Abstrakt

Bakgrunn:Det er mangel på bildebehandlings- og bildebehandlingsteknikker for nøyaktig diskriminering og kvantifisering av den dermale ekstracellulære matrisen (ECM), først og fremst kollagen. Denne studien hadde som mål å utvikle og demonstrere en helhetlig avbildnings- og bildebehandlingstilnærming for å visualisere og kvantifisere kollagenremodellering i makro-, mikro- og nanoskala ved bruk av histokjemisk avbildning, Reflectance Confocal Microscopy (RCM) og Atomic Force Microscopy (AFM) , henholdsvis.

Glykosid av cistanche kan også øke aktiviteten til SOD i hjerte- og levervev, og redusere innholdet av lipofuscin og MDA i hvert vev betydelig, effektivt rense ulike reaktive oksygenradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) og beskytte mot DNA-skader forårsaket av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en sterk renseevne for frie radikaler, en høyere reduserende evne enn vitamin C, forbedrer aktiviteten til SOD i sædsuspensjon, reduserer innholdet av MDA og har en viss beskyttende effekt på sædmembranfunksjonen. Cistanche-polysakkarider kan øke aktiviteten til SOD og GSH-Px i erytrocytter og lungevev hos eksperimentelt senescent mus forårsaket av D-galaktose, samt redusere innholdet av MDA og kollagen i lunge og plasma, og øke innholdet av elastin, har en god rensende effekt på DPPH, forlenger hypoksitiden hos eldre mus, forbedrer aktiviteten til SOD i serum og forsinker den fysiologiske degenerasjonen av lunge hos eksperimentelt eldre mus. Med cellulær morfologisk degenerasjon har eksperimenter vist at Cistanche har den gode antioksidantevnen og har potensial til å være et medikament for å forebygge og behandle aldringssykdommer. Samtidig har echinacoside i Cistanche en betydelig evne til å rense DPPH-frie radikaler og har evnen til å rense reaktive oksygenarter og forhindre frie radikal-indusert kollagen-nedbrytning, og har også en god reparasjonseffekt på anionskader av tymin frie radikaler.

Klikk på Slik bruker du Antioxidant Cistanche

【For mer informasjon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Materialer og metoder:For proof-of-concept ble et kommersielt anti-aldringsprodukt kjent for å indusere kollagen-neosyntese og reorganisering testet ex vivo på humane hudbiopsier fra to eldre kvinner.

Resultater:I forhold til ubehandlet hud var kollagenfibre (RCM) og fibriller (AFM) lengre og på linje etter behandling. Innholdet av kollagen og elastin (histokjemisk bildediagnostikk og ELISA) ble statistisk forbedret etter behandling.

Konklusjon:Basert på funnene våre kan vi konkludere: (1) AFM, RCM og histokjemisk avbildning kan nøyaktig skille kollagen fra andre ECM-komponenter i huden og (2) bildebehandlingsmetodene kan muliggjøre kvantifisering og dermed fange opp små forbedringer i kollagen-remodellering etter behandling (kommersielt kosmetisk produkt med kollagenorganiseringsteknologi som proof-of-concept). Den rapporterte holistiske avbildningstilnærmingen har direkte kliniske implikasjoner for forskere og hudleger for å ta raske, sanntids- og nøyaktige beslutninger innen hudforskning og diagnostikk.

SØKEORD

anti-aldring, atomkraftmikroskopi, kollagenreorganisering, dermal remodellering, ekstracellulær matrise, reflektans konfokalmikroskopi (Vivascope)

1. INTRODUKSJON

Kontrollert remodellering av den dermale ekstracellulære matrisen (ECM) er avgjørende for normal utvikling og homeostase av huden og andre organer. ECM-remodellering er kjennetegnet i patofysiologien for aldring av huden,1 sårheling og noen dødelige sykdommer, inkludert, men ikke begrenset til, kreft og fibrose.2 Det er mange estetiske og medisinske alternativer for å behandle disse hudtilstandene, men avbildningsmetoder er knappe for sanntidsvisualisering av ECM-remodellering, først og fremst kollagen som er den mest omfattende strukturelle komponenten i den dermale ECM. Selv om de er under utvikling, er noen av de nye ikke-invasive sanntids kliniske avbildningsteknikkene for å visualisere kollagen og dets organisering Multi-Photon Microscopy with Second Harmonic Generation (MPM-SHG),3 Reflectance Confocal Microscopy (RCM),4 Optical Coherence Tomography (OCT),5,6 Lindfield Confocal Optical Coherence Tomography (LC-OCT) basert på kombinasjonen av modaliteter av RCM og OCT,7 magnetisk resonansavbildning (MRI),8 og ultralydavbildning.9 Av disse er RCM, MPM, og LC-OCT er CE-sertifiserte hudavbildningsinstrumenter. Blant dem alle er imidlertid RCM-teknikken (Vivascope® 1500 og 3000 fra Lucid, Inc. USA) den eneste FDA-godkjente diagnostiske teknikken for klinisk dermatologi (510(k)# K080788), som også dekkes av de fleste forsikringer i USA for å diagnostisere hudlesjoner.10 Det er et ikke-invasivt og kostnadseffektivt alternativ til klassiske biopsi- og histopatologiske teknikker for å diagnostisere og overvåke hudkreft og deres behandling.10 Blant prekliniske avbildningsmetoder for å visualisere kollagenorganisering, atomkraftmikroskopi ( AFM),11 elektronmikroskopi,11,12 histokjemisk avbildning ved bruk av fluorescensmikroskopi,13 polarisert lysmikroskopi,14 konfokal laserskanningsmikroskopi (CLSM),15,16 multimodal konfokal reflektans og fluorescensmikroskopi,17 og røntgenspredning med liten vinkel18 er Velkjente.

En av de viktigste forbeholdene som begrenser bruken av de ovennevnte kliniske avbildningsteknikkene er at det krever kjedelig manuell vurdering fordi fagekspertise og erfaring for å nøyaktig analysere svart-hvitt-bilder av hudstrukturer er en forutsetning.19,20 Derfor er det mer innsats kreves innen bildebehandling for å utvikle og validere algoritmer og programvare for å automatisere analyse,5 produsere enkle å tolke digitalt fargede bilder,16,17 og trekke ut kvantitativ informasjon for å overvåke sykdomsprogresjon og terapi, inkludert kollagenorganisering i sammenheng med vår forskning.3,6,12–14 Det vil gjøre det mulig for ikke-hudleger og hudleger å ta beslutninger raskere og med større selvtillit ettersom beslutningene vil bli tatt fra en større utvalgsstørrelse av de randomiserte bildene. Noen grunnleggende studier er gjort for å vise bruken av RCM og MPM for å forstå aldersrelaterte hudendringer (inkludert kollagenorganisering) hos unge versus gamle eller fotoaldrende personer.21,22 Det er imidlertid en begrenset innsats for å utvide kraften av disse bildeteknikkene for å fange opp forbedringer i behandlingen, som krever sofistikert bildebehandling for å få kvantitativ informasjon.3,13,16

Denne studien hadde som mål å utvikle og demonstrere en helhetlig bildebehandlings- og bildebehandlingsmetode for å visualisere og kvantifisere forbedringer i hudremodellering (primært kollagen). For proof-of-concept ble et klinisk bevist kommersielt antialdringskosmetikkprodukt med kollagenorganiseringsteknologi brukt for å vurdere muligheten for å bruke bildebehandling for å kvantifisere mindre endringer i kollagen før og etter behandling.

2. MATERIALER OG METODER

2.1 Hudbiopsier og deres behandling

Hudbiopsier som ble brukt i denne forskningen var restmaterialet fra abdominal plastisk kirurgi innhentet fra to givere etter deres samtykke (samtykke beholdt av klinikkene). Donor #1 (62 år) og donor #2 (52 år) var begge kvinner og Fitzpatrick hudtype II. Biopsier ble opprettholdt under standard kulturbetingelser og behandlet daglig med testprodukt eller kontroll (ubehandlet eller placebo) i 6 dager, og høstet på dag 7 for avbildning og ELISA. Biopsier fra donor #1 ble brukt til ELISA, RCM og AFM, mens biopsier fra donor #2 ble brukt til histokjemisk avbildning.

2,2 RCM og AFM bildebehandling

Hudbiopsiene fra donor nr. 1 ble høstet på dag 7, og avbildet direkte uten snitting og farging. AFM (Bruker, Multimode 8 AFM) og RCM (Vivascope® 1500) ble brukt for å oppnå høyoppløselige nano- og mikroskalabilder av kollagen i hud behandlet med testproduktet, og ubehandlet som kontroll. For alle eksperimenter var AFM utstyrt med en liten cantilever (PPP-FMR- 20, nanosensorer): fjærkonstant, k=0.5–9.5 N/m, resonansfrekvens, f {{13} }–115 kHz i luft og ble drevet i tappemodus ved romtemperatur. Hudprøvene ble montert sideveis på en magnetisk skive (1 mm × 1 mm) og plassert på scenen. AFM-bildene ble tatt gjennom et side-/sidebilde av hudbiopsiene for å unngå seksjonering. For RCM-avbildning ble syv tilfeldige bilder hentet fra behandlede og ubehandlede biopsier fra toppen (Stratum corneum-siden) og bunnen (dermis-siden) for å ta bilder av høy kvalitet av kollagen. RCM-bilder ble behandlet og analysert med ConfoScan® for kollagentekstur for å rapportere gjennomsnittlig fragmenteringsindeks. Fragmenteringsindeksen er definert av arealet av objekter delt på antall objekter oppnådd etter behandling av råbildene for kollagentekstur. Figur S1 viser bildebehandling ved bruk av ConfoScan® for å oppnå kvantitative verdier på kollagenfragmenteringsindeksen (CFI).

2.3 Histokjemisk avbildning

For å teste effekten av antialdringsproduktet på behandling av fotoaldret hud (gjenoppretting av fotoskadet kollagen og elastin), ble biopsiene fra donor nr. 2 eksponert for en simulert dose UV (6 J/cm2 med 96 prosent UVA) ). Prøvene og forholdene som ble testet i eksperimentene var: (A) negativ kontroll (ubehandlet, ingen UV og ingen testprodukt), (B) positiv kontroll (hud eksponert for UV, men ingen testprodukt), og (C) behandlet ( hud utsatt for UV, etterfulgt av daglig behandling med testprodukt). Hudbiopsier ble høstet på dag 7, seksjonert, farget for kollagen (Picosirius-farging) og elastin (immunfarging), og avbildet. Bildene ble behandlet og analysert ved hjelp av en proprietær bildeanalysealgoritme for å få kvantitativ informasjon om innholdet av kollagen og elastin i papillærdermis. Kort fortalt inkluderer den analytiske prosessen for å oppnå kvantitativ informasjon om kollagen- og elastininnhold konvertering av RGB-bilder til LAB-fargerom, filtrering av bakgrunnen for å få klare bilder av kollagen og elastin, og deretter normalisering av kollagen- og elastininnholdet i papillærdermis til samme område eller flere piksler. Det var seks biopsier eller hudprøver for hver tilstand og to seksjoner eller bilder fra hver prøve, noe som resulterte i N=12 bilder og datapunkter for statistisk testing. Figur S2 viser skjemaet av bildebehandlingsmetoden for å oppnå kvantitative verdier på kollageninnholdet.

2.4 ELISA

Etter vevshøsting på dag 7 ble en 4 mm diameter stanse brukt for å oppnå mindre biopsier og valgte to biopsier med ~25 mg/biopsi. De utstansede biopsiene (50 mg totalvekt) ble blandet i en lyseringsbuffer som inneholdt 0,1 prosent Triton og proteasehemmercocktail, etterfulgt av homogenisering av vevet ved bruk av en automatisert dobbeltbehandlingshomogenisator med mekaniske og ultralydfunksjoner for å fullstendig lysere vev. Det lyserte vevet ble sentrifugert, supernatanten ble samlet, delt opp i to og lagret ved -80◦C inntil den ble brukt. I tillegg til normalisering av vekt (50 mg), ble prøvene også normalisert til det totale proteininnholdet i supernatanten. Supernatanten ble analysert for Pro-Collagen 1, Elastin, Alpha-Smooth Muscle Actin (A-SMA), Tenascin-X og Hyaluronsyre ved bruk av kommersielle ELISA-sett. Statistikken ble utført på N=6 datapunkter (3 biopsier × 2 alikvoter).

3 RESULTATER

Histokjemisk avbildning (figur 1) ga makroskopisk informasjon om fordelingen og mengden av kollagen og elastin. En klar reduksjon i den røde fargen på kollagen- og elastinfiberbuntene ble observert etter behandling av hudbiopsiene med UV.

Tabell 1 viser de kvantitative verdiene av kollagen- og elastininnhold i tre behandlingstilstander. Disse verdiene gjorde det mulig for oss å måle forbedringer i kollagen- og elastininnhold, og gjøre statistiske sammenligninger. Nedgangen i innholdet av kollagen (−23 prosent vs. ubehandlet) og elastin (-30 prosent vs. ubehandlet) etter UV-eksponering var signifikant (Figur 2). Etter behandling med testproduktet i 6 dager, var de UV-eksponerte hudbiopsiene i stand til å gjenvinne kollagen (pluss 18 prosent vs. UV-behandlet) og elastin (pluss 46 prosent vs. UV-behandlet). Selv om organiseringen av kollagen ikke er tydelig i histokjemiske bilder (fordi kollagenet er mest rikelig og tettpakket i huden), observeres karakteristisk vinkelrett justering av elastinfibre som løper mot epidermis i naturlig (Figur 1A) og UV-skadet hud etter behandling med testprodukt (figur 1C).

ELISA (figur 3) sammenligner nivåene av biomarkører uttrykt av hudbiopsier behandlet med testproduktet eller placebo (som mangler en cocktail av aktive ingredienser kjent for hudremodellering). Sammenlignet med placebo var det en 2–3 ganger økning i nivåene av elastin og kollagen, spesielt type 1 pro-kollagen (testprodukt vs. placebo). Selv om det ikke var signifikant, ble det også observert en merkbar økning (P < 0.1) i hyaluronsyre og tenascin-X.

RCM var i stand til å avsløre organiseringen av kollagenfibre (bunt av kollagenfibriller) i huden (figur 4). På grunn av dens konfokale og kvartbølgeplate optiske egenskaper, var teknikken i stand til å skille kollagen (sterkt endogent kontrastmiddel med dobbeltbrytning) med hell fra andre matriser uten å seksjonere og farge huden. Det korte fragmenterte kollagenet og dets sammenkrøpte arrangement (karakteristisk for skadet og dårlig organisert kollagen i aldret/fotoaldret hud) observeres i ubehandlet hudbiopsi. Etter behandling med testproduktet i 6 dager ser arrangementet av kollagenfibre i denne 62-år gamle kvinnelige hudbiopsien (donor #1) relativt mer organisert ut enn ubehandlede kollagenfibre med lengder på mer enn 100 µm løpende parallelt med hverandre. Selv om kontrasten er dårlig, kan vi observere formen og størrelsen på fibroblastene (uthevet med piler i figur 4), store og spredte fibroblaster med regelmessige former i den behandlede huden vs. ubehandlet hud. Lyse runde celler i figur 4C er av spesiell interesse. De kan være mastceller eller inflammatoriske celler. Det er ikke klart om disse inflammatoriske cellene er representative for normale hudhelsetilstander eller om de ble uttrykt som respons på betydelig kraft påført laserhodet for å prøve å oppnå bedre kontakt mellom laserhodet og huden for høykvalitetsbilder av kollagenet fibre.

Tabell 2 viser gjennomsnittlig fragmenteringsindeks bestemt ved ConfoScan®-analyse av syv tilfeldige bilder av behandlet versus ubehandlet hud. Kollagen betyr fragmenteringsindeks for den behandlede versus ubehandlede gruppen var 0.0henholdsvis 32 og 0,064. En nedgang i fragmenteringsindeksen indikerer forbedring i kollagenorganiseringen.

For å ta en dypere titt på kollagenarrangementet, ble AFM-bilder anskaffet for å visualisere kollagenarrangementet på nanoskala (figur 5). Vi kan se individuelle kollagenfibriller (den bunten for å danne en kollagenfiber) av nanometer tykkelse. Videre kan vi også se det karakteristiske traverse båndmønsteret til kollagenfibriller (D ~ 68 nm), som er i tråd med litteraturen,11 og validerer at AFM var i stand til å skille kollagen fra andre ECM-fibre. I konsensus med RCM ble en relativt parallell organisering av kollagenfibriller også observert under AFM for behandlet versus ubehandlet hud.

4. DISKUSJON

I denne forskningen undersøkte vi potensialet ved å bruke tre bildeteknikker for å visualisere endringer i kollagen i humane hudbiopsier behandlet med et kommersielt antialdringsprodukt som inneholder noen syntetiske benchmark-peptider som er kjent for å indusere kollagenremodellering. De histokjemiske avbildnings- og RCM-avbildningsteknikkene ble kombinert med bildebehandling for å oppnå semikvantitativ informasjon om kollageninnhold og fragmentering som en indeks for å oppnå forbedring i kollagen etter behandling med antialdringsproduktet.

Interessant nok viste studien vår en veldig sterk korrelasjon mellom histokjemisk avbildning og ELISA for å rapportere en signifikant økning i kollagen- og elastinnivåer etter behandling med testproduktet. Type 1 pro-kollagen er markøren for nylig syntetisert kollagen, og dets overekspresjon av fibroblaster som respons på Matrixyl® (Sederma/Croda) er en velkarakterisert mekanisme for antialdringseffekten.23,24 Det var også en betydelig økning i uttrykket av A-SMA, en markør unik for myofibroblaster, som er spesielt differensierte fibroblastceller. Rollen til A-SMA i fibroblastmediert ECM-sammentrekning og remodellering er godt forstått,25 og en direkte korrelasjon mellom A-SMA-ekspresjon og fibroblast-kontraksjonsaktivitet er rapportert.26 En økning i hyaluronsyre, selv om den er ikke-signifikant, kan primært være tilskrives tilstedeværelsen av hyaluronsyre som en fuktighetsgivende ingrediens i antialdringsproduktet. TNSX er et nytt ECM-protein som er lokalisert mellom eller på overflaten av kollagenfibriller i huddermis27 og TNSX er rapportert å indusere doseavhengig kollagenfibrillogenese,28,29 selv om det er uenighet om TNSX binder spesifikt til pro-kollagentypen 1 eller andre kollagen- og ECM-biomolekyler også.28,29 En doseavhengig økning i TNSX som respons på SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics), en aktiv ingrediens i antialdringstestproduktet, er rapportert (internasjonal patentsøknad# PCT /IB2017/056370). Derfor kan det antas at Matrixyl® (Sederma/Croda) og SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics) i testproduktet jobber sammen for å lette syntesen og justeringen av nysyntetisert kollagen, prokollagen type 1. En betydelig reduksjon i kollagen og elastin etter UV-behandling (fotoskadet hudmodell), etterfulgt av reparasjon etter behandling med et antialdringsprodukt (utjevner tilbake til naturlig hud som ikke er utsatt for UV) indikerer evnen til den histokjemiske avbildningen (polarisert mikroskopi) og bildebehandlingsteknikken til å måle små endringer i innholdet i ECM-komponenter (figur 1 og 2). Iherdig innsats ble gjort for å prøve å avbilde kollagen- og elastinorganisering (etter immunfluorescensmerking) ved å bruke det nyinnkjøpte Thunder Leica fluorescensbildesystemet. Oppløsningen var imidlertid ikke høy nok, og derfor kunne ingenting konkluderes pålitelig om organisasjonen. Den fluorescensbaserte CLSM-avbildningen tilbyr høyere oppløsning enn konvensjonell widefield-fluorescensavbildning for å tillate tydelig visualisering av kollagen- og elastinorganisering. Konvensjonell widefield fluorescensavbildning er begrenset av dominansen av sekundær fluorescens og tykkelsen på prøvene, som ikke er en bekymring for CLSM.

Vi var i stand til å visualisere kollagenorganisering ved hjelp av RCM (figur 4). RCM er et bedre valg enn CLSM fordi (1) RCM ikke bruker noen merking eller farging (i motsetning til fluorescens-CLSM som krever immunofluorescensmerking) og fjerner alle sjanser for usikkerhet eller uspesifisitet på grunn av merker, og (2) RCM er en utbredt brukt klinisk dermal avbildningsteknikk for kollagen. En forbedring i tekstur av kollagenfiber, lange og tynne fibre etter behandling med et antialdringsprodukt (vs. tette og korte fragmenterte kollagenfibre i ubehandlet hud) indikerer dens virkemåte på det strukturelle nivået. RCM-oppløsningen var høy nok til å til og med fange fibroblastceller, kollagensyntesefabrikken i huden. Kollagenfibrene viklet rundt fibroblastene kan være de nylig syntetiserte kollagenfibrene, siden de er tynnere i diameter enn omkringliggende kollagenfibre og deres bunter (Figur 4). Basert på ConfoScan®-analyse av randomiserte RCM-bilder kan vi konkludere med at ubehandlet hud har en mye høyere indeks av fragmentert kollagen sammenlignet med den behandlede huden. Selv om vi i RCM-bilder kan se den parallelle justeringen av kollagenfibre etter behandling med testproduktet, kan det ikke konkluderes med mindre isotropi/anisotropi-forholdet er beregnet, noe som var utenfor rammen av denne forskningen. Imidlertid avslører AFM ultrahøy oppløsning på nanoskalanivå bevis på kollagenjustering på enkeltfibrillersnivå. Basert på den positive korrelasjonen mellom RCM- og AFM-bilder på parallell justering av kollagenfibre (ubehandlet vs. behandlet), er det en sterk mulighet for at antialdringsproduktet har den påståtte kollagen-reorganiseringsegenskapen. For fremtidig forskning bør studien utføres for å overvåke det samme stedet (kollagenfibre) over tid (langsgående studie) før og etter behandling med testproduktet for å undersøke om det er justeringen av eksisterende kollagen eller de nylig syntetiserte kollagenfibrene som er mer på linje. Imidlertid vil en slik longitudinell studie kreve integrering av RCM- og AFM-instrumenter til levende vevsavbildningsevne og time-lapse-avbildning for å fange opp sanntidsendringer i kollagenombygging.

5. KONKLUSJONER

Basert på forskningsfunnene våre fra denne proof-of-concept-studien, kan vi konkludere med at AFM, RCM og histokjemiske avbildningsteknikker er i stand til å overvåke endringer i kollagenorganisasjonen på henholdsvis nano-, mikro- og makroskala. AFM- og RCM-bilder viser bevis på kollagenjustering på nano- og mikroskala etter behandling med testproduktet. Analysen av randomiserte RCM og histokjemiske bilder ved bruk av proprietære bildebehandlingsmetoder indikerer videre at hud etter behandling med testproduktet har lavere kollagenfragmentering og høyere kollagenfortetting sammenlignet med ubehandlet. Selv om det er lagt ned en del innsats for å utvikle og validere bildebehandlingsalgoritmer3,5,6,12–14,16,17 kreves det mer forskning i denne retningen for å oppnå datadrevne prekliniske og kliniske forsknings- og diagnostikkbeslutninger. Vår helhetlige tilnærming med å bruke høyoppløselige og høyinnholdsteknikker i kombinasjon med kraftige og robuste bildebehandlingsalgoritmer og programvare er et skritt i denne retningen.

Selv om omfanget av denne forskningen var begrenset til å undersøke kollagenorganisasjonen som svar på et antialdringstestprodukt på ex vivo human hudbiopsi, har disse avbildningsteknikkene implikasjoner for overvåking og kvantifisering av ECM-remodellering, som er kjennetegnet for normal utvikling, sårheling, samt en nøkkelmarkør i patofysiologien til livstruende tilstander som fibrose og kreft som oppstår fra ukontrollert ECM-remodellering.2

INTERESSEKONFLIKTER

Forfatterne erklærer at ingen interessekonflikt kan oppfattes som en skade på upartiskheten til den rapporterte forskningen.

REFERANSER

1. Shin JW, Kwon SH, Choi JY, Na JI, Choi HR, Park KC. Molekylære mekanismer for hudaldring og antialdringsmetoder. Int J Mol Sci. 2019;20(9):2126.

2. Cox TR, Erler JT. Remodellering og homeostase av den ekstracellulære matrisen: Implikasjoner for fibrotiske sykdommer og kreft. Dis Model Mech. 2011;4(2):165–78

3. Pittet JC, Freis O, Vazquez-Duchene MD, Perie G, Pauly G. Evaluering av elastin/kollageninnhold i menneskelig dermis in-vivo ved multifoton tomografi-variasjon med dybde og korrelasjon med aldring. Kosmetikk. 2014;1(3):211–21

4. Longo C, Casari A, Beretti F, Cesinaro AM, Pellacani G. Aldring av huden: Mikroskopisk vurdering av epidermale og dermale endringer ved hjelp av konfokal mikroskopi. J Am Acad Dermatol. 2013;68(3):e73–82.

5. Yamazaki K, Li E, Miyazawa A, Kobayashi M. Dybdeløst undersøkelse av flere optiske egenskaper og rynkemorfologi i øyehjørneområder med multi-kontrast Jones matrise optisk koherens tomografi. Skin Res Technol. 2020;27(3):435–443.

6. Yow AP, Cheng J, Li A, Srivastava R, Liu J, Wong DWK, et al. Automatisert in vivo 3D high-definition optisk koherens tomografi hudsystem. Annual Int Conf IEEE Eng Med Biol Soc. 2016;2016:3895–8

7. Ruini C, Schuh S, Sattler E, Welzel J. Linjefelt konfokal optisk koherens tomografi-praktiske applikasjoner i dermatologi og sammenligning med etablerte avbildningsmetoder. Skin Res Technol. 2021;27:340–52.

8. Tal S, Maresky HS, Bryan T, Ziv E, Klein D, Persitz A, et al.MRI i å oppdage ansikts kosmetiske injiserbare fyllstoffer. Hode Ansikt Med. 2016;12(1):27.

9. Mandava A, Ravuri PR, Konathan R. Ultralydavbildning med høy oppløsning av kutane lesjoner. Indian J Radiol Imaging. 2013;23(3):269–7.

10. Edwards SJ, Mavranesouli I, Osei-Assibey G, Marceniuk G, Wakefield V, Karner C. Vivascope 1500 og 3000 systemer som oppdager og overvåker hudlesjoner: En systematisk gjennomgang og økonomisk evaluering. Health Technol Assess. 2016;20(58):1–260.

11. Ushiki T. Kollagenfibre, retikulære fibre, elastiske fibre. En omfattende forståelse fra et morfologisk synspunkt. Arch Histol Cytol. 2002;65(2):109–26

12. Starborg T, Kalson NS., Lu Y, Mironov A, Cootes T, Holmes D, et al. Bruke transmisjonselektronmikroskopi og 3view(R) for å bestemme kollagenfibrillstørrelse og tredimensjonal organisering. Nat Protoc. 2013;8(7):1433–48.

13. Wegner KA, Keikhosravi A, Eliceiri AW, Vezina CM. Fluorescens av picosirius rød multiplekset med immunhistokjemi for kvantitativ vurdering av kollagen i vevssnitt. J Histochem Cytochem. 2017;65(8):479–90.

14. Changoor A, Tran-Khanh N, Methot S, Garon M, Hurtig MB, Shive MS, et al. En polarisert lysmikroskopimetode for nøyaktig og pålitelig gradering av kollagenorganisering i bruskreparasjon. Artrose Cartil. 2011;19(1):126–35.

15. Bernstein EF, Chen YQ, Kopp JB, Fisher L, Brown DB, Hahn PJ, et al. Langvarig soleksponering endrer kollagenet i papillærdermis. Sammenligning av solbeskyttet og fotoaldret hud ved hjelp av nordlig analyse, immunhistokjemisk farging og konfokal laserskanningsmikroskopi. J Am Acad Dermatol. 1996;34(2 pkt. 1):209–18.

16. Schuurmann M, Stecher MM, Paasch U, Simon JC, Grunewald S. Evaluering av digital farging for ex-vivo konfokal laserskanningsmikroskopi. JEADV. 2020;34(7):1496–9.

17. Gareau DS. Gjennomførbarhet av digitalt fargede multimodale konfokale mosaikker for å simulere histopatologi. J Biomed Opt. 2009;14(3):034050.

18. Zhang Y, Ingham B, Cheong S, Ariotti N, Tilley RD, Naffa R, et al. Sanntidssynkrotron med liten vinkel røntgenspredningsstudier av kollagenstruktur under lærbehandling. Ind Eng Chem Res. 2018;57(1):63–9.

19. Fra bilde til informasjon: Bildebehandling i dermatologi og kutanbiologi. I: Hamblin, M., Avci, P., Gupta, G., redaktører. Imaging in dermatology, 1st ed.Academic Press: Amsterdam, Nederland; 2016. s. 519–35.

20. Schneider SL, Kohli I, Hamzavi IH, Council ML, Rossi AM, Ozog DM. Fremvoksende bildeteknologier i dermatologi, del II: Anvendelser og begrensninger. J Am Acad Dermatol. 2019;80(4):1121–31.

21. Guida S, Pellacani G, Ciardo S, Longo C. Refleksjonsmikroskopi avbildning av aldrende hud og hudkreft. Dermatol Prac Concept. 2021;11(3):2021068.

22. Wang H, Shyr T, Fevola MJ, Cula GO, Stamatas GN. Aldersrelaterte morfologiske endringer av dermal matriks i menneskelig hud ble dokumentert in vivo ved multifotonmikroskopi. J Biomed Opt. 2018;23(3):1–4.

23. Jones RR, Castelletto V, Connon CJ, Hamley IW. Kollagenstimulerende effekt av peptidamfifil C16-KTTKS på humane fibroblaster. Mol Pharm. 2013;10(3):1063–9.

24. Gorouhi F, Maibach HI. Aktuelle peptiders rolle i å forebygge eller behandle aldret hud. Int J Cosmet Sci. 2009;31(5):327–45.

25. Shinde AV, Humeres C, Frangogiannis NG. Rollen til a-glatt muskel-aktin i fibroblast-mediert matrisekontraksjon og ombygging. Biochim Biophys Acta. 2017;1863(1):298–309.

26. Hinz B, Coletta G, Tomasek JJ, Gabbiani G, Chaponnier C. Alfa glatt muskel aktin uttrykk oppregulerer fibroblast kontraktil aktivitet. Mol Biol Cell. 2001;12(9):2730–41.

27. Valcourt U, Alcaraz LB, Exposito JY, Lethias C, Bartholin L. Tenascin-X: Utover den arkitektoniske funksjonen. Cell Adh Migr. 2015;9(1–2):154–65.

28. Egging D, van den Berkmortel F, Taylor G, Bristow G, Schalkwijk J. Interaksjoner av humane tenascin-X-domener med dermale ekstracellulære matrisemolekyler. Arch Dermatol Res. 2007;298(8):389–96.

29. Minamitani T, Ikuta T, Saito Y, Takebe G, Sato M, Sawa H, et al. Modulering av kollagenfibrillogenese av tenascin-X og type VI kollagen. Exp Cell Res. 2004;298(1):305–15

STØTTENDE INFORMASJON

Ytterligere støtteinformasjon kan finnes i nettversjonen av artikkelen på utgiverens nettsted.

【For mer informasjon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】