Identifikasjon av sytten komponenter i Cistanches Herba dyrket i Tarim-ørkenen av HPLC-MS

NAN Ze-dong1 ,ＲEN Hua-zhong1 ,ZHAO Ming-bo2 ,JIANG Yong2 ,TU Peng-fei2*

( 1. Leshan Vocational and Technical College, Leshan 614000, Kina; 2. State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University Health Science Center, Beijing 100191, Kina)

[Abstrakt]Mål: Å identifisere de kromatografiske komponentene til 60 prosent metanolekstrakt iCistanches deserticola Herbadyrket i Tarim-ørkenen av HPLC-MS.Metode: HPLC-MS-analyse ble utført på en Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18-kolonne (4,6 mm × 250 mm,5 μm) . Den mobile fasen var acetonitril-0. 1 prosent vandig maursyreløsning ved gradienteluering ved en strømningshastighet på 1 mL·min － 1, og deteksjonsbølgelengden var 254 nm. Kolonnetemperaturen ble satt til 25 grader, og injeksjonsvolumet var 10 μL. Resultat: Seksten kromatografiske topper / sytten komponenter ble nøyaktig identifisert ved å sammenligne retensjonstiden, molekylvekten og fragmentionene til forbindelsene vi isolerte og identifiserte. Disse kromatografiske komponentene ble bestemt som coniferin, demethyl syringin, syringin, echinacosid, cistanosid A, verbascoside (tubulosid A), cistanosid B, isoverbascosid, 2'-acetylcistanosid A, cistanosid C, isosistanosid C,2'-acetylverbascosid B, epetylverbascosid A, cistanosid K og cistanosid J.

Konklusjon: HPLC-MS-metoden er egnet for identifisering av de kromatografiske komponentene til 60 prosent metanolekstrakt i Cistanches Herba. Denne studien vil gi vitenskapelig bevis for en omfattende analyse av de kjemiske komponentene i denne medisinske urten.

［Stikkord］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; metanolekstrakt

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, også kjent som "ørkenginseng",er en kjent tonic kinesisk medisin, som er distribuert i Indre Mongolia, Ningxia, Gansu og Xinjiang i Kina [1].Det har effekten av å tonifisere nyre-yang, fordele blodessens, fukte tarmene og avføring. Det brukes ofte i klinikker for å behandle mannlig impotens, kvinnelig infertilitet, forkjølelsessmerter i midje og kne, blodstase forstoppelseosv. [2-3].Cistanche deserticola mainkludert i den første delen av Chinese Pharmacopoeia (2015-utgaven) er den tørkede kjøttfulle stammen av Cistanche deserticola og Cistanche tubulosa (4). Vårt forskerteam har utført systematisk og dyptgående forskning på Cistanche-planter i mange år.De kjemiske komponentene i Cistanche-planter er hovedsakelig fenyletanoidglykosider, i tillegg til iridoider og deres glykosider, lignaner og deres glykosider, benzylalkoholglykosider, etc.[5]. Moderne farmakologiske studier viser at fenyletanolglykosider, hovedkomponentene i slekten, har nevrobeskyttende, antioksidant, leverbeskyttelse, antibakteriell, antiviral, anti-tumor, anti-inflammatorisk og andre effekter [6-11].

Desert ginseng

I Kina,Cistanche deserticolaer distribuert i det vestlige indre Mongolia, det nordlige Xinjiang og Qaidam-bassenget i Qinghai, men ikke i Tarim-bassenget i det sørlige Xinjiang. På slutten av 1990-tallet, for å beskytte Tazhong-oljefeltet og kontrollere ørkenen, introduserte oljefeltets hovedkvarter et stort antall Haloxylon-ammo-dendron rundt Tazhong-oljefeltet og på begge sider av ørkenmotorveien og inokulerte Haloxylon-ammo-dendronen med cistanche, som har blitt inokulert. mer enn 10 år. På grunn av det varme klimaet i Sør-Xinjiang og de gode dryppvanningsforholdene i oljebasen, er utbyttet av cistanche deserticola svært høyt, og utbyttet av fersk cistanche deserticola per mu når mer enn 500 kg [8]. Mange kjemiske komponenter i Cistanche deserticola har produsert et stort antall isomerer på grunn av forskjellige koblingsposisjoner av substituenter. Dette fører til store vanskeligheter med å identifisere den kromatografiske toppen av dette medisinske materialet. Det er vanskelig å nøyaktig identifisere komponentene i den kromatografiske toppen hvis man bare stoler på LC-MS uten monomerforbindelser som kontroll. Derfor er det få litteraturrapporter om dette arbeidet i tidlig fase. Forfatteren isolerte mange monomerforbindelser [9-11] fra Cistanche deserticola dyrket i Tazhong-ørkenen på et tidlig stadium. Gjennom disse monomerforbindelsene oppnådd i det tidlige stadiet, ble HPLC partielle kromatografiske topper av 60 prosent metanolekstraktet av Cistanche deserticola nøyaktig identifisert. Dette vil ikke bare unngå gjentatt identifikasjon av noen kjente forbindelser i de kjemiske bestanddelene i Cistanche deserticola, men også gi en viss referanse for videre forskning på kvalitetskontrollen av det medisinske materialet. I denne artikkelen ble 17 komponenter av 60 prosent metanolekstrakt av Cistanche deserticola identifisert ved HPLC-MS.

Cistanche deserticola skive

Klikk her for å se Cistanche-produkter

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

1.Materiale

Inova-500 kjernemagnetisk resonansinstrument (Varian, USA); 6320IonTrap LC-MS massespektrometer, EclipseXDB-C18 kolonne (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) (Agilent, USA); QUINTIX313-1CN type 1/10000 elektronisk balanse (Sedaris Division); KQ-500DV ultralydsrenser (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

De 39 kontrollstoffene som ble brukt i dette eksperimentet ble alle isolert fra ørkendyrket Cistanche deserticola i Tazhong av forfatteren på et tidlig stadium, og deres strukturer ble bestemt ved NMR og andre spektroskopiteknikker. Strukturene til 39 kontrollprøver ble identifisert som Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllico, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche cymosin, 2 '- acetyl Cistanche deserticosid A, 2' - acetyl Cistanche deserticosid A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glykosid E, Salidroside, 6 '- acetyl deserticola, syringin, syringin, sali , einerin, (2E, 6E) - 3, 7-dimetyl-8-hydroksiktadien-1-O- - D-glukosid, ( pluss ) - syringin, ( pluss ) - syringin-4 '- O- - D-glucopyranosid, ( pluss ) - isoeucomminA, eucomminA, ( pluss ) - kolofoniummonometyleter- - D-glukosid, larviciding-4 ' - O- - D-glukosid, larvicider-4-O- - D-glukosid- - D glucopyranosid, hesperidin A, område til side A, 6-deoksykatapol. Renheten til alle referansestoffene ovenfor er mer enn 98,0 prosent . Acetonitril er kromatografisk rent (DikmaPure, USA), vann er ultrarent vann, og andre reagenser som brukes i testprosessen er analytiske rene reagenser, produsert av Beijing Chemical Plant.

Det medisinske materialet som ble brukt i dette eksperimentet, Cistanche deserticola, ble samlet inn fra ørkenområdet Tazhong, Xinjiang, i november 2010. Det ble identifisert av professor Tu Pengfei ved School of Pharmacy ved Peking University som den tørkede kjøttfulle stammen til Leobaceae-planten Cistanche deserticola. Prøven ble lagret i Modern Research Center of Traditional Chinese Medicine ved Peking University (prøvenummer: CD201011).

Cistanche deserticola skive

2.Metoder og resultater

2.1 Klargjøring av referanseløsning

Ta ca. 1 mg av hver av de 39 kontrollprøvene som ble oppnådd fra Cistanche deserticola i det tidlige stadiet, vei dem nøyaktig, legg dem i henholdsvis en 5 ml målekolbe, løs dem opp med metanol og volum dem til skalaen, og hent deretter enkeltkontrollen. løsning.

2.2 Klargjøring av prøveløsning

Med henvisning til Chinese Pharmacopoeia, 2015 utgave, ta omtrent 1 g av produktpulveret (gjennom den fjerde sikten), vei det nøyaktig, legg det i en 100 ml brun flaske, tilsett nøyaktig 50 ml 60 prosent metanol, tamp den, rist den godt, vei massen, bløtlegg den i 30 minutter, ultralydbehandling i 40 minutter, avkjøl den, vei massen igjen, tilsett 50 prosent metanol for å utgjøre den reduserte massen, rist den godt, still den, ta supernatanten, og bruk 0,45 μM mikroporøs membranfiltrering, ta det kontinuerlige filtratet for å få testløsningen.

2.3 Kromatografiske forhold

AgilentEclipse XDB-C18 kromatografisk kolonne (4,6 mm × 25 0 mm, 5 μ m), deteksjonsbølgelengde 254 nm, kolonnetemperatur 25 grader ; Ved å bruke acetonitril (A) - 0.1 prosent maursyre vandig løsning (B) som mobil fase, gradienteluering (0 - 20min, 5 prosent - 15 prosent A; 20 - 50 min, 15 prosent - 30 prosent A; 50 - 60min, 30 prosent - 50 prosent A; 60 - 70min, 50 prosent - 95 prosent A); Strømningshastighet: 1,0mL · min-1, injeksjonsvolum: 10 μL.

2.4 Massespektrumforhold

Kapillærtemperatur 350 grader ; Kapillærspenning 3500V; Strømningshastighet for kappegass (nitrogen) 12,0L · min-1; Hjelpegass (nitrogen) trykk 206,8kPa; Hele skanningsområdet for massespektrometri er m/z 50~1000; Kollisjonsgass helium, kollisjonsenergi velges automatisk under testen; Samle 1 nål for hver positive og negative ionemodus.

2.5 Test av et referansestoff

De 39 referanseløsningene fremstilt under 2.1 ble testet under 2.3 kromatografiske betingelser og 2.4 massespektrometriske betingelser, og deres retensjonstid og relative molekylvekt ble registrert (tabell 1).

2.6 Bestemmelse av prøveløsning

Ta det medisinske materialet Cistanche deserticola samlet fra ørkenområdet Tazhong, Xinjiang, og klargjør testløsningen i henhold til metoden beskrevet i 2.2. Utfør deretter bestemmelsen i henhold til de kromatografiske forholdene beskrevet i 2.3 og massespektrometribetingelsene beskrevet i 2.4, og bestem HPLC-kromatogrammet og massespektrometrien i positiv og negativ ionemodus (figurer 1-3).

Fig. 1 HPLC-kromatogram av 60 prosent metanolekstrakt av Cistanches Herba

Fig. 2 Positivt TIC MS-kromatogram av 60 prosent metanolekstrakt av Cistanches Herba

Fig. 3 Negativt TIC MS-kromatogram av 60 prosent metanolekstrakt av Cistanches Herba

2.7 Identifikasjon av HPLC-kromatogram av medisinske materialer

Under de samme betingelser (2,3 kromatografiske betingelser og 2,4 massespektrometriske betingelser) ble komponentene identifisert ved å sammenligne retensjonstiden og den relative molekylvekten til testprøven og kontrollprøven. Den spesifikke identifiseringsprosessen for kromatogramtoppen til testprøven (figur 1) er som følger.

2.7.1 Identifikasjon av kromatografisk topp 1

Retensjonstiden for kromatografisk topp 1 er 16,67 minutter. I positiv ionmodus er excimeriontoppen m/z365 gitt som [M pluss Na] pluss, mens i negativ ionmodus er excimeriontoppen m/z387 [M pluss COOH] - gitt. Den relative molekylvekten til topp 1 er bestemt til 342. Fragmentionet m/z179 er også gitt, som stammer fra tap av 1 molekyl glukose 163 Da på grunn av spaltningen av glykosidbindingen. I henhold til retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 1 identifisert som nåletopp.

2.7.2 Identifikasjon av kromatografisk topp 2

Retensjonstiden for kromatografisk topp 2 er 17,36 min. Under negativ ion-modus er excimer-ion-toppene m/z357 [M – H] -, 393 [M pluss Cl] - gitt, og den relative molekylvekten til topp 2 bestemmes til 358. Samtidig fragmention m/z195 er avledet fra tap av 1 molekyl glukose 163 Da på grunn av glykosidbindingen som brytes. Den kromatografiske toppen 2 ble identifisert som demetylsyringin i henhold til retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet.

2.7.3 Identifikasjon av kromatografisk topp 3

Retensjonstiden for kromatografisk topp 3 er 19,04 minutter, excimeriontoppen m/z395 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z417 [M pluss HCOO] - er gitt i negativ ionemodus, og den relative molekylvekten til topp 3 er bestemt til å være 372. Samtidig er fragmentionet m/z209 avledet fra tapet av 1 molekyl glukose 163 Da på grunn av at glykosidbindingen brytes. Den kromatografiske toppen 3 ble identifisert som syringin i henhold til retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansesubstansen.

2.7.4 Identifikasjon av kromatografisk topp 4

Retensjonstiden for kromatografisk topp 4 er 27,66 min. Eksimerion-toppen m/z804 [M pluss NH4] pluss er gitt i positiv ion-modus, og excimer-ion-toppen m/z785 [M – H] - er gitt i negativ ion-modus. Den relative molekylvekten til topp 4 er bestemt til å være 786. Samtidig er fragmentionet m/z623 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 4 identifisert som echinacea.

2.7.5 Identifikasjon av kromatografisk topp 5

Retensjonstiden for kromatografisk topp 5 er 31,48 minutter, excimeriontoppen m/z818 [M pluss NH4] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z799 [M – H] - er gitt i negativ ionemodus, og den relative molekylvekten til topp 5 er bestemt til å være 800. Samtidig er fragmentionet m/z637 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163Da. Ved å kombinere retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble det bekreftet at kromatografisk topp 5 var cistanche glykosid A.

Tabell 1 Molekylvekt og retensjonstid( tＲ ) av 39 standardforbindelser

2.7.6 Identifikasjon av kromatografisk topp 6

Retensjonstiden for kromatografisk topp 6 er 34,17 min. To excimeriontopper m/z846642 [M pluss NH4] pluss er gitt i positiv ionmodus, og to excimeriontopper m/z827623 [M – H] - er også gitt i negativ ionmodus. Det spekuleres i at topp 6 kan inneholde to forbindelser med en relativ molekylvekt på 828624. Samtidig er fragmentionet m/z665461 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da, og fragmentionet m /z622 er avledet fra at acetylesterbindingen brytes. Disse to forbindelsene ble isolert og kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, den kromatografiske toppen 6 var en blanding av Cimicifugarin og antocyanin A.

2.7.7 Identifikasjon av kromatografisk topp 7

Retensjonstiden for kromatografisk topp 7 er 35,34 min. Eksimerion-toppen m/z832 [M pluss NH4] pluss, 837 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ion-modus, og excimer-ion-toppen m/z813 [M – H] - er gitt i negativ ion-modus , og den relative molekylvekten til topp 7 er 814. Samtidig er fragmentionet m/z637 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl ferulinsyre 177Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 7 identifisert som cistanche glykosid B.

2.7.8 Identifikasjon av kromatografisk topp 8

Retensjonstiden for kromatografisk topp 8 er 36,17 minutter, excimeriontoppen m/z647 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z623 [M – H] - er gitt i negativ ionmodus, og den relative molekylvekten til topp 8 er bestemt til 624. Samtidig gis fragmentionet m/z461, som stammer fra esterbindingsbrudd og tap av 1 molekyl koffeingruppe 163 Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 8 identifisert som heterocoenosid.

2.7.9 Identifikasjon av kromatografisk topp 9

Retensjonstiden for kromatografisk topp 9 er 38,20 minutter. Eksimeriontoppene m/z860 [M pluss NH4] pluss , 865 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimerionetoppene m/z841 [M – H ] -, 877 [M pluss Cl] - er gitt i negativ ion-modus. Den relative molekylvekten til topp 9 er bestemt til å være 842. Samtidig er fragmentionet m/z679636 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da og 1 molekyl acetyl 43 Da. Retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet er konsistente, og identifikasjonstoppen 9 er 2'- acetylcistanche glykosid A.

2.7.10 Identifikasjon av chromatografisk seak 10

Retensjonstiden for kromatografisk topp 10 er 39,04 min. Eksimeriontoppen m/z656 [M pluss NH4] pluss , 661 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z637 [M – H] -, 673 [M pluss Cl] - er gitt i negativ ion-modus. Den relative molekylvekten til topp 10 er bestemt til å være 638. Samtidig er fragmentionet m/z475 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da. Retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet er konsistente, og identifikasjonstoppen 10 er Cistanche C.

2.7.11 Identifikasjon av kromatografisk topp 11

Retensjonstiden for kromatografisk topp 11 er 40,82 min. Eksimeriontoppen m/z661 [M pluss Na] pluss , 677 [M pluss K] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z637 [M – H] -, 673 [M pluss Cl] - er gitt i negativ ion-modus. Det kan bestemmes at den relative molekylvekten til topp 11 er 638. Samtidig er fragmentionet m/z475 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da. Ved å kombinere retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 11 identifisert som isocistanche glykosid C.

2.7.12 Identifikasjon av kromatografisk topp 12

Retensjonstiden for kromatografisk topp 12 er 41,48 min. Eksimerion-toppen m/z684 [M pluss NH4] pluss , 689 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ion-modus, og excimer-ion-toppen m/z665 [M – H] - er gitt i negativ ion-modus . Det kan bestemmes at den relative molekylvekten til topp 12 er 666. Samtidig er det vist at fragmentionet m/z503460 kommer fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da og 1 molekyl acetyl 43 Da. I henhold til retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 12 identifisert som 2'-acetylcoeliaosid.

Cistanche deserticola-eksperiment

2.7.13 Identifikasjon av kromatografisk topp 13

Retensjonstiden for kromatografisk topp 13 er 44,29 minutter, excimeriontoppen m/z689 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z665 [M – H] - er gitt i negativ ionemodus, og den relative molekylvekten til topp 13 er 666. Samtidig vises det at fragmentionet m/z503460 kommer fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da og 1 molekyl acetyl 43 Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 13 identifisert som antocyanin B.

2.7.14 Identifikasjon av kromatografisk topp 14

Retensjonstiden for kromatografisk topp 14 er 46,67 min. Eksimerion-toppen m/z675 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ion-modus, og excimer-ion-toppen m/z651 [M – H] - er gitt i negativ ion-modus. Den relative molekylvekten til topp 14 er 652. Samtidig er fragmentionet m/z475 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl ferulinsyregruppe 177Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 14 identifisert som epimeridinosideA.

2.7.15 Identifikasjon av kromatografisk topp 15

Retensjonstiden for kromatografisk topp 15 er 49,90 min. Eksimeriontoppen m/z698 [M pluss NH4] pluss , 703 [M pluss Na] pluss er gitt i positiv ionemodus, og excimeriontoppen m/z679 [M – H] -, 715 [M pluss Cl] - er gitt i negativ ion-modus. Den relative molekylvekten til topp 15 er 680. Samtidig er fragmentionet m/z517474 avledet fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl koffein 163 Da og 1 molekyl acetyl 43 Da. Den kromatografiske toppen 15 ble identifisert som cistanche-glykosid K basert på retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansesubstansen.

2.7.16 Identifikasjon av kromatografisk topp 16

Retensjonstiden for kromatografisk topp 16 er 55,36 minutter. I positiv ion-modus er excimer-ion-toppen m/z717 [M pluss Na] pluss gitt, mens i negativ ion-modus, excimer-ion-toppene m/z693 [M – H] -, 729 [M pluss Cl] - er gitt, noe som resulterer i en relativ molekylvekt på 694 for topp 16. Samtidig er det vist at fragmentionet m/z517474 kommer fra esterbindingsbrytende tap av 1 molekyl ferulsyregruppe 177 Da og 1 molekyl av acetylgruppe 43 Da. Kombinert med retensjonstiden og den relative molekylvekten til referansestoffet, ble kromatografisk topp 16 identifisert som cistanche glykosid J. De kromatografiske toppene av 60 prosent metanolekstraktet av Cistanche deserticola ble identifisert ved HPLC-MS kombinert med den relative molekylvekten, retensjon tid og fragmention av det separerte referansestoffet. Resultatene viste at 17 komponenter av de 16 kromatografiske toppene ble nøyaktig identifisert (tabell 2).

Tabell 2 Identifiserte kromatografiske topper av Cistanches Herba og referansestandardforbindelser

3 .Diskusjon

3.1 Valg av testartikkelfremstillingsmetode

Hovedformålet med denne studien er å identifisere HPLC-toppene til Cistanche deserticola. Derfor er valget av ekstraksjonsløsningsmiddel og ekstraksjonsmetode basert på evnen til å oppnå flere HPLC-topper. Forskerteamet har utført langsiktig forskning på Cistanche deserticola og har gjort mye arbeid med kvalitetsanalyse. I denne artikkelen ble ekstraksjonsløsningsmidlet og ekstraksjonsmetoden til Cistanche deserticola også valgt basert på det tidligere analysearbeidet til forskningsgruppen og den kinesiske farmakopéen (2015-utgaven). Til slutt ble 60 prosent metanolløsningsmiddel ultralydekstraksjon i 40 minutter valgt som ekstraksjonsmetode.

3.2 HPLC-MS tilstandsvalg

Valget av kromatografisk kolonne i denne artikkelen er basert på kvalitetsanalysen av Cistanche deserticola i det tidlige stadiet av forskningsgruppen, og undersøkelsen av AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m), DionexC18 (4,6 mm × 250 mm, 5) μ m), ThermoC18(4,6mm × 250mm,5 μm) Kromatografikolonne, velg til slutt AgilentZORBAXEclipsePlusC18 kromatografikolonne (4,6mm × 250mm,5 μm) Den har god separasjonseffekt på Cistanche deserticola; De 39 referansestoffene inkluderer fenyletanoid, lignaner og fenylpropanoid, så deteksjonsbølgelengden er 254nm; Samtidig vil effekten av mobil fase som metanol-vann, acetonitril-vann, metanol-0.1 prosent fosforsyrevann, acetonitril-0.1 prosent maursyrevann på kromatografisk separasjon og masse spektrometrideteksjon ble undersøkt, og acetonitril-0.1 prosent maursyrevann ble til slutt valgt som mobil fase.

3.3 Sammendrag

Metoden etablert i denne studien identifiserte nøyaktig 17 komponenter fra 16 kromatografiske topper av 60 prosent metanolekstraktavCistanche deserticola. 

Cistanche ekstrakt pulver

Forskningsresultatene har ikke bare en viss referanseverdi for videre kvalitetsanalyse av det medisinske materialet, men kan også unngå noe repeterende arbeid med strukturidentifikasjonen av de kjente forbindelsene i det medisinske materialet. Generelt er det imidlertid relativt få identifiserte kromatografiske topper, og mange kromatografiske topper er ikke identifisert fordi de ikke er tilordnet referansestoffet. De fleste identifiserte komponenter er fenyletanoidglykosider, mens lignaner er sjeldne. Dette kan skyldes at ekstraksjonsmetoden det refereres til i 2015-utgaven av den kinesiske farmakopéen hovedsakelig er rettet mot fenyletanoidglykosider, eller fordi innholdet av echinakosid og koliform-lignende forbindelser i ekstraktet av dette legemiddelmaterialet er for høyt, noe som gjør det vanskelig. for å oppdage andre forbindelser med lite innhold. De spesifikke årsakene må avklares ytterligere.

[Referanser]

[1] Redaksjonskomité for Flora of China. Flora of China [M]. Beijing: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Desert ginseng -- Cistanche deserticola [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011,46( 12): 881.

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai, et al. Forskning på Cistanche deserticola og dens industrielle utvikling[J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-887

[4]National Pharmacopoeia Commission. Farmakopéen til Folkerepublikken Kina. Del I [M]Beijing: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y,TU PF. Analyse av kjemiske bestanddeler i Cistanche-arter ［J］. J Chromatogr A,2009,1216 ( 11): 1970-1979．

[6] PAN J,YUAN CS,LIN CJ, et al. Farmakologiske aktiviteter og mekanismer for naturlige fenylpropanoidglykosider (J. Pharmazie,2003,58( 11): 767-775．

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. Naturlig forekommende fenyletanoidglykosider: potensielle ledetråder for nye terapier［J］． Curr Med Chem, 2008,15 ( 25 ): 2592-2613．

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing, et al. Mekanismen for anti-osteoporose-effekt av Cistanche deserticola-ekstrakt på M KOOPG-mus ［ J］. Kinesisk eksperiment Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min, et al. Effekt av Cistanche deserticola polysakkarid på D-galaktose-indusert aldring Effekt av CREB-uttrykk i gamle modellmus ［ J］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua, et al. Effekter av fenyletanosid av Cistanche deserticola på rotter Forebygging og behandling av lungeødem i høy høyde ［ J］. Chinese Journal of Experimental Prescriptions,2014,20( 15) : 134-138．

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola om den utmattede svømmeevnen til rotter og myokardial mitokondriell antioksidantkapasitet ［ J］. Kinesisk eksperimentell formel Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD, ZHAO MB, ZENG KW, et al. Anti-inflammatoriske iridoider fra stilkene til Cistanche deserticola dyrket i Tarim-ørkenen ［J］． Chin J Nat Med,2016,14( 1) : 61-65．

[13] NAN ZD, ZENG KW, SHI SP, et al. Fenyletanoidglykosider med anti-inflammatorisk aktivitet fra stilkene til Cistanche deserticola dyrket i Tarim-ørkenen ［J］． Fitoterapia,2013,89: 167-174．

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al. Kjemi av ørken cistanche dyrket i Tazhong Composition studie ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2013, 38 (16):2665-2670．

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al. Lignans [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2015, 40 (3):463-468．