, M.; Pasikowska-Piwko, M.; Eris, I. Nye lupeolestere som aktive stoffer i behandling av hudskader.PLoS ONE 2019, 14, 1–15. [CrossRef]

19. Choy, YB; Prausnitz, MR Regelen på fem for ikke-orale ruter for medikamentlevering: Oftalmisk, inhalasjons- og transdermal. Pharm. Res. 2011, 28, 943–948. [CrossRef]

20. Billet, K.; Dugé de Bernonville, T.; Oudin, A.; Courdavault, V.; Brousseau, S.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Lanoue, A. Behandling etter innhøsting på biomasse av tre fra en stor samling av europeiske druesorter: Effekt for utvalget av polyfenolrike biprodukter. ACS Sustain. Chem. Eng.. sendt inn.

21. Billet, K.; Houillé, B.; Dugé de Bernonville, T.; Besseau, S.; Oudin, A.; Courdavault, V.; Delanoue, G.; Guérin, L.; Clastre, M.; Giglioli-Guivarc'h, N.; et al. Feltbasert metabolomikk av Vitis vinifera L. stammer gir ny innsikt for genotypediskriminering og strukturering av polyfenolmetabolisme. Front. Plant Sci.2018, 9, 1–15. [CrossRef]

22. Stacchiotti, A.; Favero, G.; Rezzani, R. Resveratrol og SIRT1 aktivatorer for behandling av aldring og aldersrelaterte sykdommer. I Resveratrol—legge liv til år, ikke legge år til liv; IntechOpen: London, Storbritannia, 2019. [CrossRef]

23. Malik, S.; Mohar, D. The Sirtuin System: The Holy Grail of Resveratrol? J. Clin. Exp. Kardiologi. 2012, 3, 216–219.[CrossRef]

24. Fu, J.; Jin, J.; Cichewicz, RH; Hageman, SA; Ellis, TK; Xiang, L.; Peng, Q.; Jiang, M.; Arbez, N.; Hotaling, K.; et al. Trans-(-)-ε-vinifera øker mitokondriell sirtuin 3 (SIRT3), aktiverer AMP-aktivert proteinkinase (AMPK), og beskytter celler i modeller av Huntingtons sykdom. J. Biol. Chem. 2012, 287, 24460–24472. [CrossRef] [PubMed]

25. Corbi, G.; Conti, V.; Komici, K.; Manzo, V.; Filippelli, A.; Palazzo, M.; Vizzari, F.; Davinelli, S.; Di Costanzo, A.; Scapagnini, G.; et al. Fenoliske planteekstrakter induserer sirt1-aktivitet og øker antioksidantnivået i kaninens hjerte og lever. Oksyd. Med. Celle. Longev. 2018, 2018. [CrossRef] [PubMed]

26. Wang, Y.; Liang, X.; Chen, Y.; Zhao, X. Screening av SIRT1-aktivatorer fra medisinplanter som bioaktive forbindelser mot oksidativ skade i mitokondriell funksjon. Oksyd. Med. Celle. Longev. 2016, 2016, 1–10.[CrossRef]

27. Gertz, M.; Nguyen, GTT; Fischer, F.; Suenkel, B.; Schlicker, C.; Fränzel, B.; Tomaschewski, J.; Aladini, F.; Becker, C.; Wolters, D.; et al. En molekylær mekanisme for direkte Sirtuin-aktivering av Resveratrol. PLoS ONE2012, 7, 1–12. [CrossRef]

28. Lin, YS; Chen, HJ; Huang, JP; Lee, PC; Tsai, CR; Hsu, TF; Huang, WY Kinetikk av tyrosinaseinhiberende aktivitet ved bruk av Vitis vinifera-bladekstrakter. Biomed Res. Int. 2017, 2017. [CrossRef]

29. Likhitwitayawuid, K. Stilbenes med tyrosinaseinhiberende aktivitet. Curr. Sci. 2008, 94, 44–52.

30. Ullah, S.; Park, Y.; Ikram, M.; Lee, S.; Park, C.; Kang, D.; Yang, J.; Akter, J.; Yoon, S.; Chun, P.; et al. Design, syntese og anti-melanogen effekt av kanelderivater. Bioorganisk Med. Chem. 2018, 26, 5672–5681.[CrossRef]

31. Chen, J.; Yu, X.; Huang, Y. Hemmende mekanismer av glabridin på tyrosinase. Spectrochim. Acta-del A Mol.Biomol. Spectrosc. 2016, 168, 111–117. [CrossRef]

32. Daina, A.; Michielin, O.; Zoete, V. SwissADME: Et gratis nettverktøy for å evaluere farmakokinetikk, medikamentlikhet og medisinsk kjemivennlighet til små molekyler. Sci. Rep. 2017, 7, 1–13. [CrossRef]

33. Lipinski, CA; Lombardo, F.; Dominy, BW; Feeney, PJ Eksperimentelle og beregningsmessige tilnærminger for å anslå løselighet og permeabilitet i legemiddeloppdagelse og utviklingsmiljøer. Adv. Drug Deliv. Rev.2012, 64, 4–17. [CrossRef]

34. Ghose, AK; Viswanathan, VN; Wendoloski, JJ En kunnskapsbasert tilnærming til utforming av kombinatoriske eller medisinske kjemibiblioteker for legemiddeloppdagelse. 1. Kvalitativ og kvantitativ karakterisering av kjente legemiddeldatabaser. J. Comb. Chem. 1999, 1, 55–68. [CrossRef] [PubMed]

35. Veber, DF; Johnson, SR; Cheng, HY; Smith, BR; Ward, KW; Kopple, KD Molekylære egenskaper som påvirker den orale biotilgjengeligheten til legemiddelkandidater. J. Med. Chem. 2002, 45, 2615–2623. [CrossRef] [PubMed]

36. Egan, WJ; Merz, KM; Baldwin, JJ Prediksjon av legemiddelabsorpsjon ved bruk av multivariat statistikk. J. Med. Chem. 2000, 43, 3867-3877. [CrossRef]

37. Muegge, I.; Heald, SL; Brittelli, D. Enkle utvalgskriterier for det medikamentlignende kjemiske stoffet. J. Med. Chem. 2001, 44, 1841-1846. [CrossRef]

38. Soural, I.; Vrchotová, N.; Tˇríska, J.; Balík, J.; Horník, Š.; Cuˇrínová, P.; Sýkora, J. Ulike ekstraksjonsmetoder for å oppnå stilbener fra druestokk av Vitis vinifera L. Molecules 2015, 20, 6093–6112. [CrossRef]

39. Chen, CP; Chen, CC; Huang, CW; Chang, YC Evaluering av molekylære egenskaper involvert i transport av små molekyler i stratum corneum: A quantitative structure-activity relationship for skin permeability.Molecules 2018, 23. [CrossRef]

40. Houillé, B.; Papon, N.; Boudesocque, L.; Bourdeaud, E.; Besseau, S.; Courdavault, V.; Enguehard-Gueiffier, C.; Delanoue, G.; Guérin, L.; Bouchara, J.-P.; et al. Antifungal aktivitet av resveratrolderivater mot candidaarter. J. Nat. Prod. 2014, 77, 1658–1662. [CrossRef]

41. Billet, K.; Houillé, B.; Brousseau, S.; Melin, C.; Oudin, A.; Papon, N.; Courdavault, V.; Castro, M.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Lanoue, A. Mekanisk stress induserer raskt E-resveratrol og E-piceatannolbiosyntese i druestokker lagret som et nybeskåret biprodukt. Food Chem. 2018, 240, 1022–1027.[CrossRef]

42. Neeley, E.; Fritch, G.; Fuller, A.; Wolfe, J.; Wright, J.; Flurkey, W. Variasjoner i IC50-verdier med renheten til sopptyrosinase. Int. J. Mol. Sci. 2009, 10, 3811–3823. [CrossRef]

43. Mignani, S.; Rodrigues, J.; Å mose.; Jalal, R.; Singh, PP; Majoral, JP; Vishwakarma, RA Presenter medikamentliknende filtre i medisinsk kjemi under hit- og leadoptimeringsprosessen: Hvor langt kan de forenkles? Drug Discov. I dag 2018, 23, 605–615. [CrossRef] [PubMed]

44. Ertl, P.; Rohde, B.; Selzer, P. Rask beregning av molekylært polar overflateareal som en sum av fragmentbaserte bidrag og dens anvendelse på prediksjon av legemiddeltransportegenskaper. J. Med. Chem. 2000, 43, 3714–3717. [CrossRef][PubMed]

45. Dewar, MJS; Zoebisch, EG; Healy, EF; Stewart, JJP AM1: En ny kvantemekanisk molekylær modell for generell bruk1. J. Am. Chem. Soc. 1985, 107, 3902–3909. [CrossRef]

46. ​​Rocha, GB; Freire, RO; Simas, AM; Stewart, JJP RM1: En reparameterisering av AM1 for H, C, N, O, P, S, F, Cl, Br og IJ Comput. Chem. 2006, 27, 1101–1111. [CrossRef]

47. Rocchetti, G.; Gatti, M.; Bavaresco, L.; Lucini, L. Umålrettet metabolomikk for å undersøke fenolsammensetningen av Chardonnay-viner fra forskjellig opprinnelse. J. Food Compos. Anal. 2018, 71, 87–93. [CrossRef]