Nevrobeskyttende effekter av fire fenyletanoidglykosider på H2O2-indusert apoptose på PC12-celler via Nrf2/ARE-banen
Mar 04, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao og Baiyi Lu 1,*
1. Introduksjon
Oksidativt stress, som er en ubalanse i antioksidanthomeostase, induserer lipidperoksidasjon, skade på protein og DNA, cellealdring og celledød. Denne prosessen bidrar sannsynligvis til flere nevrodegenerative lidelser, som Alzheimers sykdom (AD), Parkinsons sykdom (PD) og iskemi/reperfusjon [1]. Hydrogenperoksid (H2O2), som er en av de viktigste reaktive oksygenartene (ROS), er kjent for å forårsake lipidperoksidasjon og DNA-skade [2]. Dessuten er H2O2 en endogen kilde til frie hydroksylradikaler som bidrar til bakgrunnsnivået av cellulært oksidativt stress [3,4]. Derfor kan terapeutiske strategier for å forhindre oksidativt stress-indusert apoptose ha potensialet i behandling av nevrodegenerative sykdommer.
Nukleær faktor erytroid 2-relatert faktor 2 (Nrf2), er en transkripsjonsfaktor som er sterkt assosiert med oksidativt stress. Aktivering av Nrf2 induserer transkripsjon av en rekke antioksidant- og avgiftningsgener, inkludert hem oksygenase-1 (HO-1), NAD(P)H kinonoksidoreduktase 1, anti-inflammatorisk [13] og immunmodulerende [14] ] bioaktiviteter. Osmanthusfragrans er en vanlig ingrediens i flere asiatiske matvarer og har lenge vært konsumert. Vi har tidligere vist at O.fragrans-blomstekstrakter forbedret romlig læring og hukommelse, hemmet oksidativ skade og viste nevrobeskyttende aktiviteter i d-galaktose-indusert aldring i en ICR-musemodell [15]. Salidrosid, acteosid og isoacteosid er den viktigste PhG-responsen for antioksidantaktivitetene til O.fragrans blomsterekstrakter [16].
Studier på den nevrobeskyttende effekten av PhG har oppnådd ønskelige resultater. Salidroside reduserte signifikant celleapoptose av PC12-celler som ble eksponert i MPP pluss [17,18]. Acteosid lindret også MPP pluss-indusert apoptose og oksidativt stress i PC12-celler [19] og Ap25-35-indusert SH-SY5Y-celleskade [20]. Echinakosid ble undersøkt på tumornekrosefaktor-a (TNFa)-indusert apoptose i SH-SY5Y-celler [21], MPTP-indusert dopaminerg toksisitet i mus [22], glutamatskadede primærkulturer av rottekortikale celler [23], og { {19}}OHDA-indusert skade i PC12-celler [24]. Resultatene indikerte at PhGs viste en cytobeskyttende effekt og er potensielle midler for å behandle nevrodegenerative sykdommer. Studier har vist antioksidantegenskapene til PhGs som ligger til grunn for mange andre bioaktiviteter for disse forbindelsene [25]. Imidlertid har få studier undersøkt den molekylære mekanismen til PhG mot oksidativ toksisitet.
I vår studie valgte vi fire typiske PhG-er som følger: salidrosid (fenyletanoide monosakkarider), acteosid (fenyletanoide disakkarider), isoakteosid (fenyletanoide disakkarider) og echinakosid (fenyletanoide trisakkarider). Vi brukte en modell for nevronal død ved å bruke differensierte PC12-celler [26] for å undersøke den beskyttende effekten og molekylære mekanismen til PhG på den H2O2-induserte PC12-cellemodellen. Vi demonstrerte at PhG-er aktiverte Nrf2/ARE-banen ved å binde seg til Kelch-lignende ECH-assosiert protein 1 (Keap1). Denne prosessen oppregulerte antioksidantenzymer og økte motstanden til PC12-celler mot oksidativt stress.
Behandling av nevrodegenerative lidelser:PhGs fra cistanche
2. Resultater
2.1. PhGs undertrykt H2O2-Indusert cytotoksisitet i PC12-celler
Cytotoksiske effekter av H2O2 og PhGs (0.1,1,5 og 10 卩g/mL) på PC12-celler ble testet. Resultatene viste at H2O2 induserte tap av PC12-cellelevedyktighet på konsentrasjonsavhengige og tidsavhengige måter (figur 1A). Eksponering av PC12-celler for 200 H2O2 i 2 timer resulterte i cellelevedyktighet på 57,4 prosent. Forbehandling av celler med PhG ved 0.1,1, 5 og 10 昭/ml hadde ingen effekt på cellelevedyktighet (figur 1B) og markert beskyttede PC12-celler fra H2O2-induserte skade ved å forbedre cellelevedyktighet som henholdsvis 9.549-22.141 prosent, 12.092-25.289 prosent, 1.470-9.289 prosent og 3.411-11,441 prosent ( Figur 1C). Salidrosid (0,1 ^g/ml), isoacteosid (0,1, 1, 5 og 10 ^g/mL), echinacosid (0,1,1 og 5 ^g/mL) viste imidlertid ingen signifikant forskjell på HzOz-indusert celle skade. Forbehandling av celler med PhG forbedret også den morfologiske egenskapen indusert av H2O2 (figur 1D).
Figur 1.PhG-er undertrykte H2O2-indusert cytotoksisitet i PC12-celler. Cellelevedyktighet ble påvist ved MTT-analyse. Cytotoksisk effekt av H2O2 (A) og PhGs (B) ved forskjellige konsentrasjoner på PC12-celler. (C) PhG-dempede H2O2-induserte reduksjon i cellelevedyktighet. PC12-celler ble inkubert med PhGs (0.1, og 10 mg/mL) i 24 timer, og deretter inkubert med 200 pM H2O2 i ytterligere 2 time etter at PhG-ene ble fjernet. (D) Morfologisk observasjon. Celler etter behandling ble observert med et fasekontrastmikroskop (x100), CK: normal gruppe, H2O2: H2O2-behandlet gruppe, HL: salidroside lavdosebehandlet gruppe, HH: salidroside høydosebehandlet gruppe, ML: acteosid lavdosebehandlet gruppe, MH: akteosid høydose behandlet gruppe, IL: isoacteosid lavdose behandlet gruppe, IH: isoacteosid høy dose behandlet gruppe, SL: echinacoside lavdose behandlet gruppe, SH: echinacoside høydose behandlet gruppe. ** p < 0,01="" versus="" ubehandlet="" gruppe;="" #="" p="">< 0,05,="" versus="" h2o2-behandlet="" gruppe;="" ##="" p="">< 0,01,="" versus="" h2o2-behandlet="">
2.2. PhGs undertrykt H2O2-Indusert intracellulær akkumulering av ROS, lipidperoksidasjon (MDA) og økt superoksiddismutase (SOD) aktiviteter i PC12-celler
Eksponering av PC12-celler for 200 pM H2O2 i 2 timer økte ROS-nivåer, MDA-innhold og reduserte SOD-aktivitet (figur 2). PhGs-forbehandling svekket ROS-nivå, salidrosid og acteosid, og den høye dosen av isoacteosid og echinacosid-forbehandling svekket ROS-nivået betydelig (p < 0,01).="" salidrosid-forbehandling="" viste="" ingen="" effekt="" på="" mda-innhold,="" men="" akteosid-forbehandling="" svekket="" mda-innholdet="" signifikant="" (p="">< 0,05).="" isoacteosid="" og="" echinacosid="" forbehandling="" svekket="" mda-innholdet="" betydelig="" til="" et="">
Figur 2.PhG blokkerte ROS- og MDA-akkumulering og økte aktivitetene til SOD i PC12-celler. PC12-celler ble inkubert med PhGs (0.1 og 10 4g/mL) i 24 timer, og deretter inkubert med 200 |^M H2O2 for en annen 2 timer etter at PhGs ble fjernet. (A) PhG blokkerte ROS- og MDA-akkumulering. (B) PhG blokkerte MDA-akkumulering. (C) PhG økte aktivitetene til SOD. CK: normal gruppe, modell: H2O2 behandlet gruppe, Salidroside: salidroside behandlet gruppe, Acteosid: akteosid behandlet gruppe, Isoacteosid: isoacteosid behandlet gruppe, Echinacoside: echinacoside behandlet gruppe. ** p < 0.01="" versus="" ubehandlet="" gruppe;="" #="" p="">< 0,05,="" versus="" h2o2-behandlet="" gruppe,="" ##="" p="">< 0,01,="" versus="" h2o2-behandlet="">
2.3.PhGs reversert H2O2-indusert apoptose i PC12-celler
H2O2-behandling (200 |1M) i 2 timer økte signifikant apoptose i PC12-celler, med en total apoptotisk rate på opptil 16,02 prosent (figur 3). Imidlertid reduserte forbehandling med PhGs (0,1 og 10 卩g/ml) i 24 timer apoptosehastigheten på en konsentrasjonsavhengig måte (p < 0,01).="" salidrosid,="" acteosid,="" isoacteosid="" og="" echinacosid="" reduserte="" prosentandelen="" av="" celleapoptose="" markant="" med="" 4.750-6.627="" prosent="" ,="" 4.413-5.800="" prosent="" ,="" 6.593-10.047="" prosent="" ,="" og="" 1.530-7.510="" prosent="">
Figur 3. PhG-er reverserte H2O2-indusert apoptose i PC12-celler. PC12-celler ble inkubert med PhGs (0.1 og 10 卩g/mL) i 24 timer, og deretter inkubert med 200 pM H2O2 i ytterligere 2 timer etter PhG-er ble fjernet. Deretter ble apoptose målt ved flowcytometri ved bruk av en PI/FITC fluorescerende probe. CK: normal gruppe, modell: H2O2 behandlet gruppe, Salidroside: salidroside behandlet gruppe, Acteosid: akteosid behandlet gruppe, Isoacteosid: isoacteosid behandlet gruppe, Echinacoside: echinacoside behandlet gruppe. ** p < 0,01="" versus="" ubehandlet="" gruppe;="" ##="" p="">< 0,01,="" versus="" h2o2-behandlet="">
2.4. PhG reversert H2O2-Indusert nedregulering av proteinekspresjon av HO-1, NQO1, GCLC og GCLM
HO{{0}}, NQO1 og glutamat-cysteinligase (GCL) er viktige cellulære antioksidantenzymer, og HO-1, NQO1 og katalytiske eller modifiserte underenheter av GCL (GCLC eller GCLM) er Nrf2-regulerte nedstrømsgener [27]. Proteinekspresjon av HO-1, NQO1, GCLC og GCLM ble observert etter behandling. En åpenbar forskjell ble funnet mellom proteinekspresjonen av HO-1 og NQO1 med eller uten H2O2 (Figur 6A-C) (p < 0.01).="" phgs="" (0.1="" og="" 10="" p^g/ml)="" reverserte="" den="" h2o2-induserte="" nedreguleringen="" av="" proteinekspresjon="" av="" ho-1="" (unntatt="" salidroside="" ved="" {{32}="" }.1="" pg/ml),="" nqo1="" (unntatt="" akteosid="" ved="" 0.1="" pg/ml)="" (p="">< {{40}}.01).="" h2o2="" nedregulerte="" også="" gclc="" og="" gclm="" proteinekspresjon="" (p="">< 0.05)="" (figur="" 6a,d,e).="" phgs="" (0.1="" og="" 10="" pg/ml)="" reverserte="" h2o2-induserte="" nedregulering="" av="" proteinekspresjon="" av="" gclc="" (unntatt="" echinacoside="" ved="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01)="" og="" gclm="" (unntatt="" salidrosid="" ved="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01).="" deretter="" ble="" de="" kjemiske="" hemmere="" for="" ho-1="" brukt="" til="" å="" evaluere="" rollene="" til="" antioksidantenzymene="" i="" å="" regulere="" beskyttelsen="" av="" phg="" mot="" h2o2-indusert="" cytotoksisitet.="" phgs="" (0,1="" og="" 10="" pg/ml)="" forhindret="" h2o2-indusert="" cytotoksisitet,="" men="" slik="" beskyttende="" effekt="" ble="" reversert="" av="" ho-1-hemmeren="" znpp="" (p="">< 0,01)="" ved="" 20="" pm="" (figur="" 6f,="" p="">< 0,01)="">
2.5. Keap1 uttrykk og molekylær dokkinganalyse
Under fysiologiske forhold fungerer Keap1 som et repressorprotein av Nrf2 ved å binde seg til Neh2-domenet til Nrf2 og målrette Nrf2 til en Cul3-basert E3 ubiquitin-ligase for ubiquitinering og påfølgende nedbrytning av 26S-proteasomet [28]. Bindingskapasitet til Keap1 av PhGs ble evaluert ved molekylær dokkinganalyse for å undersøke mekanismen under deres antioksidanteffekt.
Antioksidanteffekt: CistanchePhGs
3. Diskusjon
Vi undersøkte nevrobeskyttelsen av PhGs på H2O2-indusert cytotoksisitet i PC12-celler. Resultatene viser at PhGs-forbehandling betydelig undertrykte HzOz-indusert cytotoksisitet, svekket det intracellulære ROS-nivået, forbedret nivået av intracellulære antioksidantenzymer, og til slutt reverserte H2O2--indusert cytotoksisitet i PC12-celler. Dessuten økte PhG-er den transkripsjonelle aktiveringen av Nrf2, reverserte den HzOz-induserte nedreguleringen av proteinekspresjonen til HO-1, NQO1, GCLC og GCLM. I tillegg viste PhG potensiell interaksjon med Nrf2-bindingsstedet i Keap1-proteinet.
I H2O2-indusert PC12-celleskade, økte lipidperoksidasjon, som refererer til oksidativ nedbrytning av lipid, permeabiliteten til membraner, noe som førte til celleskade [29]. MDA-dannelse er mye brukt som indeks for lipidperoksidasjon [30]. H2O2 forbedret ROS-produksjon og utmattede antioksidantforsvarsenzymer, som SOD, katalase og GPx. Denne prosessen fører til oksidativt stress [31], som spiller en nøkkelrolle i årsakssammenheng og progresjon av de fleste nevrodegenerative lidelser. I samsvar med tidligere studier observerte vi et økt nivå av ROS, reduserte intracellulære antioksidantenzymer og forbedret apoptose av PC12-celler etter H2O2-behandling. PhGs-forbehandling svekket betydelig HzOz-indusert økning i intracellulær ROS, forbedret intracellulære antioksidantenzymer og reverserte til slutt HzOz-indusert cytotoksisitet i PC12-celler.
Kuang et al. [32] rapporterte at echinacoside viste en signifikant nevrobeskyttende effekt på H2O2-indusert cytotoksisitet i PC12-celler gjennom den mitokondrielle apoptotiske veien. I denne studien fant vi at echinakosid, salidrosid, acteosid og isoacteosid viste nevrobeskyttende effekter ved å øke antioksidantaktiviteten til PC12-celler fordi de økte den transkripsjonelle aktiveringen av Nrf2 og oppregulerte nedstrøms proteinuttrykk av HO-1, NQO1, GCLC og GCLM. Tallrike studier har tydelig vist at aktivering av Nrf2-målgener, spesielt HO-1, i astrocytter og nevroner beskytter sterkt mot betennelse, oksidativ skade og celledød. HO-1-systemet har blitt rapportert å være svært aktivt i sentralnervesystemet, og dets modulering spiller tilsynelatende en avgjørende rolle i patogenesen av nevrodegenerative lidelser [33]. Nyere studier klargjorde også rollen til Nrf2 i progresjon og risiko for PD [9] og Keap1 som et effektivt mål for reaktivering av Nrf2 i AD [34]. Resultatene støtter nye bevis for Nrf2 som et terapeutisk mål ved nevrodegenerative sykdommer.
Molekylær dokkinganalyse viste at PhG kunne binde seg til Keap1, med følgende bindingskapasitet: echinacoside > isoacteosid > acteosid > salidroside. I samsvar med disse resultatene førte PhGs-forbehandling til Nrf2-kjernetranslokasjonen, med følgende Nrf2-uttrykk i kjernen: echinacosid > isoacteosid * acteosid > salidrosid. Vi antok at antall glykosider påvirket den mulige bindingsmodusen til PhGs og Keap1, og bindingsmodusen forårsaket ytterligere frigjøring av Nrf2 fra Keap1. Denne prosessen resulterte i aktivering av Nrf2 og nedstrømsgenene og beskytter til slutt PC12-celler fra H2O2 -indusert oksidativt stress.
Nevrobeskyttende effekter av cistanchePhGs
4. Materialer og metoder
4.1. Kjemiske forbindelser og reagenser
Salidrosid (CAS-nr. {{0}}), akteosid (CAS-nr. 61276-17-3), isoakteosid (CAS-nr. 61303-13-7) og echinakosid (CAS-nr. {{3} }) ble kjøpt fra YYuanye Biotechnology Company (Shanghai, Kina). PhGs ble oppløst i PBS for å produsere en 10 mg/ml stamløsning, som ble lagret ved -20 grad. H2O2 ble kjøpt fra Aladdin® (Shanghai, Kina). RPMI-1640 medium og føtalt bovint serum ble kjøpt fra Hyclone (Logan, UT, USA), og 0,5 prosent trypsin EDTA, penicillin og streptomycin ble kjøpt fra Keyi (Hangzhou, Kina). MDA, SOD diagnostiske sett, MTT og DCFH-DA ble kjøpt fra Beyotime Institute of Biotechnology (Nanjing, Jiangsu, Kina). Annexin V-FITC/PI dobbeltfargingssett ble kjøpt fra Solarbio Life Sciences (Beijing, Kina). Antistoffer mot Nrf2, Histone H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM og p-aktin, anti-mus-pepperrotperoksid (HRP) IgG og anti-kanin-HRP-IgG ble kjøpt fra Abcam (London, Storbritannia). Inhibitorer av HO-1 og ZnPP ble kjøpt fra Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). RNAiso Plus, PrimeScript™RT reagenssett med gDNA Eraser og SYBR® Premix Ex Taq™ II ble kjøpt fra Takara (Shiga, Japan). Lipofectamine® RNAiMAX Transfection Reagent ble kjøpt fra Thermo Fisher Scientific (Waltham, Storbritannia). Nrf2 siRNA-sekvensene var som følger: fremover, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; og revers, UUAAGACACUGUAAUUCGG. I mellomtiden var kontroll siRNA-sekvensene som følger: fremover, UUCUCCGAACGUGUCACGU; og revers, ACGUGACACGUUCGGAGAA.
4.2. Cellekultur
Mus adrenal feokromocytomlinje (PC12-celler) ble hentet fra Institute of Biochemistry and Cell Biology, SIBS, (CAS, Shanghai, Kina). Cellene ble holdt i RPMI-1640 (Hyclone) inneholdende 10 prosent føtalt bovint serum (Hyclone), 100 U/ml penicillin og 0,1 mg/ml streptomycin ved 37 grader med 5 prosent CO2. Mediet ble skiftet annenhver dag.
4.3. Cell ViabilityAssay
PC12-celler ble sådd i 96-brønnplater med 2 x 104 celler/brønn. Etter festing ble cellene preinkubert med eller uten inhibitor i 20 minutter, inkubert med eller uten PhGs i 24 timer, og deretter inkubert med H2O2 i ytterligere 2 timer etter at PhGs ble fjernet. Etter inkubering ble cellene behandlet med 5 mg/ml MTT i 4 timer ved 37 grader, og mediet ble forsiktig fjernet. Formazan-krystallene som var dannet av overlevende celler ble oppløst i 150 rL DMSO for å generere en blå farge [35], og absorbansen ble målt ved 570 nm på en plateleser. Kontroller benyttet samme konsentrasjon av medium med DMSO alene. Cellelevedyktighet ble normalisert som prosentandel kontroll.
Konsentrasjonene av PhG (0.1,1,5 og 10 Rg/mL) ble valgt avhengig av cytotoksisitetsanalysen av PhG og den rapporterte cytobeskyttende effekten av echinacoside [32]. I følge rapporten var det ingen cytotoksisitetseffekt vist under 10 Rg/mL, og echinakosid ble rapportert å vise cytobeskyttende effekt i den HzOz-skadede cellemodellen.
4.4. Apoptoseanalyse
Apoptose ble påvist med et Annexin V-FITC/PI dobbeltfargingssett (Solarbio). PC12-celler ble sådd i 6-brønnplater med 2 x 105 celler/brønn. Etter festing ble cellene behandlet med PhGs (0,1 og 10 Rg/ml) i 24 timer og inkubert med H2O2 i ytterligere 2 timer etter at PhGs ble fjernet. Etter inkubering ble cellene vasket i kald PBS, sentrifugert to ganger ved 1500 rpm i 10 minutter og resuspendert i 500 rL bindingsbuffer. FITC-merket Annexin V (5 rL) og propidiumjodid.
Forkortelser
GCLC glutamat-cystein-ligase-katalytisk underenhet
GCLM glutamat-cystein-ligase-katalytisk modifiseringssubenhet
H2O2 hydrogenperoksid
HO-1 hem oksygenase 1
Keap1 Kelch ECH assosiasjonsprotein 1
NQO1 NAD(P)H kinonoksidoreduktase 1
Nrf2 nukleær faktor erytroid 2-relatert faktor 2
PhGs salidroside, acteosid, isoacteosid og echinacoside
ROS-reaktive oksygenarter
ZnPP sink protoporfyrin
Cistanche deserticola-ekstrakt: PHG av cistanche
Referanser
1. Sol, AY; Chen, YM Oksidativt stress og nevrodegenerative lidelser. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]
2. Maheshwari, A.; Micro, MM; Aggarwal, A.; Sharma, RK; Nandan, D. Pathways involvert i testikkel-kimcelle-apoptose indusert av H2O2 in vitro. FEBS J. 2009,276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]
3. Halliwell, B. Reaktive oksygenarter og sentralnervesystemet. J. Neurochem. 1992, 59,1609-1623. [CrossRef] [PubMed]
4. Richardson, JS; Subbarao, KV; Ang, LC Om den mulige rollen til jernindusert friradikalperoksidasjon i nevral degenerasjon ved Alzheimers sykdom. Ann. NY Acad. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]
5. Zhang, DD Mekanistiske studier av Nrf2-Keap1-signalveien. Drug Metab. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]
6. Itoh, K.; Tong, KI; Yamamoto, M. Molekylær mekanisme som aktiverer Nrf2-Keap1-vei i reguleringen av adaptiv respons på elektrofiler. Free Radic. Biol. Med. 2004, 36,1208-1213. [CrossRef] [PubMed]
7. Kong, AN; Owuor, E.; Yu, R.; Hebbar, V.; Chen, C.; Hu, R.; Mandlekar, S. Induksjon av xenobiotiske enzymer ved kartkinaseveien og antioksidant- eller elektrofilresponselementet (ARE/EpRE). Drug Metab. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]
8. Buendia, I.; Michalska, P.; Navarro, E.; Gameiro, I.; Egea, J.; Leon, R. Nrf2-ARE-vei: Et fremvoksende mål mot oksidativt stress og nevroinflammasjon i nevrodegenerative sykdommer. Pharmacol. Ther. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]
9. Skibinski, G.; Hwang, V; Ando, DM; Daub, A.; Lee, AK; Ravisankar, A.; Modan, S.; Finucane, MM; Shabby, BA; Finkbeiner, S. Nrf2 reduserer LRRK2- og a-synuklein-indusert nevrodegenerasjon ved å modulere proteostase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]
10. Jimenez, C.; Riguera, R. Fenyletanoidglykosider i planter: Struktur og biologisk aktivitet. Nat. Prod. Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]
11. Georgiev, M.; Alipieva, K.; Orhan, I.; Abrashev, R.; Denev, P.; Angelova, M. Antioksidant- og kolinesterasehemmende aktiviteter av Verbascum xanthophoeniceum Griseb. og dets fenyletanoidglykosider. Food Chem. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]
12. Li, N.; Wang, J.; Ma, J.; Gu, Z.; Jiang, C.; Yu, L.; Fu, X. Nevroprotektive effekter avCistanches HerbaTerapi på pasienter med moderat Alzheimer/s sykdom. Evid.-basert komplement. Altern. Med. 2015, 2015, 103985. [CrossRef] [PubMed]
13. Liu, YL; Han, WJ; Mo, L.; Shi, MF; Zhu, YY; Pan, S.; Li, XR; Xu, QM; Yang, SL Antimikrobielle, antiinflammatoriske aktiviteter og toksikologi av fenyletanoidglykosider fra Monochasma savatieri Franch. eks Maxim. J. Ethnopharmacol. 2013,149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]
14. Dong, Q.; Yao, J.; Fang, JN; Ding, K. Strukturell karakterisering og immunologisk aktivitet av to kaldtvannsekstraherbare polysakkarider fraCistanche deserticola YC Ma. Karbohydr. Res. 2007, 342,1343-1349. [CrossRef] [PubMed]
15. Xiong, L.; Mao, S.; Lu, B.; Yang, J.; Zhou, F.; Hu, Y.; Jiang, Y.; Shen, C.; Zhao, Y. Osmanthusfragrans blomsterekstrakt og akteosid beskytter mot d-galaktoseindusert aldring i en ICR-musemodell. J. Med. Mat 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]
16. Jiang, Y.; Mao, S.; Huang, W.; Lu, B.; Cai, Z.; Zhou, F.; Li, M.; Lou, T.; Zhao, Y. Phenylethanoid Glycoside Profiles and Antioxidant Activities of Osmanthusfragrans Lour. Blomster etter UPLC/PDA/MS og simulert fordøyelsesmodell. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]
17. Li, X.; Ja, X.; Li, X.; Sun, X.; Liang, Q.; Tao, L.; Kang, X.; Chen, J. Salidroside beskytter mot MPP pluss-indusert apoptose i PC12-celler ved å hemme NO-veien. Brain Res. 2011,1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]
18. Zhang, L.; Ding, W.; Sun, H.; Zhou, Q.; Huang, J.; Li, X.; Xie, Y.; Chen, J. Salidroside beskytter PC12-celler fra MPP pluss-indusert apoptose via aktivering av PI3K/Akt-veien. Food Chem. Toxicol. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]
19. Sheng, GQ; Zhang, JR; Pu, XP; Ma, J.; Li, CL Beskyttende effekt av verbascoside på 1-metyl-4- fenylpyridiniumion-indusert nevrotoksisitet i PC12-celler. Eur. J. Pharmacol. 2002, 451,119-124. [CrossRef]
20. Wang, H.; Xu, Y.; Yan, J.; Zhao, X.; Sun, X.; Zhang, Y.; Guo, J.; Zhu, C. Acteoside beskytter humane neuroblastom SH-SY5Y-celler mot beta-amyloid-indusert celleskade. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]
21. Min, D.; Jin, YZ; Yong, J.; Zheng, BL; Yao, HW Echinacoside redder SHSY5Y-nevronale celler fra TNFa-indusert apoptose. Hake. Pharmacol. Okse. 2005, 505,11-18.
22. Zhao, Q.; Gao, JP; Li, WW; Cai, DF Nevrotrofiske og nevroredningseffekter av Echinacoside i den subakutte MPTP-musemodellen for Parkinsons sykdom. Brain Res. 2010,1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]
23. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC In vitro nevrobeskyttende aktiviteter av fenyletanoidglykosider fra Callicarpa dichotoma. Planta Med. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]
24. Liu, YG; Li, X.; Xiong, C.; Yu, B.; Pu, X.; Ye, XS Syntetiske fenyletanoidglykosidderivater som potensielle nevrobeskyttende midler. Eur. J. Med. Chem. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]
25. Fu, G.; Pang, H.; Wong, YH Naturlig forekommende fenyletanoidglykosider: Potensielle ledetråder for nye terapier. Curr. Med. Chem. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]
26. Greene, LA; Tischler, AS Etablering av en noradrenerg klonal linje av rottebinyre-feokromocytomceller som reagerer på nervevekstfaktor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]
27. Liang, QN; Sheng, YC; Jiang, P.; Ji, LL; Xia, YY; Min, Y.; Wang, ZT Forskjellen mellom glutation-antioksidantsystem i lever av nyavvenne og unge mus og dens involvering i isolinindusert levertoksisitet. Arch. Toxicol. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]
28. Kobayashi, A.; Kang, M.; Okawa, H.; Ohtsuji, M.; Zenke, Y; Chiba, T.; Igarashi, K.; Yamamoto, M. Oxidative Stress Sensor Keap1 Fungerer som en adapter for Cul3--basert E3-ligase for å regulere proteasomal nedbrytning av Nrf2. Mol. Celle. Biol. 2004,24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]
29. Cornelius, C.; Crupi, R.; Calabrese, V; Graziano, A.; Milone, P.; Pennisi, G.; Radak, Z.; Calabrese, EJ; Cuzzocrea, S. Traumatisk hjerneskade: Oksidativt stress og nevrobeskyttelse. Antioksid. Redokssignal. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]
30. Hou, Z.; Luo, W.; Sun, X.; Hao, S.; Zhang, Y.; Xu, F.; Wang, Z.; Liu, B. Hydrogenrikt saltvann beskytter mot oksidativ skade og kognitive mangler etter mild traumatisk hjerneskade. Brain Res. Okse. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]
31. Ansari, MA; Roberts, KN; Scheff, SW Et tidsforløp med kontusjonsindusert oksidativt stress og synaptiske proteiner i cortex i en rottemodell av TBI. J. Neurotrauma 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]
32. Kuang, R.; Sun, Y.; Yuan, W.; Lei, L.; Zheng, X. Beskyttende effekter av echinacoside, en av fenyletanoidglykosidene, på H2O2-indusert cytotoksisitet i PC12-celler. Planta Med. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]
33. Scapagnini, G.; Vasto, S.; Abraham, NG; Caruso, C.; Zella, D.; Fabio, G. Modulering av Nrf2/ARE-vei ved matpolyfenoler: En ernæringsmessig nevrobeskyttende strategi for kognitive og nevrodegenerative lidelser. Mol. Neurobiol. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]
34. Kerr, F.; Sofolaadesakin, O.; Ivanov, DK; Gatliff, J.; Gomez, PB; Bertrand, HC; Martinez, P.; Callard, R.; Snoeren, I.; Cochem, HM Direct Keap1-Nrf2-avbrudd som et potensielt terapeutisk mål for Alzheimer/s sykdom. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]
35. Hansen, MB; Nielsen, SE; Berg, K. Reundersøkelse og videreutvikling av en presis og rask fargemetode for måling av cellevekst/celledrap. J. Immunol. Methods 1989, 119, 203-210. [CrossRef]
36. Press, C. Virtual Screening in Drug Discovery; Crc Press: Boca Raton, FL, USA, 2005.
37. Muegge, I.; Martin, YC; Hajduk, PJ; Fesik, SW Evaluering av PMF-scoring i dokking av svake ligander til FK506-bindende protein. J. Med. Chem. 1999, 42, 2498—2503. [CrossRef] [PubMed]
38. Kuntz, ID; Blaney, JM; Oatley, SJ; Langridge, R.; Ferrin, TE En geometrisk tilnærming til makromolekyl-ligand-interaksjoner. J. Mol. Biol. 1982,161, 269-288. [CrossRef]
39. MD, E.; Murray, CW; Auton, TR; Paolini, GV; Mee, RP Empiriske skåringsfunksjoner: I. Utviklingen av en rask empirisk skåringsfunksjon for å estimere bindingsaffiniteten til ligander i reseptorkomplekser. J. Comput.-Aided Mol. Des. 1997,11,425-445.
© 2018 av forfatterne. Lisensinnehaver MDPI, Basel, Sveits. Denne artikkelen er en artikkel med åpen tilgang distribuert under vilkårene og betingelsene for Creative Commons Attribution (CC BY)-lisensen (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
