Forbedring av utryddelsesminne ved farmakologiske og atferdsmessige intervensjoner rettet mot reaktivering

For mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com

Forbedring av utryddelsehukommelseved farmakologiske og atferdsmessige intervensjoner rettet mot reaktivering

Josué Haubrich, Adriano Machado, Flávia Zacouteguy Boos, Ana P. Crestani, Rodrigo O. Sierra, Lucas de Oliveira Alvares & Jorge A. Quillfeldt

Ekstinksjon er en prosess som involverer ny læring som hemmer uttrykket av tidligere ervervede minner. Selv om det er midlertidig effektivt, sletter ikke utryddelse en opprinnelig fryktassosiasjon. Siden utryddelsessporet har en tendens til å blekne over tid, er originalenhukommelsekan gjenoppstå. På den annen side er styrkende effekter beskrevet i flere rekonsolideringsstudier ved bruk av ulike atferdsmessige og farmakologiske manipulasjoner. For å vite om et ekstinksjonsminne kan styrkes ved reaktiveringsbaserte intervensjoner i den kontekstuelle fryktkondisjoneringsoppgaven, begynte vi med å replikere det klassiske fenomenet spontan recovery for å vise at korte gjeneksponeringsøkter kan forhindre forfallet av ekstinksjonssporet over tid i en langvarig måte. Denne fryktdempningen ble vist å avhenge både av L-type kalsiumkanaler og proteinsyntese, noe som antyder en rekonsolideringsprosess bak den reaktiveringsinduserte styrkende effekten. Ekstinksjonssporet var også mottakelig for forbedring ved en post-reaktivering infusjon av enhukommelse-forsterkende medikament (NaB), som også var i stand til å forhindre rask gjenervervelse av frykt (besparelser). Disse funnene peker på nye reaktiveringsbaserte tilnærminger som kan styrke et utryddelsesminne for å fremme dets utholdenhet. De konstruktive interaksjonene mellom utryddelse og rekonsolidering kan representere en lovende ny tilnærming innen fryktrelaterte lidelsesbehandlinger.

Klikk til Cistanche og Cistanches for minne

Hukommelsegjenfinning er et dynamisk fenomen som, gitt de rette forholdene, kan utløse to distinkte prosesser, rekonsolidering eller ekstinksjon. Etter en kort apportøkt i samme treningssammenheng, en tidligere konsoliderthukommelsekan gå inn i en labil tilstand som krever de novo proteinsyntese for å restabilisere og vedvare, en prosess som kalles rekonsolidering1. Imidlertid kan langvarige, ikke-forsterkede gjenfinningsøkter indusere utryddelse2. Selv om rekonsolidering av fryktminner har blitt grundig studert3, 4, har svært få studier så langt undersøkt muligheten for at et ekstinksjonsspor vil gjennomgå rekonsolidering etter gjenfinning5–7, og dets mulige utfall og kliniske anvendelser er foreløpig uutforsket8.

Ekstinksjon reduserer betingede responser gjennom en prosess som innebærer konsolidering av en ny inhibitorhukommelse; det antas ikke å være avlæring eller sletting av det opprinnelige sporet9, 10. Ekstinksjonsbaserte terapier brukes ofte for å hindre aversive reaksjoner hos pasienter med fryktrelaterte lidelser som posttraumatisk stresslidelse11, 12. Til tross for at det er en effektiv intervensjon, er tilbakefallet av fryktsymptomer rapporteres ofte13 som viser at sammenlignet med robuste fryktminner, er utryddelse mindre varig og utsatt for forfall. Fryktresponser kan lett gjenopprette seg på grunn av flere tilbakefallsprosesser, slik som spontan bedring, gjenoppretting, fornyelse og rask gjenervervelse14, 15. Følgelig er det av stor betydning å finne bedre tilnærminger for å forbedre ekstinksjonsstyrke og utholdenhet.

Til tross for at både rekonsolidering og utryddelse utløses av gjenfinning, er de distinkte prosesser. Atferdsmessig er rekonsolidering vanligvis engasjert ved korte eksponeringer for den betingede stimulus (CS), mens utryddelse krever lengre. I tillegg moduleres induksjonen av rekonsolidering av andre kontekstuelle og kognitive faktorer som til sammen kalles grensebetingelser16. Ved å variere varigheten av eksponeringen for CS, vil det anamnestiske middelet selektivt svekke enten rekonsolideringen av det opprinnelige sporet eller konsolideringen.

Psykobiologi og nevroberegningslaboratorium og nevrobiologi avHukommelselab. Nevrovitenskap Graduate Program, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, PortoAlegre, Brasil. Korrespondanse og forespørsler om materiell skal adresseres til JH (e-post: biohaubrich@gmail.com) eller JAQ (e-post: quillfe@ufrgs.br) av ekstinksjonssporet17–23. Det faktum at begge prosessene ikke finner sted samtidig antyder en spordominanseffekt, ved at det dominerende sporet vil være det første, om ikke det eneste, som påvirkes av interferens. Spordominans oppstår også når tidligere konsoliderte frykt- og utryddelsesspor sameksisterer, noe som påvirker gjenfinningen av dem. Under slike forhold vil gjeneksponering for CS, som potensielt kan aktivere både frykt- og ekstinksjonsspor, resultere i uttrykket av det dominerende minnet og i hemming av det andre2. Som diskutert ovenfor, i utgangspunktet, er utryddelse dominerende og undertrykker lett frykt. Men med tiden overvinner det opprinnelige fryktsporet hemningen ved utryddelse og blir dominerende uttrykt igjen14. I tillegg er det en dobbel dissosiasjon mellom de to prosessene angående molekylære markører som Zif26824, calcineurin19, 25 og BDNF26, noe som indikerer at begge prosessene ikke skjer parallelt.

Det antydes ofte at den funksjonelle rollen til destabilisering-restabiliseringsprosessen bak rekonsolidering er å tillatehukommelseå oppdatere for å beholde sin prediktive og adaptive relevans3, 27–29. For eksempel,hukommelseinnhold kan oppdateres gjennom inkorporering av ny informasjon30–34. I tillegg rapporterte flere studier at rekonsolidering kan formidlehukommelseforbedring og styrking30, 35–39 samt hukommelsesdempning (uten utryddelse) av aversive opplevelser34, 40. Interessant nok er det studier som viser at i noen oppgaver skjer rekonsolidering bare når hukommelsen ennå ikke er på et asymptotisk nivå41–43, noe som ytterligere fremhever dens rolle i styrkingen av minnesporet. Imidlertid er det så langt ukjent om et konsolidert ekstinksjonsspor kan modifiseres ved rekonsolidering.

Rekonsolidering kan åpne et vindu for å tillate farmakologisk modulering av de reaktivertehukommelse. Dette ville parallelt med klassiske eksperimenter der infusjon av amnestiske midler etter reaktivering svekker hukommelse1, eller i det minste effektivt reduserer fryktresponser ved fobier44. I tillegg kan intervensjoner etter reaktivering som fremmer rekonsolidering føre til forbedret ytelse45–47. Derfor, spesifikke forbindelser administrert under vinduet avhukommelselabilitet under rekonsolidering gir mulighet for positiv eller negativ modulering avhukommelsestyrke.

Gitt dens kliniske relevans, er det betydelig interesse for utvikling av mer effektive ekstinksjonsbaserte tilnærminger48. Ekstinksjonsminner er effektive for forbigående å undertrykke fryktresponser, men frykten kommer lett tilbake2. Som stammer fra det faktum at den gjenfinningsdrevne prosessen med rekonsolidering kan føre tilhukommelsestyrking, enten atferdsmessig30, 35–39 eller farmakologisk45–47, antar vi at hvis en utryddelsehukommelsereaktiveres, kan det gjennomgå en rekonsolideringsprosess og bli positivt modulert av atferdsmessige og farmakologiske intervensjoner, noe som resulterer i økt motstand mot tilbakefall.

For å bekrefte dette evaluerte vi effekten av korte gjeneksponeringer for den betingede konteksten hos dyr som tidligere ble trent i kontekstuell fryktkondisjonering (CFC) og utsatt for utryddelse. Vi fant at spontan bedring ble observert 2 uker etter utryddelse, men periodiske reaktiveringsøkter var i stand til å forsinke fryktspor-resurgens i minst 4 uker. Denne effekten ble vist å avhenge av spenningsstyrte kalsiumkanaler av L-type (L-VGCC), og en reaktivering en dag etter ekstinksjonsøkten ble vist å føre til at ekstinksjonssporet forbigående ble labilt på en proteinsynteseavhengig måte. Alt sammen antyder dataene sterkt en rekonsolideringsprosess som virker på ekstinksjonssporet. I en protokoll som ble brukt for å undersøke rask gjenervervelse av frykt – en annen tilbakefallsprosess etter utryddelse49 - var en enkelt post-reaktiveringsinfusjon av natriumbutyrat (NaB), en HDAC-hemmer som positivt regulerer nevronal plastisitet50, i stand til å forbedre utryddelsehukommelsetil det punktet å motstå fryktgjenoppretting. Bevisene viser at ekstinksjonssporet effektivt kan styrkes ved reaktiveringsbaserte intervensjoner.

Eksperiment 1: Utryddelsehukommelsebare forbigående hemmer fryktuttrykk. Ekstinksjon er ny læring som midlertidig undertrykker en tidligere ervervethukommelse. Følgelig, etter utryddelse, eksisterer to motstridende minner sammen og konkurrerer om uttrykk. I utgangspunktet er ekstinksjonsminnet dominerende over fryktsporet og dermed i stand til å hemme dets uttrykk. Denne undertrykkelsen er imidlertid ikke permanent. Etter hvert som tiden går, overvinner fryktminnet utryddelseshemming og aversive atferdsreaksjoner kommer tilbake. Denne prosessen kalles spontan restitusjon15. Først vurderte vi den tidsmessige profilen av spontan utvinning i vår CFC-protokoll. Følgelig var dyrene frykt-kondisjonerte og 24 timer senere gjennomgikk utryddelsestrening. Dagen etter ble det gjennomført en testøkt for å evaluere ekstinksjonsbevaring. En andre test ble utført 7, 14, 21 eller 28 dager senere for å vurdere spontan bedring (fig. 1A).

Under ekstinksjonsøkten avtok frysenivåene over tid i alle grupper, noe som indikerer utryddelse (Repeated-measures ANOVA, F(5,140)=13.625, P=0.001; Fig. 1B) . Ved test 1 viste dyrene lave frysenivåer, noe som indikerer utryddelsesretensjon (fig. 1C). For å vurdere spontan restitusjon ble ytelsen ved test 1 og test 2 sammenlignet med en ANOVA med gjentatte mål, som viste en signifikant gruppe x øktinteraksjon (Repeated-measures ANOVA, F(3,27)=8.085, P { {18}}.0005). Tukeys post-hoc viste at det var signifikant gjenoppretting av fryktresponser bare i grupper der test 2 ble utført enten 21 (P=0.013) eller 28 dager (P=0.0002) etter test 1, men ikke tidligere (7 dager: P=0.999; 14 dager: P=0.969; Fig. 1C).

Resultatene illustrerer den godt beskrevne15 tidsavhengige spontane gjenopprettingen av frykthukommelseetter utryddelse. I vår protokoll undertrykker ekstinksjonsminne fryktresponser i minst 14 dager. Etter 14 dager kan spontan gjenoppretting av frykt finne sted. Derfor, selv om det i utgangspunktet er dominerende, forfaller utryddelsesminnet med tiden, noe som gir mulighet for gjenoppblomstring av fryktuttrykk.

Eksperiment 2: Periodiske reaktiveringer av ekstinksjonsspor forsinker dets tidsavhengige forfall (spontan utvinning). I eksperiment 1 fant vi at i utgangspunktet er ekstinksjonsminne dominerende over det aversivehukommelsespor, hindrer dens uttrykk. Denne effekten forsvinner på senere tidspunkter når utryddelse ikke lenger er i stand til å undertrykke fryktuttrykk. Det er rapportert at reaktiveringsøkter kan føre tilhukommelsestyrking30, 36, 39. Siden ekstinksjonssporet avtar over tid, spådde vi at reaktivering av det muligens ville resultere i styrking, og dermed forbedre utholdenheten og evnen til å undertrykke frykt på avsidesliggende tidspunkter.

Figur 1. Utryddelsehukommelseklarer ikke å undertrykke frykt permanent. (A) Skjematisk representasjon av de eksperimentelle prosedyrene. Fryktkondisjonerte rotter ble sendt til 30-min. utryddelsesøkt og ble testet 24 timer senere. En andre test ble utført 7, 14, 21 eller 28 dager etter test 1 (N=6 /9 per gruppe). (B) Frysenivåer under ekstinksjonsøkter. (C) Frysenivåer under tester. (*) En signifikant forskjell mellom test 1 og 2 (P<0.05, repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

Følgelig gjennomgikk fryktbetingede rotter utryddelsestrening, ble testet 1 dag senere og testet på nytt 28 dager senere for spontan restitusjon. I intervallet mellom test og retest gjennomgikk en gruppe dyr 3-min reaktiveringsøkter på dag 7, 14 og 21 dager etter test 1 (reaktiveringsgruppe) eller ble værende i hjemmeburene (kontrollgruppe; fig. 2A) . En ekstra gruppe ble sendt til reaktiveringsøkter, men ingen ekstinksjonstrening (Ingen ekstinksjon pluss reaktiveringsgruppe). 7-døgnsintervallet mellom reaktiveringer ble valgt fordi, på dette tidspunktet, er ekstinksjon fortsatt robust uttrykt (eksperiment 1).

Under ekstinksjonstrening viste dyrene effektivt en tidsavhengig reduksjon av fryktresponser (F(5,110)=30.516, P=0.001; Fig. 2B). På test 1 var det signifikant forskjell mellom gruppene (F(2,28)=8.11, P=0.002; Fig. 2C). Tukeys post-hoc viste at kontroll- og reaktiveringsgruppene viste lignende frysenivåer (P=0.915) og begge viste lavere frysing enn gruppen Ingen ekstinksjon pluss reaktivering (P=0.007 og P { {21}}.001, henholdsvis). Under reaktiveringsøkter viste Repeated-measures ANOVA en signifikant forskjell mellom reaktivering og ingen ekstinksjon pluss reaktiveringsgrupper (F(1,19)=46.63, P=0.0001) og ingen effekt av økten (F) (2,38)=2.28, P=0.116) eller gruppe x øktinteraksjon (F(2,38)=1.00, P=0.376 Fig. 2D). Sammenligning mellom test 1 og test 2 avslørte signifikant gruppe x øktinteraksjon (Repeated-measures ANOVA, F(2,28)=3.89, P=0.03). Tukey´s post-hoc viste at frykt i reaktiveringsgruppen og i gruppen No extinction plus reaktivering ikke endret seg fra test 1 til test 2 (P=0.844), men det var signifikant gjenoppretting av frykt i kontrollgruppen (P=0.02). Viktigere, frysing av reaktiveringsgruppen var lavere enn alle andre på test 2 (Reaktivering x Kontroll: P=0.007; Reaktivering x Ingen ekstinksjon pluss reaktivering: P=0.0001; Fig. 2E). Dette viser at reaktivering styrket utryddelsehukommelseog dermed forhindret fryktgjenoppretting på et avsidesliggende tidspunkt. Spesielt i denne protokollen hadde reaktiveringsøkter i seg selv ingen effekt på fryktnivåer når ingen ekstinksjonslæring fant sted.

Eksperiment 3 - Reaktiveringsindusert styrking av ekstinksjon avhenger av L-VGCC. For å indusere rekonsolidering,hukommelsemå reaktiveres og gå inn i en labil tilstand. Tidligere arbeider har vist at aktivering av type spenningsstyrte kalsiumkanaler (L-VGCC) under reaktivering er nødvendig for destabilisering, og deres blokkering av nimodipin forhindrer rekonsolidering fra å finne sted51. For å vurdere rollen til L-VGCC i den reaktiveringsinduserte styrkingen av ekstinksjon, gjentok vi den eksperimentelle utformingen av det siste eksperimentet og administrerte nimodipin før reaktivering (fig. 3A).

Under ekstinksjonstrening viste dyrene en tidsavhengig reduksjon av fryktresponser (F(5,125)=13.55, P=0.001; Fig. 3B). På test 1 viste dyr fra Vehicle- og Nimodipin-gruppene like lave frysenivåer (Students t-test; t(25)=0.510, P=0.615; Fig. 3C). Under reaktiveringsøkter var det en signifikant gruppe x øktinteraksjon (F(2,50)=7.863, P=0.001; Fig. 3D) med nimodipin-behandlede dyr som viste økt frykt på tvers av økter (P=0.004), mens det ikke var noen endring i fryktuttrykk hos kjøretøybehandlede rotter (P=0.983).

Ved den andre testen viste nimodipinbehandlede rotter høyere frysenivåer enn kontrollene (t(25)=5.44, P=0.0001; Fig. 3E). Ved å sammenligne ytelsen til begge testøktene fant en ANOVA med gjentatte mål en signifikant gruppe kontra øktinteraksjon (F(1,20)=7.75, P=0.006). Tukeys post-har avslørt at ytelsen til nimodipin-behandlede dyr ved test 2 var høyere enn ytelsen til alle andre grupper og økter (P < 0,001).="" dette="" viser="" at="" ekstinksjonsforbedring="" ved="" reaktiveringer="" krever="">

Eksperiment 4: En enkelt ekstinksjonssporreaktivering åpner et proteinsyntesefølsomt vindu. Etter reaktivering,hukommelsekan gjennomgå en fase som krever at de novo proteinsyntese rekonsolideres og vedvarer. I denne labile tilstanden er den således utsatt for forstyrrelser av proteinsyntesehemmere1. I tidligere arbeid har det blitt påvist at utryddelsenhukommelseer utsatt for rekonsolidering

Figur 2. Periodiske reaktiveringer forhindrer spontan gjenoppretting av ekstinksjonhukommelse. (A) Skjematisk representasjon av de eksperimentelle prosedyrene. Fryktkondisjonerte rotter ble underkastet 30-min. utryddelsesøkter eller ble værende i hjemmeburene (ingen utryddelse pluss reaktiveringsgruppe: N=7). En test ble utført neste dag og en ny test 28 dager senere. I intervallet mellom testene ble dyrene reaktivert med 3-min på dag 7, 14 og 21 etter test 1 eller forble i hjemmeburene (Ekstinksjon pluss ingen reaktiveringsgruppe: N=10; Ekstinksjon pluss reaktiveringsgruppe: N=14). (B) Frysenivåer under ekstinksjonsøkter. (C) Frysenivåer under testen. (D) Frysenivåer under reaktiveringer. (E) Frysenivåer under retest. (*) Signifikante forskjeller mellom grupper (P<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

forstyrrelse ved post-reaktiveringsinterferens i det hemmende unngåelsesparadigmet5, 6. Etter å ha brukt reeksponeringsøkter i tidligere eksperimenter, evaluerte vi her om disse reeksponeringene faktisk var reaktiveringsøkter som involverte rekruttering av proteinsyntese. Følgelig ble dyrene betinget av frykt, og dagen etter gjennomgikk en gruppe utryddelsestrening (utryddelsesgruppe) mens andre forble i hjemmeburene sine (ikke-utryddelsesgruppe). På dag 2 etter trening gjennomgikk alle dyrene en kort reaktiveringsøkt på 3 minutter og ble umiddelbart etter injisert med proteinsyntesehemmeren cykloheksimid (CHX) eller dens bærer. Dagen etter ble dyr testet (fig. 4A).

Under ekstinksjonsøkten avslørte en ANOVA med gjentatte tiltak utryddelseserverv (F(5,75)=24.08, P=0.001; Fig. 4B). Under reaktivering indikerte en toveis ANOVA at dyr som tidligere gjennomgikk utryddelse viste lavere frysenivåer sammenlignet med gruppen uten utryddelse (F(1,43)=23.32, P=0. 001; fig. 4C). Ved testen avslørte en toveis ANOVA en signifikant gruppe x medikamentinteraksjon (F(1,43)=22.64, P=0.001). Tukey´s post-hoc avslørte at cykloheksimid-behandlede dyr i gruppen uten utryddelse viste lavere frysenivåer enn vehikelbehandlede dyr (P=0.01), noe som indikerer at fryktenhukommelsevar svekket. I utryddelsesgruppen,

Figur 3. Reaktiveringsindusert styrking av ekstinksjon er avhengig av spenningsstyrte kalsiumkanaler av L-type. (A) Skjematisk representasjon av de eksperimentelle prosedyrene. Fryktkondisjonerte rotter ble sendt til 30-min. utryddelsesøkt. En test ble utført neste dag og en ny test 28 dager senere. I intervallet mellom testene ble dyrene reaktivert med 3-min på dag 7, 14 og 21 etter test 1. Nimodipin (N=15) eller dets bærer (N=12) ble sc. infundert 30 minutter før hver reaktivering (B) Frysenivåer under ekstinksjonsøkt. (C) Frysenivåer under testen. (D) Frysenivåer under reaktiveringer. (E) Frysenivåer under retest. (*) Signifikante forskjeller mellom grupper (P<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="" test).="" chx-treated="" animals="" showed="" higher="" freezing="" levels="" than="" vehicle-treated="" ones="" (p="0.001)," indicating="" that="" extinction="">hukommelseble forstyrret.

Følgelig, når ingen ekstinksjonstrening ble utført, destabiliseres fryktsporet ved reaktivering og forstyrres av CHX. Når utryddelses- og fryktminnene eksisterer side om side, finner en spor dominanseffekt sted og utryddelsenhukommelseer den som lider av destabilisering, noe som krever at de novo proteinsyntesen vedvarer. Dette funnet viser at ekstinksjonssporet effektivt ble reaktivert, noe som tyder på at rekonsolidering er mekanismen som medierer utryddelsesminnets styrking.

Eksperiment 5 – En annen ekstinksjonsspor-tilbakefallsprosess, Rapid Reacquisition, kan tilbakeholdes farmakologisk med en post-reaktiveringsbehandling. Det er rapportert at rekonsolidering kan forsterkes ved post-reaktivering administrering av forbindelser som HDAC-hemmere, noe som resulterer i økt ytelse i en post-reaktivering langsiktighukommelsetest45, 52–54. Her spurte vi om ekstinksjon kunne moduleres positivt ved post-reaktiveringsbehandling med HDAC-hemmeren natriumbutyrat (NaB). Vi brukte derfor en rekondisjoneringsprotokoll som tillater deteksjon av relative endringer i styrken til frykt og ekstinksjonsminne i henhold til forholdet mellom fryktgjenervervelse. For eksempel, vanligvis etter standard ekstinksjonsprosedyrer, er gjenvinning raskt32, 34, men det kan gå sakte under visse omstendigheter, for eksempel omfattende ekstinksjonslæring eller svak innledende kondisjonering14.

Fryktkondisjonerte rotter gjennomgikk utryddelsestrening og en reaktiveringsøkt 24 timer senere. Umiddelbart etter reaktivering ble NaB eller dets vehikel infundert (ip). I løpet av de fire neste dagene gjennomgikk dyrene en blandet testing og svak rekondisjoneringsprosedyre for å vurdere gjenervervelse av frykt. Hver økt besto av en 4 min test etterfulgt av et svakt fotsjokk og en ytterligere 30 s periode i boksen (fig. 5A). Under utryddelsestrening ble dyr vist

Figur 4. Utryddelsehukommelsekrever de novo proteinsyntese etter reaktivering for å vedvare. (A) Skjematisk representasjon av de eksperimentelle prosedyrene. Fryktkondisjonerte rotter ble utsatt for 30-min. utryddelsesøkter eller ble værende i hjemmeburene. En reaktiveringsøkt ble utført 7 dager senere etterfulgt av en test neste dag. Umiddelbart etter reaktivering fikk dyrene ip-infusjon av sykloheksimid (Ekstinksjonsgruppe: N=10; Ingen-ekstinksjonsgruppe: N=14) eller dets vehikel (Ekstinksjonsgruppe: N=9; Ingen-ekstinksjonsgruppe: N=14) gruppe: N=11). (B) Frysenivåer under ekstinksjonsøkt. (C) Frysenivåer under reaktiveringsøkten. (D) Frysenivåer under testøkter. (*) Signifikante forskjeller mellom grupper (P<0.05, repeated-measures="" or="" two-way="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

en tidsavhengig reduksjon av fryktresponser (F(5,110)=32.89, P=0.001; Fig. 5B). Ved reaktivering var det ingen forskjell mellom grupper som senere ble infundert med NaB eller Veh (t(22)=0.59, P=0.56; Fig. 5C). I løpet av de 4 testøktene (som endte med en svak rekondisjonering hvis effekt ble analysert i den følgende testen; Fig. 5D), indikerte ANOVA med gjentatte mål en signifikant medikament x øktinteraksjon (F(3,66)=4.82 , P=0.004). Tukeys post-hoc avslørte at under den første testen var Veh- og NaB-gruppene like i frysenivå (P=0.99). Etter én rekondisjoneringsøkt viste imidlertid Veh-behandlet omgående fryktgjenervervelse (P=0.0002), mens NaB-behandlet ikke gjorde det (P=0.99). Den NaB-behandlede gruppen viste kun signifikant gjenervervelse etter tre rekondisjoneringsøkter, ved test 4 (P=0.002).

Disse resultatene viser at NaB-behandling etter reaktivering ga utryddelsenhukommelsemotstandsdyktig mot rask gjenanskaffelse. Dyr fra kjøretøygruppen viste lett besparelser etter en enkelt svak omtreningsøkt.

Figur 5. Post-reaktivering infusjon av, enhukommelse-forsterkende medikament, styrker også ekstinksjonsspor ved å forhindre rask gjenervervelse av frykt. (A) Skjematisk representasjon av de eksperimentelle prosedyrene.

Fryktkondisjonerte rotter ble sendt til 30-min. utryddelsesøkt. En reaktivering ble utført 24 timer senere etterfulgt av umiddelbar administrering av natriumbutyrat (NaB; N=12) eller dets bærer (N=12). I løpet av de neste 3 dagene gjennomgikk dyrene testøkter som endte med levering av et svakt fotsjokk pluss ytterligere 30 s med kontekstuell utforskning (rapid reacquisition protocol). En dag senere ble det utført en standardtest. (B) Frysenivåer under ekstinksjonsøkt. (C) Frysenivåer under reaktivering. (D) Frysenivåer under tester. (*) Signifikante forskjeller mellom grupper (P<0.05, independent-samples="" t-test="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

NaB-behandlede dyr viste på sin side kun besparelser etter 3 rekondisjoneringsøkter. Dette viser at ekstinksjonssporet kan styrkes ved farmakologiske intervensjoner etter reaktivering.

Diskusjon

I denne studien viser vi at en kontekstuell fryktutryddelsehukommelsekan forbedres med korte reaktiveringsøkter. Først viste vi at etter ekstinksjonslæring er spontan gjenoppretting av frykt observerbar 21 dager etter, men ikke 14 dager eller tidligere (eksperiment 1). Deretter fant vi det ved utryddelsehukommelseble periodisk reaktivert, dets tidsavhengige forfall ble forhindret og ingen spontan gjenoppretting av frykt ble bekreftet i minst 28 dager (eksperiment 2), en effekt som også ble vist å være mediert av L-VGCCs (eksperiment 3). For å verifisere om proteinsyntese ble rekruttert av gjeneksponeringsøktene, infunderte vi cykloheksimid etter reaktivering og observerte forekomsten av et nytt plastisitetsvindu, noe som støttet ideen om at rekonsolidering er prosessen som finner sted (eksperiment 4). Til slutt, ved å bruke en annen protokoll rettet mot en annen tilbakefallsmekanisme for ekstinksjonsminne – rask gjenanskaffelse (sparing) – bekreftet vi at farmakologisk HDAC-hemming etter reaktivering også var i stand til å forbedre ekstinksjonssporet, som bevist av den observerte motstanden mot rask gjenervervelse av fryktrespons.

Det er kjent at tapet av betingede responser etter utryddelse ikke er permanent55 siden utryddelse faktisk ikke er avhengig avhukommelsesletting. I stedet fremmer det ny læring som hindrer uttrykket av den tidligere lagrede assosiasjonen14. Derfor eksisterer minner om utryddelse og frykt side om side og konkurrerer om uttrykk. Dette fører til en spordominanseffekt med ekstinksjon som hemmer fryktuttrykk. Imidlertid forfaller utryddelse lett, og fryktminnet overvinner sin hemning gjennom flere tilbakefallsmekanismer15, 20. Den mest tydelige av disse er at frykten vender tilbake bare ved tidens gang, kalt spontan bedring15. I tillegg kan fryktminne bli løst fra utryddelseshemming av atferdsfenomener som rask gjenoppretting, gjenoppretting og fornyelse14. Utryddelsens forfallhukommelseover tid er vist i eksperiment 1. I utgangspunktet undertrykker ekstinksjon betingede fryktresponser. Men på avsidesliggende tidspunkter forsvinner denne effekten, noe som resulterer i spontan bedring. Rask gjenervervelse er observert i eksperiment 5. Kontrollrotter viser raskt høy frykt etter en enkelt svak rekondisjoneringsøkt. Nye metoder designet for å omgå utryddelsens dårlige utholdenhet ved å øke styrken, vil potensielt forbedre psykiatrisk behandling av fryktrelaterte lidelser48.

Siden utryddelsehukommelsesvekkes over tid og mister evnen til å undertrykke frykt15, og det vil være fordelaktig å forhindre dette forfallet. I eksperiment 2 fant vi at utholdenheten til et ekstinksjonsminne kan moduleres positivt ved dets enkle reaktivering. Følgelig var det ingen tegn til spontan bedring når dyr gjennomgikk korte reaktiveringer, selv 4 uker etter ekstinksjonstrening. Interessant nok økte ikke reaktivering fryktresponsen hos dyr som ikke ble underkastet ekstinksjonstrening som tidligere rapportert30, sannsynligvis på grunn av en takeffekt. Derfor var korte reaktiveringsøkter i stand til å forhindre utryddelsens tidsavhengige forfall på en langvarig måte.

Det er ofte foreslått at rekonsolidering finner sted for å tillatehukommelseinnhold som skal oppdateres, og opprettholde sin adaptive relevans for å bedre veilede fremtidig atferd. Rapporter om rekonsolidering-drevet minneoppdatering viser at det kan skje gjennom inkorporering av ny informasjon32, 34 eller ved å styrke eksisterende assosiasjoner30, 35–39. Det er viktig å påpeke at selv når styrkingen er et resultat av ytterligere læring fra en identisk andre læringsforsøk, er destabilisering-restabiliseringsprosessen fortsatt nødvendig36. Derfor antok vi at den reaktiveringsdrevne styrkende effekten observert i eksperiment 2 kunne formidles av en rekonsolideringsprosess, som omfatter en reaktiveringsavhengig destabiliseringsfase etterfulgt av en restabiliseringsfase som krever de novo proteinsyntese. Tidligere arbeider har vist at L-VGCC-blokkeren nimodipin forhindrer minnedestabilisering, og forhindrer dermed rekonsolidering51. I eksperiment 3 fant vi at den styrkende effekten av reaktivering ble forhindret av L-VGCC-blokkeren nimodipin, som støtter involveringen av rekonsolidering i forbedringen av ekstinksjonsspor. Nimodipin har også vært implisert i svekkelse av ekstinksjonsinnhenting så vel som konsolidering56, 57. I vår eksperimentelle protokoll ble imidlertid nimodipin injisert flere dager etter at ekstinksjonsøkten fant sted, noe som gjorde effektene forskjellige fra de som ble oppnådd rundt den første ekstinksjonslæringen. Derfor, uavhengig av hvilken prosess som faktisk blokkeres – rekonsolidering eller ekstinksjon – viser eksperiment 3 at reaktiveringsindusert styrking av ekstinksjon krever at aktiveringen av-VGCC finner sted.

Rekonsolidering er en prosess der en tidligere etablerthukommelsereaktiveres og blir labil, noe som krever at de novo proteinsyntesen vedvarer. For ytterligere å adressere spørsmålet om en reaktiveringsøkt induserer rekonsolidering av ekstinksjonssporet, undersøkte vi effekten av hemming av proteinsyntese etter reaktivering hos dyr som tidligere har gjennomgått ekstinksjonstrening eller ikke tidligere (eksperiment 4). Hos dyr som ikke gjennomgikk utryddelse, forstyrret hemming av proteinsyntese etter reaktivering rekonsolidering av den kontekstuelle fryktenhukommelse, noe som resulterer i lave frysenivåer. Det motsatte atferdsmessige utfallet fant sted i gruppen som gjennomgikk utryddelse: i testen viste CHX-behandlede dyr høye frysenivåer, noe som indikerer at ekstinksjonsminnet ble forstyrret. I dette eksperimentet, siden ekstinksjon ble forstyrret av proteinsyntesehemming etter en enkelt gjeneksponering (som bekreftet i en test dagen etter), ble ingen ekstra gjeneksponeringsøkter undersøkt. Resultatene av dette eksperimentet tyder på at utryddelsessporet ble hindret til et punkt at det ikke lenger var i stand til å undertrykke frykt. Tidligere arbeid5, 7 indikerer at reaktivering ikke bare fremmet "ytterligere ekstinksjonslæring", men fikk ekstinksjonssporet til å gå inn i en labil tilstand som krevde rekonsolidering for å vedvare. Man må legge merke til at enten utryddelsesminnet eller fryktminnet ble uttrykt på tidspunktet for reaktivering. Følgelig var sporet som er dominerende aktivert av reaktiveringen det som ble destabilisert og dermed svekket av proteinsyntese-inhiberingen.

Til slutt vurderte vi om ekstinksjonssporet kunne moduleres positivt ved post-reaktiveringsbehandling med enhukommelse-forsterkende medikament. Flere farmakologiske midler har vist seg å forbedrehukommelsekonsolidering og rekonsolidering, inkludert HDAC-hemmere som natriumbutyrat45, 52, 53. I eksperiment 5 fant vi at post-reaktivering NaB-behandling forbedret ekstinksjonssporet, slik at det kunne motstå tilbakefall ved hjelp av en rask gjenanskaffelsesprotokoll. Dyr behandlet med NaB viste bemerkelsesverdig motstand mot besparelser etter en rask gjenanskaffelsesprosedyre. Kjøretøybehandlede dyr viste besparelser etter en enkelt svak rekondisjoneringsøkt, mens NaB-behandlede rotter krevde 3 rekondisjoneringsøkter for å vise samme restitusjonseffekt. Dette viser at selv en kort reaktiveringsøkt gjør et ekstinksjonsspor tilgjengelig for forbedring ved positiv interferens. Ekstinksjonsforbedring ved post-reaktivering HDAC-hemming, som rapportert her, antyder at den samme gunstige effekten kan oppnås med andre minneforbedrende medisiner for å hemme fryktuttrykk over tid.

Muligheten for at den reaktiveringsavhengige styrkingen av ekstinksjon kunne vært mediert av ytterligere ekstinksjon i stedet for rekonsolidering må vurderes. Det er rapportert at selv korte gjeneksponeringer av en kontekst kan føre til utryddelse når de utføres på avsidesliggende tidspunkter35. Selv om den eksperimentelle protokollen til den artikkelen skiller seg fra vår på et betydelig antall aspekter, har vi inkludert en ekstra eksperimentell gruppe for å kontrollere denne spesifikke bekymringen: i eksperiment 2 gjennomgikk gruppen "No-extinction plus reactivation" de samme tre reaktiveringsøktene, men ble ikke sendt til en utryddelsesøkt. Denne gruppen viste ingen fryktdempning, verken under reaktiveringer eller testen, forskjellig fra det som ville forventes ved utryddelse. Ytterligere bevis kommer fra eksperiment 4. Hvis en kort eksponering induserte ytterligere utryddelse, ville cykloheksimidbehandlingen bare ha forstyrret den inkrementelle læringen av den økten, og spart det som tidligere var lagret. Imidlertid har sykloheksimid etter reaktivering forstyrret ekstinksjonssporet, og opphevet hemmingen av frykt i en test utført 24 timer senere. Forstyrrelsen av et tidligere lagret spor ved inhibering av proteinsyntese etter reaktivering er i samsvar med tolkningen av rekonsolidering. Med tanke på konvergensen av alle atferdsmessige og farmakologiske bevis oppnådd med den nåværende eksperimentelle designen, indikerer resultatene våre at det som skjedde under reaktiveringsøktene var en rekonsolideringsprosess som formidlet styrkingen av ekstinksjonhukommelse.

Fryktgjenoppretting etter utryddelsesbaserte tilnærminger er avgjørende å forstå for å forbedre atferdsmessige og farmakologiske behandlinger av angstlidelser. Faktisk kan ekstinksjonsforbedring betraktes som et kjennetegn på psykiatrisk forskning. Her fant vi ut at korte reaktiveringsøkter var effektive for å forhindre spontan gjenoppretting av utdødd frykthukommelse. Denne effekten ble mediert av L-VGCC og involverer proteinsyntese, noe som sterkt antyder at rekonsolidering er mekanismen bak denne styrkingen. Vi fant også at positiv farmakologisk modulering etter reaktivering var i stand til å forhindre rask gjenanskaffelse av frykt. Sammen viser disse funnene at utryddelse kan dra nytte av reaktiveringsbaserte intervensjoner som har som mål å forbedre dens styrke og utholdenhet. Det legger også til forestillingen om at rekonsolidering og utryddelse ikke er helt separate prosesser slik dagens paradigmer ofte antyder58. På grunn av prominensen til ekstinksjonsbaserte kognitive atferdsterapier, gir disse funnene relevant innsikt til både grunnleggende og klinisk forskning.

Metoder

Emner. Wistar hannrotter fra vår avlskoloni som veide 300–350 g, i alderen 60–70 dager, ble brukt. Dyrene ble holdt i plastbur, fire til fem per bur, med vann og mat tilgjengelig ad libitum. Alle forsøk ble utført av nasjonal dyrepleielovgivning og retningslinjer (brasiliansk lov 11794/2008) og godkjent av universitetets etiske komité.

Kontekstuell fryktkondisjonering. CFC-kammeret besto av en opplyst pleksiglassboks (25.0 ×25.0-cm rutenett med parallelle 0.1-cm kaliber rustfrie stålstenger med en avstand på 1.{{ 7}} cm fra hverandre). I kondisjonsøkten ble rottene plassert i kammeret i 3-min, og fikk deretter to 2-sekunders 0,7 mA fotsjokk atskilt med et 30-sekundersintervall. Dyrene ble holdt i kondisjoneringsmiljøet i ytterligere 30 sekunder før de returnerte til hjemmeburene.

Hukommelseekstinksjon, reaktivering og testøkter. Korte eller lange kontekstgjeneksponeringer ble brukt for å indusere henholdsvis minnereaktivering eller ekstinksjonslæring. Ekstinksjonstrening besto av 30-minst gjeneksponering for den betingede konteksten og fant alltid sted 24 timer etter CFC. Minne reaktiveringsøkter besto av en 3-min re-eksponering for den betingede konteksten. I forsøk 2 og 3 ble reaktiveringer utført på dag 7, 14 og 21 etter test 1. I forsøk 4 og 5 ble de utført 24 timer etter ekstinksjonstrening.

Testøktene besto av en 4-min. gjeneksponering for konteksten. På forsøk 1, 2 og 3 ble den første testen utført 24 timer etter ekstinksjonstreningen, og en andre test ble utført 7, 14, 21 eller 28 dager senere for å vurdere frykt for spontan bedring. I forsøk 4 og 5 ble testøkten utført 24 timer etter reaktivering for å vurdere effekten av farmakologiske manipulasjoner etter reaktivering.

For å håndtere rask gjenanskaffelse (eller "besparelser"; eksperiment 5), gjennomgikk dyrene en 4-min test etterfulgt av et svakt fotsjokk (ett 2-sekund 0,4 mA). Etter ytterligere 30 sekunder vendte de tilbake til hjemmeburene sine. Denne prosedyren ble gjentatt daglig tre ganger, etterfulgt av en ekstra test én dag senere. I denne prosedyren ble frysing alltid skåret før fotsjokket (som besto av en standard testøkt). Dette tillot oss både å måle ytelse og sende dyr til en svak rekondisjoneringsøkt.

Narkotika. Proteinsyntesehemmer cykloheksimid (CHX; Sigma) ble oppløst i sterilt isotonisk saltvann med 1 prosent dimetylsulfoksid til en konsentrasjon på 2,2 mg/ml. Sykloheksimid eller dets bærer ble injisert intraperitonealt (ip) umiddelbart etter reaktiveringen. Totalt injisert volum var 1 ml/kg.

L-type spenningsstyrte kalsiumkanaler (LVGCCs) antagonist nimodipin (Sigma) ble oppløst i sterilt isotonisk saltvann med 8 prosent dimetylsulfoksid til en konsentrasjon på 16 mg/ml. Nimodipin eller dets bærer ble injisert subkutant 30 minutter før reaktiveringsøktene. Totalt injisert volum var 1 ml/kg.

Natriumbutyrat (NaB; Sigma), en histon-deacetylase (HDAC)-hemmer, ble oppløst i sterilt isotonisk saltvann til en konsentrasjon på 0.6g/ml. Det totale volumet injisert var 1 ml/kg ip, umiddelbart etter reaktivering.

Dataanalyse.Hukommelseble målt ved å kvantifisere fryseatferd og uttrykt som en prosentandel av den totale økttiden. Frysing ble målt av en observatør som var blind for de eksperimentelle forholdene. Homoskedastisitet og normalitet av datafordelingen ble bekreftet med henholdsvis Levenes test og Kolmogorov-Smirnov test. Ekstinksjonsøkter ble analysert ved bruk av Repeated-Measures ANOVA. Reaktiveringsøkter ble analysert ved å bruke Students t-test, toveis ANOVA eller Repeated-Measures ANOVA, etterfulgt av Tukey post-hoc test. Testøkter ble analysert ved å bruke Students t-test, Toveis ANOVA eller Gjentatte Målinger ANOVA, etterfulgt av Tukey post-hoc test.

Referanse

1. Nader, K., Schafe, GE & Le Doux, JE Fryktminner krever proteinsyntese i amygdala for rekonsolidering etter uthenting. Nature 406, 722–6 (2000).(2010).

3. Finnie, PSB & Nader, K. Rollen til metaplastisitetsmekanismer i reguleringhukommelsedestabilisering og rekonsolidering. Neurosci. Biobehav. Rev. 36, 1667–707 (2012).

5. Rossato, JI, Bevilaqua, LR, Izquierdo, I., Medina, JH & Cammarota, M. Henting induserer rekonsolidering av fryktutryddelsehukommelse. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 107, 21801–21805 (2010).

7. Eisenberg, M. & Dudai, Y. Rekonsolidering av friskt, fjernt og slukket fryktminne i Medaka: gammel frykt dør ikke. Eur J Neurosci 20, 3397–3403 (2004).

8. Rosas-Vidal, L., Rodriguez-Romaguera, J., Do-Monte, F. & Anderson, R. Målretting mot rekonsolidering av utryddelsesminner: en ny potensiell strategi for å behandle angstlidelser. Mol. Psykiatri 20, 1264–1265 (2015).

9. Bouton, ME, Westbrook, RF, Corcoran, KA & Maren, S. Kontekstuell og tidsmessig modulering av utryddelse: atferdsmessige og biologiske mekanismer. Biol. Psykiatri 60, 352–60 (2006).

11. Furini, C., Myskiw, J. & Izquierdo, I. Læringen om fryktutryddelse. Neurosci. Biobehav. Rev. 47, 670–683 (2014).

13. Vervliet, B., Craske, MG & Hermans, D. Frykt utryddelse og tilbakefall: state of the art. Annu. Rev. Clin. Psychol. 9, 215–48 (2013). (2002).

15. Rescorla, Ra Spontan bedring. Lære. Mem. 11, 501–9 (2004).

17. Pedreira, ME & Maldonado, H. Proteinsyntese forhindrer rekonsolidering eller ekstinksjon avhengig av påminnelsens varighet. Neuron 38, 863–869 (2003).

18. Bustos, SG, Maldonado, H. & Molina, VA Forstyrrende effekt av midazolam på rekonsolidering av fryktminne: avgjørende påvirkning av reaktiveringstidsspenn og minnealder. Neuropsychopharmacology 34, 446–57 (2009).

19. Merlo, E., Milton, AL, Goozée, ZY, Theobald, DE & Everitt, BJ Rekonsolidering og utryddelse er adskillelige og gjensidig utelukkende prosesser: atferdsmessige og molekylære bevis. J. Neurosci. 34, 2422–31 (2014).

20. Eisenberg, M., Kobilo, T., Berman, DE & Dudai, Y. Stabilitet av hentet minne: invers korrelasjon med spordominans. Science 301, 1102–1104 (2003).

21. Suzuki, A. et al. Minnerekonsolidering og utryddelse har distinkte tidsmessige og biokjemiske signaturer.J. Neurosci. 24, 4787–95

(2004).

22. Lee, JLC, Milton, AL & Everitt, BJ Rekonsolidering og utryddelse av betinget frykt: hemming og potensering. J. Neurosci. 26, 10051–6 (2006).

23. Flavell, CR & Lee, JL Rekonsolidering og utryddelse av appetittvekkende pavlovsk minne. Neurobiol Learn Mem 104, 25–31

(2013).

24. Tedesco, V., Roquet, RF, DeMis, J., Chiamulera, C. & Monfils, M.-H. Ekstinksjon, brukt etter gjenfinning av auditivt fryktminne, øker selektivt sink-fingerprotein 268 og fosforylert ribosomalt protein S6 uttrykk i prefrontal cortex og lateral amygdala. Neurobiol. Lære. Mem. 115, 78–85 (2014).

25. de la Fuente, V., Freudenthal, R. & Romano, A. Rekonsolidering eller ekstinksjon: transkripsjonsfaktorbytte ved bestemmelse av minneforløp etter henting. J. Neurosci. 31, 5562–73 (2011).

27. Lee, JLC Rekonsolidering: opprettholdelse av minnerelevans. Trender Neurosci. 32, 413–20 (2009).

29. Nadel, L. & Hardt, O. Oppdatering om minnesystemer og prosesser. Neuropsychopharmacology 36, 251–73 (2011).

31. Forcato, C., Rodríguez, MLC, Pedreira, ME & Maldonado, H. Rekonsolidering hos mennesker åpner opp deklarativ hukommelse for inngangen til ny informasjon. Neurobiol. Lære. Mem. 93, 77–84 (2010).

32. Monfils, M.-H., Cowansage, KK, Klann, E. & LeDoux, JE Ekstinksjon-rekonsolidering grenser: nøkkelen til vedvarende demping av fryktminner. Vitenskap (80-.). 324, 951–955 (2009).

33. Hupbach, A., Gomez, R., Hardt, O. & Nadel, L. Rekonsolidering av episodiske minner: en subtil påminnelse utløser integrering av ny informasjon. Lære. Mem. 14, 47–53 (2007).

34. Haubrich, J. et al. Rekonsolidering gjør at fryktminnet kan oppdateres til et mindre aversivt nivå gjennom inkorporering av appetittvekkende informasjon. Neuropsychopharmacology 40, 315–326 (2015).

35. Inda, MC, Muravieva, EV & Alberini, CM Minnehenting og tidens gang: fra rekonsolidering og styrking til utryddelse. J. Neurosci. 31, 1635–43 (2011).

(2008).

37. Fukushima, H. et al. Forbedring av fryktminne ved gjenfinning gjennom rekonsolidering. Elife 2014, 1–19 (2014).

39. Forcato, C., Rodríguez, MLC & Pedreira, ME Gjentatte labiliserings-rekonsolideringsprosesser styrker deklarativ hukommelse hos mennesker. PLoS One 6, e23305 (2011).

(2015).

41. Garcia-DeLaTorre, P., Rodriguez-Ortiz, CJ, Arreguin-Martinez, JL, Cruz-Castaneda, P. & Bermudez-Mattoni, F. Samtidige, men ikke uavhengige anisomycin-infusjoner i insular cortex og amygdala hindrer stabilisering av smaksminne når den er oppdatert. Lære. Mem. 16, 514–519 (2009).

42. Lee, JLC Minnerekonsolidering formidler oppdatering av hippocampus-minneinnhold. Front. Oppførsel. Neurosci. 4, 168 (2010).

44. Souter, M. & Kindt, M. En brå transformasjon av fobisk atferd etter et amnesisk middel etter henting. Biol Psychiatry, doi:10.1016/j.biopsych.2015.04.006 (2015).

45. Bredy, TW & Barad, M. Histon-deacetylase-hemmeren valproinsyre forbedrer oppkjøp, utryddelse og rekonsolidering av betinget frykt. Lære. Mem. 15, 39–45 (2008).

47. Tronson, NC, Wiseman, SL, Olausson, P. & Taylor, JR Toveis adferdsplastisitet av minnerekonsolidering avhenger av amygdalar proteinkinase A. Nat. Neurosci. 9, 167–9 (2006).

48. Fitzgerald, PJ, Seemann, JR & Maren, S. Kan fryktutryddelse forsterkes? En gjennomgang av farmakologiske og atferdsmessige funn. Brain Res. Okse. 105, 46–60 (2014).

49. Bouton, ME, Winterbauer, NE & Todd, TP Tilbakefallsprosesser etter utryddelsen av instrumentell læring: Fornyelse, gjenoppblomstring og gjenervervelse. Oppførsel. Prosesser 90, 130–41 (2012).

50. Gräff, J., Kim, D., Dobbin, MM & Tsai, L. Epigenetisk regulering av genuttrykk i fysiologiske og patologiske hjerneprosesser. 603–649, doi:10.1152/physrev.00012.2010 (2011).

51. Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, PW & Kida, S. Aktivering av LVGCC-er og CB1-reseptorer som kreves for destabilisering av reaktiverte kontekstuelle fryktminner. Lære. Mem. 15, 426–33 (2008).

52. Federman, N., Fustinana, MS & Romano, A. Rekonsolidering innebærer histonacetylering avhengig av styrken til minnet. Nevrovitenskap 219, 145–156 (2012).

53. Villain, H., Florian, C. & Roullet, P. HDAC-hemming fremmer både initial konsolidering og rekonsolidering av romlig hukommelse hos mus. Sci. Rep. 6, 27015 (2016).

54. Stefanko, DP, Barrett, RM, Ly, AR, Reolon, GK & Wood, MA Modulering av langtidsminne for objektgjenkjenning via HDAC-hemming. Proc. Natl. Acad. Sci. De Forente Stater. 106, 9447–52 (2009).

56. Flavell, CR, Barber, DJ & Lee, JLC Rekonsolidering av atferdsminne av mat- og fryktminner. Nat. Commun. 2, 504

(2011).

57. Cain, CK, Blouin, AM & Barad, M. Spenningsstyrte kalsiumkanaler av L-type er påkrevd for utryddelse, men ikke for tilegnelse eller uttrykk, betinget frykt hos mus. J. Neurosci. 22, 9113–9121 (2002).

58. Almeida-Correa, S. & Amaral, OB Minnelabilisering i rekonsolidering og ekstinksjon – bevis for et felles plastisitetssystem? J Physiol Paris 108, 292–306 (2014).

Anerkjennelser

Vi takker fru Zelma Regina V. de Almeida for hennes snille og profesjonelle tekniske assistanse, og M.Sc. Jane Zhang for hennes sjenerøse og kompetente språkrevisjon. Dette arbeidet ble støttet av stipender og tilskudd fra CAPES (MEC), CNPq (MCT) og PROPESQ (UFRGS). Alle forfatterne erklærer at de ikke har noen annen kompensasjonskilde enn primær institusjon og føderal finansiering.

Forfatterbidrag

JH designet studien, utførte eksperimentene, analyserte dataene og skrev manuskriptet. AM, FZB, APC og ROS hjalp til i eksperimentene og bidro med ideer. LOA og JAQ hjalp til med å designe studien og skrive manuskriptet. Alle forfatterne har anmeldt manuskriptet.

Tilleggsinformasjon

Konkurrerende interesser: Forfatterne erklærer at de ikke har noen konkurrerende interesser.

Utgiverens notat: Springer Nature forblir nøytral når det gjelder jurisdiksjonskrav i publiserte kart og institusjonelle tilknytninger.

Open Access Denne artikkelen er lisensiert under en Creative Commons Attribution 4.0 International