En sammenlignende studie av antialdringsegenskaper og mekanismer: Resveratrol og kalorirestriksjon Ⅱ

Effekt av resveratrol og CR på mRNA-uttrykkene til SIRT1, p53 og Foxo3a i vev fra aldrende rotter

Oksidative stressforholdinduserer ofte SIRT1-ekspresjon og aktivitet. SIRT1 modulerer funksjonene til viktige overlevelsesfaktorer inkludert p53 og Foxo3a [9]. For å bestemme effekten av resveratrol og CR på mRNA-nivåene til SIRT1, p53 og Foxo3a i D-Gal-induserte aldrende rotter, ble det utført kvantitative RT-PCR-analyser. Sammenlignet med den tilsvarende negative kontrollgruppen var nivåene av SIRT1- og Foxo3a-mRNA-ekspresjon betydelig redusert, men p53-nivået ble signifikant økt i D-Gal-gruppen (P < 0.01; Figur 9A og 9B). Videre forårsaket samtidig behandling av resveratrol eller CR med D-gal hos rotter en økning i nivåene av SIRT1- og Foxo3a-mRNA-uttrykk, men reduserte p53-nivåer sammenlignet med modellkontrollgruppen (P < 0.05). Sammenlignet med CR-behandling var imidlertid nivået av SIRT1-mRNA-ekspresjon betydelig økt i leverene med høy dose resveratrol pluss D-gal-gruppen, nivået av p53-mRNA-ekspresjonen ble signifikant redusert i lever og hjerner med høy dose resveratrol pluss D- gal gruppe (P < 0,05).

Klikk her for å få Cistanche anti-aldringstilskudd

Effekt av resveratrol og CR på uttrykket av hoved-SIRT1-assosiert protein i hjernevev hos aldrende rotter

FOXO3a og p53, som er regulert av SIRT1, er nedstrømsmolekylene til SIRT1. Samtidig reguleres SIRT1-aktiviteten av oppstrømsmolekylene, for eksempel DBC1 (også kjent som KIAA1967), AROS (også kjent som RPS19BP1) og tumorsuppressoren HuR (også kjent som ELAVL1) [9, 10] . For å bestemme effekten av resveratrol og CR på proteinnivåene til p53, FOXO3a, HuR, AROS og DBC1 i D-Gal-induserte aldrende rotter, ble western blot-analyser utført. Sammenlignet med den tilsvarende negative kontrollgruppen var nivåene av FOXO3a-, AROS- og HuR-proteinuttrykk signifikant redusert, men p53- og DBC1-nivåene ble signifikant økt i D-gal-gruppen (P < 0.01 ; Figur 10). Videre forårsaket samtidig behandling av resveratrol eller CR med D-gal hos rotter en økning i proteinuttrykk av FOXO3a, AROS og HuR, men reduserte p53- og DBC1-nivåer sammenlignet med modellkontrollgruppen (P < 0,05). Sammenlignet med CR-behandling var imidlertid nivået av HuR-proteinekspresjon betydelig økt, men DBC1-nivået ble signifikant redusert i hjerner av en høy dose resveratrol pluss D-gal-gruppen (P < 0,05). Det var ingen forskjeller mellom resveratrol pluss D-gal-gruppen og CR pluss D-gal-gruppen i nivåer av p53, FOXO3a og AROS-proteinekspresjon (P > 0,05).

FOXO3a og p53 uttrykk i hjerne- og levervev

Ekspresjonsstatusen til FOXO3a og p53 ble bestemt i hjerne- og levervev ved immunhistokjemi. Immunhistokjemisk analyse av FOXO3a og p53 viste at FOXO3a-ekspresjonen i hjerne- og levervev var signifikant redusert, og p53-ekspresjonen var signifikant økt i D-Gal-gruppen, sammenlignet med den negative kontrollgruppen (P < 0).{{13} }5, figur 11). Dessuten forårsaket samtidig behandling av resveratrol eller CR med D-gal hos rotter en økning i FOXO3a-ekspresjon, men redusert p53-ekspresjon sammenlignet med modellkontrollgruppen (P < 0.05). Det var imidlertid ingen forskjeller mellom resveratrol pluss D-gal-gruppen og CR pluss D-gal-gruppen i p53- og FOXO3a-uttrykk (P > 0,05).

DISKUSJON

Den grunnleggende kjemiske prosessen som ligger til grunn for aldring ble først avansert avfri radikal teori om aldring[11], ogoksidativt stressantas å være en primær faktor i den normale aldringsprosessen.Frie radikaler initiator AAPHvar vant tilindusere oksidativt stressog etablere en modell av oksidativtstressindusert cellulær senescensi humane IMR-90-celler [12, 13]. Fordelene med denne metoden er at AAPH brytes ned termisk tilgenerere radikaleruten biotransformasjoner eller enzymer, og hastigheten påradikal generasjonkan enkelt kontrolleres ved å justere konsentrasjonen av initiatoren [12]. AAPH ble funnet tilhemme spredning av menneskerIMR- 90-celler på en konsentrasjons- og tidsavhengig måte. Resultatene viste at 2 dagers inkubasjon med AAPH (1 mM) signifikant økte prosentandelen av SA -Gal-positivt forhold, populasjonen av apoptotiske celler, reduserte mRNA-ekspresjonen av SIRT1 og induserte en forstørret og flatere morfologi. Disse indikerte at oksidativt stress forårsaket av AAPH førte IMR-90-celler til alderdom. Basert på denne cellulære senescensmodellen, hemmet 10 μM resveratrolbehandling mer effektivt AAPH-indusert senescens og apoptose enn CR-behandling.

D-gal dyremodell er en internasjonalt anerkjent aldrende dyremodell og har blitt mye brukt innenmedisiner mot aldring. D-gal er et fysiologisk næringsstoff som normalt metaboliseres av D-galaktokinase og galaktose-1-fosfat hos dyr. Imidlertid fører et overtilførsel av D-gal, som ikke metaboliseres av enzymene ovenfor, men akkumuleres i cellene, til oksidativt stress og cellulær skade [14]. Dermed induserer langsiktig administrering av D-gal endringer som ligner naturlig aldring hos dyr, slik som forkortet levetid, kognitiv dysfunksjon, nevrodegenerasjon, oksidativt stress, redusert immunrespons og avansert dannelse av glykasjonssluttprodukt (AGE) [15]. Denne studien indikerte vellykket etablering av den mimetiske aldringsmodellen, bevist av bemerkelsesverdig lærings- og hukommelsessvikt, MDA-produksjon, lipofuscinakkumulering, nedgang i T-AOC og SOD, og ​​nedregulering av telomeraseaktivitet i hjernen. I mellomtiden beskyttet resveratrol- eller CR-behandlinger de D-gal-induserte rottene mot oksidativt stress ved å øke aktiviteten til antioksidantenzymer, redusere nivåene av lipidperoksidasjonsprodukter og holde balansen mellom oksidative og antioksidative systemer. I atferds- og telomeraseaktivitetstester kan behandlingen av resveratrol eller CR reversere D-gal-indusert kognitiv svekkelse og telomeraseaktivitet. Dessuten viste aldrende modellrotter behandlet med høye doser resveratrol relativt mer signifikant effekt på atferden enn de som ble behandlet med CR.

Figur 11: Immunhistokjemisk analyse av p53 (A, B) og FOXO3a (C, D) uttrykk i lever (A, C) og hjernevev (B, D) hos aldrende rotter. Forstørrelsen var 20×. NG, negativ kontrollgruppe; MG, modellkontrollgruppe; RESL, lav dose av resveratrol gruppe; RESH, høy dose av resveratrol gruppe; CR, kalorirestriksjonsgruppe

Studier har vist at CR, en reduksjon på 10–40 prosent i inntaket av et næringsrikt kosthold, kanforsinke aldring og øke levetiden, derfor ble et vanlig brukt nivå av CR (40 prosent reduksjon i matinntak) brukt i CR-grupperotter i denne studien. Likevel avslørte noen undersøkelser at ingen gunstig effekt av CR på levetid hos naturlig eldre primater [16]. Tilsvarende, selv om resveratrolbehandling ble vist å indusere CR-lignende effekter påenergimetabolismeog metabolsk profil hos overvektige mennesker [17], forbedret det ikke metabolsk funksjon hos ikke-overvektige kvinner med normal glukosetoleranse [18]. Årsaken til forskjellene mellom disse studiene er ikke klar, men det kan være at CR og resveratrol jobber for å gjenopprette homeostase hos metabolsk kompromitterte individer, og mindre hos friske individer, en mulighet forenlig med kjente funksjoner til SIRT1 i dyrestudier [19]. Derfor ble D-gal-induserte aldrende rottemodeller brukt for å sammenligne antialdringsaktivitetene til resveratrol eller CR , i stedet for den naturlig aldrende rottemodellen.

SIRT1, en (NAD pluss)-avhengig deacetylase, har fått mye oppmerksomhet på grunn av dens mange roller i levetidsforlengelse, stressresistens og apoptosereduksjon [20, 21]. Akkumulerende studier har sterkt antydet at SIRT1 var et sentralt mål for resveratrol og CR [22]. Det er et stort antall nedstrøms molekyler av SIRT1, inkludert p53, Foxo1, Foxo3, Foxo4 og E2F1, som er regulert av SIRT1. Samtidig reguleres SIRT1-aktivitet av oppstrømsmolekylene, for eksempel p53, HIC1, E2F1, DBC1, HuR og AROS. Akutt tilbaketrekking av næringsstoffer aktiverer et transkripsjonsprogram ved SIRT1-promotoren som styres av transkripsjonsfaktorene Foxo3a og p53. Ettersom p53 undertrykker SIRT1-genuttrykk, aktiverer fjerning av Foxo3a SIRT1-transkripsjon [23]. DBC1 og AROS ble nylig beskrevet som direkte negative og positive regulatorer av henholdsvis SIRT1-aktivitet, HuR viser effekten av å redusere nivåer av SIRT1-ekspresjon i gamle senescentceller [9, 10].

CRforsinker aldring og forlenger median og maksimal levetidi en rekke arter, inkludert rotter, mus, fisk, fluer, ormer og gjær. Imidlertid har slike strenge kostholdsprogrammer hos frittlevende personer reist etiske og metodiske spørsmål [24]. For tiden kan det være viktigere å øke helsetiden enn bare å forlenge levetiden. Nyere undersøkelser tyder på at resveratrol er en av de mest potente pådriverne av SIR2-aktivitet blant alle plantepolyfenoler [25], og det påvirker levetiden gjennom lignende mekanismer som sett i kalorirestriksjon. Disse resultatene viste at CR og resveratrol hadde lignende aktiviteter for å gjenopprette SIRT1 mRNA-ekspresjonsnivåer, øke proteinuttrykkene til FOXO3a, AROS og HuR og redusere p53- og DBC1-nivåene. I mellomtiden indikerer flere linjer med overbevisende bevis de gunstige effektene av resveratrol på de nevrologiske, hepatiske og kardiovaskulære systemene.

MATERIALER OG METODER

Cellekultur, stress og behandlinger

Den humane diploide fibroblaststammen IMR-90 ble hentet fra ATCC. Celler ble dyrket i minimum essensielt medium (MEM) (Gibco, Storbritannia) supplert med 10 prosent føtalt bovint serum (FBS) (Gibco) ved 37 grader i 5 prosent CO2. Etter at sammenløpet var nådd, ble cellene sådd i 6-brønnkulturplater. En dag senere ble cellene behandlet i 48 timer med 1 mM 2,2′-azobis (2-amidinopropan) dihydroklorid (AAPH) (Sigma, USA) fortynnet i MEM pluss 10 prosent FBS. En 48 timers inkubering med frie radikalinitiator AAPH etablerer en modell av oksidativt stress-indusert cellulær senescens [12, 13]. Kontrollceller ble inkubert i kulturmedium alene. Etter AAPH-behandling ble IMR-90 vasket med kald fosfatbuffer saltvann (PBS) pH 7,4 og inkubert med ferskt kulturmedium eller kulturmedium som inneholdt resveratrol (resveratrol-gruppe) eller MEM supplert med 3 prosent FBS (CR-gruppe) for en ytterligere 48 timer før høsting.

SA -gal farging aktivitet

Forekomsten av biomarkører for senescens ble kontrollert (reduksjon av proliferasjonspotensialet og økning i SA -gal-farging) [26] fra dagen etter behandling. Deretter ble cellene farget etter produsentens instruksjoner av SA -gal Staining Kit (CST, USA). Etter farging ble minst 300 celler i flere felt undersøkt og SA -gal positive celler ble talt. Disse forsøkene ble gjentatt tre ganger, og resultatene ble presentert som middelverdier med standardavvik (SD). For å unngå uspesifikk farging muligens på grunn av cellekonfluens, ble SA -gal histokjemisk farging utført med subkonfluente celler.

Skanneelektronmikroskopianalyse

Celler ble dyrket på dekkglass i 6-brønnkulturplater som beskrevet ovenfor. Etter at resveratrol og CR var behandlet, ble dekkglass fjernet fra platene, deretter fiksert cellene i 2,5 prosent fosfatbufret glutaraldehyd og etterfiksert i 1 prosent bufret osmiumtetroksid. Faste prøver ble nedsenket i t-butylalkohol etter dehydrering gjennom en gradert serie etanol. Prøvene ble frysetørket fra t-butylalkohol, deretter evaporativt belagt med gull ved hjelp av auto fine coater (JFC-1600, JEOC, Japan), og undersøkt med et skanningselektronmikroskop (JEOL, JSM{{11} }LV, Japan).

Apoptotisk analyse

Etter resveratrol- eller CR-inkubering ble alle cellene høstet med trypsin og vasket to ganger med PBS, etterfulgt av resuspendert i 400 μL Annexin V-bindingsbuffer. Deretter ble cellene farget etter produsentens instruksjoner av Annexin V-FITC celleapoptosedeteksjonssett (BestBio, Kina). Et FACSCalibur flowcytometer (Becton-Dickinson, San Jose, CA) ble brukt for å påvise fluorescens, og prosentandelen av apoptotiske celler ble beregnet av det interne programvaresystemet til FACSCalibur. Omtrent 104 celler ble analysert for hvert spor.

Dyreprosedyrer

Hannalbino Wistar-rotter, som veier omtrent 200 ± 10 g, ble hentet fra Experimental Animal Center ved Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology (SCXK 2010-0009). Dyrene ble akklimatisert i 2 uker før de ble doseret i Experimental Animal Center ved Hubei University of Chinese Medicine, i løpet av denne tiden hadde de fri tilgang til mat og vann ad libitum. Etter akklimatisering ble 50 rotter valgt og delt inn i fem grupper på ti hver. Dyrene ble vedlikeholdt i henhold til nasjonale retningslinjer og protokoller godkjent av Institutional Animal Ethical Committee (IAEC).

Rotter fra gruppe I (negativ kontrollgruppe) mottok bæreren alene (1 ml/kg kroppsvekt på 0,9 prosent av saltvann) i 6 uker. Gruppe II (modellkontrollgruppe) rotter mottok D-gal (200 mg/kg kroppsvekt, Sigma Chemical, St. Louis, MO) i 6 uker. Gruppe III (lav dose resveratrol gruppe) rotter fikk D-gal og resveratrol (50 mg/kg kroppsvekt) oppløst i 5 prosent dimetylsulfoksid (DMSO) i 6 uker. Gruppe IV (høy dose av resveratrol gruppe) rotter fikk D-gal og resveratrol (100 mg/kg kroppsvekt). Gruppe V (CR-gruppe) rotter fikk D-gal og CR (matet en diett som var 40 prosent lavere i kalorier enn de ad libitum-matede rottene [27]) i 6 uker. D-gal ble gitt intraperitonealt, mens resveratrol ble gitt oralt under hele eksperimentet. Rottene ble avlivet på den siste behandlingsdagen, deretter ble blod, sera og organer umiddelbart samlet for bioassay eller lagret ved -80 grader for senere bruk.

Atferdstester

Morris vannlabyrint-testen ble designet for å vurdere rottenes kapasitet til romlig læring og hukommelse etter 6 uker etter skade [28]. Morris vannlabyrint-testen besto av 4-dagslæring og hukommelsestrening og en sondeprøve på dag 5. Dyrene ble trent i et sirkulært basseng (155 cm i diameter) med visuelle signaler. En rømningsplattform (9,0 cm i diameter) ble senket 1,0 cm under overflaten av bassengvannet, som ble holdt på 25 ± 2 grader. Plasseringen av plattformen forble i midten av den nordvestlige kvadranten gjennom hele den 4-dagers treningsperioden. På hver dag ble rottene trent for en morgenblokk og en ettermiddagsblokk. Rotten svømte fritt til den fant plattformen innen 120 s. Hvis den mislyktes, ble den plassert på plattformen i 10 s. Rømningslatensen (finne den nedsenkede rømningsplattformen) og svømmehastigheten ble registrert. Probeforsøket ble gjort ved å fjerne plattformen og la hver rotte svømme fritt i 120 s inne i bassenget. Antall plattformoverganger i den trente kvadranten (der plattformen ble fjernet) ble registrert med et datastyrt videosystem. Den synlige plattformversjonen av vannlabyrint ble ikke utført etter at det ble observert en signifikant forskjell i svømmehastighet mellom rotter behandlet med D-gal og kjøretøy.

Påvisning av oksidativt stress-assosierte biologiske indikatorer

Nivåene av MDA, SOD og T-AOC i blod og vev ble bestemt fotometrisk i samsvar med produsentens protokoll ved å bruke kommersielt tilgjengelige enzymatiske analysesett (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing City, PR Kina). Alle eksperimentene beskrevet i denne delen ble utført i tre eksemplarer for å oppnå gjennomsnitt og SD.

Lipofuscinnivået ble bestemt ved Sohal-metoden [29]. Kort fortalt veide vi 200 mg cerebral cortex, tilsatte 2 ml kloroform-metanol (2:1) ekstrakt, homogeniserte og filtrerte, vasket deretter resten med ekstraktet, kombinerte filtratene, tilsatte ekstraktet til 5 ml og målte fluorescensintensiteten på et fluorescensspektrometer. Emisjonsbølgelengden var 435 nm og eksitasjonsbølgelengden var 365 nm. Spektrofluorometeret ble standardisert for å gi en avbøyning på 50 ved de ovennevnte bølgelengdene med en 1 ug/ml løsning av kininbisulfat i 0,1 M H2S04. Resultatene ble uttrykt som relative fluorescerende enheter/ml kloroform/g våtvevsvekt.

Påvisning av TE-aktivitet

For telomeraseekstraksjon ble ca. 3 0 mg vev vasket to ganger i iskald PBS, og til slutt homogenisert i ca. 150 ml PBS. TE-aktivitet ble målt ved å bruke et TE ELISA-sett i henhold til produsentens instruksjoner (Nanjing Sen Beijia Biological Technology Co., Ltd., Nanjing, Kina). Sensitivitetsgrensene for analysene var 0,8 IE/L for TE.

RT-PCR-analyse

mRNA-ekspresjonsnivåene til SIRT1, Foxo3 og p53 i lever- og hjernevev ble analysert ved bruk av RT PCR-analyse. Det totale RNA ble ekstrahert ved bruk av Trizol, og deres mengde og renhet ble vurdert med et ultramikrospektrofotometer (Thermo Fisher Scientific, USA) basert på absorbansmålingen ved 260 og 280 nm. Etter kvantifisering ble cDNA syntetisert ved å bruke et FastQuant RT-sett (Tiangen Biotech, Beijing, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner. Nivåene av SIRT1, Foxo3, p53 mRNA-ekspresjon ble målt ved RT-PCR ved bruk av TIANGEN SuperReal PreMix Plus (Tiangen Biotech, Beijing, Kina) med spesifikke primere (tabell 2). Kvantitativ sanntids-PCR ble utført med et LightCycler 480 graders PCR-system (Roche, Basel, Sveits) ved bruk av 20 μL som det totale volumet av hver reaksjon. PCR-amplifisering ble initiert av 15 minutter med denaturering ved 95 grader, og deretter fulgt av 40 sykluser på 95 grader i 10 s, 59–63 grader (annealingstemperatur) i 20 s og 72 grader i 30 s, og en siste inkubasjon ved 72 grad i 5 min. Det oppnådde syklusterskelnummeret for hvert gen (Ct-verdi) ble normalisert til en fold av relative endringer i henhold til ligningen til 2-∆∆CT-metoden [30].

Tabell 2: Primerliste

Western blot-analyse

Proteinekspresjonsnivåene til p53, FOXO3a, HuR, RPS19BP1 og DBC1 i hjernevev ble analysert ved bruk av western blotting-analyse. Det totale proteinet i hjernevev ble ekstrahert ved bruk av RIPA Lysis Buffer (Beyotime, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner. Proteinkonsentrasjoner ble bestemt ved å bruke BCA Protein Assay Kit (Beyotime, Kina). 5 mg proteiner ble separert ved bruk av 12 prosent SDS-polyakrylamidgeler og overført til en PVDF-membran (0.45 μm, Millipore, USA). Blottene ble blokkert med 5 prosent fettfri melk i TBS, og deretter inkubert over natten ved 4 grader med passende fortynning av primære antistoffer: anti-p53 (SC- 6243, Santa Cruz Biotechnology), anti-FOXO3a (#12829, celle Signalteknologi), anti-HuR (#12582, Cell Signaling Technology), anti-AROS (Ab201091, abcam), anti-DBC1 (#5857, Cell Signaling Technology), anti- - handling (AC004, ABclonal Technology) . Etter å ha vasket membranene for å fjerne overflødig primære antistoffer, ble membranene inkubert i 1 time ved romtemperatur med de passende sekundære antistoffene i en fortynning på 1:2000-1:5000 (AC004 eller AS003, ABclonal Technology). Membranene ble vasket 3 ganger og deretter visualisert ved bruk av Pierce ECL Western Blotting Substrate (Thermo Scientific). -handling ble brukt som internkontroll.

Immunhistokjemi

Vevsprøvene ble fiksert i 10 prosent nøytralbufret formalin innen 1 time etter kirurgisk fjerning og parafininnstøpt ved bruk av standardprosedyrer. Deretter ble de fikserte parafininnstøpte prøvene kuttet i 5-μm tykke seksjoner, som ble avparafinisert i xylen, rehydrert i etanol og mikrobølgebehandlet for antigenhenting. Det passende fortynnede primære antistoffet, anti-p53 (SC-6243, Santa Cruz Biotechnology) og anti-FOXO3a (#12829, Cell Signaling Technology), ble inkubert i 60 minutter ved romtemperatur i et fuktighetskammer. Objektglass ble deretter skylt i PBS og deretter inkubert med det sekundære antistoffet mot anti-kanin-antistoff og visualisering av HRP (konsentrasjon 1:300, #074-1506, KPL). Deretter ble objektglassene vasket og snittene ble utviklet i enzym-substratet diaminobenzidin (DAB, Sigma) løsning. Bilder av immunhistokjemisk fargede seksjoner ble tatt med Olympus digitale mikroskop (IX-73P1F, Olympus, Japan).

Statistisk analyse

Resultatene ble uttrykt som gjennomsnitt ± SD for minst tre uavhengige eksperimenter og ble analysert med SPSS 18.0-programvaren. Gruppeforskjeller i rømningslatens og svømmehastighet i treningsoppgaven Morris vannlabyrint ble analysert ved å bruke toveis variansanalyse (ANOVA) med gjentatte mål, faktorene var behandling og treningsdag. De andre dataene ble analysert med enveis ANOVA etterfulgt av en post-hoc Tukey-test. Verdien av P mindre enn 0.05 ble ansett som signifikant.

KONKLUSJONER

Resveratrol og CR viste lignende antialdringsaktiviteter både in vitro og in vivo, bevist av deres evne til å hemme AAPH-indusert senescens og apoptose, og gjenopprette den aldersrelaterte kognitive svekkelsen forårsaket av D-gal-administrasjon. Deres antialdringsmekanismer inkluderte oppregulering av TE-aktivitet, redusert oksidativ skade og regulering av SIRT1-veien. Totalt sett viste 10 μM resveratrol in vitro og høy dose resveratrol in vivo relativt sterkere aktiviteter av antialdring og stimulerende SIRT1-nivåer. Disse resultatene impliserte potensialet til resveratrol som en CR-mimetikk.

Forkortelser

AAPH, 2,2'-azobis (2-amidinopropan) dihydroklorid; AMPK, adenosinmonofosfataktivert proteinkinase; ANOVA, variansanalyse; AROS, aktiv regulator av SIRT1; CR, kalorirestriksjon; DBC1, slettet i brystkreft 1; D-gal, D-galaktose; FBS, føtalt bovint serum; Foxo3a, gaffelboks 3a; HuR, Hu-antigen R; MEM, minimum essensielt medium; PBS, fosfatbuffer saltvann; PGC-1, peroksisomproliferatoraktivert reseptor G-koaktivator-1 ; RES, resveratrol; SA -gal, senescensassosiert -galaktosidase; SD, standardavvik; SIRT1, lyddempende informasjonsregulator; TE, telomerase.

Forfatterbidrag

Utforming og design av forskningen: Gang Chen; innhenting, analyse og tolkning av data: Juan Li, Xia Chun Zhang, Yi-Mei Liu; innhenting av finansiering og kritisk revisjon av manuskriptet for intellektuelt innhold: Gang Chen, Ke-Li Chen; skriving av manuskriptet: Juan Li. Alle forfattere har lest og godkjent utgivelsen av dette manuskriptet. TAKK OG FINANSIERING

Dette arbeidet ble finansiert av China Postdoctoral Science Foundation (2016M601237), Natural Science Foundation-prosjektet (81373704, 30873292).

INTERESSEKONFLIKTER

Ingen interessekonflikt fra alle deltakende forfattere.

REFERANSER

1. Ramis MR, Esteban S, Miralles A, Tan DX, Reiter RJ. Kalkorisk restriksjon, resveratrol og melatonin: Rollen til SIRT1 og implikasjoner for aldring og relaterte sykdommer. Mek Aging Dev. 2015; 146–148:28–41.

2. Colman RJ, Beasley TM, Kemnitz JW, Johnson SC, Weindruch R, Anderson RM. Kalorirestriksjon reduserer aldersrelatert dødelighet og dødelighet av alle årsaker hos rhesus-aper. Nat Commun. 2014; 5:3557.

3. Sohal RS, Weindruch R. Oksidativt stress, kaloribegrensning og aldring. Vitenskap. 1996; 273:59–63.

4. Testa G, Biasi F, Poli G, Chiarpotto E. Kalorirestriksjon og kostholdsbegrensningsmimetikk: en strategi for å forbedre sunn aldring og lang levetid. Curr Pharm Des. 2014; 20:2950–77.

5. Lane MA, Roth GS, Ingram DK. Kalorirestriksjonsmimetikk: en ny tilnærming for biogerontologi. Metoder Mol Biol. 2007; 371:143–9.

6. Baur JA, Pearson KJ, Price NL, Jamieson HA, Lerin C, Kalra A, Prabhu VV, Allard JS, Lopez-Lluch G, Lewis K, Pistell PJ, Poosala S, Becker KG, et al. Resveratrol forbedrer helsen og overlevelsen til mus på en kaloririk diett. Natur. 2006; 444:337–42.

7. Lagouge M, Argmann C, Gerhart-Hines Z, Meziane H, Lerin C, Daussin F, Messadeq N, Milne J, Lambert P, Elliott P, Geny B, Laakso M, Puigserver P, et al. Resveratrol forbedrer mitokondriell funksjon og beskytter mot metabolsk sykdom ved å aktivere SIRT1 og PGC-1alfa. Celle. 2006; 127:1109–22.

8. Howitz KT, Bitterman KJ, Cohen HY, Lamming DW, Lavu S, Wood JG, Zipkin RE, Chung P, Kisielewski A, Zhang LL, Scherer B, Sinclair DA. Små molekylaktivatorer av sirtuiner forlenger Saccharomyces cerevisiae levetid. Natur. 2003; 425:191–6.

9. Kwon HS, Ott M. Opp- og nedturene til SIRT1. Trender Biochem Sci. 2008; 33:517–25.

10. Brooks CL, Gu W. Hvordan påvirker SIRT1 metabolisme, senescens og kreft? Nat Rev Kreft. 2009; 9:123–8.

11. Harman D. Fri radikal teori om aldring. Mutat Re. 1992; 275:257–66.

12. Mayo JC, Tan DX, Sainz RM, Lopez-Burillo S, Reiter RJ. Oksidativ skade på katalase indusert av peroksylradikaler: funksjonell beskyttelse av melatonin og andre antioksidanter. Free Radic Res. 2003; 37:543–53.

13. Hubackova S, Krejcikova K, Bartek J, Hodny Z. IL1- og TGF-Nox4-signalering, oksidativt stress og DNA-skaderespons er delte trekk ved replikativ, onkogenindusert og medikamentindusert parakrin 'Bystander senescens '. Aldring (Albany NY). 2012; 4:932–51. https:// doi.org/10.18632/aging.100520.

14. Cui X, Zuo P, Zhang Q, Li X, Hu Y, Long J, Packer L, Liu J. Kronisk systemisk D-galaktoseeksponering induserer hukommelsestap, nevrodegenerasjon og oksidativ skade hos mus: Beskyttende effekter av R{{ 2}}liponsyre. J Neurosci Res. 2006; 84:647–54.

Spør om mer:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: pluss 86 15292862950