Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Klikk her for del 1

Diskusjon

I denne studien ble fenyletanoidglykosider hentet fraCistanche tubulosa påvirket ikke cellelevedyktighet på RBL{{0}}}H3-celler og KU812-celler ved 1.0-10,0 µg/mL-behandlinger. Men,akteosidvar cytotoksisk ved 100,0 µg/ml behandlinger (Fig. 2B), som er rapportert av Saracoglu et al. [30] som har vist detakteosidisolert fraPhlomic Armeniacaog Scutellaria salviifolia viste cytotoksiske effekter på dRLh-84, S-180, P-388/D1-cellelinjer med IC₅₀30-221 µg/ml ved forskjellige celletall. Resultatet vårt antydet at hemmingseffekten avakteosidpå cellelevedyktighet ved 100 µg/ml behandling, kan påvirkes av dens apoptotiske aktivitet.

Den umiddelbare allergiske reaksjonen er involvert i mange allergiske sykdommer som astma, allergisk rhinitt og bihulebetennelse. Mastceller spiller en avgjørende rolle i inflammatoriske og umiddelbare allergiske reaksjoner. Våre data viser at akteosidet har den høyeste hemmende effekten på -heksosaminidase-frigjøringen fra IgE-sensibiliserte, antigenstimulerte RBL-2H3-celler sammenlignet med andre fenyletanoidglykosider ved 1,0 ug/mL behandling ( Fig. 3). Hemmingseffekten av akteosid på frigjøring av -heksosaminidase ved 10.0 ug/ml behandling var lavere enn ved 1,0 ug/ml behandling. Som Sugisawa et al. [31] demonstrert, kan dette være bidratt til H₂O₂induksjon ved høye konsentrasjoner av akteosid_,som kan være regulerte kalsiumsignaler og degranulering på RBL{0}}H3-cellene [32], påvirket til -heksosaminidase-frigjøring ved 10,0 ug/mLakteosidbehandling.

Cistanche deserticola har mange effekter, klikk her for å vite mer

Degranuleringen av mastceller er nært beslektet med [Ca^{2 pluss}]i. Hemmingen av Ca^{2 pluss}tilstrømning av anti-allergiske legemidler spiller en avgjørende rolle i undertrykkelsen av degranulering i mastceller. [33-34]. Våre resultater indikerer at den intracellulære [Ca^{2 pluss}]i nivået var lavere i de akteosidbehandlede, DNP-BSA-stimulerte RBL-2H3-cellene (Fig. 4), som stemmer overens med andre rapporter [34-35], og disse resultatene stemmer overens med resultatene i fig. 3. Vi anser fra disse observasjonene at reduksjonen i intracellulær [Ca]^{2 pluss}]i er involvert i den hemmende effekten avakteosidved frigjøring av -heksosaminidase. Nitrogenoksid (NO) og H₂O₂er to store reaktive oksygenarter (ROS) kjent for regulering av kalsiumsignal og degranulering av mastceller. ROS er nødvendig for sekresjon av -heksosaminidase og kalsiumtilstrømning, og nikotinamidadenindinukleotidfosfat (NADPH)-oksidase er hovedsakelig ansvarlig for ROS-produksjon i IgE-mediert RBL-2H3-celler [29, 32]. Den vedvarende økningen av cytosolisk kalsium gjennom butikkdrevet kalsiuminngang ble fullstendig opphevet da ROS-produksjonen ble blokkert. I tillegg har ROS en viss sammenheng med frigjøring av ß-heksosaminidase og histamin ved aktivering av proteinkinase C (PKC) og IgE-stimulering i RBL-2H3-celler [34]. Videre har Suzuki et al. [36] fant at det var en signifikant korrelasjon mellom hemmende effekter på histaminfrigjøring og 1, 1-difenyl-2-piratkopiering l-hydroksyl (DPPH) eller superoksidanion-radikal-fjernende aktiviteter av curcumin-relatert antioksidant forbindelser. På den andre siden,akteosidhar frie radikalfjernende egenskaper på NO-radikaler og DPPH-radikaler [9, 37]. Akteosid har også vist rensende aktivitet i aktiverte humane leukocytter [38]. En av mulighetene er at den hemmende effekten av akteosid på intracellulær kalsiumfrigjøring kan påvirkes av dets frie radikalfjernende aktiviteter av NADPH-oksidaseaktiviteter.

Acteosid doseavhengig hemmet histaminfrigjøring på A23187 pluss PMA-stimulert KU812-celle (fig. 4A).Akteosidhemmet glutamatindusert intracellulær Ca^{2 pluss}tilstrømning som resulterer i overproduksjon av NO og redusert dannelse av ROS [37]. Både PKC og Ca^{2 pluss}signalveier er nødvendige for frigjøring av histamin og leukotriener fra mastceller så vel som gnagersystemer [39]. Vi antok detakteosidkan ha en hemmende effekt på histaminfrigjøring gjennom Ca^{2 pluss}tilstrømning. For dette formålet brukte vi A21387 pluss PMA for å stimulere KU812-celler og demonstrerte histaminfrigjøringshemmingseffekten medakteosid. Dette resultatet støttet vår hypotese om at acteosid kan redusere histaminfrigjøring fra KU812-celler ved hemming av Ca^{2 pluss}tilstrømning eller PKC-aktivering.

Det antas uten tvil at stimulering av mastceller med forbindelse 48/80 initierer aktiveringen av en signaltransduksjonsvei, som fører til histaminfrigjøring. Senyshyn et al. [40] identifiserte rekombinant G-underenhet markert synergisert fosfolipase D-aktivering av forbindelse 48/80 i permeabiliserte basofile celler. Forbindelse 48/80-indusert sekresjon er assosiert med en forbigående økning i cytosolisk Ca^{2 pluss}. Denne sekresjonen ble blokkert av kalsiumchelatoren og PKC-hemmeren. I denne studien observerte vi detakteosidhemmet forbindelsen 48/80-indusert degranulering fra basofile celler. Men den hemmende effekten av akteosid på histaminfrigjøring ved 0.1 ug/ml behandling var høyere enn 1.0-10.0 ug/ml behandling (fig. 4B). Som Lau et al. [41] påvist, hemmende effekt avakteosidpå forbindelse 48/80 kan indusert histaminfrigjøring være involvert i anti-inflammasjonseffekten av akteosid mot vaskulær permeabilitetsassosiert ødem. Muligensakteosidkan ha flere forskjellige måter å hemme frigjøring av kjemiske mediatorer fra basofile celler, noe som antyder kompleksiteten til dens virkning. For å avsløre mekanismen for hemming av histaminfrigjøring av denne resepten, bør det imidlertid utføres ytterligere studier.

Blant cytokiner produsert av basofile celler, er TNF-, IL-4, IL-13 og IL-5 nøkkelmolekylene. Reduksjonen av pro-inflammatoriske cytokiner fra mastceller eller basofile celler er en av nøkkelindikatorene for reduserte allergiske symptomer [42]. Når det gjelder TNF- er produksjonen i hovedsak regulert av Ca^{2 pluss}tilstrømning, men frigjøringsprosessen er regulert av ytterligere mekanismer som muligens involverer aktivering av PKC i KU812-celler. Inhibering av [Ca^{2 pluss}]i influx er involvert i ekspresjonen av cytokiner i mastceller og basofile celler [34, 43]. Resultatet vårt viste at 1.0 og 10,0 µg/mLakteosidredusert TNF- og IL-4-produksjon fra A23187 pluss PMA-stimulerte KU812-celler etter behandling i 16 timer. Acteosid kan hemme TNF- og IL-4-produksjonen ved å redusere [Ca^{2 pluss}] I nivå i A23187 pluss PMA-stimulerte KU812-celler. Dessuten antydet resultatene våre atakteosidhar en anti-allergisk effekt i senfasen. Bekreftelse av effekten av akteosid ved bruk av FcεRI-uttrykkende mastceller eller basofile celler er nødvendig for fremtiden.

Avslutningsvis rapporterer vi for første gang at acteosid, echinacoside ogcistanosideA hentet fraCistanche tubulosa kan hemme frigjøringen av -heksosaminidase fra IgE-sensibiliserte BSA-stimulerte RBL-2H3-celler. Videre kan acteosid hemme histaminfrigjøringen, TNF- og IL-4-produksjonen på en doseavhengig måte på A23187 pluss PMA-stimulerte KU812-celler. Disse resultatene tyder på detakteosidkan være en god kandidat for terapeutisk behandling av ulike allergiske sykdommer. Den detaljerte mekanismen bak den antiallergiske effekten av akteosid er gjenstand for en fremtidig studie.

Referanser

1 Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Fenyletanoide aminoglykosider og acylerte oligosukkere med vasorelakserende aktivitet fraCistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475

2 Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, Miyase T, Ueno A, Usmanghani K, Ahmad M. Nye Phenylethanoid Glycosider fraCistanche tubulosa (SCHRENK) KROK. f. I. Chem Pharm Bull 1987; 35: 3309–3314

3 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Effekten avCistanche tubulosa ekstrakt på ulike hjernesykdommer. Matstil 21 2008; 12:24–26

4 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Anti-aldringsfunksjoner avCistanche tubulosaekstrakt. Matstil 21 2008; 12:27–29

5 Tanaka J, Kikuchi M, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Skjønnhets- og hårvekstfunksjoner til Cistanche tubulosa-ekstrakt. Matstil 21 2008; 12:29–32

6 Tanaka J, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Fettmetaboliserende effekt avCistanche tubulosa ekstrakt. Matstil 21 2008; 12:30–33

7 Yoshizawa F, Deyama T, Takizawa N, Usmanghani K, Ahmad M. Bestanddelene av Cistanche tubulosaSchrenk (krok) f. I I. Isolering og struktur av et nytt fenyletanoidglykosid og et nytt neolignanglykosid. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930

8 Xiong Q, Tezuka Y, Kaneko T, Li H, Tran LQ, Hase K, Namba T, Kadota S. Inhibering av nitrogenoksid av fenyletanoider i aktiverte makrofager. Eur J Clin Pharmacol 2000; 14: 137–144

9 Sahpaz S, Garbacki N, Tits M, Bailleul F. Isolering og farmakologisk aktivitet av fenylpropanoidestere fra Marrubium vulgare. J Ethnopharmacol 2002; 79: 389–392

10 He WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ,tiPF. Echinacoside fremkaller endotelavhengig avslapning i rotteaortaringer via en NO-cGMP-vei. Planta Med 2009; 75: 1400–1404

11 Zhang hovedkvarter,WengXJ, Chen LL, Li X. Effekt av Cistanche tubulosa (Schenk) Whight-akteosid på telomeraseaktivitet og immunitet til aldrende mus. kinesisk J Pharmacol Toxicol 2008; 22: 270–273

12 Lee JH, Lee JY, Kang HS, Jeong H, Moon CH, Whang WK, Kim SS, Sim C. Effekten av akteosid på frigjøring av histamin og frigjøring av arakidonsyre i RBL-2H3-mastceller. J Arch Pharm Res 2006; 29: 508–513

13 Diaz AM, Abad MJ, Fernandez L, Silvan AM, Santos JD, Bermejo P. Fenylpropanoidglykosider fra Scrophularia scorodonia: in vitroanti-inflammatoriskaktivitet. Life Sci 2004; 74: 2515–2526

14 Beaven MA, Metzger H. Signaloverføring av Fc-reseptorer: FcεRI-saken. Immunol Today 1993; 14: 222–226

15 Srivastava D, Arora N, Singh BP.Gjeldende immunologiske tilnærminger for behandling av allergisk rhinitt og bronkial astma. Inflamm Res 2009; 58: 523–536

16 Pelletier C, Guerin-Marchand B, Iannascoli F, Marchand B, David AW, Blank U. Spesifikke signalveier i reguleringen av TNF-mRNA-syntese og TNF-sekresjon i RBL-2H3-mastceller stimulert gjennom de høye -affinitets-IgE-reseptor C. Inflamm Res 1998; 47: 493–500

17 Schiwartz LB, Lewis RA, Seldin D, Austen KF. Syrehydrolaser og tryptase fra sekretoriske granuler av dispergerte humane lungemastceller. J Immunol 1981; 126: 1290–1294

18 Cheong H, Choi EJ, Yoo GS, Kim KM, Ryu SY. Desacetylmatricarin, en anti-allergisk komponent fraTaraxacum Platycerium. Planta Med 1998; 64: 577–578

19 Ortega E, Schweitzer-Stenner R, Pecht I. Mulige orienteringsbegrensninger bestemmer sekretoriske signaler indusert av aggregering av IgE-reseptorer på mastceller. EMBO J 1988; 7: 4101–4109

20 Funaba M, Ikeda T, Abe M. Degranulering i RBL-2H3-celler: regulering ved hjelp av kalmodulinvei. Cell Biol Int 2003; 27: 879–885

21 Ohno Y, Tanno K, Yamauchi K, Takishima T. Genuttrykk og produksjon av tumornekrosefaktor av en basofil leukemicellelinje fra rotte (RBL-2H3) med utløsende IgE-reseptor. Immunology 1990; 70: 88–93

22 Butterfield JH, Weiler D, Dewald G, Gleich GJ. Etablering av en umoden mastcellelinje fra en pasient med mastcelleleukemi. Leuk Res 1988; 12: 345–355

23 Hosoda M,YamayaM, SuzukiT, YamadaN, Kamanaka M, Sekizawa K, Butterfield JH,Watanabe T, Nishimura H, Sasaki H. Effekter av rhinovirusinfeksjon på histamin- og cytokinproduksjon av cellelinjer fra humane mastceller og basofiler. J Immunol 2002; 169: 1482–1491

24 Galli SJ, Kalesnikoff J, Grimbaldeston MA, Piliponsky AM, Williams CM, Tsai M. Mastceller som "avstembare" effektor- og immunregulerende celler: nyere fremskritt. Annu Rev Immunol 2005; 23: 749–786

25 Galli SJ, Gordon JR, Wershil BK. Cytokinproduksjon av mastceller og basofiler. Curr Opin Immunol 1991; 3: 865–872

26 YamadaP, Isoda H, Han J,TaloreteTP,AbeY. Hemmende effekt av fulvinsyre utvunnet fra kanadiskSphagnumtorv på frigjøring av kjemisk mediator fra RBL-2H3- og KU812-celler. Biosci Biotechnol Biochem 2007; 71: 1294–1305

27 Aase F, Arna, S. Dantrolen forhindrer glutamat cytotoksisitet og Ca^{pluss 2}frigjøring fra intracellulære lagre i dyrkede cerebrale kortikale nevroner. J. Neurochem 1991; 56: 1075–1078

28 Yamada P, Zarrouk M, Kawasaki K, Isoda H, Hemmende effekt av forskjellige tunisiske olivenoljer på kjemisk mediatorfrigjøring og cytokinproduksjon av basofile celler. J Ethnopharmacol 2008; 116: 279–287

29 Kim Y, Lee YS, Hahn JH, Choe J, Kwon HJ, Ro JY, Jeoung D.Hyaluronsyre retter seg mot CD44 og hemmer FcεRI-signalering som involverer PKCδ, Rac1, ROS og MAPK for å utøve en anti-allergisk effekt. Mol Immunol 2008; 45: 2537–2547

30 Saracoglu I, Inoue M, Calis I, Ogiwara Y. Studier av bestanddeler med cytotoksisk og cytostatisk aktivitet av to tyrkiske medisinplanterPhlomis ArmeniacaogScutellaria salviifolia. Biol Pharm Bull 1995; 18: 1396–1400

31 Sugisawa A, Umegaki K. Fysiologisk konsentrasjon av (-)-epigallocatechin -3-O-gallat (EGCg) forhindrer kromosomskade indusert av reaktive oksygenarter i WIL2-NS-celler. J Nutr 2002; 132: 1836–1839

32 Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C. Fc epsilon RI-signalering av mastceller aktiverer intracellulær produksjon av hydrogenperoksid: rolle i reguleringen av kalsiumsignaler. J Immunol 2003; 171: 6119–6127

33 Oka T, Sato K, Hori M, Ozaki H, Karaki H. FcεRI-kryssbinding-indusert aktinsamling medierer kalsiumsignalering i RBL-2H3-mastceller. Br J Pharmacol 2002; 136: 837–846 34Tasaka K, Mio M, Okamoto M. Intracellulær kalsiumfrigjøring indusert av histaminfrigjørere og dets hemming av noen anti-allergiske legemidler. Ann Allergy 1986; 56: 464–469

35 Horiuti TM, Zaitsu M, Lambert KC, Grady JJ, Estes DM, Curran EM, Brooks EG, WatsonCS, Goldblum RM. Østrogener potenserer syntesen og frigjøringen av mediatorer av allergi fra mastceller ved å øke intracellulært kalsium. J Allergy Clin Immunol 2005; 115:189

36 Suzuki M, NakamuraT, Iyoki S, Fujiwara A,WatanabeY, Mohri K. Isobe K, Ono K,Yano S. Belysning av anti-allergiske aktiviteter av curcumin-relaterte forbindelser med en spesiell referanse til deres antioksidative aktiviteter. Biol Pharm Bull 2005; 28: 1438–1443

37 Koo KA, Kim SH, Oh TH, Kim YC. Acteosid og dets aglykoner beskytter primærkulturer av rottekortikale celler mot glutamatindusert eksitotoksisitet. Life Sci 2006; 79: 709–716

38 Lin LC,WangYH, Hou YC, Chang S, LiouKT,Chou YC,WangWY,Shen YC. Den hemmende effekten av fenylpropanoidglykosider og iridoidglukosider på frie radikalproduksjon og b2-integrinekspresjon i humane leukocytter. J Pharm Pharmacol 2006; 58: 129–135

39 Kim M, Shichijo M, Miura T, Serizawa I, Inagaki N, Nagai H. Ca^{2 pluss}og proteinkinase C-signalering for frigjøring av histamin og sulfidoleukotriener fra humane dyrkede mastceller. Biochem Biophys Res Commun 1999; 257: 895–900

40 Senyshyn J, Baumgartner RA, Beaven MA. Quercetin sensibiliserer RBL-2H3-celler til polybasiske mastcellesekretagoger gjennom økt ekspresjon av G_iGTP-bindende proteiner knyttet til en fosfolipase C-signalvei. J Immunol 1998; 160: 5136–5144

41 Lau CW, Chen ZY, Wong CM, Yao XQ, He ZD, Xu HX, Huang Y. Dempet endotelmediert avspenning av akteosid i rotteaorta: Endotelets rolle [Ca^{2 pluss}] I og nitrogenoksid/syklisk GMP-vei. Life Sci 2004; 75: 1149–1157

42 Paul WE, Seder RA, Plaut M. Lymfokin- og cytokinproduksjon av FcεRI-celler. Adv Immunol 1993; 53: 1–29

43 Jeong HJ, Hong SH, Lee DJ, Park JH, Kim KS, Kim HM. Rollen til Ca^{2 pluss}på TNF- og IL-6-sekresjon fra RBL-2H3-mastceller. Cell Signal 2002; 14: 633–639

Cistanche tubulosa ekstrakt