Albumin og Megalin du trenger å vite

Ta kontakt med:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Del Ⅱ: Nyrehåndtering av albumin – fra tidlige funn til nåværende konsepter

Jakub Gburek, Bogusława Konopska og Krzysztof Goł˛ab

KLIKK HER FOR Å DEL Ⅰ // KLIKK HER FOR Å DEL Ⅲ

cistanchekan behandlenyresykdomforbedrenyrefunksjon

3.3. Cubilin

Cubilinble identifisert somalbuminreseptor av Birn et al. i 2000 [64]. Forfatterne isolerte segcubinfra membranene til rottenyre-børstekanten ved bruk av affinitetskromatografi med immobilisert albumin. De bestemte også dissosiasjonskonstanten til komplekset ved overflateplasmonresonans (Kd=0.63 uM) og demonstrerte at innavlede hunder med en funksjonsdefekt påcubinog mus med hemmetmegalinekspresjon skiller ut betydelige mengder albumin i urinen. Dessuten indikerte de også den gjensidige interaksjonen mellom begge reseptorene i albuminendocytose.

Cubiliner et ekstracellulært glykoprotein med en molekylvekt på ca. 460 kDa. Opprinnelig ble det identifisert som antigenet til teratogene antistoffer produsert i kaniner etter injeksjon av nyrebørstekanten. Opprinnelig kjent som glykoprotein 280 (gp280), var det lokalisert i de proksimale nyretubuli og plommesekkens epitel. Dens uttrykk ble også funnet i ileum, livmor og placenta. Opprinnelig ble ingen ligander tilskrevet dette proteinet. Senere studier viste detcubinvar identisk med reseptoren for det indre faktor-vitamin B12 (IF-B12)-komplekset tilstede i tynntarmen. Funksjonen til et reseptorprotein ble tildelt det [65]. Mennesketcubingenet var lokalisert på 10p12.33-p13-kromosomet. Dette proteinet er sammensatt av en 110 aminosyre N-terminal del, etterfulgt av 8 epidermal vekstfaktor-lignende (EGF-lignende) domener og 27 domener som ligner komplement C1r/C1s, epidermal vekstfaktor-relatert kråkebolleprotein (Uegf) ), og benmorfogent protein1(CUB).Cubilinhar ikke et transmembrant domene. N-terminalen er ansvarlig for proteininnleiring i membranen. Hvert CUB-domene består av 110 aminosyrerester. Strukturen til CUB-domener består av to lag med fem antiparallelle -ark også forbundet med -strukturer. De utgjør det mest konservative området av molekylet og er ansvarlige for ligandbinding. I tillegg tilalbuminog IF-B12, jernholdige proteiner (transferrin, hemoglobin, myoglobin), apolipoprotein Al og vitamin D bindende protein kan også være bundet 56,59,66,67I. Analyse av albuminbinding til in vitro uttryktcubinfragmenter gjorde det mulig å identifisere bindingsstedene innenfor CUB-domener 6-8 [68]. Disse stedene vil sannsynligvis delvis overlappe med bindingsstedene til hemoglobin som demonstrert i en konkurransestudie med HK-2-celler (human nyreproksimal tubuli, voksen mann, papilloma udødeliggjort) [69].

Cubiliner ikke en fullstendig uavhengig endocytisk reseptor. For riktig membranlokalisering og stabilitet, må den samhandle med AMN-proteinet. I tillegg er dette proteinet ansvarlig forcubininternalisering. Nylig ble det demonstrert at FXNPXF-sekvensen i AMN cytoplasmatiske domene er funksjonelt aktiv og medierer sekvestreringen av komplekset ved å interagere med adapterproteiner: det funksjonshemmede proteinet-2 (Dab2) og autosomalt recessivt kolesterolemiprotein (ARH). CUBAM internalisering kan også skje gjennom tilknytning tilmegalin[55,70]. Megalinser ut til å være ansvarlig forcubinopprettholde cellemembranen. Samtidig slipp avcubinfra membranen og dens tap med urin ble funnet hos en pasient med Donnai-Barrow/FOAR syndrom (Facio-Oculo-Acustico-Renal Syndrome) på grunn av en funksjonell mutasjon i dette reseptorgenet som førte til dets cytoplasmatiske retensjon [71].

Hovedrollen til CUBAM i rørformetalbuminopptak ble påvist i nyere studier på mus med nyrespesifikk knockout avcubinogmegalin, der moderat tubulær albuminuri ble observert [54,72]. Denne observasjonen ble også bekreftet av den genetiske og fenotypiske analysen av pasienter med Imerslund-Gräsbeck syndrom, forårsaket av en mutasjon icubineller AMN-genet. I begge tilfeller, albumin og andre ligander avcubingikk tapt i urinen [58].

Interessant nok,cubinogmegalinhar også blitt påvist i rotte og human glomeruli i henhold til et mønster som ligner på det som er rapportert formegalin. Cubilinavslørte både overflate- og intracellulært uttrykk i podocyttene [73]. Dessuten,cubinmRNA-ekspresjon ble påvist i mesangiale celler, men fraværet av amnion antydet detcubiner ikke fullt funksjonell i disse cellene. Likevel,albuminendocytose ble betydelig svekket under induserbarmegalinknockdown-forhold i stabilt transduserte mesangiale celler |74]. Disse funnene kan være viktige for en bedre forståelse av glomeruli-patienter.

cistanche mannlige fordeler

3.4. Megalin

Megalinble identifisert somalbuminreseptor av Cui et al. i 1996 [75]. Studien ble utført in vivo ved å injisere proksimale tubuli av rotter med albuminløsninger merket med kolloidalt gull eller 125Ijod-isotop. I eksperimentet ble påvirkningen av mange forbindelser på det rørformede opptak av disse proteinene bestemt. Administrering av reseptorassosiert protein (RAP), cytokrom C reduserte og gentamicin hemmet fullstendig tubulær reabsorpsjon av merket albumin. Disse liganden er preget av høy affinitet formegalin, og deres tilstedeværelse hemmer effektivt bindingen av albumin gjennom denne reseptoren. Det samme gjaldt EDTA, en chelator av Ca2 pluss-ioner som også hemmet opptaket. Dette indikerte detmegalinbidrar til den tubulære reabsorpsjonen av dette proteinet. Disse konklusjonene ble bekreftet ved affinitetskromatografi på en kolonne med immobilisertmegalin.

Megalinble opprinnelig oppdaget som et antigen i Heymann-type membranøs nefropati og kalt glykoprotein 330 (gp 330). I 1994, etter et vellykket kloningsforsøk, ble strukturen bedre kjent, og navnet ble endret til det som brukes for øyeblikket [76. Mennesketmegalingenet ble lokalisert på kromosom 2g24-g31.Megaliner et stort transmembranprotein som tilhører familien av lipoproteinreseptorer med lav tetthet. I proksimale tubuli,megalinfinnes i den apikale membranen og clathrin-belagte endocytiske vesikler. Dette proteinet har en molekylvekt på 600 kDa og består av ca. 4600 aminosyrerester. Demegalinmolekylet inneholder et stort N-terminalt ekstracellulært domene, et enkelt transmembrandomene og et kort C-terminalt cytoplasmatisk fragment. Det ekstracellulære domenet har fire områder rike på cystein og er ansvarlig for binding av ligander. Flere repetisjoner av sekvens som ligner på epidermal vekstfaktor (EGF) og et cysteinfattig fragment som inneholder YWTD-motiv, skiller den ligandbindende regionen fra den innebygde delen. Signalsekvensen er ansvarlig for dissosiasjonen av liganden i det sure endosommiljøet. Den cytoplasmatiske delen inneholder tre NPXY-motiver som initierer prosessen med albuminendocytose ved å konsentrere reseptorer i belagte groper via det funksjonshemmede proteinet -2(Dab2) adapterprotein [77]. Rekruttering av denne adapteren er igjen avhengig av fosforylering katalysert av proteinkinaser B(Aktl og Akt2) [78,79].

Megalinhar også evnen til å binde mange andre proteiner. Foruten albumin inkluderer dets ligander blant annet: apolipoproteiner (B, E, HD), vitamintransporterende proteiner (A, D, B12), hormoner (angiotensin I, epitelial vekstfaktor, leptin), enzymer og deres hemmere (lysozym, plasminogen) og andre [80]. Når det gjelder albumin, er ikke bindingsstedene på reseptormolekylet kartlagt ennå. Det internaliserer også CUBAM-komplekset og dets ligander, inkludert albumin. De dannede kompleksene blir internalisert med dannelsen av tidlige endosomer. Etter forsuring av endosommiljøet dissosieres komplekset og en fri reseptor resirkuleres til celleoverflaten via tette apikale tubuli [59,66,67,81].

Det er verdt å nevne at høy glukose regulerermegalin-mediert albuminendocytose i nyreproksimale tubuliceller. Forhøyede nivåer av plasmaglukose hemmetmegalinekspresjon og følgelig albuminendocytose [61].

cistanche mannlige fordeler

3.5. Neonatal Fc-reseptor av immunoglobulinfragment

Nyere studier på nyrealbuminabsorpsjon indikerer den viktige rollen til neonatal Fc-reseptor (FcRn) i prosessen med albumin som gjenvinnes fra filtratet og beskytter dette proteinet mot intracellulær nedbrytning. FcRn er et heterodimert transmembranprotein som i sin struktur ligner store histokompatibilitetskompleks (MHC) klasse I-molekyler. Det er vanlig i endotel- og epitelceller. Dens tilstedeværelse ble bekreftet i glomerulære podocytter og i proksimale tubuli. Den har evnen til uavhengig å binde albumin og immunoglobuliner IgG i et surt miljø (pH 5-6). En økning i pH-verdien over 7 resulterer i frigjøring av ligander fra reseptoren [82]. FcRn i podocytter er tilstede i vesikler som tilhører det sure endosomale avdelingen og er ansvarlig for bindingen av immunglobuliner og albumin som passerte gjennom det glomerulære kapillære endotelet til filtreringsrommet. De filtrerte proteinene absorberes av podocytten gjennom endocytose og/eller pinocytose og bindes deretter av FcRn ved endosomenes sure pH. Endocytiske vesikler lastet med proteiner gjennomgår transcytose mot lumen av Bowmans kapsel. Under forhold med økende pH, dissosieres protein-reseptorkomplekset, og det intakte proteinet frigjøres fra cellen til primærfiltratet. Denne prosessen er ment å beskytte trange filtreringsspalter mot tilstopping med store proteiner [83,84]. En del av albuminet, filtrert og reabsorbert i de proksimale tubuli, er ikke gjenstand for nedbrytning i lysosomer i det tubulære epitelet og gjenvinnes mest sannsynlig i transcytoseprosessen. I denne teoretiske modellen binder FcRn albumin, som frigjøres fra dets reseptorer, antageligmegalin/cubinkompleks i det sure endosommiljøet, og ledes deretter gjennom transcytose til basalstedet til tubulære epitelceller, hvor det frigjøres i det interstitielle vevet som en konsekvens av økende pH [85]. Selv om i lys av nåværende forskningsresultater, gjenvinning av albumin ved transcytose som involverer FcRn i proksimale tubuli finner sted, er dette et marginalt fenomen for normal albuminhomeostase i kroppen [56].

cistanche mannlige fordeler