Studie om de terapeutiske effektene og mekanismene til monomerer av tradisjonell kinesisk medisin på en rottemodell av sen-debut hypogonadisme

 

Abstrakt

Objektiv
For å evaluere de terapeutiske effektene og mekanismene til tre tradisjonell kinesisk medisin (TCM) monomerer-icariin, verbascoside, ogginsenosid Rg1-påsen-debut hypogonadisme (LOH)i en rottemodell, og å utforske deres potensiale somnaturlige intervensjoner for aldersrelatert testosteronnedganghos middelaldrende menn.

Metoder
En sen-debut hypogonadisme (LOH) modell ble etablert hos eldre mennSprague-Dawley rottervia intraperitoneal injeksjon avcyklofosfamid, simulerer androgenmangel. Tre TCM monomerer-icariin, verbascoside, ogginsenosid Rg1- ble administrert oralt i 60 dager.

Ved slutten av behandlingen ble kroppsvekten og vekten av reproduktive organer (testikler, bitestikler, sædblærer osv.) målt.Histopatologiske endringeri testikkelvev ble vurdert vhahematoxylin-eosin (H&E) farging. Serumnivåer avFSH, LH, ogtestosteronble testet viaELISA. Uttrykket avandrogenreseptor (AR)protein og mRNA ble evaluert vhaWestern blotogkvantitativ sanntids-PCR (qRT-PCR).

 

 

 

Resultater

Ginsenoside Rg1viste den største forbedringen ikroppsvektogvekt av reproduktive organer(P < 0,01).

Icariinbetydelig økt vekten avtestikler, epididymis, ogsædblærer(P < 0,01).

Verbascosidemoderat forbedret seminal vesikkelvekt (P < 0,05).

Alle tre TCM-monomerer effektivtreversert testikkeldegenerasjoni LOH rotter, gjenopprette seminiferøs tubuli struktur og øke antalletspermatogene cellerogmoden sperm.

Alle monomergruppene viste evnen tillavere FSH- og LH-nivåer i serummensøker serum testosteron. Deicariin gruppeviste de mest signifikante endokrine forbedringene (P < 0,01).

Uttrykksnivåer avandrogenreseptor (AR)i både protein og mRNA var signifikant oppregulert i alle behandlede grupper. Effekten avicariinvarmer uttalt enn testosteronpropionat, som indikerer ensterk regulatorisk effekt på AR-signalering.

 

Konklusjon

Denne studien antyder detginsenosid Rg1er mest effektiv for å forbedrekropps- og organvekthos LOH-rotter, mensicariinviser den sterkeste effekten iøke testosteronproduksjonenogforbedre AR-uttrykk. Alle tre monomerer-icariin, verbascoside, ogginsenosid Rg1- demonstrertbeskyttende effekt mot testikkeldegenerasjonogstøtte mannlig reproduktiv endokrin funksjon, som tilbyr lovende naturlige alternativer for forvaltning avaldersrelatert hypogonadisme.

 

Nøkkelord

sen-debut hypogonadisme (LOH); Icariin; Verbascoside; Ginsenosid Rg1; tradisjonell kinesisk medisin; Naturlig testosteron booster; Aldring mannlig syndrom; Androgen reseptor uttrykk; Urteterapi for mannlig helse

Klikk på bildet for å lære mer om TCM-urten for seksuell helse

 

 

Bakgrunn

Sen-debut hypogonadisme (LOH)hos middelaldrende og eldre menn er nært knyttet tilaldersrelatert nedgang i androgennivåer, spesielt testosteron. En befolkningsbasert epidemiologisk studie fra 2021 utført på tvers av seks representative provinser i Kina, som involverer6.296 menn i alderen 40–79, avslørte følgende prevalensrater av LOH:

3.2%hos menn i 50-årene

11.2%i 60-årene

24.0%i 70-årene [1]

LOH er preget avredusert serumtestosteronsammen med en konstellasjon avsymptomer på androgenmangelslik som:

Lav libido

Erektil dysfunksjon

Depresjon og irritabilitet

Kognitiv svikt og hukommelsestap

Disse symptomene kansvekker fysisk og psykisk velvære betydelig, samtlivskvalitet [2–3].

For tiden,testosteronerstatningsterapi (TRT)er den vanlige behandlingen for LOH og kan midlertidig lindre symptomene. Imidlertid bekymringer omkardiovaskulær risiko, prostatahelse, oglangsiktig sikkerhetforbli [4]. Derfor er det økende interesse for å utforskenaturlige, tryggere alternativer, spesielt fraTradisjonell kinesisk medisin (TCM).

Denne studien tar sikte på å evaluereterapeutiske effekter og mekanismerav tre TCM monomerer-icariin, verbascoside, ogginsenosid Rg1- ved å bruke enrottemodell av LOH.

 

1. Materialer og metoder

1.1 Forsøksdyr

Seksti15 måneder gamle Sprague-Dawley (SD) hannrotter(700–800 g) ble hentet i januar 2022 fra Animal Experimental Center of China Three Gorges University. Lisensnummer:

Dyresertifikat: Nei. 42010200007997

Produksjonslisens: SCXK (E) 2022-0012

Rotter ble holdt i et kontrollert miljø (temperatur: 19–23 grader, relativ fuktighet: 55 %–65%), med en naturlig lys-mørke syklus og fri tilgang til mat og vann. Etter1 uke med akklimatisering, begynte eksperimenter.

1.2 Reagenser og instrumenter

Cyklofosfamid(Nanjing Jiancheng)

Icariin(Nanjing Guangrun Biotech)

Ginsenoside Rg1(Shanghai Macklin)

Verbascoside(Shanghai Zhenzhun Biotech)

AR antistoff(Santa Cruz, USA)

-aktin antistoff(Sigma, USA)

H&E-fargesett(Shanghai Yiji Industrial)

ELISA-sett for serum FSH, LH, testosteron(Shanghai Meilian)

qRT-PCR-reagenser (SYBR Green I)(Shanghai Julu Biotech)

Instrumenter: Termisk mikroplateleser, Olympus optisk mikroskop, LI-COR Odyssey bildesystem, ABI qRT-PCR maskin

 

1.3 Dyregruppering og LOH-modellinduksjon

Rotter ble tilfeldig tildelt6 grupper (n=10 per gruppe):

Kontrollgruppe:

Intraperitoneal (ip) injeksjon av 0,9 % saltvann i 5 dager

Oralt saltvann (1 ml/100 g) i 60 dager

Modellgruppe:

ip cyklofosfamid 20 mg/kg/dag i 5 dager

Etterfulgt av oral saltvann i 60 dager

Testosteronpropionat (positiv kontroll):

ip cyklofosfamid (samme som ovenfor)

Subkutan injeksjon av testosteronpropionat 5 mg/kg/dag i 7 dager

Icariin-gruppen:

ip cyklofosfamid (samme)

Oral icariin 200 mg/kg/dag i 60 dager

Verbascoside-gruppen:

ip cyklofosfamid (samme)

Oral verbascoside 200 mg/kg/dag i 60 dager

Ginsenoside Rg1 gruppe:

ip cyklofosfamid (samme)

Oral ginsenosid Rg1 200 mg/kg/dag i 60 dager

Alle behandlinger ble administrert mellom kl8.00–11.30. Det ble utført vurderinger24 timer etter siste dose.

 

1.4 Kroppsvekt og reproduktive organindeks

Etter veiing ble rottene avlivet ved cervikal dislokasjon. Detestikler, epididymis og sædblærerble dissekert og veid.

Entestis fra hver rotteble fikset inn4% paraformaldehydi 72 timer, dehydrert med gradert alkohol, parafininnstøpt, seksjonert (5 μm) og farget medHematoxylin-Eosin (H&E). Morfologiske endringer ble observert under lysmikroskopi.

 

1.5 Serumhormonanalyser

Rotter ble bedøvet med3 % pentobarbitalnatrium, og blod ble samlet inn viahjertepunktur. Serum ble skilt medsentrifugering ved 3000 rpm i 10 minutter ved 4 grader. ELISA-sett ble brukt til å måleFSH, LH og testosteronnivåer i henhold til produsentens protokoller.

 

1.6 AR-proteinuttrykk (Western Blot)

Testikkelvev ble lysert og proteinkonsentrasjon målt. Like mengder protein ble løst ved10 % SDS-SIDE, overført til PVDF-membraner og inkubert med primære antistoffer motARog-aktin (1:1000)over natten. Sekundær antistoffinkubasjon ble fulgt av kjemiluminescensdeteksjon.ImageJble brukt til analyse.

 

1,7 AR mRNA-ekspresjon (qRT-PCR)

Totalt RNA ble ekstrahert fra testikkelvev. cDNA ble syntetisert via revers transkripsjon. qRT-PCR ble utført ved bruk av SYBR Green-metoden.

AR primere:

Forover: 5′-CAGGGACCA CGTTTTACCCA-3′

Revers: 5′-TTCCCTTCCGCAGCTCTTTT-3′

-aktinprimere (intern kontroll):

Forover: 5′-CCACCATGTACCCAGGCATT-3′

Revers: 5′-CGGACTCATCGTACTCCTGC-3′

Termisk sykling: 95 grader i 15 minutter (pre-denaturering), etterfulgt av 40 sykluser på 95 grader i 15 s og 60 grader i 1 min. Data ble analysert ved hjelp av2^-ΔΔCtmetode.

 

1.8 Statistisk analyse

Data ble analysert vhaSPSS 26.0.

Resultater presenteres somgjennomsnitt ± standardavvik (x̄ ± s)

t-testble brukt for to-grupper sammenligninger

Enveis ANOVAble brukt til flere gruppesammenlikninger

P < 0,05ble ansett som statistisk signifikant