Forholdet mellom serum Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 og nyre interstitiell fibrose hos rotter med kronisk nyresykdom

Abstrakt:

Mål: Å undersøke forholdet mellom adenin-indusert serum Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 og nyreinterstitiell fibrose hos rotter med kronisk nyresykdom. Metoder Tjue SPF-grade hannrotter ble tilfeldig delt inn i kontrollgruppe (n=10) og modellgruppe (CKD-gruppe, n=10), og modellgruppen ble gitt adenin ved sondemating og kontrollgruppen ble gitt likt volum saltvann ved sondemating, og rottene ble henrettet ved henholdsvis 3. og 6. uke, og blod ble igjen for å påvise urea-nitrogen, kreatinin og Bcl-3, Gal-3 og renal patologiske endringer ble observert ved HE-farging, alvorlighetsgraden av interstitiell fibrose ved Masson-farging, og ekspresjonen av -SMA-protein i nyrevevet ved immunhistokjemisk farging. Sammenlignet med kontrollgruppen, nivåene av blodureanitrogen,kreatinin, Bcl{{0}}, Gal-3 og TGF- 1 var signifikant høyere i CKD-gruppen på alle tidspunkter (P＜0.0 5). Det relative arealet av interstitielle kollagenfibre i CKD-gruppen var signifikant høyere enn det i kontrollgruppen (P < 0.05). Korrelasjonsanalyse viste en positiv korrelasjon mellom blod Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 nivåer og det relative arealet av nyre interstitiell fibrose (rs=0.776, P < 0,001 ; rs=0.58, P < 0.001; rs=0.52, P=0.001).

Konklusjon Serum Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1-nivåer var signifikant økt hos rotter med en adenin-indusert CKD-modell og var nært korrelert med alvorlighetsgraden avnyrefibrose, som forventes å være en ny biomarkør for vurderingnyrefibrose.

Nøkkelord:Kronisk nyre sykdom; interstitiell fibrose; Bcl-3; Gal-3; TGF- 1

Klikk her for å få mer informasjon om hvordan Cistanche behandlerKronisk nyre sykdom

Kronisk nyre sykdom(CKD) er et globalt offentlig problem og dets utbredelse øker hvert år [1].Kronisk nyre sykdom(CKD) er et globalt offentlig problem, og dets utbredelse øker år for år [1]. I motsetning til dette er nyreflimmer hovedpatologien for CKD-progresjon til sluttstadiet. CKD er en stor patologisk endring og felles vei for alle typer CKD for å gå videre til sluttstadiet. Alvorlighetsgraden av nyrefibrose er nært knyttet til valg av behandling og prognose for pasienter. Derfor er det svært viktig å nøyaktig vurdere graden av nyrefibrose [2]. Derfor er nøyaktig vurdering av graden av nyrefibrose av stor betydning [2]. Nyrebiopsien er gullstandarden for diagnostisering av nyrefibrose og kan nøyaktig og visuelt forstå patologiske forandringer i nyrene og bestemme omfanget av nyrefibrose. Det er imidlertid invasivt og har noen begrensninger i implementeringen. B ultralyd, CT, MR og andre ikke-invasive metoder kan til en viss grad brukes for å bestemme nyrefibrose. Imidlertid kan disse testene bare indirekte reflektere nyrefibrose gjennom anatomiske endringer i nyrene. Disse testene kan imidlertid bare indirekte gjenspeile nyrefibrose gjennom anatomiske forandringer i nyren, og det er vanskelig å oppdage og bedømme alvorlighetsgraden på et tidlig stadium [3]. Imidlertid kan disse testene bare indirekte reflektere nyrefibrose gjennom anatomiske endringer i nyrene, noe som gjør tidlig oppdagelse og fastsettelse av alvorlighetsgraden vanskelig [3]. Derimot kan biomarkører vurdere eller kvantitativt måle både de biologiske og patologiske prosessene til en sykdom. biomarkører kan vurdere eller kvantifisere de biologiske og patologiske prosessene til en sykdom, og også tjene som terapeutiske mål for sykdommen [4]. Biomarkørene kan vurdere eller kvantifisere de biologiske og patologiske prosessene til en sykdom, og også tjene som terapeutiske mål for sykdommen [4]. Det er identifisert flere biomarkører for diagnostisering av nyrefibrose. Imidlertid er det ingen universelt akseptert markør for å bestemme nyrefibrose. Derfor er det viktig å utforske og screene for verdifulle biomarkører.

Bcelllymfom3 (Bcl-3), Bcl-3 hos rotter og Bcl-3 hos rotter er identifisert som de viktigste biomarkørene for diagnostisering av nyrefibrose. Bcl-3 (Bcl-3) og Galectin-3 (Gal-3) er lovende potensielle nyremarkører de siste årene. år, men deres verdi. Men verdien må undersøkes nærmere. I denne studien hadde vi som mål å etablere en adenin-indusert CKD-rottemodell og å undersøke verdien av Galectin 3. I denne studien etablerte vi en rottemodell av CKD indusert av adenin og målte serum Bcl-3, Gal -3, transgen faktor 1 og andre biomarkører hos rotter. Målet med denne studien var å etablere en rottemodell av CKD indusert av adenin og å måle serumnivåene av Bcl-3, Gal-3, transformerende vekstfaktor- 1 (TGF{{16 }}) og TGF- 1.

(TGF- 1) nivåer og analysere deres forhold til nyre interstitiell fibrose, for å undersøke om de kan være grunnlaget for å bestemme nyrefibrose. Nivåene av TGF- 1, Gal-3 og TGF- 1 ble analysert for å bestemme om de kunne være nye biomarkører for nyrefibrose.

1 Materialer og metoder

1.1 Forsøksdyr

Tjue SD-hannrotter av SPF-grad, kroppsvekt (200±10) g, 8 uker gamle, ble kjøpt fra Experimental Animal Center ved Southwest Medical University [SCXK (Chuan) 2018-17]. Rottene ble plassert og samlet i dyrerommet til Research Center for Integrative Medicine ved det tilknyttede sykehuset for tradisjonell kinesisk medisin ved Southwest Medical University [SYXK (Chuan) 2018-065]. Eksperimentet fulgte "3R"-prinsippet om human omsorg. Den eksperimentelle dyreetiske komiteen ved Southwest Medical University godkjente studien (swmu20220018).

1.2 Hovedinstrumenter og reagenser

Adenin (Sigma, USA); Gal-3 ELISA-sett (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Kina), Rat TGF- 1 ELISA-sett (Jiangsu Enzyme Free Industry Co.

Ltd., Kina), rotte Bcl-3 ELISA-sett (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Kina); Masson fargeløsning (Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd., Kina); -SMA-antistoff (Wuhan PhD Bioengineering Co., Ltd., Kina); høyhastighets frysesentrifuge (Eppendorf Co. Ltd.

Ltd., Tyskland); automatisk biokjemisk analysator (Siemens, Tyskland); parafinmikroskop (Thermo, USA); lysmikroskop (Nikon, Japan); enzymstandardiseringsinstrument (Rayto, RT-6100).

1.3 Eksperimentelle metoder

1.3.1 Eksperimentell gruppering og modellforberedelse Tjue SD-hannrotter av SPF-grad ble tilfeldig delt inn i kontroll (n=10) og modellgrupper (CKD, n=10) etter 1 uke med adaptiv fôring. Adenin ble oppløst i destillert vann for å lage en 2,5% suspensjon. 250 mg/(kg-d) adeninsuspensjon ble gitt til CKD-gruppen ved sonde regelmessig fra 1. til 4. uke, og 125 mg/(kg-d) adeninsuspensjon ble gitt til kontrollgruppen fra 5. til 4. uke. den 6. uken; det samme volumet saltvann ble gitt til kontrollgruppen ved sonde, og begge gruppene ble matet med normal mat. Alle rottene ble matet og vannet fritt, med halvparten av lystiden og halvparten av mørketiden, og romtemperaturen var 18 grader -25 grader.

1.3.2 Prøvesamling

Rottene ble henrettet på slutten av henholdsvis 3. og 6. uke, og blod ble samlet fra abdominalaorta; nyrevev ble fiksert i 10 prosent nøytral formalinløsning og laget til parafinsnitt, og den andre delen av nyrevevet ble frosset og lagret ved 80 grader Den andre delen av nyrevevet ble frosset og lagret ved 80 grader i kjøleskap.

1.3.3 Blodurea nitrogen, kreatinin, Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1 indikatorer

Nyrefunksjonen til rotter ble målt med en helautomatisk biokjemisk analysator. Enzym-linked immunoassay ELISA ble brukt for å bestemme serum Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1. Mengdene av Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1 ble bestemt ved hjelp av ELISA. Alle settene ble kjøpt fra Jiangsu Enzyme Free Industrial Co. Alle settene ble kjøpt fra Jiangsu Enzyme Free Industrial Co.

1.3.4 Nyrevev HE-farging Det fikserte nyrevevet ble dehydrert, innebygd, seksjonert og avvokset.

Det fikserte nyrevevet ble dehydrert, innebygd, seksjonert og avvokset til vann

Tabell 1 Sammenligning av nyrefunksjon mellom to grupper av rotter (&x±s)

2.2 Sammenligning av serum Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1 nivåer mellom de to gruppene Sammenlignet med kontrollgruppen, blod Bcl-3, Gal-3 og TGF- 1-nivåer i CKD-gruppen var høyere enn i kontrollgruppen. Sammenlignet med kontrollgruppen var blod Bcl-3, Gal-3 og TGF{{10}}-nivåer signifikant høyere i CKD-gruppen på alle tidspunkter (P < {{14 }}.05). TGF- 1-nivåer var signifikant høyere i CKD-gruppen (P < 0,05); i CKD-gruppen var nivåene av Bcl-3 3nivåer signifikant høyere etter 6 uker sammenlignet med 3 uker i CKD-gruppen (P < 0,05). Se figur 1

2.3 HE-farging av nyrevev i de to gruppene Det var ingen åpenbare patologiske endringer i nyrevevet til kontrollgruppen på hvert tidspunkt, mens nyrevevet til CKD-gruppen ble sett på hvert tidspunkt. Det var ingen åpenbare patologiske endringer i nyrevevet til kontrollgruppen på hvert tidspunkt, mens i CKD-gruppen, nyre. Nyreepitelcellene i CKD-gruppen viste degenerativ nekrose, dilatasjon, proliferasjon av interstitiell fibrøst vev og inflammatorisk celleinfiltrasjon. Endringene var tydeligere ved uke 6 enn ved uke 3, se figur 2

2.4 Masson-farging av nyrevev og interstitiell fibrilleringsskår for de to gruppene av rotter Interstitiumet til kontrollgrupperottene ved slutten av 3. og 6. uke Det ble ikke observert noen tydelig kollagenfiberavsetning i interstitium til kontrollrottene ved slutten av 3. og 6. uke. Økningen av kollagenfiberavsetning i interstitium til CKD-rottene ved slutten av 6. uke sammenlignet med slutten av 3. uke (Det relative arealet av interstitielle kollagenfibre i CKD-gruppen var også signifikant høyere enn det i kontrollgruppen . Det relative arealet av interstitielle kollagenfibre i CKD-gruppen var også signifikant høyere enn det i kontrollgruppen, og var høyere ved slutten av uke 6 enn ved slutten av uke 3 (P < {{10} }.05). (P < 0,05). Se figur 3.

Figur 3 Masson-fargingsresultater og relativ arealscore av kollagenfibre i nyrenes interstitium