Del én DsbA-L interagerer med VDAC1 i mitokondrionmediert tubulær celleapoptose og bidrar til progresjonen av akutt nyresykdom

Sammendrag

1. Bakgrunn

vi demonstrerte at disulfidbinding A-oksidoreduktase-lignende protein (DsbA-L) var involvert i progresjonen av nyrefibrose. Imidlertid er den nøyaktige funksjonen til DsbA-L ved akutt nyreskade (AKI), og mekanismene involvert, ennå ikke klarlagt.

2. Metoder

Vi illustrerer DsbA-L interaksjon med VDAC1 ved co-IP (co-immunopresipitering) in vitro og Viv og fant interaksjonsdelene av dem ved mutasjonseksperiment. Funnene ovenfor ble verifisert ved samlokalisering av dem. I tillegg konstruerte vi de to modellene av PT-DsbA-L og VDAC1 KO mus for å verifisere funksjonen til DsbAL og VDAC1 i modeller av VAN, CL, P og I/R-indusert AKI.

3. Funn

PT-DsbA-L-KO-musene viste forbedring av I/R-, VAN- og CLP-indusert AKI-progresjon via nedregulering av VDAC1. Til slutt bekreftet vi disse endringene i signalmolekyler ved å undersøke HK-2-celler og nyrebiopsier tatt fra pasienter med iskemisk eller akutt interstitiell nefritt (AIN)-indusert AKI. Mekanistisk interagerte DsbA-L med aminosyrene 9-13 og 22-27 i VDAC1 i mitokondriene til BUMPT-celler for å indusere nyrecelleapoptose og mitokondriell skade.

4. Tolkning

Dette arbeidet antydet at DsbA-L, lokalisert i de proksimale tubulære cellene, driver utviklingen av AKI, ved å direkte oppregulere nivåene av VDAC1. Running Tittel: The Role of DsbA-L in AKI.

5. Finansiering

National Natural Science Foundation of China, et stipend fra nøkkelprosjektet til Hunan provinsielle vitenskap og teknologiinnovasjon, Institutt for vitenskap og teknologi i Hunan-provinsen Project of International Cooperation and Exchanges, Changsha Science and Technology Bureau-prosjektet, Natural Science Foundation of Hunan Province, Fundamental Forskningsmidler for de sentrale universitetene ved Central South University, Hunan Provincial Innovation Foundation for Postgraduate China Hunan Provincial Science and Technology Department.

Nøkkelord

DsbA-L; VDAC_I; Bax; Cyt-c; AKI

Klikk her for å få Cistanche-fordelene og kjøpe Cistanche-piller

Introduksjon

Akutt nyreskade (AKI), en ødeleggende klinisk komplikasjon med høye forekomster av sykelighet og dødelighet, påvirker millioner av pasienter over hele verden(1). AKI induseres vanligvis av sepsis, nefrotoksiske midler og iskemi-reperfusjonsskade (IRI)(2). Foreløpig har de molekylære mekanismene som ligger til grunn for AKI ennå ikke blitt fullstendig belyst. Følgelig er det ingen effektive behandlingsstrategier tilgjengelig for AKI.

Tubulær celleskade har vært anerkjent i flere tiår som en viktig driver for AKI.3 Etter hvert som forskningen har utviklet seg, har et økende antall forskere identifisert at mitokondriell skade spiller en nøkkelrolle i tubulær celleskade og at denne første skaden er forårsaket av akkumulering av ROS, produksjon av cytokiner og cellulær død (inkludert både nekrose og apoptose); Til sammen bidrar alle disse prosessene til AKI.4-6 Selv om en voksende mengde forskning har fokusert på mekanismene som ligger til grunn for mitokondriell skade i AKI, har7- 12 den nøyaktige mekanismen som er ansvarlig for mitokondriell skade ennå ikke blitt identifisert.

Disulfid-binding Et oksidoreduktase-lignende protein (DsbAL) ble først identifisert som et mitokondrieprotein i rotteleverceller.13 Tidligere studier har vist at DsbA-L forhindret diett eller diabetisk nefropati (DN)-indusert fedme, betennelse, insulinresistens eller nyreskade.14-18 Interessant nok fant vår nylige studie at DsbA-L-mediert unilateral ureteral obstruksjon (UUO)-indusert nyrefibrose. Imidlertid er rollen og mekanismen til rørformet DsbA-L i AKI fortsatt helt ukjent.

I denne studien resulterte den proksimale tubulære delesjonen av DsbA-L (PT-DsbA-L-KO) i en musemodell i den bemerkelsesverdige dempningen av I/R, sammen med vankomycin (VAN) - og cecal ligering og punktering (CLP) )-indusert AKI. Konsekvent medierte DsbA-L også I/R, VAN- og LPS-indusert apoptose i mus nyre proksimale tubulære epitelceller (BUMPT) celler. Interessant nok fant vi at DsbA-L interagerte med 9-13 og 22 27 regionene i den spenningsavhengige anionkanalen 1 (VDAC1), et nøkkelmedlem i VDAC-familien av proteiner19 21; disse effektene ble observert i både in vivo og in vitro mitokondrieprøver og humane AKI-prøver. Videre demonstrerte vi at PTVDAC1-KO også forbedret nyrecelleapoptose i både in vitro- og in vivo-modeller av AKI. Samlet demonstrerte vi at DsbA-L interagerte med VDAC1 i mitokondriemediert tubulær celleapoptose og derfor forårsaket progresjon av AKI.

Cistanche tubulosa

Materialer og metoder

1. Etikkerklæring

Studien ble godkjent av Review Board of the Second Xiangya Hospital, People's Republic of China (NO. 2018065) ​​og denne studien rekrutterte 18 pasienter. Alle deltakerne før inkludering i studien ble rekruttert med skriftlig informert samtykke. Alle dyreforsøk fulgte de veiledende prinsippene godkjent av Animal Care Ethics Committee ved Second Xiangya Hospital, People's Republic of China (NR. 2020310).

2. Antistoffer og reagenser

Anti-COXIV (ab33985, RRID: AB_879754), VDAC1 (ab14734, RRID: AB_443084), and PGC-1a (ab191838, RRID: AB_2721267) antibodies were obtained from Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Anti-Caspase3 (9662, RRID: AB_331439) and cleavedcapase3 (9664, RRID: AB_2070042) antibodies were purchased from Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Anti-Bax (50599-2-Ig, RRID: AB_2061561), Cyt-c (10993-1-AP, RRID: AB_2090467), NRF1 (12482- 1-AP, RRID: AB_2282876), GAPDH (60004-1-Ig, RRID: AB_2107436), and b-tubulin (10094-1-AP, RRID: AB_2210695) antibodies were obtained from Proteintech (Rosemont, IL, USA). The anti-DsbA-L antibody was provided by Dr. Feng Liu(14). All secondary antibodies (MitoTracker Green FM and MitoTracker Red CMXRos) were obtained from Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). The calcium ionophore was purchased from Sigma-Aldrich (Shanghai, China). Antimycin A (>95 prosent ren, ab141904) og et Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (ab65320) ble kjøpt fra Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, Storbritannia). Målsekvensen for mus DsbAL er beskrevet tidligere.22

3. Opprettelsen av AKI-modeller ved iskemisk reperfusjon, CLP og VAN

C57BL/6J hannmus (RRID: MGI:5657312) i alderen 8-10 uker ble kjøpt fra Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd. Mus som viste proksimal tubulusspesifikk DsbA-L eller VDAC1-sletting ble produsert ved å krysse DsbA-L (flox/flox) mus (levert av Dr. Feng Liu) eller VDAC1 (flox/flox) mus (hentet fra Shanghai modellorganismer) med PEPCK-Cre mus (levert av Dr. Volker Haase (University of Pennsylvania, Philadelphia, PA) ) som beskrevet tidligere.22,23 Hannmus (8-10 uker gamle) ble utsatt for iskemi, CLP og VAN nefrotoksisk AKI, som beskrevet tidligere.23 27 For iskemisk AKI ble den bilaterale nyrearterien kontinuerlig klippet for 28 minutter etterfulgt av reperfusjon i 24 timer eller 48 timer. Kroppstemperaturen til musene ble opprettholdt på omtrent 37 grader. For CLP-indusert AKI ble blindtarmen tett ligert i en posisjon 1,5 cm fra spissen. Dette ble fulgt av en punktering i 18 t. For VAN-skade ble mus intraperitonealt injisert med en enkeltdose VAN i en dose på 600 mg/kg i 7 påfølgende dager, som beskrevet tidligere.28,29 I tillegg ble C57BL/6-musene injisert med DsbA-L eller VDAC1 plasmider, eller VDAC1 siRNA (i en dose på 15 mg/kg) via halevenen to ganger i uken22; saltvann ble brukt som en kontrollinjeksjon. For hver studie analyserte vi prøvene sammen for å unngå skjevheter, basert på de tidligere studiene, og brukte PASS-programvaren for å bestemme prøvestørrelsen(n=6). Vi ekskluderte prøven som døde eller sviktet modelletableringen før endepunktet. De eksperimentelle musene ble gruppert etter tilfeldige talltabeller. Etterforskerne ble ikke blindet under eksperimentet, men ble blindet under tildelingen, prøveinnsamlingen og dataanalysen. Alle dyreforsøk fulgte veiledende prinsipper godkjent av Animal Care Ethics Committee ved Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina. Musene ble holdt i et 12-t lys/mørkt miljø med fri tilgang til standard gnagerdiett og vann.

Herba Cistanche

4. Cellekultur og en iskemi-reperfusjonsmodell

BUMPT-celler hentet fra Dr. Wilfred Lieberthal (Boston University School of Medicine) eller HK{{0}}-celler hentet fra Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech ble dyrket med DMEM (Gibco, 11965092) tilsatt 10 prosent FBS (Gibco,10100147) og 1 prosent Penicillin-Streptomycin (Gibco, 15140163) ved 37 grader i 5 prosent CO2. For den iskemiske cellemodellen ble BUMPTs-celler behandlet med 10 mM antimycin A (en hemmer av mitokondriekompleks III, Abcam, ab141904) og 1,5 mM kalsiumionofor (Sigma, A23187) i Hanks' Balanced Salt Solution (Hyclone, SH32030.03030) for 2 timer.30 Vi erstattet deretter HBSS med DMEM-medium i 0, 2 og 4 timer for reperfusjonsstadiet. Celleapoptose ble oppdaget ved morfologi og immunblotting for apoptotiske indikatorer, inkludert spaltet-caspase3, Bax og Cyt-c. Flere plasmider ble opprettet og transfektert inn i celler ved lipofeksjon: DsbA-L, HA-VDAC1-1-25, HA-VDAC1-26-366, HA-VDAC1-full lengde, HA-VDAC{{33 }}D9-13,22-27, HAVDAC1-D39-45,55-57 og HA- VDAC1-D9-13, 22-27 D39-45,55-57 og siRNA for DsbA-L og VDAC1. Seks til åtte timer etter transfeksjon ble kulturmediet erstattet med DMEM. Sekvensene til DsbA-L siRNA og VDAC1 siRNA for mus var henholdsvis 50 - GCAUGGAGCAACCAGAGAUTT -30 og 50 - CCAGAGCAACTTCGCAGTT -30; sekvensene for det krypterte NC-siRNA var 50 -UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-30. Sekvensene til DsbA-L siRNA og VDAC1 siRNA for mennesker var henholdsvis 50 - UCAUUUGCCAUGUAUAGUCCU-30 og 50 -UAUUAAGCCAAAUCCAUAGCC -30; sekvensene for det krypterte NC-siRNA var 50 -AACCACUCAACUUUUUCC CAA -30. IR-modellen ble deretter indusert når celletettheten nådde 90 prosent.

5. Flowcytometri

Flowcytometrien ble operert i henhold til instruksjonene til FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit (BD, 556547). BUMPT eller HK-2 Celler med forskjellige behandlinger ble samlet ved bruk av trypsin uten EDTA og vasket tre ganger med PBS etterfulgt av FITC i 15 minutter og PI i 5 minutter ved romtemperatur, og til slutt undersøkt med flowcytometri.

6. AKI-pasienter og prøvetaking

Protokollen ble godkjent av vurderingsstyret ved det andre Xiangya-sykehuset, Folkerepublikken Kina. Denne studien rekrutterte 18 pasienter, inkludert 12 menn og 6 kvinner. Rekrutteringsprinsippet var basert på nyrebiopsi. Pasientinformasjon er supplert i tabell 1. Nyrebiopsiprøvene ble hentet fra pasienter som lever med minimal change diseases (MCD) (n=6) og iskemisk eller akutt interstitiell nefritt (AIN)-indusert AKI (n{{6} }). Vi erklærer at all studie er i samsvar med alle relevante etiske forskrifter for forskning med menneskelige deltakere og ble utført i samsvar med Helsinki-erklæringens prinsipper og at studien er i samsvar med veiledningen fra departementet for vitenskap og teknologi for gjennomgang og godkjenning av Menneskelige genetiske ressurser. Inklusjons- og eksklusjonskriteriene for MCD ble beskrevet i vår forrige studie.23 For IR: Inklusjonskriterier: 1 Biopsi for iskemi-reperfusjonspasienter,2 Alder under 75 år; Eksklusjonskriterier1: ekskluder pasienter med svulster funnet i postoperative medisinske undersøkelser,2 ekskluder pasienter med henholdsvis diabetes, gikt, hypertensjon, urintuberkulose eller infeksjon i anamnesen. For AIN: Inklusjonskriterier1: Klinisk diagnostisert som akutt interstitiell nefritis2 Biopsibekreftet AIN-pasienter,3 Alder under 75 år; Eksklusjonskriterier1: Ekskluder pasienter med unormalt blodkreatinin før innleggelse,2 ekskluder pasienter med tidligere diabetes, gikt, hypertensjon, urintuberkulose eller infeksjon. Disse prøvene ble deretter brukt til farging av HE, TUNEL og immunhistokjemi samt immunutfelling (IP) og immunblotting.

7. Immunutfelling

Cytoplasmaet og mitokondriene fra BUMPT-celler og nyrevev fra mus og AKI-pasienter ble separert ved bruk av Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (Abcam, ab65320); settet ble brukt i henhold til produsentens instruksjoner. Antistoffene (DsbA-L, VDAC1, HA eller IgG) ble bundet til de magnetiske kulene. Deretter tilsatte vi mitokondriene/cytoplasmalysatet og inkuberte det i tre timer. Deretter ble blandingen eluert og undersøkt for ekspresjon av assosierte markører ved immunblotting.

8. Relativ kvantitativ PCR (qPCR)

RNA ble ekstrahert fra BUMPT-celler eller nyrevev av Trizol-reagenset (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). RNA ble deretter revers-transkript til første-streng cDNA ved bruk av Prime Script RT Reagent kit og gDNA Eraser (TaKaRa, RR037A), som tidligere beskrevet.31'34 Deretter brukte vi cDNA som en mal med TB-grønn (TaKaRa, RR820A) og en Light cycler 96 (Roche) med følgende primerpar: DsbA-L: 5 - AAATATGGGGCCTT TGGGCT-3'(fremover) og 5'- TAGCAACTCCAAGCGGTCA G-3'(omvendt); og GAPDH: 5'-GGTCTCCTCTGACTTCACA-3'(fremover) og 5'-GTGAGGGTC TCTCTCTTCCT-3'(omvendt); PGC- 1a: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCTTTCC-3 (fremover) og 5'-CTCCCGCTTCTCGTGCTCTTTG-3'(omvendt); NrF1:5'-TCTGCTGTGGCTGATGGAGA GG-3'(fremover) og NrF1:5'-GATGCTTGCGTCGTCTGGATGG-3 (revers);

9. BUN og kreatinin påvisning

Påvisningen av BUN og kreatinin ble utført i henhold til protokollen til BUN (Urea Nitrogen Content Assay Kit Beijing Boxbio Science & Technology Co, Ltd.) og Creatinine Assay Kit (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kina).

10. HE-farging, TUNEL-farging, immunkjemi, immunfluorescens og immunblotting

Nyrevev ble innebygd i parafin og deretter kuttet i seksjoner for ulike typer farging, som beskrevet tidligere.26,35 Histologi ble vurdert ved hematoksylin- og eosinfarging. Kriteriene som ble brukt for å skåre renal tubulær skade ble beskrevet tidligere.23 TUNEL-farging ble brukt for å evaluere apoptose i nyrecellene. Andelen ( prosent ) av TUNEL-positive celler i 10-20 mikroskopiske felt per vevsseksjon ble brukt som en kvantitativ indikator på apoptose.26 For immunkjemifarging ble vevssnitt inkubert over natten ved 4 grader C med et spesifikt primært antistoff ( DsbA-L 1:200 eller VDAC1 1:100). Neste morgen ble seksjonene inkubert med et sekundært antistoff i 30 minutter ved 37 grader og deretter reagert med DAB i 5-10 minutter. For immunfluorescensfarging ble seksjonene inkubert med et spesifikt primært antistoff (DsbA-L 1:200, VDAC1 1:100) over natten ved 4 grader etterfulgt av et sekundært fluorescerende antistoff i 1 time ved 37 grader i mørket. DAPI ble deretter tilsatt i 3-5 min og snittene ble observert ved fluorescerende mikroskopi. Mitokondriell farging ble utført med en standard protokoll. Proteinlysater fra BUMPT-celler eller nyrer ble høstet og deretter sentrifugert for å samle supernatanten som inneholdt proteinene. Supernatanten ble utsatt for SDS-PAGE og deretter overført til en PVDF-membran. Membranene ble deretter inkubert med et primært antistoff over natten ved 4 grader etterfulgt av et sekundært antistoff i 1 time ved romtemperatur. Konsentrasjonen av antiCOXIV, VDAC1, PGC-1a, Bax, Cyt-c, NRF1, GAPDH og b-tubulin er 1:1000. Konsentrasjonen av anti-Caspase3 og spaltet-capase3 er 1:2000.

Cistanche supplement

11. Statistikk

Alle data ble presentert som middel § SD. To-halede Student t-tester ble brukt for to gruppesammenlikninger. Enveis ANOVA etterfulgt av Tukeys post hoc-analyse ble brukt for flere sammenligninger. Kruskal Walls-testen ble brukt for dataene med ikke-normalfordeling. Graph Pad-programvaren 8.0 ble brukt til å analysere dataene og P<0.05 was considered statistically significant.

12. Finansieringskildens rolle

Finansierne var ikke involvert i studiedesign, datainnsamling, analyse, tolkning eller skriving av manuskriptet.

Referanser

1 Zuk A, Bonventre JV. Akutt nyreskade. Annu Rev Med. 2016;67:293–307.

2 Zhou D, Tan RJ, Lin L, Zhou L, Liu Y. Aktivering av hepatocyttvekstfaktorreseptor, c-met, i nyretubuli er nødvendig for renobeskyttelse etter akutt nyreskade. Nyre Int. 2013;84(3):509– 520.

3 O'Neal JB, Shaw AD, Billings FT. Akutt nyreskade etter hjertekirurgi: nåværende forståelse og fremtidige retninger. Crit Care. 2016;20(1):187.

4 Ishimoto Y, Inagi R. Mitokondrier: et terapeutisk mål ved akutt nyreskade. Nephrol-skivetransplantasjon. 2016;31(7):1062–1069. offisiell publikasjon av European Dialysis and Transplant Association - European Renal Association.

5 Linkermann A, Chen G, Dong G, Kunzendorf U, Krautwald S, Dong Z. Regulert celledød i AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(12):2689–2701.

6 Agarwal A, Dong Z, Harris R, et al. Cellulære og molekylære mekanismer av AKI. J Am Soc Nephrol. 2016;27(5):1288–1299.

7 Morigi M, Perico L, Rota C, et al. Sirtuin 3-avhengige mitokondrielle dynamiske forbedringer beskytter mot akutt nyreskade. J Clin Investig. 2015;125(2):715–726.

8 Yu X, Xu M, Meng X, et al. Nukleær reseptor PXR retter seg mot AKR1B7 for å beskytte mitokondriell metabolisme og nyrefunksjon i AKI. Sci Transl Med. 2020;12(543):7591–7605.

9 Stoppe C, Averdunk L, Goetzenich A, et al. Den beskyttende rollen til makrofagmigrasjonshemmende faktor ved akutt nyreskade etter hjertekirurgi. Sci Transl Med. 2018;10(441):4886–4898.

10 Wei Q, Sun H, Song S, et al. MicroRNA-668 undertrykker MTP18 for å bevare mitokondriell dynamikk ved iskemisk akutt nyreskade. J Clin Investig. 2018;128(12):5448–5464.

11 Tran M, Tam D, Bardia A, et al. PGC-1alfa fremmer restitusjon etter akutt nyreskade under systemisk betennelse hos mus. J Clin Investig. 2011;121(10):4003–4014.

12 Lan R, Geng H, Singha PK, et al. Mitokondriell patologi og glykolytisk skift under proksimal tubuliatrofi etter iskemisk AKI. J Am Soc Nephrol. 2016;27(11):3356–3367.

13 Harris JM, Meyer DJ, Coles B, Ketterer B. En ny glutationtransferase (13-13) isolert fra matrisen til rottelevermitokondrier har strukturell likhet med klasse theta-enzymer. Biochem J. 1991;278(Pt 1):137-141.

14 Bai J, Cervantes C, Liu J, et al. DsbA-L forhindrer fedme-indusert betennelse og insulinresistens ved å undertrykke den mtDNA-frigjøringsaktiverte cGAS-cGAMP-STING-veien. Proc Natl Acad Sci USA. 2017;114(46):12196–12201.

15 Chen H, Bai J, Dong F, et al. Hepatisk DsbA-L beskytter mus mot diettindusert hepatosteatose og insulinresistens. FASEB J. 2017;31(6):2314–2326.

16 Liu M, Xiang R, Wilk SA, et al. Fettspesifikk DsbA-L-overuttrykk fremmer multimerisering av adiponektin og beskytter mus mot diett-indusert fedme og insulinresistens. Diabetes. 2012;61(11):2776–2786.

17 Chen X, Han Y, Gao P, et al. Disulfid-binding Et oksidoreduktase-lignende protein beskytter mot ektopisk fettavsetning og lipidrelatert nyreskade ved diabetisk nefropati. Nyre Int. 2019;95(4):880–895.

18 Dai XG, Xu W, Li T, et al. Involvering av fosfatase og tensinhomolog-indusert antatt kinase 1-Parkinmediert mitofagi ved akutt septisk nyreskade. Chin Med J (eng). 2019;132(19):2340–2347.

19 Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R. VDAC1, mitokondriell dysfunksjon og Alzheimers sykdom. Pharmacol Res. 2018;131:87–101.

20 Geisler S, Holmstrom KM, Skujat D, et al. PINK1/Parkin-mediert mitofagi er avhengig av VDAC1 og p62/SQSTM1. Nat Cell Biol. 2010;12(2):119–131.

21 Lipper CH, Stofleth JT, Bai F, et al. Redoksavhengig gating av VDAC av mitoNEET. Proc Natl Acad Sci USA. 2019;116(40):19924–19929.

22 Li X, Pan J, Li H, et al. DsbA-L-mediert renal tubulointerstitiell fibrose hos UUO-mus. Nat Commun. 2020;11(1):4467.

23 Zhang D, Liu Y, Wei Q, et al. Tubular p53 regulerer flere gener for å mediere AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(10):2278–2289.

24 Xu X, Wang J, Yang R, Dong Z, Zhang D. Genetisk eller farmakologisk hemming av EGFR forbedrer sepsis-indusert AKI. Oncotarget. 2017;8(53):91577–91592.

25 Wang J, Li H, Qiu S, Dong Z, Xiang X, Zhang D. MBD2 oppregulerer miR-301a-5p for å indusere nyrecelleapoptose under vankomycinindusert AKI. Celledød Dis. 2017;8(10):e3120.

26 Xu L, Li X, Zhang F, Wu L, Dong Z, Zhang D. EGFR driver utviklingen av AKI til CKD gjennom HIPK2-overuttrykk. Teranostikk. 2019;9(9):2712–2726.

27 Zhang P, Yi L, Qu S, et al. Biomarkøren TCONS_00016233 driver septisk AKI ved å målrette mot miR-22-3p/AIFM1-signaleringsaksen. Mol Ther Nukleinsyrer. 2020;19:1027–1042.

28 Chen J, Wang J, Li H, Wang S, Xiang X, Zhang D. p53 aktiverer miR-192-5p for å mediere vankomycin-indusert AKI. Sci Rep. 2016;6:38868.

29 Xu X, Pan J, Li H, et al. Atg7 medierer renal tubulær celle apoptose i vancomycin nefrotoksisitet gjennom aktivering av PKC-delta. FASEB J. 2019;33(3):4513–4524.

30 Lee HT, Emala CW. Prekondisjonering og adenosin beskytter humane proksimale tubuliceller i en in vitro-modell av iskemisk skade. J Am Soc Nephrol. 2002;13(11):2753–2761.

31 Ge Y, Wang J, Wu D, et al. lncRNA NR_038323 Undertrykker nyrefibrose ved diabetisk nefropati ved å målrette mot miR-324-3p/DUSP1-aksen. Mol Ther Nukleinsyrer. 2019;17:741–753.

32 Wang J, Pan J, Li H, et al. lncRNA ZEB1-AS1 ble undertrykt av p53 for nyrefibrose ved diabetisk nefropati. Mol Ther Nukleinsyrer. 2018;12:741–750.

33 Song YX, Sun JX, Zhao JH, et al. Ikke-kodende RNA-er deltar i det regulatoriske nettverket til CLDN4 via ceRNA-mediert miRNA-unnvikelse. Nat Commun. 2017;8(1):289.

34 Zhu M, Liu J, Xiao J, et al. Lnc-mg er et langt ikke-kodende RNA som fremmer myogenese. Nat Commun. 2017;8:14718.

35 Kishi S, Brooks CR, Taguchi K, et al. Proksimal tubulus ATR regulerer DNA-reparasjon for å forhindre maladaptive nyreskaderesponser. J Clin Investig. 2019;129(11):4797–4816.

Xiaozhou Li,a,b,1 Jian Pan,a,b,1 Huiling Li,c Guangdi Li,g Bohao Liu,a,b Xianming Tang,a,b Xiangfeng Liu,f Zhibiao He,a,b Zhenyu Peng,a ,b Hongliang Zhang,a,b Luxiang Wang,a,b Yijian Li,d Xudong Xiang,a,b Xiangping Chai,a,b Yunchang Yuan,e Peilin Zheng,h og Dongshan Zhang a,b *

et avdeling for akuttmedisin, Folkerepublikken Kina

b Emergency Medicine and Difficult Diseases Institute, Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan 410011, Folkerepublikken Kina

c Oftalmologisk avdeling, Folkerepublikken Kina

d Urinkirurgisk avdeling, Folkerepublikken Kina

e Institutt for brystkirurgi, Folkerepublikken Kina

f Department of General Surgery, Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina

g Institutt for folkehelse, Central South University, Changsha, Hunan, Folkerepublikken Kina

h Department of Endocrinology, Shenzhen People's Hospital, The Second Clinical Medical College ved Jinan University, The First Affiliated Hospital of Southern University of Science and Technology, Shenzhen, Folkerepublikken Kina

1 Xiaozhou Li og Jian Pan bidro like mye til denne studien