Effekten av antidiabetikere hos rotter

Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

R Mary Sujin et al

Abstrakt

Optimaliseringen av denne studien er enanti-diabetikereffekt inyreav albino Wistar-rotter som bruker Gymnema Sylvestre (Retz) R.Br. urtepulver. De histopatologiske og biokjemiske assayene ble utført i organet og blodserumet tilnyre. De forskjellige konsentrasjonene av pulver behandlet som 5, 10, 15, 20/g/25 dager. Effekten av råmedisiner hos rotter reduserte kroppsvekten og omfanget avdiabetikereble vurdert inyreved å måle nivåene av utvalgte blodparametere av protein, glukose, kolesterol, insulin og triglyserider og effekten av histopatologi. De rå medisinene reduserte kropps- og nyrevekten til dyr og reduserte betydelige nivåer av insulin, protein, triglyserider, kolesterol og glukose. Dataene ble analysert ved hjelp av matematiske beregninger verdier ble uttrykt som signifikante.

Nøkkelord:Anti-diabetikereffekt, Gymnema Sylvestre, Histopatologisk og Biokjemisk analyse iNyre.

Cistanche tubulosa forhindrer nyresykdom, klikk her for å få prøven

Introduksjon

Urtemedisin er en tradisjonell medisinsk eller folkemedisinsk praksis basert på bruk av planter og planteekstrakter. Urtemedisiner er lett tilgjengelig på markedet fra helsekostbutikker uten resept og er mye brukt i India, Kina, USA og over hele verden. I følge en fersk undersøkelse informerer de fleste som bruker urtemedisiner ikke legen om forbruket, noe som kan forårsake unormale testresultater og forvirring i riktig diagnose. Interaksjoner med urter kan resultere i uventede konsentrasjoner av de terapeutiske legemidlene. Flere urteprodukter forstyrrer immunoassays som brukes til å overvåke konsentrasjoner av terapeutiske legemidler. Urtemedisiner kan også forårsake uønskede effekter. Derfor er den vanlige troen på at alt naturlig er trygt ikke riktig.

Gymnema Sylvestre er en stor treaktig klatrer. Dens hovedbestanddel er gymnemic syre som haranti-diabetikerog hyperglykemiegenskaper. Det fjerner smaken av sukker og antas å nøytralisere for mye sukker i kroppen ved diabetes mellitus¹.

Hele planten er magesyre, stimulerende, avføringsmiddel og vanndrivende. Det er bra for hoste, biliousness og såre øyne. Hvis bladene på planten tygges, undertrykkes smakssansen for søte og bitre stoffer.

Germansk syre består av molekyler hvis atomarrangement ligner det til glukosemolekyler. Disse molekylene fyller reseptorstedene på smaksløkene i en periode på en til to timer, og forhindrer derved at smaksløkene blir aktivert av sukkermolekyler som finnes i maten. Tilsvarende fyller de glukoselignende molekylene i gymnemic syre reseptorstedene i de absorberende ytre lagene av tarmen og hindrer derved tarmen i å absorbere sukkermolekylene.

Uten tvil, to av de mest oversett når det kommer til avgiftning er leveren og nyrene. Når leveren er overarbeidet, prøver nyrene å ta opp slakk. Nyrer er to bønneformede organer, hver på størrelse med ditt første. Selv om nyrene er små organer etter vekt, mottar de en enorm mengde (omtrent 20 prosent) av blodet som pumpes av hjertet. Hver dag behandler nyrene rundt 200 liter blod for å sile ut 2 liter avfallsprodukter og overflødig vann. Uten nyrene ville avfallsstoffer og giftstoffer bygge seg opp til farlige nivåer i blodet og deretter skade kroppen. Følgelig, gjennom giftig oppbygging eller diettforsømmelse, kan disse viktige giftfiltrerende organene bli betent, infisert og utvikle nyrestein eller svikte helt.

Som med praktisk talt alle organer i kroppen, er nyrene utsatt for en rekke lidelser og sykdommer. Nyreskade skjer vanligvis gradvis og uten symptomer, og det kan være først etter år med nyresykdom at nyrefunksjonen blir merkbart redusert. Ved nyresykdom kan man generelt miste opptil 75 prosent av nyrefunksjonene før effektene blir akutt tydelige. Hvis den ikke behandles, kan nyresykdom bli irreversibel og kan være en betydelig trussel mot helsen din. Personer med diabetes, høyt blodtrykk eller en familiehistorie med nyresykdom må også aktivt forebygge nyresykdom og holde organene i optimal tilstand.

Nyresykdom assosiert med aristolochic syre (kalt kinesisk urtenefropati) kan føre til sluttstadiet av nyresvikt relativt raskt. Kinesisk urt nefropati ble først identifisert i Belgia på 1990-tallet. Rundt 100 pasienter med nyresvikt ble funnet å ha tatt en "slankekur" som senere ble identifisert som aristolochic syre. Nyrebiopsiene blant disse pasientene var svært like og viste omfattende og alvorlig arrdannelse i nyrene. Minst 70 av disse pasientene trengte dialyse eller nyretransplantasjon. Ytterligere tilfeller av kinesisk urtenefropati ble senere identifisert i Frankrike, Storbritannia og USA. Som et resultat utstedte det amerikanske FDA i 2001 en alvorlig advarsel og importforbud for kosttilskudd som inneholder denne forbindelsen.

I denne studien er effektene av forskjellige konsentrasjoner av G. Sylvestre i albino Wistar-rottene gjennom histopatologisk og biokjemisk reaksjon hos rotter.

Materialer og metoder

Innsamling og tilberedning av råstoff

Planten ble samlet inn og matchet med herbariet til Holy Cross College i Nagercoil, Kanyakumari-distriktet, Tamilnadu-India. Prøvene ble skyggetørket og pulverisert grovt.

Forsøksdyr

Albino Wister-rotter av begge kjønn, som veide 180-210g, ble holdt i adskilte bur under standard miljøforhold med temperatur 20 til 30 ºC og fuktighet ble gitt med standard rottemat og vann ad libitum. De eksperimentelle prosedyrene ble utført i streng overholdelse av institusjonelle dyreetiske komitéforskrifter.

Studieprotokoll

En pilotstudie ble utført for å studere dose-respons-forholdet til plantepulveret til Gymnema, en dose på 5, 10, 15, 20, 25 gram med ris og melk i en periode på 25 dager.

Behandlingsprotokoll

Dyrene ble delt inn i 5 grupper på 5 dyr hver og behandlet i henhold til protokollen gitt nedenfor.

Kontrollgruppe (G1):

Behandlingsgruppe (G2): Behandlingsgruppe (G3): Behandlingsgruppe (G4): Behandlingsgruppe (G5):

Dyrene fikk et normalt kosthold med ris og melk i 25 dager.

Dyrene fikk 5 g pulver med ris og melk.

Dyrene fikk 10 g pulver med ris og melk.

Dyrene fikk 15 g pulver med ris og melk.

Dyrene fikk 20 g pulver med ris og melk.

Reduksjonen av kroppsvekt hos rotter ble gjort til å faste over natten etter forsøksperioden. De ble avlivet ved anestesi ved bruk av kloroformdamp og blod ble samlet ved hjertearterieblødning og overført til EDTA-behandlet rør umiddelbart. Blod ble deretter sentrifugert ved 4000 rpm i 10 minutter for å fjerne røde blodceller og gjenvinne plasma. Nyren ble dissekert ut, veid og bevart for histopatologiske studier. Nyrene fra forskjellige grupper ble veid og forskjeller i vekt ble notert.

Histopatolske studier

Mageseksjoner ble bevart i 10 prosent formalin. De ble farget med hematoxylin og eosin, de fargede seksjonene ble observert under mikroskop for å estimere omfanget av diabetisk Mellitus.

Biokjemiske tester

Estimering av glukose:Reagensblandingen (fosfatbuffer pH 7,5:250 mmol/1, fenol 5 mmol/1, 4- Aminoantipyrin 0,5 mmol/1, Glukoseoksidase (GOD) Større enn eller lik 10 KU/1 , Peroksidase (POD), større enn eller lik 1 KU/1) ble tatt i tre reagensrør hver 1000 µl standard (S), test (T) og blindprøve (B). 10 µl serum ble tilsatt til (T). Standard 10 µl/100 mg/dl løsning ble tilsatt til (S) og 10 µl destillert vann ble tilsatt til (B). Innholdet ble blandet godt og inkubert

i 10 minutter ved 37oC. Absorbansen til (S) og (T) ble avlest mot reagenset

(B) spektrofotometrisk. Intensiteten ble målt ved 505nm.
Estimat av protein:Biuret-reagensblandingen Natriumhydroksid 500 mmol/1, Kaliumnatriumtartrat 35 mmol/1, Kaliumjodid 30 mmol/1, Kobbersulfat 10 mmol/1) ble tatt i tre reagensrør hver 1000 µl standard (S) og test (T) blank. (B) og 10 ul serum ble tilsatt (T). Standard 10 µl/6 g/dl løsning ble tilsatt til standard (S) og 10 µl destillert vann ble tilsatt til (B). Innholdet ble blandet godt og inkubert i 10 minutter ved 37oC. Absorbansen til (S) og (T) ble avlest mot reagens (B) spektrofotometrisk. Intensiteten ble målt til 546nm.

Beregning av kolesterol:Reagensblandingen (Goods buffer pH 6,7:50 mmol/1, Phenol5 mmol/1, 4-Aminoantipyrin 0,3 mmol/1, Kolesterolesterase (CHE) Større enn eller lik 200 U/1, Kolesteroloksidase (CHOD) Større enn eller lik 50 U/1, Peroksidase (POD) Større enn eller lik 3 kU/1) ble tatt i tre reagensrør hver 1000 µl standard (S) og test (T) blank (B) og 10 ul serum ble tilsatt (T). Standard 10 µl/200 mg/dl løsning ble tilsatt til (S) og 10 µl destillert vann ble tilsatt til (B). Innholdet ble blandet godt og inkubert i 10 minutter ved 37oC. Absorbansen til (S) og (T) ble avlest mot reagens (B) spektrofotometrisk. Intensiteten ble målt ved 505nm.

Estimering av triglyserider:Reagensblandingen Goods buffer pH 7,2:50 mmol/1, 4-Klorfenol 4 mmol/1, ATP 2 mmol/1, Mg2 pluss 15 mmol/1, Glyserokinase (GK) Større enn eller lik til {{20}}.4 kU/1, Peroxide (POD) Større enn eller lik 2 kU/1, Lipoproteinlipase (LPL) Større enn eller lik 2kU/1, 4- Aminoantipyrin0,5 mmol/1, glyserol-3-fosfatoksidase større enn eller lik 0,5 kU/1) ble tatt i tre reagensrør hver 1000 µl standard (S) og test (T) blank (B) og 10 µl serum ble tilsatt (T). Standard 10 µl/200 mg/dl løsning ble tilsatt til (S) og 10 µl destillert vann ble tilsatt til (B). Innholdet ble blandet godt og inkubert i 10 minutter ved 37oC. Absorbansen til (S) og (T) ble avlest mot reagens (B) spektrofotometrisk. Intensiteten ble målt til 546nm.

Estimering av insulin:Den kvantitative målingen av insulin ble utført ved solid-fase kompetitiv enzym-koblet immunosorbent-analyse (ELISA). Insulin ble estimert i Vivek laboratorier, Nagercoil.

Statistisk analyse

Alle verdiene ble uttrykt som gjennomsnitt ± SD. Dataene ble analysert ved hjelp av matematiske beregninger verdier ble uttrykt som signifikante.

Resultater og diskusjon

Biokjemiske parametere

I denne undersøkelsen viste rotter matet med G. Sylvestre til G2 en reduksjon i kroppsvekt fra 178.0 ± 17.6 til 156 ± 12.2 gm. Tilsvarende viste G4 og G5 hos dyr matet med G3 en signifikant reduksjon sammenlignet med den første dagen på slutten av den 25. dagen (tabell 1.).

I G2 var det en liten økning (0.20 ± 0.05) sammenlignet med G1 (0.13 ± 0.02). Men G4 og G5 viste en reduksjon i insulinnivå sammenlignet med G1. G. Sylvestre påvirket signifikant plasmainsulinprofilen til normale hannalbinorotter ved høyere konsentrasjonsgrupper på henholdsvis G4 og G5 (tabell 2).

Glukosenivået viste en normal verdi på 88,98 ± 4,6, 84,87 ± 4,3 og 83,70 ± 4,2 i henholdsvis G1, G2 og G3. Men ved høyere konsentrasjoner av G4 og G5, sank glukoseinnholdet jevnt med en maksimal reduksjon ved G5. I høyere konsentrasjonsgrupper av G4 og G5 sank glukoseinnholdet jevnt med en maksimal reduksjon ved G5 (tabell 3.).

G2 og G3 klarte ikke å gi en statistisk signifikant reduksjon. Men G4 og G5 (7,94 ± 0.4 og 8.12 ± {{10}}.1mg/dl) viste en liten økning sammenlignet med G1 (7.16± 0.3 gm/dl). G. Sylvestre påvirker ikke plasmaproteinprofilen til normale albinorotter signifikant, selv opp til en høyere konsentrasjon av G5 (tabell 4.).

Triglyseridnivået viste en normal verdi på 51,47 ± 3,8, 44,75 ± 2,7 og 42,30 ± 3,7 gm/dl i henholdsvis G1, G2 og G3. Ved høyere konsentrasjonsgrupper av G4 og G5 sank imidlertid verdien jevnt med en maksimal reduksjon ved G5 (tabell 5.).

Kolesterolnivåforskjellen på 72,05 ± 4,0 og 49,40 ± 5,9 mg/dl ble notert hos rottene som ble matet med Gymnema til G4 og G5 sammenlignet med G1-verdien på 87,15 ± 3,6 mg/dl. Lavdosegruppen av G2 og G3 var lik normal (tabell 6.).

Histopatologiske studier

Resultatene av histopatologiske studier er vist på plate 1. Snittene fra G1 viste normal histologi av nyrene til rotter. De proksimale innviklede tubuli, distale convoluted tubuli og renal corpuscles med glomerulus og glomerulær kapsel er veldig klare og fremtredende. Nyrelegemet med visceralt lag, parietallag og kapselrom er tydelig observert. Dyr behandlet med pulver til G2 og G3 ble ikke særlig påvirket. Behandling G (4) og (5) av nyre hos dyr matet med pulver viser nekrose, vakuolering og forstyrrelse av glomerulære tubuli. Det var moderate degenerative forandringer og nekrose av epitelet i nyretubuli og glomeruli med både høye doser (15 og 20 g/kg kroppsvekt) av urtepulveret. Vakuolering ble også lagt merke til ved både doser G4 og G5; dette ble imidlertid ikke observert i lavdosegrupper med G2 og G3 kroppsvekt.

De signifikante endringene ble observert i nivåene av serumkolesterol og triglyseridnivåer hos dyr som ble matet med en lav dose G. Sylvestre, noe som kan skyldes normal diett og normale rotter som observert. I den høyere konsentrasjonen av G4 og G5 kroppsvekt var det en reduksjon i kolesterol som kan skyldes at gymnemagenin og gymnemic syrer interagerte med steroider, spesielt kolesterol og CA-avledede gallesyrer i tarmkanalene til rotter. Således kan reduksjonen i kolesterol skyldes fekal utskillelse av kolesterol som kan skyldes et avbrudd i dannelsen av miceller som inneholder kolesterol og gallesyrer i tarmen og den påfølgende forstyrrelsen av absorpsjon av kolesterol. Reduksjon i plasmakolesterol, triglyserider og nivåer av frie fettsyrer ble observert i to studier av diabetespasienter som fikk tilskudd av Gymnema i tillegg til deres vanlige antidiabetiske medisiner (f.eks. insulin, glibenklamid eller tolbutamid). disse nivåene økte gradvis fra baseline i kontrollgruppen pasienter som ikke tok medikamenter. Det skal bemerkes at lipidsenkning var et sekundært endepunkt i disse studiene, som ble designet for å demonstrere de antidiabetiske effektene av Gymnema.

Tradisjonell erfaring kan være til liten hjelp i erkjennelsen av skadelige interaksjoner med konvensjonelle legemidler^9,10. Dødelighet og atferdsendringer anses som grunnleggende parametere for å vurdere toksisiteten til ethvert urteprodukt. G. Sylvestre blader har blitt mye brukt som helsekost da brukerne ofte forventer vektreduksjon og forbedring av diabetes på grunn av deres evne til å undertrykke smaken av søthet og hemme glukoseabsorpsjon8.

I denne studien ble kroppsvektøkning og matinntak redusert på en doseavhengig måte hos rottene administrert med G. Sylvestre. Nedgangen i kroppsvektsøkning kan ha vært på grunn av nedgangen i matinntaket. Dessuten er dette plantepulveret kjent for å undertrykke reseptoren for smak av søtt på tungen kan være en annen årsak.

Doseavhengige endringer ble også observert i bukkehornkløverfrø. I den nåværende observasjonen ble det ikke observert noen signifikant dødelighet. Den mulige årsaken kan være at Gymnema ikke forstyrrer de ulike vitale funksjonene til dyret og dermed ikke utgjør alvorlig toksisitet som kan føre til at dyret dør. Bladene øker insulinnivået, ifølge forskning hos friske frivillige2, muligens på grunn av regenerering av -celler i bukspyttkjertelen³.

Giftige stoffer kan påvirke nyrene og svekke dens fysiologiske funksjoner. Disse effektene er detekterbare og/eller kvantifiserbare ved å krysssjekke de normalt forventede funksjonene til nyrene ved utskillelse av nitrogenholdige avfallsprodukter uten terskel fra metabolisme som urea og kreatinin. Ved å bestemme nyrens evne til å filtrere og reabsorbere de kroppens nødvendige terskelsubstanser som elektrolytter, kan også toksisitet til nyrene oppdages7. Noen forfattere har vist at estimering av urea- og kreatininnivåer ikke er sensitive nok til å oppdage et lavt nivå av nyretoksisitet eller -skade. Andre har observert at den absolutte nyrevekten er en relativt sensitiv indikator på nefrotoksisitet for kjente nefrotoksiske stoffer. Nefrotoksisitet har derfor blitt definert som økt nyrevekt (enten absolutt eller relativ) kombinert med en signifikant endring i minst én serumparameter ⁶.

De histopatologiske studiene ble utført i leveren til rotter. Leverfibrosen ble indusert av CCL4 og omfanget av sykdommen ble vurdert ved å måle nivået av HP og TBL ved bruk av Trigonella foenumgraecum¹¹Dyrebehandlinger med G2 og G3 var ikke mye påvirket av G. Sylvestre. Snitt av nyrene hos dyr matet med pulver til G4 og G5 viser nekrose, vakuolering og forstyrrelse av glomerulære tubuli. Det var moderate degenerative forandringer og nekrose av epitelet i nyretubuli og glomeruli med både høye doser (15 og 20 g/kg kroppsvekt) av urtepulveret. Vakuolering ble også lagt merke til ved begge doser; dette ble imidlertid ikke observert i lavdosegrupper av G2 og G3. Nekrose og cellulær infiltrasjon ble observert i noen av glomeruli og nyretubuli hos rottene i høydosegruppen.

Glomeruli, fordi de mottar en fjerdedel av hjertevolumet og perfuses ved det høyeste trykket av en hvilken som helst kapillærleie i kroppen, er sårbare for skade av en rekke medikamenter og andre giftige midler. Disse midlene kan føre til skade ved en av to grunnleggende mekanismer: 1) direkte, doserelatert toksisk skade; 2) indirekte, immunologisk mediert skade, i stor grad avhengig av dose. En nyre fra kontrolldyrene viste normal nyremorfologi. Fordi medisinske urter vanligvis er selvforeskrevet av forbrukerne, mangler anbefalinger for bruk av foreskrevne legemidler som dose, måte og hyppighet av administrering, som vurderes og kontrolleres av forskrivende lege. Disse faktorene øker risikoen for toksisitet av Gymnema ettersom forbrukere bruker ekstraktet så lenge tilstandene varer, og til og med ved økte doser. Gymnema Sylvestre-bladekstrakt: en 52-ukers dietttoksisitetsstudie i Wistar-rotter⁵.

I nyrene var de histopatologiske endringene de ved akutt tubulær nekrose med diffus interstitiell og glomerulær blødning. Dette antyder at irreversibel cellulær skade som påvirker epitelparenkymet og endotelcellene oppstod. Nyrehistologi hos behandlede rotter viste trekk i samsvar med nyreepitelskade fra toksiner. Mange urtepreparater har vist seg å vise renal tubulær nekrose som viser omfattende interstitiell fibrose og alvorlig tubulær tap som er mest fremtredende i den ytre cortex4 (Plate 1.).

Konklusjon

G. Sylvestre utgjør ikke en alvorlig trussel for diabetikere ved konsentrasjoner opp til 10 g/kg kroppsvekt. Høyere konsentrasjoner på 15 og 20 gm/kg kroppsvekt på grunn av histopatologiske endringer, er svært mye redusert, og doseringen på opptil 10gm/kg kroppsvekt påvirker ikke protein, glukose, insulin, kolesterol eller triglyserider. Derfor kan det anbefales at G. Sylvestre kan brukes ved ulike plager i begrenset dosering etter råd fra lege.

Referanser

1. Shanmugasundaram KR, Panneerselvam C, Sumudram P og Shanmugasundaram ER, 1983. Enzymeendringer og glukoseutnyttelse hos diabetiske kaniner effekten avGymnema Sylvestre, J. Etnopharmacol 2: 205-34.

2. Beckles GLA, American Diab AK, Mathur KK, Datta SK, Tandon og Dikshith TSS, 1998. Industrial Toxicology Research Centre,Diabetes Omsorg 21:1432-1438.

3. Mhasker KS og Caius JF, 1930. En studie av indiske medisinplanter. II.Gymnema SyvestreR.Br,,indisk. J. Med. Res. Memoarer 16: 72-75.

4.Vanherweghem JL, Depierreux M, Tielemans C, Abramowicz D, Dratwa M, Jadoul M, Richard C, Vandervelde D, Verbeelen D og Vanhaelen-Fastre R, 1993. Rapidly Progressive Interstitial Renal Fibrosis In YounWomen,kinesisk Urter Lancet 341 : 387–391.

5. Ogawa Y, Sekita K, Umemura T, Saito M, Ono A, Kawasaki Y, Uchida O, Matsushima Y, Inoue T og Kanno J,2004. Gymnema Sylvestrebladekstrakt: en 52-ukers dietttoksisitetsstudie i Wistar-rotter,Shokuhin Eiseigaku Zasshi, 45(1): 8-18.

6. Srivasta S, Srivastava AK, Patnaik GK og Dhawan BN. 1996. Effekt av picroliv på leverregenerering hos rotter,Fitoterapia, 67: 252-256.

7. Barzaghi N, Creama F, Gatti G, Pifferi G og Perucca E, 1990. Farmakokinetiske studier på et silybin-fosfatidylkolinkompleks, hos friske mennesker,Eur. J. Legemiddel Meta Farmakokinet 15: 333-338.

8. Ueno G, 1997. Søknader avGymnema sylvestreekstrakter på matvarer,Shokuhin til Kagaku 1 : 100-103.

9. De Smet PAGM, 1993.En introduksjon til urtefarmakoepidemiologi.J. Etnopharmacol 38: 197-208.

10. Atherton DJ. 1994, Mot sikrere bruk av tradisjonelle midler, er det nødvendig med større bevissthet om toksisitet.BMJ, 308: 673-674.

11. Santha Rani Thakur, Saraswathy GR, Maheswari E, Sunil Kumar N, Hazarathiah T, Sowmya K, Dwarakanadha Reddy P og Ramesh Kumar B, 2007. Inhibering av CCl4-indusert leverfibrose avTrigonella foenumgraecum L, Naturlig Produkt Utstråling 6(1): 11-17.