Del 2 Forebyggende effekter av fenyletanol glykosider fra Cistanche Tubulosa på Bovine Serum Albumin-indusert leverfibrose hos rotter
Mar 06, 2022
Ansvarlig: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 og kollagen I uttrykk etter legemiddelintervensjon i HSC-T6 celler For å karakterisere signaler om leverfibrose ble to viktige regulatoriske gener i leveren bestemt via RT-PCR-analyse. Dataene viste at tHSC-T6-celler fra kontrollgruppen hadde lavere nivåer av NF- κB og kollagentype I mRNA. TGF-β1 induserte derimot HSC-T6-celler for å kunne oppregulerte NF-κB (P< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">fenylethanoid glykosid fra cistanche) , resultatene av NF-κB p65 [P NF-κB = 0,001 for 100 ug/ml, P NF-κB = 0,002 for 75 ug/ml, P NF-κB = 0,007 for 50 ug/ml, og P NF-κB = 0,012 for henholdsvis 25 ug/ml] og Col-I [P Col-I = 0,006, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,014, P Col-I = 0,019, henholdsvis] viste reduserte uttrykk for disse mRNAene (fig. 7).
Vestlig blotanalyse av kollagen I-nivå etter legemiddelintervensjon i HSC-T6-celler Figur 8 viser kollagen I proteinuttrykksnivåene i HSC-T6-celler i de ulike eksperimentelle gruppene. Kollagen I proteinuttrykksnivået ble signifikant redusert i de ulike dosegruppene av CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml og 25 ug/ml) sammenlignet med TGF-β1-gruppen
Diskusjon
CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)er en fenylethanoid glykosid isolert og renset fra rhizomet i Cistanche, som brukes som en tradisjonell kinesisk urtemedisin. De siste årene har CPhGs vist seg å ha en kraftig evne til å forhindre leverskader [20]. Derfor tok vi sikte på å undersøke om CPhGs har hemmende effekter på hepatittfibrose ved BSA-indusert leverfibrose hos rotter. BJRG brukes ofte som terapeutisk legemiddel for leverfibrose i Kina. Den er laget av skilpaddeskall. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, og etc. har effekten av å fylle opp Qi og blod, lindre tretthet, myke noder. I tillegg viser tidligere studier at den har den åpenbare funksjonen til å blokkere tidlig leverfibrose, hemme spredningen av fettlagringsceller og redusere kollagensyntesen [21]. Derfor ble BJRG brukt som et positivt stoff i denne studien.
De patologiske endringene av leverfibrose hos rotter indusert av BSA-injeksjoner ligner de i human portalcirrhose [22]. CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)doseavhengig lindret graden av leverfibrose og hemmet HSC-transformasjon til myofibroblastlignende celler, reduserte de forhøyede nivåene av serum ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF-β1 og leverindeksen, og markert undertrykt uttrykk for kollagen I, kollagen III og TGF-β1 i levervev. Stadier av leverfibrose er korrelert med serumnivåene ha, LN og IV-C, som som markører kan spille en rolle i å oppdage graden av leverfibrose [23]. Det er rapportert at HA er hovedressursen til den ekstracellulære matrisen. IV-C som det essensielle elementet i kjellermembranen vil bli syntetisert rikelig og avsatt tungt i de tidligere fasene av levercirrhose. Serumnivåene av LN og IV-C er indeksene for omsetningshastigheten til kjellermembranen og viser graden av fibrose i portalområdet og sinusformede kapillærer [24]. PC III er en markør i diagnosen leverfibrose og tidlig skrumplever, men følsomheten og spesifisiteten er ikke høy, og det er ingen signifikant forskjell mellom de ulike stadiene av fibrose i mange referanser [24, 25].
Denne studien oppnådde et lignende resultat. I tillegg viser H&E og Massons trichrome-farget seksjon observasjoner normale levervev med distinkte leverlobuler og lever sinusoider. Levervevsstrukturen i modellgruppen var uorden, og levervevet og leveren sinusoid ble erstattet av en stor mengde bindevev. Det ble imidlertid observert betydelige forbedringer i behandlingsgruppene sammenlignet med modellgruppen. Viktigst, kollagen type I og kollagen type III uttrykk spiller viktige roller i utviklingen av leverfibrose, hvis blokkering kan forhindre og behandle leverfibrose. Derfor kan generering og avsetning i levervevet av kollagen type I og kollagen type III tjene som et viktig determinant for anti-leverfibrose effekt. TGF-β1 er også en viktig profibrogen cytokin i leverskade, og den er biologisk aktiv med flere farmakologiske handlinger [26]. En balanse mellom disse handlingene er nødvendig for å opprettholde vev homeostase. Det avvikende uttrykket for TGF-β1 er involvert i patogenesen av leversykdommer [27, 28]. Det er kjent at TGF-β1 er en avgjørende cytokin som er involvert i de tidlige stadiene av leverfibrose.
Oksidativt stress utløser TGF-β1, noe som resulterer i sistnevnte stimulerende ECM-produksjon og avsetning [29]. Derfor er en av de effektive strategiene for å produsere anti-leverfibrosemedisin å identifisere anti-TGF-β1-midler. Immunhiistokjemisk analyse viste at uttrykkene for kollagen type I, kollagen type III og TGF-β1 kunne oppdage den patologiske prosessen med leverfibrose. Uttrykkene for kollagen type I, kollagen type III og TGF-β1 i behandlingsgruppene er redusert, som var signifikant lavere i høydosen CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)spesielt behandlingsgruppen, og foreslo at CPhGs er en effektiv kollagen type I, kollagen type III og TGF-β1 hemmer. Antagelig kan CPhGs forbedre kollagenaseaktiviteten, opprettholde den dynamiske likevekten av ECM-syntese og nedbrytning, og dermed forsinke og forhindre dannelse av leverfibrose. CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)ikke bare kunne ameliorate BSA-indusert leverfibrose hos rotter, men også være forbundet med å hemme aktiveringen av HSC in vitro. HSC-aktivering antas å representere det avgjørende trinnet i fibrogenese. I denne studien illustrerte resultatene at administrering av CPhGs fra 25 til 100 ug/ml bemerkelsesverdig svekket det reduserte NF-κB p65, kollagen I mRNA-uttrykket og kollagen I proteinuttrykk i HSC. NF-κB spiller en viktig rolle i modulering av immunresponsen mot infeksjon eller stimuli [30]. Oppbyggingen av NF-κB i leverceller kan føre til rekruttering av inflammatoriske cytokiner/mediatorer, og dermed indusere fibroseutvikling [31, 32]. Videre er kollagen også en sensitiv indeks som gjenspeiler fibrosenivået og står for ca 50% av det totale proteinet i den fibrøse leveren [33].
Som et resultat postulerte vi at den molekylære mekanismen mot hepatofibrose er knyttet til CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)-mediert inaktivering av NF-κB-uttrykk, der fordelen bidrar til synergistiske roller for å dempe immuntoksisitet og betennelsesstress i BSA-lesjonert levervev, ytterligere korrigere dysmetabolisme til ameliorate leverfunksjoner.
Konklusjoner
Til slutt indikerer studiene våre at CPhGs(fenylethanoid glykosid fra cistanche)betydelig svekke omfanget av leverfibrose indusert av BSA hos rotter. Mekanismen kan i det minste delvis skyldes den hemmende effekten av CPhGs på sammensetningen av ECM og stimulering av nedbrytningen av ECM, og / eller ved direkte hemming av syntesen av kollagen type I, kollagen type III og uttrykket av TGF-β1. Derfor forventet vi at CPhGs kan brukes i helseprodukter eller i kliniske medisiner for forebygging av human leverfibrose. Fremtidige studier er nødvendig for å etablere effekten av CPhGs som et potent anti-leverfibrose-legemiddel.
Forkortelser
CPhGs:Fenyletanol glykosider fra cistanche; BSA: Bovine serum albumin; HSC-T6: Lever stellate celler; Hyp: Hydroksyprolin; BJRG: Sammensatte Biejiarangan tabletter; TGF-β1: Transformere vekstfaktor β1; ALT: Alanin aminotransferase; AST: Aspartate aminotransferase; HA: Hyaluronsyre; LN: Laminin; PC III: Type III procollagen; IV-C: Type IV kollagen; NF-κB: Kjernefysisk faktor kappa-light-chain-enhancer av aktiverte B-celler; RT-PCR: Omvendt transkripsjon-polymerase kjedereaksjon; SDS-PAGE: Natrium dodecyl sulfat-polyakrylamid gel elektroforese.
Konkurrerende interesser Forfatterne erklærer at de ikke har konkurrerende interesser. Forfatternes bidrag TL, JZ, SPY, LM, MT og SLZ unnfanget og designet eksperimentene. SPY, TL og JZ analyserte dataene. SPY og JZ skrev manuskriptet. TL, LM og JZ gjennomgikk manuskriptet. Alle forfattere leste og godkjente det endelige manuskriptet. Anerkjennelse Denne forskningen ble støttet av National Natural Science Foundation of China (81260624). Forfatterne ønsker å uttrykke sin oppriktige takk til professor Tao Liu for hans foreslåtte forbedringer for skriving av denne artikkelen. Forfatter detaljer 1 Institutt for toksikologi, School of Public Health, Xinjiang Medical University, No. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur Autonome
Region, Kina. 2 Nøkkellaboratorium for uigurmedisin, Institutt for Materia Medica i Xinjiang, Urumqi 830004, Kina. 3 No. 140 Xinhua South Road, Tianshan District, Urumqi 830000Xinjiang Uigur autonome region, Kina. Mottatt: 6. august 2015 Akseptert: 24.
Referanser
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Nåværende status for nye antifibrotiske terapier hos pasienter med kronisk leversykdom. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Lever stellate celler og leverfibrose. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Patogenese av leverfibrose. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Review artikkel: reversibiliteten til skrumplever. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Kinesisk vitenskapsakademi. 23. ut. Kina: Redaksjonskomiteen i Flora i Kina; 2013. s. 1–16.
Den kinesiske farmakopékommisjonen for sanitærdepartementet i Folkerepublikken Kina. Kinesisk farmakopé, del 1. Kina: Kjemisk industri forlag; 2010. s. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Forskning fremgang av fenylethanoid glykosider fra Cistanche tubulosa. Central South Pharm. 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, Han L. Effekt av Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) på reproduksjonstoksisitet hos mus indusert av glykosid av Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE og blodplateaggregeringshemmere fra Tamarix Hojnacki Bunge (vertsplante av Herba Cistanches) vokser i Xinjiang. Pharmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Ameliorasjon av dekstransulfat natriumindusert kolitt hos mus ved echinacoside-beriket ekstrakt av Cistanche tubulosa. Fytother Res. 2014;28(1):110–9.
