Forberedelsesteknologi for Wenyang Tongbian-granulat

Abstrakt:

ObjektivFor å bestemme og optimalisere tilberedningsteknologien til Wenyang Tongbiangranules.

MetoderVannavkok ble ekstrahert. Innholdet av echinacea-glykosid i monarkmedikament og utbytteforbindelsen ble brukt som indekser. L9 (34) ortogonal test ble brukt for å optimalisere ekstraksjonen av Wenyang Tongbian-granulat. Den beste formingsprosessen ble optimalisert basert på granuleringsvanskelighet, formbarhet og partikkelutbytte. Resultater Den optimale ekstraksjonen inkluderte å legge til 10 fold med vann og ekstraksjon 3 ganger, 1 time hver gang. Den beste formasjonsprosessen: typen hjelpemateriale wasdextrin, forholdet mellom hjelpestoffer var 1∶0,9, og det beste fuktemiddelet var 85 % etanol. Konklusjon Ekstraksjons- og støpeprosessen er stabil og rimelig, enkel og gjennomførbar, med god reproduserbarhet, noe som kan gi grunnlag for industriell produksjon av Wenyang Tongbian-granulat.

Nøkkelord: Wenyang Tongbian granlue; ortogonal test; utvinning; støping

NY URTEFORMULERING FOR NYREYANG MANGEL

Støttetjeneste fra Wecistanche

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tlf:+86 15292862950

Yang mangel forstoppelseer vanlig hos eldre og kvinner. Behandlingsmetoden bør ikke være enkel purgering. Warming Yang-metoden kan oppnå gode resultater [1]. Wenyang Tongbian Granules er et preparat på sykehuset utviklet basert på den kliniske erfaringen til professor Lin Aizhen fra Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine i behandling av funksjonell forstoppelse hos eldre. Den er sammensatt av Cistanche deserticola, kanelbark, astragalus og Atractylodes macrocephala. I formelen har Cistanche deserticola funksjonene til å tonifisere nyre-yang og fordele essens og blod, og er hovedmedisinen som varmer yang; kanelbark har funksjonene til å varme meridianer og fjerne blokkering av blodårer, fylle på ild og støtte yang; astragalus har funksjonene til å heve yang og fylle på qi, astringere sår og fremme vevsregenerering; og Atractylodes macrocephala har funksjonene til å styrke milten og fylle på qi, tørke fuktighet og fremme diurese.

Studier har vist at fenyletanolglykosider er de viktigste aktive ingrediensene i Cistanche deserticola [2]. Blant dem er echinacoside og verbascoside de karakteristiske ingrediensene for kvalitetskontroll av Cistanche deserticola som spesifisert i den kinesiske farmakopéen. Liu Xianhong et al. [3] konkluderte gjennom in vivo menneskelige studier at Cistanche deserticola er egnet for klinisk behandling av forstoppelse og kan behandle både symptomene og grunnårsaken. De viktigste kjemiske komponentene i kanelbark inkluderer flyktige oljer, polysakkarider, flavonoider, etc. Moderne farmakologiske studier har vist at kanelbark har farmakologiske effekter som vasodilatasjon, anti-magesår og antibakterielle effekter [4]. Astragalus polysakkarider, flavonoider og astragalosid IV er de viktigste kjemiske komponentene som utøver immunmodulerende effekter [5]. Atractylodes macrocephala har effekten av å styrke milten og regulere tarmfloraforstyrrelser og kan brukes klinisk for å behandle gastrointestinal dysfunksjon [6]. Den originale resepten brukes hovedsakelig i avkok av kinesisk medisin, men den har ulemper som ulempe ved avkok, stor dosering og ulempe med å bære. For å gjøre denne resepten fra klinisk erfaring mye brukt i klinisk praksis, ble den utviklet til granulat. Dette eksperimentet brukte pastautbyttet og innholdet av echinakosid, den viktigste aktive ingrediensen i hovedmedisinen, som indikatorer, fortsatte å bruke den tradisjonelle vannavkokingsprosessen, og brukte L9 (34) ortogonal testmetode for å optimalisere mengden vann som ble tilsatt , avkokstid og avkokstid i ekstraksjonsprosessen for å oppnå den beste ekstraksjonsprosessen. Samtidig ble granulatstøpeprosessen undersøkt for å bestemme en stabil og rimelig støpeprosess, som ga en referanse for pilotproduksjon, kvalitetskontroll og klinisk anvendelse av preparatet [7-8].

1 Instrumenter og reagenser

1.1 Instrumenter

Alliance e2695høyytelses væskekromatograf, 2998 diode array detector (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 analytisk balanse (Precisa, Sveits), UPT-11-10T ultrarent vannmaskin (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dobbeltfrekvens CNC ultralydsrenser (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Prøvemedisiner

Vin Cistanche skiver(batchnummer: 2322050113, produsert i Indre Mongolia), kanelskiver (batchnummer: 2323020103, produsert i Guangxi), astragalusskiver (batchnummer: 2323020105, produsert i Gansu), Atractylodes (produsert i Gansu 302-biter, 302-biter, Zanghe 1, 302-1 skiver, 302, 2012-2012) ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., alle skiver er identifisert som autentiske av Chen Shuhe, sjeffarmasøyt ved Institute ofTradisjonell kinesisk medisinved Hubei provinssykehus for tradisjonell kinesisk medisin, og er kvalifisert i henhold til 2020-utgaven avkinesisk Farmakopédel I). Echinacoside referansestoff(batchnummer: 111670-201907, renhet: 91,8 %, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrin (batchnummer: 230102), maisstivelse (batchnummer: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sukrose (batchnummer: TF28221205), mikrokrystallinsk cellulose (batchnummer: TF471211001), batchnummer:lactose (batchnummer: lactose (batchnummer: TF28221205). TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metoder og resultater

2.1 Bestemmelse av echinakosidinnhold

2.1.1 Kromatografiske forhold: Agilent 5 TC-C18 (250 nm×4,6 mm, 5 μm) ble brukt som den kromatografiske kolonnen; metanol ble brukt som mobil fase A, 0,1% maursyreløsning ble brukt som mobil fase B, gradienteluering (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 min,

29,5 %A, 54-55 min, 29,5 % → 26,5 %A; 55-60min, 26,5 %A); strømningshastighet 1.0 mL·min-1; kolonnetemperatur 30 grader; diode array detektor, deteksjonsbølgelengde 330 nm; injeksjonsvolum 10μL; teoretisk platenummer beregnet basert på echinacoside-toppen bør ikke være mindre enn 3000[9].

2.1.2 Tilberedning av referanseløsning

Ta en passende mengde echinacosid, vei nøyaktig 9,65 mg, legg den i en 25 ml målekolbe, tilsett 50 %

metanol for å løse opp og fortynne til merket som referansestamløsning. Pipetter nøyaktig 1 mL echinacosid-stamløsning i en 25 mL målekolbe, tilsett 50 % metanol for å fortynne til merket, rist godt og klargjør en referanseløsning som inneholder 14,17 ug per 1 mL [9].

2.1.3 Klargjøring av testløsning

Ta ca. 0,5 g tørt pastapulver, mal det til pulver, vei det nøyaktig, legg det i en konisk flaske med brun propp, tilsett 50 mL 50 % metanol nøyaktig, propp godt til, rist godt, vei den, ultralydbehandle den i 40 minutter (effekt 250 W, frekvens 45 kHz), la den avkjøles, vei den igjen, tilsett 50 % metanol for å ta igjen vekten, rist den godt, la den stå, ta supernatanten, filtrer det, og ta filtratet.

2.1.4 Klargjøring av negativ prøveløsning

Ta ca. 0,5 g av det tørre pastapulveret med formelen uten vin Cistanche medisinske materialer, og klargjør den negative prøveløsningen i henhold til metoden under "2.1.3".

2.1.5 Spesifisitetstest

Pipetter testløsningen, referanseløsningen og den negative prøveløsningen nøyaktig, og mål i henhold til de kromatografiske forholdene under "2.1.1". Ta opp kromatogrammet. Resultatene er vist i figur 1. Det er ingen interferens med den negative prøven. Resultatene viser at metoden har god spesifisitet.

Fig. 1 Spesifikt kromatogram av Wenyang Tongbian-granulat

2.1.6 Undersøkelse av lineær sammenheng

Ta en passende mengde echinacosid, vei den nøyaktig til 10,11 mg, legg den i en 25 mL målekolbe, tilsett 50 % metanol for å fortynne den i en rekke konsentrasjoner av referanseløsning, og injiser den i henhold til de kromatografiske forholdene under "2.1 .1" for å bestemme topparealverdien til echinacoside. Tegn en standardkurve, med injeksjonsmengden av echinacosidereferanse som den horisontale aksen (ug, X) og topparealets integralverdi som den vertikale aksen (Y), og utfør lineær regresjon.

Regresjonsligningen er Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Resultatene viser at topparealets integralverdi av echinacoside-injeksjonsmengde er i et godt lineært forhold mellom 1,4850 og 371,2392 ug.

2.1.7 Presisjonstest

Aspirer nøyaktig 10 μL av referanseløsningen (massekonsentrasjon på 37,12 ug·mL－ 1) under "2.1.6", injiser 6 ganger, registrer topparealverdien til henholdsvis echinacoside og beregn RSD-verdien til 1,1 %, noe som indikerer at instrumentet har god presisjon.

2.1.8 Repeterbarhetstest

Ta den samme tørre pastaen, mal den til pulver, vei nøyaktig 6 porsjoner, som hver er omtrent 0,5 g, og legg dem i en konisk flaske med brun propp. Trekk ut etter metoden under "2.1.3", bestem innholdet, og beregn. Resultatene viser at gjennomsnittlig innhold av echinacosid i prøven er 1,46 mg·g–1, og RSD-verdien er 2,7 %, noe som indikerer at repeterbarheten til denne metoden er god.

2.1.9 Stabilitetstest

Ta den samme prøveløsningen, trekk nøyaktig 10 μL, og injiser den innen henholdsvis 0, 2, 4, 8, 12, 18 og 24 timer. RSD-verdien for toppareal er 0,71 %, noe som indikerer at prøveløsningen har god stabilitet innen 24 timer.

2.1.10 Prøvegjenopprettingstest

Vei nøyaktig 6 porsjoner av samme batch med testprøver, 0,24 g hver, og plasser dem i en konisk flaske med brun propp. I henhold til masseforholdet 1:1 av komponentene i testprøven, tilsett 0,9 mL av echinacoside-referansestoffet nøyaktig (massekonsentrasjonen er 371,24 ug·mL－ 1) under "2.1.6", klargjør testløsningen i henhold til metoden under "2.1.3", bestem det kromatografiske topparealet til echinacoside og beregn innholdet. Resultatene viser at den gjennomsnittlige utvinningsgraden for echinacoside er 101,09 %, og RSD-verdien er 1,6 %.

2.2 Forsøksplan og evalueringsindikatorer

Mengden tilsatt vann (A), ekstraksjonstid (B) og antall ekstraksjoner (D) ble valgt som faktorene som skulle undersøkes. Tre faktornivåer ble satt i henhold til resultatene fra forrige enkeltfaktorundersøkelse, se tabell 1. Den ortogonale testtabellen L9 (34) ble brukt i forsøket, se tabell 2. Testen brukte pastautbytte og innhold av echinakosid som evalueringsindikatorer for å undersøke den optimale vannutvinningsprosessen.

Fane 1 Faktor og nivå på ortogonaltesten

2.2.1 Ortogonal test

I henhold til reseptforholdet, vei 18 porsjoner av hver medisinsk smak, 55 g hver, og utfør vannavkoksekstraksjon i henhold til det ortogonale designskjemaet i Tabell 2. Hver gruppe har 2 parallelle porsjoner. Avkoket filtreres gjennom en 80-nettingssikt, filtratet kombineres, avkjøles, avkoksvolumet måles, 50 ml pipetteres nøyaktig inn i en fordampningsskål som har blitt veid konstant, fordampet til tørrhet , og tørket under redusert trykk ved 60 grader for å oppnå den ortogonale eksperimentelle prøven tørr pasta. Beregn pastautbyttet (pastautbytte=(tørrpastavekt × medisinsk væskevolum) / (50 × avkoksstykkevekt) × 100 %). I henhold til de kromatografiske forholdene under "2.1.1" og metoden under "2.1.3", ble ekstraksjonsmengden av echinacosid i de 9 gruppene av ortogonale testekstrakter bestemt henholdsvis. Echinacoside-ekstraksjonsmengde=tørr pastavekt × echinacoside-innhold / vin Cistanche avkok stykkevekt. Omfattende poengsum=echinacoside-innhold ÷ maksimalt innhold × 0,5 × 100 % + pastautbytte ÷ maksimalt pastautbytte × 0,5 × 100 % [10]. Resultatene er vist i tabell 2.

Som vist i tabell 3, og tar pastautbyttet og echinakosidinnholdet omfattende poengsum som evalueringsindikatorer, viser området R-verdien i tabellen at de primære og sekundære effektene av hver faktor er D > B > A; variansanalyseresultatene viser at D-faktoren (avkokstider) er statistisk signifikant (P < 0.05), og D3-nivået er valgt; A-faktoren (vanntilsetning) og B-faktoren (avkokstid) er ikke statistisk signifikante (P > 0,05). Tatt i betraktning at vannabsorpsjonshastigheten til de medisinske materialene i dette preparatet er relativt høy (155%), og kombinert med faktorer som faktiske produksjonsbehov, velges de optimale ekstraksjonsforholdene som A2B1D3, det vil si å tilsette 10 ganger vann, avkoke 3 ganger, hver gang i 1 time.