Resultater fra studien German Chronic Kidney Disease (GCKD) Support Association of Relative Telomere Length With Mortality in a Large Cohort of Patients with Moderate Chronic Kidney Disease
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nephrology. Publisert av Elsevier Inc. Dette er en åpen artikkel under CC BY-lisensen
Telomerlengde er kjent for å være omvendt assosiert med aldring og har blitt foreslått som en markør for aldringsrelaterte sykdommer. Telomerslitasje kan akselereres av oksidativt stress og betennelse, begge er ofte tilstede hos pasienter med kronisk nyresykdom. Her undersøkte vi om relativ telomerlengde er assosiert med dødelighet i en stor kohort av pasienter med kronisk nyresykdom stadium G3 og A1-3 eller G1-2 med åpenbar proteinuri (A3) ved innrullering. Relativ telomerlengde ble kvantifisert i perifert blod ved en kvantitativ PCR-metode hos 4 955 pasienter fra GCKD-studien, en pågående prospektiv observasjonskohort. Fullstendig fireårs oppfølging var tilgjengelig fra 4 926 pasienter hvor vi registrerte 354 dødsfall. Relativ telomerlengde var en sterk og uavhengig prediktor for dødelighet av alle årsaker. Hver reduksjon på 0.1 relativ telomerlengdeenhet var sterkt assosiert med en 14 prosent økt risiko for død (hazard ratio1.14 [95 prosent konfidensintervall 1.06-1.22]) i en modell justert for alder, kjønn, baseline eGFR, urinalbumin/kreatinin-forhold, diabetes mellitus, utbredt hjerte- og karsykdom, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, røyking, kroppsmasseindeks, systolisk og diastolisk blodtrykk, C-reaktivt protein og serumalbumin. Dette ble oversatt til en 75 prosent høyere risiko for de laveste sammenlignet med den høyeste kvartilen av relativ telomerlengde. Assosiasjonen var hovedsakelig drevet av 117 kardiovaskulære dødsfall (1,20 [1.05-1.35]) samt 67 dødsfall på grunn av infeksjoner (1.27 [1.07-1.50]). Derfor støtter funnene våre en sammenheng mellom kortere telomerlengde med dødelighet av alle årsaker, kardiovaskulær dødelighet og død på grunn av infeksjoner hos pasienter med moderat kronisk nyresykdom.
SØKEORD:Kronisk nyre sykdom; infeksjoner; dødelighet; relativ telomerlengde
Kronisk nyre sykdom(CKD) er en kompleks sykdom, og dens arvelighet har blitt estimert til å være 30 prosent –70 prosent 0,9–12 I de siste årene har genomomfattende assosiasjonsstudier identifisert mange genetiske loci assosiert med nyrefunksjon og CKD.13–17
Indeks enkeltnukleotidpolymorfismer ved de identifiserte lociene forklarer imidlertid bare en mindre del av arvbarheten, og ytterligere genetiske bidragsytere kan mangle. Til dags dato har bare noen få små studier undersøkt sammenhengen mellom TL og nyresykdom. Noen studier fant at kort TL korrelerer med nedsatt nyrefunksjon i den generelle befolkningen,18,19 så vel som hos hjertesviktpasienter.20 Vi har nylig beskrevet signifikant kortere relativ TL (RTL) hos pasienter med moderat alvorlig CKD som har utbredt hjerte- og karsykdom ( CVD),21 samt en assosiasjon med varighet22 og progresjon av CKD.23 Pasienter som har nådd nyresvikt behandlet med hemodialyse beskrives å ha redusert TL sammenlignet med friske kontroller,24–27 og redusert TL er omvendt assosiert med dødelighet. 28 Bare noen få undersøkelser er utført hos ikke-dialyseavhengige nyrepasienter.21–23,29,30 Så vidt vi vet er den nåværende studien den første prospektive studien som undersøker sammenhengen mellom leukocytt RTL og årsaker til dødelighet i en stor ikke-dialyseavhengig CKD-kohort.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunksjonen
RESULTATER
Grunnlinjekarakteristikker for studiepopulasjonen
RTL ble kvantifisert i perifert blod ved en kvantitativ polymerasekjedereaksjonsmetode hos 4955 pasienter fra det tyskeKronisk nyre sykdomstudere. En fullstendig {{0}}års oppfølging var tilgjengelig fra 4926 pasienter. Baseline-karakteristikker for disse 4926 pasientene i henhold til kvartiler av RTL er gitt i tabell 1. RTL varierte fra minimum {{10}}.40 til maksimalt 2.31 (tilleggsfigur S1) ), med et gjennomsnitt ± SD på 0.95 ±0.19 og en median på 0.92 (1. kvartil ¼ 0.82; 3. kvartil ¼ 1 .05). RTL var negativt korrelert med alder (r ¼ –{{30}},36, P < 0,001)="" og="" positivt="" korrelert="" med="" estimert="" glomerulær="" filtrasjonshastighet="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" og="" urinalbumin–="" kreatininforhold="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" da="" vi="" justerte="" rtl="" for="" alder="" og="" kjønn,="" observerte="" vi="" ikke="" lenger="" en="" signifikant="" korrelasjon="" med="" egfr="" og="">
Prospektiv oppfølging og dødelighet
Totalt 354 dødsfall skjedde i løpet av en median oppfølgingsperiode på 4 år (1483 dager). Dødsårsakene var CVD inkludert hjerteinfarkt, koronar hjertesykdom, plutselig hjertedød, kongestiv hjertesvikt, lungeemboli, hjerteklaffsykdom og iskemisk hjerneslag (117 pasienter, 33,1 prosent), infeksjoner (67 pasienter, 18,9 prosent), ikke-iskemisk cerebrovaskulær årsaker (9 pasienter, 2,5 prosent), perifer vaskulær sykdom (7 pasienter, 2,0 prosent), nyresvikt (8 pasienter, 2,3 prosent), ulike andre årsaker (103 pasienter, 29,1 prosent) og ukjente årsaker ( 43 pasienter, 12,1 prosent).
Kumulative forekomstplott viser at forekomsten av dødelighet av alle årsaker (Figur 1a) øker med kortere RTL, med høyest forekomst med laveste RTL-kvartil. I de kumulative insidensfunksjonskurvene for kardiovaskulær (Figur 1b) og infeksjonsdødelighet (Figur 1c), var forskjellen mellom kvartilene mindre uttalt, men rekkefølgen på kvartilene var den samme.
Figur 1|Kumulativ insidensfunksjon for (a) dødelighet av alle årsaker, (b) dødelighet av kardiovaskulær sykdom (CVD) og (c) død på grunn av infeksjoner, etter kvartiler (Q) av relativ telomerlengde (RTL). Q1 er kvartilen inkludert pasienter med kortest RTL.
Resultater av Cox-regresjonsmodeller som bruker forskjellige justeringer er gitt i tabell 2 og viste en signifikant sammenheng mellom kortere RTL og risikoen for dødelighet av alle årsaker. Evaluert kontinuerlig, var hver reduksjon på 0.1 RTL-enheter assosiert med en 16 prosent økt risiko for død i en modell justert for alder og kjønn (hazard ratio [HR], 1,16; 95 prosent konfidensintervall [CI], 1.08–1.24; P ¼ 1.7e-05). Sammenhengen forble signifikant etter en utvidet justering for eGFR, urinalbumin-kreatinin-ratio, diabetes mellitus og utbredt kardiovaskulær sykdom (modell 2: HR, 1,16; 95 prosent KI, 1,08–1,24) samt de ekstra CVD-risikofaktorene lav tetthet lipoproteinkolesterol, høydensitetslipoproteinkolesterol, røyking, kroppsmasseindeks, systolisk blodtrykk, diastolisk blodtrykk, C-reaktivt protein og serumalbumin ved baseline (modell 3: HR, 1,14; 95 prosent KI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Ikke-lineære P-spline-analyser er gitt i figur 2 og avslørte en nesten lineær assosiasjon av RTL med dødelighet av alle årsaker. Pasienter med kortest RTL (1. kvartil) hadde 75 prosent høyere risiko for dødelighet av alle årsaker sammenlignet med de i kvartilen med lengst RTL (tilleggstabell S1, fullstendig justert modell: HR, 1,75; 95 prosent KI, 1,22–2,50 P ¼ 0,0024).
Deretter analyserte vi hva som driver assosiasjonen til RTL med dødelighet av alle årsaker (tabell 2). Vi evaluerte de to hyppigste spesifikke dødsårsakene og observerte at hver reduksjon på 0.1 RTL-enheter var assosiert med en 20 prosent økt risiko for CVD-død i den fullt justerte modellen (HR, 1.2) 0; 95 prosent KI, 1.05–1,35; P ¼ 0,0052). Redusert RTL var også signifikant omvendt assosiert med død på grunn av infeksjoner. Hver reduksjon på 0,1 enhet av RTL var assosiert med en 1,27- ganger høyere risiko for død på grunn av infeksjoner (HR, 1,27; 95 prosent KI, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Ved å se på estimatene for de ulike kvartilene i tilleggstabell S1 viste det for død på grunn av infeksjoner at estimatene for hver av kvartilene 1, 2 og 3 var tilsvarende forhøyet sammenlignet med det for kvartil 4. Analysen med andre dødsårsaker som så vel som ukjente dødsårsaker var åpenbart for heterogen og avslørte ingen assosiasjon med RTL (data ikke vist).
Grafen over de skalerte Schoenfeld-restene og testen på proporsjonale fareforutsetninger antydet ingen tidsvarierende effekter for RTL på noen av de undersøkte resultatene. Underfordelings-HR-ene for både kardiovaskulær og infeksjonsdød, rapportert i tilleggstabell S2, er bare svakt svekket sammenlignet med de årsaksspesifikke HR-ene.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 i de fullt justerte modellene). Gitt at vi nylig observerte en U-formet assosiasjon mellom varigheten av CKD og RTL,22, utførte vi en sensitivitetsanalyse som i tillegg justerte for varigheten av CKD ved baseline definert som mindre enn 6 måneder, mellom 6 måneder og 5 år og mer enn 5 år. Denne tilleggsjusteringen resulterte i bare marginale endringer av HR-ene oppnådd for alle 3 endepunktene (tilleggstabell S3).
Cistanche fordel: forbedre nyrefunksjonen
DISKUSJON
Resultatene av denne studien viste en signifikant sammenheng mellom RTL og dødelighet av alle årsaker i en ikke-dialyseavhengig CKD-kohort. Kortere RTL var assosiert med høyere risiko for dødelighet uavhengig av nyrefunksjon og tradisjonelle CVD-risikofaktorer. Denne assosiasjonen ble drevet av død på grunn av CVD så vel som død på grunn av infeksjoner.
Assosiasjon med dødelighet av alle årsaker
Tidligere studier,5,6,31–35med få unntak,36,37 har vist en negativ sammenheng mellom RTL og dødelighet av alle årsaker i befolkningen generelt. Den største studien så langt (n ¼ 64 637) ble utført av Rode et al., med en justert HR for dødelighet på 1,40 for desilen med kortest versus desilen med lengst RTL.35I samsvar med disse resultatene viste studien vår med hver reduksjon på 0.1 RTL-enheter en 14 prosent høyere risiko for dødelighet av alle årsaker, noe som tilsvarer en 75 prosent høyere risiko for de laveste sammenlignet med den høyeste kvartil av RTL. Så vidt vi vet er det bare Carrero et al.28har undersøkt sammenhengen mellom RTL og dødelighetsrisiko hos CKD-pasienter. De studerte 175 pasienter med nyresykdom i sluttstadiet behandlet med hemodialyse, hvorav 70 døde i løpet av en median på 31 måneders observasjon. Forfatterne observerte at TL uavhengig spådde pasientens overlevelse etter ytterligere justering for alder, kjønn og betennelse. Den nåværende studien utvider disse observasjonene til den mye større gruppen av individer med CKD som ikke trenger dialyse.
Figur 2|Justerte ikke-lineære splines (og 95 prosent konfidensbånd) for sammenhengen mellom økende relativ telomerlengde (RTL) og hazard ratio (HR) av (a) dødelighet av alle årsaker, (b) kardiovaskulær død og (c) død på grunn av infeksjoner . HR er gitt som loggskala på skattene. Grayline: justeringsmodell 1 (justert for alder og kjønn). Blueline: justeringsmodell 3 (justert for alder, kjønn, estimert [forts.]
Assosiasjon med CVD-dødelighet
Ingen studier har undersøkt sammenhengen mellom RTL og CVD-dødelighet hos CKD-pasienter så langt, selv om dette er den viktigste dødsårsaken hos disse pasientene. Avhengig av den undersøkte etnisiteten og datajusteringsmodellene, rapporterte noen, men ikke alle, studier i den generelle befolkningen en sammenheng mellom lave RTL- og CVD-utfall.33,38–41Sterk støtte for en årsakssammenheng kom fra en mendelsk randomiseringsstudie der genetiske varianter assosiert med kortere RTL ble funnet å være assosiert med iskemisk hjertesykdom.40I denne studien identifiserte vi en signifikant sammenheng mellom RTL og kardiovaskulære dødsfall, med en 20 prosent høyere risiko med hver reduksjon av RTL med 0.1 enheter, eller en 75 prosent høyere risiko for disse pasienter i kvartilen med kortest TL sammenlignet med kvartilen med lengst TL. Dette funnet er i tråd med vår tidligere rapport om en assosiasjon med utbredte kardiovaskulære hendelser i denne pasientpopulasjonen: hver reduksjon av RTL med 0,1 enheter var signifikant assosiert med en 6 prosent høyere odds for utbredt CVD i en modell som justerer for alder, kjønn, nåværende røyking, hypertensjon, diabetesstatus, lipoproteinkolesterol med lav tetthet, høy tetthet
lipoprotein kolesterol, C-reaktivt protein, eGFR og kroppsmasseindeks.21Den prospektive oppfølgingen av disse pasientene i denne undersøkelsen viste at spesielt den laveste kvartilen av RTL var assosiert med en markert økt risiko, mens de andre 3 kvartilene viste svært like estimater (Figur 1b).
Sammenheng med død på grunn av infeksjoner
Selv om eksperimentelle bevis støtter rollen som cellealderdom og kort TL i svekket immunrespons, er epidemiologiske studier sparsomme, spesielt hos CKD-pasienter. Helby et al. gjennomførte den største (n ¼ 75 309) prospektive populasjonsbaserte studien som undersøkte RTL og risikoen for sykehusinnleggelse for infeksjonssykdom og risikoen for infeksjonsrelatert død. I løpet av 7 års oppfølging observerte de en høyere risiko for eventuelle infeksjoner i kvartilen med den korteste sammenlignet med kvartilen med den lengste RTL.42 Tidligere studier med mindre utvalgsstørrelser rapporterte motstridende resultater.32,43,44Våre funn hos CKD-pasienter beskriver for første gang sammenhengen mellom kort RTL og høyere risiko for død på grunn av infeksjoner i denne høyrisikopopulasjonen.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunksjonen
Potensiell mekanisme
Den biologiske mekanismen som ligger til grunn for forholdet mellom RTL og dødelighet er fortsatt uklar. Assosiasjonen identifisert av vår studie belyser ikke om RTL-forkorting er årsaksrelatert til hjerte- og karsykdommer og infeksjoner. Imidlertid viste en genomomfattende assosiasjonsstudie etterfulgt av en genetisk risikoscoreanalyse som kombinerte ledende varianter på 7 genetiske loci en assosiasjon av allelene assosiert med kortere RTL med økt risiko for koronararteriesykdom. Dette funnet gir mulig støtte for en potensiell årsaksrolle til RTL i CVD.45,46Videre kan cellulær senescens indusert av telomer-attrisjon være en utløser av aterosklerose så vel som arteriosklerose. Akkumulering av senescentceller i karet bidrar til aterosklerotisk plakkdannelse og mediakalsifikasjoner som resulterer i økt arteriell stivhet som et dominerende trekk ved uremisk arteriell sykdom.47De fleste studiene har målt RTL i DNA fra perifere leukocytter. Imidlertid er det vist en nær sammenheng mellom leukocytt- og aortaveggvev TL.48Derfor kan cellulær senescens påvirke endotelceller som fører til dysfunksjon i vaskulærveggen og fremme adhesjon av immunceller, en primær hendelse i aterosklerose. Videre aktiverer korte telomerer p53 og autofagi i hjertestamceller, og destabiliserer balansen mellom hvile og spredning mot differensiering og senescens, noe som fører til utmattelse av hjertestamceller.49Telomerdysfunksjon har vist seg å indusere dyp p53-avhengig undertrykkelse av masterregulatorene for mitokondriell biogenese og funksjon, noe som fører til bioenergetisk kompromiss på grunn av nedsatt oksidativ fosforylering og generering av adenosintrifosfat.50,51
Det er også flere koblinger mellom RTL og infeksjoner. Tap av telomerer har blitt observert under T-celledifferensiering,52ved kroniske virusinfeksjoner,53og med alderen.54Videre er kort leukocytt TL rapportert som en risikofaktor ved ulike immunrelaterte sykdommer55og diabetes.56Leukocytt kortere TL forårsaker cellealder som følges av en reduksjon av immuncelleproliferasjonskapasitet. TL kan også være involvert i aldersrelatert nedgang i immunfunksjon relatert til utilstrekkelig respons på vaksiner og akutte infeksjoner.57–59En potensiell rolle for TL i infeksjoner støttes også av en nylig genomomfattende assosiasjonsstudie i en kinesisk befolkning. Dorjee og kolleger observerte en sammenheng mellom en TL-reduserende allel og død på grunn av luftveisinfeksjon.60RTL-slitasje kan være sterkt utløst av tilstedeværelsen av forhøyet oksidativt stress, en vanlig tilstand ved CKD.61 Flere in vitro- og in vivo-studier viste at oksidativt stress akselererer nedslitning av telomerer.62,63Faktisk er telomerer, med sitt høye guanininnhold, svært utsatt for oksidativ skade,64og enkeltstrengs DNA-brudd indusert av oksidativt stress kan være en viktig faktor for telomerforkorting under DNA-replikasjon.65
Cistanche fordel: forbedre nyrefunksjonen
Styrker og begrensninger
Styrkene ved denne undersøkelsen inkluderer den store utvalgsstørrelsen til en veldefinert populasjon med en median oppfølging på 4 år med nesten ingen tap til oppfølging, homogenitet i studiepopulasjonen og en sentralisert vurdering av TL og utfallsmål. Målingen av RTL er spesielt av ytterste viktighet fordi standardisering mellom laboratorier ikke er lett å gjennomføre og derfor bør prosessen utføres i samme laboratorium under nøyaktig de samme forholdene når det gjelder protokoll, referansegen, instrument, personell,66 og DNA utvinningsprosedyre.67
Det er noen begrensninger for denne studien. Først ble RTL målt i perifere leukocytter. Det er kjent at progresjonshastigheten til senescens varierer mellom lymfocyttundergrupper. 59Dessverre var ingen data tilgjengelig om blodcelletypesammensetningen på tyskKronisk nyre sykdomstudie og det var derfor ikke mulig å undersøke dette aspektet. Å kjenne RTL fra ulike nyrecelletyper vil være av interesse, men det er ikke mulig å få tak i i en stor epidemiologisk studie da dette vil kreve vevsmateriale fra biopsier. Den andre begrensningen inkluderer observasjonsdesignet til studien, som ikke tillater avklaring av årsakssammenheng eller biologisk mekanisme. For det tredje rekrutterte studien hovedsakelig CKD-pasienter i stadium G3 eller A3, og funnene kan kanskje ikke generaliseres til andre stadier av CKD. For det fjerde kan assosiasjonen med spesifikke dødsårsaker ha vært begrenset av statistisk kraft, men var fortsatt til stede for de to spesifikke hovedårsakene til dødsfall. Til slutt, selv om analysene våre ble justert for tradisjonelle kardiovaskulære risikofaktorer så vel som nyrefunksjonsparametere, kan vi ikke utelukke muligheten for gjenværende forvirring ved ukjent eller umålt
variabler. Det var imidlertid veldig interessant å se at alders- og kjønnsjusterte estimater av RTL for ulike utfall var meget stabile med ytterligere justering for de andre variablene, noe som indikerer at RTL er relativt uavhengig av andre variabler når data justeres for alder og kjønn.
Konklusjoner
Kort relativ TL kvantifisert fra perifere blodleukocytter var uavhengig assosiert med dødelighet av alle årsaker i løpet av 4 års oppfølging hos pasienter med moderat alvorlig CKD. Denne assosiasjonen ble drevet av død på grunn av CVD så vel som død på grunn av infeksjoner.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunksjonen
METODER
Studiepopulasjon
TyskerenKronisk nyre sykdom study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min per 1,73 m2 i nærvær av åpenbar proteinuri (stadium G1–G2, A3). Eksklusjonskriterier var ikke-kaukasisk etnisitet, solid organ- eller benmargstransplantasjon, aktiv malignitet innen 24 måneder før screening, New York Heart Association Stage IV hjertesvikt og lovlig oppmøte eller manglende evne til å gi samtykke. Laboratorieparametere som ble presentert ble alle målt fra innsamlede bioprøver i et sentralt laboratorium som beskrevet tidligere.68 Informasjon om sosiodemografiske faktorer, medisinsk og familiehistorie, medisiner og helserelatert livskvalitet ble innhentet av opplært personell gjennom standardiserte spørreskjemaer. Utbredt kardiovaskulær sykdom ved baseline ble definert som en historie med ikke-dødelig hjerteinfarkt, koronar bypasstransplantasjon, perkutan transluminal koronar angioplastikk, hjerneslag og intervensjoner ved halspulsårene (carotis endarterektomi og/eller carotisballongangioplastikk eller stentimplantasjon).
Alle deltakerne ga skriftlig informert samtykke, og studien ble godkjent av etikkkomiteene til alle deltakende institusjoner og registrert i det nasjonale registeret for kliniske studier (DRKS 00003971). Alle metoder ble utført i henhold til godkjente retningslinjer og Helsinki-erklæringen. Data samles inn og administreres ved hjelp av Askimed (https://www.askimed.com) som en skybasert nettplattform for innsamling og håndtering av saksrapportskjemaer og laboratoriedata.
Kliniske endepunkter under prospektiv oppfølging
Som beskrevet nylig, følges 69 pasienter på årsbasis av trent personell som veksler ansikt-til-ansikt-besøk med telefonbesøk. Under disse besøkene oppdateres data om sykehusinnleggelser, utfallshendelser og sykehistorie som en del av et strukturert intervju. Eventuelle utskrivningsrapporter fra sykehus samles inn fra behandlende leger og/eller sykehus. Endpoints abstraheres kontinuerlig fra disse rapportene av en opplært og overvåket endepunktkomité bestående av 3 uavhengige leger i henhold til en forhåndsspesifisert endepunktkatalog. Informasjon om dødsårsaken er hentet fra disse rapportene samt fra dødsattester innhentet fra sivile registerkontorer når studiepersonell blir informert om en studiedeltakers død.
Den nåværende analysen inkluderer alle endepunkter som skjedde frem til 4-årsoppfølgingen. Hvis en pasient gikk glipp av 4-års oppfølgingsbesøk, inkluderte vi alle endepunkter inntil 4,5 år etter det respektive baseline-besøket. Derfor var sensureringstiden enten 4-års oppfølgingsdato eller 4,5 år etter baseline. Det primære utfallet var dødelighet av alle årsaker. For å evaluere om identifiserte assosiasjoner kan tilskrives en spesifikk dødsårsak, ble død fra kardiovaskulære årsaker og infeksjonssykdommer betraktet som sekundære utfall. Gruppen med CVD-død inkluderte hjerteinfarkt, koronar hjertesykdom, plutselig hjertedød, kongestiv hjertesvikt, lungeemboli, hjerteklaffsykdom og iskemisk hjerneslag. Andre dødsårsaker ble også registrert, men disse undergruppene var ikke store nok til å gjennomføre ytterligere årsaksspesifikke analyser.
Måling av RTL
Genomisk DNA ble ekstrahert fra fullblod i et sentrallaboratorium med Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Tyskland). Den nåværende analysen var basert på 4926 pasienter for hvem målinger av RTL i baseline-blodprøver og data om dødelighet var tilgjengelig. RTL ble målt i firdobbelt ved bruk av en kvantitativ polymerasekjedereaksjon-basert analyse utviklet av Cawthon70 og modifisert som beskrevet tidligere.71 DNA-prøver ble kjørt i 15-ml reaksjoner som inneholdt 1x Quantifast TM SYBR Green PCR master mix (Qiagen, Hilden, Tyskland), 10 ng DNA, 1 mM telomerprimer eller 250 nm husholdningsgen 36B4 primer. Vi bestemte det relative forholdet mellom telomer gjentatt kopinummer (T) og enkeltkopi genkopinummer (36B4-gen, som koder for ribosomalt fosfoprotein PO, lokalisert på kromosom 12; S). T/S-forholdene er proporsjonale med individuelle RTL. Automatiseringen av denne prosedyren med høy gjennomstrømning resulterte i svært gode kvalitetskontrolltiltak med en lav inter-assay-variasjonskoeffisient av T/S-forhold. Et kommersielt tilgjengelig DNA inkludert i alle de kvantitative polymerasekjedereaksjonsplatene ble brukt for å kontrollere ytelsen til analysen over hele studien. Interassay-variasjonskoeffisienten av T/S-forhold for denne prøven analysert i 112 uavhengige eksperimenter var 9,6 prosent før normalisering og redusert til 4,0 prosent etter normalisering (tilleggsfigur S2).
Statistisk analyse
Vi sammenlignet grunnlinjekarakteristikker for deltakere (tabell 1) ved å bruke Kruskal–Wallis-testen for kontinuerlige variabler og kjikvadrat-tester for kategoriske variabler. Kumulative insidensfunksjonskurver ble brukt for å estimere den kumulative forekomsten av de forskjellige dødsårsakene som står for den konkurrerende risikoen.72 Cox proporsjonale farer regresjonsmodeller ble utført for å evaluere assosiasjonene til RTL med 3 utfall: (i) dødelighet av alle årsaker, ( ii) død på grunn av CVD, og (iii) død på grunn av infeksjoner. For begge årsaksspesifikke endepunktene (ii og iii) ble pasienter sensurert hvis døden skjedde av en annen årsak. I tillegg ble assosiasjoner til disse årsaksspesifikke endepunktene undersøkt ved bruk av overlevelsesregresjon med konkurrerende risikoer, og vurderte alle dødsfall fra andre årsaker som konkurrerende hendelser. Derfor rapporteres både årsaksspesifikke HR-er og underavdelinger for død på grunn av CVD eller infeksjoner. Cox proporsjonale faremodeller ble montert med 3 forskjellige justeringsnivåer: modell 1 justert for alder og kjønn; modell 2 i tillegg justert for baseline eGFR, urin albumin-kreatinin ratio, utbredt CVD og diabetes; modell 3 ytterligere justert for de tradisjonelle CVD-risikofaktorene lavdensitetslipoproteinkolesterol, høydensitetslipoproteinkolesterol, kroppsmasseindeks, røyking, systolisk og diastolisk blodtrykk, C-reaktivt protein og albumin. Utvalget av variabler justert for i de ulike modellene var basert på forskjellene i de kliniske karakteristikkene mellom kvartilene til RTL gitt i tabell 1. I regresjonsmodellene ble RTL analysert kontinuerlig og som en kategorisk prediktor (i kvartiler av RTL). Gitt at de første resultatene indikerte en høyere risiko, spesielt for lave verdier av RTL, rapporteres den (årsaksspesifikke) HR også for kvartil 1, 2 og 3 sammenlignet med kvartil 4 som referanse (tilleggstabell S1). Ytterligere nedstrømsanalyse var basert på visuell inspeksjon av P-spline for å utlede formen på forholdet mellom RTL og dødelighetsrisiko. Vi brukte Spearmans rangkorrelasjonskoeffisient for å vurdere sammenhengen mellom studievariabler. Alle statistiske analyser ble utført ved bruk av R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-verdier<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERANSER
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. En svært konservert repeterende DNA-sekvens, (TTAGGG)(n), tilstede ved telomerene til menneskelige kromosomer. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Telomerdynamikk i menneskelige celler. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomerer som biomarkører for aldring og aldersrelaterte sykdommer. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Telomerlengde ved Parkinsons sykdom: en metaanalyse. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Leukocyttelomerlengde og alle årsaker, kardiovaskulær sykdom og kreftdødelighet: resultater fra individuell deltakerdatametaanalyse av 2 store prospektive kohortstudier. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Telomerlengde og dødelighet av alle årsaker: en metaanalyse. Aldring Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomerer og telomerase i nyrehelsen. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Er det en sammenheng mellom betennelse, telomeraseaktivitet og transkripsjonsstatus for telomerase revers transkriptase ved nyresvikt? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Genetisk mottakelighet for kronisk nyresykdom - noen flere brikker for arvelighetspuslespillet. Front Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Den familiære grupperingen av nyresykdom og relaterte fenotyper. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Genomomfattende studier for å identifisere risikofaktorer for nyresykdom med fokus på pasienter med diabetes. Nephrol-skivetransplantasjon. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Innsikt i nyresykdommer fra genomomfattende assosiasjonsstudier. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Sammenslutning av eGFR-relaterte loki identifisert av GWAS med hendelse CKD og ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM, et al. Genetiske loci som påvirker nyrefunksjonen og kronisk nyresykdom. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Nye loci assosiert med nyrefunksjon og kronisk nyresykdom. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Genetiske assosiasjoner ved 53 loci fremhever celletyper og biologiske veier som er relevante for nyrefunksjonen. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et al. En katalog over genetiske loki assosiert med nyrefunksjon fra analyser av en million individer. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Sammenheng mellom nyrefunksjon og telomerlengde: hjerte- og sjelstudien. Am J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. Kort telomerlengde er assosiert med nedsatt nyrefunksjon hos japanske personer med kardiovaskulær risiko. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. Nyredysfunksjon er assosiert med kortere telomerlengde ved hjertesvikt. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Forening av relativ telomerlengde med kardiovaskulær sykdom i en stor kronisk nyresykdomskohort: GCKD-studien. Aterosklerose. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Har telomerer høyere plastisitet enn antatt? Resultater fra den tyske studien om kronisk nyresykdom (GCKD) som en høyrisikopopulasjon. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Forening av relativ telomerlengde med progresjon av kronisk nyresykdom i to kohorter: effektmodifisering ved røyking og diabetes. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. For tidlig aldring av sirkulerende T-celler hos pasienter med nyresykdom i sluttstadiet. Nyre Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Telomerisk G-halelengde og sykehusinnleggelse for kardiovaskulære hendelser hos hemodialysepasienter. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Stressindusert for tidlig senescens i mononukleære celler fra pasienter på langvarig hemodialyse. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Telomeraseaktivitet er redusert i perifere mononukleære blodceller hos hemodialysepasienter. Am J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Telomereslitasje er assosiert med betennelse, lave fetuin-A-nivåer og høy dødelighet hos utbredte hemodialysepasienter. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Telomereslitasje, nyrefunksjon og utbredt kronisk nyresykdom i USA. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Telomeraseaktivitet hos pasienter med stadium 2–5D kronisk nyresykdom. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Sammenheng mellom fett, telomerlengde og dødelighet: data fra NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Leukocyttelomerlengde og dødelighet i kardiovaskulær helsestudie. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Leukocyttelomerlengde og dødelighet i National Health and Nutrition Examination Survey, 1999–2002. Epidemiologi. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Telomerlengde og dødelighet i Ludwigshafen risiko- og kardiovaskulær helsestudie. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Perifert blod leukocyttelomerlengde og dødelighet blant 64 637 individer fra den generelle befolkningen. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Leukocyttelomerlengde og dødelighet blant amerikanske voksne: effektmodifisering ved fysisk aktivitetsatferd. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et al. Leukocyttelomerlengde og epigenetisk-basert dødelighetsrisikoscore: assosiasjoner med dødelighet av alle årsaker blant eldre voksne. Epigenetikk. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Assosiasjon mellom forkortet leukocyttelomerlengde og kardiometabolske utfall: systematisk oversikt og metaanalyse. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Leukocyttelomerlengde og risiko for kardiovaskulær sykdom: systematisk gjennomgang og metaanalyse. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Kort telomerlengde og
iskemisk hjertesykdom: observasjons- og genetiske studier hos 290 022 individer. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Leukocyttelomerlengde og kardiovaskulær sykdom hos afroamerikanere: Jackson Heart Study. Aterosklerose. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. Kortere leukocyttelomerlengde er assosiert med høyere risiko for infeksjoner: en prospektiv studie av 75 309 individer fra den generelle befolkningen. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Sammenheng mellom telomerlengde i blod og dødelighet hos personer i alderen 60 år eller eldre. Lancet. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Sammenheng mellom telomerlengde, spesifikke dødsårsaker og år med sunt liv i helse, aldring og kroppssammensetning: en populasjonsbasert kohortstudie. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identifikasjon av syv loci som påvirker gjennomsnittlig telomerlengde og deres assosiasjon med sykdom. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Telomerlengde og risiko for kardiovaskulær sykdom. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. CDKN2A/p16INK4a-uttrykk er assosiert med vaskulær progeri ved kronisk nyresykdom.
Aldring (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Blod leukocytt telomer DNA-innhold forutsier vaskulær telomer DNA-innhold hos mennesker med og uten vaskulær sykdom. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Korte telomerer induserer p53 og autofagi og modulerer aldersassosierte endringer i hjertestamcellers skjebne. Stamceller. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Transkripsjonelle koaktivatorer PGC-la og PGC-lb kontrollerer overlappende programmer som kreves for perinatal modning av hjertet. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomerer og mitokondrier i det aldrende hjertet. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Telomerfluorescensmålinger i granulocytter og undergrupper av T-lymfocytter peker på en høy.