Mekanistisk innsikt i diosmin-indusert nevrobeskyttelse og hukommelsesforbedring i intracerebroventrikulær-kinolinsyre-rottemodell: gjenopplivning av mitokondrielle funksjoner og antioksidanter Del 4

2.12.4. Superoksiddismutaseaktivitet. .e hastighet av SOD (EC1.15.1.1) virkning (enheter per mg protein) ble vurdert ved prosedyren til Kakkar et al. [33]. .e reaksjonsblanding involverte 0,3 ml homogenat, 100 µl 5-metylfenaziniummetylsulfat (197 μM) og 1,3 ml natriumdifosfatetetrabasisk (0,066 mM, pH 7,2). .e-reaksjonen ble startet ved å bruke 200 µl -nikotinamidadenindinukleotid (DPNH) (780 μM) og stoppet 60 sekunder senere ved bruk av 1 ml glacialCH3COOH i denne blandingen. Den genererte kromogenmengden ble beregnet ved å notere fargestyrken ved λmax� 560 nm.

Superoksiddismutase (SOD) er et viktig enzymstoff som kan spille en antioksidantrolle i kroppen. Flere og flere studier har vist at det er en nær sammenheng mellom SOD og hukommelse.

For det første kan SOD-enzymet hjelpe kroppen med å fjerne frie radikaler og redusere skaden av oksidativt stress på nevroner, og dermed beskytte den normale funksjonen til nervesystemet. Den normale funksjonen til nervesystemet er nøkkelen til menneskelig hukommelse, læring og andre avanserte tenkeaktiviteter. Derfor kan et tilstrekkelig SOD-nivå hjelpe oss å opprettholde en god tilstand av hukommelse, kognisjon og læring.

For det andre kan SOD også hjelpe menneskekroppen med å fylle på nok oksygen. Med alder og endringer i miljøet vil tilførselen av oksygen i kroppen gradvis avta. Oksygen er et av nøkkelstoffene for menneskelig cellemetabolisme og er også svært viktig for å opprettholde en god hukommelse. SOD kan hjelpe kroppen med å opprettholde oksygennivået og sikre de normale grunnleggende metabolske funksjonene til menneskekroppen, og dermed gi betingelser for generering og vedlikehold av hukommelse.

I dagliglivet er det også veldig enkelt å opprettholde et tilstrekkelig SOD-nivå. Vi kan øke kroppens SOD-innhold gjennom kosthold, for eksempel å innta grønnsaker rike på SOD som grønne grønnsaker, kål og gulrøtter. I tillegg kan det å opprettholde gode levevaner også hjelpe oss å opprettholde et sunt SOD-nivå, som moderat trening, tilstrekkelig søvn, etc.

Kort sagt er det et nært forhold mellom SOD-enzym og hukommelse. Å øke kroppens SOD-innhold kan hjelpe oss å opprettholde et sunt nervesystem og fremme normal fremgang av avanserte tenkeaktiviteter. Vi bør hjelpe kroppen å opprettholde tilstrekkelige SOD-nivåer gjennom vitenskapelig kosthold, levevaner og fysisk trening, for å bedre beskytte hukommelsen vår. Det kan sees at vi trenger å forbedre hukommelsen, og Cistanche kan forbedre hukommelsen betydelig fordi Cistanche har antioksidant-, betennelsesdempende og antialdringseffekter, som kan bidra til å redusere oksidasjon og betennelsesreaksjoner i hjernen, og dermed beskytte helsen til hjernen. nervesystemet. I tillegg kan Cistanche også fremme vekst og reparasjon av nerveceller, og dermed forbedre tilkoblingen og funksjonen til nevrale nettverk. Disse effektene kan bidra til å forbedre hukommelsen, læreevnen og tenkehastigheten, og kan også forhindre forekomsten av kognitiv dysfunksjon og nevrodegenerative sykdommer.

Klikk nå for å forbedre hukommelsen

2.12.5. Catalase-aktivitet. For å vurdere hastigheten på katalase-virkningen (EC1.11.1.6), OD-avviket (λmax � 240 nm) av den analyserte blandingen (3,0 ml) omfattende 50 µl undersøker prøve, 1,22 ml H2O2 (0,03 M) i Na+-K+ [PO4]2- buffer (pH7,91, 0,06 M), og 1,63 ml 0,06 M Na{{ 29}}K+ [PO4]2- buffer (pH 7,1) ble registrert.

Katalaseaktivitet (µmol H2O2 svekkes per minutt per mg protein i hjernen) ble beregnet ved å bruke ε � 43,6/M/cm [34].2.12.6. Nitrittnivå. .e-teknikken til Sastry et al. [35] ble implementert for å evaluere hele hjernenitritt (μmolper mg hjerneprotein).

I reagensrør som omfatter 100 µl undersøkende prøve, ble 145 mg amalgam av kobber-kadmium, 500 µl H2CO3-buffer (pH 8,89), 0,44 M 100 µl NaOH, og 119,8 mM 400 µl 400 µl Z0n sentrifugert ved 400 µl kraft Z0n. i 10 minutter, og den overflødige øvre væsken (supernatanten) ble isolert.

Griess kjemikalie (50 µl) var inkludert i 100 µl av s overflødig væske. Etter 60 minutters inkubering ble OD (λmax � 548 nm bølgelengde) notert ved bruk av et tvillingstråle UV1700 spektrofotometer (Shimadzu). En typisk kurve av salpetersyrlig natrium (0,02–0,2 mM) ble designet, og hele nitritt ble utliknet.

2.12.7. Bestemmelse av totalt proteiner. .e totalt proteinnivå (mg/ml homogenat) ble beregnet ved å bruke atypisk kurvaturgraf for bovint serumalbumin med oppløsningsstyrken fra 0,3 til 3,8 mg/ml. .e undersøkelseskombinasjonen ble organisert med 250 µl homogenat, 5,1 ml Lowrys reagens, Na+-K+ [PO4]2- buffer (900 µl) og 1,1 N 500 µl FCR. .e avvik i OD ble observert ved λmax � 650 nm [36].

2.13. Hjerneseksjoner Histopatologi. Ved å bruke et gravitasjonsmatet diffusjonsoppsett ble rotter intrakardialt (via venstre ventrikkel) diffusert med 10 % nøytral bufret formaldehyd (10 % NBF)-løsning og bedøvet akutt. Hippocampus og kortikale sektorer er nedsenket i et fiksativ (10:1 fiksativ: vevproporsjon), nemlig 10 % NBF i en uke (4 grader), ledsaget av 0,04 % natriumazid (pH 7,4).

Etylalkohol (70%) ble brukt som en pakkeløsning for faste vevsdeler holdt ved 4 grader. En mikrotomkutter (rotasjonstype) ble brukt for å erverve tynne porsjoner (8,0 μm), som ble farget med hematoksylin og eosin (H&E). .slides ble gjort permanente ved bruk av DPX-harpiks, som senere ble dekkglasset og inspisert gjennom et optisk mikroskop (kikkert) ved × 40 forstørrelser.

2.14. Statistisk analyse. En dyktig eksperimentator blindet forskjellige medikamentregimer gitt til dyrekohorter gransket og evaluerte dataene. Outliers var ikke pragmatiske (Grubbs test) i dataene, og Kolmogorov–Smirnov-testen og Levenes test bekreftet henholdsvis normalfordelingen av variabler og varianshomogenitet (HOV p > 0.05, Levenes test).

Ellers, i tilfelle av ulik varians (HOV p < {{0}}.05, Levenes test), Welchs ANOVA (p < 0.05, F′-statistikk), og Games–Howell post hoc-tester kan brukes. .e gjennomsnitt av normalfordelte variabler ble gransket og relatert ved enveis eller gjentatte mål for toveis variansanalyse (ANOVA). Når det gjelder ANOVA, er resultatene signifikante (p < 0,05) i F-statistikk, flere sammenligningstester, nemlig Tukeys HSD (ærlig signifikant forskjell) eller Bonferroni, ble brukt. Statistisk signifikans ble ansett til p < 0,05, og resultatene ble angitt som gjennomsnitt-± Standard Error of Mean (SEM).

3. Resultater

3.1. Utfall av DSM på kroppsmasse (g), kosthold og vanninntak av rotter administrert QA-ICV. Kroppsvekter, fôr og vanninntak ble analysert ukentlig, fra dag 1.

En betydelig reduksjon (p < {{{{10}}}}.001) i kroppsmasse (g), fôr- og vanninntak på dag 7, 14 , og 21 var pragmatisk hos rotter som ble utsatt for QA-ICV-injeksjon på dag 1 sammenlignet med tosham-motstykker (figur 2). DSM (100 mg/kg)-dosering forårsaket en betydelig økning i kroppsvekten (dag 7p < 0.05, dag 14 p < {{38} }.01, dag 21 p < 0.001), feed (dag 7p < 0.{{6{{63} }}}5, dag 14 p < 0.01, dag 21 p < 0,001), og vanninntak (dag 7 p < 0,01, dag 14 p < 0,05) hos rotter mot QA-ICV.DSM (50 mg/kg) også signifikant svekket QA-ICV-utløst reduksjon i kroppsvekt (dag 21 p < 0,05) og fôrinntak (dag 7 p < 0,01) hos rotter i forhold til rotter som har kun hatt QA-ICV-injeksjoner. QA-ICV- og DNP-behandlede rotter avslørte en signifikant eskalering i kroppsmasse (g) (dag 7p < 0,05, dag 14 p < 0,001, dag 21 p < 0,001), fôr (dag 7p < 0,001, dag 14 p < 0,01, dag 21 p < 0,001), og vanninntak (dag 7, 14, 21 p < 0,01) i forhold til rotter som forble eksponert for ensom QA-ICV.

3.2. Effekt av DSM på bevegelse, motorisk koordinasjon og gang hos rotter mot QA-ICV. I denne studien ble ikke bevegelsesaktivitetene til dyr påvirket av QA-ICV eller legemiddelbehandlinger.

QA-gruppen viste ingen signifikant endring i temateller per 5 minutter i aktinometerapparatet sammenlignet med sham-gruppen (figur 3(a)). Rotarod og fotavtrykksanalyse ble brukt til å evaluere den sensoriske motoriske ytelsen og gangarten til rotter.

Resultatene viste at QA-ICV signifikant hemmet (p < 0.001) motorisk koordinasjon (Figur 3(b)) og gang (Figur 3(c)) hos rotter, reflektert av redusert latens for å falle fra den roterende akselen og skrittlengden til rotter i fotavtrykksanalyse sammenlignet med tosham-motstykker.

QA + DSM50 og QA + DSM100-gruppen viste en bemerkelsesverdig økning i fallende latens (p < 0.05, p < 0.01) og skrittlengde (p) < 0,05, p < 0,001) i forhold til QA-gruppen.

DNP-behandling svekket QA-ICV betydelig og utløste en reduksjon i latens til å falle (p < 0.001) og skrittlengde (p < 0,001) sammenlignet med rotter som ble gitt QA-ICV alene. Videre viste DSM (100 mg/kg) behandling en signifikant forbedring (p < 0,01) ingenit i forhold til DSM (50 mg/kg) hos rotter utsatt for QA-ICV.

3.3. Effekt av DSM på arbeidsminne og romlig langtidsminne hos rotter mot QA-ICV. En nedgang i diskrimineringsindeksen (%) i NORT bekreftet en nedgang i arbeidsminnet.

En gradvis økning i ELT i løpet av 4 dager med treningsforsøk og en nedgang i TSTQ i gjenfinningsforsøkene (gjennomført 24 timer etter siste treningsforsøk) i MWM betegnet langtidshukommelsestap hos rotter.

I denne studien indikerte rotter som ble eksponert for QA-ICV-behandling alene en bemerkelsesverdig nedgang (p < 0.001) i diskrimineringsindeksen (%) i forhold til sham (Figur 4(a)).

I MWM-testen avslørte treningsforsøk på dag 17 ingen signifikant endring i ELT blant forskjellige grupper, men på dag 18 ble det notert en markant endring i ELT. QA-kohort viste en betydelig (p < {2}}.001) økning i ELT (dag 18–20) (figur 4(b)) og en reduksjon i TSTQ (dag 21) (figur 4(c)) i forhold til falske motstykker.

Behandling med DSM (100 mg/kg)-dempet QA-ICV førte til en reduksjon i diskrimineringsindeksen (%) (p < 0.0{{14} }1), økning i ELT (dag 18 p < 0,05, dag 19 p < 0,01, dag 20 p < 0,001), og reduksjon i TSTQ (p < 0,001) sammenlignet med rottene som har gjennomgått QA-ICV-injeksjon alene.

QA + DSM50-kohorten viste en betydelig økning i diskrimineringsindeks (%)(p < 0.001), en nedgang i ELT på dag 20 (p < 0,01) og en økning i TSTQ (p < 0,001) i forhold til QA-gruppen.

DNP-behandling forbedret diskrimineringsindeksen (%)(p < {{0}}.001), reduserte ELT (dag 18 p < 0.01, dag 19p < 0,001, dag 20 p < 0,001), og økt TSTQ (p < 0,001) hos rotter som ble administrert QA-ICV i sammenligning med kjøretøybehandlede QA-ICV-rotter. Videre avslørte DSM (100 mg/kg)-gjentatte injeksjoner en betydelig forbedring i hukommelsesfunksjoner i forhold til DSM (50 mg/kg) hos rotter utsatt for QA-ICV.

3.4. Utfall av DSM på hjernemitokondriekompleks inQA-ICV injiserte rotter.

Mitokondriell aktivitet i homogenatet av hele hjernen ble evaluert etter atferdsforsøk. Resultatene viste en signifikant nedgang (p < 0.001) i de komplekse I/II-hastighetene i mitokondriefraksjonen av hjernehomogenatet ved QA-ICV i forhold til sham (Figur 5) ..er reduksjon i kompleks I/II-aktivitet ved QA-ICV-behandling ble dempet (kompleks I p < {{10}}.05, p < 0,001;kompleks II p < 0,01, p < 0,001) av DSM (50 og 100 mg/kg) gitt i 21 påfølgende dager sammenlignet med QA-ICV-administrerte rotter som ble gitt medikamentbærerbehandling alene. DNP økte signifikant (p < 0,001) aktiviteten til kompleks I/II i motsetning til bæreren i QA-ICVinjiserte rotter.

3.5. Effekt av DSM på hjernemitokondriell oksidativt stress i QA-ICV injiserte rotter. Resultatene viste en bemerkelsesverdig økning (p < 0.001) i TBARS og totale nitritter og nedgang i GSH-, GPx-, SOD- og katalaseaktiviteter i den mitokondrielle delen av hjernen homogenisere ved QA-ICV i forhold til sham (figur 6). .is forsterkning i hjernenTBARS (p < 0.05, p < 0.001) og totalt nitritter (p < {{ 21}}.05,p < 0.01) og nedgang i GSH (p < 0.05, p < {{ 39}}.001), GPx(p < 0.05, p < 0.001), SOD (p < 0.01, p < 0.001), og katalase(p < 0.05, p < 0.001) aktiviteter ved QA-ICV-behandling ble satt ut av DSM ( 50 og 100 mg/kg) gitt i 21 uavbrutt dager sammenlignet med QA-ICV-administrerte rotter som kun ble gitt medikamentell vehikelbehandling. DNP reduserte signifikant (p < 0,001) hjerne-TBARS og totalnitrittakkumulering og økte (p < 0,001) aktiviteten til GSH, GPx, SOD og katalase sammenlignet med vehikler i QA-ICV-behandlede rotter.

Videre viste DSM-behandling (100 mg/kg) en bemerkelsesverdig svekkelse i lipidperoksidasjon (p < 0.001) og intensivering i endogene antioksidanter, slik som GSH (p < 0,001), GPx (p < 0,01), SOD (p < 0,05) og katalase (p < 0,05), i forhold til DSM (50 mg/kg) hos rotter utsatt for QA-ICV. 3.6. Effekt av DSM på hjernehistopatologi hos rotter mot QAICV.

I histopatologisk analyse ble det observert store endringer i den cellulære arkitekturen i QA-gruppen. Sjamanimaler viste ingen tegn til nevrodegenerasjon. QA-ICV-behandling forårsaket markerte endringer fremhevet av pyknose og blebbing av plasmamembranen i corticale og hippocampus (CA 1 og (2) nevroner. Behandling av QAICV rotter med DSM eller DNP svekket de patologiske tegnene på nevrodegenerasjon (Figur 7).

4. Diskusjon

QA (2,3-pyridindikarboksylsyre) er et eksitotoksin lignende toglutamat og er i stand til å fremkalle nevrodegenerasjon når konsentrasjonen forsterkes med alderen [5]. .e-antagonister av NMDARer og aminofosfonater kan hindre den nevrodegenerative eksitotoksisiteten til QA, noe som antyder at QA virker gjennom NMDARer i hjernen [9]. BBB fungerer som en beskyttende barriere og begrenser nevrotoksisiteten til QA.

Bevisene indikerer imidlertid forbedret patologisk akkumulering av QA i forskjellige nevrodegenerative lidelser.

I hjernen kataboliserer kinolinatfosforibosyltransferase (QPRT) QAto NAD+ og karbondioksid. .e-aktiviteten til QPRT er maksimal i luktepæren og nederst i cortex, hippocampus og striatum, hvor QA kan utøve nevrotoksikasjon i stor grad i disse hjerneområdene. Disse hjerneområdene påvirkes negativt av en rekke nevrodegenerative lidelser, som AD, PD, HD og schizofreni som fører til alvorlig kognitiv nedgang [9, 10].

I denne studien ble QA administrert direkte gjennom ICV-ruten for å overvinne BBB-begrensningen hos voksne rotter. DSM er et bioaktivt naturlig flavonoid som har vist terapeutiske effekter mot traumatisk hjerneskade [16], skopolamin-indusert amnesi [17], apomorfin- og ketamin-indusert psykose [18], og kronisk uforutsigbart mildt stress [19].

DSM er i stand til å øke glukosemetabolismen, insulinsignalering og diabetiske komplikasjoner, og det kan forhindre energiutarming og de påfølgende negative konsekvensene som er involvert i nevrodegenerative lidelser [14, 15].

QA forbyr mitokondriell funksjon og energiproduserende aerobe luftveier i hjerneregionene som er negativt påvirket av nevrodegenerative lidelser [5].

Derfor, i denne studien, ble rotter administrert med QA-ICV på dag én eksponert for DSM-behandling i 21 påfølgende dager, og biokjemiske parametere og atferdsfunksjoner ble vurdert.

idonitrosativt stress og svekkelse av endogene antioksidantnivåer av QA-ICV i mitokondriell fraksjon av helhjernehomogenatet. Tidligere studier indikerer også NMDAR-avhengige og NMDAR-uavhengige økninger i frie radikaler og inflammatorisk forverring av QAin-forsøksdyr [5, 9, 10].

I nåværende eksperimenter forbedret QA lipidperoksidasjon og totale nitritter i hjernen. Frie radikaler og de påfølgende modifikasjonene i cellulære biomolekyler, som lipider, proteiner og DNA, ligger til grunn for store patogene endringer i nevrodegenerative lidelser.

Lipidperoksider, som malondialdehyd (MDA), 4-hydroksy 2-nominell (4-HNE), isoprostaner og akrolein er svært giftige aldehyder som lett akkumuleres i form av bioaddukter og er resistente til autofagiske og andre mekanismer for fjerning [37, 38].

En patogen økning i disse uløselige adduktene bryter med cellens integritet, noe som fører til tap av intern homeostase, lekkasje av interne komponenter og celledød [38].

Videre korrelerer en økning i nitrater direkte med nivået av frigjøring av nitrogenoksid i hjernen til rotter. .e administrasjon av QA-ICV på den første dagen førte til en bemerkelsesverdig eskalering av nitrater i hjernen til rotter. Nitrogenoksid er en gassformig nevrotransmitter som deltar i synaptisk modulering og langsiktig potensering ved å virke bakover gjennom NMDARer [39, 40].

Nitrogenoksid biosyntetiseres av nitrogenoksidsyntase (NOS-neuronal) som respons på aktiveringen av postsynaptiske NMDARer. En tilstrømning av kalsiumioner gjennom postsynaptiske NMDARer aktiverer neuronal NOS, noe som fører til generering av nitrogenoksid som stimulerer presynaptisk glutamatfrigjøring i synapsen.

Imidlertid fører overdreven NMDAR-aktivering og den resulterende åpenlyse intracellulære tilstrømningen av kalsiumioner og nitrogenoksidbiosyntese til en økning i de reaktive oksygenarter (ROS), som alkoksyl (RO_), superoksid (O•−2) , peroksyl (RO2·), hydroksylradikaler (OH•), og hydrogenperoksyd (H2O2), og reaktive nitrogenarter (RNS), slik som salpetersyreanhydrid (N2O3), peroksynitritt (ONOO−) og nitrogendioksid (•NO2) [41–43].

RNS modifiserer proteiner, noe som fører til proteinnitrosylering og dannelse av S-glutatioler og nitrosothioler. Nitrogenoksid deltar i vaskulær skade (f.eks. BBB og iskemiskade) og inflammatorisk respons ved aktivering av makrofager, astrocytter, matrisemetalloproteinaser (MMP) og adhesjonsmolekyler [44, 45].

Peroksynitritt forårsaker nitrering av guanin-nukleotider, noe som resulterer i DNA-enkeltråd-ruptur, utløser PARP-banen, og forbyr også DNA-reparasjonsenzymer [46].

Nitrooksid hemmer cytokrom c-oksidase og undertrykker derved mitokondriell ATP-produksjon [39]. Derfor kan overflødig nitrittakkumulering forårsake en energimangeltilstand i hjernen som ytterligere sikrer dysfunksjonen til ATP-avhengige ionepumper, akkumulering av natriumioner (som forårsaker cellehevelse), økt kalsiumtilstrømning og hypereksitabilitet [47]. Økning av cytoplasmatiske kalsiumnivåer er den primære mekanismen for ROS- og RNS-utgang og aktivering av kalsiumavhengige celledødsveier gjennom aktivering av proteaser og kalpainer [48].

I nevrodegenerative sykdommer er frie radikaler, kalsium, lipidperoksidasjon og DNA-mutilasjon kjernen i den patogene utviklingen av sykdommer. I tidligere studier avslørte analysen av biomarkørene for oksidativt stress amplifikasjonen av MDA, 4-HNE og 8-hydroksy-2'-deoksyguanosin (8-OHdG) i cerebrospinalvæsken , hjerne- og blodprøver [49, 50].

I de nåværende eksperimentene opphevet DSM (50 og 100 mg/kg) betydelig QA-ICV-utløst intensivering av lipidperoksidasjon og totale nitritt i mitokondriedelen av hjernen.

Tidligere rapporter underbygger også de frie radikaldempende og antiinflammatoriske handlingene til DSM i hele hjernen til forsøksdyr [16–20]. .e standardlegemiddel, DNP, svekket også lipidperoksidasjon (TBARS) og totale nitritter i hjernen til rotter utsatt for QA-ICV.

.e mitokondrier, peroksisomer, endoplasmatisk retikulum og plasmamembraner er de viktigste stedene for ROS- og RNS-biosyntese [51]. Cellulær respirasjon i mitokondriene er hovedgeneratoren av ROS, slik som superoksid og hydroksylradikaler. Peroksisomer er det sentrale navet for generering av hydrogenperoksid.

Superoksidanion erverver et elektron fra molekylært oksygen og dismutaser til hydrogenperoksid via Fenton-reaksjonen. Deretter metaboliseres dette hydrogenperoksidet av katalase til vann og oksygen, eller det kan generere hydroksylradikaler.

H2O2 kan også generere giftige hydroksylradikaler gjennom Haber-Weiss-reaksjonen. Superoksidanion, ved å reagere med nitrogenoksid, kan danne peroksynitritt [52, 53]. Disse frie radikalene utløser mitokondrielle permeabilitetsovergangsporer (mPTP), som fører til lekkasje av cytokrom c, mitokondriell degenerasjon og celledød.

Mitokondrielt kompleks I er inngangsporten til forelektronene fra NADH til respirasjonskjeden. Kompleks I og II kan generere superoksidanioner i surplusinrespons til et høyere NADH/NAD+-forhold, noe som fører til forkortet FMN (flavinmononukleotid)-sted på kompleks I og elektron bidrag til det succinatdehydrogenase (SDH)-reduserte koenzym Q er assosiert med en høy protonmotorisk kraft, noe som fører til omvendt elektrontransport [54]. QA er en godt anerkjent hemmer av mitokondriefunksjoner [5].

I denne studien forårsaket QA-ICV hemming av hjernemitofragmentkompleks I- og II-hastigheter hos rotter. .e QA-induserte aberrasjoner i mitokondrielle elektrontransportkjedefunksjoner kan være den primære årsaken til oksidativ lemlestelse i hjernen til rotter. Imidlertid gjenopplivet DSM (50 og 100 mg/kg) hjernekomplekset I og II aktivitetene i QA-ICV-utfordrede rotter.

DNP-behandling viste også signifikant forbedring i kompleks I og II funksjoner i hjernemitokondrier mot QA-ICV cytotoksisitet. .eanalyse av antioksidantnivåer viste at DSM-behandling i 21 påfølgende dager svekket QA-ICV-indusert nedgang i endogene antioksidanter, slik som GSH, GPx, SOD og katalase.

SOD, katalase og tiolavhengige antioksidanter, som GSH og GPx, er den første forsvarslinjen mot oksidativ lemlestelse. SOD og katalase avgifter henholdsvis superoksideanioner og H2O2, og GPx og GSH er involvert i fjerning av H2O2 og nedbrytning av lipidperoksider (MDA, 4-HNE, etc.) til deres respektive alkoholer, spesielt i mitokondriene og cytoplasma [ 55]. I den nåværende studien økte DSM (50 og 100 mg/kg) eller DNP-regimer antioksidantvirkningene i hjernen til rotter som ble gjengitt mot QA-ICV-nevrotoksisitet.

Nevrobeskyttelse av DSM og DNP var tydelig i H&E-fargingsanalysen av hippocampus og kortikale områder av rottehjerner. QA-ICV-behandling forårsaket markante endringer i den cellulære arkitekturen fremhevet av pyknose, cellehevelse og blebbing av plasmamembranen. Disse patogene endringene ble dempet av DSM- og DNP-behandlinger i separate grupper av rotter. I den gjeldende protokollen viste DSM (100 mg/kg) signifikant forbedring i biokjemiske parametere mot QA-ICV og også svekket patologisk cellelemlestelse tydelig i histologisk analyse sammenlignet med DSM (50 mg/kg). Derfor skildret disse funnene de doseavhengige effektene av DSM i QA-ICV-rottemodellen for nevrodegenerasjon.

I den ukentlige analysen var en signifikant nedgang i gjennomsnittlig kroppsmasse (g), fôr og vanninntak pragmatisk hos QAICV-behandlede rotter. Motorisk koordinasjon (rotarod-test) og gangart (fotavtrykksanalyse) ble også negativt påvirket hos rotter behandlet med QA-ICV alene.

Bevegelsesaktivitet ble ikke påvirket av forskjellige medikamentelle behandlinger i det nåværende settet av eksperimenter. DSM- eller DNP-behandlede rotter viste imidlertid signifikant forbedring i motorisk koordinasjon og mot QA-ICV-toksisitet. Kroppsmasse (g), kosthold og vannforbruk ble også forbedret av DSM eller DNP separate grupper av QA-ICV-behandlede rotter.

Minneparametere ble vurdert ved bruk av NORT (dag 16) og MWM (dager 17–21) paradigmer. En nedgang i diskrimineringsevnen til QAICV-behandlede rotter i NORT støttet tapet av arbeidsminne.

I MWM-forsøk forårsaket QA-ICV en økning i ELT i løpet av fire dager med treningsforsøk og en nedgang i TSTQin-uthentingsforsøk på den 5. dagen. Disse funnene viste svekkelse av langtidsromlig hukommelse hos rotter ved QAICV-behandling. DSM- eller DNP-behandlinger dempet nedgangen i diskrimineringsindeksen, TSTQ, og økningen i ELTin-rotter som ble utfordret med QA-ICV på dag 1. .Økontemporære funn er i harmoni med de tidligere rapportene som underbygger hukommelsesforbedringsaktiviteten til DSM hos forsøksdyr [16–20 ].

DSM (100 mg/kg) viste doseavhengig forbedring i arbeidsminne og langtidshukommelse sammenlignet med DSM (50 mg/kg) mot QA-ICV. .e-funn viste at DSM kunne forbedre hjernefunksjoner som hukommelse, motorisk koordinasjon og gang hos rotter i QA-ICV-modellen. Diosmin er aflavonoid glykosid som har en sukkerdel (rutinosidedisakkarid) og aglykongruppe diosmetin. I flere prekliniske studier administreres diosmin via den parenterale ruten (ip) [17, 56], og det er et overhengende behov for å finne en passende formulering for bedre å oversette de prekliniske funnene i kliniske omgivelser.

Partikkelstørrelsesreduksjon og økning av overflatearealet kan brukes for å øke transporten over biologiske barrierer [57]. I denne sammenhengen ble det forsøkt en mikronisert diosminformulering [58] som viste større biotilgjengelighet og farmakokinetiske egenskaper, men målrettet hjernespesifikk levering av diosmin er fortsatt en stor utfordring.

5. Konklusjoner

I det nåværende terapeutiske scenariet der det ikke er noe slikt medikament tilgjengelig som kan gjenopplive den patogene utviklingen av nevrodegenerative tilstander, som AD og HD, er et skifte mot naturlige rettsmidler pragmatisk. Nåværende terapeutiske strategier fokuserer kun på symptomatisk forbedring, og ingen kan reversere rekkefølgen av sykdomsutviklingen. Vi observerte at diosmin gjenoppstod kognitive funksjoner (arbeids- og langtidsromlig hukommelse) i QA-ICV-rottemodellen for nevrodegenerasjon. Diosmin forbedret den sensorimotoriske ytelsen og gangarten til rotter mot QA-ICV. .e observert forbedring av atferdsfunksjoner hos QA-ICV-rotter behandlet med diosmin skyldes først og fremst svekkelse av mitokondriell dysfunksjon og oksidativ lemlestelse av hjernen. Derfor kan diosmin brukes som et alternativt terapeutisk middel mot nevrodegenerative lidelser med opphav til mitokondriell dysfunksjon. Ytterligere undersøkelser er imidlertid obligatoriske for å se for seg dens nevrobeskyttende mekanisme og kliniske applikasjoner.

Datatilgjengelighet

.e data fra denne studien er tilgjengelig på passende forespørsel fra den korresponderende forfatteren.

Etisk godkjenning
Hele settet med dyreforsøk ble godkjent av IAEC (godkjenning nr. ASCB/IAEC/14/20/145) og ble utført ved å implementere de etiske retningslinjene for dyreforsøk utstedt av "Committee for Control and Supervision of Experiments on Animals (CPCSEA), GOI, New Delhi."

Interessekonflikter

Forfatterne erklærer at det ikke er noen interessekonflikter.

Referanser

[1] T. Heinbockel og B. Antonei: Innledende kapittel: .eChemical Basis of Neural Function and Dysfunction, Neurochemical Basis of Brain Function and Dysfunction.

[2] AV Eapen, D. Fernandez-Fern Mendez, J. Georgiou et al., "Flere roller av GluN2D-holdige NMDA-reseptorer kortsiktig potensering og langsiktig potensering i musehippocampale skiver," Neuropharmacology, vol. 201, s. 108833,2021.

[3] A. Singh, R. Kukreti, L. Saso og S. Kukreti, "Oxidative stress: a key modulator in neurodegenerative diseases," Molecules, vol. 24, nei. 8, s. 1583, 2019.[4] J. Song, X. Yang, M. Zhang, C. Wang og L. Chen, "Glutamatmetabolisme i mitokondrier er nært knyttet til Alzheimers sykdom," Journal of Alzheimer's Disease, vol. 84, nei. 2, s. 557–578, 2021.

[5] R. Lugo-Huitron, P. Ugalde Muñiz, B. Pineda, J. Pedraza-'Chaverr'ı, C. R'ıos og V. Perez-de la Cruz, "Kinolinsyre: et endogent nevrotoksin med flere mål," OxidativeMedicine and Cellular Longevity, vol. 2013, artikkel-ID 104024,14 sider, 2013.

[6] TW Stone og LG Darlington, ".e kynurenine pathwayas a therapeutic target in cognitive and neurodegenerative disorders," British Journal of Pharmacology, vol. 169, nr. 6, s. 1211–1227, 2013.

[7] VK Sharma, TG Singh, NK Prabhakar og A. Mannan,"Kynurenine metabolisme og Alzheimers sykdom: de potensielle målene og tilnærmingene," Neurochemical Research, 2022.

[8] DC Maddison og F. Giorgini, ".e kynurenine pathwayand neurodegenerative disease," Seminars in Cell & Developmental Biology, vol. 40, s. 134–141, 2015.

[9] Y. Liang, S. Xie, Y. He et al., "Kynurenine pathway metabolitesas biomarkers in Alzheimer's disease," Disease Markers, vol. 2022, artikkel-ID 9484217, 15 sider, 2022.

[10] GJ Guillemin, "Kinolinsyre, det uunngåelige nevrotoksin," FEBS Journal, vol. 279, nr. 8, s. 1356–1365, 2012.

[11] MK Arora, A. Kisku og A. Jangra, "Mangiferin forbedrer intracerebroventrikulær-kinolinsyre-induserte kognitive underskudd, oksidativt stress og nevroinflammasjon i Wistarrats," Indian Journal of Pharmacology, vol. 52, nei. 4, s. 296–305, 2020.

[12] M. Sharifi-Rad, C. Lankatillake, DA Dias, et al., "Impact ofnatural compounds on neurodegenerative disorders: frompreclinical to pharmacotherapeutics," Journal of ClinicalMedicine, vol. 9, nei. 4, s. 1061, 2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com