Anti-inflammatoriske prinsipper fra nålene til Pinus Taiwanensis Hayata og i silicostudier av deres potensielle antialdringseffekter Ⅱ

Furunålene ble ekstrahert med metanol og fordelt med heksaner, etylacetat og vann for å oppnå tre oppløselige lag, henholdsvis. Deanti-inflammatoriskbrøkdel, denetylacetatlag, ble utsatt for kontinuerlig konvensjonell kromatografisk teknikkkombinasjon, og fem ubeskrevne forbindelser ble karakterisertinkludert to nye lignaner, 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksy-70 -(4-hydroksyfenyl)propan-80 -yloksy]benzosyre (1), 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksy-70 -(4-hydroksy-3-metoksyfenyl)-propan-80 -yloksy]-2-hydroksybenzosyre (2), en ny diterpenoid, (13E,12R)-12 -hydroksyagatisksyre (3), en monoterpenoid, 5-isopropyl-3-oksocykloheks-1-en-1-karboksylsyre (4), og enfenylpropan, styraksinolsyre (5). De kjemiske strukturene til disse nye forbindelseneble konstruert ved hjelp av NMR spektral elucidation og MS spectrometrisk analyse. Dessuten, syttito kjente forbindelser, omfattende ett steroid, -sitosterol (6); en sesquiterpenoid, (-)-oplopan-4-en-10- -O- -D-glukosid (7); enkumarin, umbelliferon (8); enalkaloid, indol-3-aldehyd (9); fire diterpenoider,

Klikk her for å få Anti-Aging Cistanche Cream

3-metoksyfenyl)-1-propanon (64), 3-hydroksy-1-(4-hydroksyfenyl)-1-propanon (65),2-(4-hydroksyfenyl)eddiksyre (66), fenyleddiksyre (67), er vanillinsyre (68), benzoisksyre (69), vanillin (70), p-hydroksyacetofenon (71), natriumsalisylat (72), vaniljesyre4-O- -L-rhamnoside (73), trans-ferulsyre (74), natriump-kumarat (75), p-kumarisksyre (76), trans-metylp-kumarat (77), henholdsvis ble identifisert ved undersøkelse avderes fysiske og spektroskopiske data med de tidligere publiserte (referanser til kjenteforbindelser ble gitt i tilleggsmaterialer vedlegg B).

3.1. Strukturell belysning av forbindelsene 1–5

Sammensatt1 ble isolert som en optisk aktiv fargeløs sirup, og molekyletformel ble tildelt som C16H16O6 ved HR-ESI-MS-analyse ([M− H]−, m/z 303,0855, beregnet.for C16H15O6, 303.0869, figur S1). IR-spekteret indikerer tilstedeværelsen av en hydroksyl(3412 cm−1 ) og en konjugert karbonylgruppe (1598 cm−1 ). De1H-NMR-data (figur S2)viste signalene for topara-substituerte aromatiske deler [δH 6.72 (2H, d, J = 8.4 Hz,H-30 , -50 ), 6.86 (2H, d, J = 8,8 Hz, H-2, -6), 7,24 (2H, d,J = 8.4 Hz, H-20 , -60 ), og 7,83(2H, d, J = 8,8 Hz, H-3, -5)], to oksygenerte metiner [δH 4.48 (1H, m, H-80 ), og 4,85(1H, d, J = 5.6 Hz, H-70 )], og to metiner [δH 3,81 (1H, dd,J {{0}}.0, 4,0 Hz, H-90 a), og 3.86 (1H, dd,J {{0}}.0, 5,6 Hz, H-90 b)]. De13C- og DEPT NMR-spektra (figur S3)av1 viste seksten karboner, tilsvarende en metylengruppe, to oksygenertekarboner, tolv aromatiske karboner og en konjugert karbonyl (tabell1). De2 J- og3 J- HMBC-korrelasjoner fra H-2, -6 til C-1 og 4; fra H-3, 5 til C-1 og 7; fra H-20, 60 tilC-40 og 70 ; fra H-70 til C-80 og 90 ; og fra H-80 til C-1, henholdsvis ble observert iHMBC-spekteret til1 (Figur S4). Dessuten en stor koblingskonstant mellom H-70 og H-80 (J = 5.6 Hz) støttet den relative konfigurasjonen av1 ved C-70 /C-80 somtreo[44]. De absolutte konfigurasjonene ved C-70 og C-80 av1 ble bestemt ved elektronisk rundskrivdikroisme (ECD) analyse. Den positive bomullseffekten ved 230 nm (∆ε pluss 0.17) viste en 8S konfigurasjon for1, ifølge publisert litteratur [37,38] og derfor 70 R var ogsåfast bestemt. Andre 2D-spektre (figur S5–S7) ga hele tildelingen av proton ogkarbonsignaler. Følgelig er strukturen til1 ble tildelt som 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksy-7 0 -(4-hydroksyfenyl)propan-80 -yloksy]benzosyre som vist i figuren1. 

Molekylformelen til2 ble tildelt som C17H18O8 på grunnlag av HR-ESI-MSanalytiske data (m/z 349.0936 [M − H]−, figur S8). Absorpsjonen i IR-spekteret(3425 og 1541 cm−1 ) indikerte hydroksyl- og konjugerte karbonylfunksjonaliteter,hhv. I sammenligning med NMR-spektrene til1 og2, kunne det observere at dehadde forskjellige aromatiske deler. To sett med ABX-koblede aromatiske ringer og enmetoksygruppe kunne påvises i1H- (Figur S9) og13C-NMR (Figur S10) dataav2 (Bord1), og den foreslo den forbindelsen2 hadde to trisubstituerte i stedet forpara-disubstituerte aromatiske deler. De signifikante HMBC-korrelasjonene (Figur S11) fraH-3 til C-1, C-5 og C-7; fra H-6 til C-4; fra OCH3-30 til C-30 ; fra H-60 til C-40 ogC-70; fra H-70 til C-10 , C-20 , C-80 og 90 ; fra H-80 til C-1, henholdsvis etablerte detstrukturen til2 var også et neolignan-skjelett. Gjennom en kombinasjon av en stor koblingkonstant (J7,8 = 5.2 Hz) og positiv bomullseffekt ved 230 nm (∆ε pluss 1,14), den absoluttekonfigurasjon av2 ble tildelt somtre- og (70 R,80 S)-form, det samme som1 [44,45]. Annen2D-spektra (figur S12–S14) ga den fulle tilordningen av proton- og karbonsignaler.Disse funnene konkluderte med strukturen til2 som 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksy-70 -(4-hydroksy-3-metoksyfenyl)propan-80 -yloksy]-2-hydroksybenzosyre (figur1). 

Sammensatt3 ble oppnådd som et fargeløst pulver og dets molekylformel vartildelt som C20H30O5 på grunnlag av HR-ESI-MS analytiske data (m/z 349.2024 [M − H]−, Figur S15). Sammensatt3 viste absorpsjonstopper ved 3450 (OH) og 1648 (karboksylsyre)syre) cm−1 i sitt IR-spekter. Det ble bevist av13C-NMR-spektrum (figur S16) inhvor to karboksylfunksjoner ble observert vedδC 167,2 (C-15) og 181,5 (C-19). Idet er1H-NMR (Figur S17), resonansene vedδH 4,03 (1H, dd,J = 9.2, 2,8 Hz, H-12) ogδC 75,5 (C-12) indikerte tilstedeværelsen av en sekundær alkoholgruppe. Den terminale metylengruppe kunne etableres på grunn av protonresonansene klδH 4,53 (1H, s, H-17a) og4,91 (1H, s, H-17b), og karbonsignalene vedδC 106,9 (C-17) og 150,2 (C-8), henholdsvis.To metylgrupper vedδH 0.63 (3H, s, CH3-20) og 1,21 (3H, s, CH3-18) ble koblet tilde kvartære karbonene (C-10 og C-4) dokumentert av HMBC-korrelasjonene (Figur S18).Skjermingseffekten til karboksylgruppen ved C-4 resulterte i oppoverfeltforskyvningen av CH3-20 (δH 0.63), som foreslår dens-konfigurasjon [46]. I tillegg er det kjemiske skiftet til H-17a (δH 4.53) dukket opp i oppmarksregionen, noe som antydet de 12R konfigurasjon [47]. I sin HMBCspektrum, korrelasjonene fra H-12 til C-9, C-14 og C-16; fra H-17 til C-7 og C-9;fra CH3-16 til C-12 og C-14; fra CH3-18 til C-3, C-4 og C-19; fra CH3-20 til C-1, C-5,C-9 og C-10, henholdsvis, konstruerte den plane strukturen til3 som tidligere rapportertfor 12-hydroksyagatsyre [46]. Imidlertid er C-13-konfigurasjonen av3 var bestemtsomE av NOESY-analytiske data (Figur S19), som viste NOE-effektene blantH-5/H-9, H-5/H-18 og H-12/H-14. Dessuten er NOE mellom H-14 og CH3-16, som skal registreres i 12-hydroksyagatsyre [46], ble ikke oppdaget i3. Annen2D-spektra (Figur S20–S21) leverte hele tilordningen av proton- og karbonsignaler.Avslutningsvis er strukturen til3 ble etablert som (13E,12R)-12-hydroksyagatinsyre asvist (figur1).

HR-ESI-MS-spekteret til4 viste en [M− H]− ionetopp klm/z 181.0855 (Figur S22), i samsvar med den pseudomolekylære formelen til C10H13O3. Absorpsjonentopper på 3456 og 1635 cm-1 i sitt IR-spektrum viste hydroksyl og konjugert karbonylhenholdsvis grupper. To metinprotoner klδH 2,09 (1H, m, H-5) og 6,32 (1H, dd,J = 2.4, 1,2 Hz, H-2), to metylengrupper vedδH 1.84 (1H, m, H-4a), 2.02 (1H, m, H-4b), 2.50 (1H, dddd,J = 19.2, 9.2, 4.8, 2.4 Hz, H-6a) og 2.70 (1H, dddd,J = 19.2, 5.2, 5.2, 1.2 Hz,H-6b), og ett sett med isopropylprotoner vedδH 0.88 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-9), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-10) og 2,31 (1H, hept,J = 6.8 Hz, H-8) dukket opp i1H-NMR-spektrumav4 (Figur S23). I tillegg er ett konjugert karbonylkarbon vedδC 174,8 (C-7), og énkarboksylkarbon vedδC 205.7 (C-3) kunne observeres i sin13C- og DEPT NMR-spektra(Figur S24). De observerte HMBC-korrelasjonene (figur S25) fra H-2 til C-7; fra H-4 tilC-3; fra H-6 til C-1, C-2 og C-5; fra CH3-9 til C-5 og CH3-10; fra CH3-10 til C-8,henholdsvis konstruert strukturen av4 som 5-isopropyl-3-oksocykloheks-1-en-1-karboksylsyresyre (figur1). Andre 2D-spektre (Figur S26–S28) ga hele tildelingen av protonog karbonsignaler. Imidlertid forble stereokjemien ved C-5 ubestemt.

Sammensatt5 hadde molekylformelen C11H14O5 bestemt fra en deprotonertmolekylær ionetopp i negativ modus HR-ESI-MS-analyse (m/z 225.0767 [M − H]−, FigurS29). I sitt IR-spektrum, hydroksyl (3421 cm−1 ) og karboksyl (1572 cm−1 ) funksjoner kunne oppdages. De1H-NMR-spektrum (figur S30) avslørte to langdistansekobling av aromatiske protoner vedδH 6.86 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-4) og 7.31 (1H, d,J = 2.4 Hz, H-6), én metoksygruppe vedδH 3.56 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-9), og ett sett medpropanolprotoner vedδH 1,82 (2H, tt,J {{0}},0, 6,8 Hz, H-8), 2,61 (2H, t,J {{0}},0 Hz, H-7) og 3,56(2H, t, J = 6,8 Hz, H-9). Dessuten var en karboksylgruppe lokalisert vedδC 176,2 (C-10) indet er13C-NMR-spektrum (figur S31). Den plane strukturen til5 ble etablert av den betydeligeHMBC-korrelasjoner (Figur S32) av OCH3-3 til C-3; H-6 til C-2, C-4, C-7 og C-10; H-7til C-4, C-5 og C-8; H-9 til henholdsvis C-7 og C-8. Andre 2D-spektre (Figur S33–S35)levert hele tildelingen av proton- og karbonsignaler. Ovennevnte bevis tyder påstrukturen til5 som 2-hydroksy-5-(3-hydroksypropyl)-3-metoksybenzosyre (figur1), som allerede ble rapportert som styraksinolsyre i tidligere syntetisk litteratur [48]. Likevel er denne forskningen den første rapporten av5 fra naturlige kilder.

3.2. Anti-inflammatorisk aktivitet

Betennelse er en av de viktigste selvforsvarsmekanismene som stimuleres av bakterier,virus, sår eller forskjellige andre miljøfaktorer. Det er en første respons fra immunforsvaretsystem mot infeksjon og irritasjon. Nøytrofiler tilhører en rikelig typeav makrofager og spiller en stor rolle i betennelse, og er vanligvis den første lymfencytter for å nå den infiserte regionen [49]. Nøytrofiler skiller ut en rekke cellegifter som f.ekssuperoksidanion og elastase som respons på aktivering av immunsystemet [50]. Ide siste årene har forskjellige menneskelige sykdommer vist seg å være relatert til nøytrofileoveruttrykk [51–55]. Forholdet mellom betennelse og kreft er etablert, og forfatterne påpekte at dannelsen av kreftceller var direkte relaterttil betennelse [49]. Derfor er nye anti-inflammatoriske forbindelser verdt forvidere studier om kreftbehandling. Førti-tre isolerte forbindelser ble evaluert forhemming av superoksidaniongenerering og elastasefrigjøring av humane nøytrofilersom svar på fMLF/CB [56] (se tilleggsmaterialer, tabell S2). Det betydelige ihindrende resultater (tabell2) viste bare det45, 47, 48, 49, og50 (Figur2) visesen betydelig hemming av superoksidaniongenerering, med IC50 verdier fra3.3 ± 0.9 til7.7 ± 0.9 µM sammenlignet med den positive kontrollen LY294002 (IC50 1.1 ± 0.3 µM). Dessuten,48, 50, og51 (Figur2) avslørte den signifikante inhiberingen av elastasefrigjøringmed IC50 verdier fra 5,3± 0.2 til 8.3± 0.8 µM sammenlignet med det positivekontroll LY294002 (IC50 3.2 ± 1.0 µM) (Tabell2). Forbindelser48 og50 viste beggehemninger av superoksidaniongenerering og elastasefrigjøring, noe som indikerer deres multipleantiinflammatoriske bioaktiviteter. Nålene tilP. morrisonicolahar blitt rapportert å haen anti-inflammatorisk effekt i RAW 264.7 makrofager [13]. Forfatterne foreslo detepicatechin ogp-kumarsyre identifisert iP. morrisonicolakan være de aktive ingrediensene.I den nåværende forskningen inneholdt alle de aktive forbindelsene lignende flavonryggradtil epicatechin ogp-coumaroyl-delen kan også observeres i49, 50, og51. Dette indikerer at flflavonoiden ogp-coumaroyl funksjonelle grupper kan bidraden antiinflammatoriske bioaktiviteten i denne studien. Disse bioassay-resultatene tyder på detflavonoider spiller nøkkelroller iPinusarter for anti-inflammasjon bioaktivitet.

Tabell 2.Inhiberende effekter av rensede forbindelser på superoksidaniongenerering og elastasefrigjøringav humane nøytrofiler som respons på fMLF/CB.

Figur 2.Strukturer av antiinflammatoriske prinsipper45, 47, 48, 49, 50, og51. 

3.3. Molekylær dokkingstudie

Den aldersrelaterte nedgangen i GH-nivåer anses å være et symptom på nevroendokrinealdring [57]. Dette fenomenet eksisterer i flere pattedyrarter som mennesker, husdyrhunder og laboratoriegnagere [57]. Hos mennesker begynner GH-nivåene i plasma å synkemed alderen etter full fysisk modning og fortsetter i løpet av tiårene av livet [57]. Ghrelin er identifisert som den endogene liganden for GHSR og er en hovedregulator avGH-sekresjon [18,19]. Ghrelin er involvert i ulike fysiologiske og patofysiologiskemekanismer hos mennesker som aldring [24,25]. I tillegg kan det tenkes ghrelinvære relatert til den antiinflammatoriske aktiviteten. Aktivering av immunceller ble begrenset av ghrelinbehandling gjennom hemming av NF-κB-aktivering og påfølgende MCP-1-sekresjon [26]. Et syntetisk ghrelinanalog veksthormonfrigjørende peptid-2 (GHRP-2) ble rapportertå redusere de inflammatoriske faktorene hos artrittrotter, og det støtter at immuncelleneble mediert av aktivering av ghrelinreseptorer [27]. Neves et al. også foreslåttregulering av betennelse som en anti-aldringsintervensjon [58]. Således, ifølgeeksperimentelle data fra antiinflammatorisk bioassay,45, 47, 48, 49, 50, og51 (Figur2) vistesignifikante hemmende effekter og ble valgt for å bestemme deres bindingsevner tilghrelin reseptor. Før dokkingsimulering ble den native liganden (8QX) inkludert i 6KO5PDB-filen ble dokket på nytt for validering. Interaksjonene mellom 8QX og 6KO5 ogbeste positur av beregnede resultater viste høy likhet og repeterbarhet med native data(data ikke vist). Resultatene indikerer den høye nøyaktigheten til det eksisterende simuleringssystemetog støttet ytterligere databehandling.

Den laveste bindingsenergien til hver ligand ble ansett som den beste konformasjonen. Debindingsaffiniteter er oppført i tabell3. Veksthormonfrigjørende peptid 6 (GHRP-6) varbrukes som en positiv kontroll for dokking til bindingslommen til ghrelinreseptoren som i vårforrige rapport. Selv om AutoDock Vina ikke er konstruert for dokking mellom peptiderog proteiner, har flere vellykkede resultater blitt publisert i tidligere rapporter [59–61]. Derfor, i denne studien, ble GHRP-6 først beregnet for å bestemme nøyaktigheten tildagens dokkingmodell og resultatene falt godt sammen (figur3EN). Sammenlignet med GHRP-6,bindingsenergiene til49, 50, og51 var lavere enn−10,3 kcal/mol (tabell3). Detteforeslår det49, 50, og51 kunne dokke inn i lommen på ghrelinreseptoren lignende ellerenda bedre enn GHRP-6. Til49, kunne hydrogenbindingene observeres mellomto karbonylgrupper (C-4 ogp-coumaroyl) og Arg283, C-5 hydroksyl og Gln120,C-7 hydroksyl og Tyr313, og C-40 henholdsvis hydroksyl og Cys304. Arg199 dannet enkonvensjonell hydrogenbinding med en karbonylgruppe påp-kumaroyl. I tillegg,49 varknyttet til Arg283, Arg102, Asp99, Phe279, Phe312, Leu181 og Pro200-restene tilghrelinreseptoren via forskjellige effekter som f.eksπ-kation,π-anion,π–π T-formet, ogπ-alkyl-interaksjoner. Disse tillot sammensatte49 og protein for å danne et stabilt kompleks(Figur3B). 50 ble bundet med Asp99, Arg102, Gln120, Arg283, Leu103, Asn305 ogArg199 gjennom forskjellige hydrogenbindinger, mens andre interaksjoner (π-kation,π-anion,π–π T-formet, ogπ–alkyl) ble også observert med Asp99, Arg102, Arg283, Phe279, Phe312,Leu181 og Leu210 (figur3C). 51 også etablert hydrogen- eller karbon-hydrogenbindingermed Tyr313, Ser123, Arg283, Arg102 og Asn305, sammen med andre interaksjoner (π-kation,π-anion,π-sigma,π–π T-formet, ogπ-alkyl) for å koble til Asp99, Arg283, Arg102, Leu181,Phe312- og Pro200-rester av ghrelinreseptor kunne påvises (figur3D). Sammenlignet medforbindelser45, 47, og48 med49, 50, og51, hadde den førstnevnte gruppen en flflavonoidbare skjelett mens den sistnevnte gruppen hadde sukker- og kumaroylgrupper. Det ble rapportert atkumaroylgruppen festet på sukkeret var avgjørende for bindingsaffiniteten til ghrelinetreseptor [34]. Gapetstrukturen til GHSR som interagerer med acylsyredelen av ghrelinresulterte i transformasjonen av ghrelinreseptoren til en aktiv konfigurasjon [43]. Dessuten er bindingslommen til GHSR todelt av saltbroen mellom Glu124og Arg283, og denne regionen er rik på hydrofobe aminosyrer [43]. I følge vårdata, dokkingskårene til49, 50, og51 var høyere enn de av45, 47, og48, hvilkenforeslått en bedre bindingsevne. De viktigste strukturelle egenskapene varkumaroylgrupper i stedet for sukkerdelene, og dette kan bevises ytterligere avundersøkelse av flere forbindelser som har kumaroylfunksjonaliteter. I denne studien haraktive ingredienser49, 50, og51 hadde ikke bare anti-inflammatorisk bioaktivitet, men ogsåghrelinreseptorens bindingspotensial. Dette indikerte at de påståtte anti-aldringseffektene avfuru nål te kan også være basert på disse te ghrelin-lignende forbindelser.

4. Konklusjoner

Totalt syttisju isolater bestående av femten ubeskrevne forbindelser ble rensetverifisert fra metanolekstraktene avP. taiwanensisnåler. Deres strukturer ble pregetgjennom spektroskopiske og spektrometriske analyser. Førti-tre rensede forbindelser varundersøkt for deresanti-inflammatorisk aktivitetvedhemming av superoksidaniongenereringogelastasefrigjøring på nøytrofilmodellen. Resultatene tyder på det45, 47, 48, 49, 50, og51 besitter betydeliganti-inflammatorisk potensial. Ytterligere molekylær dokkingdatabehandlingsresultater støttes49, 50, og51 viser en bindingsaffinitet til det aktivelomme til ghrelinreseptoren. Derfor er råekstrakter og rensede bestanddeler avP. taiwanensishar potensial til å bli utviklet som nye antiinflammatoriske ledende legemidler ellermat ingredienser.

Tilleggsmaterialer:Følgende er tilgjengelig online på, Vedlegg A: Fullstendige ekstraksjons- og isolasjonsprosedyrer,Vedlegg B: Referanserav kjente forbindelser, Tabell S1: Foreløpig bioaktivitetsscreening av nåler avP. taiwanensispå superoksidaniongenerering og elastasefrigjøring av humane nøytrofiler som respons på fMLF/CB,Tabell S2: Inhiberende effekter av rensede forbindelser på superoksidaniongenerering og elastasefrigjøring av humane nøytrofiler som respons på fMLF/CB, figur S1–S35: HRMS- og NMR-spektra avnye forbindelser

1–5. Forfatterbidrag:Konseptualisering, P.-CK og JTCT; Metodikk, P.-CK og T.-LH;Utredning, Y.-CL, AMK og M.-LY; Ressurser, S.-YW; Datakurering, Y.-CL og G.-HY;Skriving—originalt utkast til utarbeidelse, P.-CK og Y.-CL; Skriving – gjennomgang og redigering, P.-CK Alleforfattere har lest og godtatt den publiserte versjonen av manuskriptet.

Finansiering:Denne studien ble sponset av departementet for vitenskap og teknologi, Taiwan (MOST). Deforskning ble delvis støttet av Higher Education Sprout Project, Kunnskapsdepartementet tilHovedkvarter for University Advancement ved National Cheng Kung University (NCKU).

Uttalelse fra institusjonell revisjonskomité:Studien ble utført med godkjenning fra institusjonenReview Board of Chang Gung Memorial Hospital (IRB nr. 201800369A3).Erklæring om informert samtykke:Uttalelsen kan leveres på forespørsel.

Datatilgjengelighetserklæring:Originaldata kan fås fra den tilsvarende forfatteren på forespørsel.

Anerkjennelser:Forfatterne er også takknemlige overfor Chang Gung Memorial Hospital (CMRPD1B0281~3,CMRPF1D0442~3, CMRPF 1F0011~3, CMRPF1F0061~3 og BMRP450 tildelt T.-LH) fordelvis økonomisk støtte til denne forskningen. Forfatterne takker for bruken av NMRutstyr som tilhører Instrument Center ved National Cheng Kung University.

Interessekonflikter:Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.

Referanser

1. Xie, Q.; Liu, Z.; Li, Z. Kjemisk sammensetning og antioksidant aktivitet av eterisk olje av seksPinustaxa hjemmehørende i Kina.Molekyler2015, 20, 9380–9392. [Kryssref] 

2. Kim, KY; Chung, HJ Smakforbindelser av furuspire-te og furu-nålte.J. Agric. Food Chem.2000, 48, 1269–1272. [Kryssref] 

3. Park, G.; Paudyal, DP; Hwang, I.; Tripathi, GR; Yang, Y.; Cheong, H. Produksjon av fermenterte nåleekstrakter fra rød furu ogderes funksjonelle karakterisering.Bioteknologi. Bioprosess Eng.2008, 13, 256. [Kryssref]

4. Idžojti´c, M.; Kajba, D.; Franji´c, J. Differensiering av F1-hybriderP. nigraJF Arnold× P. sylvestrisL., P. nigraJF Arnold× P. densifloraSiebold et Zucc.,P. nigraJF Arnold× P. thunbergianaFranco og deres foreldrearter etter nålflyktig sammensetning.Biochem.Syst. Ecol.2005, 33, 427–439. [Kryssref] 

5. Kim, YS; Shin, DH Flyktige komponenter og antibakterielle effekter av furunål (Pinus densiflfloraS. og Z.) ekstrakter.Food Microbiol.2005, 22, 37–45. [Kryssref] 

6. Dob, T.; Berramdane, T. Eterisk oljesammensetning avPinus halepensisMølle. fra tre forskjellige regioner i Algerie.J. Essent. Olje Res.2007, 19, 40–43. [Kryssref] 

7. Nam, AM; Tomi, F.; Gibernau, M.; Casanova, J.; Bighelli, A. Sammensetning og kjemisk variabilitet av nåleoljen fraPinus halepensisvokser på Korsika.Chem. Biologiske dykkere.2016, 13, 380–386. [Kryssref] 

8. Sezik, E.; Üstün, O.; Demirci, B.; Ba¸ser, KHC Sammensetning av essensielle oljer avPinus nigraArnold fra Tyrkia.Turk. J. Chem.2010, 34, 313–325.