Studier av kjemiske bestanddeler av Cistanche Tubulosa

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Intro

Cistanche tubulosa er en slags parasittisk planteparasittisk på røttene til flergrenet Tamarix vamosissma eller andre ørkenplanter. Det er distribuert i den sørlige regionen Xinjiang, Kina. Dens medisinske del er dens tørre kjøttfulle stilk. Dens medisinske materialer er Cistanche, Grand-Rue eller Inch-Rue. Det er ofte brukt til nyretonifisering og Yang-styrkende medisin i tradisjonell kinesisk medisin. Moderne farmakologiske studier mener at den har antialdringsfunksjoner som å forlenge livet, så den kalles også "ørkenginseng". Det er få studier på dets kjemiske komponenter, og noen fenyletanoidglykosider ble ekstrahert av Kobayashi Hiromi et al. Seks monomere forbindelser I, IL, III, IV, V og VI ble isolert fra ekstraktet og identifisert som D-Mannitol ved kjemiske og spektrale metoder, - Sitosterol, daucosterol, 8-epibrucin, echinacoside og Cistanoside A. De to sistnevnte glykosidene er aktive komponenter for å styrke Yang og anti-aldring. Forbindelser I, II, III, IV og VI er ikke rapportert i Cistanche deserticola ennå.

Eksperimentell

1. materialer og instrumenter

Den eksperimentelle Cistanche deserticola ble kjøpt fra Hotan farmasøytisk selskap, Xinjiang. Den makroporøse harpiksen var type AB-B, produsert av Nankai University. Dextran gel LH-20 var produktet fra Shanghai Long March farmasøytiske fabrikk. Type X4 mikrosmeltepunktinstrument ble brukt til smeltepunktmåling, og termometeret ble ikke kalibrert. IR-instrumentet som ble brukt var Shimadzu-440, og modellene for H-NMR- og C-NMR-instrumenter var Varian FT-80A.

2. utvinning og separasjon

Ta 8 kg Cistanche deserticola, refluks og ekstraher med 95 prosent EtOH, plasser ekstraktet over natten, fell ut forbindelse I, konsentrer løsningen under redusert trykk til ekstraktsituasjonen, tilsett en passende mengde vann for suspensjon, og ekstraher suksessivt med EtOAc og n -BuOH for å oppnå 3 deler: EtOAc, n-BuOH og vannlag. Forbindelsene II og III ble oppnådd ved silikagelkolonnekromatografi og eluert med CHC13 MeOH (100:1 → 10:1); Det vandige laget ble eluert med vann og 50% EtOH gjennom en aktivert karbonkolonne, og den 50% EtOH-eluerte delen ble eluert med silikagelkolonnekromatografi og CHCl3EtOH (10:4) for å oppnå forbindelse IV; Den delen av n-BuOH som elueres med henholdsvis vann og metanol gjennom den makroporøse harpikskolonnen etter dekompresjon og konsentrering, samler metanolelueringsdelen og oppnår deretter fenolglykosider gjennom polyamidkolonnelaget. De fenoliske glykosidene ble deretter separert og depurert av silikagelkolonnen (CHCl3:MeOH: H2O 6:4:l eluering) og Dextran gel LH-20 (MeOH: H20 ble 1:1 eluert), og den gulaktige amorfe pulver V og VI. ble innhentet.

3. Komponentidentifikasjon

Forbindelse I: fargeløs nålformet krystall (EtOH), mp166 ~ 168 grader, [a] 15D pluss 21,3 grader (målt i boraks, 1g av denne komponenten, og 1,28g boraks, tilsett vann til 10ml), IR ( KBr) υ 3400, 3250, 1460, 1350, 1080, 1020 cm-1. H-NMR(D2O) 5 3,4~4,0 ppm. Fargeløse firkantede krystaller ble oppnådd ved acetylering med den konvensjonelle metoden, smp. 121 ~ 122 grader, IR (KBr) υ 1735, 1450, 1370, 1370, 1215, 1085, 1030 cm-1, dataene ovenfor er sammenlignet medmannitolstandard, og resultatene er konsistente.

Forbindelse II: fargeløs nålformet krystall (EtOH), mp140 ~ 142 grader, IR (KBr) υ 3400, 2950, ​​1630, 1460, 1380, 1060 cm-1. Og smeltepunktet til blandingen med - sitosterolstandard reduseres ikke. Tynnsjiktskromatografi Rf-verdier er konsistente, så forbindelse II bestemmes som- Sitosterol.

Forbindelse III: hvitt amorft pulver, - Naftoltest var positiv. mp282-284 grader, IR(KBr) υ3400, 2950, ​​1630, 1465, 1380, 1075, 1020 cm-1. Sammenlignet med standarden direkte ble III bestemt somdaucosterol.

Forbindelse IV: fargeløs nålformet krystall (EtOH), mp147 ~ 150 grader, IR (KBr) υ 340{{1{{105}}3}}, 2800~2400 , 1680, 1630, 1430 cm-1. H-NMR(C5D5N) δ 1,16 (3H, D, j=7Hz, CH3), 2,1 ~ 2,6 (2t, m, H-6), 2,7 (1H, m, H{{26 }}), 3,25 (1H, m, H-9), 3,5 (1H, m, H-5), 4,3 ~ 5,2 (H-7, maskert av glykosylprotonsignal), 5,4 (1H, D, j=7Hz, terminal proton), 5,82 (1H, D, j=4Hz, h-1), 7,85 (1H, s, H{{52 }}) ppm. C-NMR(C5D5N) δ 15,8 (C-10), 29,6 (C-5), 43,2 (C-8), 44,2 (C-6), 47,3 (C -9), 63,0 (C-6',), 71,7 (C-4'), 74,3 (C-2'), 78,1 (C-7, C-3'), 78,5 (C-5'), 95,0(Cl), 100,5(C-1'), 114,7(C-4), 150,4(C{ {98}}), 170,3 (C-11) ppm. Pentaacetylat (IV A) av IV: 70 mg krystall IV ble oppløst i 0,7 ml pyridin og 0,7 ml eddiksyreanhydrid og plassert ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsproduktet ble eluert ved silikagelkolonnekromatografi og CHCl3MeOH (20:1) for å oppnå 40 mg hvitt pentaacetylat. IR(KBr) 3350, 1750, 1675, 1630, 1365 cm-1. H-NMR(CDC13) 5 0,99 (3H, d, j=7Hz, CH3), 1,96 (3H, s, OCH3), 2,02 (9H, s, OCOCH3 * 3), 2,10 (3H, s, OCOCH3), 2,15 ~ 2,50 (2H, m, H-6), 2,7 (1H, m, H-8), 2,95 (1H, m, H-9), 3,75 (1H , m, H-5), 4,2 ~ 5,3 (H-7 maskert av glykosylprotonsignal), 5,35 (1H, D, J=2,5Hz, H-1) , 7,43 (1H, s, H-3) ppm. I henhold til de ovennevnte spektraldataene for IV og IV a, kombinert med litteraturverdiene, ble IV identifisert som8-epibrucin.

Forbindelse V: amorft pulver, silikagel tynnsjiktskromatografi Rf-verdi på {{0}}.3 (CHCl3: MeOH: H2O for 6: 4: l ekspansjon, 1 prosent FeCl3 spraydeteksjon), UV (H2O) λ 222 , 320nm. IR(KBr) υ 3350, 1690, 1625, 1596, 1515 cm-1. H-NMR (D2O) δ 1.07 (3H, d, CH3), 2.86 (2H, t, AR-CH2-CH2 -) , 4,3, 4,37, 5,16 (1H hver, glukose- og rhamnosyl-endegruppeprotoner), 6,6 ~ 7,1 (6H, aryl H), 6,4 og 7,7 (1H hver, d, J=16Hz, koffeylenprotoner) ppm. C-NMR (D2O pluss DSS) δ 133,8, 119.{{80}}, 145.0, 146.5, 119.4, 123.8, 73.0, 37.0 (fenyletanolgruppe ovenfor, 1116.30), 1116,3.0 , 150,7, 147,1, 117,9, 125,3, 170,7, 116,0, 149,6 (kaffeinsyregruppe ovenfor), 104,6, 76,8, 83,6, 71,8, 75,2, 70,3 (mellomliggende glukosegruppe 50, 7, 3, 5, 5, 5, 5, 7, 3, 5, 5, 5, 5, 7 , 19,6 (rhamnosegruppe ovenfor), 105,0, 75,8, 78,3, 72,5, 78,3, 63,1 (terminal glukosegruppe ovenfor) ppm. Sammenlignet med litteraturen identifiseres V somechinacoside.

Forbindelse VI: amorft pulver, silikagel tynnsjiktskromatografi RF 0.35 (utviklings- og deteksjonsforholdene er de samme som ovenfor), UV- og IR-spektra er svært like de for echinacoside, og det er en δ 3,8{ {13}} topp i H-NMR-spektrene, det er en δ 57,1-topp i C-NMR-spekteret, bevist at det er en OCH3-gruppe på den. C-NMR(D2O pluss DSS) δ 134.0, 116.0, 149.5, 146.4, 119.3, 123.9, 73.0, 37.2 (det over er fenyletanolgruppe, δ 149,5 indikerte substitusjonsposisjonen til OCH3), 129,5, 116,0, 150,7, 147,2, 117,9, 125,4, 170,9, 116,5, 149,6, 149,6 ovenfor, 734,6, 134,6, 134,6, , 71,8, 75,3, 70,3 (mellomprodukt glucosyl ovenfor), 104,0, 73,5, 73,5, 74,3, 72,3, 19,7 (rhamnosyl ovenfor), 105,1, 75,9, 78,3, 72,3, glucosyl. ) ppm. Dataene ovenfor er i samsvar med spektraldataene tilCistanoside Aisolert fra samme slekt Cistanche salsa.