Nøytralisering av autoantistoffer forbedrer kapillærsvekkelse og tretthetssymptomer etter covid-19-infeksjon
Jun 13, 2022
Kliniske trekk ved koronavirussykdom 2019 (COVID-19) er forårsaket av alvorlig akutt respiratorisk syndrom koronavirus-2 (SARS-CoV-2). Akutt infeksjonsbehandling er et betydelig helseproblem, og utviklingen av langtids-Covid-syndrom (LCS) er ekstremt utfordrende for pasienter og leger. Det er assosiert med en rekke egenskaper som nedsatt kapillær mikrosirkulasjon,kronisk utmattelsessyndrom(CFS),pro-inflammatoriske cytokiner, og funksjonelle autoantistoffer rettet mot G-proteinkoblede reseptorer (GPCR-AAbs). Her presenterer vi en saksrapport om vellykket helbredelse av LCS med BC 007 (Berlin Cures, Berlin, Tyskland), et DNA-aptamer-medikament med høy affinitet til GPCR-AAbs som nøytraliserer disse AAbs. En pasient med en dokumentert historie med glaukom, ble frisk etter mild covid-19, men fortsatt led avCFS, tap av smak og nedsatt kapillær mikrosirkulasjon i makula og peripapillær region. Han ble positivt testet for ulike målrettede GPCR-AAbs. Innen 48 timer etter en enkelt BC 007-behandling ble GPCR-AAbs funksjonelt inaktivert og forble inaktive i løpet av observasjonsperioden på 4 uker. Denne observasjonen ble ledsaget av konstant forbedring avtretthetssymptomerav pasienten, smak og netthinnekapillær mikrosirkulasjon. Derfor kan fjerning av GPCR-AAbforbedreegenskapene tilCFS, slik som kapillær svekkelse, tap av smak ogCFS.
For mer info om CFS-behandling
INTRODUKSJON
Alvorlig akutt respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) forårsaket en pandemi med globale helseproblemer. Symptomene under akutt infeksjon og selv etter koronavirussykdom 2019 (COVID-19) og langvarig covid-syndrom (LCS) er en utfordring for hver enkelt behandler. Selv den kliniske egenskapen til LCS oppsummerer et bredt spekter av symptomer; det kan antas at mangfoldet av molekylære mekanismer er grunnlaget for ulike kliniske egenskaper ved LCS (f.eks. lungebegrensning, endokarditt, ubehag, smakstap og kognitiv svikt). En av disse kliniske enhetene kan induseres av autoimmune mekanismer, og foreslås å være involvert under infeksjon og deretter (1). Siden ikke alle pasienter med COVID-19 sykdom vil lide av LCS etterpå, kan det være en genetisk følsomhet som grunnlag for hyperstimulering av immunsystemet (2). Aktivering av mastceller, frigjøring av proinflammatoriske cytokiner, dannelse av nøytrofile ekstracellulære feller (NETosis) og generering av autoantistoffer (AAbs) kan forekomme i dette komplekse immun- og autoimmune samspillet (3–8). Spesielt ble AAbs rettet mot G-proteinkoblede reseptorer (GPCR-AAbs) observert i sera til pasienter som ble friske etter akutt COVID-19, med en tilsynelatende kobling til blodmikrosirkulasjon (8). Nyere studier med ikke-invasiv optisk koherenstomografi angiografi (OCT A) antydet at selv måneder etter COVID-19 er okulær kapillær mikrosirkulasjon svekket (9, 36). Vi foreslår at den kapillære svekkelsen delvis kan induseres av den agonistiske GPCR-AAb rettet mot ß2-adrenerge reseptoren (ß2-AR). Denne koblingen er allerede etablert i kliniske studier for pasienter med glaukom (37), som nå tjener som grunnlag for å identifisere GPCR-AAbs som et potensielt terapeutisk mål hos pasienter med nedsatt kapillærmikrosirkulasjon etter COVID-19. Her presenterer vi en saksrapport om en pasient med høye nivåer av GPCR-AAbs, nedsatt retinal kapillær mikrosirkulasjon og tilsvarende kliniske symptomer på LCS. Pasienten ble overvåket før og etter nøytraliseringen av GPCR-AAbs av et DNA-aptamer-medikament med høy affinitet til en GPCR-AAb, nemlig BC 007.
RESULTATER Case Report
En 59-år gammel mann med en glaukomhistorie på 17 år led av covid-19-infeksjon to ganger. Ingen alvorlige symptomer ble overvåket under begge COVID-19-infeksjonene angående nødvendigheten av sykehusinnleggelse. Den første COVID-19-infeksjonen skjedde 04/2020. Etterpå ble ingen symptomer registrert av pasienten. Etter en kirurgisk restaurering på grunn av søvnapné (september 2020), skjedde tap av smak, som ble bedre i løpet av de neste månedene, men som likevel ikke nådde normaliteten. Det ble antatt at pasienten led av en 2. COVID{10}}-infeksjon i løpet av årsskiftet med forverring av smakstapet og et progressivt utmattelsessyndrom som startet i januar 2021. To måneder senere oppsto nevrologiske symptomer (hjernetåke). , mangel på konsentrasjon og ubalanser). I mai 2021 ble det observert at de kanadiske kriteriene var 11, Chalder Fatigue Scale var 27 og Bell Score var 70, noe som begrenser pasientens hverdagsaktiviteter. I tillegg diastolisk blodtrykket ble økt (Figur 1). Å være deltaker i Erlanger Glaucoma Registry (EGR, ISSN 2191-5008, CS-2011; NTC00494923) ved Institutt for oftalmologi, University of Erlangen-Nürnberg, seropositivitet av AAb målrettet mot ß2-AAb har allerede vært kjent for å eksistere i 12 år. Etter den første COVID-19-infeksjonen vedvarte det eksisterende AAb-mønsteret til pasienten og ytterligere AAb-målrettet angiotensin-1-reseptor (AT-1-AAb), 1-adrenerg reseptor ( {{0}}AAb), MAS-reseptor (MAS-AAb) og muskarin2-reseptor (M2-AAb) ble overvåket i en kardiomyocyttbioanalyse. Best korrigert synsskarphet (BCVA) ble funnet å være 0.8 (desimal, høyre øye, RE) og 0.6 (desimal, venstre øye, LE). Intraokulært trykk (IOP) ble funnet å være henholdsvis 13 mm Hg (RE) og 13 mm Hg (LE), under topikale anti-glaukomatøse øyedråper (Taflfluprost 15)µg/ml; en gang
en dag). I tillegg var det allerede utført en Nd:YAG-iridotomi, trabekulektomi og kataraktkirurgi på LE. Optisk plate viste glaukomendring [RE: I, LE: II, klassifisert etter Jonas (10, 11)]. Gjennomsnittlig defekt ble funnet å være henholdsvis 5,6 dB (RE) og 7,0 dB (LE). Optisk koherenstomografi – angiografi (OCT-A) (Spectralis II OCT-A, Heidelberg Engineering, Heidelberg, Tyskland) ga en svekket kapillær mikrosirkulasjon i makula og peripapillærområdet sammenlignet med normative data (Figurene 2A–D). Ingen vaksinasjon mot SARS-CoV-2 ble gjort før en behandling med BC 007. Tatt i betraktning seropositiviteten til ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS-AAb og M2-AAb og deres potensielle kobling til den nedsatte netthinnemikrovaskulaturen, sammen med pasienten bestemte vi oss for å forsøke å helbrede med aptamer BC 007 (Berlin Cures GmbH, Berlin, Tyskland). Målet var å (1) eliminere AAbs mot GPCR-AAbs, og å (2) forbedre den svekkede kapillære mikrosirkulasjonen, målt ved OCT-A. I tillegg hadde vi til hensikt å forbedre kronisk utmattelsessyndrom (CFS). Etter og under infusjonen av BC 007 (1350 mg i NaCl; i 75 minutter, ryggleie), ble det ikke observert noen alvorlige bivirkninger. Seropositivitet for ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS AAb og M2-AAb ble evaluert (Figur 3). Netthinnekapillær mikrosirkulasjon ble målt ved OCT-A da retinal kartetthet fungerer som en korrelat for den systemiske mikrosirkulasjonen (Figurene 2A–D). Kroniske utmattelsessymptomer ble vurdert av tre standardiserte skårer (Canadian Criteria, Chalder Fatigue Scale og Bell Score;Figur 4). Så tidlig som 2 timer etter infusjon av BC 007, aktiviteten til ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS AAb og M2-AAb ble redusert og tettheten av makula og peripapillære kar økte. En dag etter infusjonen av BC 007 ble GPCR-AAbs observert å være i grensen, og etter 2 dager ble ingen funksjonell aktivitet observert for alle AAbs i kardiomyocytt-bioanalysen (12). Pasienten forble seronegativ for ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS-AAb og M2-AAb så lenge som 4 uker etter infusjonen av BC 007 (Figur 3). Forbedringen av netthinnemikrosirkulasjonen, observert kort tid etter infusjonen av BC 007, økte kontinuerlig på dag 1 og 2 og holdt seg på et konstant økt nivå i ex ante sammenligning i løpet av observasjonsperioden på 4 uker (Figurene 2A–D).
FIGUR 2 |Måling av okulære parametere (kapillær mikrosirkulasjon,A–D; intraokulært trykk,E): Kapillær mikrosirkulasjon av makula og peripapillær region, skannet ved optisk koherenstomografi-angiografi (OCT-A): kartetthet (VD) ble overvåket i de tre lagene av makula (overfladisk vaskulær plexus, SVP,A; intermediær kapillær plexus, ICP,B; dyp kapillær plexus, DCP,C) og peripapillær region(D). Kartetettheten til makula ble redusert etter COVID-19-infeksjon sammenlignet med eksisterende data fra 2018. Etter behandling med BC 007 økte VD i alle de tre lagene av makula og peripapillær region, og var stabil over minst under observasjonsperioden på 4 uker (grå: rekkevidde av VD i normale øyne, stiplet linje: referansenivå for VD etter COVID-19-infeksjon). Data for venstre øye er vist ettersom kvaliteten på OCT-A-skanningene av høyre øye ikke kunne utnyttes på grunn av en hindret fiksering av pasienten ved tilstedeværelse av grå stær.(E) Intraokulært trykk (IOP, mmHg; målt ved Goldmann applanasjonstonometri) ble overvåket før og etter behandling med BC 007; referansedata fra 2018 (EGR, ISSN 2191-5008, CS-2011; NTC00494923) ble presentert: IOP ble redusert etter behandling med BC 007, da IOP-nivået var stabilt, men uten IOP-senkende øyedråper (antiglaukomatøse øyne) dråpe før behandling med BC 007: Taflfluprost 15µg/ml, en gang daglig; etter behandling med BC 007: uten IOP-senkende lokal terapi); w-uke; 1. COVID-19-infeksjon: 04/2020; antatt 2. COVID-19-infeksjon: årsskiftet 2021.
FIGUR 3 |Autoantistoffer (AAbs) mot G-proteinkoblede reseptorer (ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS-AAb og M2-AAb) før (på infusjonsdagen, før behandlingen, enkeltstjerne) og etter behandling med BC 007 [etter 2 timer (dobbeltstjerne), 1 dag, 2 dager og 1–4 uker]: funksjonell aktivitet av den positive og negative kronotrope effekten av de forskjellige AAbs ble redusert selv etter 2 timer og funksjonelt inaktiv i det minste over observasjonsperioden på 4 uker (cut-off 1,8 slag). /15 s); w-uke.
FIGUR 4 |Kronisk utmattelsessyndrom (CFS) ble vurdert av Canadian Criteria, Chalder Fatigue Scale og Bell Score før og etter behandling med BC 007: CFS ble redusert etter behandling med BC {{8} }07, fraværende etter 4 uker; jo lavere er Canadian Criteria and Chalder Fatigue Scale, jo lavere er CFS; jo høyere Bell-score, jo lavere er CFS; w, uke; rekkevidden til poengsummene – kanadiske kriterierscore: 0 (best)–34 (dårligst): Chalder Fatigue Scale: 0 (best)–33 (dårligst); Bellscore: 100 (best)–0 (dårligst).
Tilsvarende økt retinal kapillær mikrosirkulasjon, ble tretthetssymptomene til pasienten jevnt bedre (Figur 4). Hjernetåken, mangel på konsentrasjon og ubalanse forbedret seg kontinuerlig og var fraværende etter 4 uker. Tap av smak oppløst. Som en positiv bieffekt har vi observert en reduksjon av det intraokulære trykket (IOP) i begge øyne (Figur 2E). IOP viste en stabil oppfølging, nå uten den eksisterende topiske glaukomterapien. Faktisk, i løpet av observasjonsperioden på 4 uker, ble pasienten lettet fra medisin mot glaukom. I tillegg til dette ble tidligere forhøyet diastolisk blodtrykk senket (Figur 1).
DISKUSJON
Corona Virus Disease 2019-infeksjon rangert som et pandemisk helseproblem i 2020. I tillegg til de kliniske egenskapene under akutt SARS-CoV-2-infeksjon (f.eks. lungekomplikasjoner, vaskulitt og tromboembolisme), lider pasienter ofte av LCS etter bedring . Nyere studier diskuterte involvering av autoimmunitet under og etter COVID- 19-infeksjon. Mikrotrombose (immun trombose) og selve betennelsen utløses i denne komplekse patofysiologien (13–15), potensielt mediert av flere interagerende faktorer (f.eks. IL-1-mediert tromboksan B2-frigjøring, IL-6, endotelcelleaktivering, nøytrofil ekstracellulær felle (NET)-formasjoner (7, 16– 18). Ulike funksjonelle aktive og inaktive AAbs ble observert i sera fra pasienter med COVID-19, målrettet mot 52 og 60 kDa SSA/Ro (19) og interferon- (20).
Funksjonelt aktive (dvs. agonistiske) AAb er av stor interesse med tanke på deres skadelige potensial, og de ble observert i sera til pasienter etter COVID-19 (8). Overraskende nok, hver av disse GPCR-AAb (ß2-AAb, AT-1-AAb, 1-AAb, MAS-AAb og M2-AAb) målretter mot vasoaktive reseptorer. En kobling av ß2-AAb til netthinnens mikrovaskulatur ble nylig observert hos pasienter med glaukom (37). Pasienter med agonistisk ß2-AAb viste en svekket foveal-avaskulær sone (FAZ, skannet med OCT-A), med fokus på den intermediære kapillære plexus. Det er bare to regioner i levende mennesker, hvor kapillære mikrokar kan skannes, overvåkes, og kvantifisert ikke-invasivt: (1) neglefold ved mikroskopi, (2) retina ved OCT-A. OCT-A er en ny teknikk som muliggjør ikke-invasive skanninger av netthinnekapillærsystemet med høy oppløsning (lavµm rekkevidde). Til nå er det bare én OCT A-enhet tilgjengelig (Spectralis II OCT-A), som skanner området av interesse i tre mikrovaskulære lag. Disse mikrovaskulære OCT-A-skanningene korrelerer godt med den menneskelige anatomien (21). En tidligere studie viste at spesielt i den intermediære kapillære plexus (ICP) og peripapillær regionen, ble det observert en signifikant redusert kartetthet (VD) etter COVID-19 sammenlignet med friske øyne (36). I tilfeller av alvorlig COVID-19 under akutt infeksjon, ble de tilstøtende mikrovaskulære lagene i netthinnen også svekket (SVP, DCP). I tillegg var disse retinale funnene knyttet til kliniske alvorlighetsmarkører (f.eks. det høyeste nivået av D-dimer og det høyeste nivået av glutamat-pyruvattransaminase).
Dermed postulerer vi at den nedsatte netthinne- og peripapillære mikrosirkulasjonen kan tjene som en korrelat for tilstanden til den systemiske kapillære svekkelsen med muligens ulikt fokalt uttrykk etter SARS-CoV-2-infeksjon. Vi antar at funksjonelle vasoaktive GPCR-AAbs bidrar til svekkelse av mikrosirkulasjonen. I tillegg, gitt rollen til ß-adrenerge reseptorer i å stimulere IL-6-produksjon (22), er det sannsynlig at nøytralisering av GPCR-AAbs i tillegg kan redusere gjenværende IL-6-mediert betennelse hvis den er til stede. Denne molekylære banen er absolutt ikke spesifikk for COVID- 19. Pasienter med glaukom er kjent for å vise agonistisk ß2-AAb, som er knyttet til økt IOP (23, 24) som en uspesifikk immunaferese eliminerer det funksjonelle aktive ß2- AAb ledsaget av en reduksjon i IOP og/eller et antall antiglaukom øyedråper (23). AT-1-AAb ble tidligere rapportert i sera fra pasienter med malign hypertensjon eller svangerskapsforgiftning (25, 26). ß2-AAb og M2-AAb er allerede observert hos pasienter med CFS, uavhengig av COVID-19 (27). Derfor antar vi at det er forskjellige triggere som stimulerer immunsystemet (f.eks. betennelse og iskemi) for å generere GPCR-AAbs.
Disse sameksisterende faktorene kan settes opp som en ond sirkel, ettersom GPCR-AAbs har blitt observert å virke spesielt i iskemiske eller inflammatoriske områder (28). Binding og nøytralisering av GPCR-AAbs ville være et flott alternativ for å eliminere deres funksjonelle aktivitet i sykdommer med seropositivitet av GPCR AAbs (23). BC 007 er en aptamer som binder og nøytraliserer ulike GPCR-AAbs. Det er et umodifisert 15-mer DNA-basert oligonukleotid (aptamer), som består av ni guanosin (purin nukleosid) og seks tymidiner (pyrimidin nukleosid) nukleosider av følgende sekvens 5′ -GGT TGG TGT GGT TGG-3′ . Det ble identifisert for å nøytralisere et bredt spekter av patogene GPCR-AAbs (29, 30). BC 007 er for tiden i en fase-2 klinisk studie for behandling av hjertesvikt hos pasienter som er seropositive for ß1-AAb. BC 007 har en gunstig sikkerhetsprofil og tolereres godt som en intravenøs infusjon på opptil 1900 mg iv over 75 minutter, som testet i en dosefinnende studie. En forbigående antikoagulatorisk effekt (mild til moderat økning i PTT, PT og INR) som normaliseres umiddelbart etter avsluttet infusjon var en forventet bireaksjon. Forsøket på helbredelse med BC 007 ble gjort ettersom alvorlighetsgraden av LCS økte i løpet av 5 måneder etter 2. COVID-19-infeksjon (dvs. 13 måneder etter 1. COVID-19-infeksjon). Derfor antar vi at reduksjonen av LCS skyldes effekten av BC 007-mediert nøytralisering av GPCR-AAbs og ikke på grunn av en infeksjonsoppløsning. Tidligerein vitroeksperimenter antydet at BC 007 ikke binder og nøytraliserer spesifikke anti-SARS CoV-2 antistoffer (31). Siden pasienten, presentert i dette manuskriptet, var seronegativ for spesifikke anti-SARS CoV-2 antistoffer før behandlingen med BC 007, kan vi ikke løse dette problemet. Som konklusjon, her rapporterer vi en bemerkelsesverdig reversering av en LCS med en rekke egenskaper hos en pasient med seropositivitet for GPRC-AAbs ved nøytralisering av disse GPCR-AAbs med aptameren, BC 007. Den spesifikke nøytraliseringen av sistnevnte forbedret de svekkede retinal kapillær mikrosirkulasjon og kroniske utmattelsessymptomer, som oppsto fra LCS. Parallelt forsvant smakstap, ubalanser og hjernetåke, og IOP og blodtrykk (diastolisk) kunne senkes.
METODER Kardiomyocytt bioassay
En etablert sensitiv bioassay ble brukt for påvisning av GPCR-AAbs da ELISA ga en høy spesifisitet i dyreprøver, men ikke i humane prøver (32). Spontant ble bankende rottekardiomyocytter dyrket i 4 dager og deretter brukt til eksperimentene som beskrevet i detalj (33). Slaghastigheten ble telt på seks utvalgte felt av kulturkolben plassert på et oppvarmet trinn i et omvendt mikroskop (37◦C) i 15 s. Det AAb-holdige IgG-preparatet i seraet til pasientene ble brukt i en fortynning på 1:50. Kardiomyocyttbioanalysen ble inkubert med sera fra pasienten (i 60 minutter; fortynning 1:40). Cut-off ble funnet å være 1,8 slag/15 s.
Score for kronisk utmattelse
Kronisk tretthetsskår (CF) ble brukt som følger: Canadian Criteria, Chalder Fatigue Scale og Bell Score. Jo mer reduksjonen er i Canadian Criteria and Chalder Fatigue Scale, desto bedre er CF-symptomene til pasienten. Jo mer økningen er, desto bedre er CFS-symptomene.
Optisk koherenstomografi – angiografi
Retinal kartetthet (VD) ble skannet med Heidelberg Spectralis II (Heidelberg Engineering, Heidelberg, Tyskland). To anatomiske områder av øyet ble overvåket (skannevinkel: 15◦ × 15◦; skannestørrelse: 2,9× 2,9 mm; total skannestørrelse: 8,41 mm2; diameter på indre ring: 0,8 mm; diameter på den ytre ringen: 2,9 mm): makula og peripapillær region. Ved å skanne makula-regionen, kan en underinndeling av regionen i tre mikrovaskulære lag gjøres: overfladisk vaskulær plexus (SVP, tykkelse: 80)µm), mellomliggende kapillærplexus (ICP, tykkelse: 50µm), og dyp kapillærplexus (DCP, tykkelse: 40µm).
Peripapillære mikrokar ble skannet i ett overall lag som levert av selskapet. Skanningene ble utført i den høyeste kommersielt tilgjengelige laterale oppløsningen på 5,7µm/piksel. Etter manuell sjekk for riktig segmentering eller artefakter, ble analyse av skanningene utført av Erlangen-Angio Tool (EA-Tool; versjon 3.0; Matlab, The MathWorks, Inc., R2017b), som muliggjorde kvantifisering av VD med høy reproduserbarhet og pålitelighet (34). EA-Tool (versjon 3.0) er avansert programvare som implementerer et anatomisk posisjoneringssystem (APS, en del av Glaucoma Module Premium Edition [GMPE], Heidelberg Engineering, Tyskland). APS-modulen muliggjør en nøyaktig justering av OCT-A-skanninger til individuelle Fovea-til Bruchs Membrane Opening-Center (FoBMOC)-akse for hver pasient ("APS-ify"). I tillegg implementerer det avanserte EA-verktøyet (versjon 3.0) muligheten til å analysere peripapillær VD i henhold til BMO-landemerkene (BMO-basert peripapillær VD), som representerer den eksakte grensen til synsnervehodet. BMO- og APS-koordinatene ble eksportert av SPX1902-programvare (prototypeprogramvare, Heidelberg Engineering, Heidelberg, Tyskland) (35).
FINN DE BESTE BOTANISKE HOLISTISKE BEHANDLINGENE FOR kronisk utmattelsessyndrom CFS
Vår nøye håndlagde Neuro Regen-formel inkluderer de best undersøkte urtene. Hver viser fantastisk potensial forStressavlastningbehandling, pluss generell nerve- og nevronstøtte generelt.
Inkluderer:
Cistanche-
Cistancheer den mest brukte urten i tradisjonell kinesisk medisin for å lindre fysisk tretthet, spesielt etter å ha lidd av en alvorlig sykdom. Faktisk,Cistancheer et slags matmateriale. På det teoretiske grunnlaget for tradisjonell medisin har moderne medisin også utført mye forskning påanti-tretthetseffekt avCistanche. Eksperimenter har vist atAnti-tretthetseffekt av Cistancheer på grunn av forbedring av kroppens organer avCistanche. Cistanche kanforbedre funksjonene til nyrene og leveren, og dermed oppnå enanti-tretthetseffekt. Følgende er en oversikt over hvordan Cistanche kanlindre tretthet.
Med samfunnsutviklingen blir menneskers liv raskere og raskere. Fra det øyeblikket solen står opp, som en del av den "levende maskinen", må alle skynde seg til postene sine. Enten du er en tekniker som står på verkstedet, en aksjehandler som sitter foran en datamaskin, eller til og med en student som leker på lekeplassen ... du må møte utallige press. Folks jobber er forskjellige, men de har alle en felles problem-tretthet. Tretthet er som en kakerlakk som gjemmer seg i hjørnet av kjøkkenet. Det har ingen vesentlig skade, men det har alltid plaget mennesker.
Hvis du har noen forslag og spørsmål om cistanche, er jeg her for å hjelpe med forvirring!
