Hvor mye vet du om kronisk nyresykdom?

Ansvarlig: emily.li@wecistanche.com

Evaluering av albuminuri og dets forhold til blodtrykk hos hunder med kronisk nyresykdom

Angela Bacic¹, Marcia M. Kogika¹, et.al

NøkkelordAlbuminuri, hund,kronisk nyresykdom, ELISA, hypertensjon,nyrefunksjon

BakgrunnMikroalbuminuri og hypertensjon har lenge vært forbundet med en bevoktet prognose hos menneskelige pasienter med en rekke sykdommer. I veterinærmedisin har tester for mikroalbuminuri blitt brukt til å påvise tidlignyreskade, men det er lite informasjon om sammenhengen med høyt blodtrykk hos hunder medkronisk nyresykdom(CKD). Hensikt: Hensikten med denne studien var å evaluere albuminuri og dens tilknytning til arteriell hypertensjon hos hunder med CKD.

MetoderUrinalbumin: kreatinin (UAC) forhold, urinprotein: kreatinin (UPC) forhold, og systolisk blodtrykk ble bestemt hos 39 klinisk friske hunder og 40 hunder med CKD.

ResultaterUAC hos hunder med CKD (område, 0,002–7,99; median, 0,38) var statistisk forskjellig fra kontrollhundenes (område, 0,0005–0,01; median, 0,002). Mikroalbuminuri (UAC 0,03–0,3) og mikroalbuminuri (UAC 4 0,3) ble påvist hos henholdsvis 32,5 % og 50 % av hundene med CKD. Seksti prosent (24/40) av hunder med CKD hadde systolisk trykk Z180 mmHg; hos disse hundene var UAC-forholdet (område, 0,006-7,99; median, 1,72) betydelig høyere enn hos hunder med CKD og systolisk trykk o 180 mmHg (område, 0,002-4,83; median, 0,10). Av hypertensive hunder med CKD hadde de med UPC 41,0 vanligvis makroalbuminuri, de med UPC 0,5-1,0 hadde vanligvis mikroalbuminuri, og de med UPC o 0,5 manglet vanligvis albuminuri.

KonklusjonerUAC-forholdet var høyere hos hypertensive enn hos normotensive hunder med CKD. Tester designet for å oppdage mikroalbuminuri kan være nyttige for hypertensive hunder med CKD og en UPC 1.0 for å oppdage utbruddet og størrelsen på albuminuri. Når macroalbuminuria er overt, kan UPC-forholdet i seg selv brukes til samme formål.

Cistanche behandle nyresykdom

Introduksjon

Proteinuri har blitt implisert som en uavhengig formidler av progresjonen avNyresykdom.^1,2Hos rotter med eksperimentelt indusert proteinuri og hos mennesker med naturlig forekommendeNyresvikt, korrelerer størrelsen på proteinuri med progresjonsraten forNyresvikt.^3,4Nylig var total dødelighet og antall uremiske kriser forbundet med proteinuri hos hunder medkronisk nyresykdom(CKD).⁵

Microalbuminuria er generelt definert som subklinisk albuminuri, dvs.⁶Dette betyr at albuminutskillelseshastigheten er over det normale nivået, men under det vanlige proteinuriske nivået. Hos mennesker har mikroalbuminuri lenge vært anerkjent som en prediktiv faktor for klinisk proteinuri i sen begynnelse og nyresykdom i sluttfasen⁶så vel som av utviklingen av diabetisk nefropati.⁷På samme måte kan mikroalbuminuri komme før proteinuri hos hunder med arvelig nefropati^,8hos hunder smittet med Dirofilaria immitis,⁹og i mykbelagte Wheaten Terriers genetisk disponert for utviklingen av glomerulær sykdom.¹⁰

Sameksistensen av hypertensjon og proteinuri er allerede rapportert hos hunder med hyperadrenokortisisme^11–13og diabetes mellitus,^14,15men ingen rapporter har blitt publisert om foreningen av systemisk blodtrykk med alvorlighetsgraden av proteinuri og / eller albuminuri hos hunder med CKD. Whittemore et al¹⁶nevnt at hos katter er det en signifikant sammenheng mellom urinalbumin: kreatinin (UAC) forhold, hypertensjon og azotemi, og lignende resultater ville forventes hos hunder, men studien støttet ikke denne konklusjonen.
Det er viktig ikke bare at albuminuri og/eller proteinuri diagnostiseres, men at andre faktorer som også forverrer det, identifiseres og kontrolleres.^17–19Systemisk hypertensjon, mest sannsynlig sekundær hos hunder medNyresykdom^,20kan resultere i glomerulosklerose, glomerulær atrofi og proliferativ glomerulitt. Hypertensive nyrearteriolar lesjoner kan forårsake nyrerørformet degenerasjon og interstitiell fibrose.²¹

Semikanteditative analyser (f.eks. peilepinner) undervurderer ofte proteinuri fordi hunder med CKD vanligvis har fortynnet urinprøver. På den annen side er UAC-forholdet svært korrelert med urinalbuminkonsentrasjon målt ved tidsbestemt urinoppsamling og korrigerer for variasjon i diurese og urinkonsentrasjon.^22,23Hos mennesker er mikroalbuminuri definert som 30–300 mg albumin/g kreatinin, med et UAC-forhold på 0,03–0,3 mg/mg.^24,25Målet med denne studien var derfor å bestemme utbredelsen og omfanget av albuminuri hos hunder med CKD og undersøke om hypertensjon er forbundet med økningen i albuminutskillelse. For å oppnå dette målet ble en kvantitativ fangst ELISA utviklet for å kvantifisere albumin i urinprøver fra hunder med CKD, og UAC-forholdet ble bestemt for å evaluere alvorlighetsgraden av albuminuri.

Cistanche å forbedrenyrefunksjon

Materialer og metoder

Dyr

Alle prosedyrer for bruk av dyr ble godkjent av Etisk komité for omsorg og bruk av dyr ved Veterinærhøgskolen, Universitetet i Sa ̃o Paulo (protokoll #378/2003). Kontrollgruppen besto av 39 klinisk sunne normotensive hunder av begge kjønn (23 menn og 16 kvinner), 1–5 år og av forskjellige raser. CKD-gruppen besto av 40 hunder (20 hanner og 20 kvinner), 2–18 år gamle og også av forskjellige raser, med en klinisk diagnose av CKD kategorisert som trinn 3 eller 4 i henhold til iscenesettelsessystemklassifiseringen foreslått av International Renal Interest Society.26 Kriteriene for å inkludere hunder i CKD-gruppen var: historie og komplementære laboratoriefunn som er kompatible med CKD, inkludert nonregenerativ anemi, isosthenuria og kronisk nyreazotemi (serumkonsentrasjon av kreatinin Z2,0mg/dl i 4 2 måneder hos hydrerte hunder), samt ingen tidligere administrering av antihypertensiv medisinering.

Blodtrykk

Systolisk arterielt trykk ble målt ved hjelp av Doppler strømningsdetektor (Doppler Ultrasound Parks Medical Model 811B, Las Vegas, NV, USA). Mansjettbredden ble valgt til å være 30-40% av lemomkretsen på plasseringsstedet. For denne studien ble hypertensjon ansett som tilstede når gjennomsnittet av minst 5 forskjellige målinger utført etter hverandre bleZ180 mmHg.27Hunder ble plassert og holdt i et rolig miljø med eieren før prosedyren. Den samme klinikeren utførte blodtrykksmålingene hos alle hundene i studien.

Urinalysis

Urinprøver ble aseptisk samlet inn ved cystocentese eller urineteralisering, og ble sendt inn for en fullstendig urinalyse, inkludert mikroskopisk evaluering av urinsediment. Dyr hvis urinprøver hadde makroskopiske bevis på hematuri og / eller mikroskopiske bevis på pyuri og bakteriuri ble utelukket. Aliquots av urin supernatant ble frosset og lagret ved -201C i opptil 1 år for etterfølgende bestemmelse av UAC ratio.

Rensing av hundalbumin og immunisering av kaniner

For det første ble lyofilisert hundealbumin (Fraction V, #A9263, Sigma, St Louis, MO, USA) ytterligere renset av affinitetskromatografi på Blue Sepharose og Q-sepharose kolonner (GE Biotech, Piscataway, NJ, USA). Deretter ble 2 kaniner immunisert intramuskulært med

det rensede albuminet i Freunds adjuvans med fjorten dagers mellomrom og IgG ble isolert fra serum.²⁸

Elektroforese og vestlig blotting av renset hundealbum

Vestlig blotting ble oppnådd ved endring av en tidligere beskrevet protokoll.²⁹Kort sagt ble ikke-induserte urinprøver fra en sunn hund og en hund med CKD, en serumprøve fra en sunn hund og renset hundealbumin elektroforert i 11% natrium dodecylsulfat-polyakrylamidgeler.³⁰Proteiner ble overført til nitrocellulosemembranplater (0,22 mm porestørrelse, Sigma) ved 15 V i 2 timer, ved hjelp av et semidry transfer blotting system (BioRad, Hercules, CA, USA). Membraner ble skyllet med vaskebuffer (10 mM Tris, 150 mM NaCl, 0,1% [v/v] Tween 20, pH 7,5), og deretter inkubert med blokkeringsløsning (5% [v/v] kaldtvannsfiskskinngelatin [Sigma G7765] oppløst i vaskebuffer) i 18 timer ved 41C. Membraner ble inkubert med antistoffer oppløst i vaskebuffer som inneholder 0,5% (v / v) fiskegelatin i 2 timer ved romtemperatur under agitasjon. For å evaluere spesifisiteten av antistoffer mot renset hundalbumin, ble membraner inkubert med total kanin IgG anti-canine albumin. Etter vask ble strimler inkubert med geit anti-kanin IgG-peroksidase konjugat (Sigma A6154) i 2 timer ved romtemperatur med agitasjon. Alle antistoffer og konjugater ble fortynnet i en vaskebuffer som inneholder 0,5% (v / v) fisk gelatin. Reaksjonen ble utviklet som beskrevet tidligere.³¹

ELISA for hundealbum i urinprøver

For å måle albumin i urinprøver, ble mikrotiterplater (Maxisorp-Nunc Immunoplate, Montreal, Canada) belagt over natten ved 41C med en 100 mg / ml løsning av kanin IgG anti-canine albumin oppløst i 0,1 M karbonatbuffer (pH 9,6), og deretter blokkert med 3% kasein oppløst i karbonatbuffer. Sekspunkts standardkurver for albumin ble konstruert ved hjelp av renset hundealbumin, serie fortynnet (til konsentrasjoner på 250,0, 83,3, 27,8, 9,3, 3,1 og 1,0 ng/ml) i inkubasjonsbuffer (0,05 % Tween 20 og 0,6 % fiskegelatin i fosfatbufferbasert saltvann, pH 7,4). Urinprøver ble også fortynnet på riktig måte (1:100, 1:300, 1:500, 1:1000, 1:10,000 og 1:50,000) i inkubasjonsbuffer slik at reaksjoner ville oppstå innenfor det lineære området av standardkurven (1,03–250 ng/ml). Prøver og standarder ble analysert i triplikat. Det samme antistoffet ble brukt som sekundært antistoff, men det ble konjugert med biotin29,32 og brukt i en konsentrasjon på 3,15 ng/ml, oppløst i inkubasjonsbuffer. Plater ble deretter inkubert med 100 ng/ml avidin-peroksidasekonjugat (Sigma A3151) og deretter med et friskt fargeutviklende reagens, som beskrevet andre steder.33 Urine albumin konsentrasjon for hver prøve ble ekstrapolert fra standardkurven, og resultatene ble korrigert for den første prøvefortynningen.

Cistanche fornyre

UAC og urinprotein: kreatinin (UPC) forhold

Total urinproteinkonsentrasjon (mg/dl) ble målt ved hjelp av en Coomassie G-250 assay34; Hvert utvalg ble analysert i triplikat og verdier ble hentet fra en 8-punkts standardkurve (0,025, 0,075, 0,10, 0,50, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 og 3,0 mg/ml). Urinkreatininkonsentrasjon (mg/dl) ble bestemt ved hjelp av en picrinsyreanalyse35 på en automatisert klinisk kjemianalysator (Liasys, AMS, Roma, Italia) og kjørt med kvalitetskontroller (Precinorm Uplus og Precipath Uplus, Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland). UAC ble fastslått ved hjelp av albuminkonsentrasjonen (mg/dl) oppnådd av ELISA. Fordi alle analyser ble rapportert som mg/dl, ble UAC og UPC uttrykt uten enheter.

Statistisk analyse

Gaussisk distribusjon ble undersøkt ved hjelp av Kolmogorov-Smirnov-testen. UPC- og UAC-forhold ble normalt ikke distribuert, så Mann-Whitney-testen ble brukt i sammenligninger. Programvarepakken SigmaStat 3.1 (Chicago, IL, USA) ble brukt til statistisk analyse. Forskjeller med P .05 ble ansett som statistisk signifikante.

Resultater

Kanin IgG anti-canine albumin var spesifikk for renset hund albumin basert på Western blotting (Figur 1), fordi bare 1 protein band av relativ molekylær masse lik den av hunden albumin ble funnet i alle baner. ELISA-protokollen som ble brukt til å måle albuminkonsentrasjon i urinprøver var ekstremt følsom, med en deteksjonsgrense på ca. 0,5 ng/ml.

UPC-forholdet hos klinisk sunne normotensive hunder (n = 39; område, 0,04–0,29; median, 0,10) var signifikant lavere (P o.0001) enn hos hunder med CKD (n = 40; område, 0,13–25,08; median, 1,86). 65 prosent (26/40) hunder med CKD hadde UPC 4 1,0, 20 % (8/40) hadde en UPC mellom 0,5 og 1,0, og 15 % (6/40) hadde EN UPC o 0,5 (tabell 1). De fleste (38/40, 95%) av hundene med CKD hadde et UPC-forhold Z0.2.
UAC-forholdet hos klinisk friske hunder (område, 0,0005–0,01; median, 0,002) var også signifikant lavere (P o.0001) enn hos hunder med CKD (område, 0,002–7,99; median, 0,38) (figur 2). UAC-forholdet varierte fra 0,03 til 0,3 (mikroalbuminuri) i 32,5 % (13/40) hunder med CKD og var 4 0,3 (makroalbuminuri) hos 50 % (20/40) hunder med CKD (tabell 1).

Hypertensjon ble påvist hos 24/40 (60%) hunder med CKD. Hunder med hypertensjon varierte i alder fra 2 til 18 år (gjennomsnittlig +-SD, 9,1 +- 3,7 år), mens normotensive hunder varierte fra 2 til 12 år (7,9 +- 3,3 år).

Med tanke på mikroalbuminuri som UAC-området definert for mennesker (0,03–0,3), ble mikroalbuminuri oftere påvist i normotensiv (7/16, 43,7 %) enn hos hypertensive (6/24, 25 %) hunder med CKD. På den annen side ble makroalbuminuri oftere observert hos hypertensive (15/24, 62,5%) enn hos normotensive (5/16, 31,3%) hunder med CKD. Ingen albuminuri ble observert hos 3/24 (12,5 %) hypertensiv og hos 4/16 (25,0 %) normotensive hunder med CKD (tabell 1).

UAC-forholdet hos hypertensive hunder med CKD (n = 24; 0,006–7,99; median, 1,72) signifikant høyere (P =,0183) enn hos normotensive hunder med CKD (n = 16; område, 0,002–4,83; median, 0,10) (figur 3). Hypertensjon ble observert hos 6/13 (46,1%) mikroalbuminuriske hunder og hos 15/20 (75%) makroalbuminuriske hunder med CKD hunder. Ingen signifikant forskjell (P =.062) i UPC-forholdet ble observert mellom hypertensiv (n = 24; område, 0,20–25,08; median, 3,07) og normotensiv (n = 16; område, 0,13–4,70; median, 1,10) hunder med CKD.

Diskusjon

UAC-forhold oppnådd hos klinisk friske hunder ved hjelp av vår kvantitative fangst ELISA-teknikk var lik de som ble rapportert for friske mennesker^36,37og katter.³⁸Størrelsen på albuminuri hos hunder med CKD, som vurdert av UAC, var statistisk høyere enn for friske kontrollhunder. Med tanke på at hunder med CKD ble klassifisert som å ha stadier 3 og 4 av sykdommen, kan den større størrelsen på albuminuri i denne gruppen korreleres med graden av progresjon av nyresykdom som tidligere ble demonstrert hos rotter og mennesker.^3,4

Halvparten av hundene med CKD hadde urinalbuminkonsentrasjoner i det makroalbuminuriske området som forventet, men 32,5% av hundene med CKD var mikroalbuminuriske, og 17,5% var normoalbuminuriske. Derfor, i sistnevnte gruppe, kan bruk av rutinemessige metoder for å oppdage mikroalbuminuri være til en viss fordel. Videre kan tester for å oppdage mikroalbuminuri brukes til å overvåke behandling samt følge sykdomsprogresjon ikke bare hos mikroalbuminuriske, men også hos normoalbuminuriske hunder med CKD. Bruk av disse testene hos normoalbuminuriske hunder kan hjelpe klinikere med å gjenkjenne tidlig utbrudd av albuminuri og innføre tilstrekkelige terapeutiske tiltak så snart det oppdages; På den annen side, i mikroalbuminuriske hunder, ville målet være å legge til nye stoffer til behandlingsregimet og / eller å øke doseringen av nåværende legemidler for å redusere omfanget av albuminuri og derfor forsinke progresjonen til makroalbuminuri.

Dataene rapportert heri at alle hunder med CKD og makroalbuminuri også hadde en UPC>1.0 kan tyde på at når makroalbuminuri allerede har manifestert, kan UPC-verdier brukes til de formålene som er nevnt tidligere siden hundene har utviklet seg til å overt proteinuri; det ville være unødvendig å bruke tester så følsomme som ELISA. De fleste CKD hunder med UPC-forhold mellom 0,5 og 1,0 presentert med mikroalbuminuri og de fleste av dem med UPC< 0.5="" were="" no="" albuminuria.="" these="" findings="" suggest="" that="" upc="" values="" between="" 0.5="" and="" 1.0="" reflect="" the="" presence="" of="" microalbuminuria.="" for="" upc=""><0.5, the="" specific measurement="" of="" albuminuria="" would="" be="" recommended to="" detect="" the="" initial="" development="" of="">
Hypertensjon ble diagnostisert hos 60% av CKD hunder, et funn i samsvar med tidligere studier.^20,39,40En høy prosentandel (62,5%) av hunder med hypertensjon hadde makroalbuminurisk CKD. Høyt systolisk arterielt trykk var tilstede hos 46,1% av hundene med mikroalbuminurisk CKD. Fordi proteinuri er forbundet med en større risiko for utviklingen av den uremiske krisen, kan progresjon av CKD og død,5 behandlinger designet for å redusere hypertensjon redusere progresjonen av nyresvikt og forlenge overlevelsen hos hypertensive hunder med CKD. Sammenligningen mellom UAC-verdier hos normotensive vs hypertensive hunder med CKD viste seg å være statistisk signifikant, noe som viste både den sannsynlige sammenhengen mellom disse parametrene og de negative effektene som høyt systolisk arterielt trykk kunne ha i utviklingen av albuminuri, lik det som har blitt vist for mennesker.^41–43

Det kan reises spørsmål om forskjellene i UAC-verdier mellom hypertensive og normotensive hunder med CKD i denne studien, siden de kan tilskrives en ulik fordeling av dyr; Imidlertid var alle hundene i trinn 3 og 4 av sykdommen, og alvorlighetsgraden av anemi og azotemi var lik for begge gruppene, i samsvar med de avanserte stadiene av sykdommen.

I human medisin fører samtidig funn av mikroalbuminuri og hypertensjon generelt til bruk av spesifikke terapeutiske strategier. Bruken av angiotensinkonverterende enzymhemmere hos mennesker med type 1 diabetes mellitus, hypertensjon og mikroalbuminuri kan redusere det progressive kurset til massiv proteinuri.⁴⁴Den samme behandlingen er også gunstig i mikroalbuminurisk normotensiv diabetikere.^45,46Hos hypertensive rotter med restNyrerbehandling med enalapril opprettholdt systemisk blodtrykk på normale nivåer og dramatisk begrenset utviklingen av proteinuri og glomerulære lesjoner.⁴⁷Våre funn tyder på at testing for mikroalbuminuri kan brukes som oppfølgingsverktøy for å evaluere sykdomsprogresjon og etablere terapeutiske og forebyggende tilnærminger hos hundepasienter, spesielt når mikroalbuminuri gradvis forverres på grunn av hypertensjon.

Til slutt var UAC-forholdet hos hypertensive hunder med CKD i studien vår høyere enn hos normotensive hunder, noe som tyder på at høyt systolisk trykk kan være forbundet med endringer i glomerulær struktur. Tester designet for å oppdage mikroalbuminuri kan være nyttige hos hypertensive hunder med CKD og UPC 1.0 for å oppdage utbruddet av albuminuri eller for å overvåke doseringen av antihypertensive legemidler. Når macroalbuminuria er overt, kan UPC-forholdet i seg selv brukes til samme formål.

Cistanche for forbedringnyrefunksjon

Bekreftelser

Støttet av et stipend (#03/10,426-3) fra Fundaca ̃o de Amparo a' Pesquisa do Estado de Sa ̃o Paulo – FAPESP.

Avsløring: Forfatterne har antydet at de ikke har noen tilknytning eller økonomisk involvering med noen organisasjon eller enhet med økonomisk interesse i, eller i økonomisk konkurranse med, emnet eller materialet som er omtalt i denne artikkelen.

Fra: 'Evaluering av albuminuri og dets forhold til blodtrykk hos hunder med kronisk nyresykdom' vedAngela Bacic¹, Marcia M. Kogika¹, et.al

-----Vet Clin Pathol39/2 (2010) 203–209c 2010 American Society for veterinær klinisk patologi DOI:10.1111/j.1939-165X.2009.00207.x

Referanser

1. Burton C, Harris KP. Proteinuriens rolle i utviklingen av kronisk nyresvikt. Am J nyre dis. 1996;27:765–775.

2. Remuzzi G. Nephropathic natur av proteinuri. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1999;8:655–663.
3. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, et al. Langsiktige gunstige effekter av angiotensinkonverterende enzyminhibering hos pasienter med nefrotisk proteinuri. Am J nyre dis. 1992;20:240–248.
4. Williams PS, Fass G, Bone JM. Nyrepatologi og proteinuri bestemmer progresjon ved ubehandlet mild/moderat kronisk nyresvikt. Q J Med. 1988;67:343–354.
5. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Evaluering av sammenhengen mellom innledende proteinuri og sykelighetsrate eller død hos hunder med naturlig forekommende kronisk nyresvikt. J Am Vet Med Assoc. 2005;226:393–400.
6. Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ, et al. Mikroalbuminuri som prediktor for klinisk nefropati hos insulinavhengig diabetes mellitus. Lancet. 1982;1: 1430–1432.

7. Mogensens CE, Christensen CK. Forutsi diabetisk nefropati hos insulinavhengige pasienter. N Engl J Med. 1984;311:89–93.

8. Lees GE, Jensen WA, Simpson DF, et al. Vedvarende albuminuri går foran utbruddet av overt proteinuri hos hannhunder med X-koblet arvelig nefropati. J Vet Intern Med. 2002;16:353.
9. Grauer GF, Oberhauser EB, Basaraba RJ, et al. Utvikling av mikroalbuminuri hos hunder med hjerteormsykdom. J Vet Intern Med. 2002;16:352.
10. Vaden SL, Jensen WA, Longhofer SL, et al. Langsgående studie av mikroalbuminuri i myke belagte wheaten terrier. J Vet Intern Med. 2001;15:300.
11. Ortega TM, Feldman EC, Nelson RW, et al. Systemisk arterielt blodtrykk og urinprotein/kreatininforhold hos hunder med hyperadrenokortisisme. J Am Vet Med Assoc. 1996;209:1724–1729.
12. Cavalcante CZ, Kogika MM, Simo ̃es DMN, et al. Mikroalbuminuri hos hunder med hyperadrenokortisisme og forhold til blodtrykk. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
13. Cavalcante CZ, Kogika MM, Santoro ML, et al. Evaluering av urinproteinelektroforese og albuminuri hos hunder med hyperadrenokortisisme, og forholdet til systemisk arterielt blodtrykk. J Vet Intern Med. 2008;22:798–799.
14. Struble AL, Feldman EC, Nelson RW, et al. Systemisk hypertensjon og proteinuri hos hunder med diabetes mellitus. J Am Vet Med Assoc. 1998;213: 822–825.
15. Kogika MM, Cavalcante CZ, Simo ̃es DMN, et al. Mikroalbuminuri hos hunder med diabetes mellitus. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
16. Whittemore JC, Miyoshi Z, Jensen WA, et al. Assosiasjon av mikroalbuminuri og urinalbumin-til-kreatininforholdet med systemisk sykdom hos katter. J Am Vet Med Assoc. 2007;230: 1165–1169.
17. Brown SA, Walton CL, Crawford P, Bakris GL. Langsiktige effekter av antihypertensive regimer på nyre hemodynamikk og proteinuri. Nyre int. 1993;43:1210–1218.
18. Brown SA, Finco DR, Brown CA. Evaluering av effekten av inhibering av angiotensinkonverterende enzym med enalapril hos hunder med indusert kronisk nyreinsuffisiens. Am J Vet Res. 2003;64:321–327.
19. Grauer GF, Greco DS, Getzy DM, et al. Effekter av enalapril versus placebo som behandling for idiopatisk glomerulonefritt hos hunder. J Vet Intern Med. 2000;14:526–533.

20. Ross LA. Patofysiologi og styring av systemisk hypertensjon assosiert mednyre dysfunksjon. I: Osborne CA, Finco DR, eds. Hund og Feline Nephrologi og urologi. Baltimore, MD: Lippincott Williams &Wilkins; 1995:392–399

21. Bartges JW, Willis AM, Polzin DJ. Hypertensjon ogNyresykdom. Vet Clin North Am Liten Anim Pract. 1996;26:1331–1345.
22. Bakker AJ. Påvisning av mikroalbuminuri. Mottaker som opererer karakteristisk kurveanalyse favoriserer albumin til kreatininforhold over albuminkonsentrasjon. Diabetes omsorg. 1999;22:307–313.
23. Harvey JN, Hette K, Platts JK, et al. Prediksjon av albuminutskillelsesrate fra albumin-til-kreatininforhold. Diabetes omsorg. 1999;22:1597–1598.
24. Weir GC, Nathan DM, Sanger DE. Standarder for omsorg for diabetes. Diabetes omsorg. 1994;17:1514–1522.
25. Sabharwal RK, Singh P, Arora MM, Somani BL, Ambade V. Forekomst av mikroalbuminuri hos hypertensive pasienter. Indisk J Clin Biochem. 2008;23:71–75.
26. Polzin DJ, Osborne CA, Ross S. Kronisk nyresykdom. I: Ettinger SJ, Feldman E, eds. Lærebok for veterinær indremedisin. 6. ut. Philadelphia, PA: Saunders; 2005:1767–1785.
27. Brun S, Atkins C, Bagley R, et al. Retningslinjer for identifisering, evaluering og styring av systemisk hypertensjon hos hunder og katter. J Vet Intern Med. 2007;21:542–558.
28. Mckinney MM, Parkinson A. En enkel, nonchromatographic prosedyre for å rense immunglobuliner fra serum og ascites væske. J Immunol Metoder. 1987;96:271–278.
29. Harlow E, Lane D. Antistoffer: En laboratoriehåndbok. New York, NY: Cold Spring Harbor Laboratory; 1988: 471–510.
30. Laemli Storbritannia. Cleavage av strukturelle proteiner under montering av hodet av bakteriofage T4. Natur. 1970;227:80–685.
31. Pukac LA, Carter JE, Morrisonn KS, et al. Enhacement av diaminobenzidin kolorimetrisk signal i immunoblotting. Bioteknologi. 1997;23:385–388.
32. Olovsson M, Larsson A. Biotin merking av kylling antistoffer og deres etterfølgende bruk i ELISA og immunohistokjemi. Comp Immunol Mikrobiol Infisere Dis. 1993;16:145–152.
33. Santoro ML, Barbaro KC, Flores da Rocha TR, et al. Samtidig isolering av blodplatefaktor 4 og glykoprotein IIb-IIIa-kompleks fra kaninplater, og karakterisering av spesifikke kyllingantistoffer for å analyse dem. J Immunol Metoder. 2004;284:55–72.

34. Bradford MM. En rask og sensitiv metode for kvantifisering av mikrogram mengder protein ved hjelp av prinsippet om proteinfarget binding. Anal Biochem. 1976;72:248–254.

35. Lustgarden JA, Wenk RE. Enkel, rask, kinetisk metode for serumkreatininmåling. Clin Chem. 1972;8:1419–1422.
36. Lima CSP, Bottini PV, Garlipp CR, et al. Nøyaktigheten av urinalbumin til kreatininforholdet som en prediktor for albuminuri hos voksne med sigdcellesykdom. J Clin Pathol. 2002;55:973–975.
37. Jefferson SA, Greene MA, Smith RF, et al. Urinalbumin til kreatinin ratio-respons på trening i diabetes. Arch Dis Child. 1985;60:305–310.
38. Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, et al. Overlevelse av katter med naturlig forekommende kroniskNyresvikter relatert til alvorlighetsgraden av proteinuri. J Vet Intern Med. 2006;20:528–535.
39. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Sammenheng mellom innledende systolisk blodtrykk og risiko for å utvikle en uremisk krise eller å dø hos hunder med kronisk nyresvikt. J Am Vet Med Assoc. 2003;222: 322–329.
40. Cowgil L, Kallet A. Systemisk hypertensjon. I: Kirk R, ed. Nåværende veterinærterapi IX. Philadelphia, PA: W.B. Saunders; 1986:360–364.
41. Ruilope LM, Rodicio JL. Klinisk relevans av proteinuri og mikroalbuminuri. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1993;2:962–967.
42. Ritchie CM, Mcknight JA, Hadden DR, et al. Utbredelse av hypertensjon og albuminuri i en undervisningsklinikk for diabetes på sykehus. Diabetes Res Clin Pract. 1995;27:69–76.
43. Campos-Pastor MM, Escobar-Jimenez F, Mezquita P, et al. Faktorer forbundet med mikroalbuminuri i type 1 diabetes mellitus: en tverrsnittsstudie. Diabetes Res Clin Pract. 2000;48:43–49.
44. Hermans MP, Birchard SM, Colin I, et al. Langsiktig reduksjon av mikroalbuminuri etter 3 år med angiotensinkonverterende enzyminhibering ved perindopril hos hypertensive insulinbehandlede diabetespasienter. Am J med. 1992;92(Suppl 4B):102s–107s.
45. Mathiesen ER, Hommel E, Giese J, et al. Effekt av captopril ved utsettelse av nefropati hos normotensive insulinavhengige diabetespasienter med mikroalbuminuri. BMJ. 1993;303:81–87.
46. Marre M, Chatelier G, Leblanc I, et al. Forebygging av diabetisk nefropati med enalapril hos normotensive diabetikere med mikroalbuminuri. BMJ. 1999;302:210–216.
47. Anderson S, Rennke HG, Brenner BM. Terapeutisk fordel ved å konvertere enzymhemmere i å arrestere progressiveNyresykdomforbundet med systemisk hypertensjon hos rotten. J Clin Invest. 1986;77:1993–2000.