Oversikt over Phlorotannins' bestanddeler i Fucales del 3

Glykosid av cistanche kan også øke aktiviteten til SOD i hjerte- og levervev, og redusere innholdet av lipofuscin og MDA i hvert vev betydelig, effektivt rense ulike reaktive oksygenradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) og beskytte mot DNA-skader forårsaket av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en sterk renseevne for frie radikaler, en høyere reduserende evne enn vitamin C, forbedrer aktiviteten til SOD i sædsuspensjon, reduserer innholdet av MDA og har en viss beskyttende effekt på sædmembranfunksjonen. Cistanche-polysakkarider kan øke aktiviteten til SOD og GSH-Px i erytrocytter og lungevev hos eksperimentelt senescent mus forårsaket av D-galaktose, samt redusere innholdet av MDA og kollagen i lunge og plasma, og øke innholdet av elastin, har en god rensende effekt på DPPH, forlenger hypoksitiden hos eldre mus, forbedrer aktiviteten til SOD i serum og forsinker den fysiologiske degenerasjonen av lunge hos eksperimentelt eldre mus. Med cellulær morfologisk degenerasjon har eksperimenter vist at Cistanche har den gode antioksidantevnen og har potensial til å være et medikament for å forebygge og behandle aldringssykdommer. Samtidig har echinacoside i Cistanche en betydelig evne til å rense DPPH-frie radikaler og kan rense reaktive oksygenarter og forhindre frie radikal-indusert kollagen-nedbrytning, og har også en god reparasjonseffekt på anionskader av tymin frie radikaler.

Klikk på Hvor kan jeg kjøpe Cistanche

【For mer informasjon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Når det gjelder Eckols, på grunn av tilstedeværelsen av dibenzodioksinstrukturer, kan disse skilles fra de andre gruppene basert på deres deprotonerte molekylære ioner, som vanligvis er 2 Da lavere enn andre PT-er med like DP-er, for hvert dibenzodioksin-motiv som er tilstede i strukturen (figur 5D). For eksempel presenterer eckol en [MH]− ved m/z 371, mens trifokal, triphlorethol og fucophlorethol alle er til stede [MH]− ved m/z 373. I sin tur lokker, som har to dibenzodioksinstrukturer i ryggraden, presentere en [MH]− ved m/z 741, mens deres heksamerekvivalenter presenterer [MH]− ved m/z 745. Det samme gjelder karmaloler, som i hovedsak er haller som inneholder dibenzodioksinstrukturer [120]. Til slutt er noen PT-er som inneholder furanringer, som fucofuroeckol og phlorofucofuroeckol, karakterisert ved et dehydrert-deprotonert molekylært ion, dvs. et [MH]− som er 18 Da lavere, sammenlignet med deres ikke-furanholdige ekvivalenter med like DP-er (f.eks. fucofuroeckol vs. phloroeckol-strukturer er kun forskjellige på nærvær/fravær av furanringen og viser [MH]- ved m/z 496 og 478, henholdsvis) [120]. Tabell 3 viser MS-data samlet inn fra forskjellige studier fokusert på identifisering av PT-er i Fucales.

Selv om disse fundamentene kan være nyttige for å oppnå rimelig strukturell identifikasjon av PT-er med lav molekylvekt, oppstår det store vanskeligheter når det gjelder oligomerer og polymerer med høy molekylvekt siden deres isomerisering øker eksponentielt, og de mange mulighetene for floroglucinol-arrangementer og -kombinasjoner kan neppe være belyst av MS eller MS/MS. Likevel, i slike tilfeller, kan MS fortsatt gi verdifull informasjon om DP av forbindelsene som er tilstede i en florotanninblanding. I denne forbindelse utgjør matriseassistert laserdesorpsjon/ioniseringstid for flygning MS (MALDI-TOF-MS) en mer egnet tilnærming for analyse av større oligomerer siden den kan oppdage molekyler med m/z over den øvre grensen for ESI- MS. Denne teknikken har blitt brukt til å studere florotannin-fraksjonen av Sargassum wightii, slik at den kan bekrefte tilstedeværelsen av dimerer, trimerer og heksamerer av floroglucinol [125]. Høyoppløselig MS (HRMS) er en alternativ tilnærming som også kan brukes til analyse av PT-er med høy molekylvekt, basert på de flerladede ionene og endringer i pluss 1 13C-isotopmønsteret. Med andre ord, når en forbindelse er dobbelt- eller trippelladet, viser den et pluss 1 13C isotopmønster med m/z-forskjeller på henholdsvis 0.5 og 0.33 . På dette prinsippet har Steevensz et al. [78] var i stand til å profilere PT-sammensetningen til P. canaliculata, F. spiralis, F. vesiculosus og A. nodosum når det gjelder DP, og detekterte forbindelser med molekylvekter opp til 6000 Da som ellers ville overskride masseområdet av ESI-MS.

Totalt sett, selv om massespektrometri kan være en ressurssterk teknikk for kvalitativ analyse av PT-er og til og med kraftig nok til å oppnå rimelig god karakterisering av lavmolekylære forbindelser, klarer den ikke å hente tilstrekkelige detaljer om typen og koblingsposisjonen til de isomere formene av forbindelser. med høyere DPS. Derfor, når målet er å fullstendig belyse PTs-strukturelle trekk, er NMR den eneste effektive metoden som kan tilby en tilstrekkelig oppløsning for en slik dybdeanalyse.

5.2.3. NMR

NMR-spektroskopi omfatter en direkte og ikke-destruktiv analyse som kan være nyttig ikke bare for å få tilgang til innholdet i PT-er, men også for å fullstendig belyse de strukturelle egenskapene til PT-er. Når kvantitative data er ment, blir 1H NMR-resonanssignaler for alle fenolforbindelser i algeekstrakter integrert og sammenlignet med de av en passende intern standard; disse forbindelsene må være stabile, kjemisk inerte, tilgjengelige i svært ren form og fullstendig løselige i samme deutererte løsningsmiddel(er) som prøven. Samlet sett har forfattere brukt forskjellige tilnærminger og metoder for å kvantifisere fenoliske forbindelser og/eller PT-er gjennom denne teknikken, inkludert i Fucale-avledede prøver.

I 2009, Parys et al. beskrev, for første gang, bruken av kvantitativ 1H NMR (NMR) for å bestemme variasjonen av florotannininnholdet til A. nodosum i løpet av året. I deres arbeid ble trimesinsyre brukt som intern standard (2,0 mg trimesinsyre i 0,8 ml deuterert metanol og 0,2 ml deuteriumoksid), og en kalibreringskurve ble produsert ved bruk av floroglucinol. Til tross for at høyere PT-innhold ble oppdaget ved qHNMR, sammenlignet med de oppnådd ved bruk av FC kolorimetrisk metode, fulgte begge metodene den samme trenden med sesongvariasjoner [126]. Det er viktig å merke seg at, i motsetning til den kolorimetriske analysen, som ikke er spesifikk for PT-er eller til og med for fenoliske forbindelser, sammenlignes integreringen av resonanssignalene til 1H NMR-spektra i qHNMR med de til den interne standarden. På grunn av disse prinsipielle forskjellene kan en direkte sammenligning ikke gjøres nøyaktig mellom begge metodene [127,128].

Ved å bruke en distinkt tilnærming brukte Stiger-Pouvreau og medarbeidere høyoppløselig magisk vinkelspinning (HR-MAS) for å kvantifisere PT-er i brunalgene, Cystoseira tamariscifolia. I denne studien ble faststoff-NMR brukt for å påvise floroglucinol (monomer) in vivo og 1H qNMR ble brukt for å estimere monomer-kvantifiseringen (ved bruk av trimetylsilylpropionat -d4 (TSP) som en intern standard). Floroglucinol-singletten ved δ 6,02 ppm, integrert i tre protoner, bekreftet dens tilstedeværelse i prøven. Nøyaktigheten til denne metoden ble vurdert ved bruk av en standardløsning av floroglucinol, og resultatene ble validert ved sammenligning med FC-analysen. Til syvende og sist hevdet forfatterne at den presenterte metodikken består av en innovativ og rask metode for å kvantifisere floroglucinol, som kan brukes på alle algearter. Den eneste begrensningen ved qNMR-metoden ligger i nødvendigheten av at minst ett av spektrasignalene (singlett, dublett, etc.) utvetydig tilskrives én og bare én forbindelse [129].

Tidligere i 2010 har de samme forfatterne allerede demonstrert potensialet til in vivo 1H HR-MAS NMR assosiert med massespektrometri (LC/ESI–MSn) for å observere den globale kjemiske profilen til fem arter av slekten, Cystoseira, tilstede langs kysten av Bretagne i Frankrike: C. baccata, C. foeniculacea, C. humilis, C. nodi caulis og C. tamariscifolia [130]. De

Hovedmålet med arbeidet deres var å identifisere Cystoseira-prøver og diskutere deres taksonomi. Resultatene beviste effektiviteten til den presenterte tilnærmingen for å skille hovedsakelig C. nodicaulis og C. tamariscifolia ettersom spektrene deres beviste tilstedeværelsen av karakteristiske signaler, noe som tillot deres entydige identifikasjon. I tilfellet med en singlett ved 2,91 ppm for den første og for sistnevnte, karakteriserte en topp på nøyaktig 6.00 ppm arten og indikerte mulig forekomst av et enkelt florotannin. Foeniculacea og C. humilis var generelt preget av forekomsten av to dubletter med samme intensitet ved 7,90 og 7,36 ppm. Imidlertid forble den absolutte diskrimineringen mellom de to signalene umulig. Likheten til in vivo NMR-signalene, i tandem med den lille intraspesifikke kjemiske diversiteten til begge artene, rettferdiggjorde disse resultatene. Til slutt, i tilfellet med C. baccata, til tross for at de viste det viktigste kjemiske mangfoldet, tillot mange signaler konstant diskriminering fra de andre artene.

I 2020 demonstrerte Walsh og medarbeidere [131] det antimikrobielle potensialet til to rensede florotanninekstrakter fra A. nodosum og F. serratus, to intertidal brune tang. I det arbeidet tillot 1H og 13C NMR-analyse ikke bare en kvantitativ og kvalitativ estimering av totale fenoliske forbindelser, men også tilgang til forskjeller i koblingsprofilen mellom rensede fenolekstrakter av begge arter. Når det gjelder FC-analysen, ble det funnet et betydelig høyere nivå av total-fenoliske forbindelser i A. nodosum enn i F. serratus, og resultatene ble validert av FC-analysen. Dessuten viste de oppnådde resultatene ved bruk av både qNMR- og FC-analyse eksistensen av variasjoner mellom prøver samlet inn hver måned og mellom begge metodene.

For å belyse PT-strukturen ble 1H og 13C NMR-analyse først brukt av Glombitza og hans gruppe på 70-tallet da de identifiserte floroglucinol i forskjellige brunalgearter. Kompleksiteten til spektra assosiert med disse derivatene tillot bare identifikasjon av mindre polyfenoliske strukturer. I 1974 var det således første gang at de kjemiske strukturene til bifuhalol og difloretol ble belyst fra et 80 prosent etanolekstrakt av C. tamariscifolia [132].

Likevel, siden den gang har mer enn hundre PT-strukturer blitt belyst ved bruk av NMR [133]. For det blir ekstrakter vanligvis underkastet et forbehandlingstrinn med heksan eller petroleumseter for å utfelle store PT-er. I tillegg, for å forhindre PTs ustabilitet, lette NMR-analyse og endre polariteten til disse forbindelsene, acetyleres de ofte ved bruk av eddiksyreanhydrid og pyridin, og tillater dermed deres normalfase-silikakromatografirensing [119]. I 1H NMR-spektrene til denne typen forbindelse må to aspekter bemerkes: resonansen til aromatiske protoner vises mellom δ 6.0 og 7,5 ppm, og acetylgruppene vises som singlett-topper mellom δ 2 og 3 ppm . Dette er et nyttig verktøy for å fastslå antall frie hydroksygrupper i de opprinnelige ubeskyttede fenolene. De to typene av aromatiske ringsystemer som kan forekomme er representert i figur 6. Den særegne kjemiske omgivelsen til de to typene protoner (Ha og Hb) endrer mangfoldet av de observerte signalene i 1H NMR, så vel som deres integrasjon.

Sammen med 1H NMR-spektroskopi har 13C og HSQC og HMBC NMR-spektra blitt brukt for å klargjøre strukturene til rensede PT-er, inkludert i Fucales. Den heteronukleære korrelasjons-NMR-spektroskopiske tilnærmingen er nyttig for å identifisere klassen av PT-er fra en prøvematrise (monomer, drivstoff, kloretyl, full, fukofloretol, etc.) [134]. De karakteristiske 13C-NMR-signalene til PT-er er oppsummert i tabell 4. Ved karakteristisk-kjemiske skift tillater karbonresonanser av en distinkt type karboner sammen med deres intensitet tildeling av noen signaler til spesifikke klasser av PT-er, spesielt phlorethols e halls .

I 1997 ble Glombitza et al. [135] beskrev isolasjonen og karakteriseringen av 33 PT-er fra brunalgen, Cystophora torulosa. Ulike PT-klasser ble identifisert inkludert floretoler og haller, og fukofloretoler og hydroksyfukofloretoler (eksempler i figur 7). Dessuten, når det gjelder sistnevnte, ble syv nye hydroksyfukofloretoler som bærer ytterligere hydroksylgrupper identifisert og karakterisert (NMR og MS). Som tidligere nevnt, for å forhindre oksidasjon og øke lipofilisiteten til de isolerte PT-derivatene, beskrev forfatterne deres isolasjon som acetater [82].

Koch et al. har også demonstrert anvendelsen av 1H og 13C NMR for å karakterisere større fuhalolacetater i B. bifurcate [136]. HSQC og HMBC (2D) NMR spektroskopiske teknikker har blitt brukt av Cérantola et al. å vise tilstedeværelsen av fukol- og fukofloretol-strukturer i ekstraktene av Fucus spiralis [137]. Den samme tilnærmingen ble brukt med Halidrys siliquosa, rikelig i Bretagne. Bruken av 1D og 2D NMR og MS-analyse tillot identifisering av fire fenoliske derivater: trifuhaloler og tetrafuhaloler, og for første gang difloretoler og trikloretoler [125]. Tabell 5 oppsummerer studiene nevnt ovenfor der 1H og 13C NMR bidro til å belyse strukturen til PT-er ekstrahert fra alger som tilhører Fucales.

【For mer informasjon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】