Kjønnsbaserte forskjeller i plasmaautoantistoffer mot sentralnervesystemproteiner i golfkrigsveteraner versus sunne og symptomatiske kontroller
Mar 22, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Mohamed B. Abou-Donia 1,*, Maxine H. Krengel 2, Elizabeth S. Lapadula 1, Clara G. Zundel 2, Jessica LeClair 3, Joseph Massaro 3, Emily Quinn 3, Lisa A. Conboy 4, Efi Kokkotou 4, Daniel D. Nguyen 5, Maria Abreu 6,7, Nancy G. Klimas 6,7 og Kimberly Sullivan 5,*
1 Institutt for farmakologi og kreftbiologi, Duke University Medical Center, Durham, NC 27710, USA;
2 Institutt for nevrologi, Boston University School of Medicine, Boston, MA 02118, USA;
3 Institutt for biostatistikk, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
4 Institutt for medisin, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA;
5 Department of Environmental Health, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
6 Dr. Kiran C. Patel College of Osteopathic Medicine, Institute for Neuroimmune Medicine, Nova Southeastern University, Fort Lauderdale, FL 33314, USA;
7 Institutt for immunologi, Miami VA Medical Center, Miami, FL 33125, USA
Abstrakt:
Veteraner fra 1991 Gulf War (GW) har lidd av Gulf War sykdom (GWI) i nesten 30 år. Denne sykdommen omfatter flere kroppssystemer, inkludert sentralnervesystemet (CNS). Diagnose og behandling av GWI er vanskelig fordi det ikke har vært en objektiv diagnostisk biomarkør. Nylig rapporterte vi om en nyutviklet blodbiomarkør som skiller GWI fra GW-friske kontroller, og symptomatiske kontroller med irritabel tarmsyndrom (IBS) og myalgisk encefalomyelitt/kronisk utmattelsessyndrom (ME/CFS). Denne studien ble designet for å sammenligne nivåer av disse biomarkørene mellom menn og kvinner med GWI, så vel som kjønnsspesifikke effekter sammenlignet med friske GW-veteraner og symptomatiske kontroller (IBS, ME/CFS). Resultatene viste at menn og kvinner med GWI er forskjellige i 2 av 10 plasmaautoantistoffer, med menn som viser signifikant forhøyede nivåer. Menn og kvinner med GWI viste signifikant forskjellige nivåer av autoantistoffer i 8 av 10 biomarkører mot nevronale og gliale proteiner i plasma i forhold til kontroller. Oppsummert tok denne studien for seg nytten av bruken av plasmaautoantistoffer for CNS-proteiner for å skille mellom både menn og kvinnelige veteraner med GWI og andre sunne og symptomatiske kontrollgrupper.
Nøkkelord: CNS-autoantistoff; Gulf War sykdom; kjønn; biomarkører; proteiner; myalgisk encefalomyelitt/kronisk utmattelsessyndrom; irritabel tarm-syndrom
1. Introduksjon
Gulf War (GW) veteraner har lidd av en tilstand kjent som Gulf War illness (GWI), som omfatter flere kroppssystemer, inkludert sentralnervesystemet (CNS) [1–3]. Denne kroniske tilstanden påvirker omtrent 250,000 GW-veteraner, inkludert en stor andel av de 40,000 kvinnene som deployerte til krigen. GWI har overlappende, men forskjellige, symptomer fra andre lidelser som også rammer kvinner, inkludert Myalgisk Encefalomyelitt/Kronisk utmattelsessyndrom (ME/CFS) og Irritabel tarmsyndrom (IBS). Mangel på objektive diagnostiske markører har minimert evnen til å konsekvent diagnostisere og behandle mangfoldet av symptomer på GWI. Nylig vurderte vi en kandidatplasma-biomarkør for GWI, og vi har vist forskjeller i individer som oppfyller kriteriene for GWI versus GW-friske, og ikke-veterankontroller med IBS og CFS. Gitt de forskjellige symptomene på GWI opplevd mellom menn og kvinner, var det vårt neste mål å vurdere mulige forskjeller i disse plasmabiomarkørene mellom kjønn [4–8]. Å bestemme om CNS-autoantistoffer er forskjellig mellom menn og kvinner med GWI og deres respektive kontroller, vil hjelpe til med å videreutvikle den diagnostiske nytten av disse som plasmabiomarkører. Kvinner som tjenestegjorde i 1991 GW har rapportert om en rekke helseproblemer, hvorav mange er kjønnsspesifikke. Noen studier har antydet økte forekomster av kvinners helseproblemer og blæreinfeksjoner i forhold til veterankontroller fra GW-tiden [9]. I Ft. Devens Cohort (FDC) av GW-veteraner, GW-kvinner i forhold til ikke-veterankontroller har vist seg å ha en høyere risiko for diabetes, men en lavere risiko for hypertensjon sammenlignet med National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) alder og kjønn- matchet kohort [8].
I kontrast rapporterte GW-utplasserte menn økte forekomster av syv kroniske helsetilstander i forhold til NHANES-menn, inkludert signifikant høyere sjanser for å rapportere hypertensjon, høyt kolesterol, hjerteinfarkt, diabetes, hjerneslag, leddgikt og kronisk bronkitt [8]. Fordi denne studien viste at GW-menn hadde økt risiko for medisinske tilstander som er kjente risikofaktorer for senere kardiovaskulær og cerebrovaskulær sykdom (dvs. hypertensjon, høyt kolesterol, diabetes), kan GW-menn vise økte forekomster av CNS-biomarkører i forhold til deres kvinnelige veteran motparter. Imidlertid, i en fersk studie som brukte den store GW-era biorepository-kohorten (GWEBC), var GW-utplasserte kvinner betydelig mer sannsynlig å rapportere symptomer relatert til kognitive, nevrologiske og humørproblemer enn kvinner fra GW-tiden [4]. Derfor kan GW-kvinner også vise økte CNS-relaterte biomarkører sammenlignet med andre kvinnekohorter. I tillegg, når man sammenligner utplasserte GW-veteranmenn versus kvinner, har kvinnelige GW-veteraner blitt funnet å ha mer bruk av poliklinisk og stasjonær helsehjelp 5 år etter utplassering [10]. GW-kvinner har også blitt funnet å ha høyere forekomst av alvorlige og moderate tilfeller av GWI i forhold til sine mannlige kolleger [5,11–13]. Flere faktorer kan forklare de observerte kjønnsforskjellene i GWI og individuelle symptomer, inkludert kjønnsforskjeller i mottakelighet for nevrotoksiske eksponeringer i teater og/eller høyere eksponeringer blant mannlig personell. Allerede i 1996 spekulerte vi i at kjemisk eksponering på tidspunktet for GW var en utløsende faktor i GWI [14,15].
effekten avcistanche tubulosa ekstrakt
Vi demonstrerte i eksperimentelle studier at kombinert eksponering for plantevernmidler og pyridostigminbromid (PB) forårsaket nevrotoksiske effekter som forstyrrer nevronal og gliacellefunksjon, noe som fører til langvarige og potensielt nevrodegenerative effekter [14–16]. Nevrodegenerasjon involverer nevronal og gliacelledød og frigjøring av innholdet deres til sirkulasjon gjennom den brutte blod-hjerne-barrieren (BBB), som deretter kan oppdages gjennom CNS-autoantistoffer i plasma [17]. Vi har tidligere vist BBB-endringer i våre dyremodeller av GWI-eksponeringer [18]. Vi har også tidligere vist at disse plasmamarkørene kan påvises i lave nivåer hos individer uten signifikant sykdom, men øke hos de med mer symptomatologi [16,19]. CNS har to typer celler: nevroner og støttende gliaceller. Nevronale celler inneholder flere cytoskjelettproteiner, inkludert tau og neurofilamenter [20,21]. Sammen med mikrotubuli laget av tubulin, danner de ryggraden i det aksonale cytoskjelettet. Disse proteinene er involvert i den aksonale transporten av essensielle næringsstoffer, aminosyrer og organeller nedover aksonet [22]. Microtubule-Associated Proteins (MAP)-2 og tau, fremmer polymerisering og stabilisering av mikrotubuli i aksoner, kryssbro-nevrotråder og mikrotubuli som kobler seg til hverandre; dette bidrar til å opprettholde cytoskjelettet for aksonal transport [23]. Tau-proteiner er lokalisert primært i aksonet i nevronceller. De støttende gliacellene, oligodendrocytter i CNS og Schwann-celler i det perifere nervesystemet (PNS), produserer myelinbasisprotein (MBP) og myelinassosiert glykoprotein (MAG) som er membranproteolipider [24]. Gliale astrocytiske proteiner produserer glial fibrillært surt protein (GFAP), en komponent av astroglia cytoskjelett, som er svært spesifikk for CNS og frigjøres fra astrocytten inn i det ekstracellulære rommet etter CNS-skade [25]. Kalsiumbindende S100B-protein frigjøres også av astrocytiske gliaceller (figur 1).
Mange av disse nevronale cytoskjelett- og spesielt gliaproteinene finnes bare i CNS og deres autoantistoffer finnes i det perifere blodet hvis disse proteinene på et tidspunkt har lekket gjennom BBB og immunsystemet monterer en autoantistoffrespons på dem [18,26] . Det tidsmessige forløpet av dette BBB-bruddet kunne ha skjedd en gang i fortiden hos disse individene, noe som resulterte i lekkasje av disse proteinene fra nevroner og/eller glia. Så selv om S100B, en markør for gjeldende BBB-kompromiss, ikke var forskjellig i vår tidligere studie hos veteraner med GWI, betyr ikke dette at et BBB-brudd ikke skjedde en gang i fortiden som forårsaket varige påvisbare autoantistoffer mot disse CNS-proteinene i blodet . Hjernevitenskap. 2020, 10, x FOR FELLEKLEVENDIGHET 3 av 16 som er svært spesifikk for CNS og frigjøres fra astrocytten til det ekstracellulære rommet etter CNS-skade [25]. Kalsiumbindende S100B-protein frigjøres også av astrocytiske gliaceller (figur 1). Mange av disse nevronale cytoskjelett- og spesielt gliaproteinene finnes bare i CNS og deres autoantistoffer finnes i det perifere blodet hvis disse proteinene på et tidspunkt har lekket gjennom BBB og immunsystemet monterer en autoantistoffrespons på dem [18,26] . Det tidsmessige forløpet av dette BBB-bruddet kunne ha skjedd en gang i fortiden hos disse individene, noe som resulterte i lekkasje av disse proteinene fra nevroner og/eller glia. Så selv om S100B, en markør for gjeldende BBB-kompromiss, ikke var forskjellig i vår tidligere studie hos veteraner med GWI, betyr ikke dette at et BBB-brudd ikke skjedde en gang i fortiden som forårsaket varige påvisbare autoantistoffer mot disse CNS-proteinene i blodet .
Denne studien undersøker effekten av kjønn på tilstedeværelsen av immunoglobulin G (IgG) klasse sirkulerende autoantistoffer mot CNS-spesifikke nevronale og gliaproteiner i plasmaet til GW-veteraner med og uten GWI, så vel som i symptomatiske ikke-veterankontroller (IBS, og ME/CFS). Spesifikt antok vi at menn og kvinnelige veteraner med GWI ville skille seg fra hverandre på fordelingen av CNS-autoantistoffproteiner og at GW-menn og -kvinner ville ha høyere nivåer av CNS-autoantistoffproteiner enn andre symptomatiske grupper med kroniske sykdommer inkludert IBS og ME/CFS . På grunn av eksponering under krigen kunne alle GW-veteraner ha hatt et visst nivå av BBB-kompromittering som bevist av CNS-autoantistoffer i plasma, men vi antok at de med GWI ville ha høyere nivåer av disse blodmarkørene
2. Materialer og metoder
2.1. Studiebefolkning
Metodene er de samme som vår nylig publiserte studie [19]. Kort fortalt ble plasma fra GW-veteraner levert av Gulf War Illness Research Consortium (GWIC), Dynamic Modeling of GWI-studien fra Nova Southeastern University, Congressionally Directed Medical Research Program (CDMRP) finansiert studie til South Florida Veterans Affairs Foundation for Research og Education, Inc., Akupunkturbehandlingsstudien og biorepositoriet for irritabel tarm ved Harvard/BIDMC. Godkjenning fra Institutional Review Board (IRB) ble innhentet fra Boston University, Nova Southeastern University, Miami VAMC og Harvard University. De samme standard operasjonsprosedyrer ble brukt for hvert studiested for flebotomi, plasmaseparasjon og alikvotering. Plasmaprøver ble tatt fra fastende personer og lagret ved -80 ◦C. De forble frosset frem til analyser. Deltakerne samtykket til sine respektive studier ved å bruke retningslinjene for International Conference of Harmonization Good Clinical Practice (ICH GCP). Kansas GWI-kriteriene ble brukt for å bestemme tilfeller av GWI og kontroller [27]. Kansas GWI-kriteriene krever at GW-veteraner godkjenner symptomer i minst 3 av 6 symptomdomener (tretthet, smerte, kognitiv/nevrologisk/humør, gastrointestinal, luftveier og hud). Veterankontroller inkluderte utplasserte veteraner fra 1991 GW som ikke oppfylte Kansas GWI eller eksklusjonskriterier. Kansas GWI eksklusjonskriterier ekskluderer individer som rapporterer å ha blitt diagnostisert med en annen medisinsk tilstand som kan forklare deres kroniske medisinske symptomer, inkludert veteraner med tidligere sentralnervesystem eller alvorlige psykiatriske lidelser som kan påvirke kognitiv funksjon (f.eks. epilepsi, hjerneslag, hjerne). svulst, multippel sklerose, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, schizofreni). Plasmaprøver fra symptomatiske kontroller kom fra tidligere studier av personer med ME/CFS og IBS [28,29]. ME/CFS-tilfeller ble bestemt ved å bruke 1994 Centers for Disease Control and Prevention (CDC) kriterier [28]. IBS-deltakere oppfylte Roma III-kriteriene [29]. De fullstendige kohortene er beskrevet i tidligere artikler (GWIC, CFS, IBS, GWIC delprøve [16,30–33]).
2.2. Materialer
Proteinkildene er også beskrevet tidligere [19]: Tubulin (humant rekombinant, Prospec Kat. # PRO-982), Mikrotubule-Associated Protein 2 (MAP-2, humant rekombinant, Origene, Kat. # TP316775, human rekombinant), Tau-381 (human rekombinant, Millipore Cat. #AG952), Neurofilament Protein (NFP, Prospec, Cat #PRO-523), Calmodulin Kinase II (human rekombinant, CaMKII, Novus Biologicals, Cat #H000000H15-P01), Alphasynuclein (humant rekombinant, AnaSpec Cat. #AS-55555), Myelin Basic Protein (MBP, human, Fitzgerald Cat. #30R- AM030), Myelin-assosiert glykoprotein (MAG, human rekombinant, Sinobiological Cat. 131-86 H02H), Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP, human, CalBiochem Cat. #345996), S100B Protein (human, Millipore Cat. #30R -AS002). Geite-antihumant IgG konjugert til pepperrotperoksidase og det forbedrede kjemiluminescensreagenset ble oppnådd fra Amersham Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, USA). Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) geler, 2–20 prosent gradient (8 × 8), og 15 mM tris-glycin ble oppnådd fra Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Alt annet materiale ble kjøpt fra Amersham.
fordel av cistanche tubulosa ekstrakt
2.3. Etikkerklæring
Godkjenning for bruk av lagrede blodprøver fra alle studiesteder for denne studien ble innhentet fra Duke University Health System Institutional Review Board for Clinical Investigations 10.9.2017 og fra Boston University Medical Campus Institutional Review Board 19.1. 2018. De spesifikke protokollkomponentene for Duke University var: Protokoll-ID: Pro00003202, Referanse-ID: 335940, Hovedetterforsker: Mohamed Abou Donia, Protokolltittel: 'Nervesystemskade'. De spesifikke protokollkomponentene for Boston University var Protocol ID: H-34334, Reference ID: 1288716, Principal Investigator: Kimberly Sullivan, Protocol Title: "Novel Autoantibody Serum and Cerebrospinal Fluid Biomarkers in Veterans with Gulf War Illness." Plasmaprøver ble delt fra IRB-godkjente depoter fra studier ved Boston University (IRB # H-32768), NOVA Southeastern University/Miami VA Medical Center (IRB # 4987.76 og IRB # 4987.75), Beth Israel Hospital/Harvard University ( IRB # 2011P-000124), og New England School of Acupuncture (IRB # 09-204).
2.4. Prosedyrer
2.4.1. Plasma-prosedyrer
Alle steder fulgte samme protokoll: for venepunktur, blodhåndtering, plasmaseparasjon, alikvotering og lagring ved -80 ◦C. Den samme flebotomi og prøveprotokoll ble distribuert skriftlig til alle steder og inkluderte faste før blodprøvetaking om morgenen. Alle prøvene som ble analysert var baseline-blodprøver samlet inn før intervensjonsterapi. Prøver brukt i denne studien var ikke tidligere tint og var fri for hemolyse ved visuell inspeksjon.
2.4.2. Western Blot Assay
I denne studien ble Western blot-analyse brukt til å bestemme autoantistoffer mot spesifikke proteiner i plasmaprøven av GWI-tilfeller og sunne og symptomatiske kontroller etter kjønn. Denne analysen tillot bestemmelsen av autoantistoffene og assoformerte isoformer av antigenet. Som tidligere beskrevet ble hver plasmaprøve analysert i tre eksemplarer [19]. Alle proteiner ble lastet med 10 ng/felt bortsett fra IgG, som ble lastet som 100 ng/felt. Proteinene ble denaturert og elektroforert på SDS-PAGE (gradient 4 prosent til 20 prosent) kjøpt fra Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). En gel ble brukt for hver serumprøve. Proteinene ble overført til polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner (Amersham). Ikke-spesifikke bindingssteder ble blokkert med Tris-bufret SalineTween (TBST) (40 mM Tris (pH 7,6), 300 mM NaCl og 0,1 prosent Tween 20) inneholdende 5 prosent fettfritt melkepulver i 1 time ved 22 ◦C. Membraner ble inkubert med serumprøver ved 1:100 fortynninger i TBST med 3 prosent fettfri melkepulver over natten ved 4 ◦C. Etter fem vaskinger i TBST ble membranene inkubert med en 1:2000 fortynning av geit-anti-humant IgG konjugert til pepperrotperoksidase (Amersham). Membraner ble utviklet ved forbedret kjemiluminescens ved bruk av produsentens protokoll (Amersham) og en Typhoon 8600 variabel modellopptaker (GE Lifesciences, Marlborough, MA, USA). Signalintensiteten ble kvantifisert ved bruk av Bio-Rad bildeanalyseprogramvare versjon 4.5 (Hercules, CA, USA). Alle testene ble utført med forskerne blindet for sakskontroll og kjønnsstatus for prøvene.
2.4.3. Spesifisitet av plasmaautoantistoffer
Tidligere har vi sjekket spesifisiteten til plasma- og serumautoantistoffet ved å utføre en peptid/antigenkonkurranseanalyse, der serumet og plasmaet ble tilsatt målproteinet eller peptidet [34]. Serumet fra tilfeldige friske kontroller ble blandet med eller uten tau, MAP2 eller MBP. Proteinblandingen ble sentrifugert ved 15,000 rpm for å tømme eventuelle immunkomplekser. Supernatantene ble deretter forsiktig fjernet og brukt i Western blotting. Spesifisitetene til autoantistoffer mot alle testede proteiner ble bekreftet i en oppfølgingsstudie [35].
2.5. Statistikk
De samlede dataene presenteres som gjennomsnitt ± SD for kontinuerlige variabler og antall og prosentdel deltakere i hver kategori for kategoriske variabler. Forsøkenes demografiske verdier ble sammenlignet med kontrollgruppene ved å bruke Students t-test kontinuerlig og chi-kvadrat for kategoriske variabler. Gjennomsnittsverdier av autoantistoffer til GWI-menn og -kvinner ble sammenlignet ved bruk av analyse av kovarians (ANCOVA), justering for alder og rase. Rasen ble brukt dikotomit (kaukasisk eller ikke). Deretter ble gjennomsnittsverdiene for GWI-kvinnene sammenlignet med GW-friske kvinner og deretter gjentatt for GWI-menn og GW-friske menn. Til slutt ble gjennomsnittsverdiene for GWI-kvinnene sammenlignet med de kombinerte 3 kontrollgruppene (GW-kontroller, IBS, ME/CFS) ved bruk av ANCOVA, justering for alder og rase; denne analysen ble deretter gjentatt for menn. En tosidig p-verdi < 0.05="" ble="" akseptert="" som="" statistisk="" signifikant="" for="" alle="" analyser,="" og="" analyser="" ble="" ikke="" justert="" for="" flere="" sammenligninger.="" analyser="" ble="" utført="" ved="" bruk="" av="" sas="" versjon="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">
cistanche tubulosa ekstrakt fordel
2.6. Beregninger
Optisk tetthetsmåling for tilfeller og kontroller ble delt på konsentrasjonen av serum IgG; denne verdien for hvert individ ble normalisert til kontroller og uttrykt som en endring fra friske kontroller. Derfor er resultatene uttrykt som gjennomsnittlig triplikat analyseverdier av vilkårlige optiske tetthetsenheter normalisert til IgG optisk tetthet sammenlignet med friske kontroller.
2.7. CNS Autoantibody Index (CAI)
Denne indeksen bestemmer den generelle nevrodegenerative tilstanden til et individ basert på nivået av autoantistoffer i plasma. Det beregnes ved å legge til alle verdiene av autoantistoffer for hvert nevrale protein og deretter dele summen med antallet autoantistoffer som brukes. Til slutt multipliseres verdien med 10 for å gi en enkel CAI-score som tidligere rapportert under det tidligere navnet nevrodegenerasjonsindeks [19].
3. Resultater
3.1. Deltakerdemografi
Studieutvalget inkluderte totalt 171 veteraner med GWI (137 menn, 34 kvinner), totalt 56 GW mannlige friske kontroller og 4 GW kvinner veteranfriske kontroller, totalt 3 mannlige og 32 kvinner IBS kontroller, og totalt 5 menn og 45 kvinner CFS symptomatisk kontroll (tabell 1). Noen av gruppene (Men GWI versus kvinner GWI, og GWI versus alle kombinerte kontroller) var signifikant forskjellige i alder og rase (kaukasisk eller ikke), så alle videre analyser kontrollerte for disse demografiske variablene.
Denne studien rapporterer resultatene av bruken av våre nyutviklede plasma nevrodegenerative biomarkører for å skille mellom menn og kvinner som tjenestegjorde i 1990/1991 GW og utviklet symptomer på GWI eller forble friske. I tillegg ble det utført analyser for å oppdage forskjeller mellom kvinner med GWI versus GW-kvinnene og deretter den kombinerte kvinnekontrollgruppen (friske GW-veteraner, IBS, ME/CFS) og mellom menn med GWI vs. GW-friske menn og deretter med den kombinerte kontroll menn gruppe. Nivåene av 10 sirkulerende autoantistoffer mot nevrale proteiner ble analysert i plasma til menn og kvinnelige veteraner med GWI, med friske GW menn og kvinner, og med symptomatiske menn og kvinner med CFS og IBS, som ble brukt som kontroller.
3.2. Effekter av kjønn på nivåene av autoantistoffer mot plasmanevrale proteiner
3.2.1. Autoantistoffresultater analysert etter kjønn for GWI-tilfeller og GW Healthy Only
Denne studien omfattet 171 plasmaprøver fra veteraner med GWI, inkludert 137 (80,2 prosent) menn (gjennomsnittsalder på 49.2-år) og 34 kvinner (19.9 prosent) (med en gjennomsnittsalder på 46.9 år) (tabell 1) ). Forskjeller mellom menn og kvinner med hensyn til autoantistoffer i plasma innenfor GWI-gruppene ble funnet slik at menn med GWI viste signifikant høyere nivåer av tubulin og MAG sammenlignet med kvinnelige veteraner med GWI (tabell 2, figur 2). Det var ingen antistoffer der kvinner hadde høyere gjennomsnitt enn menn. Vi sammenlignet også 56 GW friske menn (gjennomsnittsalder på 50,5 år) med 4 GW friske kvinner (gjennomsnittsalder på 56,5 år). Selv om vi manglet statistisk kraft, ble ingen signifikante forskjeller funnet mellom mannlige og kvinnelige GW-friske kontroller på noen av autoantistoffene (data ikke vist).
3.2.2. Autoantistoffresultater i plasma hos veteranmenn med GWI versus friske veteranmenn og deretter kvinner med GWI versus friske veterankvinner
Den andre analysen sammenlignet mannlige veteraner med GWI (N=137) med GW-friske menn (N=56) og GWI-kvinner (N=34) med GW-friske kvinner (N=4 ). Sammenlignet med de friske mennene hadde GWI-menn signifikant høyere autoantistoffverdier for 9 av de 10 autoantistoffene med unntak av S100B. Sammenlignet med friske kvinner, hadde GWI-kvinner signifikant høyere autoantistoffverdier for 2 av de 10 autoantistoffene, inkludert GFAP og Tubulin (tabell 3).
3.2.3. Autoantistoffresultater i plasma hos menn GWI veteraner versus alle menn kontroller og kvinner GWI veteraner versus alle kvinner kontroller
Den tredje analysen sammenlignet mannlige veteraner med GWI (n {{0}}) og kombinert IBS, ME/CFS og sunn kontroll GW veteranhanner (n=64), og kvinnelige veteraner med GWI (n)=34) og kombinert IBS, ME/CFS og helsekontroll GW veteran kvinner (n=81) (tabell 4). Sammenlignet med alle mannlige kontroller, viste menn med GWI signifikant høyere (p < 0.01)="" gjennomsnittlige="" nivåer="" av="" 9="" av="" 10="" autoantistoffer="" mot="" nevrale="" proteiner="" (tubulin,="" tau,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" og="" gfap).="" det="" var="" ingen="" signifikant="" forskjell="" observert="" for="" s100b.="" kvinnelige="" veteraner="" med="" gwi="" viste="" signifikant="" økte="" (p="">< 0,01)="" gjennomsnittlige="" nivåer="" på="" 8="" av="" 10="" autoantistoffer="" sammenlignet="" med="" den="" kombinerte="" kvinnelige="" kontrollgruppen="" (ibs,="" me/cfs,="" friske="" kontroll="" gw-veteraner)="" inkludert="" tubulin,="" tau,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" og="" -syn="" (tabell="">
3.2.4. CAI-verdier etter kjønn i GWI-tilfeller for menn og kvinner versus kontroll for menn og kvinner
Når alle autoantistoffer ble kombinert i CAI-skåren, hadde menn med GWI de høyeste verdiene av totale kombinerte autoantistoffer, som indikert av en CAI-score på 41,1, og kvinner med GWI viste en CAI-score på 32,4. Disse verdiene var statistisk signifikant forskjellige av ANCOVA, justering for alder og rase (p=0.007). CAI-skåren til GW-kontrollmennene hadde et gjennomsnitt på 21,4, som var statistisk lavere enn GWI-mennene (p < 0.0001)="" (figur="" 3).="" cai-skåren="" til="" gw-kontrollkvinnene="" hadde="" en="" gjennomsnittlig="" score="" på="" 12,0,="" som="" var="" statistisk="" lavere="" enn="" gwi-kvinnene="" (p="">< 0,021).="" den="" kombinerte="" mannlige="" kontrollgruppen="" hadde="" en="" gjennomsnittlig="" cai="" på="" 21,5,="" som="" var="" statistisk="" signifikant="" lavere="" enn="" gwi-manngruppen="" (p="">< 0,0001).="" i="" tillegg="" hadde="" den="" kombinerte="" kvinnekontrollgruppen="" en="" gjennomsnittlig="" cai="" på="" 18,7,="" som="" også="" var="" signifikant="" lavere="" enn="" gwi="" kvinnegruppen="" (p="">< 0,0001).="" i="" denne="" studien="" viste="" resultatene="" våre="" av="" både="" menn="" og="" kvinner="" med="" gwi="" at="" deres="" cai-verdier="" var="" høyere="" enn="" 90="" prosent="" av="">
4. Diskusjon
Denne studien, ved bruk av våre tidligere validerte plasma CNS-autoantistoffbiomarkører, viser at det var en forskjell mellom menn og kvinnelige veteraner med GWI, med mannlige veteraner som hadde signifikant høyere nivåer for 2 av de 10 autoantistoffene (tubulin, MAG) som er relatert til aksonal og oligodendrocyttfunksjoner (figur 2). Når man kombinerer alle autoantistoffene til CNS autoantistoff nevrodegenerativ indeks (CAI), er en betydelig
forskjell mellom menn med GWI og kvinner med GWI ble observert, slik at menn med GWI hadde mer total autoantistoffproteinbelastning og en signifikant høyere CAI-verdi. Vårt andre sett med analyser sammenlignet mannlige veteraner med GWI med mannlige GW-friske kontroller og gjentok deretter analysene for kvinnelige veteraner med GWI sammenlignet med friske GW-kvinner. Våre neste analyser sammenlignet mannlige veteraner med GWI med alle mannlige kontroller fra vår tidligere studie (friske GW-veteraner, ikke-veteraner med IBS eller ME/CFS) [19]. Vi utførte deretter de samme analysene og sammenlignet kvinnelige veteraner med GWI med den kombinerte kontrollgruppen for alle kvinner (ikke-veteraner med IBS og ME/CFS). Resultatene viste at menn med GWI hadde signifikant høyere nivåer av autoantistoffer for 9 av de 10 autoantistoffene sammenlignet med mannlige friske GW-veteraner eller med den kombinerte mannlige kontrollgruppen.
Kvinner med GWI viste signifikant høyere verdier for 2 av de 10 autoantistoffene sammenlignet med kvinnelige friske GW-veteraner og med 8 av 10 autoantistoffer sammenlignet med deres respektive kombinerte kvinnekontrollgruppe (ikke-veteraner med IBS og ME/CFS). CAI-analysene som sammenlignet GWI-menn med sin mannlige kontrollgruppe og GWI-kvinner med sin respektive kontrollgruppe, viste også signifikant høyere verdier for GWI-menn og -kvinner, med doble verdier sammenlignet med respektive kontroller. Disse resultatene legger til våre tidligere funn som antydet å bruke en cutoff på 30 eller mer på CAI-skåren, ville skille mellom GWI og andre kroniske lidelser. Disse resultatene indikerer at denne grensen samsvarer med både menn og kvinnelige veteraner med GWI. Selv om menn og kvinnelige veteraner med GWI hadde høyere autoantistoffnivåer enn deres respektive kontrollgrupper, skilte de seg bare fra hverandre på to CNS-autoantistoffproteiner. Imidlertid var den totale kombinerte CAI-skåren en signifikant høyere verdi for mennene med GWI. De to signifikant forskjellige proteinene inkluderte tubulin og MAG, som er relatert til aksonal og oligodendrocyttfunksjon, som har vært assosiert med historien om milde traumatiske hjerneskader (mTBI) og eksponering for kjemiske våpen. Disse resultatene samsvarer med våre tidligere studier som viser økte forekomster av mTBI og kjemiske våpeneksponeringer under krigen, spesielt hos mannlige veteraner med GWI [30,36,37].
Faktisk antydet denne multiple hit-hypotesen at de med både mTBI og kjemiske våpeneksponering ville rapportere mer kroniske helsesymptomer som kan være relatert til disse aksonale og myelinrelaterte patobiologiske markørene. Tilsvarende har Carney et al. sammenlignet kamperfaringer, yrkesrelaterte eksponeringer og andre tjenesterelaterte eksponeringer, og bruk av GW mannlige og kvinnelige veteraner i helsevesenet og rapporterte lignende militære erfaringer, men med mannlige veteraner som oftere deltok i kamprelaterte aktiviteter. Det ble imidlertid ikke funnet signifikante kjønnsforskjeller i eksponering for løsemidler/petrokjemikalier, infeksjonssykdommer, nevrotoksiner, varmestress, traumer eller stråling [38]. I tillegg skilte kvinneveteranene med GWI seg fra GW-kvinnelige friske kontroller på to markører, inkludert en glialmarkør (GFAP) og en neuronal cytoskelettmarkør (Tubulin). Disse resultatene tyder på at kvinner med GWI ser ut til å vise flere neuronale cytoskjelett- og nevroinflammatoriske endringer sammenlignet med friske GW-kontroller eller kvinner med IBS eller ME/CFS. De mannlige veteranene med GWI skilte seg fra de GW-friske hannene med høyere verdier på alle autoantistoffer bortsett fra den akutte gliale BBB-markøren S100B og CAI-verdien, som var det dobbelte av kontrollene.
Når kvinnene med GWI ble sammenlignet med den kombinerte kontrollgruppen, viste de høyere nivåer av autoantistoffer på alle markører bortsett fra gliamarkørene GFAP og S100B. Igjen var deres CAI-verdi nesten det dobbelte av de kombinerte kontrollene. I likhet med den tidligere analysen skilte de mannlige veteranene med GWI seg ikke fra sine respektive kontroller for glialaktivering og akutt BBB-markør S100B. Dette antyder at mannlige GWI-veteraner kan vise mer kronisk gliaaktivering, nevronal skade og nevroinflammasjon enn deres mannlige kontroller sunne og symptomatiske kolleger med IBS og ME/CFS fordi S100B er en markør for gjeldende BBB-forstyrrelse og GFAP er en markør for nåværende nevroinflammasjon [39,40]. Dette er fordi GFAP utskilles av aktiverte astrocytter, noe som fører til nevroinflammasjon [41–43]. Når det gjelder integrering av funnene våre innenfor det større omfanget av GWI-forskning som er relevant for kjønnsforskjeller, har det blitt vist at det er forskjeller i immuninflammatoriske markører og i den generelle frekvensen av helsesymptomer mellom GW-veteranmenn og -kvinner [5,8,13 ,44–46]. Den nåværende studien legger til litteraturen ved at GW-veteranmenn har høyere totale verdier av autoantistoffer (som vurdert av CAI-forholdet), og at funnene stemmer overens med menn og kvinner som potensielt kan oppleve økte autoantistoffer i tilsvarende grad, men med en mindre økning i autoantistoffer hos kvinner assosiert med større symptombyrde. Disse resultatene tyder på at ytterligere studier av sensitiviteten til CAI-grensen på 30 for både menn og kvinnelige veteraner med GWI er berettiget. Autoantistoffer mot nevrale proteiner i tillegg til å være blodbiomarkører er også indikasjoner på nevrodegenerasjon og kan forklare mekanismene for hjernesykdommer og aldringseffekter [26,47].
Fordeler med cistanche tubulosa-ekstrakt
Foreløpig er de eneste konsistente risikofaktorene for GWI kjemisk eksponering og historie med mTBI [30,36,37,48–51]. Disse kjemikaliene inkluderer pyridostigminbromid, plantevernmidler inkludert insektmidlene permetrin og lindan samt insektmiddelet, DEET (N, N-dietyl-m-toluamid), et organofosfat (OP) insektmidler og nervegasser, sarin og cyclosarin, som nå er kjent for å påvirke CNS ubetydelig eller kombinerte doser [3,14,15,48,51–58]. Undersøkelser av mekanismene som OP-forbindelser forårsaker nevrodegenerasjon har vist at OP-er øker aktiviteten og uttrykket av kalsium-calmodulin Kinase II (CaMKII) som forårsaker hyperfosforylering av nevrale proteiner, noe som fører til deres aggregering og bremse av aksonal transport, noe som resulterer i nevronal celledød [51,59–62]. I samsvar med dette er vårt tidligere funn at flyselskapsmannskaper som ble utsatt for OP-er utviklet autoimmune antistoffer mot nevrale proteiner [34]. Økte autoantistoffer mot nevronale proteiner som Tau, NFP, MAG, MBP og GFAP er i samsvar med hjerneavbildningsstudien i en annen gruppe flyselskaper som viste redusert hjernehvittstoffmikrostruktur og cerebral perfusjon, som kan være potensielle årsaker til kognitive svekkelser og humørunderskudd rapportert av flybesetningene [63]. Betydningen av dette funnet er at GFAP er en markør for astrocyttaktivering og astrocytter kan direkte samhandle med og begrense hjernevaskulatur inkludert kapillærer som er involvert i cerebral perfusjon og nevroinflammasjon. Helsesymptomer rapportert av GW-veteraner stemmer overens med følgetilstander etter eksponering for plantevernmidler som organofosfater, pyretroider og DEET [51,64,65].
Økte autoantistoffer mot nevrofilament-, tau-, tubulin- og myelinbasisproteiner, som er biomarkører for myelin og neuronale cytoskjelettforstyrrelser, inkludert mikrotubuli-ustabilitet, aksonal degenerasjon og endret aksonal transport, er funnet i mange celle- og dyrestudier av giftstoffinduserte modeller av GWI [66–74]. Resultatene våre er i samsvar med tidligere rapporter som viser økte ulike autoantistoffer i en mindre og deretter større studie av GW-veteranblodprøver [16,19,75–78]. Så vidt vi vet, er dette den første studien som vurderer kjønnseffektene av disse autoantistoffene hos veteraner med GWI sammenlignet med sunne og symptomatiske sammenligningsgrupper. Oppsummert viste resultatene av denne undersøkelsen om effekten av kjønn på blodbiomarkører at nivåene av autoantistoffer var signifikant høyere for både menn og kvinnelige GW-veteraner sammenlignet med kontroller [19]. Når det var en kjønnsforskjell, viste mannlige veteraner med GWI høyere nivåer av autoantistoffer så vel som den totale CAI-score enn kvinnelige veteraner med GWI. Dette samsvarer med situasjonen i krigsteatret, at selv om menn og kvinner hadde lignende militære erfaringer, deltok menn oftere i kamp og hadde høyere mTBI-rater [30,36–38]. Dette er ikke for å antyde at kvinnelige veteraner ikke har økte nivåer av andre symptomer på denne multifaktorielle lidelsen, men snarere at mannlige veteraner ser ut til å vise flere CNS-autoantistoffforskjeller enn kvinnelige veteraner som indikert av høyere CAI-totalverdier.
Begrensninger
Som de fleste studier hadde vår studie begrensninger. Vi hadde små gruppestørrelser i noen analyser som reduserte vår evne til å se forskjeller mellom gruppene. Dette gjaldt spesielt for kvinnenes sammenligninger. Fordi hovedfokuset i denne studien var å vurdere GWI vs. symptomatiske kontrollgrupper, hadde vi ikke en ikke-veteran sunn kontrollgruppe for sammenligning, noe som kan ha gitt mer klarhet i resultatene hvis den gruppen hadde blitt inkludert. I denne studien brukte vi Kansas-kriteriene for GWI som skulle ha ekskludert kjente tilfeller av lidelser inkludert Alzheimers sykdom (AD), Parkinsons sykdom (PD) og andre kroniske sykdommer som kunne ha stått for deres kroniske symptomer [27]. I denne studien demonstrerte vi assosiasjoner mellom autoantistoffer, spesielt hos GWI-veteraner, sammenlignet med sunne og symptomatiske kontroller stratifisert etter kjønn. Imidlertid er det tidsmessige forholdet uklart mellom disse forholdene og produksjonen av autoantistoffer. Mer forskning er nødvendig for å avgjøre om disse er blodbaserte CNS-proteiner fra eksponeringer for 30 år siden, eller om det er pågående CNS-endringer som fremkaller disse autoantistoffproteinene. Andre større studier med kvinnelige veteraner vil også bidra til ytterligere å validere den patobiologiske effekten av GWI på kvinnelige veteraner. En stor styrke ved vår studie er at den representerer både friske og symptomatiske GW-veterangrupper så vel som symptomatiske ikke-veterankontroller med ME/CFS eller IBS. Dette antyder at både menn og kvinnelige veteraner med GWI ikke bare skiller seg fra sine friske GW-veterankontroller, men også har flere CNS-forskjeller enn andre grupper av menn og kvinner med kroniske multisymptomsykdommer. I tillegg ble CNS-autoantistoffanalysene utført med laboratoriepersonalet blindet for saksstatusen til alle deltakerne.
5. Konklusjoner
I år er det 30-årsjubileet for Gulfkrigen 1990/1991. Gjennom det meste av denne tiden har det vært mangel på diagnostiske verktøy for nøyaktig å diagnostisere lidelsen, noe som har hindret både nøyaktige diagnoser og sårt tiltrengte behandlinger for veteraner. Vårt laboratorium var et av de første som foreslo og dokumenterte at GWI er relatert til kjemisk eksponering under krigen, og at disse eksponeringene påvirket CNS negativt. I tillegg har vi dokumentert forskjeller i autoantistoffer mellom GWI og GWhealthy og symptomatiske kontroller. Denne studien dokumenterer at det er en kjønnseffekt for disse gruppene med menn og kvinner med GWI som viser høyere nivåer av autoantistoffer enn deres respektive kontrollgrupper og med mannlige veteraner med GWI som viser den største belastningen av autoantistoffer. Etter ytterligere validering håper vi at vår nyutviklede CNS Autoantibody Neurodegeneration Index (CAI) summarisk poengsum på 30 eller mer kan brukes til å utvikle objektive diagnostiske markører for GWI og for å sammenligne behandlingsstudiers effektivitet for både menn og kvinnelige GW-veteraner.
Dette er vårt anti-tretthetsprodukt! Klikk på bildet for mer informasjon!
Referanser
1. Racgwi, R. Gulf War Illness and the Health of Gulf War Veterans: Research Recommendations; US Government Printing Office: Washington, DC, USA, 2008.
2. Racgwi, R. Gulf War Illness and the Health of Gulf War Veterans: Research Update and Recommendations, 2009–2013; US Government Printing Office: Washington, DC, USA, 2014.
3. Hvit, RF; Steele, L.; O'Callaghan, JP; Sullivan, K.; Binns, JH; Golomb, BA; Bloom, FE; Bunker, JA; Crawford, F.; Graves, JC; et al. Nyere forskning på Golfkrigssykdom og andre helseproblemer hos veteraner fra Gulfkrigen i 1991: Effekter av giftige eksponeringer under utplassering. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]
4. Sullivan, K.; Krengel, M.; Heboyan, V.; Schildroth, S.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N.; Coughlin, SS Prevalens og mønstre av symptomer blant kvinnelige veteraner fra 1991 Gulf War Era: 25 år senere. J. Women's Health 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]
5. Heboyan, V.; Krengel, M.; Sullivan, K.; Iobst, S.; Klimas, N.; Wilson, CC; Coughlin, SS Kjønnsforskjeller i Gulf War Illness: En reanalyse av data fra CDC Air Force-studien ved bruk av CDC og modifiserte kasusdefinisjoner i Kansas. J. Occup. Environ. Med. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]
6. Coughlin, SS; Heboyan, V.; Sullivan, K.; Krengel, M.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N. Kardiovaskulær sykdom blant kvinnelige veteraner fra 1991 Gulf War Era. J. Environ. Helsevitenskap. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]
7. Coughlin, SS; Krengel, M.; Sullivan, K.; Pierce, PF; Heboyan, V.; Wilson, CC En gjennomgang av epidemiologiske studier av helsen til Gulf War Women Veterans. J. Environ. Helsevitenskap. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]
8. Zundel, CG; Krengel, MH; Heeren, T.; Ja, MK; Grasso, CM; Janulewicz Lloyd, PA; Coughlin, SS; Sullivan, K. Rate of Chronic Medical Conditions in 1991 Gulf War Veterans Sammenlignet med den generelle befolkningen. Int. J. Environ. Res. Public Health 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]
9. Pierce, PF Overvåker helsen til kvinner i den persiske gulfkrigen. Federal Nursing Service Award. Mil. Med. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]
10. Pierce, PF; Antonakos, C.; Deroba, BA Utnyttelse av helsetjenester og tilfredshet med kjønnsspesifikke helseproblemer blant militærkvinner. Mil. Med. 1999, 164, 98–102. [CrossRef]
11. Wolfe, J.; Proctor, SP; Erickson, DJ; Hu, H. Risikofaktorer for multisymptom sykdom hos amerikanske hærveteraner fra Gulfkrigen. J. Occup. Environ. Med. 2002, 44, 271–281. [CrossRef]
12. Steele, L.; Sastre, A.; Jurkovich, MM; Cook, MR Komplekse faktorer i etiologien til Gulf War-sykdom: Krigstidseksponeringer og risikofaktorer i veteranundergrupper. Environ. Helseperspektiv. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]
13. Dursa, EK; Barth, SK; Porter, BW; Schneiderman, AI Health Status of Female and Male Gulf War and Gulf Era Veterans: A Population-Based Study. Women's Health Issues 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]
14. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Abdel-Rahman, AA; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Økt nevrotoksisitet etter samtidig eksponering for pyridostigminbromid, DEET og klorpyrifos. Fundam. Appl. Toxicol. 1996, 34, 201–222. [CrossRef] [PubMed]
15. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Nevrotoksisitet som følge av samtidig eksponering for pyridostigminbromid, deet og permetrin: Implikasjoner av kjemiske eksponeringer fra Golfkrigen. J. Toxicol. Environ. Helse 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]
16. Abou-Donia, MB; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Jacobson, E.; Elmasry, EM; Elkafrawy, P.; Neely, M.; Bass, CRD; Sullivan, K. Screening for nye biomarkører i sentralnervesystemet hos veteraner med Gulf War Illness. Neurotoksikol. Teratol. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]
17. Bowyer, JF; Sarkar, S.; Burks, SM; Hess, JN; Tolani, S.; O'Callaghan, JP; Hanig, JP Mikroglial aktivering og responser på vaskulatur som skyldes en akutt LPS-eksponering. Nevrotoksikologi 2020, 77, 181–192. [CrossRef]
18. Abdel-Rahman, A.; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Forstyrrelse av blod-hjerne-barrieren og nevronal celledød i cingulate cortex, dentate gyrus, thalamus og hypothalamus i en rottemodell av Gulf-War-syndrom. Neurobiol. Dis. 2002, 10, 306–326. [CrossRef]
19. Abou-Donia, MB; Lapadula, ES; Krengel, MH; Quinn, E.; LeClair, J.; Massaro, J.; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Abreu, M.; Klimas, NG; et al. Bruk av plasmaautoantistoffer fra sentralnervesystemproteiner for å skille veteraner med Gulfkrigssykdom fra sunne og symptomatiske kontroller. Hjernevitenskap. 2020, 10, 610. [CrossRef]
20. Lee, G.; Cowan, N.; Kirschner, M. Den primære strukturen og heterogeniteten til tau-protein fra musehjernen. Science 1988, 239, 285–288. [CrossRef]
21. Tagliaferro, P.; Ramos, AJ; Onaivi, ES; Evrard, SG; Lujilde, J.; Brusco, A. Neuronale cytoskjelett og synaptiske tettheter endres etter kronisk behandling med cannabinoidreseptoragonisten WIN 55,212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]
22. Laferrière, NB; MacRae, TH; Brown, DL Tubulinsyntese og montering i differensierende nevroner. Biochem. Cell Biol. 1997, 75, 103–117. [CrossRef]
23. Hoshi, M.; Akiyama, T.; Shinohara, Y.; Miyata, Y.; Ogawara, H.; Nishida, E.; Sakai, H. Protein-kinas-C-katalysert fosforylering av det mikrotubuli-bindende domenet til mikrotubuli-assosiert protein 2 hemmer dets evne til å indusere tubulinpolymerisasjon. Eur. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]
24. Jauch, EC; Lindsell, C.; Broderick, J.; Fagan, SC; Tilley, BC; Levine, SR Association of serielle biokjemiske markører med akutt iskemisk slag: The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rekombinant vevsplasminogenaktivator Stroke Study. Hjerneslag 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]
25. Kövesdi, E.; Lückl, J.; Bukovics, P.; Farkas, O.; Pál, J.; Czeiter, E.; Szellár, D.; Dóczi, T.; Komoly, S.; Büki, A. Oppdatering om proteinbiomarkører ved traumatisk hjerneskade med vekt på klinisk bruk hos voksne og pediatri. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]
26. Mayne, K.; White, JA; McMurran, CE; Rivera, FJ; de la Fuente, AG Aldring og nevrodegenerativ sykdom: Er det adaptive immunsystemet en venn eller fiende? Front. Aldrende Neurosci. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]
27. Steele, L. Prevalens og mønstre av Gulf War-sykdom i Kansas-veteraner: assosiasjon av symptomer med karakteristikker av person, sted og tidspunkt for militærtjeneste. Er. J. Epidemiol. 2000, 152, 992–1002. [CrossRef] [PubMed]
28. Fukuda, K.; Straus, SE; Hickie, I.; Sharpe, MC; Dobbins, JG; Komaroff, A. Det kroniske utmattelsessyndromet: En omfattende tilnærming til definisjonen og studien. International Chronic Fatigue Syndrome Study Group. Ann. Turnuskandidat. Med. 1994, 121, 953–959. [CrossRef]
29. Longstreth, GF; Thompson, WG; Chey, WD; Houghton, LA; Mearin, F.; Spiller, RC Funksjonelle tarmsykdommer. Gastroenterology 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]
30. Janulewicz, P.; Krengel, M.; Quinn, E.; Heeren, T.; Toomey, R.; Killiany, R.; Zundel, C.; Ajama, J.; O'Callaghan, J.; Steele, L.; et al. Multiple Hit-hypotesen for Gulf War Illness: Selvrapportert eksponering for kjemiske/biologiske våpen og mild traumatisk hjerneskade. Hjernevitenskap. 2018, 8, 198. [CrossRef]
31. Janulewicz, PA; Seth, RK; Carlson, JM; Ajama, J.; Quinn, E.; Heeren, T.; Klimas, N.; Lasley, SM; Horner, RD; Sullivan, K.; et al. Gut-Microbiome in Gulf War Veterans: En foreløpig rapport. Int. J. Environ. Res. Folkehelse 2019, 16, 751. [CrossRef]
32. Conboy, L.; St John, M.; Schnyer, R. Effektiviteten av akupunktur i behandlingen av Gulf War Illness. Contemp Clin. Forsøk 2012, 33, 557–562. [CrossRef]
33. Conboy, L.; Gerke, T.; Hsu, KY; St John, M.; Goldstein, M.; Schnyer, R. Effektiviteten av individualiserte akupunkturprotokoller i behandling av Gulf War Illness: A Pragmatic Randomized Clinical Trial. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]
34. Abou-Donia, MB; Abou-Donia, MM; Elmasry, EM; Monro, JA; Mulder, MFA Autoantistoffer mot nervesystemspesifikke proteiner er forhøyet i sera fra flybesetningsmedlemmer: Biomarkører for nervesystemskade. J. Toxicol. Environ. Helse A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]
35. Abou-Donia, MB; Suliman, HB; Siniscalco, D.; Antonucci, N.; ElKafrawy, P. De novo Blood Biomarkers in Autism: Autoantibodies against Neuronal and Glial Proteins. Oppførsel. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]
36. Ja, MK; Seichepine, DR; Janulewicz, PA; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Selvrapportert traumatisk hjerneskade, helse og hyppighet av kronisk multisymptomsykdom hos veteraner fra 1990-1991 Gulf-krigen. J. Head Trauma Rehabil. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]
37. Ja, MK; Janulewicz, PA; Seichepine, DR; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Flere milde traumatiske hjerneskader er assosiert med økte forekomster av helsesymptomer og Gulfkrigssykdom i en kohort av 1990-1991 Gulfkrigsveteraner. Hjernevitenskap. 2017, 7, 79. [CrossRef]
38. Carney, CP; Sampson, TR; Voelker, M.; Woolson, R.; Thorne, P.; Doebbeling, BN Kvinner i Gulf-krigen: Kamperfaring, eksponeringer og påfølgende helsehjelp. Mil. Med. 2003, 168, 654–661. [CrossRef]
39. Kapural, M.; Krizanac-Bengez, L.; Barnett, G.; Perl, J.; Masaryk, T.; Apollo, d.; Rasmussen, P.; Mayberg, MR; Janigro, D. Serum S-100beta som en mulig markør for forstyrrelse av blod-hjernebarriere. Brain Res. 2002, 940, 102–104. [CrossRef]
40. Siracusa, R.; Fusco, R.; Cuzzocrea, S. Astrocytter: Rolle og funksjoner i hjernepatologier. Front. Pharm. 2019, 10, 1114. [CrossRef]
41. O'Callaghan, JP; Jensen, KF; Miller, DB Kvantitative aspekter ved medikament- og giftstoffindusert astrogliose. Neurochem. Int. 1995, 26, 115–124. [CrossRef]
42. Eng, LF; Ghirnikar, RS GFAP og astrogliose. Hjernepatol. 1994, 4, 229–237. [CrossRef]
43. Aurell, A.; Rosengren, LE; Karlsson, B.; Olsson, JE; Zbornikova, V.; Haglid, KG Bestemmelse av S-100 og glialfibrillære sure proteinkonsentrasjoner i cerebrospinalvæske etter hjerneinfarkt. Slag 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]
44. Brown, MC; Sims, KJ; Gifford, EJ; Goldstein, KM; Johnson, MR; Williams, CD; Provenzale, D. Kjønnsbaserte forskjeller mellom 1990–1991 golfkrigsveteraner: Demografi, livsstilsatferd og helseforhold. Women's Health Issues 2019, 29 (Suppl. 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]
45. Craddock, TJ; Fritsch, P.; Rice, MA, Jr.; del Rosario, RM; Miller, DB; Fletcher, MA; Klimas, NG; Broderick, G. En rolle for en homeostatisk drift i fortsettelsen av kompleks kronisk sykdom: Gulf War Illness and chronic fatigue syndrome. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]
46. Smylie, AL; Broderick, G.; Fernandes, H.; Razdan, S.; Barnes, Z.; Collado, F.; Sol, C.; Fletcher, MA; Klimas, N. En sammenligning av kjønnsspesifikke immunsignaturer i Gulf War illness and chronic fatigue syndrome. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]
47. Lobo, PI Rollen til naturlige IgM-autoantistoffer (IgM-NAA) og IgM-anti-leukocyttantistoffer (IgM-ALA) i regulering av betennelse. Curr. Topp. Microbiol. Immunol. 2017, 408, 89–117.
48. Sullivan, K.; Krengel, M.; Bradford, W.; Stone, C.; Thompson, TA; Heeren, T.; White, RF Nevropsykologisk funksjon i militære plantevernmidler fra Gulf-krigen: Effekter på informasjonsbehandlingshastighet, oppmerksomhet og visuelt minne. Neurotoksikol. Teratol. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]
49. Chao, LL; Rothlind, JC; Cardenas, VA; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Effekter av lavt nivå eksponering for sarin og cyclosarin under Gulf-krigen i 1991 på hjernefunksjon og hjernestruktur hos amerikanske veteraner. Nevrotoksikologi 2010, 31, 493–501. [CrossRef]
50. Chao, LL; Abadjian, L.; Hlavin, J.; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Effekter av lav-nivå sarin og cyclosarin eksponering og Gulf War Illness på hjernens struktur og funksjon: En studie ved 4T. Nevrotoksikologi 2011, 32, 814–822. [CrossRef]
51. Golomb, BA Acetylkolinesterasehemmere og Gulfkrigssykdommer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]
52. Michalovicz, LT; Kelly, KA; Sullivan, K.; O'Callaghan, JP Acetylkolinesterasehemmereksponeringer som en initierende faktor i utviklingen av Gulf War Illness, en kronisk nevroimmun lidelse hos utplasserte veteraner. Neuropharmacology 2020, 171, 108073. [CrossRef]
53. O'Callaghan, JP; Kelly, KA; Locker, AR; Miller, DB; Lasley, SM Kortikosteron starter den nevroinflammatoriske responsen på DFP hos mus: Potensiell dyremodell av Gulf War Illness. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]
54. Winkenwerder, W. Miljøeksponeringsrapport: Sluttrapport om plantevernmidler US Department of Defense, Office of the Special Assistant to the Undersecretary of Defense (personell og beredskap) fra Gulf War Illnesses Medisinsk beredskap og militære utplasseringer; US Government Printing Office: Washington, DC, USA, 2003.
55. Cherry, N.; Creed, F.; Silman, A.; Dunn, G.; Baxter, D.; Smedley, J.; Taylor, S.; Macfarlane, GJ Helse og eksponeringer av krigsveteraner fra Storbritannias Gulf. Del II: Forholdet mellom helse og eksponering. Okkupere. Environ. Med. 2001, 58, 299–306. [CrossRef] [PubMed]
56. Haley, RW; Kurt, TL Selvrapportert eksponering for nevrotoksiske kjemiske kombinasjoner i Gulf-krigen. En tverrsnitts epidemiologisk studie. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]
57. Nisenbaum, R.; Barrett, DH; Reyes, M.; Reeves, WC-utplasseringsstressfaktorer og en kronisk multisymptomsykdom blant golfkrigsveteraner. J. Nerv. Mente. Dis. 2000, 188, 259–266. [CrossRef]
58. Sullivan, K.; Krengel, M.; Proctor, SP; Devine, S.; Heeren, T.; Hvit, RF kognitiv funksjon i behandlingssøkende golfkrigsveteraner: Pyridostigminbromidbruk og PTSD. J. Psychopathol. Oppførsel. Vurdere. 2003, 25, 95–103. [CrossRef] 59. Patton, SE; O'Callaghan, JP; Miller, DB; Abou-Donia, MB Effekt av oral administrering av tri-o-cresyl fosfat på in vitro fosforylering av membran og cytosoliske proteiner fra kyllingens hjerne. J. Neurochem. 1983, 41, 897–901. [CrossRef]
60. Lapadula, ES; Lapadula, DM; Abou-Donia, MB Biokjemiske endringer i isjiasnerven til høner behandlet med tri-o-kresylfosfat: Økt fosforylering av cytoskjelettproteiner. Neurochem. Int. 1992, 20, 247–255. [CrossRef]
61. Abou-Donia, MB Involvering av cytoskjelettproteiner i mekanismene for organofosforester-indusert forsinket nevrotoksisitet. Clin. Exp. Pharm. Physiol. 1995, 22, 358–359. [CrossRef]
62. Torres-Altoro, MI; Mathur, BN; Drerup, JM; Thomas, R.; Lovinger, DM; O'Callaghan, JP; Bibb, JA Organofosfater dysregulerer dopaminsignalering, glutamatergisk nevrotransmisjon og induserer nevronale skademarkører i striatum. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]
63. Reneman, L.; Schagen, SB; Mulder, M.; Mutsaerts, HJ; Hageman, G.; de Ruiter, MB Kognitiv svekkelse og tilhørende tap i hjernehvit mikrostruktur hos flybesetningsmedlemmer utsatt for motoroljedamp. Brain Imaging Behav. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]
64. Petras, JM Soman nevrotoksisitet. Fundam. Appl. Toxicol. 1981, 1, 242. [CrossRef]
65. Abdel-Rahman, AA; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Akutt eksponering for sarin øker blod-hjerne-barriere-permeabiliteten og induserer nevropatologiske endringer i rottehjernen: Dose-respons-forhold. Nevrovitenskap 2002, 113, 721–741. [CrossRef]
66. Belgrad, J.; De Pace, R.; Fields, RD Autophagy in Myelinating Glia. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]
67. Naughton, SX; Beck, WD; Wei, Z.; Qu, G.; Terry, AV, Jr. Multifunksjonelle forbindelser litiumklorid og metylenblått demper de negative effektene av diisopropylfluorfosfat på aksonal transport i rottekortikale nevroner. Toxicology 2020, 431, 152379. [CrossRef]
68. Naughton, SX; Terry, AV, Jr. Nevrotoksisitet ved akutt og gjentatt eksponering for organofosfat. Toksikologi 2018, 408, 101–112. [CrossRef]
69. Naughton, SX; Hernandez, CM; Beck, WD; Poddar, I.; Yanasak, N.; Lin, P.-C.; Terry, AV, Jr. Gjentatte eksponeringer for diisopropylfluorfosfat resulterer i strukturelle forstyrrelser av myeliniserte aksoner og vedvarende svekkelser av aksonal transport i hjernen til rotter. Toksikologi 2018, 406, 92–103. [CrossRef]
70. Gao, J.; Naughton, SX; Beck, WD; Hernandez, CM; Wu, G.; Wei, Z.; Yang, X.; Bartlett, MG; Terry, AV, Jr. Klorpyrifos og klorpyrifos okson svekker transporten av membranbundne organeller i rottekortikale aksoner. Nevrotoksikologi 2017, 62, 111–123. [CrossRef]
71. Qiang, L.; Rao, AN; Mostoslavsky, G.; James, MF; Comfort, N.; Sullivan, K.; Baas, PW Omprogrammerer celler fra Golfkrigsveteraner til nevroner for å studere Gulfkrigssykdom. Neurology 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]
72. Hernandez, CM; Beck, WD; Naughton, SX; Poddar, I.; Adam, B.-L.; Yanasak, N.; Middleton, C.; Terry, AV, Jr. Gjentatt eksponering for klorpyrifos fører til langvarig svekkelse av aksonal transport i den levende gnagerhjernen. Nevrotoksikologi 2015, 47, 17–26. [CrossRef]
73. Rao, AN; Patil, A.; Brodnik, ZD; Qiang, L.; España, RA; Sullivan, KA; Svart, MM; Baas, PW Farmakologisk økende acetylering av mikrotubulus korrigerer stressforverrede effekter av organofosfater på nevroner. Trafikk 2017, 18, 433–441. [CrossRef]
74. Terry, AV, Jr. Funksjonelle konsekvenser av gjentatt organofosfateksponering: Potensielle ikke-kolinerge mekanismer. Pharmacol. Ther. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]
75. Joshi, U.; Pearson, A.; Evans, JE; Langlois, H.; Saltiel, N.; Ojo, J.; Klimas, N.; Sullivan, K.; Keegan, AP; Oberlin, S.; et al. En permetrinmetabolitt er assosiert med adaptive immunresponser ved Gulf War Illness. Hjernens oppførsel. Immun. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]
76. Vojdani, A.; Thrasher, JD Cellulære og humorale immunabnormiteter hos veteraner fra Gulfkrigen. Environ. Helseperspektiv. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]
77. Skowera, A.; Stewart, E.; Davis, ET; Cleare, AJ; Unwin, C.; Hull, L.; Ismail, K.; Hossain, G.; Wessely, SC; Peakman, M. Antinuclear autoantibodies (ANA) i Gulf War-relatert sykdom og kronisk utmattelsessyndrom (CFS) pasienter. Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354–358. [CrossRef] [PubMed]
78. Hokama, Y.; Empey-Campora, C.; Hara, C.; Higa, N.; Siu, N.; Lau, R.; Kuribayashi, T.; Yabusaki, K. Akuttfasefosfolipider relatert til kardiolipin i mitokondrier i sera til pasienter med kronisk utmattelsessyndrom (CFS), kronisk Ciguatera-fiskforgiftning (CCFP) og andre sykdommer som tilskrives kjemikalier, Gulf-krigen og marine toksiner. J. Clin. Lab. Anal. 2008, 22, 99–105.
