Utforske effekten av Cistanche Phenylethanoid Glycosider på ikke-alkoholisk fettleversykdom basert på nettverksfarmakologi og cellulære eksperimenter

Abstrakt

Objektiv: For å undersøke de forbedrende effektene av Cistanche fenyletanoidglykosider på ikke-alkoholisk fettleversykdom (NAFLD).

Metoder: Nettverksfarmakologi ble brukt til å forutsi de potensielle mekanismene til Cistanche fenyletanoidglykosider mot NAFLD. En in vitro NAFLD-modell ble etablert ved å indusere HepG2-celler med frie fettsyrer (FFA). Cellelevedyktighet ble vurdert ved å bruke CCK-8-analysen; Oljerød O-farging ble brukt for å observere lipidakkumulering; triglyserid (TG) og total kolesterol (TC) nivåer ble målt ved bruk av analysesett; JC-1-farging ble brukt for å vurdere mitokondriell membranpotensial; intracellulære ROS-nivåer ble evaluert med DCFH-DA fluorescerende probe; apoptose ble påvist ved bruk av Hoechst 33342-farging; og ekspresjonen av TNF-, PI3K-, Akt- og Bax-proteiner ble målt ved Western blot.

Resultater: Ti aktive forbindelser og 77 potensielle mål relatert til anti-NAFLD-effekter ble identifisert, med kjernemål inkludert TNF, NFKB1 og TLR4. Forbindelsene viste god bindingsaffinitet med målene, spesielt TNF. Sammenlignet med modellgruppen reduserte Cistanche fenyletanoidglykosider signifikant FFA-indusert lipidakkumulering i HepG2-celler (P < 0,01), reduserte intracellulære TG-, TC- og ROS-nivåer (P < 0,01), gjenopprettet mitokondrielt membranpotensial, lindret, redusert mitokondriell proteinuttrykk (P < 0,01). 0,05), og nedregulerte TNF-, PI3K og Akt-proteinekspresjon (P < 0,05, P < 0,01).

Konklusjon: Cistanche-fenyletanoidglykosider utøver anti-NAFLD-effekter ved å forbedre FFA-indusert lipidakkumulering, mitokondriell dysfunksjon, oksidativt stress og apoptose i HepG2-celler. Disse effektene kan være assosiert med TNF/PI3K/Akt-signalveien.

Nøkkelord: Cistanche fenylethanoid glykosider; ikke-alkoholisk fettleversykdom (NAFLD); lipidmetabolisme; oksidativt stress;apoptose; TNF/PI3K/Akt signalvei; nettverk farmakologi; celleeksperiment

Cistanche Benefits in depression

Cistanche fenylethanoid glykosider

catalog cistanche

Høyinnhold Cistanche-ekstrakt selges

Kontakt oss kjøp nå

1. Introduksjon

Ikke-alkoholisk fettleversykdom (NAFLD) er en kronisk leversykdom preget av hepatisk steatose uten overdreven alkoholforbruk. Prevalensen i Kina har nådd 32,9 %. Patogenesen involverer flere mekanismer, inkludert insulinresistens, oksidativt stress og ubalanse i tarmmikrobiota. Kliniske symptomer inkluderer tretthet, ubehag i leverområdet og magesmerter, og i alvorlige tilfeller kan det utvikle seg til ikke-alkoholisk steatohepatitt (NASH).

For tiden er livsstilsintervensjoner den primære behandlingen for NAFLD. Selv om FDA godkjente det første legemidlet for NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), i 2024, har det potensielle bivirkninger som leverskade og kardiovaskulær risiko. Derfor er det et presserende behov for å finne trygge og effektive behandlinger for NAFLD.

Echinacoside in cistanche 7

Tradisjonell kinesisk medisin (TCM), med sine egenskaper av flere komponenter, flere mål og flere veier, stemmer godt overens med den komplekse patogenesen til NAFLD og tilbyr unike fordeler i behandlingen.

Cistanche deserticolaogCistanche tubulosaer medisinplanter fra familien Orobanchaceae, oppført iShennong Bencao Jing. Deres kjøttfulle stilker, rike på skjell, brukes tradisjonelt til å tonifisere leveren og nyrene, fylle på essens og blod og fukte tarmene. De primære aktive komponentene - fenyletanoidglykosider - har antiinflammatoriske, lipidsenkende og leverbeskyttende egenskaper. Imidlertid mangler det fortsatt systematiske studier av deres effekter mot NAFLD.

Denne studien tar sikte på å analysere det farmakologiske grunnlaget og potensielle mekanismene til Cistanche fenyletanoidglykosider i behandling av NAFLD ved bruk av nettverksfarmakologi, og å utforske mekanismene deres ytterligere gjennom cellulære eksperimenter, og gi et teoretisk grunnlag for utvikling av nye legemidler.

Echinacoside in cistanche 11

2. Materialer

2.1 Nettverksfarmakologiverktøy

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatikk: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB PDB: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 Cellelinje

HepG2 humane leverkreftceller, kjøpt fra Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reagenser og legemidler

Cistanche-fenyletanoidglykosider (batchnr.. 201610, renhet større enn eller lik 80 %, inneholdende 44,5 % echinacosid og 16,1 % verbascoside), kjøpt fra Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Stamløsning tilberedt ved 6,40 mg/ml og lagret ved –20 mg/ml, filtrert.

Ytterligere reagenser inkluderer:

Fetalt bovint serum (FBS), DMEM-medium, penicillin-streptomycin, Oil Red O-fargingssett, BCA-sett, ROS-deteksjonssett, Hoechst 33342, BSA-V, natriumoleat, natriumpalmitat, TG- og TC-analysesett, CCK-8-analyse for mitochondrial-antistoffer, JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -actin og sekundære HRP-konjugerte antistoffer.