Sammensetningsanalyse av Cistanche Tubulosa: Separasjon og struktur av fenyletanoidglykosid og neolignanglykosid
Mar 14, 2022
Ta kontakt med:joanna.jia@wecistanche.com
Bestanddelene av Cistanche Tubulosa (Schrenk) Hook. F. II.1) Isolering og strukturer av et nytt fenyletanoidglykosid og et nytt neolignglykosid
Fumio Yoshizawa,* a Takeshi Deyama/ Nobuo Takizawa/ Khan UsmanghaniJ og Mansoor Ahmad6
Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., a 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Japan og Department of Pharmacognosy, Fakultet for farmasi, University of Karachi? Karachi-32, Pakistan. Mottatt 9. november 1989
En nyfenyletanoid glykosidkalt tubulosid E (I), og en nyneolignan glykosid, dehydrodiconiferylalkohol yO-0-D-glukopyranosid (II), ble isolert fra hele plantene tilCistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3)-2-O-acetyl-4-Op-coumaroyl-^-D-glukopyranosid på grunnlag av kjemisk bevis og spektraldata.
Nøkkelord Cistanche tubulosa-, Orobanchaceae;fenyletanoid glykosid;iridoid; tubulosid E; dehydrodiconiferylalkoholglykosid; syringalid rhamnoside;neolignan glykosid; 13C-NMRMOE
fenyletanoid glykosid i cistanche
I en tidligere artikkel rapporterte vi isolasjon og strukturell bestemmelse av nyefenyletanoidglykosider, tubulosider A一D fra hele plantene avCistanche tubulosa(Schrenk) Krok. f. (Orobanchaceae) i Pakistan.
Denne artikkelen tar for seg isolasjon og strukturell belysning av en nyfenyletanoid glykosid, kalt tubulosid E (I), og en nyneolignan glykosid, dehydrodiconiferylalkohol ■/-QgD-glukopyranosid (II), samt isolering av 11 kjente forbindelser, dehydrodiconiferylalkohol 4-OgD-glukopyranosid (III), syringalid A 3'-aL-rhamnopyranosid (IV), isosyringalid 3'-aL-rhamnopyranosid (V), (pluss)-syringaresinol OgD-glukopyranosid(VI), (pluss)-pinoresinol OgD-glukopyrano-side (VII), liriodendron (VIII), 6-deoksykatalpol (IX) , 8- epilogansyre (X), 20-hydroksyekdyson (XI), 8-hydroksygeraniol 1-gD-glukopyranosid (XII) og syringin (XIII). Forbindelsene VI, VIII一X, XII og XIII ble tidligere isolert fra Cistanche salsa?'
Tubulosid E (I) ble isolert som et amorft pulver, C31H38O15 -3/2H2O, [a】D -134.0 grad (MeOH). Det infrarøde (IR) spekteret antydet tilstedeværelsen av hydroksylgrupper (3430cm-1), konjugert ester (1734cm-x), en dobbeltbinding (1634cm-1) og aromatiske ringer ( 1608 og 1518 cm-1). Protonkjernemagnetisk resonans 0H-NMR)-spekteret til I viste signaler på grunn av en metylgruppe av rhamnose 0 1.07 (3H, d, J= 6 Hz)], en acetoksylgruppe {{22} }.98 (3H, s)], benzyliske metylenprotoner 0 2.72 (2H, t, J—1 Hz)], et glukoseanomert proton 0 4.54 (1H, d, J{{ 32}} Hz)], et rhamnoseanomert proton 0 5.00 (1H, br s)], to olefiniske protoner [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">
Ved acetylering ga forbindelse I oktaacetatet (la), hvis 】H-NMR-spektrum viste fem alifatiske acetoksylgrupper 0 1.87, 1.95, 2.02 (3H hver, s), 2.10x2 (6H, s)] og tre aromatiske acetoksylgrupper [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">
Ved metanolyse av I med acetylklorid i metanol ble metyl-p-kumarat og 3,{2}}dihydroksyfenetylalkohol påvist på tynnsjiktskromatografi (TLC) og høyytelses væskekromatografi (HPLC).
Syrehydrolyse av I med 10 prosent svovelsyre ga glukose og rhamnose i forholdet 1 til 1.
From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-kumaroyl-^-D-glukopyranosid.
Forbindelse III ble isolert som et amorft pulver, [a]D - 56,4 grader (MeOH). Enzymatisk hydrolyse av III ga et aglykon (Illb) som et amorft pulver, [0]270 -11300, [a]D -31,6 grader (MeOH) og glukose. Forbindelsene Illb og III ble identifisert som henholdsvis dehydrodiconiferylalkohol3,4) og dens 4-O-#-D-glukopyranosid,3,4) ved sammenligning med autentiske prøver (TR-,】H- og 13C-NMR-spektra) .
Forbindelse II ble isolert som et amorft pulver, [a]D 一 7,4 grader (MeOH), hvis IR-spektrum antydet tilstedeværelsen av en hydroksylgruppe (3430 cm-1) og en aromatisk ring (1614,1522,1502 cm) T). 〔H-NMR av II viste signaler på grunn av to aromatiske metoksylgrupper 0 3.74, 3.80 (3H hver, s)], et benzylisk proton 0 5.45 (1H, d, J{{ 16}}Hz)], to transolefiniske protoner 0 6.17 (1H, dt, J= 16, 7 Hz), d 6,58 (1H, d, J= 16 Hz)] og fem aromatiske protoner 0 6.7一7.1 (5H, m)]. Ved acetylering ga forbindelse II heksaacetatet (Ila), hvis 'H-NMR-spektrum viste fem alifatiske acetylsignaler 0 2.01, 2.03, 2.09, 2.06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. Enzymatisk hydrolyse av II ga aglykonet (lib) og glukose. Forbindelse lib ble isolert som et amorft pulver, [a]D pluss 34,8 grader (MeOH), hvis IR-, iH- og 13C-NMR-spektre var nesten identiske med de til Illb, bortsett fra [a]D-verdier og sirkulær dikroisme (CD) ) spektrum.
Den absolutte konfigurasjonen av lib ble belyst ved sammenligning av CD-spekteret med det til Illb og III, hvis stereokjemi ble bekreftet i publiserte data.4) CD-spekteret til lib viste A& pluss 14100 (270) og pluss 15200 (283) som positive maksima, på den annen side, viste den for Illb A& -11300 (270) og -10990 (283) som negative maksima. Disse fakta antyder at lib og Illb er enantiomerer av hverandre. Stereokjemien til lib må være den som er vist i diagram 1.
Således ble forbindelse II fastslått å være dehydrodico-niferylalkoholmonoglukosid. Posisjonen til glukosen
hhv. Skiftene av de tilsvarende karbonene ved å gå til II fra lib var -4,4 og pluss 7,3 ppm, noe som indikerte at en glukosyldel i II var koblet til hydroksylgruppen ved Cy'-atom.5)
Fra resultatene ovenfor ble forbindelse II etablert som dehydrodiconiferylalkohol y'-O-^-D-glukopyranosid.
Forbindelsene IV og V ble isolert som et amorft pulver (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). IR-spektrene antydet tilstedeværelsen av hydroksylgrupper (3400 cm7), en dobbeltbinding (1634 cm-1) og aromatiske ringer (1606 og 1518 cm-1). Ved acetylering ga forbindelsene IV og V oktaacetatene ( IVa, Va), hvis 1H-NMR-spektra viste henholdsvis fem alifatiske acetoksyl- og tre aromatiske acetoksylsignaler. Forbindelsene IVa og Va ble identifisert som henholdsvis syringalid A 3'-aL-rhamnopyranosid oktaacetat og isosyringalid 3'-aL-rhamnopyranosid oktaacetat ved sammenligning av (以 IR og 】H-NMR) med autentiske prøver.6) 'H- 13C-NMR-spektrum av IV og V støttet disse strukturene (se eksperimentelt). Forbindelser VI-XIII ble identifisert som (pluss)-sprøyter-esinol O-少-D-glukopyranosid (VI),2c) (pluss)-pinoresinol O- jS-D-glukopyranosid (VII),7) liriodendrin (VIII),2Z,) 6-de-oxycatalpol (IX),2c) 8-epilogansyre (X),2fl) {{50} }hydroxyecdyson (XI),8) 8-hydroksygeraniol 1-0-D-glukopyranoside (XII) og syringin (XIII),2d) henholdsvis ved sammenligning med autentiske prøver
Eksperimentell
Smeltepunktene ble bestemt på et Mitamura mikrosmeltepunktsapparat og er ukorrigerte. Optiske rotasjoner ble målt med et JASCO DIP-140 digitalt polarimeter. IR-spektra ble registrert med et Hitachi 279-30 IR-spektrofotometer og ultrafiolett (UV)-spektra med et Hitachi 200-20-spektrofotometer. CD-spektra ble registrert med et JASCO J-20A CD-spektrofotometer og massespektre (MS) med et JEOL JMS-100. 'H-NMR- og 13C-NMR-spektra ble registrert med en JEOL FX-90Q-maskin (henholdsvis 89,55 og 22,5 MHz).
Kjemiske skift er gitt på d (ppm)-skalaen med tetrametylsilan (TMS) som intern standard. Forkortelsene som brukes for kjernemagnetisk resonans (NMR) data er som følger; s, singlett; d, dublett; t, triplett; q, kvartett; br, bred. Gasskromatografi (GC) ble kjørt på et Shimadzu GC-4CM-apparat med en flammeioniseringsdetektor. HPLC ble utført på en Hitachi 655A-11-maskin. Silikagel (Wako gel C-300) ble brukt for kolonnekromatografi. Silikagel 60 F254 (Merck) forhåndsbelagte plater ble brukt for TLC og deteksjon ble utført ved å sprøyte 10 prosent H2SO4 etterfulgt av oppvarming.
Isolering
Hele planter avcistanche tubulosa(7 kg), samlet i desember 1986, i Karachi, Pakistan, ble ekstrahert med MeOH (20 1 x 2) under tilbakeløp. Ekstraktet ble konsentrert under redusert trykk og resten ble suspendert i vann. Denne suspensjonen ble ekstrahert med EtOAc mettet med vann. Vannlaget ble utsatt for en Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) kolonne og vasket med H2O, og deretter eluert med MeOH. MeOH-eluatet (140 g) ble kromatografert på en polyamid C-200 (Wako Pure Chemical)-kolonne ved bruk av H2O og deretter MeOH for å gi to fraksjoner (fraksjon 1, H2O-eluat; fraksjon 2, MeOH-eluat). Fraksjon 1 ble konsentrert for å gi en rest. Resten ble kromatografert på en silikagelkolonne ved bruk av CHCl3-MeOH-H2O gjentatte ganger. Etter gjentatt kromatografi av HPLC (kolonne, Develosil ODS-10, 20 x 250 mm; løsningsmiddel; H2O-CH3CN eller H2O-MeOH), ble 10 forbindelser isolert [II (45mg), III (40mg), VI (35mg) ), VII (43 mg), VIII (12 mg), IX (8 mg), X (10 mg), XI (20 mg), XII (10 mg) og XIII (3,6 mg)]. Fraksjon 2 ble behandlet på samme måte som fraksjon 1 og ga forbindelsene I (150 mg), IV (10 mg) og V (10 mg).
Tubulosid E (I)
Amorft pulver, [a]p3 —134.0 grad (c= 1.5, MeOH). Anal. Beregnet for C31H38O15 -3/2H20: C, 54,98; H, 6,10. Funnet: C, 55,01; H, 5,98. IR cm-1: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H·NMR (MeOH-4) 3: 1,07 (3H, d, J=6Hz, CH3 av rhamnose), 1,98 (3H, s, OAc), 2,72 (2H, t, J{ {37}}Hz, Ar-CH2~), 4,54 (1H, d, J=8Hz, Hl av glukose), 5.00 (1H, brs, Hl av rhamnose), 6,34 ( 1H, d, J= 16Hz, Ar-CH=CH-), 6,5一6,8 (3H, aromatisk H), 6,80 (2H, d, J-9Hz, H{ {65}}; H-5'), 7,46 (2H, d, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7,66 (1H, d, J= 16 Hz, Ar—CH=CH—). 13C-NMR: Tabell L
Dehydrodiconiferylalkohol y^-O-^-D-GIucopyranosid (II)
Amorft pulver, [a]^5 —7,4 grader (c= 1.6, MeOH). IR cm"1: 3430, 1614, 1522, 1502. UV h nm: 227 (sh), 280. H·NMR (DMSO-rf6) J: 3,74, 3,80 (3H hver, s, OCH3), 5,45 (1H, d,丿=6Hz, Ha), 6,17 (1H, dt,丿=16, 7Hz, H-#), 6,58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) 6,7-7,1 (5H, m, aromatisk H).13C-NMR: Tabell I.
Dehydrodiconiferylalkohol 4-Oj8-D-Glukopyranosid (III)
Amorft pulver, [a]^5 -56.4.(c= 1.1, MeOH). IR cm-1: 3400, 1604, 1566, 1502. UV 11 nm; 222, 277. XH-NMR (DMSO-(76) 6: 3,76, 3,82 (3H hver, s, OCH3), 5,52 (1H, d, J-7 Hz, Ha), 6,18 (1H, dt, J=16, 7 Hz, H-^), 6,49 (1H, d,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">
Syringalid A 3'-(xL-Rhamnopyranoside (IV)
Amorft pulver, Anal. Beregnet for C29H36O14 • 5/2H20: C, 56,11; H, 5,94. Funnet: C, 56,4{{107}}; H, 6,04. IR cm— prosent 3400, 1606, 1518. 】H・NMR (MeOH-J4) d: 1,15 (3H, d, J-6 Hz, CH3 av rhamnose), 2,90 (2H, t, J{{27 }} Hz, Ar-CH2-), 4,46 (1H, d, J=8Hz, Hl av glukose), 5,27 (1H, brs, Hl av rhamnose), 6,35 (1H, d, J-16Hz, Ar—CH=CH—), 6,6—7,3 (3H, aromatisk H), 7,68 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH {{54 }} CH-). 13C-NMR (CD3OD) 8: 130,6 (Cl), 116,1 (C-2), 130,8 (C-3, 156,6 (C-4), 116,1 (C-6 ), 72,1 (Ca, rham-2, 3), 36,2 (C-8), 127,6 (Cr), 114,6 (C2), 149,6 (C・3'), 146,6 (C{{94) }}'),116,4 (C-5'), 123,1 (C-6'),168,2 (C・a'),115,2 (C书),147.0 104.0 (glu-1), 76.0
(glu-2), 81,5(glu-3), 70,3 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 73,7 (rham-4), 70,5 (rham-5), 18,3 (rham-6).
Isosyringalid S^aL-Rhamnopyranosid (V)
Amorft pulver, Anal. Beregnet for C29H36O14-1/2H20: C, 56,31; H, 5,96. Funnet; C, 56,4{{70}}; H, 6,04. IR 唸cm-1: 3420, 1608, 1518. XH-NMR (MeOH-J4) d: 1,09 (3H, d,丿=6Hz, CH3 av rhamnose), 2,80 (2H, t, J-6 Hz, Ar-CH2-), 4,40 (1H, d, J=8Hz, Hl av glukose), 5,23 (1H, br s, Hl av rhamnose), 6,37 (1H, d, J-18Hz, AsCH=C旦'一),6,6–7,2 (3H, aromatisk H), 7,71 (1H, d, 丿=18Hz, Ar -CH=CH-y 13C-NMR (CD3OD) S: 131,4 (Cl), 116,3 (C-2), 144,5 (C-3X 146,0 (C-4 ), 117,0 (C-5), 121,2 (C-6), 72,2 (Ca), 36,5 (C/), 127,1 (Cr), 116,8 (C-2\ 69, 131,2 (C-3\ 5'),161,2 (C-4'),168,2 (CH), 114,7 (C-^), 147,5 (Cy), 104,1 (glu-1), 76,1 (glu-2), 81,5 (glu-3),
70,2 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 72,1 (rham-2, 3 ), 73,7 (rham-4), 70,6 (rham-5), 18,4 (rham-6).
( pluss )-Syringaresinol Oj?-D-Glukopyranosid (VI)
Amorft pulver, [a]g5 —14,4.(c=0.1, MeOH). Anal. Beregnet for C28H36O13: C, 57,93; H, 6,25. Funnet: C, 58,01; H, 6,26. IRv^cm-1: 3430, 1600, 1518. ·H·NMR (DMSO"6): 3,78 (12H, s-OCH3 x 4), 6,60, 6,66 (2H hver, s, aromatisk H).
(pluss)-Pinoresinol O-^-D-Glukopyranosid (VII)
Amorft pulver, [a]^5 pluss 38,9 grader (c=0.6, MeOH). Anal. Beregnet for C26H32O11T/2H20: C, 58,97; H, 6,28. Funnet: 58,94; H, 6,29. IR cm-1: 3425, 1606, 1516. 】H-NMR (C5D5N) W 3,77, 3,80 (3H hver, s, OCH3), 6,9-7,7 (6H, m, aromatisk H).
Liriodendron (VIII)
Fargeløse nåler (MeOH), smp. 255一257 grader, [a]p5 -9.2 grader (c=L3, pyridin). IR cm-1: 3400, 1598, 1510. XH-NMR (DMSO/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">
6-Deoxycatalpol (IX)
Fargeløse nåler (MeOH), smp. 204–206 grader, [a]p5 -50.1 grad (c=0.7, MeOH). Analyse, beregnet for C15H2209: C, 52,02; H, 6,40. Funnet: C, 52,12; H, 6,41. IR 唸cm-1: 3400, 1658. 】H・NMR (D2O) 3:
l. 3–1,9 (1H, m, H-6), 2,1–2,7 (3H, m, H-5, H-6, H-9), 3,65 (1H, s-lignende, H-7), 3,90, 4,35 (2H, ABsystem, J=13Hz, H-10), 4,92 (1H, d, J=7 Hz, aromatisk H), 5,10 (1H, dd, J=6, 4Hz, H-4), 5,12 (1H, d, J-10Hz, Hl), 6,38 (1H, dd, 1Hz, H-3).
{{0}}Epilogansyre (X) Fargeløse nåler (MeOH), smp. 147一149 grader, [a]p5 — 135.0 grader (c= 1.0, pyridin ). Anal. Beregnet for C16H24O10H2O: C, 48,73; H, 6,65. Funnet: C, 48,60; H, 6,70. IR v;cm-1: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・NMR (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">
m, H-6), 2,60 (1H, m, H-8), 3,08 (1H, dt, J=3, 8,5Hz, H-9), 3,58 ( 1H, m, H-5), 5,40 (1H, d, J=7,5Hz, anomer H), 5,91 (1H, d〃=3Hz, Hl), 7,92 (1H , s, H-3).
20-Hydroxyecdyson (XI)
Krystallinsk fast stoff, smp. 241一242 grader, [a]p5 pluss 70.0 grader (c= LI, MeOH). Anal. Beregnet for C27H4407: C, 67,47; H, 9,23. Funnet: C, 67,28; H, 9,18. IR cm-1: 3440, 1646. XH-NMR (C5D5N) 1,06 (3H, s, H-19), 1,20 (3H, s, H-18), 1,36 (6H, s, H-26, H-27)? 1,58 (3H, s, H-21), 6,24 (lH,d, J=2Hz, H-7). 13C-NMR (C5D5N): 38,0 (Cl),
68,2 (C-2, C-3), 32,5 (C・4), 51,5 (C-5), 203,7 (C-6), 121,8 (C-7), 166,3 (C-8), 34,6 (C-9), 38,8 (C-10), 21,3 (C-ll), 31,9 (C {{30}}), 48,2 (C-13), 84,4 (C-14), 32,1 (C-15), 21,6 (C-16 ), 50,2 (C-17), 18,0 (C-18), 24,6 (C-19), 77,0 (C-20), 21,8 (C-21 ), 77,7 (C-22), 27,6 (C-23), 42,7 (C-24), 69,8 (C-25), 30,1 (C-26 , 27).
8-Hydroxygeraniol 1-^-D-GIucopyranoside (XII)
Fargeløse nåler (MeOH), smp. 58—60 grader, [a]^5 —40,1.(c=L2, MeOH). Anal. Beregnet for C16H28O71/2H20: C, 56,29; H, 8,56. Funnet: C, 56,40; H, 8,50. IR cm"1: 3350, 1670, 1446. XH-NMR (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">
Syringin (XIII)
Fargeløse nåler (MeOH), smp. 188一189 grader, [a]^5 — 15,3 grader (c=0.4, MeOH). Anal. Beregnet for C17H2409: C, 55,13; H, 6,53. Funnet: C, 54,83; H, 6,50. IR cm-1: 3400, 1592, 1514. 'H-NMR (DMSO/6)W 3,78 (6H, s, OCH3 x 2), 6,3-6,5 (2H, m, -CH=CH-), 6,72 (2H, s, aromatisk H).
Acetylering av I forbindelse I (50 mg) ble oppløst i pyridin (1 ml) og eddiksyreanhydrid (1 ml) og fikk stå ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen ble helt over i isvann og deretter ekstrahert med EtOAc. EtOAc-ekstraktet ble konsentrert i vakuum, og resten ble kromatografert på en silikagelkolonne ved bruk av benzen-aceton (5:1) for å gi oktaacetatet (la) (35 mg). IR cm"1: 1760, 1638, 1604, 1508. iH-NMR(CDC13)(5: 1,02 (3H, d, J=6Hz, CH3 av rhamnose), 1,87, 1,95, 2,02 (3H hver, s, OAc), 2,10 (6H, s, OAc x 2), 2,27, 2,28, 2,31 (3H hver, s, Ar-OAc), 2,90 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6,38 (1H, d, J=16Hz, AR~CH=CH-), 6,80-7,15 (3H, m, aromatisk H), 7,24 (2H, d, J-9 Hz, H-3\ H・5'), 7,55 (2H, d,丿=9Hz, H-2, H-6), 7,72 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-).
Acetylering av II og III
Forbindelser II og III (20 mg hver) ble acetylert på samme måte som beskrevet for forbindelse I og ga heksaacetatene [Ila (12 mg), Illa (15 mg)]. Ila: IR 唸顋 cm-1: 1754, 1608, 1506. 】H・NMR (CDC13) 5: 2,01, 2,03, 2,09 (3H hver, s, OAc), 2,06 (6H, 2, OAc) ), 2,30 (3H, s, OAc), 3,84 (3,95 (3H hver, s, OCH3), 5,54 (1H, d, 丿=6Hz, Ha), 6,05 (1H5 dt, J{{38} }, 7Hz, H-^), 6,53 (1H, d, «/= 16Hz, H-a'), 6,8x7,1 (5H, m, aromatisk H). Illa: IR v^cm 1: 1760, 1604, 1516. 】H-NMR (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">
(5H, m, aromatisk H).
Acetylering av IV og V
Forbindelsene IV og V ble acetylert på samme måte som beskrevet for forbindelse I og ga oktaacetatene [IVa, Va]. IVa: IR 唸児 cmT: 1754, 1636, 1514. 】H・NMR (CDC,) W 1,03 (3H? d, J=6Hz, CH3 av rhamnose), 1,87, 1,94, 1,99 (hver) s, OAc), 2,09 (6H, s, OAcx2), 2,28 (6H, s, OAcx2), 2,30 (3H, s, OAc), 2.86 (2H, t, J=6 ,6Hz, Ar■-CH?—), 3,67 (2H, t, J=7,2Hz Ar-CH2~CH2-), 6,35 (1H, d, J=16Hz , ASCH=CU—), 6,87—7,35 (3H, m, Ar—7,09 (4H, q, J=8,6Hz, A2/B2/type), 7,65 (1H, d, J =16Hz, Ar CH=CH ). Va: IR cm-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-NMR (CDC13) 1,03 (3H, d,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>
A2zB/type), 7,71 (1H, d, «/=16Hz, Ar-CH=CH ).
Metanolyse av I
Forbindelse I (ca. 1 mg) ble tilbakeløpskokt med metanolisk 5 % CH3COC1 (2 ml) i 3 0 minutter, og deretter ble reagenset avdampet i vakuum. Tilstedeværelsen av metyl-p-kumarat og 3,4-dihydroksyfenetylalkohol i resten ble påvist ved TLC [CHCl3-MeOH (10:1)] og HPLC [kolonne, Develosil ODS -7 (4,6 x 250 mm); løsningsmiddel, 55 prosent MeOH; detektor (UV), 220 nm; strømningshastighet, 1,0 ml/min]. Metyl p-kumarat; Rf 0,82, ;R (min) 8,8, 3,4-dihydroksyfenetylalkohol; ± 0,31, tR (min) 3,2.
Syrehydrolyse av IA
løsning av forbindelse I (2 mg) i 10 prosent H2SO4 (1 ml) ble oppvarmet i et kokende vannbad i 30 minutter. Løsningen ble ført gjennom en Amberlite IR-45-kolonne og konsentrert for å gi en rest, som ble redusert med natriumborhydrid (ca. 3 mg) i 1 time. Reaksjonsblandingen ble ført gjennom en Amberlite IR-120-kolonne og konsentrert til tørrhet. Borsyre ble fjernet ved destillasjon med MeOH og resten ble acetylert med eddiksyreanhydrid (1 dråpe) og pyridin (1 dråpe) ved 100 grader i 1 time. Reagensene ble fordampet i vakuum. Glucitolacetat og rhamnitolacetat ble påvist i et forhold på 1 til 1 fra forbindelse I ved GC. Tilstand: kolonne, 1,5 prosent OV-17, 3 mm x 1,5 m; kolonnetemp., 180 grader; bæregass, N2 (30 ml/min). tR (min): 2,0 (rhamnitolacetat), 5,5 (glucitolacetat).
Enzymatisk hydrolyse av II og III forbindelse II
(13 mg) eller III (40 mg) ble hydrolysert med cellulase (40 mg) i vann (1 ml) i 2 timer ved 37 grader. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med EtOAc. EtOAc-ekstraktet ble konsentrert i vakuum for å gi resten, som ble kromatografert på HPLC [kolonne, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); løsemiddel. II: H20-CH3CN (77,5:22,5); III: H20-CH3CN (80:20); detektor (UV), 205 nm; strømningshastighet, 6,0 ml/min] for å gi lib (3,3 mg), Ilb (5,7 mg). lib: [a]^5 pluss 34,8 grader (c=0.3, MeOH). CD (c=3.3mg/10ml, MeOH) [0]25 (nm): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232) ). IR 唸E; cm"1: 3380, 1606, 1520, 1500. UV nm: 276. MS m/z (prosent): 358 (M pluss, 53), 340 (M pluss -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59). XH-NMR (aceton-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">
BekreftelseVi er takknemlige til Prof. A. Ueno og Dr. T. Miyase, University of Shizuoka, for målingene av NMR- og CD-spektra, og for deres verdifulle forslag, og til Dr. M. Kikuchi, Tohoku College of Pharmacy, for å gi autentiske prøver.
Referanser og notater
1) H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani og M. Ahmad, Chem. Pharm. Bull., 35,3309 (1987).
2) a) H. Kobayashi og J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm, Bull., 33, 1452 (1985); c) Idem, ibid., 33, 3645 (1985); d) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase og S. Fukushima, Yakugaku Zasshi. 106, 721 (1986).
3) HD Ludemann og H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).
4) a) H. Achenbach, J. Grob, XA Dominguez, G. Cano, JV Star, LC Brussolo, G. Munoz, F. Salgado og L. Lopez, Phytochemistry. 26, 1159 (1987); b) AN Binns, RN Chen, HN Wood og DG Lynn, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 980 (1987); c) DG Lynn, RH Chen, KS Manning og HN Wood, ibid., 84, 615 (1987).
5) T. Deyama, T. Ikawa, S. Kitagawa og S. Nishibe, Chem. Pharm. Bull., 35, 1803 (1987).
6) M. Kikuchi, Y. Yamauchi og F. Tanabe, Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).
7) M. Chiba, S. Hisada, S. Nishibe og H. Thieme, Phytochemistry, 19, 335 (1980).
8) a) H. Hikino, Y. Hikino, Fortschritted. Chem. Org. Naturst., 28, 256 (1970); b) RW Miller, J. Clardy, J. Kozlowski, KL Mikolajczak, RD Plattner, RG Powell, CR Smith, D. Weisleder og Q.-T. Zheng, Planta Medica, 1985, 40.
