Beskyttende effekt av Panduratin A på cisplatin-indusert apoptose av humane nyreproksimale tubulære celler og akutt nyreskade hos mus
Mar 18, 2022
Bakgrunn:Cisplatin er effektiv kjemoterapi, men dens viktigste bivirkning er akuttnyreskade, begrenser bruken. Pandurate A, en bioaktiv forbindelse ekstrahert fra Boesenbergia rotunda, viser flere biologiske aktiviteter som antioksidative effekter. Denne studien undersøkte den nefroprotektive effekten av pandurat A på cisplatin-indusertnyreskade.Metoder: Vi undersøkte effekten av pandurat A på toksisiteten til cisplatin i både mus og humane nyrecellekulturer ved bruk av RPTEC/TERT1-celler. Resultater: Resultatene viste at pandurat A forbedrer cisplatin-indusert nyretoksisitet i både mus og RPTEC/TERT1-celler ved å redusere apoptose. Mus behandlet med en enkelt intraperitoneal (ip) injeksjon av cisplatin (20 mg/kg kroppsvekt (BW)) vistenyretubulusskade og svekketnyrefunksjonsom vist ved histologisk undersøkelse og økt serumkreatinin. Samtidig administrering av pandurat A (50 mg/kg kroppsvekt) ble oralt forbedretnyrefunksjonog forbedretnyretubulusskade av cisplatin ved å hemme aktivering av ekstracellulær signalregulert kinase (ERK)1/2 og caspase 3. I humane nyreproksimale tubulære celler, cisplatinindusert celleapoptose ved å aktivere pro-apoptotiske proteiner (ERK1/2 og caspase 3), og redusere det anti-apoptotiske proteinet (Bcl-2). Disse effektene ble betydelig forbedret ved samtidig behandling med pandurat A. Interessant nok endret ikke pandurat A den intracellulære akkumuleringen av cisplatin. Det endret ikke anti-krefteffekten til cisplatin i verken humane tykktarmsceller eller ikke-småcellet lungekreftcellelinjer. Konklusjoner: Denne studien fremhever at pandurat A har en potensiell beskyttende effekt på cisplatins nefrotoksisitet.
Nøkkelord:kjemoterapi; akutt nyreskade; panduratin A; human renal proksimal tubuli; anti-apoptose; nyre; nyre
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE/NYRE DIALYSEN
INTRODUKSJON
Nefrotoksisitet indusert av legemidler er et stort problem i klinisk setting fordi bruk av nefrotoksiske legemidler ofte er uunngåelig. Nefrotoksisitet kan defineres ved nyreskader inkludert glomerulær skade og tubulær skade som fører til nedsatt nyrefunksjon.1) Vanlige legemidler assosiert mednyreskadeer betennelsesdempende, antibiotika og kjemoterapeutiske midler, som cisplatin.2–4) Cisplatin er et bredspektret, høypotens kjemoterapeutisk legemiddel.5) Omtrent én av tre pasienter som får cisplatinbehandling lider imidlertid av nefrotoksisitet6,7) og elektrolyttubalanse.8,9) Cisplatin-indusert nefrotoksisitet er karakterisert ved proksimal tubuliskade, vaskulær skade og inflammasjon.4) Akkumulering av cisplatin i nyreceller induserer flere veier som fremmer celledød. Reaktive oksygenarter (ROS) har blitt identifisert som en nøkkelmediator i cisplatin nefrotoksisitet.10,11) I tillegg induserer ROS nefrotoksisitet via aktivering av mitogenaktiverte proteinkinaser (MAPK).10,12,13) Flere studier har rapportert at cisplatin i seg selv kan direkte stimulere ekstracellulær signalregulert kinase (ERK)1/2 (et medlem av MAPK) både in vitro og in vivo. 14,15)
Visse fytokjemikalier forbedrer cisplatin-indusert nefrotoksisitet ved å hemme ROS-akkumulering og apoptose.16–18) Selv om nefrobeskyttende effekter av disse fytokjemikaliene er rapportert i prekliniske studier, er det fortsatt ingen godkjente legemidler fra fytokjemikalier for cisplatin-oversikt (se detaljer i cisplatinoversikt1). ) Gjeldende klinisk praksis gir kun støttende behandlinger for å gjenopprette nyrefunksjonen.20) Derfor er det fortsatt viktig å søke etter effektive midler for å forebygge eller behandle cisplatin-indusert nefrotoksisitet. Pandurat A er et interessant fytokjemikalie. Det er en cyclohexanol chalcone isolert fra Boesenbergia rotunda, en plante som brukes i tradisjonell medisin og mat.21) Panduratin A har vist seg å forebygge eller behandle oksidativt stress, betennelse og metabolsk sykdom.22,23) Skade på nyreproksimale tubuli forårsaket av cisplatin medieres, i det minste delvis, via økt oksidativt stress og inflammasjon.11) Derfor undersøkte vi effekten av pandurat A på toksisiteten til cisplatin i både dyr og cellekulturer ved bruk av RPTEC/TERT1-celler. Vi testet også om samtidig behandling med pandurat A påvirker cisplatins antikreftaktivitet i humane kreftcellelinjer.
MATERIALER OG METODER
Kjemikalier Thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT), 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA), cisplatin, and compound C (AMP-activated protein kinase (AMPK) inhibitor) were purchased from Sigma-Aldrich (MO, U.S.A.). 3 H-1-Methyl-4-phenylpyridinium (3 H-MPP+) was purchased from PerkinElmer, Inc. (Bangkok, Thailand). Annexin V- fluorescein isothiocyanate (FITC) apoptosis detection kit was purchased from BD Biosciences (CA, U.S.A.). Primary antibodies for p-ERK1/2 (Cat. No. 9102S), ERK1/2 (Cat. No. 9101S), Bcl-2 (Cat. No. 2872T), caspase-3 (Cat. No. 9662S), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) (Cat. No. 2118S), p-AMPKα (Cat. No.2531S), AMPKα (Cat. No. 5832S), Bax (Cat. No. 5023) and β-actin (Cat. No. 4970T) antibodies were obtained from Cell Signaling (MA, U.S.A.) and anti-neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) antibody (Cat. No. STCSC-515876) was purchased from Santa Cruz Biotechnology (CA, U.S.A.). Pandurate A >98 prosent renhet bestemt ved HPLC ble isolert fra Boesenbergia rotunda som tidligere beskrevet av vår gruppe.24) Jordstenglene til Boesenbergia rotunda ble samlet fra Kanchanaburi, Thailand. Planten ble identifisert av Tuanta Sematong. Bongprøven (nr. BKF 68909) er deponert ved Forest Herbarium, Royal Forestry Department, Bangkok.
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE-/NYREFUNKSJONEN
DyrC57BL/6 hannmus (8-uker gamle) ble kjøpt fra Nomura Siam International Co., Ltd. (Bangkok, Thailand). Animal Care and Use Protocol No. MUSC61-063-464 er godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee, MUSC–IACUC. Musene fikk fritt tilgang til mat og vann. Etter en uke med akklimatisering ble mus delt tilfeldig og administrert behandlinger som følger: normal saltvann ved en enkelt intraperitoneal (ip) injeksjon på dag 4 (kontrollgruppe); pandurat A (50 mg/kg kroppsvekt (BW)) ved oral sonde i 7 dager (pandurat A-gruppe); cisplatin (20 mg/kg kroppsvekt) ved en enkelt ip-injeksjon på dag 4 (cisplatingruppe); pandurat A (50 mg/kg BW/d) ved oral sonde i 7 dager og cisplatin (20 mg/kg BW) ved en enkelt ip-injeksjon på dag 4 (sambehandlingsgruppe). På dag 7 ble mus dypt bedøvet med tiopentalnatrium. Blod ble tappet og sentrifugert i 10 minutter ved 3000 pm. De oppsamlede supernatantene ble holdt ved -80 grader tilnyrefunksjonble målt.Nyrerble samlet inn for måling av proteinuttrykk og histopatologiske studier.
Bestemmelse av nyrefunksjon og histologisk undersøkelseNyrefunksjonen ble bestemt ved å måle serumkreatinin ved bruk av Stanbio Creatinine Liquicolor (NY, USA) og blodkjemianalysator, Licenza (Roma, Italia). For å undersøke cisplatin-indusert renal tubulær skade, musnyrerble fikset i 4 prosent paraformaldehyd. Denyreskiver ble farget med hematoksylin og eosin (H&E) fotografert med et lysmikroskop. Prosentandelen av tubulær skade ble brukt til å evaluere den renale tubulære skaden: 0=ingen tubulær skade 1=<10%; 2="10–25%;" 3="26–50%;" 4="51–75%;" 5="">75 prosent. Objektglass ble målt blindt av en patolog. Gjennomsnittlig poengsum for hver gruppe dyr ble beregnet ved å telle 10 forskjellige felt av et lysbilde.
CellelinjerRPTEC/TERT1-celler, tykktarmskreftceller (HCT116) og ikke-småcellede lungekreftceller (A549) ble kjøpt fra American Type Culture Collection (VA, USA). Kort fortalt ble RPTEC/TERT1-celler dyrket i komplett Dulbeccos modifiserte Eagles medium/F-12-medium (DMEM/F12) som tidligere beskrevet.25) HCT116- og A549-celler ble dyrket i henholdsvis DMEM/F12- og RPMI1640-medium supplert med penicillin-streptomycin-antibiotika og 10 prosent føtalt bovint serum (FBS). Celler ble dyrket ved 37 grader i en fuktet atmosfære på 5 prosent CO2 og 95 prosent O2.
Cellelevedyktighetsanalyse og celleapoptoseanalyseCellelevedyktighet ble bestemt ved å eksponere RPTEC/TERT1-cellene for 0.5mg/mL MTT-reagens i 1 time ved 37 grader C. Reagensene ble fjernet, det dannede formazansaltet ble oppløst i dimetylsulfoksid (DMSO) og detektert av EnVision mikroplateleser ved 570nm absorbans. Cellelevedyktighet ble rapportert som en prosentandel av kontroll. Annexin V og propidiumjodid (PI-fargeanalyse ble brukt for å bestemme celleapoptose. Kort fortalt ble RPTEC/TERT1-celler løsnet med 0,25 prosent trypsin-etylendiamintetraeddiksyre (EDTA). Cellesuspensjonene ble inkubert med Annexin V-FITC og PI i mørke kl. 4 grader i 15 minutter etterfulgt av to ganger vask med bindingsbuffer Apoptotiske celler ble talt med flowcytometer og uttrykt som en prosent av totale celler.
Vurdering av intracellulær ROS-akkumuleringROS-nivåer ble bestemt ved DCFH-DA-analyse. RPTEC/TERT1-celler ble inkubert med 10 uM DCFH-DA og inkubert i 30 minutter ved 37 grader. Deretter ble DCFH-DA fargestoff fjernet og cellene ble vasket med fosfatbufret saltvann (PBS). Intracellulært ROS-nivå ble målt ved bølgelengder på 485 og 530nm for henholdsvis eksitasjon og emisjon. Intracellulær ROS-akkumulering rapporteres som en prosentandel av fluorescerende intensitet i forhold til kontrollceller.
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE/NYRESYKDOM
PlatinaakkumuleringsanalyseAkkumulert platina ble målt i både fordøyde RPTEC/TERT1-celler og musnyrerav UNICAM 989 QZ AA spektrometer (Geleen, Nederland). Ti mikroliter 1 prosent Triton X-100 og 400uL 1 prosent salpetersyre ble tilsatt til hver 100μL prøve. Prøver ble deretter inkubert i minst 1 time. Før platinadeteksjon ble hver prøve fortynnet 10:1 med 1 prosent salpetersyre. Platinakonsentrasjonen ble beregnet ved å bruke lineær regresjon av en platinastandardkurve fremstilt ved bruk av 2,5 mg/ml cisplatin fortynnet i 1 prosent salpetersyre. Platina ble beregnet som ng/cellenummer eller ng/nyrevekt.
3H-MMP* OpptaksanalyseOpptak 3H-MPP pluss i RPTEC/TERT1-celler ble bestemt ved å bruke vår forrige metode.25) Kort fortalt ble cellene vasket med varm transportbuffer og videre inkubert i 20 minutter. Cellemonolagene ble inkubert med H-MPP pluss (10 nM) etterfulgt av vasking med iskald transportbuffer. Prøvene ble samlet og radioaktiv aktivitet av H-MPP pluss ble målt ved bruk av en væskescintillasjonsteller.
Western blotting-analyseProteinuttrykk ble behandlet i henhold til vår tidligere studie.26) Ekstraherte proteiner fra musnyreog RPTEC/TERT1-celler ble sentrifugert ved 12000 rpm i 20 minutter ved 4 grader. Like mengder proteiner isolert fra celler og vev ble denaturert og separert med 10-12 prosent natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE). Prøver ble overført til nitrocellulosemembraner etterfulgt av 1 time ikke-spesifikk proteinblokkering ved bruk av fettfri tørrmelk (5 prosent). Membranene ble inkubert med primært antistoff i 24 timer og ble deretter inkubert med sekundært antistoff i 1 time. Intensiteten av proteinekspresjon ble oppdaget ved bruk av kjemiluminescerende HRP-substrat og kvantifisert med ImageJ-programvare.
Statistisk analyseData er uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD). Data ble analysert med enveis ANOVA ved bruk av Tukeys posthoc-tester (GraphPad Prism 8.0). En signifikans vurderes når p-verdien er mindre enn 0.05.
RESULTATER Panduratin A forbedrer cisplatin-indusert akutt nyreSkade Vi undersøkte effekten av pandurat A pånyreskadeforårsaket av cisplatin hos mus. Vi observerte først den generelle toksisiteten ved å måle kroppsvektsendring hos mus etter behandling med normalt saltvann, pandurat A (50 mg/kg kroppsvekt), cisplatin (20 mg/kg kroppsvekt) og både cisplatin (20 mg/kg kroppsvekt) og pandurat A (50 mg/kg kroppsvekt). Det ble funnet en betydelig redusert kroppsvekt hos cisplatin-behandlede mus. Kroppsvektapet ble dempet ved samtidig behandling med pandurat A (fig. 1A). Sammenlignet med kontrollen,nyrefunksjonsom ble målt ved serumkreatininnivå viste at mus-behandlet pandurat A alene ikke endret serumkreatininnivå; mens de cisplatin-behandlede musene hadde betydelig økte serumkreatininnivåer, noe som tyder på nedsatt nyrefunksjon. Serumkreatininnivået ved samtidig administrering av pandurat A ble signifikant redusert sammenlignet med cisplatinbehandlede mus (fig. 1B). I tillegg kommer akkumulering av platina inyrevev var ikke signifikant forskjellig i mus behandlet med cisplatin alene sammenlignet med mus behandlet med cisplatin og pandurat A (fig. 1C). Disse dataene indikerer at pandurat A ikke påvirket cisplatininnholdet i nyrevevet. Denyreroppnådd fra mus behandlet med bærer eller pandurat A alene viste ingen markante patologiske endringer. Imidlertid viste cisplatin-behandlede mus mer tubulær skade sammenlignet med vehikelbehandlede mus som vist ved økningen i degenerasjon og deskvamering, dannelse av luminale avstøpninger, mononukleær celleinfiltrasjon, karyomegali, inter-tubulær blødning og dilatasjon. Disse patologiske endringene ble signifikant svekket ved samtidig administrering av pandurat A (fig. 2A, tabell 1). Ekspresjonsnivåene av NGAL (en nefrotoksisitetsbiomarkør), og ERK1/2 og spaltet caspase 3 (pro-apoptotiske proteiner) ble bestemt. Vår studie viste at mus behandlet med cisplatin signifikant økte ekspresjonen av NGAL, p-ERK1/2 og spaltet caspase 3 sammenlignet med vehikelbehandlede mus. Samtidig behandling med pandurat A reduserte disse proteinene indusert ved cisplatinbehandling betydelig (fig. 2B).
Pandurate A forhindrer cisplatinindusert cytotoksisitet i humane nyreproksimale tubulære celler ved å hemme apoptotiske signalveierCisplatin (50 µM) betyr en betydelig redusert levedyktighet for RPTEC/TERT1-celler etter 72 timers inkubering. Interessant nok økte sambehandling med pandurat A (1 og 5 µM) cellelevedyktigheten betydelig (fig.
3A). Panduratin A sin beskyttende effekt mot cytotoksisiteten til cisplatin ble bekreftet ved måling av celleapoptose. Som forventet økte eksponering av cellene for 50 µM cisplatin i 48 timer betydelig apoptose av RPTEC/TERT1-celler. Denne effekten ble dempet av pandurat A (fig. 3B). Vi undersøkte om effekten av pandurat A på cisplatins toksisitet krevde aktivering av AMPK. Som vist i fig. 3C ble proteinekspresjon av p-AMPK, en aktiv form av AMPK, økt av pandurat A, mens det ble redusert av cisplatin. I tillegg ble den beskyttende effekten av pandurat A under AMPK-hemming bestemt. Interessant nok svekket ikke inkubering av cellene med 10 uM forbindelse C, en hemmer av AMPK, den beskyttende effekten av pandurat A på cellelevedyktighet (fig. 3D). Disse resultatene indikerer at den beskyttende effekten av pandurat A kan formidles av AMPK-uavhengige mekanismer. Vi undersøkte deretter effekten av pandurat A på visse proteiner involvert i celleapoptose indusert av cisplatin. Som vist i figur 4, økte cisplatin signifikant pro-apoptotiske proteiner p-ERK1/2 og spaltet caspase 3. Cisplatin reduserte ekspresjonen av anti-apoptotisk protein Bcl-2. Sambehandling med pandurat A reverserte uttrykket av disse proteinene. Siden ROS er en viktig faktor involvert i nyrecelleapoptose indusert av cisplatin,11,27) bestemte vi effekten av panduratin A på ROS-akkumulering på grunn av cisplatin. Cisplatin økte intracellulære nivåer av ROS betydelig. Interessant nok reduserte panduratin A betydelig cisplatin-indusert ROS-akkumulering.
Panduratin A påvirker ikke cellulær akkumulering av cisplatin OCT2medierer cisplatintransport inn i de humane nyreproksimale tubulære cellene.289 For å undersøke muligheten for at panduratin A reduserer cisplatinakkumulering, målte vi transportfunksjonen til OCT2. Resultatene viste at inkubering av celler med 5uM panduratin A i 10 minutter og 24 timer ikke hadde noen effekt på celleakkumuleringen av H-1-metyl-4-phenylpyridinium (H-MPP pluss), et substrat for OCT2. Deretter ble effekten av panduratin A på celleakkumulering av cisplatin bekreftet. Panduratin A hadde ingen signifikant effekt på platinaakkumuleringen i de humane nyrecellene (fig. 5).
Den beskyttende effekten av Panduratin A påvirker ikke anti-kreftaktiviteten til CisplatinPanduratin A's effekt på cisplatins toksisitet i kreftcellelinjer ble bestemt. Viabiliteten til HCT116- og A549-celler, som er henholdsvis tykktarms- og lungekreftcellelinjer, ble betydelig redusert 72 timer etter behandling med cisplatin (50μuM). Samtidig behandling med panduratin A（5μM） svekket ikke cytotoksisiteten til cisplatin. Interessant nok reduserte panduratin A i seg selv også
DISKUSJON
Den nåværende studien avslører at panduratin A reduserer cis-platin nefrotoksisitet uten å svekke cisplatins antikreftaktivitet i tykktarm og ikke-småcellet lungekreftcellelinjer. Vi viste at samtidig behandling med panduratin A demper akuttnyreskadehos mus forårsaket av cisplatin. Selv om denne studien viser den beskyttende effekten på cisplatin-indusertnyreskade,det primære målet for panduratin A er ikke identifisert. Panduratin A kan aktivere AMPK i nyreproksimale tubulære celler (fig. 3) og andre celletyper.30-2) Det virker usannsynlig at den beskyttende effekten av panduratin A krever aktivering av AMPK, da bevis viste at hemming av AMPK ved bruk av kjemiske hemmere endret ikke den beskyttende effekten av Pandu-klassifisering A. Panduratin A forbedret nyrefunksjonen som vist ved redusert serumkreatinin. Cisplatin-svekket nyrefunksjon er korrelert med nyretubuliskader som degenerasjon, luminal gipsdannelse, blødning og dilatasjon. Resultatene av nyretubuliskade korrelerte godt med våre data som viser induksjonen av NGAL-ekspresjon inyrevev fra mus behandlet med cisplatin. I tillegg støttes disse bevisene av den forrige studien som viser at NGAL er markert uttrykt i nyretubuli etter akuttnyreskadeindusert av cisplatin.3) Interessant nok svekket samtidig behandling av musene med panduratin A cisplatin-indusert nyretubuliskade. Den histologiske analysen viste at cisplatin økte mononukleær celleinfiltrasjon og denne effekten ble opphevet av panduratin A. Disse resultatene antyder at panduratin A, som tidligere har vist en anti-inflammasjon,24.3435) kan dempe den inflammatoriske effekten av cisplatin i nyrevev. MAPK-aktivering kunne indusere celledød.2415) Resultatene våre viste at cisplatin stimulerte aktivering av ERK1/2 og caspase 3. Uttrykk av disse proteinene ble svekket av panduratin A.
Flere veier som bidrar til cisplatin-indusert nefrotoksisitet (inkludert apoptose, oksidativt stress og inflammasjon) er rapportert.4Vi brukte RPTEC/TERT1-cellelinjen for å identifisere mekanismer for panduratin A-forbedrende toksisitet forårsaket av cisplatin i humane nyreproksimale tubulære celler. RPTEC/TERT1-celler har blitt foreslått som en nyrecellemodell for xenobiotika-induserte toksisiteter.36Panduratin A viser en beskyttende effekt med hensyn til cisplatin-cytotoksisitet som vist ved en reduksjon i RPTEC/TERT1-celleapoptose. Mekanismene for cisplatins toksisitet i renale proksimale tubulære celler er komplekse. ERK1/2- og caspase 3-aktivering og Bcl{10}}-deplesjon har vært implisert i nyrecelleapoptose på grunn av cisplatin.373) I samsvar med tidligere studier viste denne studien at cisplatin øker ekspresjonen av p-ERK1/2 og spaltet caspase 3 og reduserer Bcl-2-uttrykket. Resultatene våre indikerer at panduratin A undertrykker cisplatin-induserte apoptotiske signalproteiner, p-ERK1/2 og spaltet caspase 3, og opprettholder anti-apoptotisk protein. Bcl-2. I tillegg til aktiveringen av ERK1/2 og caspase 3, er økt intracellulær ROS-akkumulering en nøkkelfaktor i nyrecelleapoptose på grunn av cisplatin.139En tidligere studie rapporterte at panduratin A beskytter mot oksidativ skade i hepatocytter ved å redusere intracellulær ROS-dannelse forårsaket av reaktivt intermediates.4Reduksjonen i ROS-akkumulering etter behandling med panduratin A kan være mediert av enten hemming av ROS-produksjon eller økning i ROS-rensende reaksjon. Vi rapporterte at panduratin A økte glutationnivået, et ROS-rensende molekyl, som kan redusere ROS-akkumulering i nyrevev (se tilleggsmaterialer). Vi utelukker imidlertid ikke at andre mekanismer er involvert i ROS-reduksjon. Resultatene våre viste at panduratin A reduserer intracellulær ROS-akkumulering, noe som bidrar til panduratin A sin beskyttende effekt. Det intracellulære nivået av cisplatin er den primære faktoren som påvirker alvorlighetsgraden av cisplatinindusert toksisitet. Nyretransportører som OCT2, kobbertransportører og multimedikament- og toksinekstruderingstransportører-1 (MATE1) er rapportert å bidra til cisplatintransport.4) Transport av cisplatin inn i de proksimale tubulære cellene i nyrene er imidlertid primært mediert av OCT2. Hemming av OCT har vist seg å svekke cisplatin-indusert nyretoksisitet både i dyrkede nyreceller og dyr.发9,42）Det virker imidlertid sannsynlig at panduratin A ikke påvirker OCT2-transportfunksjon eller akkumulering av cisplatin, noe som tyder på panduratin A sin beskyttende effekt mot Cisplatins toksisitet medieres ikke ved å redusere transport eller akkumulering av cisplatin.
CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE-/NYRESMERTER
Panduratin A viser renobeskyttende effekter via hemming av nyrecelleapoptose. Hvis panduratin A også hemmet kreftcelleapoptose, ville det redusere kjemoterapiens effekt. Vi testet derfor om panduratin A reduserer cisplatins antikreftaktivitet. Det er vesentlig at samtidig behandling med Pandu-rating A ikke endrer anti-kreftaktiviteten til cisplatin i verken tykktarms- eller ikke-små lungecellekreftceller. Dessuten er panduratin A i seg selv giftig for begge kreftcellelinjene. Resultatene indikerer at effekten av panduratin A er selektiv, og påvirker normale nyreceller og kreftceller forskjellig. Selv om pan-duration A kan være et godt middel for å forhindre cisplatin-indusert nefrotoksisitet, bør informasjonen om de farmakologiske effektene av panduratin A under klinisk relevant i xenograft-modellen undersøkes i fremtiden.
KONKLUSJON
Vår nåværende studie viste at panduratin A gir en markert beskyttende effekt på cisplatins nefrotoksisitet ved å redusere oksidativt stress og hemme ERK1/2 og caspase 3 aktiveringer. Den beskyttende effekten av panduratin A endret ikke anti-kreftaktiviteten til cisplatin i kreftceller. Selv om blokkering av noen skadelige hendelser bare kan ha delvise renobeskyttende effekter, kan panduratin A være et godt kandidatmiddel for å lindre cisplatins nefrotoksisitet fordi det reduserer toksisiteten til cisplatin via flere mekanismer.
