Et heterologt AZD1222-priming- og BNT162b2-forsterkende regime fremkaller mer effektivt nøytraliserende antistoffer, men ikke minne T-celler, enn det homologe BNT162b2-regimet
Aug 07, 2023
abstrakt
Bakgrunn: Sammenlignende analyser av SARS-CoV-2-spesifikke immunresponser fremkalt av ulike prime-boost-regimer er nødvendig for å etablere effektive regimer for kontroll av COVID-19. Metode: I denne prospektive observasjonskohortstudien, piggspesifikk immunoglobulin G (IgG) og nøytraliserende antistoffer (nAbs) sammen med piggspesifikke T-celleresponser i alderstilpassede grupper av homolog BNT162b2/BNT162b2 eller AZD1222/AZD1222/AZD1222/AZD1222 vaksinasjon, heterolog. BNT162b2-vaksinasjon og tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjon/vaksinasjon ble evaluert. Resultater: Maksimal immunrespons ble oppnådd etter den andre vaksinedosen i de naive vaksinerte gruppene og etter den første dosen i den tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppen. Topptitre for anti-spike IgG og nAb var signifikant høyere i gruppene med AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon og tidligere infeksjoner/vaksinasjoner enn i BNT162b2/BNT162b2- eller AZD1222/AZD1222-gruppene. Imidlertid var frekvensen av interferon-c-produserende CD4 pluss T-celler høyest i BNT162b2/BNT162b2 vaksinasjonsgruppen. Lignende resultater ble observert i analysen av polyfunksjonelle T-celler. Når nAb og CD4 pluss T-celleresponser mot Delta-varianten ble analysert, viste den tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppen høyere responser enn gruppene med andre homologe eller heterologe vaksinasjonsregimer. Konklusjon: nAbs fremkalles effektivt ved heterolog AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon, så vel som tidligere infeksjon/vaksinasjon, mens piggspesifikke CD4 pluss T-celleresponser fremkalles effektivt ved homolog BNT162b2-vaksinasjon. Variantgjenkjennende immunitet genereres mer effektivt ved tidligere infeksjon/-vaksinasjon enn de andre homologe eller heterologe vaksinasjonsregimene.
cistanche tubulosa-forbedre immunsystemet
1. Introduksjon
Alvorlig akutt respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) har spredd seg globalt siden det oppsto i desember 2019, og utviklingen av effektive vaksiner mot koronavirussykdom 2019 (COVID-19) har blitt fremskyndet [1 ]. Suksessen med forsøket ble sett relativt raskt, og flere vaksiner som bruker spike (S)-protein som et vaksineantigen demonstrerte sikkerhet og effektivitet i å forhindre symptomatisk COVID-19. Nærmere bestemt ble mRNA-basert vaksine BNT162b2 (Comirnaty, Pfifizer-BioNTech) og adenovirusvektorbasert vaksine AZD1222 (Vaxzevria, AstraZeneca) opprinnelig godkjent og administrert bredt som et to-dose prime-boost-regime. To doser BNT162b2 hadde 95 prosent (95 prosent konfidensintervall [KI], 90–98 prosent) effekt mot symptomatisk COVID-19 [2], og to doser AZD1222 hadde 70 prosent (95 prosent KI, 55–81) prosent ) effekt [3]. Interessant nok fikk heterologe prime-boost-regimer med lisensierte COVID-19-vaksiner betydelig interesse og ble deretter startet i flere land til tross for utilstrekkelige data angående immunogenisitet og sikkerhet. BNT162b2 gitt som en boostdose hos individer primevaksinert med AZD1222 induserte robuste S-spesifikke immunglobulin G (IgG) antistoff (Ab) titere, nøytraliserende antistoff (nAb) responser og interferon-c pluss (IFN-c pluss) T-celler [4 ,5]. Imidlertid har få studier evaluert effekten av heterolog AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon sammenlignet med homolog BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjon [6–8], og disse studiene manglet omfattende evaluering av S-spesifikke T-celleresponser. Følgelig forblir det uklart om heterolog AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon resulterer i potente kryssvariante nAb- eller T-celleresponser. Et annet eksempel på heterolog priming-boosting kan sees hos individer som hadde blitt infisert med SARS-CoV-2 og senere vaksinert mot viruset. Flere studier antydet at spesifikke bindende Ab- og nAb-nivåer påvises i høye nivåer hos individer med tidligere infeksjon og vaksinasjon, selv om det ikke var noen sammenlignende analyser [9,10]. Helsepersonell med tidligere SARS-CoV-2-infeksjon har høyere Ab-titre som respons på en enkeltdose mRNA-vaksine enn de som ikke tidligere var infisert [11]. Videre viser individer med tidligere infeksjon forbedrede S-spesifikke T-celleresponser og Ab-utskillende minne Bcell-responser etter primedosen uten boostdosen [12]. I denne studien undersøkte vi omfattende den humorale og cellulære immunogenisiteten til homologe og heterologe prime-boost-regimer i en prospektiv observasjonskohort med side-ved-side sammenligninger av S-spesifikk bindende Ab, nAb og spesifikke CD4 pluss T-celleresponser . Vi evaluerte også de immunologiske resultatene hos deltakere som hadde blitt infisert med villtype SARS-CoV-2 og mottatt COVID-19-vaksiner for å avgjøre om tidligere infeksjon og vaksinasjon effektivt fremkaller immunresponser mot Delta-varianten.
cistanche fordeler for menn styrker immunforsvaret
2. Metoder
2.1. Studere design
En potensiell multisenterkohort ble etablert i mars 2021 for å studere immunresponser på covid-19-vaksinasjon. Deltakerne i denne kohorten ble frivillig rekruttert blant helsepersonell og opprinnelig planlagt å motta to doser BNT162b2 med 3-ukers intervall eller AZD1222 med 12-ukers intervall. Imidlertid mottok en del av individer som var førstegangsvaksinert med AZD1222 boosterdosen av BNT162b2 mellom mai og juni 2021 og ble inkludert i AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen. Blant deltakerne i kohorten ble de som hadde tidligere villtype SARSCoV-2-infeksjon og mottok BNT162b2 eller AZD1222 inkludert som tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppe. Alle vaksinemottakere som ble analysert i denne studien var alderstilpasset blant gruppene. Perifere blodprøver ble samlet inn fra alle deltakerne i kohorten på hvert tidspunkt (T): før og 3 uker etter 1. vaksinedose (henholdsvis T1 og T2), 5 uker etter 1. BNT162b2-dose eller 11 uker etter 1. AZD1222-dose (T3), og 14 uker etter 1. vaksinedose (T4). En skjematisk representasjon av studieprotokollen er gitt i fig. 1. For sammenligning ble rekonvalesentprøver hentet fra uvaksinerte pasienter infisert med SARSCoV-2 Delta-varianten bekreftet ved sanntids revers transkripsjonspolymerasekjedereaksjon ved bruk av Seegene Allplex { {38}}nCoV-analysesett (Seegene, Korea) og Illumina BTSeq SARS-CoV-2 helgenomsekvenseringssett (Celemics Inc, Korea) på en MiSeq-sekvenser (150-bp paret-ende-modus; Illumina, San Diego, CA, USA). Basesekvensen oppnådd gjennom BTseq ble sammenlignet med NCBI-referansesekvensen NC_045512.2 ved å bruke IGV 2.10-programvaren for å bekrefte Delta-varianten. Studien ble godkjent av de institusjonelle vurderingskomiteene til hvert deltakende institutt og utført i henhold til prinsippene i Helsinki-erklæringen. Alle deltakere ga skriftlig informert samtykke før påmelding.
2.2. Studiedeltakere
Denne kohorten besto av 22 deltakere som mottok homolog BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjon (gjennomsnittsalder, 38,0 år; 31,8 prosent menn), 20 deltakere som fikk homolog AZD1222/AZD1222-vaksinasjon (gjennomsnittsalder, 39,7 år; 23,8 prosent menn) , og 9 deltakere som fikk heterolog AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon (gjennomsnittsalder, 38,2 år; 33,3 prosent menn). Av de 11 deltakerne med tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjon (gjennomsnittsalder, 38,5 år; 27,3 prosent menn), ble 2 og 9 vaksinert med henholdsvis BNT162b2/BNT162b2 og AZD1222/AZD1222. Demografien til de forskjellige vaksinerte gruppene er gitt i tilleggstabell 2. Alle deltakere med tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjon opplevde asymptomatisk eller mild COVID-19, og 3 av dem hadde lungebetennelse. Mediantiden fra bekreftelse av COVID-19 til første vaksinasjon var 121,5 (interkvartilområde [IQR], 102,3–252,5) dager. Demografien til deltakerne med tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjon og vaksinasjon er gitt i tilleggstabell 1. Rekonvalesensprøver ble tatt fra 17 pasienter (gjennomsnittsalder, 53 år; 52,9 prosent menn) infisert med SARS -CoV-2 Delta-variant og innlagt på sykehus for moderat til kritisk COVID-19 (moderat, 17,6 prosent; alvorlig, 35,3 prosent; kritisk syk, 47,1 prosent). Mediantiden fra utbruddet av covid-relaterte-19-symptomer til prøvetaking var 24 (IQR, 22–32) dager. Demografien til SARS-CoV-2 Delta-rekonvalesentdeltakerne er gitt i tilleggstabell 2 og tabell 3.
2.3. Bindende antistoffer
SARS-CoV-2 S-spesifikke bindende Abs ble analysert ved bruk av en kommersiell immunanalyse. Elecsys anti-S-proteinanalysen (Roche Diagnostics, Tyskland) er en elektrokjemiluminescens-immunanalyse som brukes til å oppdage SARS-CoV-2 S-spesifikke antistoffer på Cobas e411-analysatoren (Roche Diagnostics, Tyskland), med et måleområde fra { {8}}.4 U/ml til 250 U/ml (opptil 2500 U/ml med innebygd 1:10 fortynning, og opptil 12 500 U/ml med innebygd 1:50 fortynning). Det rekombinante reseptorbindende domenet til S-proteinet ble brukt med et dobbelt antigen-sandwichprinsipp. Antigenene i reagenset fanger hovedsakelig anti-SARSCoV-2 IgG. Elecsys anti-nukleokapsidproteinanalysen (Roche Diagnostics, Tyskland) ble brukt til å oppdage tidligere SARS-CoV-2-infeksjoner, med en cut-off-indeks på 1,0.
cistanche supplement fordeler-øke immunitet
2.4. Plakk-reduksjon nøytraliseringsanalyse
Plakkreduksjonsnøytraliseringsanalyser for villtype SARS-CoV- 2-virus (BetaCoV/Korea/KCDC03/2020) og Delta-variantstammen YS117 (GenBank-aksessnummer MZ798798 og GISAID-aksessnummer EPI{ {8}}ISL_3411836) ble utført ved bruk av plasmaprøver. Viruset ble dyrket på Vero E6-celler i et biosikkerhetsnivå 3-laboratorium ved Avison Biomedical Research Center i Seoul, Korea. Inaktiverte plasmaprøver (135 lL) av inaktiverte plasmaprøver ble 2- ganger seriefortynnet (1:40 til 1:1280) og tilsatt til et likt volum på 100 ganger 50 prosent vevskulturinfeksiøs dose (TCID50) av virus. Isolatene som inneholdt 100 ganger TCID50 ble inkubert i 96-brønnplater i 60 minutter ved 37 C. Virus-plasmablandinger ble inkubert i 60 minutter ved 37 C i en CO2-inkubator. Virus-plasma-blandingene ble deretter tilsatt til Vero E6-celler sådd i en 24-brønnplate med 1x105 celler/brønn og inkubert i 1 time ved 37 C. Overlagsmedium bestående av 2 prosent føtalt bovint serum (FBS) i DMEM og 1 prosent agar ble tilsatt til E6-cellene og inkubert i 3 dager i 37 C i en CO2-inkubator. Etter at en plakk var dannet, ble 10 prosent formaldehydløsning og 0,33 prosent nøytralrød i fosfatbufret saltvann (PBS) brukt for å fikse og farge cellekulturlaget. Nøytraliserende fortynning av hver prøve ble bestemt ved å identifisere brønnen med høyest plasmafortynning uten en observerbar cytopatisk effekt. De 50 prosent nøytraliseringsdosene (ND50) ble uttrykt som den resiproke fortynningen av plasma, noe som resulterte i en 50 prosent reduksjon i plakkantall sammenlignet med den positive viruskontrollen. Spearman–Kärber-metoden ble brukt til å beregne ND50-titrene. Sammenlignet med WHOs internasjonale standardsera (NIBSC 20–136; nAb-titer: 1000 IU/mL), ble nAb-titere konvertert til internasjonale enheter per milliliter (IU/mL).
Fig. 1. Skjematisk fremstilling av vaksinemottakerkohortene. Studieopplegg for påvisning av SARS-CoV-2 piggspesifikke bindende antistoffer, nøytraliserende antistoffer og T-celleresponser i perifere blodprøver fra individer vaksinert for COVID-19. Studien inkluderer BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) og tidligere villtype SARS-CoV{{20 }} infeksjons-/vaksinasjonsgrupper (n=11). Blant de tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjonene/-vaksinasjonene ble 2 og 9 vaksinert med henholdsvis BNT162b2/BNT162b2 og AZD1222/AZD1222. Historie med SARS-CoV-2-infeksjon ble bekreftet av en positiv anti-SARS-CoV-2-nukleokapsid-antistofftest. T, tidspunkt; uker, uker.
2.5. T-celleanalyser
Perifere mononukleære blodceller (PBMC) ble isolert ved tetthetsgradientsentrifugering ved bruk av Leucosep-rør (Greiner Bio-One) inneholdende lymfocyttseparasjonsmedium. Etter sentrifugering ved 800 g i 15 minutter med bremsen av, ble den anrikede cellefraksjonen bestående av PBMC-er høstet og vasket med 20 ml PBS. Etter sentrifugering ved 300 g i 10 minutter ble cellepelleten resuspendert i 10 ml PBS for telling. Etter sentrifugering ved 300 g i 10 minutter ble cellene kryokonservert i FBS med 10 prosent dimetylsulfoksid ved 180 C frem til bruk. For intracellulær cytokinfarging (ICS) av IFN-c, interleukin-2 (IL-2) og tumornekrosefaktor (TNF), brukte vi peptidpooler av 15-mer-peptider som overlapper med 11 aminosyrer som dekker de immundominante delene av SARS-CoV-2 Wuhan S-protein (aa 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802 og 885–1273; Biotec). For å sammenligne T-celleresponser mot Wuhan- og Delta-stammene, brukte vi to forskjellige sett med S-peptidpooler som omfatter ikke-konserverte regioner av S-sekvenser mellom Wuhan- og Delta-stammene (B.1.617.2-linje) (Miltenyi Biotec). Etter å ha tint PBMC-er og hvile dem over natten, ble 1 106 PBMC-er stimulert med peptidpooler ved en sluttkonsentrasjon på 1 mg/mL og anti-human CD28/CD49d (1 mg/mL; BD Biosciences) i 1 time i en { {45}}brønnplate i RPMI-1640-medier som inneholder 1 prosent penicillin-streptomycin, 2 mM L-glutamin og 10 prosent FBS. PBMC-kultur ble inkubert i ytterligere 5 timer etter tilsetning av brefeldin A og monensin (BD Biosciences) ved 37 C i 5 prosent CO2. Etter stimuleringen ble cellene vasket med PBS og farget med Live/Dead-Aqua (Invitrogen) i 20 minutter ved romtemperatur, etterfulgt av en cocktail av overflateabs i 20 minutter ved romtemperatur, inkludert anti-CD14- BV510, anti-CD19-BV510, anti-CD4- BV650, anti-CD3-BV786 og anti-CD8-APC-Cy7 (BD Bioscience). Celler ble fiksert og permeabilisert ved bruk av et Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (eBioscience) og deretter farget med en cocktail av intracellulære Abs, inkludert anti-TNF-FITC, anti-IL-2-PE (eBioscience) og anti- IFN-c-APC (BD Biosciences) i 20 minutter ved romtemperatur. Etter fullført farging ble cellene analysert på et LSR II-instrument med FACSDiva (BD Biosciences), og dataene ble analysert i FlowJo-programvare (FlowJo LLC).
cistanche planteøkende immunsystem
2.6. Statistisk analyse
Data plottet i lineær skala ble uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik. Data plottet i logaritmiske skalaer ble uttrykt som geometrisk gjennomsnitt ± geometrisk standardavvik. Mann-Whitney U- eller Wilcoxon-tester ble brukt for henholdsvis uparrede eller parede sammenligninger. Statistiske analyser ble {{0}}tailed, med P < 0.05 ansett som signifikant. Alle analyser ble utført i R studio eller GraphPad Prism v9.0.
3. Resultater
3.1. Kinetikk av immunresponser fremkalt av forskjellige vaksinasjonsregimer
Først undersøkte vi anti-S IgG-titere etter vaksinasjon med forskjellige regimer. Som forventet økte den første dosen signifikant anti-S IgG-titere (T2), og den andre dosen økte ytterligere signifikant anti-S IgG-titere i den homologe BNT162b2/BNT162b2 (T3) og AZD1222/AZD1222-vaksinasjonen (T4) og heterologe AZD1222/ BNT162b2 vaksinasjons (T4) grupper (fig. 2A). I gruppen med tidligere infeksjon/vaksinasjon økte den første dosen maksimalt anti-S IgG-titrene (T3), men den andre dosen økte ikke anti-S IgG-titrene ytterligere (T4). Vi undersøkte også S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser etter direkte ex vivo stimulering med peptidpooler som dekker SARSCoV-2 Wuhan villtype S-proteinsekvens. Basert på ICS økte den første dosen signifikant frekvensen av IFN-c-produserende celler blant CD4 pluss T-celler, og den andre dosen økte frekvensen ytterligere signifikant i BNT162b2/BNT162b2 (T3) og AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppene (T4) (Fig. 2B). I gruppene AZD1222/AZD1222 og tidligere infeksjon/vaksinering økte den første dosen signifikant frekvensen av IFN-c pluss-celler blant CD4 pluss T-celler, men den andre dosen økte ikke frekvensen ytterligere.
3.2. Sammenligning av Ab-titere mellom forskjellige regimer
Deretter sammenlignet vi topptitrene for bindende Ab blant de forskjellige vaksinasjonsregimene. Som topptitere valgte vi anti-S IgG-titere etter den andre dosen i BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 og AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppene og etter den første dosen i den tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppen. Topptitere for anti-S IgG var signifikant høyere i AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppen enn i BNT162b2/BNT162b2 eller AZD1222/AZD1222 vaksinasjonsgruppene (fig. 3A). Tilsvarende var topptitrene for anti-S IgG signifikant høyere i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinasjon enn i BNT162b2/BNT162b2 eller AZD1222/AZD1222 vaksinasjonsgruppene. Det var ingen forskjell i anti-S IgG-titere mellom gruppene AZD1222/BNT162b2 og tidligere infeksjon/-vaksinasjon. Vi evaluerte også nAb-titere på topptidspunkter: etter den andre dosen i BNT162b2/BNT162b2-, AZD1222/AZD1222- og AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppene og etter den første dosen i den tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgruppen. Bemerkelsesverdig nok var nAb-titere signifikant høyere i AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen enn i BNT162b2/BNT162b2- eller AZD1222/AZD1222-vaksinasjonsgruppene (fig. 3B). I tillegg var nAb-titere signifikant høyere i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinasjon enn i BNT162b2/BNT162b2 eller AZD1222/AZD1222 vaksinasjonsgruppene. Det var ingen forskjell i nAb-titere mellom gruppene AZD1222/BNT162b2 og tidligere infeksjoner/vaksinasjoner. Nivået av humoral respons fremkalt av ulike vaksinasjonsregimer ble kategorisert i sterke, moderate og ingen/svake respondere basert på persentilrangeringen. Andelen sterke respondere var høyest i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinering, etterfulgt av AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen angående analyse av anti-S IgG (fig. 3C) og nAb (fig. 3D). Til sammen indikerer disse resultatene at heterolog priming og boosting, inkludert både AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon og tidligere infeksjon/vaksinering, er mer effektiv i genereringen av humorale responser enn homolog priming og boosting.
3.3. Sammenligning av S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser mellom forskjellige regimer
Vi sammenlignet også S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser blant de forskjellige vaksinasjonsregimene på topptidspunkter: etter den andre dosen i BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 og AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppene og etter den første dosen i de foregående infeksjon/vaksinasjonsgruppe. I motsetning til anti-S IgG og nAb titere, var frekvensen av IFN-c pluss-celler blant CD4 pluss T-celler høyest i BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen (fig. 4A). Andelen sterke respondere var også høyest i BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen, etterfulgt av den tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppen (fig. 4B). Disse resultatene viser at immunisering med den andre homologe boosten av BNT162b2 mer effektivt fremkaller minne-T-celleresponser enn den andre heterologe boost-vaksinasjonen eller den første dosen etter naturlig SARS-CoV-2-infeksjon. Tvert imot, heterologe prime-boost-regimer er mer sannsynlig å utvikle høyere nivåer av humorale immunresponser. Vi analyserte også den relative frekvensen av polyfunksjonelle CD4 pluss T-celler som samtidig produserer flere cytokiner (dvs. IFN-c, IL-2 og/eller TNF). BNT162b2/BNT162b2 vaksinasjonsgruppen viste signifikant høyere frekvenser av polyfunksjonelle celler som produserer 2 cytokiner blant S-spesifikke CD4 pluss T-celler enn AZD1222/AZD1222 eller AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppene (fig. 4C). Det var ingen forskjell i frekvensen mellom BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjonen og tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgrupper. Frekvensen av polyfunksjonelle celler var signifikant høyere i AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen enn i AZD1222/AZD1222-vaksinasjonsgruppen. Sektordiagrammer som representerer enkelt-, dobbelt- og trippelpositive CD4 pluss T-celler når det gjelder cytokinproduksjon som reagerer på S-overlappende peptidpooler, indikerte også en relativt høy frekvens av dobbelt- eller trippelpositive celler i BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjonen og tidligere infeksjon/- vaksinasjonsgrupper (fig. 4D).
3.4. Immunresponser mot Delta-varianten blant forskjellige regimer
Til slutt analyserte vi immunresponser mot Delta-varianten. I denne analysen inkluderte vi rekonvalesentpersoner som ble friske etter SARS-CoV-2 Delta-infeksjon for sammenligning. Delta-variantspesifikke nAb-titere var signifikant høyere i den tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgruppen enn i BNT162b2/BNT162b2-, AZD1222/AZD1222- eller AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppene, og var enda høyere enn de i de rekonvalescente individene i Delta (fig. 5A) . Vi undersøkte også CD4 pluss T-celleresponser mot S-proteinet til Delta-varianten. I denne analysen utførte vi ICS av IFN-c etter direkte ex vivo-stimulering ved bruk av to forskjellige sett med S-peptidpooler som omfatter ikke-konserverte regioner av S-sekvenser mellom Wuhan- og Delta-stammene og beregnet forholdet mellom frekvensen av Delta Sspecificific IFN-c pluss celler til frekvensen av Wuhan S-spesifikke IFN-c pluss-celler. Som forventet var forholdet høyest hos Delta-rekonvalesentindividene. Interessant nok var forholdet høyere i den tidligere infeksjon/vaksinasjonsgruppen enn i BNT162b2/BNT162b2 vaksinasjonsgruppen (fig. 5B), selv om Wuhan S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser var høyest i BNT162b2/BNT162b2 vaksinasjonsgruppen (fig. 4A). Til sammen indikerer disse resultatene at nAb og CD4 pluss T-celleresponser som kryssgjenkjenner Delta-varianten genereres mer effektivt ved tidligere infeksjon/vaksinasjon enn de homologe eller heterologe vaksinasjonsregimene.
Fig. 2. Antistoff- og T-celleresponser fremkalt av forskjellige prime-boost-regimer. Longitudinelle immunresponser i henhold til prøvetakingsplanen fra før vaksinasjon til 14 uker etter første vaksinasjon. (A) SARS-CoV-2 spike-spesifikke bindingsantistoffer ble målt i BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 20}}), og tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgrupper (n=6). (B) SARS-CoV-2 piggspesifikke CD4 pluss T-celleresponser ble målt i BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 (n=9), og tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgrupper (n=7). Data presenteres som geometrisk gjennomsnitt ± geometrisk SD (A) eller gjennomsnitt ± SD (B). Statistiske analyser mellom tidspunkter innenfor hver gruppe ble utført ved bruk av Wilcoxon signed-rank test. ns, ikke signifikant; *P < 0.05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Fig. 3. Humorale immunresponser på topptidspunkter. (A) SARS-CoV-2 piggspesifikke bindende antistoffer ble sammenlignet blant BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 15}}), og tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgrupper (n=6) på topptidspunkter. (B) Nøytraliserende antistoffer ble sammenlignet mellom BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) og tidligere infeksjon/vaksinasjon ( n=11) grupper på topptidspunkter. Topptidspunkter ble valgt som følger: etter den andre dosen i vaksinasjonsgruppene BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 og AZD1222/BNT162b2 og etter den første dosen i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinering. Data presenteres som geometrisk gjennomsnitt ± geometrisk SD og analyseres for signifikans ved bruk av Mann-Whitney-testen. (C og D) Prosentandelen av deltakere med varierende nivåer av humorale immunresponser. Kvantifisering av typen responder (sterk, moderat og ingen/svak) er uttrykt som en brøkdel av antall vaksinemottakere i hver gruppe. Typer av respondere ble bestemt av prosentilpoengsummen beregnet fra alle vaksinerte deltakere. ns, ikke signifikant; *P < {{40}}.05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
4. Diskusjon
De for øyeblikket godkjente mRNA-vaksinene og adenovirusvektorvaksinene har vist bemerkelsesverdig effektivitet for å forebygge COVID-19. Imidlertid har heterolog prime-boost-vaksinasjon blitt ansett for å forbedre immunogenisitet og redusere periodisk forsyningsmangel [13]. I tillegg har sikkerhetsproblemer blitt tatt opp med adenovirusvektorvaksinene etter gjenkjennelse av alvorlige bivirkninger, inkludert livstruende venøs trombose assosiert med AZD1222-vaksinasjon, spesielt hos yngre kvinner [14,15]. Disse har ført til heterolog mRNA booster-immunisering for de som allerede hadde fått den første dosen av AZD1222. Selv om ingen effektivitetsdata var tilgjengelig, tok mange nasjonale helsemyndigheter i bruk heterologe regimer med autoriserte COVID-19-vaksiner. En sammenlignende studie av humorale og cellulære immunresponser fremkalt av forskjellige prime-boost-vaksinasjonsregimer er informativ og hjelper til bedre å forstå utfordringer i den virkelige verden. I denne studien demonstrerte vi differensiell induksjon av humoral og cellulær immunitet ved heterologe prime-boost-vaksinasjoner (tilleggstabell 4). I sterk kontrast til både spesifikke bindende Ab-nivåer og nøytraliseringstitere, som var høyest i AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen, var S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser høyest i BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen, ikke i AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonen. gruppe. De relativt lave nivåene av S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser i AZD1222/BNT162b2-vaksinerte deltakere var uventede og kan fortsatt sette disse individene i fare for alvorlig SARS-CoV-2-infeksjon. Funnene våre skiller seg fra de som er rapportert av Schmidt og kolleger, som antydet at ved heterolog BNT162b2-forsterkning, ble nAb-titere og T-celleresponser signifikant økt hos AZD1222-primede individer [7]. Imidlertid ble den absolutte frekvensen av CD69 pluss IFN-c pluss-celler blant CD4 pluss T-celler bare marginalt økt, og denne studien utelukket dybdeanalyser av polyfunksjonaliteten til S-spesifikke T-celleresponser. For personer som tidligere var infisert, kan den første vaksinedosen fungere som en booster-immunisering og potent indusere humorale og cellulære responser [16,17]. Siden nAb-titeren antas å være en nøkkelkorrelat av beskyttelse mot SARS-CoV-2-infeksjon [18], passer resultatene våre godt med det nylige funnet av en fordelaktig boost til infeksjonservervet immunitet, med justert vaksineeffektivitet av > 90 prosent etter første dose hos vaksinemottakere som hadde tidligere SARS-CoV-2-infeksjon [19]. Videre, til tross for den betydelige rømmingen av nAb-responser mot Delta-varianten blant studiedeltakerne, observerte vi de høyeste nivåene av nAb som kryssgjenkjenner Delta-varianten i gruppen av deltakere med tidligere villtype SARS-CoV-2-infeksjon og vaksinasjon. Imidlertid, i tråd med den heterologe AZD1222/BNT162b2-vaksinasjonsgruppen, hadde de med tidligere infeksjon som ble vaksinert en svakere S-spesifikk CD4 pluss T-cellerespons enn individer med homolog BNT162b2/BNT162b2-vaksinasjon uten tidligere infeksjon. Spesielt viser resultatene våre at to doser BNT162b2 fører til pålitelig og robust induksjon av S-spesifikke CD4 pluss T-celleresponser, betydelig høyere enn andre prime-boost vaksinasjonsregimer. Disse funnene samsvarer med en nylig rapport om fire forskjellige COVID-19-vaksiner [20], mens analysen vår inkluderte heterologe prime-boost-regimer og hybridimmunitet fra tidligere infeksjon og vaksinasjon. Følgelig kan mRNA-vaksineplattformer velges for deres evne til å indusere robuste minne CD4 pluss T-celleresponser. Ettersom forekomsten av gjennombruddsinfeksjon etter vaksinasjon øker over hele verden, er det økende interesse for immunitet som beskytter mot alvorlig COVID-19. Ettersom nye SARS-CoV-2-varianter fortsetter å dukke opp og unnslipper humoralt immunforsvar, kan cellulær immunitet, som retter seg mot et bredt spekter av SARS-CoV-2-epitoper gjenkjent av T-celler, gi stabil beskyttende immunitet [21 ], selv om determinanter for cellulære responser i vaksinemediert beskyttelse ennå ikke er nøyaktig definert. Derfor er det uklart om den økte humorale immunogenisiteten til heterolog AZD1222/BNT162b2-vaksinasjon konsekvent oversetter til forbedret beskyttelse, og dette krever ytterligere studier. I tillegg må det undersøkes om personer som har utviklet dårlige Tcell-responser etter vaksinasjon, slik som de som er primet med AZD1222, kan ha nytte av T-celle-vaksineformuleringer [22]. Både infeksjonsindusert og vaksineindusert immunitet avtar naturlig over tid; Det ser imidlertid ut til å gi større beskyttelse til personer som tidligere har vært infisert med SARS-CoV-2 [23]. Hos vaksinerte individer induserer gjennombruddsinfeksjon med Omicron-varianten mindre nAb-responser enn infeksjon med Delta-varianten [24], og relativt lite er kjent om de potensielle konsekvensene av hybridimmunitet gitt av infeksjon og vaksinasjon med forskjellige stammer. Tilstedeværelsen av polyfunksjonelle S-spesifikke T-celler i tidligere infiserte og vaksinerte deltakere i studien vår er imidlertid forenlig med en langsommere nedgang i beskyttelse mot alvorlig covid-19 i denne populasjonen og kan bidra til å endre sykdommens alvorlighetsgrad etter reinfeksjon med SARS -CoV{100}}-varianter [25,26]. Den nåværende studien har flere begrensninger. For det første gjør de små prøvestørrelsene i kohorten robust statistisk analyse utfordrende; derfor vil funnene våre måtte valideres ytterligere i større kohorter. For det andre var vi ikke i stand til å teste prøver på senere tidspunkter for å bestemme holdbarheten og avtakelsen av humorale og cellulære immunresponser. For det tredje kan resultatene våre undervurdere virkningen av subdominante T-celleepitoper utenfor de dominerende epitopene. For det fjerde studerte vi bare sirkulerende lymfocytter, og fremtidige studier av drenering av lymfeknuter etter vaksinasjon kan være nødvendig for å forstå mekanismene som ligger til grunn for de differensielle responsene som er observert her. Oppsummert, den nåværende studien med direkte, alderstilpassede sammenligninger kaster lys over den uenige humorale og cellulære immunogenisiteten til heterolog priming og boosting i sammenheng med SARS-CoV{106}}-antigeneksponeringer. Funnene våre fremhever hvordan individuell immunologisk erfaring former den påfølgende immunresponsen fremkalt av covid{107}}-vaksinasjon. Ytterligere effektivitetsdata fra den virkelige verden og laboratorieundersøkelser vil videre informere om den mest passende vaksinasjonsstrategien for beskyttelse mot nye SARS-CoV{110}}-varianter, med implikasjoner for utviklingen av neste generasjons vaksineplattformer.
Fig. 4. Cellulære immunresponser ved topptidspunkter. (A) Frekvensene av piggspesifikke IFN-c pluss-celler blant CD4 pluss T-celler ble sammenlignet blant BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 ( n=9), og tidligere infeksjons-/vaksinasjonsgrupper (n=7) på topptidspunkter. Topptidspunkter ble valgt som følger: etter den andre dosen i vaksinasjonsgruppene BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 og AZD1222/BNT162b2 og etter den første dosen i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinering. (B) Prosentandelen av deltakere med varierende nivåer av cellulære immunresponser. Kvantifisering av typen responder (sterk, moderat og ingen/svak) er uttrykt som en brøkdel av antall vaksinemottakere i hver gruppe. Typer av respondere ble bestemt av prosentilpoengsummen beregnet fra alle vaksinerte deltakere. (C) Frekvensen av polyfunksjonelle piggspesifikke CD4 pluss T-celler som produserer en hvilken som helst kombinasjon av IFN-c, IL-2 eller TNF i hver gruppe vaksinerte deltakere. (D) Fraksjonen av piggspesifikke CD4 pluss T-celler er positiv for et gitt antall cytokiner. Data presenteres som gjennomsnitt ± SD. Signifikans ble analysert ved hjelp av Mann-Whitney-testen (A og C). ns, ikke signifikant; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Dessuten den tradisjonelle kinesiske medisiningrediensencistanche urtkan også forbedre immuniteten, mekanismen til Cistanche deserticola for å styrke immuniteten
cistanche supplement fordeler-hvordan styrke immunforsvaret
Klikk her for å se Cistanche Enhance Immunity-produkter
【Be om mer】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche tubulosapolysakkarider kan fremme spredningen av T- og B-lymfocytter, men spredningseffekten av B-lymfocytter er betydelig sterkere enn for T-lymfocytter. Cistanche deserticola-polysakkarider fremmer frigjøringen av cytokin IL22 fra lymfocytter, som er relatert til å fremme splenisk lymfocyttproliferasjon. Cistanche deserticola kan aktivere makrofager og regulere immunsystemet. Cistanche deserticola polysakkarider, echinaside og pilosid har betydelige effekter på dannelsen og aktiviteten til humane lymfocytter. Det kan øke spredningsresponsen til lymfocytter, og dermed styrke kroppens immunfunksjon.
cistanche ekstrakt
De funksjonelle komponentene tilCistanche tubulosatotale glykosider har en betydelig innvirkning på cellegjenoppretting etter 60Coy-strålingsskade, og kan også forbedre immunfunksjonen mot strålingsskader.
Cistanche tubulosa-ekstrakt kan ikke bare kompensere for medfødt immunsvikt, men også forbedre ervervet immunitet.
Fig. 5. Kryssvariante immunresponser mot Delta fremkalt av forskjellige prime-boost-regimer. (A) Plasmaprøver ble analysert med plakkreduksjonsnøytraliseringsanalyser for SARS-CoV-2 Delta-varianten i BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}}), AZD1222/AZD1222 (n {{ 13}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), tidligere infeksjon/vaksinasjon (n=11), og Delta-rekonvalescent (n {{20}}) grupper. Delta-nøytraliserende antistoffer ble sammenlignet mellom grupper på følgende tidspunkt: etter den andre dosen i BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 og AZD1222/BNT162b2 vaksinasjonsgruppene og etter den første dosen i gruppen med tidligere infeksjon/vaksinering. (B) PBMC-er ble analysert ved intracellulær farging for IFN-c etter direkte ex vivo-stimulering ved bruk av to forskjellige sett med S-peptidpooler som omfatter ikke-konserverte områder av spikesekvenser mellom Wuhan- og Delta-stammene i BNT162b2/BNT162b2 (n {{37} }), AZD1222/AZD1222 (n {{40}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), tidligere infeksjon/vaksinering (n=7) og Delta-rekonvalescent ( n=17) grupper. Forholdet mellom frekvensen av IFN-c-produserende CD4 pluss T-celler mot Delta-toppen og frekvensen av IFN-c-produserende CD4 pluss T-celler mot Wuhan-toppen ble beregnet i hver gruppe. Data presenteres som geometrisk gjennomsnitt ± geometrisk SD (A) eller gjennomsnitt ± SD (B) og analysert for signifikans ved hjelp av Mann-Whitney-testen. ns, ikke signifikant; *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Referanser
[1] Bok K, Sitar S, Graham BS, et al. Akselerert COVID-19-vaksineutvikling: milepæler, lærdommer og utsikter. Immunitet 2021;54:1636–51. https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017.
[2] Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Sikkerhet og effekt av BNT162b2 mRNA Covid-19-vaksinen. N Engl J Med 2020;383:2603–15. https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577.
[3] Falsey AR, Sobieszczyk ME, Hirsch I, et al. Fase 3 Sikkerhet og effekt av AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19-vaksine. N Engl J Med 2021;385:2348–60. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290.
[4] Borobia AM, Carcas AJ, Pérez-Olmeda M, et al. Immunogenisitet og reaktogenisitet av BNT162b2-booster i ChAdOx1-S-primede deltakere (CombiVacS): en multisenter, åpen, randomisert, kontrollert fase 2-studie. Lancet 2021;398:121–30. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3.
[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, et al. Immunresponser mot SARS-CoV-2-varianter etter heterolog og homolog ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2-vaksinasjon. Nat Med 2021;27:1525–9. https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9.
[6] Hillus D, Schwarz T, Tober-Lau P, et al. Sikkerhet, reaktogenisitet og immunogenisitet av homolog og heterolog prime-boost-immunisering med ChAdOx1 nCoV-19 og BNT162b2: en prospektiv kohortstudie. The Lancet Respir Med 2021;9:1255–65. https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X.
[7] Schmidt T, Klemis V, Schub D, et al. Immunogenisitet og reaktogenisitet av heterolog ChAdOx1 nCoV-19/mRNA-vaksinasjon. Nat Med 2021;27:1530–5. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w.
[8] Liu X, Shaw RH, Stuart ASV, et al. Sikkerhet og immunogenisitet av heterologe versus homologe prime-boost-planer med en adenoviral vektorert og mRNA COVID-19-vaksine (Com-COV): en enkeltblind, randomisert, noninferiority-studie. Lancet 2021;398:856–69. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9.
[9] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, et al. Antistoffresponser hos seropositive personer etter en enkelt dose SARS-CoV-2 mRNA-vaksine. N Engl J Med 2021;384:1372–4. https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667.
[10] Bradley T, Grundberg E, Selvarangan R, et al. Antistoffresponser etter en enkelt dose SARS-CoV-2 mRNA-vaksine. N Engl J Med 2021;384:1959–61. https:// doi.org/10.1056/NEJMc2102051.
[11] Saadat S, Rikhtegaran Tehrani Z, Logue J, et al. Bindings- og nøytraliseringsantistofftitere etter en enkelt vaksinedose hos helsepersonell som tidligere er infisert med SARS-CoV-2. JAMA 2021;325:1467–9. https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341.
[12] Reynolds CJ, Pade C, Gibbons JM, et al. Tidligere SARS-CoV-2-infeksjon redder B- og T-celleresponser på varianter etter første vaksinedose. Science 2021;372:1418–23. https://doi.org/10.1126/science.abh1282.
[13] Ledford H. Kan blanding av covid-vaksiner øke immunresponsen? Nature 2021;590:375–6. https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5.
[14] Schultz NH, Sorvoll IH, Michelsen AE, et al. Trombose og trombocytopeni etter ChAdOx1 nCoV-19-vaksinasjon. N Engl J Med 2021;384:2124–30. https:// doi.org/10.1056/NEJMoa2104882.
[15] Greinacher A, Thiele T, Warkentin TE, et al. Trombotisk trombocytopeni etter ChAdOx1 nCov-19-vaksinasjon. N Engl J Med 2021;384:2092–101. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840.
[16] Mazzoni A, Di Lauria N, Maggi L, et al. Førstedose mRNA-vaksinasjon er tilstrekkelig til å reaktivere immunologisk hukommelse mot SARS-CoV-2 hos forsøkspersoner som har blitt friske etter COVID-19. J Clin Invest 2021;131:e149150.
[17] Samanovic MI, Cornelius AR, Gray-Gaillard SL, et al. Robuste immunresponser observeres etter én dose av BNT162b2 mRNA-vaksinedosen hos SARS-CoV-2--erfarne individer. Sci Transl Med 2022;14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961.
[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. Nøytraliserende antistoffnivåer er svært prediktive for immunbeskyttelse mot symptomatisk SARS-CoV-2-infeksjon. Nat Med 2021;27:1205–11. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8.
[19] Hall V, Foulkes S, Insalata F, et al. Beskyttelse mot SARS-CoV-2 etter Covid- 19-vaksinasjon og tidligere infeksjon. N Engl J Med 2022;386:1207–20. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691.
[20] Zhang Z, Mateus J, Coelho CH, et al. Humoralt og cellulært immunminne til fire COVID-19-vaksiner. Cell 2022;185:2434–51. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022.
[21] Vardhana S, Baldo L, Morice WG, et al. Å forstå T-cellers respons på COVID-19 er avgjørende for å informere om folkehelsestrategier. Sci Immunol 2022;7:eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303.
[22] Moss P. T-cellens immunrespons mot SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022;23:186–93. https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w.
[23] Goldberg Y, Mandel M, Bar-On YM, et al. Beskyttelse og avtakelse av naturlig og hybrid immunitet mot SARS-CoV-2.N Engl. J Med 2022;386:2201–12. https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946.
[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, et al. Nøytraliseringsprofil etter gjenoppretting fra SARS-CoV-2 Omicron-infeksjon. N Engl J Med 2022;386:1764–6. https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607.
[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, et al. BNT162b2-vaksinasjon induserer varige SARS-CoV-2-spesifikke T-celler med en stamcelleminnefenotype. Sci Immunol 2021;6(eabl5344). https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344.
[26] Goldblatt D. SARS-CoV-2: fra flokkimmunitet til hybridimmunitet. Nat Rev Immunol 2022;22:333–4. https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0.
