Forskning på effekten av Cistanche On Free Radicals

Hvis du vil ha mer information:Ali.ma@wecistanche.com

Andre Skyskog En Gammel Zhang Hongjing

For tiden antas det at nedgangen i maskinens immunfunksjon er relatert til aldring. Basert på studien somCistanchekan forbedre musenes humorale og cellulære immunfunksjoner og kjempe mot aldringsmodellen forårsaket av d-galaktose, studerte vi videre effekten av stoffet på mus. Innånding av ozon<. 3)="" induces="" strong="" antagonistic="" effects="" of="" aging="" and="" aging="" caused="" by="" strong="">frie radikaleri kroppen. Chemiluminescensuttrykkshastigheten til mus i legemiddelgruppen økte, SOD Økt vitalitet "Innholdet av lipidperoksider i plasma, knelende og lårvev og MAOB vitalitet av korridorvev redusert; det var en dose-effekt sammenheng mellom ulike doseringsgrupper. Den anti-aldring effekten av mus mot subakutt aldring er i samsvar med studiet avCistanches forbedring av immunfunksjonen hos mus.Cistanchekan forbedre immunforsvaret, forbedre kroppens anti-stress evne, og det er hensiktsmessig å motta eller indirekte eliminere skade påfrie radikalerkroppen. , Hemm vitaliteten til 1WMAO-B. For å oppnå effekten av å forsinke aldring. Dette eksperimentet gir det eksperimentelle grunnlaget for anvendelsen avCistanchei anti-aldring og behandling av visse senile sykdommer.

Klikk for å cistanche fordeler og bivirkninger for frie radikaler

1 Materiale og metoder

1.1 Materiale

1.1.1 Legemiddel og reagenser:Cistanchedeserticola Y. C. Ma ble avkokt i vann 3 ganger, avkokene ble kombinert, konsentrert til et passende volum, og en viss mengde etanol ble tilsatt. Etter å ha stått i 24 timer ble det filtrert. Filtratet ble fordampet til ingen alkohol. Forbered med dampende vann før du bruker 0,25% ~ 0,5% konsentrasjon. ml inneholder rå stoffer om lg). Luminol (luminol), ®National E Merck selskapets produkter Huang Howling Oksidasjon 88 (HO), Hypochromatic Howling (HX), standard tetra ethoxy propan, alle er Sigma Selskapets produkt, salt, benzalkonium, Changzhou Guangming Biochemical Research Institute; cyclohexane, et produkt fra Shanghai Reagent No. 1; Thiobarbituric acid, et produkt fra Shanghai Reagent No. 2, LuzhanSuperoksidOpphev demping, Shanghai Chinese Academy of Sciences Produkter fra Institutt for biokjemiske produkter.

Cistanche

1.1. 2 Instrument Beckman LS-98OO33 væske scintillation teller bare, Shimadzu RF-540 fluorescens spektrofotometer, 752 ultrafiolette gitter spektrofotometer-G1-20A høyhastighets nedkjølt sentrifuge, CPS-1A ultralyd pulverisator.

1.1.3 Dyr ICR mus, 2 måneder gammel, veier 20±2g, levert av Jiangsu Experimental Animal Center.

1.2 metode

Musene ble delt inn i kontroll (ikke gå inn i Q-miljøet), modell og medisingruppe, hver med 10 mus, raskt vann som spiser uten begrensning. Legemiddelgruppen ble delt inn i to doseringsgrupper, volum 2, utgave 7, 1994, kinesisk journal over kinesiske Materia MedicaCistancheekstrakt100 og 200 mg/kg (tilsvarende råmedisiner 20 og 4Qg/kg) ble matet henholdsvis. Kontrollgruppen og modellgruppen fikk et likt volum av normal saltvann hver dag. Administrasjonsgruppen og modellgruppen fikk O, miljø (0,9 X 10-^Oaft grad), kontinuerlig 2. Dag. Testen av hver fingerstamme ble utført på den 21.

1. 2.1 Utholdenhetstest Sett musene i hver av de ovennevnte gruppene i en vanndybde på 40 cm og 12±l. I beholderen til vann®L, start timing til den synker til bunnen og ikke beveger seg, som er svømmetiden for musene.

   
   

1.2.2 Varmsikker test Musen er satt til 15 først. Svøm i vannet i 2 minutter, og skriv deretter inn en 15P fryser for å observere hele frysetiden.

1.2.3 Atmosfærisk hypoksitoleransetest Sett den lille glutenen i en 250 ml bredmunnflaske fylt med natriumkalk, og registrer overlevelsestiden til musene i hver gruppe etter forsegling.

1.2.4 Bestemmelse av hjernetype B monoaminoksidase (MACXB) I henhold til litteraturens muntlige metode, ta hele hjernen til mus, tilsett en passende mengde forhåndskjølt 0,2mol/l fosfatbuffer (PH7,4), homogenat og ultralyd (24kC) Crush 3 ganger, totalt to ganger, med et intervall på 30sr1000r/min, 0C i 30min, ta supernatanten på 17000r/min, 4C i 30min, kast supernatanten og ta utfellingen, og bruk en passende mengde. .2mo(/L PH7.4) Syren bufres og brukes på nytt for å lage en rå gjæringsløsning. Ta en passende mengde rågjæringsløsning, tilsett 16mmol / L benzamidin 0,3 ml, bruk ovennevnte fosfatbuffer for å utgjøre 3 ml, og bruk fosforsyretrommel 3 ml bufferløsning brukes som et tomt rør. Alle reagensrør er plassert på 37. Rist i et vannbad i 3 timer, ta det ut, tilsett 6% peroksysyre for å avslutte reaksjonen, tilsett deretter 3m [cyclohexane, rist for å blande, sentrifuger på 1000r / min for 1 Omin, og ta den opp Absorbansen av den klare løsningen måles ved 242 nm, og det tomme røret skal holdes varmt før du tilsetter kinesisk amin. Proteinet turbiditet bestemmes av Folin-fenolmetoden, med kalveserumalbumin som standardprotein. En enzymaktivitetsenhet og en enzymaktivitetsenhet er definert som 37P produserer mengden enzym med en endring i absorbansen på 0,01/3t.

1. 2. 5 Serumsuperoksidoppheve demping(SOD) aktivitetsbestemmelse (5 mu I, musserum 10M, tilsatt til luminescerende blanding (blandet med 0, 1mmol / L luminol og 0,1 mmol / l hypoksantin) I 980", hold den i en 37C inkubator i 20 minutter. Etter å ha tatt det ut, legg til Huang Guanyin oxidase for å starte reaksjonen. I Beckman LS ~ 98OO flytende blitsmedium beregnes antall luminescens på slutten av 1 min basert på graden av enkeltfotondeteksjon. Com brukes som enhet. Luminescenshemmingshastigheten beregnes med den dårligere serumgruppen som en blank. I tillegg er standardensuperoksiddismutasjonkonsentrasjon (abscissa) og luminescenshemmingshastighet (koordinat) brukes som standard proteininnholdsbestemmelse som før. 1. 2.6 Bestemmelse av Lipidperoksid (LPO) i plasma, hjerne og lever (4) Ta 50 bokser musplasma, homogenisere lever og hjerne (bruk 0,2mol/L fosfatbuffer pH7,4, i en homogenisator Laget i 10% konsentrasjon) hver 50 forfedre, tilsett l/24mol/L svovelsyre 4 ml, 1% Fosforsyre 0,5 ml, blandet og plassert i 5min, sentrert ved 1000r/mm for 10minmin, sentfurigert ved 1000r/mm i 10min, og aspirerte supernatanten. Tilsett 2 ml l/24mol/l svovelsyre og 0,3 ml 10 % kalsiumfosfat i bunnfallet, bland godt, sentrifuger ved 1000r/min, og tilsett 1 ml motstått feigt vann til bunnfallet, bland godt for å danne en suspensjon, tilsett ødelagt barbital acid reagens 1 ml, ved 95. Etter avkjøling for 14 i et oljebad, tilsett 5 ml n-butanol, bland godt * 100Eller / min sentrifugering 10mtn, ta n-butanol-fasen, og mål fluorescensintensiteten på RF-54OS spektrofotometeret (eksitasjonsbølgelengde 515mn, utslippslengde 553nm), Bruk i tillegg standard tetra ethoxy propan og relativ fluorescensintensitet som standardkurve.

   
   

2. 

2 resultater

2.1 Virkningen på utholdenhetstesten av mus skadet av frie radikaler

Svømmetiden til mus i modellgruppen var betydelig kortere enn kontrollgruppens, mens svømmetiden til administrasjonsgruppen varte lenger, og høydosegruppen var lik kontrollgruppen (tabell 1).

Tabell 1: Effekten avCistanchepå svømming utholdenhet test av gratis gravskade mus modell

2.2 Innvirkning på evnen til å holde seg varm

Mus i modellgruppen fryser raskt ved lave temperaturer, og tiden er kortere enn kontrollgruppens, mens frysetiden for todosegruppene avCistancheikke bare er lengre enn modellgruppen, men også lengre enn kontrollgruppen, noe som indikerer atCistancheikke bare har effekten av anti-fri radikal skade, men har også åpenbare effekter. Øk evnen til å holde seg varm fra kulden (tabell 2).

Tabell 2: Effekten avCistancheom Senhans evne i musmodell med fri god skade

2.3 Påvirkning på evnen til å motstå hypoksi ved atmosfærisk trykk

Etter administrering avCistanche, mus overlevde under normalt trykk og hypoksi.Cistanche's effekt på evnen til frittgående skademus modell Senhan var betydelig lengre enn modellgruppens og også høyere enn kontrollgruppens, noe som indikerer atCistanchekan øke musenes toleranse for hypoksi. Kraft (tabell 3)

Tabell 3:Cistanches mus modell av fri radikal skade

2.4 Innvirkning på vitaliteten til MAO-B

Etter innånding av O var hjernevevet MAO-B-aktiviteten til modellgruppen betydelig høyere enn for motpartsgruppen, og økningen av MAO-B-aktiviteten til administrasjonsgruppen ble betydelig hemmet.

Tabell 4: Effekten avCistanchepå aktiviteten til 1SB type monoaminoksid vintre (MAO ~ B) i den frie gravskademusmodellen

2. 5 Innvirkning på SOD vitalitet

Chemiluminescence-hemmingshastigheten for serum i modellgruppen var betydelig lavere enn for de andre gruppene, og SOD-aktiviteten ble betydelig redusert. SOD-aktiviteten til legemiddelgruppen ble betydelig økt, og høydosegruppen var høyere enn kontrollgruppen (se tabellen nedenfor 5)

Tabell 5: Modellserumsuperoksiddismutase (SOD)-aktivitet er den høyeste effekten på innholdet av lipidperoksid (ZLPO)

2.6 Lipidperoksidinnholdet (LFO) i modellgruppens plasma-, lever- og hjernevev ble betydelig økt, og LPO-innholdet ble betydelig redusert etter administrering. Den store dosen og dosegruppen hadde redusert LPO i hjernevevet til kontrollgruppens nivå (tabell 6).

Tabell 6: Effekten av kjøtt Axun på plasma-, lever- og lipidperoksidnivåer (LPO) i en musemodell med frie radikaler

3 Diskusjon

Aldring er et positivt fenomen i livets prosess. Den tradisjonelle medisinen i moderlandet har akkumulert rik erfaring og medisinkilder i anti-aldring år. De siste årene har innenlandske forskere fokusert på å finne effektive anti-aldringsmedisiner fra tradisjonell kinesisk medisin. For tiden blir den frie radikale teorien om kropps aldring i økende grad sett på. Selv omfrie radikalergenereres i kroppen under normale forhold, er vevscellene beskyttet på grunn av kontinuerlig fjerning av SOD og andre anti-oksygentoksisitetsenzymsystemer. Oa er et sterkt oksidant. , Kan starte den frie radikale reaksjonen i kroppen. Overdreven innånding av oksygen forårsaker generering avfrie radikaleri kroppen, som overskrider kroppens antitoleranse stele-system, forårsaker skade på nukleinsyrer, proteiner, aminosyrer, karbohydrater og lipidforbindelser, og dermed skader dannelsen og funksjonen til celler, og fører til aldring (3). Dette eksperimentet viser at etter å ha inhalert oksygen7, reduseres musenes fysiske styrke, evne til å holde seg varm og toleranse for hypoksi, som ligner ytelsen til den fysiologiske funksjonsnedgangen til gamle dyr. Det viser at de unge musene kan forårsake en aldringsmodell etter å ha fått d stimulering.Cistanchehar forbedret endringene i indikatorene ovenfor betydelig.

Superoksidfrie radikalereksisterer i kroppen i en kort periode og elimineres hovedsakelig av SOD. Generelt reflekteres nivået av eller ved å måle aktiviteten til SOD. Ulike antioksidanter i kroppen av naturlig aldrende mus og frie radikal-skadede mus reduseres, Aktiviteten til sod minker, og reduserer dermed evnen til å scavengefrie radikaler, noe som fører til en økning i innholdet av lipidperoksider. Aktiviteten til type B monoaminoksidase (MA0-B) i hjernen øker med alderen. MAOB er den viktigste kontrollen av den aldrende biologiske klokken i den sentrale hypothalamus Clockwork er nært knyttet til aldring. (1). Aktiviteten til MA0-B i musenes hjerner i denne eksperimentelle modellgruppen økes, og viser biokjemiske endringer i samsvar med de av aldrende dyr.