Del 3: Distinkte roller for deacetylasedomenet til HDAC3 i hippocampus og medial prefrontal cortex i dannelsen og utryddelsen av minne

for mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com

Vennligst klikk her tilbake til del 2

KlikkCistanches og Cistanche for å forbedre hukommelsen

Anerkjennelser

Spesiell takk til Dr. Norbert J. Fortin for hans hjelp med statistisk analyse.

Finansieringskilder: Dette arbeidet ble støttet av National Institute on Drug Abuse og National Institute of Mental Health grants (DA025922, DA036984, MH101491) til MAW og NIDA og National Institute on Aging (NIA) tilskudd (F32 DA043998 og T32 AG{{ 6}}) til YA.

Referanser

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Nukleær reseptor corepressor og histon deacetylase 3 styrer døgnkontinuerlig metabolsk fysiologi. Natur. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Konsolideringen av objekt- og kontekstgjenkjenninghukommelseinvolvere forskjellige regioner i tinninglappen. Lær Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Uttrykk av histondeacetylaser i cellulære rom i musehjernen og effekten av iskemi. Transl Stroke Res. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Hippocampus fokal knockout av CBP påvirker spesifikke histonmodifikasjoner, langsiktig potensering og langsiktighukommelse. Nevropsykofarmakologi. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Klasse I HDAC-hemmeren RGFP963 forbedrer konsolideringen av cued fryktutryddelse. Lær Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Distribusjon av histondeacetylaser 1–11 i rottehjernen. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Rekombinante AAV-virale vektorer pseudotypet med virale kapsider fra serotype 1, 2 og 5 viser differensialeffektivitet og celletropisme etter levering til ulike regioner av sentralnervesystemet. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Farmakologien, nevroanatomien og nevrogenetikken til gjenkjenning av ett-forsøk hos gnagere. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Gjenkjenning av objekter med ett forsøk hos rotter og mus: metodologiske og teoretiske problemstillinger. Behav Brain Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Er dorsal og ventral hippocampus funksjonelt distinkte strukturer? Nevron. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Enzymatisk aktivitet assosiert med klasse II HDAC er avhengig av et multiproteinkompleks som inneholder HDAC3 og SMRT/N-CoR. Mol Cell. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, Se RE. Rollen til den dorsomediale prefrontale cortex, basolaterale amygdala og dorsal hippocampus i kontekstuell gjeninnsetting av kokainsøking hos rotter. Nevropsykofarmakologi. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Interaksjoner av den basolaterale amygdala med dorsal hippocampus og dorsomedial prefrontal cortex regulerer medikamentkontekstindusert gjeninnføring av kokainsøking hos rotter. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Histonacetylering: molekylær mnemonikk på kromatinet. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. SMRT- og N-CoR-corepressorene er aktiverende kofaktorer for histon-deacetylase 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Montering av SMRT-histondeacetylase 3-represjonskomplekset krever TCP-1-ringkomplekset. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. De mange rollene til histon-deacetylaser i utvikling og fysiologi: implikasjoner for sykdom og terapi. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. HDAC-hemming modulerer hippocampus-avhengig langsiktighukommelsefor objektplassering på en CBP-avhengig måte. Lær Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Celletypespesifikk inaktivering av hippocampus CA1 forstyrrer lokaliseringsavhengig objektgjenkjenning i musen. Lær Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Prefrontale cortexlesjoner forstyrrer differensielt kokainforsterket betinget stedspreferanse, men ikke betinget smakaversjon. Oppfør Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Oversettelse av histonkoden. Vitenskap. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Hjernekretsløp og gjeninnføring av kokainsøkende atferd. Psykofarmakologi (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Redde svekkelse av langsiktig potensering i fyn-mangelfulle mus ved å introdusere Fyn-transgen. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Kromatinmodifikasjoner og deres funksjon. Celle. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Transkripsjonelle responser på forsterkende effekter av kokain i rottehippocampus og cortex. Genes Brain Behav. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Kontekst og auditiv frykt er differensielt regulert av HDAC3-aktivitet i de laterale og basale underkjernene i Amygdala. Nevropsykofarmakologi. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Å nøste opp den skjulte katalytiske aktiviteten til virveldyr klasse IIa histon deacetylaser. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Den infralimbiske cortex regulerer konsolideringen av utryddelse etter selvadministrering av kokain. Lær Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Inaktivering av den infralimbiske, men ikke den prelimbiske cortex, svekker konsolidering og gjenfinning av fryktutryddelse. Lær Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Forsinket tilbakekalling av fryktutryddelse hos rotter med lesjoner i den ventrale mediale prefrontale cortex. Lær Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Epigenetiske mekanismer: et vanlig tema hos virveldyr og virvelløse dyrhukommelseformasjon. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Promoter-spesifikke effekter av DREADD-modulering på hippocampus synaptisk plastisitet ogMinnedannelse. J Neurosci. 2016; 36:3588-3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Modulering av kromatinmodifikasjon letter utryddelsen av kokain-indusert betinget stedspreferanse. Biol Psykiatri. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP i nucleus accumbens regulerer kokainindusert histonacetylering og er kritisk for kokainassosiert atferd. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. HDAC3-selektiv hemmer øker utryddelsen av kokainsøkende atferd på en vedvarende måte. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiology of pavlovian fear to condition. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos, men ikke Cart (kokain- og amfetaminregulert transkripsjon) er overuttrykt av flere misbruksstoffer: en sammenlignende studie som bruker sanntid kvantitativ polymerasekjedereaksjon i rottehjerne. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 og hypotesen om molekylær bremsekloss. Neurobiol Lær Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 er en kritisk negativ regulator avdannelse av langtidshukommelse. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Dorsale, men ikke ventrale, hippocampale lesjoner forstyrrer kokainbehandlingen. Nevrorapport. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Histon deacetylase 3 er en epigenomisk brems i makrofag alternativ aktivering. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Perspektiver på objektgjenkjenningsminne etter hippocampusskade: leksjoner fra studier på rotter. Behav Brain Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Dissosiasjon i effekter av lesjoner av nucleus accumbens kjerne og skall på appetittvekkende pavlovsk tilnærmingsadferd og potensering av betinget forsterkning og lokomotorisk aktivitet av D-amfetamin. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Rollen til histonacetylering i minnedannelse og kognitive svekkelser. Nevropsykofarmakologi. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histon deacetylaser i hukommelse og kognisjon. Sci-signal. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Den infralimbiske prefrontale cortex er ansvarlig for å hemme kokainsøking hos slukkede rotter. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Ekstinksjonskretser for frykt og avhengighet overlapper hverandre i den prefrontale cortex. Lær Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. En ny matematisk modell for relativ kvantifisering i sanntids RT-PCR. Nucleic Acids Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Sanntids RT-PCR kvantifisering av insulinlignende vekstfaktor (IGF)-1, IGF-1-reseptor, IGF-2, IGF-2-reseptor, insulinreseptor, veksthormon reseptor, IGF-bindende proteiner 1, 2 og 3 i bovine arter. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Rollen til ventromedial prefrontal cortex i utvinningen av slukket frykt. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Prefrontale mekanismer i utryddelse av betinget frykt. Biol Psykiatri. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Sammenligning av ratene for assosiativ endring under oppkjøp og utryddelse. J Exp Psychol Animal Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 er en negativ regulator av kokain-kontekst-assosiert minnedannelse. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Membranassosiert glukokortikoidaktivitet er nødvendig for modulering av langtidshukommelse via kromatinmodifikasjon. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Farmakologisk selektivitet innen klasse I histondeacetylaser forutsier effekter på synaptisk funksjon og minneredning. Nevropsykofarmakologi. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 styrer et transkripsjonsprogram som er essensielt for synaptisk plastisitet og minne. Celle. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Inaktivering av den ventromediale prefrontale cortex reduserer uttrykk for betinget frykt og svekker påfølgende tilbakekalling av ekstinksjon. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Økende histonacetylering i det hippocampus-infralimbiske nettverket øker fryktutryddelsen. Biol Psykiatri. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulering av langtidsminne for objektgjenkjenning via HDAC-hemming. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106:9447-9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Deacetylase-uavhengig funksjon av HDAC3 i transkripsjon og metabolisme krever en nukleær reseptor corepressor. Mol Cell. 2013; 52:769-782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Diskrete kinolinsyrelesjoner av den prelimbiske mediale prefrontale cortex hos rotter påvirker kokain- og MK-801-, men ikke morfin- og amfetaminindusert belønning og psykomotorisk aktivering målt med stedspreferanse-kondisjoneringsparadigmet. Behav Brain Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Funksjonell heterogenitet av rotte mediale prefrontale cortex: effekter av diskrete subområdespesifikke lesjoner på medikamentindusert betinget stedspreferanse og atferdssensibilisering. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Den nevronspesifikke kromatinregulatoriske underenheten BAF53b er nødvendig for synaptisk plastisitet og hukommelse. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Nevronspesifikk kromatinremodellering: en manglende kobling i epigenetiske mekanismer som ligger til grunn for synaptisk plastisitet, hukommelse og intellektuelle funksjonshemmingsforstyrrelser. Nevrofarmakologi. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF redder BAF53b-avhengig synaptisk plastisitet og kokainassosiert minne i nucleus accumbens. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Objektgjenkjenningsminne: nevrobiologiske mekanismer for koding, konsolidering og gjenfinning. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. N-CoR-HDAC3 kjernefysisk reseptor corepressor-komplekset hemmer JNK-banen gjennom den integrerte underenheten GPS2. Mol Cell. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Høydepunkter

► Blokkering av HDAC3-deacetylase-aktivitet i dorsale hippocampus forbedret langsiktig objektlokaliseringsminne, men hadde ingen effekt på kokainassosiert minnedannelse. ► Å svekke HDAC3-deacetylasedomenet i den prelimbiske cortex hadde ingen effekt på kokainassosiert hukommelsesdannelse. ► Blokkering av HDAC3-deacetylaseaktivitet i den infralimbiske cortex hadde ingen effekt på ekstinksjon. ► Forstyrrelse av HDAC3-deacetylaseaktivitet i dorsal hippocampus resulterte i lettet utryddelse.

Figur 1.

Dominant negativt punktmutantvirus (HDAC3(Y298H)-v5 uttrykkes effektivt i dorsale hippocampus. (A) V5-epitop ble lagt til punktmutantviruset. (B) Representativt immunfluorescensbilde som viser uttrykk for V5-epitoptaggen (grønn) i dorsal hippocampus (DH) etter infusjon av AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Ingen V5-farging ble observert med AAV-EV-kontrollvirus. Celler ble motfarget med DAPI (blått). (C) V5-mRNA ble signifikant økt i DH av mus infundert med AAV-HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n {{20}}, HDAC3(Y298H)-v5 n=4. (D) HDAC3 ble også betydelig økt i DH av mus infundert med AAV-HDAC(Y298H)-v5 sammenlignet med AAV-EV-kontroller, AV-EV n=6, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. *p < 0,05.

Figur 2.

Blokkering av HDAC3-aktivitet i det forbedrede DH-minnet for objektplassering (OLM), men ikke for objektgjenkjenning (ORM). (A) Mus fikk underterskeltrening (3 min) i et miljø med to identiske objekter og mottok en retensjonstest 24 timer senere der en gjenstand flyttes til et nytt sted. Skjematisk beskriver metoder for B og C. (B) Mus som ble gitt AAV-HDAC3(Y298H)-v5 viste en signifikant preferanse for den nye objektplasseringen 24 timer etter trening sammenlignet med EV-kontroller, AAV-EV n {{10 }}, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) Grupper var ikke forskjellige i total letetid for de to objektene. (D) Mus fikk underterskeltrening (3 min) i et miljø med to identiske objekter og mottok en retensjonstest 24 timer senere der ett objekt ble erstattet med et nytt (ORM), AAV-EV n=9, HDAC3(Y298H)-v5 n=7. Skjematisk beskriver metoder for E og F. (E) Verken AAV-EV-kontroll eller AAV-HDAC3(Y298H)-v5-mus viste signifikant preferanse for det nye objektet. (F) Grupper var ikke forskjellige i total letetid for de to objektene. *p <>

Figur 3.

Blokkering av HDAC3-aktivitet i dorsal hippocampus har ingen effekt på dannelsen av kokainindusert CPP-minne. (A) Skjematisk av kokain-CPP-prosedyren. (B) Kokain-CPP-uttrykk indikert med gjennomsnittlig CPP-score (tid brukt i kokain-paret (CS pluss) minus saltvannsparet (CS-) ± sem). Ved 5 mg/kg kokainkondisjoneringsdose viste AAV-HDAC3(Y298H)-v5-mus tilsvarende CPP-score som EV-kontroller under post-testen, AAV-EV n=15, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}.

Figur 4.

Fokal homozygot gensletting av Hdac3 i dorsal hippocampus har ingen effekt på dannelsen av kokainindusert CPP-minne. (A) Skjematisk av kokain-CPP-prosedyren. (B) Kokain-CPP-uttrykk indikert med gjennomsnittlig CPP-score (tid brukt i kokain-paret (CS pluss) minus saltvannsparet (CS-) ± sem). Ved 5 mg/kg kokainkondisjoneringsdose viste Hdac3flox/flox-mus tilsvarende CPP-score som Hdac3 pluss/pluss-kontroller under post-testen. (C) Representativt immunfluorescensbilde som viser uttrykk for HDAC3 (grønn) i dorsal hippocampus etter infusjon avAAV2.1 Cre infundert i Hdac3 plus/plus og Hdac3flox/flox mus. Celler ble motfarget med DAPI (blått). (D) Kvantifisering av immunfarging bekreftet at HDAC3 var signifikant redusert i Hdac3flox/flox-mus sammenlignet med Hdac3 plus/plus-kontroller, Hdac3 plus/pluss n=12, Hdac3flox/flox n=11. *p <>

Figur 5.

Blokkering av HDAC3-aktivitet i den prelimbiske cortex (PrL) har ingen effekt på dannelsen av kokainindusert CPP-minne. (A) Skjematisk av kokain-CPP-prosedyren. (B) Kokain-CPP-uttrykk indikert med gjennomsnittlig CPP-score (tid brukt i kokain-paret (CS pluss) minus saltvannsparet (CS-) ± sem). Ved 5 mg/kg kokainkondisjoneringsdose viste AAV-HDAC3(Y298H)-v5-mus tilsvarende CPP-score som EV-kontroller under post-testen, AAV-EV n=12, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}. (C) Representativt immunfluorescensbilde som viser uttrykk for V5-epitop-taggen (grønn) etter infusjon av AAV-HDAC3(Y298H)-v5 rettet mot PrL. Ingen V5-farging ble observert med AAV-EV kontrollvirus. Celler ble motfarget med DAPI (blå) og nevroner ble motfarget med NeuroTrace (rød). V5-ekspresjon var stort sett begrenset til den prelimbiske regionen av den mediale prefrontale cortex. (D) Målrettet viral infusjon i PrL. De skyggelagte områdene i museatlasbildene illustrerer den representative utstrekningen av viral infusjon.

Figur 6.

Blokkering av HDAC3-aktivitet i den infralimbiske cortex (IL) har ingen effekt på utryddelsen av kokainindusert CPP-minne. (A) Skjematisk av kokain-CPP-prosedyren. (B) Kokain-CPP-uttrykk indikert med gjennomsnittlig CPP-score (tid brukt i kokain-paret (CS pluss) minus saltvannsparet (CS-) ± sem). Dyrene ble først trent på 20 mg/kg kokain. Deretter fikk dyrene intra-IL AAV-EV eller AAV-HDAC3(Y298H)-v5 virale infusjoner, og ekstinksjonsminne ble undersøkt. AAV-HDAC3(Y298H)-v5-mus viste lignende CPP-score som EV-kontroller under post-testene 2–5, AAV-EV n=17, HDAC3(Y298H)-v5 n=16. (C) Representativt immunfluorescensbilde som viser uttrykk for V5-epitop-taggen (grønn) etter infusjon av AAV-HDAC3(Y298H)-v5 rettet mot IL. Ingen V5-farging ble observert med AAV-EV kontrollvirus. Celler ble motfarget med DAPI (blå) og nevroner ble motfarget med NeuroTrace (rød). V5-ekspresjon var stort sett begrenset til den infralimbiske regionen av den mediale prefrontale cortex. (D) Målrettet viral infusjon i IL. De skraverte områdene i museatlasbildene illustrerer det representative omfanget av viral infusjon.