Forskningsfremgang og anvendelse i fingeravtrykkteknologi på kinesisk materia Medica Ⅱ

1.2 Elektrokjemisk fingeravtrykk

Elektrokjemi er en enkel analysemetode basert på de elektrokjemiske egenskapene og prinsippene til stoffet som skal testes, som er rimelig, svært sensitivt og krever få forbruksvarer [19]. Denne metoden har imidlertid visse begrensninger og er for tiden hovedsakelig anvendelig for analyse av kinesiske medisiner som inneholder kjemiske komponenter som terpener (som Angelica sinensis), flavonoider (som Scutellaria baicalensis), alkaloider (som Aconite) og antrakinoner ( som Rabarbra) som kan gjennomgå elektrokjemiske reaksjoner.

Wu Di et al. [20] brukte et elektrokjemisk fingeravtrykk for å etablere den optimale utvinningsprosessen av Scutellaria baicalensis Georgi, og ga en god metode for rasjonell bruk av kinesiske medisinske materialer. Shi Huihui et al. [21] brukte Belousov-Chabotinsky (BZ) reaksjonskjemisk oscillasjonsteknologi for å undersøke effekten av temperatur, rotasjonshastighet og antall medisinske materialer lagt til de eksperimentelle resultatene og etablerte rimelige eksperimentelle forhold for å oppnå det elektrokjemiske fingeravtrykket til Magnolia biondii Pamp ., gir en ny metode for kvalitetskontroll av Magnolia biondii. Zou Guihua et al. [22] etablerte det ikke-lineære elektrokjemiske fingeravtrykket til Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. Og Gentiana macrophylla Pall. De elektrokjemiske fingeravtrykkene til de to medisinske materialene er visuelt forskjellige, noe som kan brukes som en enkel og effektiv metode for å skille Codonopsis pilosula fra Gentiana macrophylla. Dai Hongxia et al. [23] utførte en elektrokjemisk analyse på 20 partier Angelica sinensis (Oliv.) Diels med en vekstperiode på 1, 2 og 3 år. Kombinert med hovedkomponentanalyse, ble det funnet at de elektrokjemiske fingeravtrykkene og oscillasjonsparametrene (inkludert oscillasjonsinduksjonstid, maksimalt potensial, oscillasjonslevetid, maksimal amplitude, stopppotensial og antall sykluser) til Angelica sinensis ved forskjellige vekstperioder var signifikant forskjellige, som kan brukes som grunnlag for å identifisere Angelica sinensis i ulike perioder.

KINESISK MATERIALMEDISISK URT CISTANCHE HPLC Fingeravtrykk

1.3 Kromatografisk fingeravtrykk

1.3.1 Tynnsjiktskromatografi

Tynnsjiktskromatografi er en kromatografisk metode som oppnår separasjon ved å stole på de forskjellige adsorpsjonskapasitetene til samme adsorbent for forskjellige kjemiske komponenter. Det er den mest brukte metoden for å identifisere tradisjonelle kinesiske medisiner, med fordelene av enkel betjening, enkelt utstyr, god følsomhet, høy sammenlignbarhet, sterk spesifisitet og enkel fargeutvikling. Ektheten til det medisinske materialet kan bestemmes av tilstedeværelsen eller fraværet av flekker på den tynne lagplaten. Dybden og størrelsen på fargen på flekkene kan til en viss grad gjenspeile kvaliteten på det medisinske materialet[24]. Foreløpig høyytelses tynnsjiktskromatografi(HPTLC) brukes ofte til å erstatte høyytelses væskekromatografi (HPLC) for å kvalitativt og kvantitativt identifisere tradisjonelle kinesiske medisinprodukter på grunn av dens enkelhet, nøyaktighet, lave kostnader, høy effektivitet og hurtighet. HPTLC-fingeravtrykk har bedre oppløsning og kan rimelig og nøyaktig estimere de aktive ingrediensene i legemidlet på kortere tid[25]. Men på grunn av det store antallet påvirkningsfaktorer (fuktighet, temperatur osv.), er reproduserbarheten av resultatene dårlig sammenlignet med HPLC. Loescher et al. [26] brukte HPLC og HPTLC for å analysere ekstraktet av Calendula officinalis og fant ut at HPLC var mer egnet for kvantitativ analyse enn HPTLC.

Som svar på denne effekten, Li Xiangjun et al. [27] laget en serie tilsvarende løsninger, inkludert å utføre utviklingseksperimentet i et kjøleskap eller en forseglet temperaturkontrollert enhet for å redusere påvirkningen av temperaturen og tilsette forskjellige proporsjoner svovelsyre i den ene enden av fremkallingssylinderen for å kontrollere fuktigheten.

KINESISK MATERIALE MEDISINSK URT CISTANCHE HPLC LABEL

Patil et al. [28] etablerte HPTLC-fingeravtrykket til petroleumseterekstraktet av Catsia tora Linn. Resultatene viste at bladene, frøene og blomstene inneholdt henholdsvis 10, 7 og 11 typer ingredienser. Denne metoden kan brukes til å identifisere ektheten til Catsia tora Linn. Xiao Honghua et al. [29] brukte tynnsjiktskromatografi kombinert med massespektrometri for å etablere et tynnsjiktskromatografisk fingeravtrykk av kromoner, organiske syrer og triterpenoidsaponiner i Cimicifuga foetida L., og utførte likhetsanalyse, klyngeanalyse og hovedkomponentanalyse på 16 batcher av Cimicifuga-prøver fra fem kilder, gir grunnlag for kvalitetskontrollen av Cimicifuga.

Guzelmeric et al. [30] brukte etylacetat-maursyre-eddiksyre-vann (30:1.5:1.5:3) som utviklingsløsningsmiddel for å utvikle HPTLC-fingeravtrykket til apigenin-7-glukosid, en aktiv markør for Matricaria chamomilla L., som kan brukes som en hovedveiledning for kvalitetsvurdering av kamille. Bazylko et al. [31] etablerte HPTLC-fingeravtrykket til fem flavonoidforbindelser, nemlig tagetoides, quercetin, flavonoider, koffeinsyre og klorogensyre, fra Galinsoga parviflora Cav. Denne metoden kan brukes til å identifisere Galinsoga parviflora. Etanolic et al. [32] etablerte fingeravtrykket til etanolekstraktet av Acacia catechu (L. f.) Willd. Ved å bruke HPTLC utførte en enkel og rask kvantitativ evaluering av rutin og quercetin i ekstraktet. Agatonovic-Kustrin et al. [33] brukte HPTLC for å kvantitativt analysere apigenin, Matricaria og bisabolol i blad- og blomsterekstraktene av Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. og Calendula officinalis L., kombinerte det med DPPH-metoden for å sammenligne antioksidanten kapasiteten til disse komponentene. Denne metoden er enkel, rask, pålitelig og rimelig, og kan også brukes til å screene antioksidantaktiviteten til planteekstrakter.

1.3.2 HPLC-metode HPLC er en universell analysemetode for å påvise ulike kjemiske komponenter i tradisjonell kinesisk medisin.

Det er mye brukt i påvisning av kjemiske komponenter i tradisjonell kinesisk medisin på grunn av fordelene med høyt trykk, høy følsomhet, høy effektivitet og automatisering [34]. UV-detektoren, diode array-detektoren (DAD), elektrokjemisk detektor, fordampningslysdetektor osv. som kan kobles til det hele viser sin uerstattelige overlegenhet.

Qiao et al. [35] brukte reversert fase × reversert fase omfattende todimensjonal væskekromatografi (RP × RP 2DLC) for å separere fenolforbindelsene oppnådd ved etylacetatekstraksjon av lakris Glycyrrhiza uralensis Fisch.

311 forbindelser ble oppdaget innen 40 minutter, og strukturene til 21 ukjente forbindelser ble preliminært karakterisert ved massespektrometri, og 8 av dem ble funnet i lakris for første gang. Resultatene viste at RP×RP2DLC/MS-systemet har god effekt på separasjon av komplekse tradisjonell kinesisk medisinekstrakter og kvalitativ analyse av naturprodukter. Peng Liang et al. [36] analyserte flavonoidkomponentene til 10 partier av Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino etablerte HPLC-fingeravtrykket til Gynostemma pentaphyllum og kalibrerte 11 vanlige karakteristiske topper. Likhetsanalyseresultatene viste at den høyeste likheten av 10-gruppene av Gynostemma pentaphyllum-fingeravtrykk i forhold til referansespekteret var 0,989, og den laveste var 0,128, noe som indikerer at flavonoidkomponentene til Gynostemma pentaphyllum fra forskjellige opphav var like i type, men hadde betydelige forskjeller i innhold. Sun et al. [37] brukte HPLC-DAD-metoden for å analysere likheten mellom de kjemiske komponentene i Bupleurum chinense DC. og B. scorzonerifolium Willd. For første gang, og fant ut at de to hadde henholdsvis 12 vanlige flavonoidtopper og 4 saponintopper, og samtidig hadde hver henholdsvis 6 unike flavonoidtopper og 5 saponintopper. Resultatene viste at denne metoden rimelig og effektivt kan reflektere forskjellen i kjemiske komponenter mellom Bupleurum og Bupleurum chinense. Sammenhengen mellom de to er dårlig. Derfor bør Bupleurum chinense brukes med forsiktighet i klinisk praksis. Han et al. [38] kvantitativt analyserte 10 typer bioaktiv gallussyre, klorogensyre, koffein og katekiner inneholdt i 10 partier av Ziyang grønn te. HPLC-fingeravtrykket som ble utviklet var enkelt og pålitelig. Li et al. [39] etablerte HPLC-fingeravtrykket til granatepleskall. De valgte 15 karakteristiske topper og evaluerte likheten til 10 partier med granatepleskall til å være 0,968. De har også separert og kvantitativt analysert punicalagin, gallussyre, katekin, klorogensyre, koffeinsyre, epicatechin, rutin og ellaginsyre inneholdt i den, og ga en pålitelig og effektiv metode for å identifisere ektheten og kvalitetskontrollen av granatepleskall. Sumathy et al. [1] brukte HPLC kombinert med HPTLC og gasskromatografi-massespektrometri (GC-MS) for å bestemme den kjemiske sammensetningen av metanolekstraktet av Ixora chinensis Lam. HPLC-analyse viste tilstedeværelsen av biokin A, myricetin, quercetin, rutin, daidzein og formononetin; ursolsyre ble funnet i HPTLC-fingeravtrykket; 24 fytokjemiske komponenter ble funnet av GC-MS; denne kombinerte kvalitative og kvantitative metoden kan enkelt evaluere kvaliteten og stabiliteten til Ixora chinensis Lam. Ge et al. [40] etablerte UHPLC-DAD-fingeravtrykket til Radix Angelicae Pubescentis, analyserte kvantitativt kumarinene og fenolsyrene inneholdt i Radix Angelicae Pubescentis, og identifiserte kvalitativt dets aktive ingredienser ved bruk av quadrupol-time of flight massespektrometri (Q-TOF-MS). De fant 9 fenolsyrer, 30 kumariner og 41 forbindelser av myrra og adenosin. De kombinerte den diskriminerende analysemetoden for å effektivt og raskt skille 32 partier av Radix Angelicae Pubescentis fra forskjellige provinser. Denne metoden gir en ny idé for kvalitetskontrollen av Radix Angelicae Pubescentis.

CISTANCHE SPESIFIKASJONSLISTE

Yang et al. [41] brukte ultrahøyytelses væskekromatografi (UPLC)-DAD-detektor og ESI-MS-teknologi for å oppnå henholdsvis HPLC-fingeravtrykk og massespektrometri-fingeravtrykk til Xiaoyanlidan-tabletter. De analyserte 113 prøver av Xiaoyanlidan-tabletter og oppnådde 39 topper, hvorav 26 var fra Quassia, 9 fra Andrographis paniculata og 4 fra Rhizoma Cynoglossi. Ved å bruke de kjeometriske metodene for likhet og PCA, bestemte de at de fem signifikante komponentene var 4-metoksy-5-hydroksyferrocefalostomon, andrografolid, dehydroandrografolid, neoandrografolid og rosmarinsyre. De etablerte et systematisk og omfattende fingeravtrykk for å forbedre og evaluere kvaliteten på Xiaoyanlidan-tabletter. Fan et al. [42] etablerte HPLC- og UPLC-fingeravtrykk av flavonoidglykosider i Lophatherum gracile Brongn., og isolerte en ny flavonoid C-glykosid luteolin 6-C- -D-glukuronsyre-(1→2){{19 }}D-pyranoglukosid for første gang. De oppdaget også de optiske isomerene av to forbindelser, flavonoid flavonoid og flavonoid hydroxyflavonoid, for første gang. De brukte endimensjonal og todimensjonal kjernemagnetisk resonans og massespektrometri for å skille og bestemme strukturene deres, og ga en ny metode for kvalitetskontroll av Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu et al. [43] brukte HPLC-DAD kombinert med tynnsjiktskromatografi, kjernemagnetisk resonans og massespektrometri for effektivt å skille de viktigste biflavonoidforbindelsene GB1, GB2, GB-1a og flavonoider fra Garcinia kola Linn., og bekreftet deres strukturer. , som kan brukes som rutineanalysemetode for farmasøytiske preparater. Zhao et al. [44] etablerte HPLC-UV-MS-fingeravtrykket til Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, kvantitativt bestemt andrographolide og dehydroandrographolide inneholdt i Andrographis paniculata, og evaluerte forskjellene mellom 10 batcher av Andrographis paniculata-likhet ved å kombinere analyse og PCA. Denne metoden gir grunnlag for kvalitetskontrollen av Andrographis paniculata.

Ahmed et al. [45] brukte HPLC for å få fingeravtrykket til Commiphora wightii (Arn.) Bhandari-harpiks, og analyserte kvantitativt trans- og cis-sterolonet i det. Samtidig kan denne metoden effektivt skille 22 partier av Commiphora wightii-harpiks og 9 partier med forfalsket harpiks, som kan brukes som en metode for å identifisere ektheten til Commiphora wightii-harpiks.

2 biologiske fingeravtrykk

Biologiske fingeravtrykk er bruken av gensekvensanalysemetoder på molekylært nivå for å skille og klassifisere den geografiske distribusjonen og endringer i kinesiske medisinske materialer, inkludert genomiske fingeravtrykk, proteomiske fingeravtrykk[60] og DNA-fingeravtrykk[61]. For tiden er det færre studier på biologiske fingeravtrykk av kinesiske medisiner enn kjemiske fingeravtrykk. De mest brukte metodene er polyakrylamidgelelektroforese (PAGE), tilfeldig amplifisert polymorf DNA molekylær markørteknologi (RAPD), polymerasekjedereaksjon.

(PCR) og andre metoder.

Liu Li et al. [62] brukte RAPD-markører, kombinert med PCR og klyngeanalyse, for effektivt å identifisere Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey., og amerikansk ginseng Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] etablerte først SDS-PAGE-proteinfingeravtrykket til Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus, og Scolopendra subsidierer mutilans L. Koch, og gir en pålitelig og effektiv metode for identifisering av disse tre medisinske materialene. Wei Yicong et al. [64] designet dual-site spesifikke primere og konstruerte en multipleks PCR. Den raske identifiseringen av to medisinske materialer, Houttuynia cordata Thunb. Og Gymnotheca chinensis Decne., kan samtidig identifisere de to artene positivt og bestemme om de er blandet. Wang Fu et al. [65] brukte ITS2-sekvensen (internt transkribert spacer 2) som en DNA-strekkode for nøyaktig å identifisere den kinesiske medisinen, Zanthoxylumbungeanum Maxim. Og dets krydder Zanthoxylumbungeanum Maxim., som gir grunnlag for identifikasjon av kinesisk medisin Zanthoxylumbungeanum og krydderet Zanthoxylumbungeanum.