Utforske de terapeutiske effektene av Cistanche-basert formulering på kronisk ikke-bakteriell prostatitt (CNP) og dens mekanisme via tarmmikrobiota og metabolomikk i en rottemodell

Abstrakt

Basert på eneksperimentell autoimmun prostatitt (EAP) rottemodell, undersøker denne studienterapeutiske effekter og underliggende mekanismer til en Cistanche-basert kapsel (CBC)i å lindrekronisk ikke-bakteriell prostatitt (CNP). Målet er å gi et preklinisk grunnlag for utvikling avforbedrede botaniske medisinermed utvidede indikasjoner for forvaltning avkronisk prostatitt og bekkensmerter.

Metodikk:

Histopatologiske endringeri rotte ble prostatavev vurdert viahematoxylin-eosin (HE) farging.

Infiltrasjon av hvite blodlegemeroglecithin kroppstettheti prostatahomogenater ble evaluert mikroskopisk.

Serumnivåer avsuperoksiddismutase (SOD)ogmalondialdehyd (MDA)ble målt ved hjelp av biokjemisk analyse.

Inflammatoriske cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 og IL-10) ble kvantifisert ved å brukeenzymkoblet immunsorbentanalyse (ELISA).

16S rDNA-sekvenseringble brukt til å evaluere endringer itarmmikrobiota.

Umålrettet metabolomikkanalyse ble utført for å belysemetabolske veier påvirket av CBC.

Western blot (WB)ble brukt til å verifisere moduleringen avSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalvei.

Resultater:

CBC-administrasjon betydelig:

Redusert histologisk skadetil prostatavev;

Økt lecitinkroppstetthetogredusert leukocyttinfiltrasjon;

Senket pro-inflammatoriske cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);

Økte det antiinflammatoriske cytokinet IL-10;

Forbedret sammensetning av tarmmikrobiota, særlig økendeLactobacillusogBifidobacterium animalis, mens du redusererunclassified_f_PrevotellaceaeogVeillonella;

Endret 10 nøkkelmetabolitter, inkludertsfingosinogretinoyl-glukuronid, påvirkersfingolipidmetabolismeogretinol metabolisme;

Nedregulert SPHK1 og S1P1 uttrykk, og hemmetPI3K og Akt fosforyleringi prostatavev.

Konklusjon:

Cistanche-baserte kapsler (CBC) effektivtlindre inflammatorisk skadei prostatavevet til EAP-rotter. Mekanismene kan omfatte:

Modulering av intestinal mikrobiota dysbiose;

Korrigering av metabolske dysfunksjoner;

Undertrykkelse av SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalveien.

Disse funnene støtter potensialet tilCistanche-avledede urteformuleringersom ennaturlig multi-target terapitilkronisk ikke-bakteriell prostatittog gi en lovende retning for fremtidenurtemedisininnovasjon.

Nøkkelord:

Cistanche-baserte kapsler; kronisk ikke-bakteriell prostatitt; tarmmikrobiota; metabolomikk; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-vei; urtebehandling for prostatitt; naturlig anti-inflammatorisk terapi; EAP rottemodell

 

 

Cistanche-basert formel te

Kjøp nå

 

 

Abstrakt:

Kronisk ikke-bakteriell prostatitt/kronisk bekkensmertesyndrom (CNP/CPPS), også kjent som kategori III prostatitt, står for ca.90 % av alle prostatitttilfeller. Det er preget av ubehag i nedre urinveier, bekken- og perinealsmerter, seksuell dysfunksjon og ofte psykologiske eller nevrologiske symptomer. I tradisjonell kinesisk medisin (TCM) er CNP kategorisert under "Jing Zhuo" (seminal turbiditet), ofte assosiert med intern fuktighet, miltmangel eller langvarig bruk av kalde eller bitre medisiner som svekker miltens funksjon, noe som fører til akkumulering av fuktighet og varme i prostata.

Gjeldende vestlige farmakologiske behandlinger for CNP, inkludert antibiotika, -blokkere og NSAIDs, fokuserer primært på symptombehandling og mangler ofte langsiktig effekt. I økende grad henvender forskerne seg tilurtemedisin som et tryggere og mer helhetlig alternativ.

Cistanche: En lovende urtekandidat

Cistanche, en tradisjonell kinesisk urt kjent for sinnyre-tonifiserende, anti-inflammatorisk, immunmodulerende og antioksidantegenskaper, har vist potensiale ved behandling av ulike genitourinære lidelser. Moderne farmakologiske studier rapporterer detCistanche deserticolakan regulere inflammatoriske cytokiner, forbedre immunresponsen og forbedre mikrosirkulasjonen, noe som gjør det til enlovende kandidat for CNP-behandling.

Til tross for økende interesse, den presisemekanismer som Cistanche lindrer CNP forblir dårlig forstått. Nyere studier tyder på dettarmmikrobiota dysbiosespiller en kritisk rolle i patogenesen av CNP. Derfor undersøker denne studien de terapeutiske effektene av enCistanche-basert urtekapsel (CBC)på CNP ved bruk av en rottemodell for eksperimentell autoimmun prostatitt (EAP), med spesielt fokus påtarmmikrobiotasammensetning og metabolomiske endringer.

 

1. Materialer og metoder

1.1 Dyr

30 SPF-grade Sprague-Dawley (SD) hannrotter(300–320 g) og45 SD-hannrotter av SPF-grad(180–200 g) ble hentet fra Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.

Plassert under standard SPF-forhold: temperatur 25±1 grad, fuktighet 55±5 %, 12-timers lys/mørke-syklus.

Dyreetisk godkjenning:HUCMS00302159, gitt av Etikkkomiteen ved Hubei University of Chinese Medicine.

1.2 Legemidler og reagenser

Cistanche-baserte kapsler (CBC)(Batch: 20221226) fra et GMP-sertifisert urtefarmasøytisk firma.

Tamsulosin hydroklorid kapsler(positiv kontroll) kjøpt fra Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.

Fullfør Freunds adjuvans (CFA)fra Sigma (Tyskland).

ELISA-settfor IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF- og iNOS fra Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.

Oksidativt stresssett(MDA, T-SOD) fra Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.

Tarmmikrobiota DNA-ekstraksjonssettogmetabolomiske reagenserfra Meiji Biotechnology (Shanghai).

1.3 Utstyr

Høyhastighetsentrifuge (Eppendorf, Tyskland), UHPLC og Q-Exactive HF-X massespektrometer (Thermo Fisher Scientific), og andre molekylærbiologiske instrumenter for ELISA, PCR, sekvensering og metabolomikkanalyse.

2. Eksperimentell protokoll

2.1 Induksjon av eksperimentell autoimmun prostatitt (EAP) modell

2.1.1 Fremstilling av prostataprotein-CFA-emulsjon

Prostatavev ble ekstrahert fra donorrotter, homogenisert i sterilt saltvann med 0,5 % TritonX-100 og sentrifugert ved 20 000 rpm i 30 minutter ved 4 grader.

Proteinkonsentrasjon justert til 20 mg/ml ved bruk av BCA-analyse.

Proteinekstrakt ble emulgert med CFA i forholdet 1:1 for å danneCNP antigen emulsjon.

2.1.2 Vaksinasjonsprosedyre

45 SD-rotter (180±20g) ble tilfeldig delt, med 10 tildelt den normale gruppen.

Resterende rotter mottattsubkutane flerpunktsinjeksjonerav CNP-antigenemulsjonen i lysken, innsiden av låret og ryggen.

Boosterimmunisering ble administrert påDag 15etter samme protokoll.

Normale kontroller fikk saltvannsinjeksjoner.

2.2 Gruppering og behandling

På dag 28 etter immunisering ble vellykket modellering bekreftet via histologi (HE-farging).

Rotter ble tilfeldig tildelt:

Normal kontrollgruppe

Modellgruppe

Positiv narkotikagruppe: Tamsulosin (0,021 mg/kg)

CBC lavdosegruppe: 0,63 g/kg (klinisk ekvivalent dose)

CBC høydosegruppe: 1,26 g/kg

Behandlingen ble administrert oralt én gang daglig i 30 dager. Kontroll- og modellgrupper fikk saltvann.

 

 

2.3 Prøveinnsamling og analyse

24 timer etter den siste dosen ble rottene avlivet.

Blod ble samlet via abdominal aorta; serum ble separert og lagret ved -80 grader.

Prostatavev ble høstet, veid og undersøkt makroskopisk.

DeProstataindeks (PI)ble beregnet:
PI=Prostata våtvekt / kroppsvekt

Vev ble fiksert i formalin for histologi eller frosset for cytokinanalyse, Western blotting, mikrobiota-DNA-ekstraksjon og metabolomikk.

Konklusjon og betydning

Denne studien har som mål å gipreklinisk bevistil bruk avCistanche-basert urteterapii behandlingen avkronisk ikke-bakteriell prostatitt. Ved å integreretarmmikrobiotaanalyseogmetabolomikk profilering, søker vi å avdekkeflermålsmekanismergjennom hvilke Cistanche utøver sine antiinflammatoriske og immunmodulerende effekter.

Disse funnene vil støtteutvikling av Cistanche som en ny urtemedisinfor CNP og potensielt føre tilnye indikasjonerfor sin kliniske anvendelse.