Coelomocytes Of The Oligochaeta Earthworm Lumbricus Terrestris (Linnaeus, 1758) Som evolusjonær nøkkel til forsvar: En morfologisk studie

Abstrakt

Metazoer har flere mekanismer for indre forsvar for deres overlevelse. Det indre forsvarssystemet utviklet seg sammen med organismene. Annelidae har sirkulerende coelomocytter som utfører funksjoner som kan sammenlignes med de fagocytiske immuncellene til virveldyr. Flere studier har vist at disse cellene er involvert i fagocytose, opsonisering og patogengjenkjenningsprosesser. I likhet med virveldyrmakrofager, fanger eller innkapsler disse sirkulerende cellene som gjennomsyrer organer fra det coelomiske hulrommet patogener, reaktive oksygenarter (ROS) og nitrogenoksid (NO). Videre produserer de en rekke bioaktive proteiner involvert i immunrespons og utfører avgiftningsfunksjoner gjennom deres lysosomale system.

Kølomocytter kan også delta i litiske reaksjoner mot målceller og frigjøring av antimikrobielle peptider. Vår studie identifiserer immunhistokjemisk coelomocytter av Lumbricus terrestris spredt i epidermal og bindelaget nedenfor, både i det langsgående og i det glatte muskellaget, immunreaktivt for TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang. TLR2 og CD14 er ikke fullstendig kolokalisert med hverandre, noe som antyder at disse coelomocyttene kan tilhøre to distinkte familier. Uttrykket av disse immunmolekylene på Annelidae-coelomocytter bekrefter deres avgjørende rolle i det indre forsvarssystemet til disse Oligochaeta-protostomene, noe som antyder en fylogenetisk bevaring av disse reseptorene. Disse dataene kan gi ytterligere innsikt i forståelsen av det indre forsvarssystemet til Annelida og de komplekse mekanismene til immunsystemet hos virveldyr.

Coelomocytter er nært beslektet med immunitet. Coelomocytter er celler relatert til immunsystemet. De kan skille ut en rekke immunfaktorer, som cytokiner, interleukiner, antigener og antistoffer, for å regulere og forbedre kroppens immunforsvar.

Coelomocytter spiller en rekke immunfunksjoner, inkludert å regulere cellulære immunresponser som antigenpresenterende celler, direkte drepe patogener og unormale celler, og delta i reguleringen av betennelse og immunresponser. I tillegg har noen studier vist at coelomocytter også kan forbedre immuniteten mot potensielle patogener ved å akkumulere immunminneceller, og dermed forbedre kroppens immunitet.

Derfor er det avgjørende for kroppens immunitet å opprettholde normal funksjon og mengde coelomocytter. Samtidig, ved å regulere og styrke immunfunksjonen til coelomocytter, kan kroppens immunitet også forbedres, for bedre å forebygge og behandle ulike sykdommer. Fra dette kan vi se viktigheten av immunitet. Cistanche kan forbedre immuniteten. Cistanche er rik på en rekke antioksidantstoffer, som vitamin C, vitamin C, karotenoider osv. Disse ingrediensene kan rense frie radikaler, redusere oksidativt stress og forbedre immuniteten. systemmotstand.

Klikk cistanche tubulosa fordeler

Nøkkelord

Annelid, Coelomocytes, Meitemark, Evolusjon, Immunitet.

Introduksjon

De indre forsvarsmekanismene tillater overlevelse av verten i metazoanen. Disse mekanismene blir stadig mer komplekse etter hvert som organismer utvikler seg. I motsetning til vertebrat-deuterostome mangler protostomer adaptiv immunitet, og baserer deres forsvar på medfødt immunitet [56]. Den første forsvarslinjen mot bakterier og mikroorganismer hos virveldyr er rask aktivering av medfødte immunceller og molekyler. Nylig har virvelløse dyr blitt kandidater for medfødt immunitetsanalyse for å avsløre strategier og kompleksiteter for adaptiv immunrespons hos virveldyr. Virvelløse dyr har utviklet en rekke aktive immunmekanismer inkludert produksjon av antimikrobielle peptider, koagulasjon, fagocytose og innkapslingsreaksjoner [20, 24]. Disse mekanismene er avhengige av "mønstergjenkjenningsreseptorer" (PRR), medfødte immunmolekyler som kan skille "selv" fra "ikke-selv" membrankomponenter.

Gjenkjennelsen av "patogen-assosierte molekylære mønstre" (PAMPs) regulerer starten på essensielle signalveier, opp til aktivering av gener som koder for inflammatoriske mediatorer, antimikrobielle peptider og fagocytoseregulatorer [32]. Oligochaetes annelids (meitemark) har blitt en modell for komparativ immunologi, og brukes, i likhet med igler, til jord- og vannmiljøbioovervåking (B.-T. [48, 52, 53, 72]. Meitemark er utstyrt med medfødt, høyt utviklet , og effektive forsvarsmekanismer mot farlige miljømikroorganismer. Den første mekanisk-biologiske forsvarslinjen som skiller kroppen av annelider fra det ytre miljøet er tegumentet, som består av en epidermis og muskellag. Den har en kutikula med et tynt lag av mukopolysakkarider og proteiner, som fungerer som en antimikrobiell barriere [20].

Hos meitemark jobber det cellulære og humorale immunsystemet sammen for første gang i metazoens utvikling. Væsken i det coelomiske hulrommet antas å være ansvarlig for humorale immunologiske aktiviteter. Det coelomiske hulrommet til meitemark er fylt med væsker som inneholder frie og vandrende coelomocytter og deres pigmenterte aggregater, kalt brune kropper, et produkt av innkapslingen av invaderende bakterier og partikkelrester. Flere biologiske prosesser, inkludert hemolytiske, proteolytiske, cytotoksiske og antibakterielle, utføres av den seelomiske væsken til meitemark [19, 24, 29]. Coelom kommuniserer direkte med det ytre miljøet gjennom dorsalporene og de koblede nefridiale tubuli, som skiller ut metabolittene. Disse porene er også involvert i eliminering av bakterier og utmattede coelomocytter. Under stressforhold kan den coelomiske væsken og de suspenderte cellene raskt utvises av økningen i intrakolonalt trykk [24].

Coelomocytter av meitemark er et viktig element i cellulær medfødt immunitet. Disse cellene ligner vertebrat-leukocytter både i morfologi og funksjon [33]. Coelomocytter utfører et bredt spekter av oppgaver, inkludert cellecytotoksisitet, innkapsling og fagocytose. De kan deles inn i to primære underpopulasjoner: melanocytter og amøbocytter (hyalin og granulære) [33]. Hyaline og granulære amøbocytter er involvert i fagocytose og innkapsling, og uttrykker ulike PRR [23, 60]. Disse sirkulerende cellene som migrerer inn i vev fra det coelomiske hulrommet ligner veldig på virveldyrmakrofager, som oppsluker eller innkapsler patogener, reaktive oksygenarter (ROS) og nitrogenoksid (NO) [39]. Eleocytter produserer et bredt spekter av bioaktive proteiner som er involvert i den humorale immunresponsen og som også avgifter kroppen gjennom deres lysosomale system [24]. Kølomocytter kan delta i litiske reaksjoner mot målceller og frigjøring av antimikrobielle peptider. Blant immunmekanismene har transplantasjonseksperimenter vist eksistensen av selvgjenkjenning hos meitemark [28].

Annelid-coelomocytter danner raskt immunmekanismer mot bakterier, parasitter og sopp gjennom cellulære reaksjoner [59]. Denne raske responsen formidles av løselige antibakterielle molekyler, som lysozym, lysenin og lubricin [22, 42, 68]. Svært konserverte immunologiske molekyler, som celleoverflateindikatorer, ble oppdaget på coelomocytter ved bruk av cytometri for analyse. Spesielt reagerte coelomocytter med pattedyrspesifikke antistoffer, og viste overfladisk positivitet til anti-CD11a, CD45RA, CD45RO, CDw49b, CD54, b2-M og Ty-1 [30, 34].

Vår studie tar sikte på å immunhistokjemisk evaluere tilstedeværelsen av TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang i coelomocytter av Lumbricus terrestris (Linnaeus, 1758), en bred, multi-segmentert, sylindrisk meitemark som tilhører familien Lumbricidae (Annelida, Oligochaeta) , hermafroditt, 8 til 10 cm lang [55]. Å forbedre kunnskapen om det indre forsvarssystemet hos virvelløse dyr kan hjelpe til med å forstå den mer sofistikerte immuniteten til virveldyr og følgelig utviklingen av immunresponsen [63].

Materialer og metoder

Prøver og vevsforberedelse

Lombricus terrestris-prøver kommer fra laboratoriet vårt histotheca. Tidligere ble de tatt i det uforurensede åpne feltet og akklimatisert i to uker i fersk jord, som rapportert av Licata et al. [51], og ble deretter fremstilt ved bruk av standardmetodene for lysmikroskopi. Prøver ble nedsenket i immun (paraformaldehyd 4 prosent) (05-W01030705, BioOptica Milano SpA, Milano, Italia) i to timer. Deretter ble de behandlet med en dehydrerende etanolskala (fra 30 til 100 prosent etanol), og deretter klargjort for inkludering i parafin ved bruk av xylen.

Når de var inkludert, ble to tynne seksjoner på 3–5 μm kuttet med en roterende mikrotom plassert på hvert objektglass.

Histologi

Morfologiske og histokjemiske flekker ble brukt til å behandle lysbildene [4, 6]. Skivene ble deretter rehydrert ved bruk av progressive alkoholløsninger (fra 100 til 30 prosent etanol), til destillert vann etter å ha blitt avparafinisert i xylen [17], G. [75], deretter ble de farget med Mallory trikrom og AB/PAS [3] . Etter farging ble objektglass montert ved bruk av Eukitt (BioOptica Milano SpA, Milano, Italia, Europa). Data om stammene brukt i denne studien er inkludert i tabell 1.

Immunfluorescens

Deparafniserte seksjoner ble behandlet med en 5 prosent løsning av natriumborhydrid for å eliminere autofluorescens, deretter ble en 2,5 prosent løsning av bovint serumalbumin (BSA) brukt, og deretter ble skivene inkubert over natten med primære antistoffer mot TLR2, CD14 og -Tubulin [40 ]. Deretter ble inkubasjonen av sekundære antistoffer utført. For å unngå bleking ble skivene montert ved bruk av Fluoromount™ Aqueous Mounting Medium (Sigma-Aldrich, Taufkirchen Tyskland, Europa). Eksperimenter ble kjørt uten de primære antistoffene som en negativ kontroll (data ikke vist). For å bekrefte at de primære antistoffene var immunopositive, ble rottehudvev brukt som en positiv kontroll (data ikke vist) [5, 47, 74].

Seksjonene ble analysert under et Zeiss LSM DUO konfokalt laserskanningsmikroskop med en META-modul (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, Jena, Tyskland, Europa) med helium-neon (543 nm) og argon (458 nm) lasere med forskjellige bølgelengder [7] . For å forbedre bilder ble Zen 2011 (LSM 700 Zeiss-programvare, Oberkochen, Tyskland, Europa) brukt. Ved å bruke Adobe Photoshop CC versjon 2019 (Adobe Systems, San Jose, CA, USA) ble de digitale bildene slått sammen til en sammensatt figur. Fluorescensintensitetskurvene ble deretter evaluert ved hjelp av Zen 2011 "Visningsprofil"-funksjonen [58]. Detaljer om antistoffer er oppsummert i tabell 2.

Kvantitativ analyse

Data ble samlet inn for den kvantitative analysen gjennom undersøkelse av ti seksjoner og tjue felt per prøve. Cellepositiviteten og antallet ble vurdert ved bruk av ImageJ-programvare 1.53e. Antallet coelomocytter som er positive for TLR2, CD14 og -Tubulin ble talt ved bruk av SigmaPlot versjon 14.0 (Systat Software, San Jose, CA, USA). De normalfordelte dataene ble analysert ved å bruke enveis ANOVA og en Students t-test. Gjennomsnittsverdier og standardavvik (SD) for antall immunreaktive seelomocytter er rapportert: ** p Mindre enn eller lik 0.01, * p Mindre enn eller lik 0,05.

Resultater

Meitemarken Lumbricus terrestris har et mono-stratifisert epitel og en dekkende fibrøs kutikula som utgjør epidermis. Binde- og muskelvev som utgjør det meste av kroppsveggen ligger under epidermis. Det epidermale epitelet holder den kollagenøse kutikula forskjellig fra resten av organismen og er ansvarlig for produksjonen av dette kutikulære kollagenet. Kutikula, epidermis, langsgående muskel og sirkulær muskel er alle synlige ved histologisk inspeksjon av tverrsnittet av kroppsveggen til meitemark. Epidermis er morfologisk veldefinert; det er enten et enkelt epitellag eller pseudostratifisert; den består av støttende, basale, kjertel- og sanseceller (fig. 1). Immunfluorescensanalyse, ved konfokalmikroskopobservasjonen, viser positive coelomocytter for TLR2 (fig. 2, 3), CD14 (fig. 2) og -Tubulin (fig. 3), spredt i epidermal og bindelaget nedenfor, både i det langsgående og i glattmuskellaget. TLR2 og CD14 er ikke fullstendig kolokalisert med hverandre, noe som tyder på at disse coelomocyttene kan tilhøre to distinkte familier (fig. 2). Videre var slimkjertelceller tubulinpositive i epidermis (fig. 3). Ved å analysere "visningsprofil"-funksjonen til det konfokale mikroskopet, bekreftet vi fluorescenstoppene for kolokalisering mellom testede antistoffer.

Kvantitativ analyse avslørte et lignende antall positive coelomocytter for de individuelle antistoffene som ble testet, som vist i tabell 3.

Diskusjon

Vertsresponser mot invaderende patogener er fysiologiske mekanismer som tilhører alle levende organismer. Siden de første eukaryote cellene dukket opp, har flere forsvarsprosesser utviklet seg for å garantere celleintegritet, homeostase og vertsoverlevelse [25]. Virvelløse dyr har utviklet en rekke forsvarsresponser som effektivt gjenkjenner og fjerner fremmede materialer, mikrober eller parasitter. Mens chordater har adaptiv immunitet, stoler lophotrochozoans som meitemark primært på medfødte immunceller, slik som fagocytter (amoebocytter, coelomocytes), som involverer fylogenetisk konserverte PRRer for å mediere immunresponsen [41]. Scavenger-reseptorer, TLR-er og Nod-lignende reseptorer (NLR-er) er fremtredende representanter hos virvelløse dyr. Etter reseptor-ligandbinding initierer signaltransduksjon en kompleks kaskade av cellulære reaksjoner, som fører til produksjon av ett eller flere effektormolekyler involvert i immunresponsen [61]. Det coelomiske cytolytiske proteinet (CCF), det lipopolysakkaridbindende proteinet (EaLBI/BPI) og den Toll-lignende EaTLR-reseptoren er de tre typene PRR som har blitt identifisert i meitemark så langt [65, 66]. CCF har blitt identifisert og karakterisert som et immunmolekyl av den coelomiske væsken og coelomocyttene til Eisenia foetida (Savigny, 1826). CCF, som binder seg til de mikrobielle antigenene, kan utløse prophenoloxidase-kaskaden, en viktig invertebrat-immunmekanisme som også utøver opsoniserende egenskaper, og dermed fremme fagocytose [18, 35].

TLR-er er evolusjonært konserverte membrangjenkjenningsreseptorer [9, 15] som gjenkjenner fremmede antigener ved bruk av PAMP-er [2] og bidrar til modulering av immunresponsen [8, 9, 11, 36]. Bodó et al. [24] demonstrerte tilstedeværelsen av TLR på coelomocytter av en annelid oligochaete Eisenia andrei (Bouché, 1972) [24]. Skanta et al. (2013) isolerte meitemark TLR (EaTLR) fra E. andrei. Den høye intraartsdiversiteten til denne reseptoren indikerer tilstedeværelsen av flere TLR-gener i E. andrei-genomet. En TLR fra annelid polychaete Capitella teleta (Blake, Grassle og Eckelbarger, 2009), EaTLR og TLR-er av bløtdyr og pigghuder deler mange likheter, ifølge fylogenetisk forskning [66]. Prochazkova et al. fremhevet EaTLR og multiple cysteine ​​cluster (MCC) EaTLR uttrykt i hele kroppsvevet til meitemark. Den første er spesielt rikelig i fordøyelsessystemet, mens den andre kan virke i embryonal utvikling og responsen mot parasitter [61]. Videre kan dets tilstedeværelse i coelomocytter overuttrykkes på grunn av bakteriell akkumulering [66]. Coelomocytes av Lumbricus terrestris var i stand til å gjenkjenne monocytter in vitro som ikke-selv, og bekreftet deres evne til immungjenkjenning [62]. Transkriptomiske studier bekrefter tilstedeværelsen av 18 TLR i polychaete annelid Arenicola marina (Linnaeus, 1758) [67].

Vi har tidligere demonstrert tilstedeværelsen av TLR2 i flere virveldyr [4, 11, 12, 16, 46, 54] og urochordater [14, 45].

Etter disse dataene karakteriserte vår studie immunhistokjemisk TLR2 i coelomocytter av Lumbricus terrestris for første gang. Vi kolokaliserte TLR2/CD14 og TLR2/-Tubulin, og bekreftet to celletyper av coelomocytter, som rapportert av Engelmann [33]. Ikke alle coelomocytter ble kolokalisert for antistoffene som ble testet, noe som tyder på en sannsynlig funksjonell og strukturell diversifisering av disse cellene. Selv om det ikke er eksperimentelt bevis, kan tilstedeværelsen av TLR2/CD14-kolokaliserte coelomocytter tyde på at disse cellene kan være amøbocytter involvert i fagocytose, mens coelomocytter som bare uttrykker TLR kan være melanocytter celler involvert i immunresponsen, men som ikke utfører fagocytiske funksjoner [1, 37 , 38], SJ [49, 50], s., [57, 71]. Til tross for Bodó et al. som tyder på fravær av TLR i E. andrei melanocytter ved bruk av qPCR [23], TLR2-positive melanocytter påvises i L. terrestris, noe som antyder en forskjell mellom meitemarkarter, som allerede antatt på en kjernefysisk genomisk base [64].

En studie av Eguilor et al. [31] i igle Glossiphonia complanata (Linnaeus, 1758) identifiserte morfologisk og histokjemisk tre hovedcelletyper (makrofaglignende celler, NK-lignende celler, granulocytter type I og II) ved bruk av forskjellige anti-humane markører i mus spesifikke for makrofager CD14 og CD61 [44] og NK-celler CD56 og CD57 [43]. Denne kryssreaktiviteten til antistoffer generert mot pattedyr-CD-antigener stemmer overens med litteraturdata om fylogenetiske korrelasjoner mellom annelider og vertebrater [21, 30] og kan være et eksempel på den evolutive bevaringen av disse immunmolekylene.

Mus anti-human anti-CD24, anti-tumor nekrose faktor (TNF)-, anti-CD45RA og anti-CD45RO antistoffer har blitt lokalisert i coelomocyte overflater av meitemark Eisenia foetida [30, 34], noe som tyder på at disse molekylene er svært konservert under fylogenese. Disse studiene er i samsvar med tidligere forskning som viser at coelomocyte-overflateantigener er kryssreaktive med antistoffer mot CD14, CD11b og CD11c produsert i pattedyr Temiste petricola (Amor, 1964), og karakteriserer fagocytter positive til anti-CD14, CD11b og CD11c antistoffer [21 ]. Ved hjelp av disse dataene viste resultatene våre fagocytiske celler immunreaktive mot CD14 i Lumbricus terrestris.

Videre demonstrerte vi immunopositiviteten til coelomocytter til -Tubulin, kolokalisert med TLR2, og viste en kobling mellom cytoskjelett, mikrotubuli og medfødt immunrespons mediert av TLR2. Kolokalisering av TLR2 og -Tubulin bekrefter involveringen av tubulin i transporten av TLR på membranoverflaten. En studie av Heli Uronen-Hansson et al. [70] viste omfattende tubulovesikulær ekspresjon av TLR2 og TLR4 på interne og eksterne monocytter så vel som i dendrittiske celler. Siden disse reseptorene er kolokalisert med -Tubulin og koblet direkte til Golgi-komplekset, kan mikrotubuli tjene som en kanal for overføring av TLR-vesikler [70]. Tubulin er også tilstede i epidermis, og bidrar til å opprettholde dens integritet [27], og griper inn i sårheling [73], og hjelper dermed det medfødte immunsystemet, som også rapportert av studier på Nematoda Caenorhabditis elegans (Maupass, 1900) [27, 69].

Kolokalisering, bekreftet av "visningsprofil"-funksjonen til det konfokale mikroskopet, bekrefter de oppnådde resultatene, og fremhever toppen av fluorescens som tilsvarer bindingen av antistoffene til de tilsvarende antigenene.

Avslutningsvis identifiserer vår studie ved konfokal mikroskopi coelomocytter som er immunreaktive mot TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang i Oligochaeta annelid Lumbricus terrestris. Disse dataene validerer ikke bare den viktige evolusjonære bevaringen av disse molekylene, men utdyper også vår kunnskap om det indre forsvarssystemet til virvelløse dyr, spesielt annelidene, og kan gi nyttige indikasjoner for fremtidige studier, og forbedre studiet av de komplekse medfødte immunmekanismene til øvre virveldyr.

Uttalelse fra institusjonsutvalget

Etisk gjennomgang og godkjenning ble frafalt for denne studien fordi ingen eksperimentelle prosedyrer ble brukt på prøvene.

Forfatteres bidrag

Konseptualisering, Alessio Alesci; formell analyse, Alessio Alesci og Angelo Fumia; etterforskning, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi og Eugenia Rita Lauriano; datakurering, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi og Eugenia Rita Lauriano.; skriving – originalutkast, Alessio Alesci; skriving – anmeldelse og redigering, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi og Eugenia Rita Lauriano; visualisering, Alessio Alesci og Angelo Fumia; tilsyn, Eugenia Rita Lautiano. Alle forfattere har lest og godtatt den publiserte versjonen av manuskriptet.

Finansiering

Denne forskningen mottok ingen ekstern finansiering.

Tilgjengelighet av data og materialer

Dataene presentert i denne studien er tilgjengelig i artikkelen.

Erklæringer

Etikkgodkjenning og samtykke til å delta

Ikke aktuelt.

Konkurrerende interesser

Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.

Referanser

1. Aderem A, Underbakke DM. Mekanismer for fagocytose i makrofager. Annu Rev Immunol. 1999;17(1):593–623. https://doi.org/10.1146/annur ev.immunol.17.1.593.

2. Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. Patogengjenkjenning og medfødt immunitet. Celle. 2006;124(4):783–801. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.02.015.

3. Alesci A, Albano M, Savoca S, Mokhtar DM, Fumia A, Aragona M, Lo Cascio P, Hussein MM, Capillo G, Pergolizzi S, Spanò N, Lauriano ER. Konfokal identifikasjon av immunmolekyler i hudklubbceller til sebrafsh (Danio rerio, Hamilton 1882) og deres mulige rolle i immunitet. Biologi. 2022;11(11):1653. https://doi.org/10.3390/biology11111653.

4. Alesci A, Capillo G, Fumia A, Messina E, Albano M, Aragona M, Lo Cascio P, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Konfokal karakterisering av intestinale dendrittiske celler fra myxiner til teleoster. Biologi. 2022;11(7):1045.https://doi.org/10.3390/biology11071045.

5. Alesci A, Capillo G, Mokhtar DM, Fumia A, D'Angelo R, Lo Cascio P, Albano M, Guerrera MC, Sayed RKA, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Ekspresjon av antimikrobisk peptid Piscidin1 i gjellemastceller til gigantiske mudskipper Periophthalmodon schlosseri (Pallas, 1770). Int J Mol Sci. 2022;23(22):13707. https://doi.org/10.3390/ijms232213707.

6. Alesci A, Cicero N, Fumia A, Petrarca C, Mangifesta R, Nava V, Lo Cascio P, Gangemi S, Di Gioacchino M, Lauriano ER. Histologisk og kjemisk analyse av tungmetaller i nyre og gjeller av bryster. Boops: Melanomakrofager-sentre og stangceller som miljømessige biomarkører. Giftstoffer. 2022;10(5):218. https://doi.org/10.3390/toxics10050218.

7. Alesci, A., Fumia, A., Miller, A., Calabrò, C., Santini, A., Cicero, N., & Lo Cascio, P. (2022). Spirulina fremmer makrofagaggregering i sebrafisk (Danio rerio) leveren. Nat Prod Res, 1–7. https://doi.org/10.1080/14786419. 2022.2089883.

8. Alesci, A., Gitto, M., Kotańska, M., Lo Cascio, P., Miller, A., Nicosia, N., Fumia, A., & Pergolizzi, S. (2022). Immunogenisitet, effektivitet, sikkerhet og psykologisk påvirkning av COVID-19 mRNA-vaksiner. Human Immunol, S0198885922001586. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2022.08.004.

9. Alesci, A., Lauriano, ER, Aragona, M., Capillo, G., & Pergolizzi, S. (2020). Merking av virveldyr Langerhans celler, fra fisk til pattedyr. Acta Histochemica, 122(7): 151622. https://doi.org/10.1016/j.acthis.2020.151622.

10. Alesci A, Lauriano ER, Fumia A, Irrera N, Mastrantonio E, Vaccaro M, Gangemi S, Santini A, Cicero N, Pergolizzi S. Forholdet mellom immunceller, depresjon, stress og psoriasis: Kan bruk av naturlige produkter Vær hjelpsom? Molekyler. 2022;27(6):1953.

11. Alesci, A., Pergolizzi, S., Capillo, G., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Rodlet-celler i nyrene til gullfisk (Carassius auratus, Linnaeus 1758): En lys og konfokal mikroskopistudie. Acta Histochemica, 124(3):151876.

12. Alesci, A., Pergolizzi, S., Fumia, A., Calabrò, C., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Mastceller i gullfisk (Carassius auratus) tarm: Immunhistokjemisk karakterisering. Acta Zoologica.

13. Alesci A, Pergolizzi S, Fumia A, Miller A, Cernigliaro C, Zaccone M, Salamone V, Mastrantonio E, Gangemi S, Pioggia G, Cicero N. Immunsystemet og psykologiske tilstanden til gravide kvinner under COVID-19 .Pandemi: Er mikronæringsstoffer i stand til å støtte graviditet? Næringsstoffer. 2022;14(12):2534. https://doi.org/10.3390/nu14122534. 14. Alesci, A., Pergolizzi, S., Lo Cascio, P., Capillo, G., & Lauriano, ER (2022). Lokalisering av vasoaktivt intestinalt peptid og tolllignende reseptor 2 immunreaktive celler i endostil av urochordate Styela plicata (Lesueur, 1823). Microsc Res Tech, https://doi.org/10.1002/jemt.24119.

15. Alesci A, Pergolizzi S, Lo Cascio P, Fumia A, Lauriano ER. Nevronal regenerering: Komparativ oversikt over vertebrater og nye perspektiver for nevrodegenerative sykdommer. Acta Zoologica. 2021. https://doi.org/10. 1111/azo.12397.

16. Alesci A, Pergolizzi S, Savoca S, Fumia A, Mangano A, Albano M, Messina E, Aragona M, Lo Cascio P, Capillo G, Lauriano ER. Påvisning av tarmbegerceller av bredgilt hagfsh Eptatretus Cirrhatus (Forster, 1801): En konfokalmikroskopivurdering. Biologi. 2022;11(9):1366.https://doi.org/10.3390/biology11091366.

17. Alturkistani HA, Tashkandi FM, Mohammedsaleh ZM. Histologiske flekker: En litteraturgjennomgang og kasusstudie. Global J Health Sci. 2015;8(3):72.https://doi.org/10.5539/gjhs.v8n3p72.

18. Beschin A, Bilej M, Brys L, Torreele E, Lucas R, Magez S, De Baetselier P. Konvergent utvikling av cytokiner. Natur. 1999;400(6745):627–8.https://doi.org/10.1038/23164.

19. Bilej M, De Baetselier P, Beschin A. Antimikrobielt forsvar av meitemarken. Folia Microbiol. 2000;45(4):283–300. https://doi.org/10.1007/BF028 17549.

20. Bilej M, Procházková P, Šilerová M, Josková R (2010) Earthworm Immunity. I: Söderhäll K, edotiro. Invertebrate Immunity, vol. 708. Boston: Springer; s. 66–79). https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.

21. Blanco GAC, Escalade AM, Alvarez E, Hajos S. LPS-indusert stimulering av fagocytose i sipunculan-ormen Themiste petricola: Mulig involvering av humane CD14-, CD11B- og CD11C-kryssreaktive molekyler. Dev Comp Immunol. 1997;21(4):349–62. https://doi.org/10.1016/ S0145-305X(97)00007-4.

22. Bodó K, Boros Á, Rumpler É, Molnár L, Böröcz K, Németh P, Engelmann P. Identifikasjon av nye lubricin-homologer i Eisenia andrei meitemark. Dev Comp Immunol. 2019;90:41–6.

23. Bodó, K., Ernszt, D., Németh, P., & Engelmann, P. (2018). Distinkte immun- og forsvarsrelaterte molekylære fingeravtrykk i separerte coelomocytt-undergrupper av Eisenia andrei meitemark. Invertebrat Survival J, 338–345.

24. Bodó K, Kellermayer Z, László Z, Boros Á, Kokhanyuk B, Németh P, Engelmann P. Skade-indusert medfødt immunrespons under segmentregenerering av meitemarken, Eisenia andrei. Int J Mol Sci. 2021;22(5):2363.

25. Buchmann, K. (2014). Evolusjon av medfødt immunitet: ledetråder fra virvelløse dyr via fisk til pattedyr. Frontiers in Immunology.

For more information:1950477648nn@gmail.com