Nevroprotektive egenskaper til 4-aminopyridin

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP, og Philipp Albrecht, MD

Abstrakt

Som en antagonist av spenningsstyrte kaliumkanaler (Kv) brukes 4-aminopyridin (4-AP) som symptomatisk terapi ved flere nevrologiske lidelser. Forbedringen av visuell funksjon og motoriske ferdigheter og lindring av tretthet hos pasienter med MS er blitt tilskrevet 4-AP. Dens depotformulering (fampridin) er godkjent for symptomatisk behandling av gangvansker ved MS. De gunstige effektene ble forklart av blokkeringen av aksonale Kv-kanaler, og derved forbedret ledning langs demyeliniserte aksoner. Et økende antall bevis tyder imidlertid på at 4-AP kan ha flere egenskaper utover den symptomatiske virkemåten. I denne gjennomgangen oppsummerer vi prekliniske og kliniske data om mulige nevrobeskyttende egenskaper ved 4-AP.

4-Aminopyridin ved nevrologisk sykdom

Aminopyridiner er en gruppe monoamin- og diaminoderivater av pyridin, som hemmer spenningsstyrte kaliumkanaler (Kv). Spesielt de 2 bredspektrede kaliumkanalblokkerne 4-aminopyridin (4-AP) og 3,4-aminopyridin (3,4- DAP) har blitt brukt som nye undersøkelsesstoffer ved ulike nevrologiske sykdommer. Selv om 3,4-DAP er en mer potent antagonist av kaliumkanaler, 4-passer AP lettere blod-hjerne-barrieren1 og var klinisk overlegen hos pasienter med MS, spesielt for å forbedre visuell funksjon,2 tretthet ,3 kognisjon,4 og ganghastighet.1 I tillegg har 4-AP blitt rapportert å lette nevral ledning ved andre nevrologiske sykdommer enn MS.5,6

Effekter av cistanche: Beskytt nevroner

I friske aksoner er kanalene Kv1.1 og Kv1.2 gruppert nær nodene til Ranvier.7 Disse kanalene blir eksponert etter demyelinisering og migrerer gjennom det demyelinerte segmentet. Samtidig økes uttrykket av disse kanalene flere ganger.8 Denne feilrettede omfordelingen av Kv-kanalene svekker overføringen av aksjonspotensialer, og fører til varig funksjonshemming. 4-AP blokkerer disse eksponerte kaliumkanalene og forbedrer derfor signaloverføringen.9,10Kv1.3-kanalen ble oppdaget i menneskelige T-celler,11 ble funnet å være sterkt uttrykt på inflammatoriske infiltrater i MS-hjernen,12 og er uttrykt på makrofager, mikroglia og effektorminne T-celler.13 Selektive og ikke-selektive Kv1.3-kanalblokkere kan dermed gi immunmodulerende egenskaper ved å hemme celleproliferasjon og proinflammatorisk cytokinsekresjon.14 Studier før 2009 klarte ikke å etablere 4-AP som en symptomatisk behandling for MS fordi medikamentets blodnivåer hos pasienter var uforutsigbare, med for høye doser assosiert med risiko for epileptiske anfall og nedsatt bevissthet.15–18 Derfor ble fampridin, depotformuleringen av 4-AP utviklet og har senere blitt godkjent for symptomatisk behandling av gangvansker i MS.19–23 Interessant nok, mer nylig, tyder stadig flere bevis på at i tillegg til disse brede ely anerkjente symptomatiske effekter, 4-AP kan ha ytterligere beskyttende egenskaper.

Evaluering av 4-AP ved bruk av in vitro-modeller

In vitro har nevrobeskyttende effekter av 4-AP blitt observert i en rekke modeller. Når motoriske nevroner (MNs) differensierte fra induserte pluripotente stamceller fra pasienter med amyotrofisk lateral sklerose som bærer mutasjoner av FUS- og SOD1-genet ble utsatt for 4-AP, ble ionekanalubalanser utbedret, nevronale aktivitetsnivåer økte, endoplasmatisk retikulum stress redusert, og caspase-aktivering dempet. De mutante MN-ene viste lavere natriumstrømmer og Na pluss /K pluss-forhold, som i det minste delvis kan være årsaken til deres hypereksitabilitet. Dette ble reversert etter 4-AP-behandling, som førte til reduserte kaliumstrømmer og gjenopprettede spontane aktivitetsmønstre og synaptisk input i MN-ene.24 4-AP-behandling reduserte frigjøringen av proinflammatoriske mediatorer fra humane mikroglia utfordret med amyloid- beta- og beskyttede, dyrkede hippocampale nevroner fra rotter badet i supernatanter fra amyloid-beta-behandlede mikroglia.25 Et 4-AP-derivat har rapportert redusert -synukleinakkumulering, oksidasjon, betennelse og Rho-kinaseaktivering i en in vitro-modell av Parkinsons sykdom.26 Andre in vitro-studier rapporterte at 4-AP økte cAMP-respons element-bindende proteinfosforylering beskyttet mot cellulært stress av glutamat, NMDA og 3-nitropropionsyre som utøves på rotte neonatale cerebellare granulaneuroner. Glutamat fører til redusert levedyktighet også i celler prekondisjonert med 4-AP, men uten signifikant aktivering av caspase-3. Disse observasjonene antydet at 4-AP primært er effektiv mot nekrotisk eksitotoksisitet.27 Det ble også vist å beskytte primære nevronale kulturer mot oksygen-glukosemangel eller ouabain/DL-tre- -benzyloksyasparaginsyretoksisitet.28

nevrobeskyttende effekt av Cistanche

Prekliniske in vivo-studier på 4-AP

Flere studier har undersøkt den beskyttende effekten av 4-AP i ulike sykdomsmodeller (tabell 1). I nerveknusemodeller av perifer nerveskade, førte profylaktisk og tidlig 4-AP-behandling til gjenoppretting av nerveledningshastigheten, fremmet remyelinisering og forsterket det aksonale området. De sistnevnte observasjonene ble forklart av effekter som ligner på de som oppstår etter elektrisk stimulering, for eksempel økninger i nivåer av neuronal hjerneavledet neurotrofisk faktor (BDNF).29 I en modell av Alzheimers sykdom, injeksjon av amyloid-beta i hippocampus til Sprague Dawley rotter induserte nevronal skade og økt mikroglial aktivering. Daglig administrering av 1 mg/kg 4-AP ble funnet å undertrykke mikroglial aktivering og ga nevrobeskyttelse. Dette ble tilskrevet 4-APs evne til å blokkere den ikke-inaktiverende utadrettet K pluss-strømmen i aktiverte mikroglia og redusere cellulær produksjon av proinflammatoriske cytokiner.25 Undersøkelser ved bruk av en in vivo-modell av kainatindusert hippocampus nevrotoksisitet avslørte robuste nevrobeskyttende effekter av { {11}}AP som kan oppheves av den ikke-konkurrerende NMDA-reseptorantagonisten MK-801 og adenosin A1-antagonisten 8-cyklopentylteofyllin. Disse observasjonene tyder på at NMDA-reseptorer er relevante for 4-AP-mediert beskyttelse i denne modellen.30I en dyremodell av autoimmun nevropati hos Lewis-rotter, 4-forbedret AP den kliniske alvorlighetsgraden og patologiske elektrofysiologiske funn. Forfatterne antydet at aksonal beskyttelse ble gitt ved å blokkere natrium-mediert innoverstrøm i den tidlige fasen fordi høye membranpotensialer i den akutte fasen av betennelse kan være nevrotoksisk. I den kroniske fasen ble nerveledning potensielt forbedret ved å blokkere kaliummediert utadgående strøm.1

I eksperimentell autoimmun encefalomyelitt (EAE), en modell av immunmediert CNS-inflammasjon som replikerer kardinaltrekk ved MS, har Kv-kanalblokkering blitt rapportert å hemme T-celleaktivering, potensielt ved blokkering av kanaler i Kv1.3-underfamilien og svekket aksonal demyelinisering og degenerasjon ved å virke på K.3.1-kanalen på astroglia, potensielt indusere BDNF-signalet. ling. I proteolipidprotein-indusert EAE i SJL-mus, 4-AP-behandling forbedret de digitale skårene betydelig som ble bekreftet patologisk. Glialfibrillært surt proteinuttrykk ble observert å være nedregulert i 4-AP-behandlede mus, og T-celleaktivering og Th1/17-polarisering ble dempet. I den kroniske, myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG) peptid-induserte EAE-modellen i C57BL/6-mus, endret4-AP imidlertid ikke EAE-kurset.5 En annen studie undersøkte også effekten av {{19} }AP i en MOG-EAE-modell i C57BL/6-mus og rapporterte symptomatiske, men ingen sykdomsmodifiserende effekter. Verken en profylaktisk eller terapeutisk 4-AP-behandling svekket alvorlighetsgraden av det digitale EAE-forløpet, mens 4-AP-behandlede dyr viste forbedret mobilitet vurdert ved fotavtrykk og rotarod-analyse. Demyelinisering av ryggmargen, nevronal skade og MR-avbildning av hjernevolumendringer var uendret. Proliferasjon, IL17 eller IFN-y produksjon av CD4* T-celler var også upåvirket.3

Nylig har vi vist at bortsett fra dens symptomatiske effekt på å forbedre nevral ledning, kan 4-AP forhindre retinal nevrodegenerasjon under MOG-peptidindusert eksperimentell optisk neuritt (EAEON) hos C5BL6-mus.'Ved bruk av in vivo optisk koherenstomografi( OCT), visuell funksjonstesting og histologisk vurdering, observerte vi en reduksjon i omfanget av degenerasjon av indre retinale lag i modeller av EAEON, både for profylaktisk og terapeutisk 4-AP-administrasjon. I denne modellen potenserte 4-AP effekten av immunmodulerende behandling med sfingosin-1-fosfatreseptormodulatoren fingolimod, noe som tyder på uavhengige virkemåter. Det er rimelig å anta at denne effekten ikke er begrenset til fingolimod alene og gjelder for 4-AP kombinert med andre MS-immunmodulerende legemidler. I vår studie avslørte optisk nervehistologi at i motsetning til fingolimod, hadde 4-AP ingen signifikant innflytelse på mikroglial aktivering og/eller infiltrasjon av lymfocytter eller makrofager, noe som tyder på at de beskyttende effektene ikke var relatert til en anti-inflammatorisk modus handling. I tråd med dette, 4-interfererte ikke AP-behandling med EAE-induksjon, validert av en T-celle-restimuleringsanalyse. Videre observerte vi betydelig beskyttelse mot retinal nevrodegenerasjon under 4-AP-behandling også i den ikke-inflammatoriske modellen for optisk nerveknuse, mens fingolimod her ikke hadde noen effekt. Interessant nok, in vitro, 4-AP-behandling mislyktes i å direkte beskytte retinale ganglionceller. I stedet indikerte histologi og in vitro-eksperimenter 4-AP-mediert stabilisering av myelin- og oligodendrocytt-forløperceller. Denne effekten var assosiert med økt kalsiumtilstrømning og nukleær translokasjon av den nukleære faktoren til aktiverte T-celler (NFAT). Det har tidligere blitt vist at 4-AP regulerer kalsiumhomeostase ved å øke nivåene av inositoltrifosfat og derved forårsake kalsiumfrigjøring fra intracellulære kalsiumlagre. Ytterligere studier på 4-AP i demyeliniserende modeller, for eksempel cuprizon-behandling eller transgene musemodeller med induserbar oligodendrocytt-ablasjon, kan imidlertid være nyttige for å bekrefte disse forholdene. Eksisterende studier i dyremodeller for demyelinisering fokuserer hovedsakelig på kapasiteten til 4-AP til å gjenopprette handlingspotensialet, men mangler ytterligere undersøkelser av oligodendrogliale celler (figur).

Det er viktig å nevne at dosene som trengs for å oppnå disse effektene in vitro er omtrent 100-1,000x høyere enn konsentrasjonen som oppnås hos pasienter. Derfor kan ytterligere eller andre mekanismer være relevante for observasjonene gjort in vivo og in vitro. Disse inkluderer, men er ikke begrenset til, en redusert energispredning av demyeliniserte aksoner på grunn av blokkering av kaliumlekkasje og sterkere beskyttende og reparerende kapasiteter i hjernen indirekte som følge av økt mobilitet og større trening.

Dessuten kan immunmodulerende mekanismer av 4-AP ikke utelukkes, spesielt fordi redusert T-celleaktivering og Th1/17-polarisering er påvist i PLP-indusert EAE i SJL-mus.3I tillegg fant prekliniske studier av andre sykdomsmodeller en dempet aktivering og redusert frigjøring av proinflammatoriske mediatorer av mikroglia. Disse kontroversielle resultatene fremhever de forskjellige patologiske mekanismene til de forskjellige dyremodellene, der immunceller er mer eller mindre mottakelige for behandlingsstrategier. Avvikene mellom våre resultater og tidligere rapporter om kun symptomatiske effekter i MOG-peptidindusert EAE i C57BL6-mus" kan i det minste delvis forklares med (1) forskjeller i dosering fordi andre brukte doser på 100 ug og 600 ug/mus/dag, mens vi administrerte 250 ug/mus/d;(2)behandlingsvarighet (40, 60 og 90 dager av henholdsvis Göbel et al,* Moriguchi et al,3 og Dietrich et al.); og (3) mengde MOG brukt til immunisering fordi vi brukte 200 ug MOG per mus, mens andre bare brukte 100 ug MOG per mus. Nyere forskning fokuserer på rollen til tarmmikrobiota i å påvirke induksjonen og alvorlighetsgraden av EAE ved å endre balansen mellom effektor- og regulatoriske T- og B-celler. Mikrobiomet til gnagere kan variere mellom dyrefasilitetene, noe som resulterer i forskjeller i EAE-alvorlighetsgrad, forløp og muligens til og med respons på terapeutika. Til sammen kan disse faktorene forklare heterogeniteten i studieresultatene.

nevrobeskyttende effekt av Cistanche

Klinisk tilnærming til 4-AP hos pasienter med MS

Flere kliniske studier siden 1980-tallet har allerede antydet de gunstige effektene av 4-AP hos personer med MS. Blant annet identifiserte de forbedringer i motoriske40-2 og visuelle funksjoner-44 og tretthet.5-7 Studiebegrensninger, fravær av et homogent studiedesign og små pasienttall forbød imidlertid godkjenning av {{ 5}}AP av de vanlige myndighetene og førte til en off-label-bruk i mer enn 3 tiår.4 På den annen side har noen av disse studiene lettet utviklingen av formuleringen med vedvarende frigjøring (SR-4-AP eller fampridin) fordi de fant at plasmanivåene til den opprinnelige umiddelbare frigjøringsforbindelsen var inkonsekvente og uforutsigbare. Den første kliniske studien med SR-4-AP ble utført i 1997 av Schwid et al.,49 og demonstrerte en betydelig forbedring av ganghastigheten og en trend mot forbedring av muskelstyrken.

Teknologisystemet med utvidet utgivelse ble utviklet av Elan Pharmaceuticals. Den brukte et såkalt matrise-medisinabsorbsjonssystem, bestående av en proprietær polymermatrise som kontrollerer frigjøring ved diffusjon og erosjon av gastrointestinale enzymer. Dette resulterte i lavere maksimale plasma-legemiddelnivåer og lengre virketid.1 Opprinnelig ble SR-4-AP testet i 4 studier. I 2007 utførte Goodman et al.1 en dose-varierende etterfølgende økning på 5 mg fra 10 til 40 mg to ganger daglig med 36 pasienter med MS. I Timed 25 Foot Walk Test (T25FW) ble ingen signifikant endring observert, mens en post hoc-analyse som konverterte dataene til ganghastighet (ft/s) nådde signifikans. I tillegg ble det observert en forbedring i selvrapportert tretthet. I en dosesammenligningsstudie i 2008 (randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert) rekrutterte Goodman et al.2 206 pasienter som fikk placebo eller doser på 10,15 eller 20 mg to ganger daglig. Igjen, post hoc-analyse som sammenlignet forbedring i ganghastighet fant signifikant bedre resultater for alle behandlingsgrupper individuelt og for alle SR-4-AP-behandlede pasienter samlet sammenlignet med placebo. Musestyrken ble forbedret for de 10-mg- og 15-mg-behandlede gruppene, men ikke for de 20 mg-behandlede gruppene sammenlignet med placebopersonene. I de 2 påfølgende fase Ⅲ kliniske studiene (21-ukers dobbeltblind placebokontrollert randomisert studie, 301 pasienter og 14-ukers dobbeltblindet placebokontrollert studie, 239 pasienter) med 10 mg to ganger daglig, Pasientene ble delt inn i en respondergruppe og en non-respondergruppe, definert ved konsekvent forbedring på T25FW. I begge studiene var økningen i ganghastighet signifikant sammenlignet med non-responder- eller placebogruppen. Videre var det en forbedring i 12-Item MS Walking Scale(MSWS-12)-poengsummen for respondentene.2122

I en åpen utvidelsesstudie av disse studiene ble det vist at den kliniske forbedringen gikk tapt etter seponering av medikamenter, men kom tilbake 2 uker etter gjenoppstart av behandlingen med SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, tablettformuleringen av SR{ {3}}AP fikk full godkjenning av Food and Drug Administration i januar 2010 for å forbedre gange hos pasienter med MS, men kun en betinget markedsføringstillatelse i 2011 fra European Medicines Agency (EMA). Basert på de nevnte forsøkene var godkjenningen underlagt bestemmelsen om å gi mer langsiktige effekt- og sikkerhetsdata. Derfor ble en fase II eksplorativ (MOBILE) og en fase I bekreftende studie (ENHANCE) igangsatt.

I den utforskende MOBLE-studien med 132 deltakere ble det funnet en forbedring av pasientens globale inntrykk av endring (PGIC), MSWS-12 og Timed Up and Go (TUG) hastighet23 For å evaluere den langsiktige effekten og sikkerheten til SR-4-AP, den bekreftende ENHANCE-studien (10 mg to ganger daglig hos 646 MS-pasienter) ble utført. I tillegg til forbedringene rapportert i MOBILE-studien, fant forfatterne en betydelig forbedring av SR-4-AP-behandlede pasienter på 29-Item MS Impact Scale.5 EMA ga etterpå ubetinget godkjenning av SR{ {11}}AP for behandling av pasienter med MS med gangvansker. ENABLE-fasens observasjonsstudie med 901 pasienter viste at behandling med SR-4-AP er fordelaktig for pasienter med MS ved hjelp av selvopplevd fysisk funksjon og psykologisk helse i en virkelig verden2(tabell 2).

Basert på de lovende prekliniske dataene om beskyttelse mot retinal nevrodegenerasjon beskrevet ovenfor, utførte vår gruppe en retrospektiv, multisenter OCT-studie for å sammenligne retinal nevrodegenerasjon mellom 52 pasienter på kontinuerlig 4-AP-terapi og 51 kontroller som ble matchet for alle relevante kovariater ved å bruke en forhåndsdefinert samsvarsalgoritme. I tråd med de eksperimentelle dataene, under samtidig 4-AP-terapi, ble degenerasjon av nervefiberlaget i makulær retinal redusert over 2 år. Disse funnene må imidlertid bekreftes i uavhengige og ideelt prospektive kohortstudier, spesielt fordi effektstørrelsen var lav og frekvensen av peripapillær retinal nervefiberlag og makulær ganglioncelle/indre plexiform lag-fortynning ikke var signifikant forskjellig mellom gruppene . Disse avvikene i en beskyttende effekt av 4AP bare på mRNFL, men verken i pRNFL eller i McGill, er ikke lett å forklare. Det er viktig å nevne at fordi 4AP kun er lisensiert for å forbedre gangvansker hos pasienter med EDSS 3.5-5, ble endringsratene som ble analysert undersøkt i senere stadier av sykdommen og uten akutt optisk neuritt. I en slik setting forekommer bare svært subtile retinale endringer, og store kohorter vil være nødvendig for å oppdage behandlingseffekter. Derfor var den retrospektive studien på pasienter absolutt ikke tilstrekkelig kraftfull til å pålitelig oppdage beskyttende behandlingseffekter, og det kommer ikke som en overraskelse at bare ett av utfallene viste seg positivt. Muligens var mRNFL det mest følsomme laget for påvisning av behandlingseffekter.5"

Oppsummert, en voksende mengde in vivo-bevis tyder på at 4-AP, i tillegg til dens velkjente symptomatiske effekter, ved å forhindre nevrodegenerasjon kan endre sykdomsforløpet til EAEON og muligens til og med pasienter med MS. Foreløpige in vitro-bevis innebærer involvering av cellulære kalsiumnivåer og NFAT-veien, men ytterligere undersøkelser er berettiget for å belyse de eksakte molekylære mekanismene som ligger til grunn for 4-APs nevrobeskyttende effekt i immunmediert inflammatorisk demyelinisering. Disse funnene kan ha en markant innvirkning på MS-behandlingsstrategier hvis de bekreftes i en prospektiv randomisert kontrollert klinisk studie.

effekten av Cistanche

Referanser

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Gjenoppretting av aksonal funksjon med 4-aminopyridin: klinisk effekt ved multippel sklerose og utover. CNS-medisiner 2018;32:637–651.

2. Horton L, Conger A, Conger D, et al. Effekt av 4-aminopyridin på synet hos pasienter med multippel sklerose med optisk nevropati. Neurology 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. Effekten av Fampridine-SR på kognitiv tretthet i en randomisert dobbeltblind crossover-studie hos pasienter med MS. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Bror SD, Filli L, Geissler O, et al. Positive effekter av fampridin på kognisjon, tretthet og depresjon hos pasienter med multippel sklerose over 2 år. J Neurol 2018; 265:1016–1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ, et al. Preklinisk utprøving av 4-aminopyridin hos pasienter med kronisk ryggmargsskade. Paraplegia 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z, et al. Dalfampridin forbedrer den sensorimotoriske funksjonen hos rotter med kroniske defekter etter okklusjon av middels cerebral arterie. Stroke 2013;44: 1942–1950.

7. Trimmer JS, Rhodes KJ. Lokalisering av spenningsstyrte ionekanaler i pattedyrhjernen. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Studier av struktur-aktivitetsforhold av fire nye 4-aminopyridin K( plus ) kanalblokkere. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. Effektene av 4-aminopyridin og tetraetylammoniumioner på normale og demyeliniserte pattedyrnervefibre. J Physiol 1981;313:301-315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Effekt av fampridin på aksonal eksitabilitet ved multippel sklerose. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Spenningsstyrte K pluss-kanaler i humane T-lymfocytter: en rolle i mitogenese? Nature 1984;307:465–468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. Den spenningsstyrte kaliumkanalen Kv1.3 er sterkt uttrykt på inflammatoriske infiltrater i multippel sklerose-hjerne. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J, et al. Kv1.3-kanal som et sentralt terapeutisk mål for nevroinflammatoriske sykdommer: toppmoderne og utover. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. Den spenningsstyrte Kv1.3 K( pluss)-kanalen i effektorminne T-celler som et nytt mål for MS. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopyridintoksisitet med utilsiktet overdose hos fire pasienter med multippel sklerose. Neurology 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Et uvanlig tilfelle av 4-aminopyridin-toksisitet. J Emerg Med 2006;30:175–177.

17. Schwam E. Alvorlig utilsiktet overdose av 4-aminopyridin på grunn av en sammensatt apotekfeil. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A, et al. Effekten av fampridin på risikoen for anfall hos pasienter med multippel sklerose. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A, et al. Fampridine-SR i multippel sklerose: en randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert, dosevarierende studie. Mult Scler 2007; 13:357–368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA, et al. Dosesammenligningsforsøk av fampridin med vedvarende frigjøring ved multippel sklerose. Neurology 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Peroralt fampridin med vedvarende frigjøring ved multippel sklerose: en randomisert, dobbeltblind, kontrollert studie. Lancet 2009;373: 732–738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR, et al. En fase 3-studie av oral dalfampridin med utvidet frigivelse ved multippel sklerose. Ann Neurol 2010;68:494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Fampridin med forlenget frigivelse og gange og balanse i MS: randomisert kontrollert MOBIL-forsøk. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S, et al. 4-Aminopyridin-indusert aktivitet redder hypoeksiterbare motoriske nevroner fra amyotrofisk lateral sklerose-pasient-avledet induserte pluripotente stamceller. Stamceller 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Bredspektrede effekter av 4-aminopyridin for å modulere amyloid beta1-42-indusert cellesignalering og funksjonelle responser i menneskelig mikroglia. J Neurosci 2006;26:11652–11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z, et al. Design, syntese, immunocytokjemi-evaluering og molekylær docking-undersøkelse av flere 4-aminopyridinderivater som potensielle nevrobeskyttende midler for behandling av Parkinsons sykdom. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Prekondisjonering med 4-aminopyridin beskytter cerebellare granulatneuroner mot eksitotoksisitet. Brain Res 2009;1294: 165–175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Svikt og redning av prekondisjoneringsindusert nevrobeskyttelse ved alvorlige slaglignende fornærmelser. Nevrofar mykologi 2016;105:533–542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A, et al. 4-Aminopyridin fremmer funksjonell restitusjon og remyelinisering ved akutt perifer nerveskade. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. In vivo-behandling med K pluss-kanalblokkeren 4-aminopyridin beskytter mot kainat-indusert nevronal celledød gjennom aktivering av NMDA-reseptorer i murine hippocampus. Neuropharmacology 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Aminopyridin forbedrer eksperimentell autoimmun neuritt hos Lewis-rotter. J Neuroimmunol 2017;305:72–74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB, et al. Identifikasjon av en ny klasse av inhibitorer av den spenningsstyrte kaliumkanalen, Kv1.3, med immunsuppressive egenskaper. Biochemistry 2002;41:7781–7794.

33. Varga Z, Company T, Papp F, et al. Kaliumkanalekspresjon i human CD4 pluss regulatoriske og na¨ ïve T-celler fra friske forsøkspersoner og multippel sklerosepasienter. Immunol Let 2009;124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Undertrykkelse av inflammatorisk demyelinisering og aksondegenerasjon gjennom inhibering av Kv3-kanaler. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Aminopyridine forbedrer relapsing-remitting eksperimentell autoimmun encefalomyelitt i SJL/J mus. J Neuroimmunol 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-Aminopyridin forbedrer mobiliteten, men ikke sykdomsforløpet i en dyremodell av multippel sklerose. Exp Neurol 2013;248: 62–71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Beskyttende effekter av 4-aminopyridin ved eksperimentell optisk nevritt og multippel sklerose. Brain 2020;143:1127–1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Mobilisering av kalsium fra intracellulære lagre, potensering av nevrotransmitter-induserte kalsiumtransienter og kapasitiv kalsiuminntrengning av 4-aminopyridin. J Neurosci 2001;21:3135–3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopyridin hos pasienter med multippel sklerose: dosering og serumnivå relatert til effekt og sikkerhet. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. Oralt administrert 4-aminopyridin forbedrer kliniske tegn ved multippel sklerose. Ann Neurol 1990;27:186–192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Aminopyridin forbedrer kliniske tegn ved multippel sklerose. Ann Neurol 1987;21:71–77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopyridin ved multippel sklerose: forlenget administrasjon. Neurology 1991;41: 1344–1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Effekter av 4-aminopyridin hos pasienter med multippel sklerose. J Neurol Sci 1983;60:353-362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. Effektene av 4-aminopyridin på kliniske tegn ved multippel sklerose: en randomisert, placebokontrollert, dobbeltblind, cross-over-studie. Ann Neurol 1992;32:123–130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopyridin i behandling av pasienter med multippel sklerose. Langsiktig effekt og sikkerhet. Arch Neurol 1994;51:292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Fatigue i multippel sklerose: flerdimensjonal vurdering og respons på symptomatisk behandling. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Fatigue i progressiv multippel sklerose: resultater av en randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert, crossover-forsøk med oral 4-aminopyridin. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopyridin: nytt liv for et gammelt stoff. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Kvantitativ vurdering av forsinket frigjøring av 4-aminopyridin for symptomatisk behandling av multippel sklerose. Neurology 1997;48:817–821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR, et al. Langsiktig sikkerhet og effekt av dalfampridin for gangvansker hos pasienter med multippel sklerose: resultater av åpne utvidelser av to fase 3 kliniske studier. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P, et al. Vurdering av klinisk betydningsfulle forbedringer i selvrapportert gangevne hos deltakere med multippel sklerose: resultater fra den randomiserte, dobbeltblinde fase III ENHANCE-studien av fampridin med forlenget frigivelse. CNS-medisiner 2019;33:61–79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lappland DA, et al. Forbedret pasientrapportert helseeffekt av multippel sklerose: ENABLE-studien av PR-fampridin. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopyridin som et enkelt middel for diagnostikk og behandling for alvorlig nerveknusningsskade. Mil Med 2019;184(suppl 1):379–385.