Del 2 Fenyletanolglykosidliposomet hemmer PDGF-indusert HSC-aktivering via regulering av FAKPI3KAkt-signalveien
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materialer og metoder
4.1. Materialer
CPhGs (fenyletanoidglykosid fra cistanche)ble kjøpt fra Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, Kina). Innholdet iechinaceavar mer enn 35 prosent, og akteosiden var mer enn 16 prosent. Lecithin ble kjøpt fra Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, Kina). 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycerol-3-fosfokolin (DPPC) og kolesterol ble levert av Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, USA). En udødeliggjort rottehepatisk stellatecelle ble levert av Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, Kina). Dulbeccos modifiserte Eagle's medium (DMEM) ble kjøpt fra Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, USA). Fetalt bovint serum (FBS) ble kjøpt fra Gibco Life Technologies (Waltham, MA, USA). Penicillin (100 卩g/mL) og streptomycin (100 卩g/mL) var produkter fra Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl){ {13}},5-difenyltetrazoliumbromid] (5 mg/ml) ble kjøpt fra Sigma (Oakville, ON, Canada). LDH-aktivitet ble vurdert ved å bruke et LDH-analysesett fra Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Beijing, Kina). FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I og propidiumjodid (PI)/RNase Staining Buffer ble alle kjøpt fra BD Biosciences (San Diego, CA, USA) og rrPDGF-BB ble levert av R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). TRIzol-reagensen ble kjøpt fra Thermo Fisher Scientific, Inc. RevertAid First Strand cDNA Synthesis-settet var et produkt fra Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Litauen). TB Green Premix Ex Taq TM II ble kjøpt fra Takara (Dalian, Kina). Ripa pyrolyseløsning ble levert av Thermo Fisher Scientific, Inc. Proteasehemmer fenylmetylsulfonylfluorid og bredspektret fosfataseinhibitorblanding ble kjøpt fra Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Kina). Proteinbånd ble visualisert av et Pierce™ ECL Western Blotting Substrate, som ble levert av Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Pepperrotenzymet merking geit anti-kanin IgG ble kjøpt fra Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, Kina). Super Signal West Femto Trial Kit ble levert av Thermo Fisher Scientific, Inc. Rabbit anti-p-actin, a-SMA, kollagen-1, FAK, PI3K, phospho-PI3K, Akt og phospho-Akt antistoffet ble alle kjøpt fra Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Beijing, Kina). X-3-FAK og X-3-NC ble kjøpt fra Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, Kina). Lipofectamine 2000 ble levert av Invitrogen.
4.2. Fremstilling av CPhG-liposomer
Lecitin, DPPC og kolesterol (1:2:2, m/m/m) ble oppløst i en blanding av kloroform og metanol (2:1 v/v), rotert for å danne en film ved 49-50 grader, ogCPhGs(fenyletanoidglykosid fra cistanche)(250 卩g/ml) ble tilsatt deretter. Den reaktive løsningen ble rotert og hydrert kontinuerlig, og fosfolipidmembranen ble overført til vannet for å danne CPG-liposomer. Den innkapslede liposomprosessen ble gjentatt i henhold til metodene ovenfor. For å oppnå et jevnt liposom ble det innkapslede liposomet ekstrudert 5 ganger med en 0.45 µm mikroporøs membran og filtrert 18-20 ganger med en 0,22 µm membran. CPG liposomene ble lagret ved 4 grader. Partikkelstørrelsesfordelingen ble målt med en laserpartikkelstørrelsesanalysator, partikkelformen ble observert ved transmisjonselektronmikroskopi, og medikamentbelastningen og innkapslingseffektiviteten ble bestemt ved HPLC.
4.3. In vitro utgivelse fra CPG Liposomet og CPhGs(fenyletanoidglykosid fra cistanche)
In vitro-frigjøringsprofilen til CPG-liposomer ogCPhGs(fenyletanoidglykosid fra cistanche) ble utført ved bruk av dialysemembranmetoden. Totalt 5 mL av hver prøve ble overført til en dialysepose med en 14,000 Da molekylvekt cut-o任 Dialyseposen ble nedsenket i 20{{1{11}} }} mL PBS-bufferløsning (pH=6.0) vibrerte ved 37 grader. Frigjøringsmediet (3 ml) ble trukket ut og erstattet med en isopyknisk PBS-bufferløsning (pH=6.0) med planlagte tidsintervaller (0,5,1, 2, 4, 8,12,16, 24 og 48 h). Konsentrasjonene av echinacoside i CPG-liposomer ogCPhGsi frigjøringsmediet ble bestemt av
HPLC. Den kumulative frigjøringen ( prosent ) av CPG-liposomer ogCPhGs(fenyletanoidglykosid fra cistanche) ble beregnet ved å bruke følgende ligning (1):
hvor Cn er medikamentkonsentrasjonen i frigjøringsmediet ved det n'te prøvetakingspunktet, V er volumet av det frigjorte mediet, og W er totaldosen.
For bedre å forstå vitro-frigjøringen som er karakteristisk forCPhG(fenyletanoidglykosid fra cistanche) liposom ogCPhGs, ble tre forskjellige modeller brukt for å passe til de oppnådde frigjøringsdataene: (a) nullordens kinetikkmodellen, (b) førsteordens kinetikkmodellen og (c) Higuchi-modellen gitt i ligning (2)-(4) :
hvor Mt/Mo er brøkdelen av curcumin som frigjøres fra prøven på tidspunkt t, og k er frigjøringskonstanten til de forskjellige modellene. Korrelasjonskoeffisienten er beregnet for å illustrere tilpasningsgraden mellom utgivelsesmodellen og dataene.
4.4. Cytotoksisitet
For HSC-ene ble en tetthet på 1 x 105 celler/ml sådd ut i 96-brønnplater og fikk vokse over natten ved 37 grader i en 5 prosent CO2-inkubator. Cellevitalitet ble testet på et bredt spekter avCPhGliposomkonsentrasjoner (117,79,58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68,1,84, 0,92 og 0,46 卩g/mL) for å oppdage testcellenes vitalitet og beregne IC50-verdiene. Deretter ble cellene inkubert ved 37 grader i 4 timer med 20 µL MTT (5 mg/ml i PBS-løsning). Det lilla MTT-produktet ble oppløst i en 150 µL DMSO, og en Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) ble brukt for å måle absorberen ved 490 nm. Følgende formel (ligning (5)) ble brukt til å beregne prosentandelen av cellelevedyktighet:
4.5. Celletoksisitet til CPhG-liposomer på HSC-er
Celler ble sådd inn i 6-brønnplater, og toksisiteten til HSC-ene ble målt ved hjelp av et LDH-deteksjonssett. Celler ble sådd ut med en tetthet på 2 x 105 celler/brønn i 6-brønnplater ved 37 grader i en inkubator med 5 prosent CO2. Etter vekst over natten ble cellene behandlet medCPhGliposomer (29,45, 14,72 og 7,36 µg/ml). En tom (DEME media) kontroll ble opprettholdt samtidig. Etter 24 timer ble cellene samlet ved trypsin og sentrifugering. Hver gruppe av celler ble administrert strengt i samsvar med settets instruksjoner. LDH-lekkasjehastigheten til cellekulturvæsken ble deretter beregnet.
4.6. Apoptoseanalyse
Celler ble dyrket i 6-brønnplater med en tetthet på 2 x 105 celler/brønn ved 37 grader i en inkubator med 5 prosent CO2. Etter vekst over natten ble cellene behandlet medCPhGliposomer (29,45, 14,72 og 7,36 卩g/mL), og deretter ble apoptosen til HSC-er målt ved å bruke FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit. Konsentrasjonene var basert på IC50 bestemt fra cytotoksisitetsanalysen. En tom (DEME media) kontroll ble opprettholdt samtidig. Etter 24 timer ble cellene samlet ved trypsin og sentrifugering og vasket med PBS og suspendert i en 500 µl bindingsbuffer. Deretter ble cellene farget med 5 µL Annexin V-FITC og 5 µL PE. Celler ble inkubert ved romtemperatur i 30 minutter i mørket, og den apoptotiske hastigheten ble målt ved å bruke et FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA).
4.7. Analyse av cellesyklusstopp
HSC-er (2 x 105 celler/2 ml/brønn) ble behandlet i 24 timer medCPhGliposomer ved 29,45, 14,72 og 7,36 ^g/ml i 6-brønnplater. En tom (DEME media) kontroll ble opprettholdt samtidig. Cellene ble høstet og vasket med 1 ml PBS og fiksert med 75 prosent etanol over natten ved 4 grader. Cellene ble deretter sentrifugert og resuspendert i 500 løsninger av propidiumjodid (PI)/RNase-fargebuffer ved 37 grader i 30 minutter i mørket. Til slutt ble cellene målt med et FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson). Proporsjonene av cellene i G0/G1-, S- og G2/M-fasene av cellesyklusen ble analysert av FACS Diva-programvaren (Becton Dickinson).
4.8. Effekten avCPhG(fenyletanoidglykosid fra cistanche) Liposom på PDGF-mediert FAK og PI3K/Akt Signaling Pathway
4.8.1. Spredningsanalyse
HSC-linjene (1 X 105 celler/ml) ble sådd ut i 96-brønnplater og fikk vokse over natten ved 37 grader i en 5 prosent CO2-inkubator. Etter 24 timers cellekultur ble cellene tilfeldig delt inn i følgende fem grupper: En blindkontroll (dyrket i DMEM som kun inneholder 10 prosent FBS), PDGF-BB (dyrket i DMEM som inneholder 50 卩g/L PDGF-BB), enCPhGliposomintervensjon (stimulert med medium som inneholder 50 昭/ml PDGF-BB 24 timer). Deretter ble cellene behandlet med 29,45, 14,72 og 7,36 Rg/ml CPhG-liposomer. Cellene ble kontinuerlig dyrket i 24 timer, 48 timer og 72 timer i inkubatoren ved 37 grader i 4 timer med 20 rL MTT (5 mg/ml i PBS-løsning). Det lilla MTT-formazan-produktet ble oppløst i 150 rL DMSO og estimert ved å måle absorbansen ved 490 nm i en Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Thermo Fisher Scientific, Inc.), og IC50 ble beregnet. Firedoble prøver ble kjørt for hver konsentrasjon i fire uavhengige eksperimenter. Følgende formel (ligning (6)) beregnet prosentandelen av cellelevedyktighet:
4.8.2. Kvantitativ sanntids polymerasekjedereaksjon (qRT-PCR)
Celler ble sådd i {{0}}brønnplater med en tetthet på 1 x 105 celler/ml. Denne grupperingsmetoden er den samme som den forrige. Etter 24 timer ble det totale RNA ekstrahert fra de dyrkede cellene med et TRIzol-reagens. Konsentrasjonen og renheten til RNA ble målt ved 260/280 nm ved bruk av et ultrafiolett spektrofotometer i henhold til standard OD260/OD280-forhold på 1.8-2.0. Revers transkripsjonsreaksjonene ble reversert transkribert fra RNA ved å bruke RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit. En TB Green Premix Ex TaqTM II ble brukt for å måle genuttrykk. qRT-PCR ble utført ved bruk av et ABI QuantStudio™6 Flex sanntids PCR-system (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Primersekvenser ble syntetisert av Sangon Biotech (Shanghai, Kina) (tabell 4).
4.8.3. Western blot-analyse
De totale proteinene ekstrahert fra HSC-er i forskjellige grupper ble fremstilt som beskrevet tidligere. Kort fortalt ble de lignende proteinene separert via 10 prosent natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE) og deretter overført til polyvinylidenfluorid (PVDF)-membraner (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Tyskland). Deretter ble PVDF-membranene blokkert i 3 prosent BSA og inkubert over natten ved 4 ◦C med de primære antistoffene. Dagen etter ble HRP-merket geit-anti-kanin IgG (1:25,{10}} fortynning; 1 time) tilsatt. Proteinbånd ble visualisert via et Pierce™ ECL Western Blotting Substrate og avbildet ved bruk av FluorChem E Imaging System (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), som ble normalisert med -aktin som en intern kontroll.
4.8.4. FAK-overuttrykkseksperimenter
Cellene ble delt inn i normal medium-kontrollgruppen, PDGF-BB-stimuleringsgruppen, PDGF-BB-stimuleringen pluss X-3-FAK-gruppen, PDGF-BB-stimuleringen pluss X-3-NC-gruppen, PDGF -BB-stimulering pluss X-3-FAK plussCPhGliposomgruppen, og rrPDGF-BB-stimuleringen pluss X-3-NC plussCPhGliposomgruppe. HSC-linjene (1 × 105 celler/ml) ble sådd ut i 6-brønnplater og fikk vokse over natten ved 37 ◦C i en 5 prosent CO2-inkubator. Neste dag ble PDGF-BB (dyrket i DMEM inneholdende 50 ug/L PDGF-BB) celler tilsatt og dyrket. På den tredje dagen ble pEX-3-FAK og X-3-NC fortynnet i et antibiotikafritt medium, blandet godt med lipofectamine 2000 og fikk stå ved 37 ◦C i 20 minutter før de ble tilsatt til hver brønn av cellene ved 37 ◦C. Etter å ha blitt inkubert i 5 timer, ble mediet som inneholdt 10 prosent serum erstattet i 48 timer, og på den femte dagen ble mediet erstattet med konsentrasjonen på 29,45 µg/ml CPhG liposom i 24 timer. Deretter ble hver brønn samlet på den andre, tredje, femte og sjette dagen, og uttrykkene av genproteinene FAK, PI3K, Akt, p-PI3K og p-Akt ble påvist.
4.9. Statistisk analyse
Data ble uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD). SPSS 16.0-programvaren (IBM, New York, NY, USA) ble brukt til statistiske analyser. Signifikansen av forskjellen ble beregnet ved en enveis ANOVA-test og etterfulgt av en LSD-test. Legemiddeloppløsningsligningen ble tilpasset av Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, USA).
5. Konklusjoner
Avslutningsvis viser resultatene våre detCPhG(fenyletanoidglykosid fra cistanche) liposomer hemmer betydelig aktivering av HSC-er, og demper utviklingen av leverfibrose markant ved å øke apoptose og regulere cellesyklusen i HSC-er. Hemming av aktiveringen av FAK/PI3K/Akt-signalveier kan være den underliggende mekanismen somCPhGliposomer beskytter mot kronisk leversykdom assosiert med fibrose. Disse funnene gir ny innsikt i mekanismene til denne nye legemiddelformuleringen som en antifibrogen kandidat for fremtidig behandling av leverfibrose. Imidlertid er de underliggende mekanismene mer komplekse enn det som er beskrevet her, og resultatene våre utelukker ikke mulig involvering av andre enheter forårsaket avCPhGliposomer for å behandle leverfibrose.
Forfatterbidrag:TL, JZ, S.-PY, LM og S.-LZ unnfanget og designet eksperimentene. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM og X.-YY analyserte dataene. S.-LZ og JZ skrev manuskriptet. TL, LM og JZ gjennomgikk manuskriptet. Alle forfattere leste og godkjente det endelige manuskriptet.
Finansiering:Denne forskningen ble finansiert av National Natural Science Foundation of China, stipendnummer 81560628.
Anerkjennelser:Dette arbeidet ble økonomisk støttet av National Natural Science Foundation of China (nr. 8156140127). Forfatterne vil gjerne uttrykke sin oppriktige takk til Jun Zhao og Xin Wang for deres forbedring av skrivingen av denne artikkelen.
Interessekonflikter:Forfatterne rapporterer ingen interesseerklæringer.
Referanser
1. Zhang, H.; Sun, D.; Wang, G.; Cui, S.; Field, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin lindrer leverfibrose via undertrykkelse av aktivert hepatisk stellatcelle. Biochem. Biofys. Res. Commun. 2019,511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Leverfibrose: Patofysiologi, patogenetiske mål og kliniske problemer. Mol. Aspekter Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Reparative effekter av astaxanthin-hyaluronan nanoaggregater mot retrorsin-CCl(4)-indusert leverfibrose og nekrose. Molecules 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Sun, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla fremmer høy glukose og PDGF-indusert hepatisk stellatcelleaktivering ved å indusere autofagi gjennom CaMKKp/ERK-signalvei. Toxicol. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Rollen til hepatisk stellatcelle (HSC)-avledede cytokiner i leverbetennelse og immunitet. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosafenyletanoidglykosider induserer apoptose i Eca-109-celler via den mitokondrieavhengige veien. Oncol. Lett. 2019,17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Du, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Fenyletanol Glykosider fraCistanche tubulosaUndertrykk hepatisk stellatecelleaktivering og blokker ledningen av signalveier i TGF-beta1/smad som potensielle antihepatiske fibrosemidler. Molecules 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Du, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Forebyggende effekter av fenyletanoidglykosider fraCistanche tubulosapå bovint serumalbumin-indusert leverfibrose hos rotter. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Felleeffektiviteten og absorpsjonen av fire typer proliposomer. J. Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bio-adhesive medikamentleveringssystem og dets anvendelse i tradisjonell kinesisk medisin. Hake. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Long, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Nitroimidazolderivat inkorporerte liposomer for hypoksi-utløst medikamentlevering og forbedret terapeutisk effekt i pasientavledede tumor xenografts. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Lever-målrettet liposom medikamentleveringssystem og dets forskningsfremgang i leversykdommer. World Chin. J. Digest. 2016, 24 4238. [CrossRef]
13. Zhou, BH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, HW PI3K/AKT-signalveiens involvering i fluorindusert apoptose i C2C12-celler. Chemosphere 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinacoside stimulerer celleproliferasjon og forhindrer celleapoptose i intestinale epiteliale MODE-K-celler ved oppregulering av transformerende vekstfaktor-p1-ekspresjon. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Anti-nociseptiv og antiinflammatorisk aktivitet forårsaket avCistanche deserticolahos gnagere. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaekstrakt øker beindannelse i osteoblaster. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. Effekt avCistanches HerbaVandig ekstrakt på bentap hos ovariektomisert rotte. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studier på den beroligende effekten avCistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Antifatigue aktivitet av fenylethanoid-rik ekstrakt fraCistanche deserticola. Phytother. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Nevroprotektive effekter av echinacoside i muse-MPTP-modellen av Parkinsons sykdom. Eur. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acylerte fenyletanoide aminoglykosider med hepatobeskyttende aktivitet fra ørkenplanten Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Forebygging av Cistanche salsa-ekstrakt på hepatisk fibrose indusert av karbontetraklorid hos rotter. Hake. Urte Med. 2013, 5 199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Fremstillingen av Cistanche phenylethanoid glykosider flytende prolipo somes: Optimalisert formulering, karakterisering, og prolipo noen dryppende piller in vitro og in vivo evaluering. Eur. J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, statsminister; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Leverfibrose påvirker målrettingsegenskapene til legemiddelleveringssystemer til makrofagundergrupper in vivo. Biomaterialer 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Sun, H.; Li, S.; Jepp.; Gallons, H. Sammensetningsdesign og medisinsk anvendelse av liposomer. Eur. J. Med. Chem. 2019,164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofen-lastede etanoliske liposompartikler for biomedisinske applikasjoner. J. Microbiol. Metoder 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Effekt av overflateladning på størrelsesavhengig cellulær internalisering av liposomer. Chem. Phys. Lipider 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Sun, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Galanginbelastede, levermålrettede liposomer: Optimalisering og hepatobeskyttende effekt. J. Drug Deliv. Sci. Teknol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Hepatisk fibrose: Det er på tide å gå med hepatiske stellatcellespesifikke terapeutiske mål. Hepatobiliær Pankreatisk Dis. Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brown, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Stamcellespesifikke mekanismer sikrer genomisk troskap innenfor HSC-er og ved aldring av HSC-er. Cell Rep. 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Motion, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 induserer apoptose av hepatiske stellatceller og demper leverfibrose hos mus ved å nedregulere miR-23a-5p og miR-28a-5p. Biochim. Biofys. Acta Biophys. Inkl. Fotosynth. 2018,1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Forskjeller i cellesyklusstatus ligger til grunn for transkripsjonell heterogenitet i HSC-rommet. Cell Rep. 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Rosmarinsyre svekker hepatisk fibrogenese via undertrykkelse av hepatisk stellatcelleaktivering/-proliferasjon og induksjon av apoptose. Asiatisk Pac. J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Effekter av endoteliale stamceller på spredning og biologisk funksjon av hepatiske stellatceller under skjærspenning. Hake. J. Appl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Aktiverte hepatiske stellatceller fremmer progresjon av gjenværende hepatocellulært karsinom etter varme fra autofagisk overlevelse til spredning. Int. J. Hyperthermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH Succinate induserer hepatisk fibrogenese ved å fremme aktivering, spredning og migrasjon, og hemme apoptose av hepatiske stellatceller. Biochem. Biofys. Res. Commun. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mekanismer for leverfibrose. Clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16 mekanismer for leverfibrose. I Comprehensive Toxicology, 3. utg.; McQueen, CA, red.; Elsevier: Oxford, Storbritannia, 2018; s. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Ekspresjonsmønstre av PDGF-A, -B, -C og -D og PDGF-reseptorene a og |3 i aktiverte rottehepatiske stellatceller (HSC). Cytokine 2005, 31, 349-357. [CrossRef]