Effekt av ernæringsmessig kalsium- og fosfatbelastning på kalsiproteinpartikkelkinetikk hos voksne med normal og nedsatt nyrefunksjon

Abstrakt

Plasma nærmer seg metastabilitet når det gjelder kalsium- og fosfatinnholdet, med bare mindre forstyrrelser i ionisk aktivitet som er nødvendig for å opprettholde krystallvekst når det først er kjerneført. Fysiologisk blir kalsium og fosfat intermitterende absorbert fra kostholdet hver dag, men plasmakonsentrasjonene av disse ionene avviker minimalt etter måltidet. Dette innebærer eksistensen av et blodbåren mineralbuffersystem for å binde kalsiumfosfater og minimere risikoen for avleiring i bløtvevet. Kalsiproteinpartikler (CPP), endogene mineralproteinkolloider som inneholder plasmaproteinet fetuin-A, kan oppfylle denne funksjonen, men definitive bevis som forbinder mineralbelastning i kosten med dannelsen deres mangler. Her demonstrerer vi at CPP dannes som en normal fysiologisk respons på fôring hos friske voksne og at dette skjer til tross for minimal endring i konvensjonelle serummineralmarkører. Videre, hos personer med kronisk nyresykdom (CKD), hvor mineralhåndtering er svekket, viser vi at både fastende og post-prandiale nivåer av CPP-forløpere er markant forsterket og sterkt omvendt korrelert med nyrefunksjonen. Denne studien fremhever det viktige, men ofte neglisjerte, bidraget fra kolloidal biokjemi til mineralhomeostase og gir ny innsikt i dysreguleringen av mineralmetabolisme ved CKD.

Klikk her for å kjøpe Cistanche-produkter

Introduksjon

Kalsium og fosfat danner svært uløselige salter i vandig løsning, og mens metabolismen i alle levende organismer er avhengig av disse essensielle næringsstoffene, skaper deres sameksistens i biologiske væsker en iboende mineraliseringsrisiko og behovet for tett regulering1. De fleste ekstracellulære væsker som plasma anses som metastabile eller nærmer seg metastabilitet når det gjelder deres kalsium- og fosfat-ioniske aktiviteter2, og opprettholder lett krystallvekst hvis de dannes med kjerne. Denne tendensen til utfelling av kalsium og fosfat har blitt utnyttet av virveldyr for deres unike biomekaniske egenskaper under utviklingen av skjelett- og tannvev. Imidlertid påla dette samtidig mekanismer for rask mobilisering og effektiv bulktransport av mineralforløpere for å møte kravene til vekst og reparasjon av disse harde vevene, samt strategier for å begrense mineralisering til disse stedene og forhindre uønsket forkalkning i bløtvev3 . Faktisk er selv beskjedne økninger i plasmakalsium- og fosfatkonsentrasjoner assosiert med en økt risiko for patologisk forkalkning av arterier og vev4. Siden overflødig kalsium og fosfat nesten utelukkende skilles ut av nyrene, er denne risikoen, sammen med tilhørende kardiovaskulære følgetilstander, betydelig høyere hos de med kronisk nyresykdom (CKD), hvor forstyrrelser i mineralmetabolismen blir tydelige med relativt små reduksjoner i glomerulær filtrasjon rate (GFR)5,6. Gitt overfloden av kalsium og fosfat i dietten som pattedyr periodisk eksponeres for, kan man mistenke at risikoen for ektopisk mineralisering er høyest etter et måltid på grunn av den forventede økningen i mineralioner absorbert fra tarmen. Likevel, i motsetning til denne forventningen, endres plasmakalsium- og fosfatkonsentrasjonene minimalt i post-prandialperioden, og mens økt urinutskillelse bidrar til å opprettholde homeostase7, er denne responsen ikke øyeblikkelig og forsinker noen timer etter inntak av millimolare mengder kalsium og fosfat8. Som en løsning på denne fysiologiske utfordringen har det lenge vært mistanke om et blodbåren system for buffering og transport av mineraler9, og nylig har oppmerksomheten rettet seg mot kolloidale mineral-proteinkomplekser som kan oppfylle denne funksjonen og trygt lede den intermitterende strømmen av mineraler gjennom det ekstracellulære væske til steder for bruk eller deponering10.

I plasma er den mest potente og rikeligste proteinmineraliseringsregulatoren det leveravledede glykoproteinet fetuin-A11, som interagerer med begynnende kolloidale mineral-proteinkomplekser for å danne kalsiproteinpartikler (CPP)12,13. Analogt med hvordan apolipoproteiner solubiliserer lipidlasten for transport, stabiliserer fetuinA dårlig løselige kalsiumfosfater, forhindrer krystallvekst og utfelling, samtidig som de letter deres opptak i vev for utnyttelse eller klaring14–16. En manglende evne til å lage eller tilstrekkelig stabilisere CPP, som sett hos fetuin-A knockout-mus, resulterer i en av de mest alvorlige fenotypene av ektopisk forkalkning som er kjent17, hvor mineralholdige komplekser utfelles direkte i lumen av mikrovaskulaturen som fører til okklusjon, iskemi, nekrose og fbrose18. CPP genereres gjennom en rekke ordnede trinn, først med binding av spontant dannede klynger av kalsium- og fosfationer til fetuin-A, og danner kalsiproteinmonomerer (CPM)19, som deretter fungerer som byggesteinene for større polymere strukturer; først, koaleserer for å danne sfærisk primær CPP (CPP-I) som inneholder amorft kalsiumfosfat, før den transformeres til større og tettere ellipsoidal sekundær CPP (CPP-II) som inneholder krystallinsk hydroksyapatitt12.

Utover den påståtte fysiologiske rollen til CPP-dannelse i sekvestrering og dispergering av overflødig mineraler, observeres forhøyede nivåer også i tilstander med nedsatt mineralmetabolisme, inkludert i CKD20. I denne innstillingen har høyere serumnivåer av CPM og CPP vært knyttet til økt risiko for kardiovaskulære hendelser21–25 og dødelighet22. Prekliniske studier tyder på at CPP direkte kan indusere vaskulær glattmuskelcelleforkalkning26,27, aktivering av cellulære inflammatoriske og cytotoksiske veier28,29, så vel som vaskulære luminale og endoteliale lesjoner30. Sammenlagt har det blitt foreslått at langvarig eksponering for kronisk forhøyede nivåer av serum CPP kan bidra til å forklare sammenhengen mellom overflødig kostholdsmineraler og dårlige pasientresultater i CKD14,31. Interessant nok tyder nyere data også på at sirkulerende CPM filtreres ved glomerulus29, noe som antyder at nedsatt nyrefunksjon kan påvirke CPP-metabolismen via flere mekanismer.

Nyere metodiske fremskritt tillater direkte kvantifisering av CPM32, CPP-I og CPP-II33, med disse analysene nå brukt på tvers av flere observasjons- og intervensjonelle kliniske studier24,25,34–39. En annen ny komplementær metode for å vurdere dette systemet er T50-testen, en funksjonell vurdering av serumets kapasitet til å motstå ex vivo-dannelse av CPP-II når det utfordres med overmettende mengder kalsium og fosfat40. En lavere T50 har konsekvent vært assosiert med økt risiko for vaskulær patologi og dødelighet hos individer med normal nyrefunksjon41, så vel som i ulike CKD-kohorter, inkludert både ikke-dialyse22,42,43 og også dialyseavhengig CKD44. I tillegg til kinetikken til CPP-II-dannelse, kan størrelsen (hydrodynamisk radius) til CPP-II-molekylene generert i T50-analysen også måles40,45, og kan gi ytterligere prognostisk informasjon om vaskulær risiko46,47.

Forestillingen om en diettopprinnelse til CPP støttes sterkt av observasjonen at høyfosfatfôring er assosiert med økte omgivelsesnivåer av CPM48 og CPP33 i dyrestudier, og reduksjonen i serum CPM34 og CPP37 hos hemodialysepasienter behandlet med intestinale fosfatbindere. Imidlertid mangler definitiv observasjon av effekten av ernæringsmessig mineralinntak på akutt CPP-kinetikk hos mennesker. Videre er virkningen av CKD på post-prandial CPP-metabolisme ennå ikke dokumentert. For å adressere disse nøkkelbevishullene, gjennomførte vi en kontrollert studie av effekten av standardisert matinntak på serum CPM, CPP-I, CPP-II, T50 og CPP-II størrelse, hos fastende voksne med normal eller nedsatt nyrefunksjon.

Cistanche ekstrakt

Metodikk

1. Studiepopulasjon.

Vi studerte 14 individer med CKD og 16 alders- og kjønnsmatchede friske kontroller. Hver deltaker måtte være minst 18 år for å være kvalifisert. Deltakerne ble ekskludert hvis de: (i) hadde en historie med mineral- eller bensykdom, annet enn relatert til CKD; (ii) ble behandlet med et intestinalt fosfatbindemiddel eller kalsitriol; eller (iii) hadde en gastrointestinal lidelse, historie med laktoseintoleranse eller var uvillig til å innta studiemåltidet. For CKD-gruppen rekrutterte vi syv individer med en estimert glomerulær filtrasjonshastighet (eGFR) mellom 30 og 60 ml/min/1,73 m2 og syv med en eGFR<30 mL/min/1.73 m2, excluding participants who required dialysis or with a previous kidney transplant. Healthy controls had no history of chronic medical conditions and had normal kidney function (eGFR>60 ml/min/1,73 m2). Studien ble utført av Helsinki-erklæringen.

Alle individer ga skriftlig informert samtykke, og studien ble godkjent av den lokale etiske komiteen (Melbourne Health Human Research Ethics Committee MH2018.363).

2. Prosedyre.

Hver deltaker ble studert etter en faste over natten, og prøveinnsamlingen startet mellom 7.30 og 9.30. En intravenøs kanyle ble satt inn ved starten av studieperioden. Før hver blodprøve ble tatt, ble en innledende 5 ml trekking fra kanylen kastet. To innledende fastende blodprøver ble tatt med 30 minutters mellomrom for å ta hensyn til grunnlinjevariasjon. Gjennomsnittsverdiene for disse to-tidspunktene ble brukt som "tid 0". Umiddelbart etter innsamlingen av den andre fasteprøven inntok deltakerne et standardisert måltid (Sanitarium Up&Go flytende frokost; 250 ml, vaniljesmak) som inneholdt 815 kJ energi, 300 mg kalsium og 188 mg fosfat (tabell 1). Deltakerne ble bedt om å konsumere hele drikken innen 5 minutter. Serieblodprøver ble tatt på fem tidspunkter etter måltidet (30, 60, 120, 180 og 240 minutter) fra begynnelsen av måltidet. I løpet av studieperioden fikk deltakerne drikke vann, men fikk ikke lov til å innta annen mat eller drikke.

3. Resultatmål.

Blod ble samlet for gjentatt måling av nye markører for mineralmetabolisme (CPM, CPP-I, CPP-II, T50 og CPP-II-størrelse) ved hvert tidspunkt. Fetuin-A ble målt på hvert tidspunkt, gitt dens rolle som det viktigste mineralbindende proteinet tilstede i CPM og CPP. Vi målte også serumfosfat, totalt kalsium, magnesium, albumin og bikarbonat ved hvert tidspunkt, og serum intakt paratyreoideahormon (PTH) og intakt fibroblastvekstfaktor-23 (iFGF23) ved tre tidspunkter ({{12 }}, 120 og 240 min). Serumsitrat ble målt ved 0, 30 og 60 min. Serumurea, kreatinin og 1,25 dihydroksyvitamin D ble målt én gang ved fastende baseline (0 min). Blodprøver for nye markører for mineralmetabolisme, PTH, iFGF23, 1,25 dihydroksyvitamin D og serumsitrat, fikk koagulere i 30 minutter før sentrifugering, og deretter ble serumalikvoter lagret ved -80 grader inntil batchanalyse. Alle andre biokjemiske målinger ble utført på tidspunktet for prøvetaking ved bruk av standard laboratoriemetoder.

4. Gel-fltrasjons- og strømningscytometriske analyser for CPM og CPP.

Vi brukte to komplementære analyser for å kvantifisere forskjellige fraksjoner av den sirkulerende CPP-poolen49. Begge analysene bruker det fluorescensmerkede bisfosfonatderivatet, OsteoSense 680EX (Perkin Elmer), som binder seg spesifikt til fastfase kalsiumfosfat og fortrinnsvis til krystallinske faser (f.eks. hydroksyapatitt). 'gel-fltrasjonsmetoden til Miura et al.32 ble brukt til å måle små (<50 nm diameter), low-density mineral-laden fetuin-A colloids. Briefly, frozen serum samples were thawed for 24 h at 25 °C to induce aggregation of CPM and phase transition to crystalline calcium phosphate. Samples were then centrifuged for 30,000g for 2 h at 4 °C to remove larger CPP-I and CPP-II, leaving less dense crystal-laden fetuin-A monomer and multimers for staining with OsteoSense (0.5 µM) in HEPES-buffered DMEM (pH 8.0). Unbound dye was subsequently removed by gel filtration (Micro Bio-Spin® Columns with Bio-Gel® P-30, Bio-Rad) and the resultant fluorescence was measured using an infrared scanner (Odyssey CLx, LI-COR; EX 685 nm, EM 700 nm). Miura and colleagues32 referred to the mineral detected as low-density (L)-CPP, however, here we refer to them as CPM to reflect the origin of this mineral fraction in vivo. In our hands, the mean interassay analytical coefficient of variation (CVA) for the CPM assay was 4.9%.

For flowcytometrisk analyse ble alikvoter av frosset serum behandlet ved å bruke de standardiserte prosedyrene beskrevet tidligere50. CPP-I og CPP-II ble målt som tidligere beskrevet ved bruk av et BD FACSVerse flowcytometeroppsett for å løse opp partikler<200 nm from the background and operate with fluorescence triggering on OsteoSense-positive events33,37. In this assay, CPP is distinguished from membrane-delimited mineral-containing extracellular vesicles using phosphatidyl serine–binding cadherin-FITC (Haematologic Technologies Inc., Essex Junction, VT). CPP-I and CPP-II were distinguished by differences in side scatter (SSC) intensity (related to particle size) and OsteoSense fluorescence intensity. Interassay CVA for CPP-I and CPP-II were<15% and<10%, respectively.

5. Andre mineralmarkører.

Serum T50 ble målt av Calciscon AG, Biel, Sveits, som tidligere beskrevet ved bruk av et Nephelostar nefelometer (BMG Labtech, Ortenberg, Tyskland)40. Gjennomsnittlig interassay CVA for T50 var 3,4 prosent. CPP-II hydrodynamisk radius ble målt ved dynamisk lysspredning ved bruk av en DynaPro Plate Reader II (Wyatt Technology, Santa Barbara, CA, USA) som beskrevet av Chen et al.47 Te interassay CVA for CPP-II størrelse var 4 prosent. Kommersielle immunoassays ble brukt til å måle iFGF23 (Kainos Laboratories, Tokyo, Japan), 1,25 dihydroxy vitamin D Immunodiagnostic Systems, Boldon, Storbritannia) og fetuin-A (R&D Systems, Minneapolis, USA) i henhold til produsentens instruksjoner. Gjennomsnittlig interassay-CVA var henholdsvis 3,8 prosent, 5,5 prosent og 3,2 prosent. Serumsitrat ble målt ved å bruke en kolorimetrisk analyse (Sigma-Aldrich, Darmstadt, Tyskland) med en gjennomsnittlig interanalyse-CVA på 3,5 prosent.

6. Statistisk analyse.

Using GLIMPSE, a validated linear mixed model power and sample size calculator51, we estimated that 10 participants would provide>90 prosent effekt for å oppdage en dobling av CPP i perioden etter måltid med en type I feilrate på 0,05. Studien var ikke drevet til å oppdage en forskjell mellom grupper.

Demografiske og fastende biokjemiske data ble sammenlignet mellom grupper ved bruk av en uparet t-test eller Kruskal–Wallis-test for henholdsvis normale og skjeve kontinuerlige variabler, og en kjikvadrattest for kategoriske variabler.

Vi hadde som mål å beskrive innenfor og mellom gruppen post-prandial respons for hver gjentatt parameter. For å gjøre dette, monterte vi lineære blandede effekter-modeller (LMM) for hver parameter, ved å bruke en begrenset maksimal sannsynlighetstilnærming og med en ustrukturert kovariansmatrise52. For hver LMM modellerte vi gruppe, kategorisk tid og gruppe-for-tid-interaksjon som faste effekter, og et tilfeldig avskjæring ble inkludert for hver deltaker for å redegjøre for korrelasjonen av gjentatte mål. Kontrollgruppen og tiden '0' ble brukt som referanseverdier for henholdsvis gruppen og tiden. Koeffisientestimater for gruppe-for-tid interaksjonstermer ble brukt for å teste for forskjeller i post-prandial respons mellom CKD- og kontrollgruppene. Etter tilpasning av hver LMM, utførte vi også post hoc parvise sammenligninger for å teste for forskjeller i gjennomsnittsverdier mellom grupper på hvert tidspunkt, og for å teste for avvik fra fastende baseline innenfor hver gruppe. For disse parvise sammenligningene brukte vi Bonferroni-korreksjonsmetoden for å justere for flere sammenligninger. CPM, CPP-I, CPP-II, CPP-II størrelse, PTH og iFGF23 ble naturlig log-transformert før montering av LMM-er for å sikre normal fordeling av rester. For å lette tolkningen ble koeffisientestimater for interaksjonsbegreper fra disse modellene eksponensert for å utlede estimater av den prosentvise endringen. For LMM av CPM antydet interaksjonstermer gruppe for gang en signifikant forskjell i post-prandial respons mellom grupper. For ytterligere å utforske effekten av nyrefunksjon på post-prandiale nivåer av CPM beregnet vi også arealet under kurven (AUC) for CPM ved å bruke kubisk spline-metoden (tid 0 til 240 min) og undersøkte forholdet mellom eGFR , AUC og maksimal konsentrasjon av CPM (ved bruk av Spearman-rangkorrelasjon) samt mellom CKD og tidspunktet for maksimal CPM-konsentrasjon (ved bruk av kjikvadrattest).

Flere prøver hadde upåviselige nivåer av CPP-I (2 prøver i kontrollgruppen og 6 i CKD-gruppen) eller CPP-II (5 i kontrollgruppen og 10 i CKD-gruppen). For hovedanalysene ble den nedre grensen for kvantifisering for analysen (133 partikler/mL) brukt for disse venstresensurerte verdiene. For å vurdere potensiell skjevhet fra denne tilnærmingen, utførte vi en sensitivitetsanalyse der LMM-er for CPP-I og CPP-II ble gjenopprettet etter å ha tilskrevet lefsensurerte verdier ved bruk av multi-level Tobit-regresjon, der tid og gruppe ble lagt inn som uavhengige variabler 53.

To-halede p-verdier<0.05 were considered significant. All data were analyzed using Stata MP version 17.0 (StataCorp, College Station, USA) and figures were produced using GraphPad Prism version 9.2.0 (GraphPad Sofware, San Diego, USA).

Herba Cistanche

Diskusjon

Så vidt vi vet, er dette den første studien som rapporterer en signifikant post-prandial effekt av ernæringsinntak på serumnivåer av CPM, CPP-I og CPP-II hos mennesker. Disse effektene var vanlige for personer med normal og nedsatt nyrefunksjon; Imidlertid var den post-prandiale ekskursjonen av serum CPM mye mer uttalt hos CKD-deltakere. Vi fant også en tidlig og forbigående post-prandial effekt på T50, som var tilstede uavhengig av nyrefunksjon og ledsaget av en samtidig økning i serum fetuin-A.

Våre funn stemmer overens med forestillingen om at intestinal absorpsjon av en mineralmengde fra kosten kan direkte føre til dannelse av sirkulerende CPM, CPP-I og CPP-II. Dette har tidligere blitt foreslått10,15,16, men er i stor grad basert på dyredata33,48. I motsetning til dette har bevis hos mennesker vært indirekte, og kommer fra studier av intestinale fosfatbindere hos hemodialyseavhengige CKD-pasienter34,37,55. En liten studie av Yamada et al. antydet daglig variasjon i serum CPP med post-prandiale topper, men denne studien brukte en eldre analyseteknikk som ikke var i stand til å kvantifisere CPM og CPP underarter separat, og deltakerne ble alle innlagt på sykehus for behandling av ustabil diabetes56. I motsetning til dette var alle deltakerne i denne studien klinisk stabile, og så vidt vi er klar over, har vi for første gang vist at post-prandiale ekskursjoner ikke bare sees hos personer med CKD, men også hos friske voksne, noe som underbygger rollen av CPM- og CPP-dannelse i den normale fysiologiske responsen på inntak av mat.

Økninger av serum CPM og CPP ble sett selv etter relativt beskjedne, og fysiologisk relevante, ernæringsmessige mineralbelastninger (tabell 1). Derimot var det minimal post-prandial variasjon i de mer konvensjonelle markørene for mineralmetabolisme. Tidligere studier har tilsvarende vist begrenset post-prandial avvik i fosfat7,57, bortsett fra når forsøkspersoner er utfordret med store farmakologiske belastninger58,59. I helse reguleres totalfosfat i kroppen, slik at netto intestinal absorpsjon matches av urinutskillelse8. Denne responsen er imidlertid ikke øyeblikkelig, og det kan sees et etterslep på flere timer før økning av fosfatutskillelsen i urinen skjer, selv når fosfatmengden gis intravenøst8. I stedet har dyremodeller vist at andre, ikke-nyre, mekanismer tjener til å opprettholde serumioniske konsentrasjoner mer akutt, via distribusjon til bein og annet vev59–61. Det er sannsynlig at dannelsen av CPM og CPP kan være et viktig ekstra midlertidig depot av fosfat (og kalsium), som akutt kan buffere lokale mineralbelastninger, slik som fra mage-tarmsystemet14. De fysisk-kjemiske egenskapene til CPM og CPP betyr at potensielt store mengder ellers uløselige mineraler kan eksistere i sirkulasjonen uten risiko for nedbør, noe som tilsynelatende gjør det lettere for mineraler å transporteres trygt i bulk til bruks- eller klaringssteder.

Vi observerte en forbigående økning i serum fetuin-A i CKD-gruppen. Derimot virket fetuin-A stabil i kontroller, men når parvise sammenligninger ble gjentatt uten korreksjon for flere sammenligninger, var det betydelige økninger etter 30 og 60 minutter i kontroller (tilleggstabell S8), noe som indikerer at vi kan ha vært underkraftig til å oppdage en underliggende effekt. Utover å være en negativ akuttfasereaktant, med nivåer sterkt undertrykt som respons på akutt og kronisk betennelse62, er lite kjent om andre mekanismer som direkte regulerer hepatisk syntese og sekresjon av fetuin-A, og det er en mangel på tidligere data om daglig, eller akutt post-prandial variasjon hos enhver art. Gitt den observerte økningen i serum fetuin-A etter fôring, spesielt i CKD-gruppen, og den nødvendige rollen til fetuin-A i CPM- og CPP-dannelse, er det spennende å vurdere om fôring kan "sanses" via en ennå ukjent mekanisme, fører til at leverfrigjøring av fetuinA faller sammen med en tilstrømning av mineral fra tarmene. Faktisk, Uedono et al. nylig antydet at CPP i seg selv kan være en utløser for fetuin-A-uttrykk i dyrkede hepatocytter63. Mekanismer som kontrollerer frigjøring av fetuin-A og deres respons på mineralbelastning krever derfor videre undersøkelse.

T50 er en funksjonell vurdering av serumets evne til å motstå ex vivo CPP-II-dannelse, og representerer en sammensetning av ulike potensierende (inkludert kalsium og fosfat) og hemmende (inkludert fetuin-A, albumin, magnesium, sitrat og bikarbonat) forkalkningsfaktorer40. Vi observerte en tidlig, men forbigående økning i T50. Dette ble sett i begge gruppene, men i CKD-gruppen var toppen sammenfallende med økninger i serum fetuin-A. Videre, blant alle deltakerne, var endring i T50 fra baseline veldig nært korrelert med endring i serum fetuin-A (Supplerende Fig. S2), noe som tyder på at fetuin-A kan være hovedfaktoren som ligger til grunn for de observerte endringene i T50. Faktisk fant vi ikke tilsvarende tidlige post-prandiale endringer i andre kjente modulatorer av T50 (serumfosfat, kalsium, bikarbonat, magnesium eller albumin), selv om dette ikke utelukker mer subtile endringer i en, eller en kombinasjon, av disse faktorene . For eksempel var en positiv gruppe-for-tid-interaksjon til stede for serumbikarbonat i CKD-gruppen ved 120 minutter, som overlappet med økningen i T50. Når det gjelder fetuin-A, var det også en korrelasjon mellom endringen i bikarbonat og T50 fra baseline (Supplerende Fig. S4), selv om denne var relativt svak sammenlignet med korrelasjonen med førstnevnte (r=0.385 vs. r=0.839). Likevel er den post-prandiale "alkaliske tidevannet" et anerkjent fenomen, og det er sannsynlig at flere faktorer bidro til de observerte post-prandiale endringene i T5064. Studiemåltidet inneholdt også en overraskende mengde sitrat (~16 mM), en kjent potent hemmer av CPP-dannelse, men selv om det var en liten økning i serumsitrat i CKD-gruppen, falt ikke denne endringen sammen med de observerte endringene i T50, og det var heller ingen generell sammenheng mellom endring i T50 og serumsitrat på tvers av begge grupper. Andre tidligere beskrevne modulatorer av T50, som pyrofosfat og sink, ble ikke målt i denne studien. Selv om disse, eller andre ennå ukjente, faktorer også kan ha bidratt til den observerte post-prandiale økningen i T50, merker vi at ganske betydelige endringer i konsentrasjonen av disse små uorganiske molekylene vanligvis er nødvendige for å påvirke T5065 betydelig. I motsetning til de post-prandiale effektene på T50, forble den hydrodynamiske radiusen til CPP-II tilsynelatende uendret i begge grupper.

Cistanche kapsler

Mens post-prandiale ekskursjoner av CPM ble observert i begge grupper, var CPM-nivåene konsekvent høyere i CKD-gruppen på hvert av tidspunktene, og gruppe-for-tid interaksjonstermer indikerte at omfanget av post-prandial responsen var betydelig større hos CKD-deltakere enn hos kontroller. Følgelig, i utforskende analyse, var det en sterk korrelasjon mellom eGFR og CPM AUC og maksimal konsentrasjon. Toppnivåer av CPM hadde også en tendens til å oppstå senere i CKD-gruppen. Teoretisk sett kan disse forskjellene indikere økt produksjon av CPM etter næringsinntak og/eller nedsatt kapasitet til å fjerne CPM hos de med CKD. Sistnevnte støttes av nyere data fra Koeppert et al., som brukte levende to-fotonmikroskopi for å vise at sirkulerende CPM hovedsakelig fjernes av glomerulær filtrasjon i mus29. En rimelig prediksjon kan derfor være at kapasiteten til å klarere CPM blir svekket når GFR synker. Imidlertid er endringer i andre aspekter av mineralhomeostase, inkludert beinomsetning66, og forsinket nyreutskillelse av akutte fosfatbelastninger7,59 også ofte sett ved CKD og kan godt ha bidratt til økninger i postprandiale nivåer. Nyere bevis har stilt spørsmål ved den langvarige oppfatningen om at CKD påvirker netto intestinal fosfatabsorpsjon57,67,68. Vi la imidlertid merke til at seks av de 14 personene i CKD-gruppen tok kolekalsiferol. Med tanke på potensialet for stimulerende effekter av vitamin D på intestinal mineralabsorpsjon, utførte vi en ad hoc utforskende analyse for å teste om bruken av ernæringsmessig vitamin D påvirket den akutte responsen til CPM, CPP-I og CPP-II på fôring (tilleggstabeller) S9–S11). Bortsett fra en enkelt positiv gruppevis interaksjon for CPP-I etter 30 minutter hos de som tok kolekalsiferol, var ikke alle andre interaksjonstermer og post hoc parvise sammenligninger for CPM, CPP-I og CPP-II signifikante, noe som tyder på at kolekalsiferol bruk var usannsynlig å ha hatt en vesentlig effekt på post-prandial CPM/CPP kinetikk. Mens den lille prøvestørrelsen og potensialet for forvirring kan utelukke definitive konklusjoner, kan mangelen på effekt også reflektere overvekten av fosfatabsorpsjon via den paracellulære banen når mineralet er rikelig, som ikke er aktivt regulert av vitamin D-aksen69.

I motsetning til CPM observerte vi ingen sterk effekt på nyrefunksjonen i verken CPP-I eller CPP-II. I motsetning til CPM, blir sirkulerende CPP primært fjernet fra sirkulasjonen av ikke-renale mekanismer. Dyre- og in vitro-modeller har foreslått rask clearance av CPP-I hovedsakelig av sinusoidale endotelceller i leveren28, og av CPP-II av residente makrofager i leveren og milten70. Det er sannsynlig at mens deltakere i vår CKD-gruppe viste bevis på endret CPM-metabolisme, var disse diskrete CPP-clearance-veiene tilstrekkelige til å opprettholde normale post-prandiale CPP-profiler. Vi hadde regnet med at CKD-gruppen ville ha tydelige høyere nivåer av CPP sammenlignet med kontroller basert på tidligere studier, selv om disse studiene inkluderte pasienter med mer avansert CKD som var dialyseavhengige33, eller brukte den eldre og indirekte metoden for CPP-måling20,23. Personer med mer avansert CKD enn de som er studert her, kan vise større forskjeller i fastende og post-prandiale CPP-nivåer. Mangelen på separasjon for CPP mellom vår CKD og kontrollgruppen kan også skyldes vårt begrensede deltakerantall, som også begrenset vår evne til å formelt teste for en effekt av CKD-stadiet (tillegg Fig. S6). Faktisk var studien vår basert på å undersøke post-prandiale svar i stedet for forskjeller mellom grupper. Merk at CPP-I så ut til å gå tilbake til fastenivåer tidligere i kontroller enn CKD-deltakere, og det var en positiv gruppevis interaksjon for CPP-II hos CKD-deltakere etter 120 minutter. Begge funnene signaliserer potensielt at vi kan ha observert mer uttalte effekter mellom grupper i en større kohort. Høyere analytisk unøyaktighet for flowcytometri-baserte CPP-målinger kan også ha bidratt til nullfunnene.

I tillegg til å gi ny innsikt i fysiologien til CPM- og CPP-metabolisme, har studien vår også direkte relevans for å optimalisere bruken av disse nye markørene for mineralmetabolisme i fremtidige studier. Mens hver av disse nye analysene har vist lovende i tidlig klinisk arbeid, har svært få studier rapportert43 eller kontrollert for fastende/absorberende status46,56. I denne studien hadde flere individer uoppdagelige nivåer av CPP-I eller CPP-II i fastende og tidlig post-prandial periode, og denne dype effekten av faste på serum CPP er i seg selv tidligere urapportert og bemerkelsesverdig finansiering. I kontrast var fastende CPM-nivåer målbare og signifikant høyere i CKD-gruppen enn i kontroller, noe som tyder på at vedvarende økninger i CPM ikke nødvendigvis manifesterer seg i forhøyede CPP-nivåer hos de med ikke-dialyseavhengig CKD.

Tidligere epidemiologiske studier har antydet sammenhenger mellom forhøyede nivåer av CPM og CPP med en rekke surrogatmarkører for vaskulær sykdom21,23,24, så vel som med kardiovaskulære hendelser25 og dødelighet av alle årsaker22. Videre har laboratoriebaserte studier gitt plausible mekanismer som CPP kan formidle disse patologiske vaskulære utfallene26–28. Men mens in vitro-studier har antydet at mange av disse toksisitetene induseres på en doseavhengig måte hvis CPP har en normal fysiologisk rolle i helsen, er det uklart på hvilket tidspunkt disse partiklene kan bli skadelige. Kunnskap om effekten av ernæringsinntak på CPP-kinetikk som avslørt her kan vise seg å være avgjørende for å forstå denne prosessen ytterligere. En terskelkonsentrasjon for utbruddet av patologiske effekter av CPM og CPP kan (i det minste initialt) bare nås i post-prandial tilstand in vivo. I så fall kan dynamisk testing av den post-prandiale responsen gi ytterligere muligheter til å evaluere tidligere manifestasjoner av dysregulert mineralmetabolisme, samt risikoen for assosiert vaskulær sykdom. En annen viktig mulighet er at sammensetningen og dermed den iboende toksisiteten til CPP-I og CPP-II er forskjellig mellom helse og CKD45.

Cistanche supplement

Begrensninger

Vi erkjenner at denne studien har flere begrensninger, inkludert begrenset pasientantall, som allerede diskutert. Spesielt brukte vi også et standardisert måltid gitt etter en faste over natten, så vi kan ikke kommentere effekten av varierende måltidssammensetning eller effekten av påfølgende måltider gitt gjennom resten av dagen. Vi valgte måltidet basert på dets kommersielle tilgjengelighet, noe som muliggjorde standardisering mellom deltakerne, og fordi det representerte fysiologisk relevante ernæringsmessige belastninger (tabell 1). Det er imidlertid mulig at dersom deltakerne ble utfordret med større mineralmengder, kan ytterligere separasjon mellom de med normal og nedsatt nyrefunksjon ha vært tydelig. På samme måte, gitt vi bare observerte individer i fire timer etter måltid, kan det tenkes at den kumulative effekten av påfølgende måltider også kan ha skilt grupper ytterligere.

Vi fant ikke ut avføring eller urin og kan derfor ikke kommentere de totale mineralene som ble absorbert eller utskilt under studien. Vi antar at endringer i hvert mål sett etter fôring er direkte relatert til næringsinntaket. Denne antagelsen støttes indirekte av detaljerte avbildningsstudier som viser fuks av kalsium- og fosfationer etter matinntak57, samt direkte bevis fra dyrestudier som viser at akutt oral sondeføring av mus med en bufret fosfatløsning resulterer i serumtopper i CPM/CPP48. Likevel observerte vi ikke deltakere under langvarige fasteforhold, og kan derfor ikke konkludert redegjøre for ikke-kostholdsrelaterte daglige svingninger i noen av de studerte parameterne. Vi hadde imidlertid to fasteprøver, hvor gjennomsnittet ble brukt som "tid 0", og variasjonen mellom disse fasteprøvene var triviell sammenlignet med omfanget av endringer sett i perioden etter måltidet.

Vi brukte Bonferroni-metoden for å gjøre rede for de flere post hoc parvise sammenligningene mellom og innenfor grupper for hver parameter. Dette er utvilsomt en konservativ tilnærming, og så vidt vi vet ikke en som er tatt i bruk av andre lignende fôringsstudier av post-prandial mineralmetabolisme. Vi valgte denne tilnærmingen gitt det store antallet tidspunkt og sammenligninger som ble gjort og begrunnet at det var å foretrekke å fokusere på de mest robuste og signifikante signalene. Som et resultat kan vi imidlertid ha gått glipp av mindre, men potensielt relevante effekter. Vi korrigerte ikke for flere tester på tvers av forskjellige mineralparametere gitt sannsynligheten for gjensidig avhengige fysiologisk koblede endringer.

Cistanche tubulosa

Konklusjon

Vår studie har avslørt for første gang at ernæringsmessig mineralinntak fører til dannelse av CPM og CPP i blod som en normal fysiologisk respons på fôring. Disse funnene bekrefter hypotesen om at CPM/CPP-dannelse bidrar til å bygge post-prandiale mineralbelastninger, og fungerer som et midlertidig sirkulerende lager av bulk kalsiumfosfater som til slutt er bestemt for bruk/lagring (f.eks. en mineralforløper for benmineralisering) eller eliminering. Vi observerte også høyere fastenivåer av serum-CPM og en større post-prandial respons hos de med nedsatt nyrefunksjon, noe som tyder på at CPM-metabolismen er tydelig endret ved CKD. Analyse av post-prandial CPM/CPP-håndtering kan gi ny innsikt i mekanismene som forbinder overdreven kalsium- og fosfatinntak i kosten til økt risiko for hjerte- og karsykdommer hos pasienter med nedsatt mineralutskillelse. Mer generelt understreker disse nye funnene det viktige, men ofte forsømte, bidraget fra kolloidal biokjemi til mineralhomeostase.

Referanser

1. Magalhães, MCF, Marques, PAAP & Correia, RN Biomineralization—Medical Aspects of Solubility (red. Königsberger, E. & Königsberger, L.). 71–123. (Wiley, 2006).

2. Holt, C., Lenton, S., Nylander, T., Sorensen, ES & Teixeira, SC Mineralisering av mykt og hardt vev og stabiliteten til biovæsker. J. Struct. Biol. 185, 383–396 (2014).

3. Reznikov, N., Steele, JAM, Fratzl, P. & Stevens, MM En materialvitenskapelig visjon om ekstracellulær matrisemineralisering. Nat. Rev. Mater. 1, 16041 (2016).

4. Smith, ER Vaskulær forkalkning i uremi: New-age konsepter om et alderdomsproblem. Metoder Mol. Biol. 1397, 175–208 (2016).

5. Chen, J. et al. Koronarforkalkning og risiko for hjerte- og karsykdommer og død blant pasienter med kronisk nyresykdom. JAMA Cardiol. 2, 635–643 (2017).

6. Kestenbaum, BR et al. Forekomst og progresjon av koronar forkalkning ved kronisk nyresykdom: Den multietniske studien av aterosklerose. Nyre Int. 76, 991–998 (2009).

7. Isakova, T. et al. Postprandial mineralmetabolisme og sekundær hyperparathyroidisme i tidlig CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 615–623 (2008).

8. Scanni, R., vonRotz, M., Jehle, S., Hunter, HN & Krapf, R. Den menneskelige responsen på akutte enterale og parenterale fosfatbelastninger. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 2730–2739 (2014).

9. Pasch, A., Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Fosfat, forkalkning i blod og mineralstress: Det fysiologiske blodmineralbuffersystemet og dets assosiasjon med kardiovaskulær risiko. Int. J. Nephrol. 2018, 9182078 (2018).

10. Jahnen-Dechent, W. et al. Gjørme i blodet: Rollen til protein-mineralkomplekser og ekstracellulære vesikler i biomineralisering og forkalkning. J. Struct. Biol. 212, 107577 (2020).

11. Schinke, T. et al. Serumproteinet alfa2-HS glykoprotein/fetuin hemmer apatittdannelse in vitro og mineraliserende calvariaceller. En mulig rolle i mineralisering og kalsiumhomeostase. J. Biol. Chem. 271, 20789–20796 (1996).

12. Heiss, A. et al. Strukturelt grunnlag for forkalkningsinhibering av alfa 2-HS glykoprotein/fetuin-A. Dannelse av kolloidale kalsiproteinpartikler. J. Biol. Chem. 278, 13333–13341 (2003).

13. Cai, MM, Smith, ER & Holt, SG Fetuin-A's rolle i mineralsmugling og avsetning. Bonekey Rep. 4, 672 (2015).

14. Smith, ER, Hewitson, TD & Jahnen-Dechent, W. Kalsiproteinpartikler: Mineral oppfører seg dårlig? Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 29, 378–386 (2020).

15. Jahnen-Dechent, W., Schäfer, C., Ketteler, M. & McKee, MD Mineral chaperones: En rolle for fetuin-A og osteopontin i hemming og regresjon av patologisk forkalkning. J. Mol. Med. (Berl.) 86, 379–389 (2008).

16. Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Naturens middel mot fosfatproblemer: Kalsiproteinpartikler regulerer systemisk mineralmetabolisme. Nyre Int. 97, 648–651 (2020).

17. Schafer, C. et al. Serumproteinet alfa 2-Heremans-Schmid glykoprotein/fetuin-A er en systemisk virkende hemmer av ektopisk forkalkning. J. Clin. Investere. 112, 357–366 (2003).

18. Herrmann, M. et al. Lumenal forkalkning og mikrovaskulopati hos fetuin-A-mangelfulle mus fører til multippel organmorbiditet. PLoS ONE 15, e0228503 (2020).

19. Heiss, A., Pipich, V., Jahnen-Dechent, W. & Schwahn, D. Fetuin-A er et mineralbærerprotein: Nøytronspredning med liten vinkel gir ny innsikt om Fetuin-A kontrollert forkalkningshemming. Biofys. J. 99, 3986–3995 (2010).

20. Smith, ER et al. Serum fetuin-A-konsentrasjon og fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler hos pasienter med kronisk inflammatorisk sykdom og nyresvikt. Nephrology (Carlton) 18, 215–221 (2013).

21. Smith, ER et al. Fosforylerte fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler er assosiert med aortastivhet og et prosyklisk miljø hos pasienter med CKD før dialyse. Nephrol. Slå. Transplantasjon. 27, 1957–1966 (2012).

22. Smith, ER et al. Serumforkalkningstilbøyelighet forutsier dødelighet av alle årsaker ved predialyse CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 339–348 (2014).

23. Hamano, T. et al. Fetuin-mineralkomplekset reflekterer ekstraosøst forkalkningsstress ved CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 21, 1998–2007 (2010).

24. Nakazato, J. et al. Assosiasjon av kalsiproteinpartikler målt med en ny metode med koronararterieplakk hos pasienter med koronararteriesykdom: En tverrsnittsstudie. J. Cardiol. 74, 428–435 (2019).

25. Gatate, Y. et al. Mid-term prediktiv verdi av kalsiproteinpartikler hos vedlikeholdshemodialysepasienter basert på en gelfiltreringsanalyse. Aterosklerose 303, 46–52 (2020).

26. Cai, MMX, Smith, ER, Tan, SJ, Hewitson, TD & Holt, SG. Rollen til sekundære kalsiproteinpartikler i mineraliseringsparadokset ved kronisk nyresykdom. Calcif. Vev. Int. 101, 570–580 (2017).

27. Aghagolzadeh, P. et al. Kalsifiseringen av vaskulære glatte muskelceller induseres av sekundære kalsiproteinpartikler og forsterkes av tumornekrosefaktor alfa. Aterosklerose 251, 404–414 (2016).

28. Koppert, S. et al. Cellulær clearance og biologisk aktivitet av kalsiproteinpartikler avhenger av deres modningstilstand og krystallinitet. Front. Immunol. 9, 1991 (2018).

29. Koeppert, S. et al. Levende avbildning av kalsiproteinpartikkelclearance og reseptormediert opptak: Kalsiproteinmonomers rolle. Front. Celle. Dev. Biol. 9, 633925 (2021).

30. Shishkova, D. et al. Kalsiumfosfatbioner forårsaker intimal hyperplasi i intakte aorta hos normolipidemiske rotter gjennom endotelskade. Int. J. Mol. Sci. 20, 5728 (2019).

31. Kuro-o, M. Et fosfatsentrisk paradigme for patofysiologi og terapi av kronisk nyresykdom. Nyre Int. Suppl. 2011 (3), 420–426 (2013).

32. Miura, Y. et al. Identifikasjon og kvantifisering av plasmakalsiproteinpartikler med distinkte fysiske egenskaper hos pasienter med kronisk nyresykdom. Sci. Rep. 8, 1256 (2018).

33. Smith, ER et al. En ny fluorescerende probe-basert flowcytometrisk analyse for mineralholdige nanopartikler i serum. Sci. Rep. 7, 5686 (2017).

34. Nakamura, K. et al. Effekten av lantankarbonat på kalsiproteinpartikler hos hemodialysepasienter. Clin. Exp. Nephrol. 24, 323–329 (2020).

35. Tiong, MK et al. Effekt av en middels dialysator på proteinbundne uremiske toksiner og mineralmetabolismemarkører hos pasienter på hemodialyse. Hemodial. Int. https://doi.org/10.1111/hdi.12924 (2021).

36. Tiong, MK, Smith, ER, Toussaint, ND, Al-Khayyat, HF & Holt, SG Reduksjon av kalsiproteinpartikler hos voksne som mottar infliksimab for kronisk inflammatorisk sykdom. JBMR Plus 5, e10497 (2021).

37. Smith, ER, Pan, FFM, Hewitson, TD, Toussaint, ND & Holt, SG Effekt av sevelamer på kalsiproteinpartikler hos hemodialysepasienter: Te sevelamer versus kalsium for å redusere fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler i dialyse (SCaRF) randomisert kontrollert forsøk. Nyre Int. Rep. 5, 1432–1447 (2020).

38. Ruderman, I., Smith, ER, Toussaint, ND, Hewitson, TD & Holt, SG Langsgående endringer i ben- og mineralmetabolisme etter seponering av cinacalcet hos dialysepasienter med sekundær hyperparathyroidisme. BMC Nephrol. 19, 113 (2018).

39. Bressendorf, I. et al. Effekten av å øke dialysatmagnesium på kalsiproteinpartikler, betennelse og benmarkører: Post hoc-analyse fra en randomisert kontrollert klinisk studie. Nephrol. Slå. Transplantasjon. 36, 713–721 (2021).

40. Pasch, A. et al. Den nanopartikkelbaserte testen måler den generelle tilbøyeligheten til forkalkning i serum. J. Am. Soc. Nephrol. 23, 1744–1752 (2012).

41. Eelderink, C. et al. Serumforkalkningstilbøyelighet og risikoen for kardiovaskulær dødelighet og dødelighet av alle årsaker i den generelle befolkningen: Forhindre-studien. Arterioskler. Tromb. Vasc. Biol. 40, 1942–1951 (2020).

42. Bundy, JD et al. Serumforkalkningstilbøyelighet og koronararterieforkalkning blant pasienter med CKD: Te CRIC (Chronic Renal Insufficiency Cohort) studie. Er. J. Nyre. Dis. 73, 806–814 (2019).

43. Bundy, JD et al. Serumforkalkningstilbøyelighet og kliniske hendelser ved CKD. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 14, 1562–1571 (2019).

44. Pasch, A. et al. Blodforkalkningstilbøyelighet, kardiovaskulære hendelser og overlevelse hos pasienter som får hemodialyse i EVOLVE-studien. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 12, 315–322 (2017).

45. Smith, ER, Hewitson, TD, Hanssen, E. & Holt, SG Biokjemisk transformasjon av kalsiproteinpartikler i uremi. Bone 110, 355–367 (2018).

46. ​​Chen, W. et al. Assosiasjoner av serumkalsiproteinpartikkelstørrelse og transformasjonstid med arteriell forkalkning, arteriell stivhet og dødelighet hos hendende hemodialysepasienter. Er. J. Kidney Dis. 77, 346–354 (2021).

47. Chen, W. et al. Pasienter med avansert kronisk nyresykdom og vaskulær forkalkning har en stor hydrodynamisk radius av sekundære kalsiproteinpartikler. Nephrol. Slå. Transplantasjon. 34, 992–1000 (2019).

48. Akiyama, KI et al. Kalsiproteinpartikler regulerer uttrykk for fibroblastvekstfaktor-23 i osteoblaster. Nyre Int. 97, 702–712 (2020).

49. Smith, ER Kalsiproteinpartikler: En mineralbiomarkør som trenger bedre måling. Aterosklerose 303, 43–45 (2020).

50. Smith, ER Te isolasjon og kvantifisering av fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler fra biologiske væsker. Metoder Mol. Biol. 1397, 221–240 (2016).

51. Guo, Y., Logan, HL, Glueck, DH & Muller, KE Velge en prøvestørrelse for studier med gjentatte mål. BMC Med. Res. Metode. 13, 100 (2013).

52. Liu, C., Cripe, TP & Kim, MO Statistiske problemer i longitudinell dataanalyse for behandlingseffektivitetsstudier i biomedisinske vitenskaper. Mol. Ter. 18, 1724–1730 (2010).

53. Tobin, J. Estimering av sammenhenger for begrensede avhengige variabler. Econometrica 26, 24–36 (1958).

54. Ter Meulen, KJ et al. Sitronsyredialysat forbedrer forkalkningstilbøyeligheten til hemodialysepasienter: En multisenter prospektiv randomisert cross-over-studie. PLoS ONE 14, e0225824 (2019).

55. Tiem, U. et al. Effekten av fosfatbindemiddelterapi med sukroferrioksyhydroksid på forkalkningstilbøyelighet hos kroniske hemodialysepasienter: en randomisert, kontrollert, kryssforsøk. Clin. Nyre J. 14, 631–638 (2021).

56. Yamada, H. et al. Daglig variasjon i serumnivåer av kalsiproteinpartikler og deres assosiasjon med mineralmetabolismeparametere: En tverrsnittspilotstudie. Nephrology (Carlton) 23, 226–230 (2018).

57. Stremke, ER et al. Intestinal fosforabsorpsjon hos moderat CKD og friske voksne ble bestemt ved bruk av et radioisotopisk sporstoff. J. Am. Soc. Nephrol. 32, 2057–2069 (2021).

58. Volk, C. et al. Akutte effekter av et uorganisk fosfortilsetningsstoff på mineralmetabolisme og kardiometabolske risikofaktorer hos friske personer. J. Clin. Endokrinol. Metab. 107, e852–e864 (2022).

59. Turner, ME et al. Nedsatt fosfattoleranse ble avslørt med en akutt oral utfordring. J. Bone Miner. Res. 33, 113–122 (2018).

60. Tomas, L. et al. Akutt tilpasning til oralt eller intravenøst ​​fosfat krever parathyroidhormon. J. Am. Soc. Nephrol. 28, 903–914 (2017).

61. Zelt, JG et al. Akutt vevsmineralavsetning som respons på en fosfatpuls ved eksperimentell CKD. J. Bone Miner. Res. 34, 270–281 (2019).

62. Lebreton, JP et al. Serumkonsentrasjonen av humant alfa 2 HS glykoprotein under den inflammatoriske prosessen: bevis på at alfa 2 HS glykoprotein er en negativ akuttfase reaktant. J. Clin. Investere. 64, 1118-1129 (1979).

63. Uedono, H. et al. Effekter av fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler på posttranslasjonelle modifikasjoner av fetuin-A i HepG2-celler. Sci. Rep. 11, 7486 (2021).

64. Niv, Y. & Fraser, GM Te alkalisk tidevannsfenomen. J. Clin. Gastroenterol. 35, 5–8 (2002).

65. Smith, ER, Hewitson, TD & Holt, SG Diagnostiske tester for vaskulær forkalkning. Adv. Kronisk nyredis. 26, 445–463 (2019).

66. Sprague, SM et al. Diagnostisk nøyaktighet av beinomsetningsmarkører og beinhistologi hos pasienter med CKD behandlet med dialyse. Er. J. Kidney Dis. 67, 559–566 (2016).

67. Vorland, CJ et al. Progresjon av nyresykdom reduserer ikke intestinal fosforabsorpsjon i en rottemodell av kronisk nyresykdom-mineral bensykdom. J. Bone Miner. Res. 35, 333–342 (2020).

68. Marks, J. et al. Intestinal fosfatabsorpsjon i en modell av kronisk nyresvikt. Nyre Int. 72, 166–173 (2007).

69. Hill Gallant, KM & Vorland, CJ Intestinal fosforabsorpsjon: Nylige funn i translasjons- og klinisk forskning. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 30, 404–410 (2021).

70. Herrmann, M. et al. Clearance av fetuin-A-holdige kalsiproteinpartikler medieres av scavenger-reseptor-A. Circ. Res. 111, 575–584 (2012).

71. Sanitarium Health Food Company. UP&GO™ vaniljeissmak. https://www.sanitarium.com.au/products/up-and-go/up-and-go/ vanilla-ice-favor (2021).

72. Australian Government National Health and Medical Research Council. Næringsreferanseverdier for Australia og New Zealand. https://www.nrv.gov.au/nutrients (2021).

Mark K.Tiong1,2, Michael MX Cai1 , Nigel D.Toussaint1,2, Sven‑JeanTan1,2, Andreas Pasch3,4,5 & Edward R. Smith1,2

1 Department of Nephrology, Royal Melbourne Hospital, Grattan Street, Parkville, VIC 3052, Australia.

2 Institutt for medisin (RMH), University of Melbourne, Parkville, Australia.

3 Calciscon AG, Biel, Sveits.

4 Lindenhofspital Bern, Bern, Sveits.

5 Institutt for fysiologi og patofysiologi, Johannes Kepler-universitetet, Linz, Østerrike.