Potensielle tårebiomarkører for diagnostisering av Parkinsons sykdom – en pilotstudieⅡ

3. Resultater

3.1. Pasienter og kliniske parametere

Mellom mars 2019 og oktober 2019 ble 24 pasienter med iPD, tre symptomatiske bærere av E46K-SNCA-mutasjonen og 27 CT-personer inkludert i denne pilotstudien, hvis generelle karakteristika er presentert i tabell 1. PD-pasientenes gjennomsnittlige sykdomsvarighet var 9,36 år, og de hadde mild bilateral motorisk funksjonshemming (UPDRS-skår) og Hoehn og Yahr-skår som tydet på mild til moderat motorisk svekkelse. Et karakteristisk for IPD-pasienter var at 40 prosent av dem hadde mild til moderat blefaritt.

3.2. nLC MS/MS-data Totalt 560 tåreproteiner ble identifisert i prøvene som ble analysert her, ved tidligere proteomiske studier på tårer, og flere gruppespesifikke tåreproteomendringer var tydelige hos PD-pasientene i forhold til CT-ene. Proteiner med forskjellig overflod med tidligere proteomiske studier på tårer, og flere gruppespesifikke tåreproteomendringer var tydelige hos PD-pasientene i forhold til CT-ene. Proteiner med ulik forekomst ble påvist i begge grupper, selv om de fleste av de deregulerte proteinene i tåreproteomet til PD-pasienter ble overuttrykt. En analyse av STRING PPI-nettverket ble utført for å evaluere interaksjonene mellom proteiner som var signifikant forskjellig i PD-pasientene og CT-er (figur 1). Proteiner som ble overuttrykt hos PD-pasienter var involvert i betydelig flere interaksjoner enn forventet, noe som indikerer at økningen i disse proteinene har en eller annen biologisk forbindelse (Figur 1A). Imidlertid ble det observert svakere forhold mellom proteinene som ble nedregulert, og representerte en differensiert klynge (figur 1B). De fleste av de differensielt uttrykte proteinene kunne lokaliseres til enten de ekstracellulære eller intracellulære avdelingene.

For bedre å forstå den potensielle rollen til de differensielt uttrykte proteinene i en biologisk kontekst, ble funksjonelle annotasjonsanalyser utført med forskjellige genontologi (GO) termer. Som et resultat ble deregulerte proteiner sett å være involvert i forskjellige biologiske prosesser (figur 2): immunresponsen (lipocalin 2-LCN 2, serpin B3-SPB3, follikulær dendritisk celle utskilt peptid-FDSCP, cadherin-MFGM og nøytrofil gelatinase- assosiert lipokalin—NGAL); apoptose (olfaktomedin-4—OLFM4, caspase-14—CASPE og gamma-glutamylcyklotransferase—GGCT); betennelse (Calprotectin-S100A8, S100A9); kollagen nedbrytning (myeloblastisk-PRTN3 og metalloproteinase 9-MMP9); proteinsyntese (heterogent nukleært ribonukleoprotein A3—ROA3); keratinocyttdifferensiering (calmodulin-lignende protein 5—CALML5); lipidtransport (apolipoprotein D—APOD, apolipoprotein A2—APOA2 og lavdensitet-lipoprotein-relatert protein 2—LRP2); og forsvar (myeloperoksidase—MPO, defensin alfa 3—DEFA 3, glutationperoksidase 3—GPX3, kitinase-3-lignende protein 2—CH3L2 og lysozym C—LYSC).

Hvis PD-pasientene ble vurdert alle sammen, og separat som iPD-pasienter og pasienter med E46K-SNCA-mutasjonen, var oppregulerte tåreproteiner tydelige i alle tre av disse gruppene, med deres uttrykk varierende i hver (figur 3). Det skal bemerkes at bare tre pasienter som bærer E46K-SNCA-mutasjonen ble studert, og spredningen av dataene fra da var større. De samme proteinene kom sterkere til uttrykk i tårene til pasienter med E46K-SNCA-mutasjonen enn i tårene til pasienter med iPD. Alle disse sammenligningene ble gjort på verdiene i forhold til CT-tåreprøvene.

Tabell 2 viser proteinene som ble oppregulert (fold > 1,5) og nedregulert (fold < 0,5) i IPD-gruppen med blefaritt sammenlignet med IPD-pasienter uten blefaritt. Pasienter med E46K-SNCA-mutasjonen utviklet ikke blefaritt.

Blant tåreproteinene som ble deregulert hos PD-pasienter skilte en gruppe på seks proteiner seg ut, hvorav fem ble overuttrykt i PD-gruppen i forhold til CT-ene (prelamin A/C—LMNA, cathepsin D—CATD, acid ceramidase—ASAH1, transitional endoplasmic retikulum ATPase—TERA og cytoplasmatisk dynein 1—DYHC1), mens en av dem ble nedregulert (tripeptidyl-peptidase 1—TPP1: Tabell 3). Disse proteinene var assosiert med nevrodegenerative prosesser, hovedsakelig endringer i lysosomal autofagi, apoptose, retrograd aksonal transport og demyeliniserende prosesser. Det var interessant å merke seg forholdet mellom disse proteinene og endringer i lysosomal funksjon. Av de seks proteinene presenterte tre en god evne til å klassifisere PD-pasienter og CT-er korrekt, som reflektert av AUC-verdiene til ROC-kurvene, og de var relatert til endringer i lysosomal funksjon: CATD, ASAH1 og DYHC1.

Den univariate logistiske regresjonsanalysen identifiserte fire variabler med statistisk signifikans ved=0.05: pasientenes alder og foldendringen i CATD-, ASAH1- og DYHC1-proteiner (tabell 4).

I tillegg ble LMNA- og DYHC1-proteinene sett å ha statistisk signifikans ved=0.1. En multivariat logistisk regresjonsmodell ble etablert ved å vurdere alder og proteiner med et hvilket som helst signifikansnivå. Mens den generelle modellen bare viste betydning for CATD-proteinet (tabell 5), var modellen sannsynligvis påvirket av det lille antallet tilgjengelige prøver, og å øke antallet prøver som ble studert, kan godt identifisere andre signifikante variabler.

4. Diskusjon

Denne studien ble utført for å analysere proteiner ved hjelp av nano-væskekromatografi-massespektrometri (nLC-MS/MS) og velge de som er relatert til nevrodegenerative sykdommer som hadde en høyere diskriminerende kraft mellom PD- og TC-gruppene som ble studert. Flere søk etter kandidatbiomarkører i tårene til PD-pasienter har blitt utført de siste årene; konklusjonen var imidlertid at ytterligere valideringsstudier var nødvendig for å finne den beste diagnostiske eller prognostiske biomarkøren for denne patologien. Diagnosen PD er for tiden basert på tilstedeværelsen av motoriske og ikke-motoriske symptomer, inkludert søvnforstyrrelser eller luktunderskudd. Motoriske symptomer vises hovedsakelig når tapet av dopaminerge nevroner når rundt 50–60 prosent.

Click to life extension cistanche for Parkinsons sykdom

Derfor vil det å oppnå en tidlig diagnose åpne veien for å endre sykdomsforløpet og forhåpentligvis forsinke den alvorlige funksjonshemmingen forårsaket av denne patologien. Dette problemet har blitt et nøkkelaspekt i PD-forskning, selv om mangelen på gyldige biomarkører representerer en stor hindring som forhindrer identifisering av pasienter i prekliniske eller prodromale stadier, samt overvåking av utviklingen av sykdommen og effekten av behandlinger.

Av denne grunn satte denne studien seg for å søke etter en pålitelig biomarkør for PD i en ikke-invasiv væske, for eksempel tårer. Øyet har mange nevrale og vaskulære elementer som også finnes i hjernen, noe som gjør det ideelt for oppdagelsen av nye biomarkører som kan brukes til å diagnostisere PD eller andre nevrodegenerative sykdommer, samt for å oppdage nye terapeutiske mål. Her ble rifter fra PD- og CT-pasienter oppnådd gjennom glasskapillærer uten forutgående anestesi og uten å berøre øyeoverflaten. Tidligere pilotstudier på tårer i pasienter har blitt utført med en gruppe pasienttårer [19], og vår analyse er den første individuelle tåreanalysen som vil tillate identifisering av spesifikke individuelle markører. Ved å bruke kapillærer for å få tåreprøvene unngår vi å berøre det konjunktivale epitelet, og skiller dermed proteiner som finnes i tåren fra konjunktivale proteiner, slik det skjer ved bruk av Schirmer-strimler. I vår studie fant vi betydelig deregulerte proteiner hos PD-pasienter.

Disse proteinene er hovedsakelig involvert i inflammatoriske og nevrodegenerative prosesser, apoptose og immunresponser. Betennelse er allestedsnærværende i nevrodegenerative sykdommer, inkludert PD, og ​​nyere studier har identifisert at -syn-avledede T-celleepitoper fortrinnsvis gjenkjennes hos PD-pasienter, så vel som T-celler i PD-målregioner, noe som muligens antyder en autoimmun komponent av PD [20 ]. Nevroner ble antatt å være beskyttet mot autoimmune angrep, men dopaminerge nevroner er sårbare fordi de har proteiner på celleoverflaten som hjelper immunsystemet å gjenkjenne fremmede stoffer [21]. T-celler kan potensielt forveksle sykdomsskadede nevroner med fremmede stoffer, og som et resultat, Sulzer et al. foreslått en modell der -syn-spesifikke T-celler forårsaker nevronal død i nevrodegenerative sykdommer assosiert med spesifikk feilfolding av dette proteinet. I vår studie ble grupper av deregulerte proteiner relatert til immunrespons, slik som LCN2, SPB3 og FDSCP, blant andre, observert i tåreprøver. Imidlertid viste visse immunglobuliner involvert i immunrespons, slik som IgA2, ikke statistisk signifikante forskjeller mellom PD-gruppen og CT-gruppen.

Ytterligere studier er nødvendig for å belyse om dette forholdet mellom immunrespons og proteiner funnet i tårer er direkte relatert til PD. Nevroinflammasjon kan defineres som en ikke-spesifikk inflammatorisk hendelse i hjernen, og hele sentralnervesystemet har en nevroinflammatorisk komponent, som er tydelig ved sykdommer som multippel sklerose (MS), hjerneaneurismer og cerebrovaskulære ulykker, epilepsi, AD og PD, og hvor aktiviteten til ekstracellulær matrise (ECM) nedbrytende enzymer eller metalloproteaser (MMP) har vært involvert. MMP deltar i mange fysiologiske og patologiske prosesser i hjernen og blodet. Blod-hjerne-barrieren (BBB) ​​dannes av endotelkapillærene som skiller blodtilførselen til hjernen, og dens funksjon ligger i tre strukturer som er kritiske for dens integritet: endotelcellene i hjernens kapillærer, de tette koblingene (TJs) ) mellom disse cellene og basalmembranen. Endotelet er en barriere for små hydrofile forbindelser ettersom TJ-ene forsegler hullene mellom de tilstøtende endotelcellene, hindrer ukontrollert passasje av oppløste stoffer mellom disse cellene og omdanner hjerneendotelet til en relativt ugjennomtrengelig barriere [22,23].

Imidlertid forbinder basalmembranen disse endotelcellene til pericytter og astrocytter for å danne den nevrovaskulære enheten som letter kommunikasjonen mellom cellene. Denne membranen er grunnleggende for at BBB skal fungere tilstrekkelig, og som sådan for hjernens homeostase og dens generelle helse. Det har blitt foreslått at MMP-er spesifikt forstyrrer TJ-er, og de fordøyer basalmembranen til endotelet, og bidrar dermed til visse hjernesykdommer [24]. Selv om det er teknisk vanskelig å demonstrere MMP-aktivitet in vivo, var sterkere MMP-aktivitet assosiert med større BBB-permeabilitet etter en cerebrovaskulær ulykke og under reperfusjon in vivo [25]. En økning i MMP-2 og MMP-9 mRNA og aktivitet er beskrevet etter reperfusjon hos hypertensive rotter med medial cerebral arterieokkklusjon (MCAO) [26]. Dessuten ble BBB-lekkasje også oppdaget i den piriforme cortexen til disse rottene, i forbindelse med forstyrrelsen av TJ-er, noe som indikerer at disse MMP-ene endrer BBB-integritet ved å degradere TJ-proteiner [26]. Som sådan, og til tross for de tekniske utfordringene, er det noen bevis på at MMP-er fordøyer TJ- og ECM-proteiner in vivo.

Uttrykket og aktiviteten til MMP-1, -2 og -9 har blitt bestemt i postmortem hjernevev fra PD-pasienter, og mens ingen endringer ble observert i MMP-1 og MMP -9 i forhold til aldersmatchede kontroller, var en 50 prosent reduksjon i MMP-2-aktivitet tydelig i SN hos PD-pasientene [27]. Det ble foreslått at den svakere MMP 2-aktiviteten kunne hjelpe de dopaminerge nevronene og nevrittene deres til å overleve i SN [27]. Dessuten har MMP-3 også blitt studert om PD, som potensielt kan være involvert i spaltningen av -syn. MMP-3 spalter renset -syn in vitro og aggregeringen av -syn øker i nærvær av MMP-3-aggregater som vil være spesielt skadelig for dopaminerge celler i PD. Det er vesentlig at MMP-1, -2 og -9 og MT1-MMP også spalter renset -syn, om enn mindre effektivt enn MMP-3 [28]. MMP-3 ser ut til å være involvert i dopaminerg nevrodegenerasjon, nevroinflammasjon og BBB-integritet i PD; Det vil imidlertid kreves ytterligere studier for å avklare rollen til alle disse MMP-ene i PD og om deres spesifikke hemming kan representere en gyldig terapeutisk strategi. Her var MMP-9-nivåene høyere i tåre hos PD-pasienter, både iPD-pasienter (2.8- ganger) og de som bærer E46K-SNCA-mutasjonen (3-fold).

De sistnevnte PD-pasientene utviklet ikke blefaritt, noe som tyder på at økningen i MMP-9-konsentrasjoner ikke er like sterkt assosiert med blefaritt som med patologien til PD. Men ved å analysere iPD-gruppene separat, ser vi at det er sterkere MMP-9-overuttrykk hos IPD-pasienter med blefaritt, 3,08 ganger det hos IPD-pasienter uten blefaritt. Vi har tidligere studert bidraget til denne MMP til riften hos pasienter med patologier i den okulære overflaten [29,30]. Det vil imidlertid være nødvendig med ytterligere studier for å avgjøre om økningen i MMP-9 er direkte relatert til PD eller okulære overflatepatologier som kan endre tåreanalysen.

Det samler seg bevis på den viktige rollen til energimetabolisme i nevrodegenerative sykdommer, inkludert PD. Unormale lipidfraksjoner og lipidperoksidasjon har blitt vurdert hos PD-pasienter [31], og som et resultat ble lipidfraksjoner foreslått som mulige beskyttende biomarkører for PD. Nyere epidemiologiske studier på en prospektiv kohort eller med case-control design forsøkte å vurdere assosiasjonene mellom lipidfraksjoner og risikoen for PD [32–35]. Noen av disse studiene hadde små prøvestørrelser, mens andre bare undersøkte spesifikke lipidfraksjoner, hovedsakelig kolesterol, eller kontrollert for et begrenset antall potensielle konfoundere. Selv om det er sett en konsistent sammenheng mellom høyere kolesterolnivå og lavere risiko for PD, er den underliggende årsaken ukjent, og om lignende resultater er sett for andre lipidfraksjoner bør vurderes. I tåreprøvene som er testet her, ser det ut til at medlemmer av apolipoprotein (APO)-familien er deregulert, en familie av proteiner som er involvert i mange nevrodegenerative lidelser. APOE-proteinet deltar i flere hjernesykdommer, inkludert AD, MS, traumatiske hjernelesjoner og Creutzfeldt-Jakobs sykdom [36-38], noe som øker muligheten for at ApoE også kan spille en betydelig rolle i utviklingen av PD. Videre ble høyere kolesterolnivåer påvist i hjernen til en transgen musemodell av PD, og ​​siden APO er involvert i å opprettholde kolesterolhomeostase, kan det eksistere en mulig assosiasjon mellom APO og PD [39].

Imidlertid har få studier fokusert på rollen til APO i PD. I CNS produseres APOer av gliaceller og de tas opp av nevroner for å brukes i aksonvekst og for synaptisk aktivitet. Videre antas ApoE å ha en nevrobeskyttende rolle, og forhindrer apoptose av nevroner og retinale ganglionceller (RGCs) [40]. Uttrykket av APO i den menneskelige hjernen er påvirket av typen APO og individets alder. Av de forskjellige APOene er ApoE, ApoD og ApoJ de sterkest uttrykt i hjernen. Uttrykksnivåene deres kan imidlertid endre seg på forskjellige stadier av livet, og for eksempel er det 50 prosent mer ApoE i den nyfødte hjernen enn i en voksen, mens det er omtrent 10 ganger mer ApoD og ApoJ i den voksne hjernen enn i embryoet. ApoD uttrykkes hovedsakelig i hjernen, perifere nerver, placenta, lunge, eggstokk og milt [41]. I våre tåreprøver ser det ut til at ApoD er overuttrykt hos pasienter med PD. Gliaceller nær SN av PD-pasienter har mer ApoD, som antas å være relatert til oksidativt stress, da ApoD beskytter celler mot oksidativt stress, og dets forbedrede uttrykk hemmer lipidperoksidasjon [42].

Faktisk ser det ut til at ApoDs uttrykk i hjernestammen beskytter mot nevrodegenerasjon, og i skadede hjerner uttrykker ikke nevroner ApoD [41]. ApoD i tåren garanterer derfor ytterligere studier hos PD-pasienter og de med andre nevrodegenerative sykdommer for å vurdere om det har en ekte nevrobeskyttende effekt hos slike pasienter. Blant andre proteiner som ble funnet å være deregulert i denne studien, ble en liten gruppe valgt på grunn av deres involvering i nevrodegenerative prosesser, spesielt i lysosomal autofagi eller nevronal transport. Ubiquitin-proteasom (UPP)-veien har blitt foreslått å spille en nøkkelrolle i nedbrytningen av -syn [43]; imidlertid er det økende bevis på at lysosomet også kan mediere nedbrytningen av -syn [44,45]. Uavhengig av den eksakte autofagiveien som -syn kommer inn i lysosomet, antas det at den raskt brytes ned av "synukleinase" under normale forhold. I dopaminerge nevroner er det en dynamisk likevekt mellom de ulike konformasjonsformene og oligomere tilstandene til -syn-proteinet, som moduleres av faktorer som kan akselerere eller hemme aggregeringen og dannelsen av fibriller [46]. Identifikasjonen og karakteriseringen av den giftige -syn-arten er fortsatt ufullstendig, og mange studier har fokusert på forskjellige tilstander av proteinaggregering.

Disse studiene forsøkte å bestemme om de toksiske artene tilsvarer de uløselige fibrillære proteinene som hovedsakelig finnes i LB-ene eller omvendt til de pre-fibrillære proteinoligomerene eller protofibrillerne. Det er økende bevis in vivo og in vitro for at oligomere arter er de mest patologisk relevante isoformene [47,48], og det har til og med blitt foreslått at LB-er kan være beskyttende, og representere en form for aggresom. Under fysiologiske omstendigheter er -syn aktiv ved synapser og er involvert i prosesser som dannelse, handel og kobling av synaptiske vesikler (SV). Det er også assosiert med resirkulering av SV-er og lagring av dopamin.

Fosforyleringen og defosforyleringen av -syn driver aktiveringen og deaktiveringen av dette proteinet, som også kontrolleres av lysosomal autofagi og proteasomnedbrytning drevet av ubiquitinylering [49]. I patologiske tilstander provosert av forskjellige stimuli, gjennomgår -syn feil folding, mutasjon eller fosforylering som fører til aggregering, som påvirker dannelsen og koblingen av lysosomale vesikler uten å produsere lysosomal autofagi, og fører til avsetning i dopaminerge nevroner, dannelsen av LBs. og apoptose [49]. Resultatene som presenteres her viser at blant proteinene som er deregulert i tårevæsken til PD-pasienter, både iPD-pasienter og bærere av E46K-SNCA-mutasjonen, er det to proteiner relatert til lysosomal autofagi: CATD og ASAH1. CATD er en viktig lysosomal aspartylprotease, og interessant nok, CATD-mangel og dens enzymatiske inaktivering hos mennesker resulterer i en tidlig inntreden av progressiv og til slutt dødelig nevrodegenerasjon, som er klassifisert som en av flere neuronale ceroid lipofuscinose (NCL) syndromer [50,51 ]. In vitro produserer CATD delvis proteolyse av rekombinant -syn [52], og CATDs evne til å regulere -syn har blitt evaluert i villtype og mutante dopaminerge celler i kultur.

Videre ble hjernen til flere CATD-mangelfulle pattedyr med NCL studert for å vurdere endogen -syn-prosessering, og følgelig ble det konkludert med at den enzymatiske aktiviteten til CATD spiller en viktig rolle i metabolismen av -syn. ASAH1-proteinet er et lysosomalt enzym som omdanner lysosomalt ceramid til sfingosin. Hemming av ASAH1 øker ceramidnivåene, og reduserer også mengden oksidert -syn og det ubiquitinylerte proteinet i dopaminerge nevroner avledet fra PD-pasienter. En reduksjon i nivåene av ceramid på grunn av økt ASAH1-aktivitet kan bidra til akkumulering av intracellulær -syn siden det endrer lysosomal autofagi, og kanskje hemmer frigjøringen av -syn til det ekstracellulære rommet.

DYHC1 og LMNA er to andre relevante proteiner deregulert i tårene til pasienter med PD. DYHC1 er et protein involvert i bevegelse av organeller i cellen og retrograd transport i aksoner. Blant andre nevrodegenerative sykdommer er det involvert i AD og PD. Endringene i DYHC1 forårsaker dårlig transport til dens normale synaptiske plassering og dårlig proteinclearance, slik som den til lysosomale protease cathepsin D [53]. Denne foreslåtte hendelsesforløpet vil generere en autokatalytisk spiral der prosessene som fører til hemming av aksonal transport og produksjon av fosforylert -syn blir gjensidig stimulerende, og gir en rasjonell forklaring på det tidlige synaptiske tapet i striatum hos PD-pasienter. Til slutt har overekspresjonen av LMNA-proteinet i PD-tåren vært implisert i demyelinisering, men dette har ikke vært relatert til PD til dags dato [54].

Dette er imidlertid en rute som fortjener å bli vurdert i fremtidige studier. Denne studien har noen begrensninger, for eksempel det lave antallet pasienter som er inkludert, så den bør betraktes som en pilotstudie, og dette bør tas i betraktning ved tolkning av resultatene. I tillegg vil det være nødvendig å validere kandidatproteinene, ikke bare i en større kohort, men også for å sjekke om de forekommer i andre kroppsvæsker (dvs. blod eller cerebrospinalvæske). Det er også viktig å huske på at de mulige mekanismene som er foreslått i denne artikkelen kun er hypoteser som må verifiseres i videre studier. I tillegg bør det bemerkes at siden databasesøkene tok hensyn til kanoniske proteinsekvenser, ble det ikke innhentet informasjon om proteoformer. Selv om dette kan representere en begrensning i spesifisiteten til resultatene, mener vi at informasjonen innhentet på kanonisk sekvensnivå fortsatt er av stor verdi og gir verdifull innsikt i sykdommens molekylære egenskaper.

Imidlertid bør muligheten for at visse proteoformer kan være ansvarlige for de kommenterte resultatene tas i betraktning når dataene tolkes.

5. Konklusjoner

I denne pilotstudien viste proteomisk analyse at visse proteiner ble oppregulert i tårene til PD-pasienter, hovedsakelig de som var involvert i lysosomal funksjon. Betydningen av denne studien for å identifisere proteiner i tåren involvert i nevrodegenerasjon bør fremheves som deres forhold til PD-pasienter med en aggressiv sykdomsfenotype. Siden dette var en pilotstudie ble kun et begrenset antall pasienter studert. En begrensning ved studien er forskjellen i alder mellom kontrollgruppen og PD-gruppen. Analyse med tåreprøver hos friske personer uten okulære patologier er komplisert siden det i en viss alder er vanskelig å finne frivillige uten endringer i tårefilmen. Fremtidige forsøk med større pasientkohorter vil tillate oss å identifisere spesifikke biomarkører for PD som ideelt sett vil bidra til å forutsi utbruddet av denne sykdommen.

Ikke desto mindre gir vi bevis her for at proteomet til individuelle pasienter kan analyseres ved å bruke bare en begrenset mengde tårer. Med god trening er den beste måten å trekke ut tårer for proteomiske studier å bruke en glasskapillær, og dermed unngå celleforurensning som kan oppstå når Schirmers strips brukes. I fremtidige studier håper vi å validere resultatene som presenteres her og identifisere endofenotyper av PD gjennom den tåreproteomiske profilen, som kan tjene til å oppnå tidlig diagnose av PD.

Referanser

1 George, JM Synukleinene. Genom Biol. 2001, 3, 1–6. [CrossRef]

2. Love, S. Nevropatologisk utredning av demens: En veiledning for nevrologer. J. Neurol. Nevrokirurgi. Psykiatri 2005, 76 (Suppl. 5), v8–v14. [CrossRef]

3. Spillantini, MG; Schmidt, ML; Lee, VM-Y.; Trojanowski, JQ; Jakes, R.; Goedert, M. -Synuklein i Lewy-kropper. Nature 1997, 388, 839–840. [CrossRef]

4. Atik, A.; Stewart, T.; Zhang, J. Alpha-Synuclein som en biomarkør for Parkinsons sykdom. Hjernepatol. 2016, 26, 410–418. [CrossRef] [PubMed]

5. Satake, W.; Nakabayashi, Y.; Mizuta, I.; Hirota, Y.; Ito, C.; Kubo, M.; Kawaguchi, T.; Tsunoda, T.; Watanabe, M.; Takeda, A.; et al. Genomomfattende assosiasjonsstudie identifiserer vanlige varianter på fire loci som genetiske risikofaktorer for Parkinsons sykdom. Nat. Genet. 2009, 41, 1303–1307. [CrossRef] [PubMed]

6. Polymeropoulos, MH; Higgins, JJ; Golbe, LI; Johnson, WG; Ide, SE; Di Iorio, G.; Sanges, G.; Stenroos, ES; Pho, LT; Schaffer, AA; et al. Kartlegging av et gen for Parkinsons sykdom til kromosom 4q21-q23. Vitenskap 1996, 274, 1197–1199. [CrossRef] [PubMed]

7. Zarranz, JJ; Alegre, J.; Gomez-Esteban, JC; Lezcano, E.; Ros, R.; Ampuero, I.; Vidal, L.; Hoenicka, J.; Rodriguez, O.; Atarés, B.; et al. Den nye mutasjonen, E46K, av -synuclein forårsaker Parkinsons og Lewy body demens. Ann. Neurol. 2003, 55, 164–173. [CrossRef]

8. Archibald, NK; Clarke, MP; Mosimann, UP; Burn, DJ Visuelle symptomer ved Parkinsons sykdom og Parkinsons sykdom demens. Mov. Uorden. 2011, 26, 2387–2395. [CrossRef] [PubMed]

9. Safranow, K.; Nowacka, B.; Lubi ´nski, W.; Honczarenko, K.; Potemkowski, A. Oftalmologiske trekk ved Parkinsons sykdom. Med Sci. Monit. 2014, 20, 2243–2249. [CrossRef] [PubMed]

10. Chesnokova, NB; Pavlenko, TA; Ugrumov, MV Oftalmiske lidelser som en manifestasjon av Parkinsons sykdom. Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii Imeni SS Korsakova 2017, 117, 124–131. [CrossRef] [PubMed]

11. Murueta-Goyena, A.; Del Pino, R.; Galdós, M.; Arana, B.; Acera, M.; Carmona-Abellán, M.; Fernández-Valle, T.; Tijero, B.; Lucas-Jiménez, O.; Ojeda, N.; et al. Netthinnetykkelse forutsier risikoen for kognitiv nedgang ved Parkinsons sykdom. Ann. Neurol. 2020, 89, 165–176. [CrossRef]

12. Nakahara, T.; Mori, A.; Kurauchi, Y.; Sakamoto, K.; Ishii, K. Nevrovaskulære interaksjoner i netthinnen: Fysiologiske og patologiske roller. J. Pharmacol. Sci. 2013, 123, 79–84.3. [CrossRef]

13. Lopatina, EV; Penniyaynen, VA; Tsyrline, VA Påvirkning av noradrenalin og selektive 1 -adrenoreseptorblokkere på veksten av netthinnevevseksplantater. Okse. Exp. Biol. Med. 2012, 153, 48–50. [CrossRef] [PubMed]

14. Bowd, C.; Zangwill, LM; Weinreb, RN; Girkin, CA; Fazio, MA; Liebmann, JM; Belghith, A. Raseforskjeller i endringshastighet for spektral-domene optisk koherenstomografi – målt minimum kantbredde og lagtykkelse på netthinnenervefiber. Er. J. Ophthalmol. 2018, 196, 154–164. [CrossRef] [PubMed] 15. Wisniewski, JR; Zougman, A.; Nagaraj, N.; Mann, M. Universell prøveprepareringsmetode for proteomanalyse. Nat. Metoder 2009, 6, 359–362. [CrossRef]

16. Meier, F.; Geyer, PE; Winter, SV; Cox, J.; Mann, M. BoxCar-oppkjøpsmetoden muliggjør enkeltopptaksproteomikk på en dybde på 10,000 proteiner på 100 minutter. Nat. Metoder 2018, 15, 440–448,3. [CrossRef] [PubMed]

17. Tyanova, S.; Temu, T.; Sinitcyn, P.; Carlson, A.; Hein, MIN; Geiger, T.; Mann, M.; Cox, J. Perseus beregningsplattform for omfattende analyse av (prote)omikkdata. Nat. Metoder 2016, 13, 731–740. [CrossRef] [PubMed]

18. Perez-Riverol, Y.; Csordas, A.; Bai, J.; Bernal-Llinares, M.; Hewapathirana, S.; Kundu, DJ; Inuganti, A.; Griss, J.; Mayer, G.; Eisenacher, M.; et al. PRIDE-databasen og relaterte verktøy og ressurser i 2019: Forbedring av støtte for kvantifiseringsdata. Nucleic Acids Res. 2019, 47, D442–D450. [CrossRef]

19. Boerger, M.; Funke, S.; Leha, A.; Roser, A.-E.; Wuestemann, A.-K.; Maass, F.; Bähr, M.; Grus, F.; Lingor, P. Proteomisk analyse av tårevæske avslører sykdomsspesifikke mønstre hos pasienter med Parkinsons sykdom – En pilotstudie. Parkere. Relat. Uorden. 2019, 63, 3–9. [CrossRef]

20. Arlehamn, CSL; Garretti, F.; Sulzer, D.; Sette, A. Roller for det adaptive immunsystemet ved Parkinsons og Alzheimers sykdommer. Curr. Opin. Immunol. 2019, 59, 115–120. [CrossRef]

21. Sulzer, D.; Surmeier, DJ Neuronal sårbarhet, patogenese og Parkinsons sykdom. Mov. Uorden. 2013, 28, 715–724. [CrossRef]

22. Martin, TA; Mansel, RE; Jiang, WG Antagonistisk effekt av NK4 på HGF/SF-induserte endringer i den transendoteliale motstanden (TER) og paracellulær permeabilitet til menneskelige vaskulære endotelceller. J. Cell. Physiol. 2002, 192, 268–275. [CrossRef]

23. Zlokovic, BV Blod-hjernebarrieren ved helse og kroniske nevrodegenerative lidelser. Neuron 2008, 57, 178–201. [CrossRef]

24. Feng, S.; Cen, J.; Huang, Y.; Shen, H.; Yao, L.; Wang, Y.; Chen, Z. Matrix Metalloproteinase-2 og -9 utskilt av leukemiceller øker permeabiliteten til blod-hjernebarrieren ved å forstyrre Tight Junction-proteiner. PLoS ONE 2011, 6, e20599. [CrossRef]

25. Gu, Y.; Zheng, G.-Q.; Xu, M.; Li, Y.; Chen, X.; Zhu, W.; Tong, Y.; Chung, SK; Liu, KJ; Shen, J. Caveolin-1 regulerer nitrogenoksid-mediert matrisemetalloproteinaseaktivitet og blod-hjernebarriere-permeabilitet ved fokal cerebral iskemi og reperfusjonsskade. J. Neurochem. 2011, 120, 147–156. [CrossRef] [PubMed]

26. Yang, Y.; Estrada, EY; Thompson, JF; Liu, W.; Rosenberg, GA Matrisemetalloproteinase-mediert forstyrrelse av Tight Junction-proteiner i cerebrale kar er reversert av syntetisk matrisemetalloproteinasehemmer i fokal iskemi hos rotter. J. Cereb. Blodstrømmetab. 2007, 27, 697–709. [CrossRef] [PubMed]

27. Lorenzl, S.; Albers, DS; Narr, S.; Chirichigno, J.; Beal, M. Expression of MMP-2, MMP-9 og MMP-1 and their Endogenous Counterregulators TIMP-1 and TIMP-2 in Postmortem Brain Tissue of Parkinson's Sykdom. Exp. Neurol. 2002, 178, 13–20. [CrossRef] [PubMed]

28. Kim, ST; Kim, E.-M.; Choi, JH; Sønn, HJ; Ji, IJ; Joh, TH; Chung, SJ; Hwang, O. Matrix metalloproteinase-3 bidrar til sårbarheten til de nigrale dopaminerge nevronene. Neurochem. Int. 2010, 56, 161–167. [CrossRef]

29. Acera, A.; Vecino, E.; Duran, JA Tear MMP-9-nivåer som en markør for okulær overflatebetennelse i konjunktivokalasis. Undersøk. Opthalmol. Vis. Sci. 2013, 54, 8285–8291. [CrossRef]

30. Recalde, JI; Duran, JA; Rodriguez-Agirretxe, I.; Soria, J.; Sanchez-Tena, MA; Pereiro, X.; Suarez, T.; Acera, A. Endringer i tårebiomarkørnivåer i keratokonus etter kryssbinding av hornhinnekollagen. Mol. Vis. 2019, 25, 12–21. [PubMed]

31. Dexter, DT; Carter, CJ; Wells, FR; Javoy-Agid, F.; Agid, Y.; Lees, A.; Jenner, P.; Marsden, CD Basal lipidperoksidasjon i Substantia Nigra er økt ved Parkinsons sykdom. J. Neurochem. 1989, 52, 381–389. [CrossRef] [PubMed]

32. Huang, X.; Abbott, RD; Petrovitch, H.; Mailman, RB; Ross, GW Lavt LDL-kolesterol og økt risiko for Parkinsons sykdom: Prospektive resultater fra Honolulu-Asia Aging Study. Mov. Uorden. 2008, 23, 1013–1018. [CrossRef] [PubMed]

33. Huang, X.; Alonso, A.; Guo, X.; Umbach, DM; Lichtenstein, ML; Ballantyne, CM; Mailman, R.; Mosley, TH; Chen, H. Statiner, plasmakolesterol og risiko for Parkinsons sykdom: En prospektiv studie. Mov. Uorden. 2015, 30, 552–559. [CrossRef]

34. Ma, VR; Gurevich, T.; Giladi, N.; El-Ad, B.; Tsamir, J.; Hemo, B.; Peretz, C. Høyere serumkolesterol og redusert risiko for Parkinsons sykdom: En statinfri kohortstudie. Mov. Uorden. 2018, 33, 1298–1305.

35. Zhang, L.; Wang, X.; Wang, M.; Sterling, NW; Du, G.; Lewis, MM; Yao, T.; Mailman, RB; Li, R.; Huang, X. Sirkulerende kolesterolnivåer kan knyttes til faktorene som påvirker Parkinsons risiko. Front. Neurol. 2017, 8, 501. [CrossRef]

36. Tamam, Y.; Tasdemir, N.; Yalman, M.; Tamam, B. Forening av apolipoprotein E genotyper med prognose ved multippel sklerose. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2011, 15, 1122–1130.

37. Ponsford, J.; McLaren, A.; Schönberger, M.; Burke, R.; Rudzki, D.; Olver, J.; Ponsford, M. Foreningen mellom apolipoprotein E og traumatisk hjerneskade og funksjonelt resultat i en rehabiliteringsprøve. J. Neurotrauma 2011, 28, 1683–1692. [CrossRef]

38. Amouyel, P.; fransk forskningsgruppe for epidemiologi av menneskelige spongiforme encefalopatier; Vidal, O.; Laplanche, J.-L.; Launay, J. Apolipoprotein E allelene som viktige følsomhetsfaktorer for Creutzfeldt-Jakobs sykdom. Lancet 1994, 344, 1315–1318. [CrossRef]

39. Koob, AO; Ubhi, K.; Paulsson, JF; Kelly, J.; Rockenstein, E.; Mante, M.; Adame, A.; Masliah, E. Lovastatin forbedrer synukleinakkumulering og oksidasjon i transgene musemodeller av -synukleinopatier. Exp. Neurol. 2010, 221, 267–274. [CrossRef]

40. Hayashi, H.; Campenot, RB; Vance, DE; Vance, JE Lipoproteiner som inneholder Apolipoprotein E Beskytter nevroner mot apoptose via en signalvei som involverer lavdensitetslipoproteinreseptorrelatert protein-1. J. Neurosci. 2007, 27, 1933–1941. [CrossRef]

41. Navarro, A.; Mendez, E.; Diaz, C.; del Valle, E.; Martinez-Pinilla, E.; Ordonez, C.; Tolivia, J. Livslangt uttrykk for apolipoprotein D i den menneskelige hjernestammen: Korrelasjon med redusert aldersrelatert nevrodegenerasjon. PLoS ONE 2013, 8, e77852. [CrossRef] [PubMed]

42. Elliott, DA; Weickert, CS; Garner, B. Apolipoproteiner i hjernen: Implikasjoner for nevrologiske og psykiatriske lidelser. Clin. Lipidol. 2010, 5, 555–573. [CrossRef] [PubMed]

43. Leroy, E.; Anastasopoulos, D.; Konitsiotis, S.; Lavedan, C.; Polymeropoulos, MH Slettinger i Parkingenet og genetisk heterogenitet i en gresk familie med tidlig debut av Parkinsons sykdom. Nynne. Genet. 1998, 103, 424–427. [CrossRef] [PubMed]

44. Shin, Y.; Klucken, J.; Patterson, C.; Hyman, BT; McLean, PJ Co-chaperon-karboksylterminalen til Hsp70-interagerende protein (CHIP) medierer beslutninger om alfa-synuklein-nedbrytning mellom proteasomale og lysosomale veier. J. Biol. Chem. 2005, 280, 23727–23734. [CrossRef] [PubMed]

45. Webb, JL; Ravikumar, B.; Atkins, J.; Skepper, JN; Rubinsztein, DC Alpha-Synuclein degraderes av både autofagi og proteasomet. J. Biol. Chem. 2003, 278, 25009–25013. [CrossRef]

46. ​​Dehay, B.; Bourdenx, M.; Gorry, P.; Przedborski, S.; Vila, M.; Hunot, S.; Singleton, A.; Olanow, CW; Kjøpmann, KM; Bezard, E.; et al. Målretting av alfa-synuklein for behandling av Parkinsons sykdom: Mekanistiske og terapeutiske hensyn. Lancet Neurol. 2015, 14, 855–866. [CrossRef] 47. Bengoa-Vergniory, N.; Roberts, RF; Wade-Martins, R.; Alegre-Abarrategui, J. Alfa-synuklein-oligomerer: Et nytt håp. Acta Neuropathol. 2017, 134, 819–838. [CrossRef]

48. Rockenstein, E.; Nuber, S.; Overk, CR; Ubhi, K.; Mante, M.; Patrick, C.; Adame, A.; Trejo-Morales, M.; Gerez, J.; Picotti, P.; et al. Akkumulering av oligomer-utsatt alfa-synuklein forverrer synaptisk og nevronal degenerasjon in vivo. Brain 2014, 137, 1496–1513. [CrossRef]

49. Datta, I.; Ganapathy, K.; Razdan, R.; Bhonde, R. Plassering og antall astrocytter bestemmer dopaminerge nevroners overlevelse og funksjon under 6-OHDA-stress mediert gjennom differensiell BDNF-frigjøring. Mol. Neurobiol. 2017, 55, 5505–5525. [CrossRef]

50. Partanen, S.; Haapanen, A.; Kielar, C.; Pontikis, C.; Alexander, N.; Inkinen, T.; Saftig, P.; Gillingwater, TH; Cooper, JD; Tyynela, J. Synaptiske endringer i det thalamokortikale systemet til mus med cathepsin D-mangel: En modell av menneskelig medfødt nevronal ceroid-lipofuscinose. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2008, 67, 16–29. [CrossRef]

51. Siintola, E.; Partanen, S.; Stromme, P.; Haapanen, A.; Haltia, M.; Maehlen, J.; Lehesjoki, AE; Tyynela, J. Cathepsin D-mangel ligger til grunn for medfødt human neuronal ceroid-lipofuscinose. Brain 2006, 129, 1438–1445. [CrossRef] [PubMed]

52. Cullen, V.; Lindfors, M.; Ng, J.; Paetau, A.; Swinton, E.; Kolodziej, P.; Boston, H.; Saftig, P.; Woulfe, J.; Feany, MB; et al. Cathepsin D-ekspresjonsnivået påvirker alfa-synuklein-prosessering, aggregering og toksisitet in vivo. Mol. Brain 2009, 2, 5. [CrossRef] [PubMed]

53. Chu, J.; Thomas, LM; Watkins, SC; Franchi, L.; Nunez, G.; Salter, RD Kolesterolavhengige cytolysiner induserer rask frigjøring av moden IL-1beta fra murine makrofager på en NLRP3-inflammasom- og katepsin B-avhengig måte. J. Leukoc. Biol. 2009, 86, 1227–1238. [CrossRef]

54. Padiath, QS; Fu, YH Autosomal dominant leukodystrofi forårsaket av lamin B1 duplikasjoner en klinisk og molekylær casestudie av endret kjernefysisk funksjon og sykdom. Metoder Cell Biol. 2010, 98, 337–357.

for mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com