Totalt antall glykosider fra stammer av Cistanche Tubulosa lindrer depresjonslignende atferd: Toveis interaksjon mellom fytokjemikalier og tarmmikrobiota

for mer informasjon:ali.ma@wecistanche.com

Li Fan, et al

ABSTRAKT

Bakgrunn: Som den mest brukte nyre-yang tonifiserende urten i tradisjonell kinesisk medisin, tørkede saftige stilker avCistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) har vist seg å være effektiv i behandlingen av depresjon. Imidlertid forblir de antidepressive komponentene og deres underliggende mekanisme uklare.

Hensikt: For å utforske de aktive komponentene i CT(Cistanchetubulosa)mot depresjon, samt potensielle mekanismer. Studiedesign og metoder: Atferdsmessige fortvilelsestester ble brukt for å vurdere de antidepressive aktivitetene til polysakkarider, oligosakkarider og forskjellige glykosid-anrikede fraksjoner separert fra CT, så vel som de typiske tarmmikrobiota-metabolittene inkludert 3-hydroksyfenylpropionsyre ({{2 }}HPP) og hydroksytyrosol (HT). Videre ble effekten av bioaktive fraksjoner og metabolitter på modeller for kronisk uforutsigbart mildt stress (CUMS) utforsket med flere farmakodynamiske og biokjemiske analyser. Endringer i kolonhistologi og tarmbarrieren ble observert ved farging og immunhistokjemisk analyse. Tarmmikrobielle egenskaper og tryptofan-kynurenin-metabolisme ble utforsket ved bruk av henholdsvis 16S rRNA-sekvensering og western-blotting.

Resultater: Totalglykosider(TG) lindret dramatisk depresjonslignende atferd sammenlignet med forskjellige separerte fraksjoner, noe som gjenspeiles i de synergistiske effektene av fenyletanoid- og iridoidglykosider på hyperaktiveringen av hypothalamus-hypofyse-binyreaksen (HPA), alvorlig nevro- og perifer betennelse og mangler i 5-hydroksytryptamin (5-HT) og hjerneavledet nevrotrofisk faktor i hippocampus. Dessuten, TG(totalt glykosider)dempet lavgradig betennelse i tykktarm og tarmbarriereforstyrrelser, og forekomsten av flere bakterieslekter var sterkt korrelert med HPA-aksen og betennelse hos CUMS-rotter. Konsekvent ble uttrykket av indolamin 2, 3-dioksygenase 1 (IDO1) i tykktarmen betydelig redusert etter TG(totalt glykosider)administrering, ledsaget av undertrykkelse av tryptofan-kynurenin metabolisme. På den annen side utøvde HT også en markert antidepressiv effekt ved å forbedre HPA-aksefunksjonen, pro-inflammatorisk cytokinfrigjøring og tryptofan-kynurenin metabolisme, mens den i stor grad ikke var i stand til å justere den forstyrrede tarmmikrobiotaen på samme måte som TG. Overraskende nok, overlegne fluoksetin, kan TG og HT ytterligere forbedre dysfunksjon av hypothalamus-hypofyse-gonadeaksen og unormal syklisk nukleotidmetabolisme.

Nøkkelord: Cistanchetubulosa, totale glykosider, hydroksytyrosol, depresjon, tarmmikrobiota

Klikk for å cistanche deserticola ma produkt

Introduksjon

Depresjon er en kronisk, tilbakevendende og potensielt livstruende psykisk lidelse som rammer opptil 20 prosent av befolkningen på verdensbasis (Nabavi et al., 2017). For tiden, selv om mange antidepressiva er godkjent, er bivirkningene bekymringsfulle. Spesielt langtidsbehandling med selektive serotoninreopptakshemmere (SSRI) som fluoksetin, det viktigste farmakologiske middelet for depresjon, forverret problemer som kronisk seksuell dysfunksjon (Bijlsma et al., 2014); dette har trukket økende oppmerksomhet til oppdagelsen av nye antidepressiva fra naturlige urter (Wang et al., 2019). I tradisjonell kinesisk medisin (TCM)-teori, resulterer nyre-yang-mangel i ytelsestrekk som ligner på de kliniske symptomene på depresjon, som å føle seg nede, tap av interesse og sentimentalitet (Yang et al., 2020), noe som fremmer tankene å lindre depresjonslignende atferd ved å tonifisere nyre-yang. Tilfeldigvis har mange nyre-yang tonifiserende urter fordelen av å forbedre seksuell funksjon (Wu et al., 2015). Slike studier får oss til å ta hensyn til den potensielle anvendelsen avCistancherHerba, som er den mest brukte nyre-yang-tonifiserende urten i TCM og er effektiv i behandling av mannlig seksuell dysfunksjon (Wang et al., 2020), når det gjelder antidepressiv utvikling.CistancherHerba, offisielt registrert som de tørkede saftige stilkene avCistanchetubulosa(Schrenk) Wight (CT) ogCistanchedeserticola(YC Ma) i den kinesiske farmakopéen (Wang et al., 2017), har blitt brukt i Kina og andre østasiatiske land siden 1400-tallet for å behandle tilstander som nyre-yang-mangel, impotens og kvinnelig infertilitet. Moderne farmakologiske studier indikerer detCistancherHerba har flere bioaktiviteter, som immunitetsforbedring, nevrobeskyttelse, antioksidant-, antialdrings- og antifatigue-effekter (Wang et al., 2017). De nevrobeskyttende egenskapene tilCistancherHerba foreslår dets terapeutiske potensiale ved kognitiv-relaterte sykdommer som slag, depresjon og Alzheimers sykdom (Wang et al., 2020). I vår forrige studie fant vi at CT(Cistanchetubulosa)ekstrakt lindret depresjonslignende oppførselen til rotter med kronisk uforutsigbar mild stress (CUMS) (Li et al., 2018). Til dags dato, kjemisk analyse av CT(Cistanchetubulosa)viste at hovedbestanddelene inkluderer fenyletanoidglykosider, iridoidglykosider, polysakkarider og oligosakkarider (Jiang og Tu, 2009), men hvilken type forbindelse som spiller en dominerende rolle i dens antidepressive effekt er fortsatt uklar.

Tallrike studier har bekreftet at den fysiologiske virkningen av tarmen (spesielt kommensal mikrobiota) spiller en viktig rolle i utviklingen av depresjon og kan regulere det nevroendokrine, autonome nervesystemet og immunsystemet (Yang et al., 2020). Dessuten har forholdet mellom tryptofanmetabolisme, tarmmikrobiota og depresjon gradvis tiltrukket seg mye oppmerksomhet. Endret tarmmikrobiota kan aktivere tryptofan-kynurenin-banen, og deretter redusere perifer og cerebral tryptofan-tilgjengelighet, noe som resulterer i 5-HT-mangel (Agus et al., 2018). Vår forrige studie viste at fenyletanoidglykosider i CT(Cistanchetubulosa)har generelt lav biotilgjengelighet, og kan raskt metaboliseres til 3-hydroksyfenylpropionsyre (3-HPP) og hydroksytyrosol (HT) av tarmmikrobiotaen (Li et al., 2016). I tillegg, CT(Cistanchetubulosa)ekstrakt ble rapportert å gjenopprette tarmmikrobiota homeostase hos CUMS-rotter (Li et al., 2018). Basert på slik forskning, konkluderte vi at den toveis interaksjonen mellom fytokjemikaliene og tarmmikrobiotaen kan styre de antidepressive effektene av spesifikke bioaktive komponenter i CT(Cistanchetubulosa). Nærmere bestemt kan forbindelsene omdannes til absorberbare metabolitter (som 3-HPP og HT) i mage-tarmkanalen av tarmmikrobiota, og deretter ha antidepressive effekter. I sin tur kan bioaktive komponent-induserte tarmmikrobiota strukturelle endringer samtidig spille en viktig rolle i den antidepressive aktiviteten.

Her i vår studie brukte vi atferdsmessige fortvilelsestester for å vurdere de antidepressive aktivitetene til polysakkarider, oligosakkarider og forskjellige glykosideranrikede fraksjoner skilt fra CT(Cistanchetubulosa)vandig ekstrakt (CTE), og de typiske metabolittene fra tarmmikrobiota (inkludert 3-HPP og HT), som vi ytterligere bekreftet i en kronisk uforutsigbar mild stress-modell (CUMS) med flere farmakodynamiske og biokjemiske analyser. Deretter undersøkte vi om dens mekanisme mot depresjon var relevant for den toveis interaksjonen mellom fytokjemikalier og tarmmikrobiota.

Materialer og metoder

Materialer

Alle standarder brukt for kjemisk analyse ble kjøpt fra Durst (Sichuan, Kina). 3-HPP, HT, fluoksetin og imipramin ble kjøpt fra Aladdin (Shanghai, Kina). Det kvantitative BCA-proteinsettet ble kjøpt fra Boster (Wuhan, Kina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, Kina) ga 5-HT, BDNF, tumornekrosefaktor-alfa (TNF-), interleukin-1beta (IL-1) og interferon-gamma (IFN- ) sett med enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA). Kortikosteron (CORT), adrenokortikotropisk hormon (ACTH) og kortikotrofinfrigjørende hormon (CRH) ELISA-sett ble kjøpt fra MultiSciences (Hangzhou, Kina). Syklisk adenosinmonofosfat (cAMP), syklisk guanosinmonofosfat (cGMP), testosteron (T) og gonadotropinfrigjørende hormon (GnRH) ELISA-sett ble kjøpt fra Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, Kina). Tryptofan og kynurenin ELISA-sett ble oppnådd fra Small Molecule Antibodies (Bordeaux, Frankrike). Primære/sekundære antistoffer inkludert zonula occludens 1 (ZO-1), indolamin 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -aktin og HRP geit anti-kanin IgG (H pluss L) ble kjøpt fra Proteintech (Wuhan, Kina). Alle andre reagenser av analytisk kvalitet eller høyere renhet ble hentet fra kommersielle leverandører.

Fremstilling av forskjellige fraksjoner separert fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)

CT(Cistanchetubulosa)ble samlet inn i november 2015 i Hetian, Xinjiang, Kina, og autentisert av prof. Xiaobo Li. Kupongprøven (20151108) ble deponert ved School of Pharmacy ved Shanghai Jiao Tong University.

Knust prøver ble ekstrahert tre ganger med destillert vann (1:10, w/v) i 2 timer ved 80~90 ◦C for å oppnå CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)(avkastningen var 57,1 prosent ). CTE ble oppløst i destillert vann og deretter sakte omrørt med etanol (1:4, v/v) og plassert ved 4 ◦C i 24 timer. Deretter ble presipitatet og supernatanten samlet ved sentrifugering ved 4000 rpm i 20 minutter. Totalt antall polysakkarider (TP; utbyttet var 5,7 prosent) ble oppnådd ved vasking med 80 prosent etanol og deproteinisering med Savage-reagens tre ganger fra det oppsamlede bunnfallet. Den gjenværende supernatanten ble deretter kromatografert over en D101 mikroporøs harpikskolonne og eluert med destillert vann og 40% etanol. De eluerte vann- og 40 prosent etanolfraksjonene inneholdt totale oligosakkarider (TO; utbyttet var 35,1 prosent) ogTotalglykosider(TG; utbyttet var henholdsvis 12,1 prosent). TG(totalt glykosider)ble ytterligere eluert med destillert vann og 5 prosent, 10 prosent og 40 prosent etanol gjennom D101 mikroporøs harpiks igjen, og de eluerte fraksjonene på 5 prosent og 40 prosent etanol var totale iridoidglykosider (TG-IrG; utbyttet var 2,7 prosent) og totale fenyletanoidglykosider (TG-PhG; utbyttet var henholdsvis 8,7 prosent).

Kjemisk analyse

Først de viktigste kjemiske bestanddelene i forskjellige fraksjoner skilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)ble karakterisert ved UPLC-QTOF-MS. For det andre ble det relative innholdet av totale karbohydrater og glykosider bestemt ved UV-Vis-metoden. For det tredje ble hovedkomponentene (echinakosid, verbaskosid, er verbaskosid, 8-epilogansyre og teniposidsyre) kvantifisert ved en validert HPLC-metode. De detaljerte parametrene og metodevalideringen er vist i tilleggsmaterialet.

Dyreforsøk

De spesifikke dyreforsøksplanene er vist i fig. 1. Alle forsøksdyr ble holdt og akklimatisert i 1 uke før forsøkene i Laboratory Animal Center ved Shanghai Jiao Tong University (Shanghai, Kina), under kontrollerte romtemperaturer (25 ± 2) ◦C; 55 ± 10 prosent relativ fuktighet) med en lys-mørke-syklus på 12:12 timer. Denne forskningen ble utført i samsvar med SJTUs retningslinjer for stell og bruk av forsøksdyr. Dyrefasilitetene og protokollene ble godkjent av den dyreetiske komiteen til SJTU (nr. A2019008).

Ett hundre og femti ICR-hannmus (som veide 18–20 g, 6 uker gamle) ble kjøpt fra Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, Kina) og tilfeldig delt inn i 10 grupper (n=15/gruppe). Forsøkspersonene og dosene for atferdsmessige fortvilelse mus i hver gruppe er vist i tabell 1. Dosene av CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt) og dets separerte fraksjoner ble beregnet ved hjelp av følgende formel: dosering=4,55 g/kg.d.bw × utbytte, som ble bestemt i henhold til tre humanekvivalente doseberegninger basert på kroppsoverflateareal. Dosene av det positive stoffet imipramin og tarmmikrobiota-metabolitter (3-HPP og HT) ble satt opp i henhold til de tidligere studiene (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Etter intragastrisk administrering én gang daglig i 7 dager, ble åpen felttest (OFT), haleopphengstest (TST) og tvungen svømmetest (FST) utført på henholdsvis 8., 9. og 10. dag. De spesifikke metodene for atferdstestene er skissert i tilleggsmaterialet.

Syttito hannrotter Sprague-Dawley (vekt 160–180 g, 6 uker gamle) ble kjøpt fra Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, Kina). Før de formelle eksperimentene ble alle rottene utsatt for sukrosepreferansetesten (SPT) etter den tilsvarende treningen. Rottene ble delt inn i 8 grupper (n=9/gruppe) i henhold til deres sukrosepreferanse (Supplerende Fig. S1). Forsøkspersonene og dosene for rottene i hver gruppe er vist i tabell 1. Dosene ble satt opp i henhold til konverteringskoeffisienten mellom mus og rotte basert på deres effektive doser i atferdsmessige fortvilelsesmus. Og dosen av det positive kontrollmedisinen fluoksetin var i samsvar med forrige studie (Hou et al., 2017). Alle gruppene fikk en serie med kronisk uforutsigbart mildt stress (CUMS) bortsett fra kontrollgruppen. Stressfaktorer ble påført kontinuerlig og tilfeldig i 4 uker (se tilleggstabell S1 for detaljer). Mat og vann var fritt tilgjengelig for kontrollrottene, som forble uforstyrret i et annet rom, bortsett fra atferdstestene. Forsøkspersonene ble administrert intragastrisk 1 time før CUMS-prosedyren i løpet av 4 uker. Etter 28 dager med kontinuerlige stressfaktorer og medikamentadministrasjon ble OFT, SPT og FST utført på henholdsvis 29., 31. og 33. dag. De spesifikke metodene for atferdseksperimentene er vist i tilleggsmaterialet.

Prøveinnsamling og biokjemisk analyse

Etter atferdstestene ble de fastende rottene bedøvet med pentobarbitalnatrium, og fullblod ble samlet for å få serumprøver. Etter hjerteperfusjon med saltvann ble innholdet i hippocampus, tykktarmen og cecal samlet og lagret i -80 ◦C. Distale tykktarmssegmenter ble fjernet og fiksert i 4 prosent paraformaldehyd. Nivåene av CORT, CRH, ACTH, TNF-, IL-1, IFN-, cAMP, cGMP, T, GnRH, tryptofan og kynurenin i serumet, 5-HT, BDNF og TNF- i hippocampus, og TNF- og IFN- i tykktarmen ble målt i henhold til instruksjonene som fulgte med de tilsvarende ELISA-settene.

Histologi, immunhistokjemi og western-blotting-analyse

Hematoxylin og eosin (H&E) og Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS)-farging ble brukt for å observere de patologiske endringene i tykktarmsvev. I tillegg ble immunhistokjemivurderinger av disse seksjonene utført for å observere ZO-1-proteinekspresjon i tykktarmsepitelceller (Ding et al., 2020). Detaljer om prøveforberedelse og western-blotting-analyse for å bestemme IDO1-proteinekspresjon i tykktarmen og hippocampus er også beskrevet i tilleggsmaterialene.

Sammensetningsprofilanalyse av tarmmikrobiota

16S rRNA high-throughput sekvensering ble utført av MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, Kina), og den detaljerte metoden og databehandlingen er vist i tilleggsmaterialet.

Statistisk analyse

Dataene uttrykkes som gjennomsnitt ± standardfeil av gjennomsnittet (SEM). Enveis variansanalyse (ANOVA) ble brukt til å sammenligne flere grupper ved å bruke SPSS 20.0-programvare. En forskjell ble ansett som signifikant ved p < 0,05.="" korrelasjonene="" mellom="" tarmmikrober="" og="" visse="" depresjonsrelaterte="" fysiologiske="" faktorer="" ble="" analysert="" ved="" å="" bruke="" spearman-korrelasjonskoeffisienten="" basert="" på="">

Resultater

Kjemisk analyse av forskjellige fraksjoner separert fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)

Hovedkomponentene ble karakterisert ved bruk av UPLC-QTOF-MS (tilleggstabell S2 og fig. S2), og totalt 21 bestanddeler ble identifisert, inkludert 16 bestanddeler av fenyletanoidglykosider, 2 bestanddeler av fenolglykosider i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG og TG-PhG; og 3 bestanddeler av iridoidglykosider i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG og TG-IrG. Totalt sett var det relative innholdet av totale karbohydrater i TP og TO henholdsvis 60,3 prosent og 80,8 prosent. Det relative innholdet iTotalglykosideri TG var 87,7 prosent . Tilsvarende utgjorde fenyletanoid- og iridoidglykosider 86,7 prosent og 53,4 prosent av henholdsvis TG-PhG og TG-IrG. Innholdet av echinacoside, verbascoside, er verbascoside, 8-epilogansyre og teniposidsyre i hver fraksjon er vist i tabell 2, og HPLC-kromatogrammet og metodevalideringsdata er oppført i tilleggstabell S3 og fig. S3.

Effekter av forskjellige fraksjoner skilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)og de typiske metabolittene av tarmmikrobiota på atferdsmessige fortvilelsestester hos mus

Som vist i fig. 2, sammenlignet med kontrollgruppen, viste mus som ble utsatt for 7 dager med imipramin (positiv kontroll) administrering signifikante reduksjoner i immobilitetstidene i både FST og TST og viste ingen signifikant effekt på den totale tilbakelagte distanse i OFT . Lignende endringer ble også observert i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG og HT-grupper, noe som indikerer at CTE, TG(totalt glykosider), og HT utøvde den antidepressive aktiviteten og effektene var ikke relatert til eksitabilitet. Derfor TG(totalt glykosider)og HT var den dominerende bioaktive fraksjonen separert fra henholdsvis CTE og typiske metabolitter av tarmmikrobiota. Interessant nok ble ingen signifikante endringer i immobilitetstidene i FST vist etter TG-PhG og TG-IrG administrering sammenlignet med kontrollene, eller i TST etter TG-PhG administrering, noe som indikerer at tilstedeværelsen av fenylethanoid og iridoid glykosider kan være avgjørende for den antidepressive aktiviteten til CTE.

Farmakodynamiske effekter og biokjemiske endringer av forskjellige glykosidanrikede fraksjoner og HT på CUMS-rotter

Som vist i tabell 3, viste rotter som ble utsatt for 28 dager av CUMS-paradigmet betydelige reduksjoner (p < 0.001)="" i="" sukrosepreferanse="" i="" spt,="" totalt="" tilbakelagt="" distanse,="" og="" oppvekstnummer="" i="" oft,="" samt="" en="" signifikant="" økning="" (p="">< 0,01)="" i="" total="" immobilitetstid="" i="" fst="" sammenlignet="" med="" kontrollene,="" noe="" som="" tyder="" på="" induksjon="" av="" depresjonslignende="" fenotyper="" hos="" cums-rotter.="" de="" depressive="" ytelsene="" ble="" reversert="" i="" flx-gruppen="" (positiv="" kontroll).="" på="" samme="" måte="" resulterte="" cte-,="" tg-,="" tg-phg-,="" tg-irg-="" og="" ht-behandling="" i="" gjenoppretting="" av="" sukrosepreferanse="" til="" normale="" nivåer="" hos="" cums-rotter,="" som="" var="" 102,7="" prosent="" ,="" 94,1="" prosent="" ,="" 89,8="" prosent="" ,="" 91,9="" prosent="" og="" 94,3="" prosent="" av="" kontroller,="" henholdsvis.="" konsekvent="" i="" fst-,="" cte-="" og="" tg-gruppene="" viste="" de="" mest="" åpenbare="" effektene,="" og="" immobilitetstidene="" nådde="" henholdsvis="" 103,3="" prosent="" og="" 93,4="" prosent="" av="" kontrollgruppene,="" mens="" immobilitetstidene="" for="" tg-phg-,="" tg-irg-="" og="" ht-gruppene="" nådde="" akkurat="" 62,1="" prosent,="" 73,2="" prosent="" og="" 69,9="" prosent="" av="" kontrollgruppene.="" lignende="" signifikante="" økninger="" (p="">< 0,05)="" ble="" observert="" i="" total="" tilbakelagt="" distanse="" og="" oppdrettstall="" i="" oft="" etter="">(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG og HT-administrasjon, og TG-PhG og TG-IrG-behandling hadde en trend mot å revidere oppveksttallet hos CUMS-rotter. Resultatene indikerte at TG var den dominerende bioaktive antidepressive fraksjon skilt fra CTE, og fenyletanoid- og iridoidglykosider var uunnværlige for å utøve sin antidepressive effekt. Dessuten ble HT vist å være en av de aktive metabolittene til TG in vivo.

Konsekvent økte det å lide av CUMS nivåene av CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 og IFN- i serumet og TNF- i hippocampus hos rotter, sammenlignet med kontrollgruppen (p.< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG og HT, noe som indikerer at CTE, TG(totalt glykosider), og HT viste forbedringseffekter på hyperaktiveringen av HPA-aksen, alvorlig perifer og nevrale betennelse og mangler i {{0}}HT og BDNF. På samme måte reduserte TG-IrG og TG PhG-behandling nivåene av serum CORT, TNF- , IFN- og hippocampus TNF- , og økte nivået av hippocampus 5-HT hos CUMS-rotter (p < {{8}="" }.05).="" signifikante="" reduksjoner="" (p="">< 0.05)="" i="" nivåene="" av="" serum="" crf="" og="" acth="" ble="" også="" observert="" i="" tg-irg-gruppen="" sammenlignet="" med="" cums-gruppen.="" interessant="" nok="" var="" nivåene="" av="" serum="" cort,="" tnf-="" ,="" acth="" og="" crf="" i="" tg-phg-="" og="" tg-irg-gruppene="" signifikant="" høyere="" enn="" i="" tg-gruppen="" (p="">< 0,05),="" og="" nivåene="" av="" hippocampus="" 5-ht="" og="" bdnf="" viste="" det="" motsatte="" uttrykksmønsteret="" (p="">< 0,05).="" disse="" resultatene="" viste="" at="" effekten="" av="" tg-phg="" og="" tg-irg="" på="" hyperaktiviteten="" til="" hpa-aksen,="" perifer="" og="" neural="" betennelse="" og="" mangel="" på="" 5-ht="" var="" klart="" dårligere="" enn="" tg,="" noe="" som="" indikerer="" at="" fenyletanoid-="" og="" iridoidglykosider="" kan="" utøve="" synergistiske="" effekter="" på="" de="" ovennevnte="" flere="">

TG og HT regulerer HPG-aksen og syklisk nukleotidmetabolisme hos CUMS-rotter

Nivåene av T, GnRH, cAMP og cGMP og forholdet mellom cAMP og cGMP (cAMP/cGMP) i serumet som ble utsatt for CUMS ble målt, og resultatene er vist i tabell 4. Konsentrasjonene av T, GnRH, cAMP, og cAMP/cGMP i serumet ble signifikant redusert, og nivået av cGMP ble signifikant økt (p < 0.05)="" i="" cums-gruppen="" sammenlignet="" med="" kontrollene,="" noe="" som="" indikerer="" at="" utsatt="" for="" cums="" resulterte="" i="" undertrykkelse="" av="" hpg-aksen="" og="" syklisk="" nukleotidmetabolisme="" dysfunksjon.="" sammenlignet="" med="" cums-gruppen="" var="" det="" ingen="" signifikante="" endringer="" i="" flx-gruppen.="" overraskende="" nok,="" etter="">(totalt glykosider)og HT-behandling ble signifikante økninger (p < {0}}}.05)="" vist="" i="" nivåene="" av="" serum="" t,="" gnrh,="" camp="" og="" camp/cgmp,="" mens="" nivået="" av="" serum="" cgmp="" ble="" betydelig="" redusert="" (p="">< 0,05).="" disse="" resultatene="" indikerte="" at="">(totalt glykosider)og HT regulerte HPG-aksen og syklisk nukleotidmetabolisme, som var klart overlegen den positive kontrollen av fluoksetin.

TG og HT lindrer lavgradig betennelse i tykktarmen og forstyrrelse av tarmbarrieren hos CUMS-rotter

H&E-farging ble brukt for å vurdere tykktarmsmorfologiske skader, og ingen signifikante forskjeller i tykktarmen ble observert blant forsøksgruppene (fig. 4a). Videre ble også effektene av TG og HT på inflammasjon i tykktarmen og forstyrrelse av tarmbarrieren analysert (fig. 4b-d). Sammenlignet med kontrollgruppen, ble antall begerceller og tykkelsen på slimlaget redusert i CUMS-gruppen. Konsekvent ble proteinekspresjonen av ZO-1 og nivåene av IFN- og TNF- i tykktarmen signifikant redusert (p < 0.05)="" og="" økt="" (p="">< 0,05="" ),="" henholdsvis,="" noe="" som="" antyder="" at="" selv="" om="" ingen="" åpenbar="" histologisk="" skade="" ble="" indusert,="" resulterte="" utsatt="" for="" cums="" i="" lavgradig="" betennelse="" i="" tykktarmen="" og="" forstyrrelse="" av="" tarmbarrieren.="" etter="" fluoksetin,="">(totalt glykosider), og HT-behandling, ble antall begerceller og tykkelsen på slimlaget økt, og nivåene av colon IFN- og TNF- ble signifikant redusert (p < 0.05).="" i="" tillegg="" økte="" tg="" og="" ht="" signifikant="" (p="">< 0,05)="" proteinekspresjonen="" av="" zo-1="" til="" et="" nivå="" som="" ligner="" det="" for="" kontrollgruppen.="" disse="" resultatene="" viste="" at="">(totalt glykosider)og HT kan lindre lavgradig betennelse i tykktarmen og forstyrrelse av tarmbarrieren hos CUMS-rotter.

Effekter av TG og HT på sammensetning av tarmmikrobiota

Etter å ha fjernet ukvalifiserte sekvenser, ble det oppnådd totalt 1 874 721 effektive avlesninger. Resultatene for alfa-diversitet (fig. 5a) og beta-diversitet (fig. 5b) viste at selv om rikdommen (Chao) og diversiteten (Shannon) til tarmmikrobiotaen i cecalinnholdet ikke var forskjellig, var den generelle strukturen til tarmmikrobiotaen i plottet for hovedkoordinatanalyse (PCoA) indikerte en slående forskjell mellom kontroll- og CUMS-grupper. Dessuten, TG(totalt glykosider)og HT-behandling økte signifikant bakterierikheten til CUMS-rotter og induserte markante forskjeller i PCoA-plottet sammenlignet med de for CUMS-rotter, og viste klare likheter med kontrollene, spesielt når TG(totalt glykosider)ble analysert.

De taksonomiske endringene i mikrobiota bekreftet videre at TG(totalt glykosider)utøvde en dramatisk regulatorisk effekt på sammensetningen av tarmmikrobiota. Etter TG(totalt glykosider)administrasjon, ble forekomsten av flertallet av endrede taxa hos CUMS-rotter reversert til et nivå som ligner på kontrollgruppen. En betydelig reduksjon (14,2 prosent , p < 0,05)="" og="" berikelse="" (53,6="" prosent="" ,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(totalt glykosider)gruppe sammenlignet med henholdsvis CUMS-gruppe (fig. 5c). På familienivå (tilleggstabell S4) reduserte TG konsekvent forekomsten av Ruminococcaceae (phylum Firmicutes) og Peptococcaceae (phylum Firmicutes) med henholdsvis 33,9 prosent og 82,9 prosent sammenlignet med CUMS-gruppen (p < 0).="" {{10}}5).="" motsatt="" eksisterte="" signifikante="" berikelser="" i="" mengden="" av="" familien="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78,4="" prosent,="" p="">< 0,05)="" og="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77,3="" prosent,="" p="">< 0,05)="" i="" tg-gruppen.="" konsekvent="" på="" slektsnivå="" (fig.="" 5d),="" forekomsten="" av="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" uklassifisert_f_ruminococcaceae="" (medlemmer="" av="" familien="" rumino-coccaceae),="" og="" peptococcus="" (et="" medlem="" av="" familien="" peptococcaceae)="" ble="" betydelig="" redusert="" mens="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (medlemmer="" av="" familien="" erysipelotrichaceae)="" og="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (et="" medlem="" av="" familien="" muribaculaceae)="" viste="" høyere="" forekomster="" i="" tg-gruppen="" enn="" de="" i="" cums-gruppen="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Korrelasjonsanalyse av endrede mikrobielle slekter påvirket av TG(totalt glykosider)og HT, HPA-akse-relaterte hormoner, pro-inflammatoriske cytokiner, 5-HT og BDNF

For å belyse assosiasjonene mellom endringer i tarmmikrobiotasammensetningen påvirket av TG(totalt glykosider)og HT, og tilsvarende depresjonsrelaterte egenskaper, ble Spearmans korrelasjonsanalyse utført. Som vist i fig. 6 var nivåene av 5-HT og BDNF i hippocampus bare signifikant positivt korrelert med norank_f_Muribaculaceae. Ellers kan klare korrelasjoner identifiseres mellom de endrede mikrobielle slektene og HPA-akserelaterte hormoner. Spesielt var Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea og Peptococcus sterkt relatert til HPA-aksefunksjonen. Serum CORT, CRF og ACTH hadde negative korrelasjoner med Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae og norank_f_Erysipelotrichacea, og positive assosiasjoner med Peptococcus. Videre viste Dubosiella og norank_f_ Erysipelotrichacea negative assosiasjoner med colon IFN- og hippocampal TNF-, mens lignende forhold eksisterte i Allobaculum, Harryfinita og serum og hippocampal TNF-, så vel som i norank _f_Lachnospiracea og serum IFN- og TNF-. I motsetning til dette var Peptococcus positivt assosiert med colon TNF- og serum TNF-. På samme måte var norank_f_Muribaculaceae positivt relatert til serum IFN- og TNF-. Disse resultatene indikerte at de endrede mikrobielle slektene, spesielt visse slekter som tilhører familien Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae og Muribaculaceae, som var spesifikt påvirket av TG, viste sterke assosiasjoner med HPA-akserelaterte hormoner og pro-inflammatoriske cytokiner samtidig, noe som demonstrerte den kritiske rollen av tarmmikrobiota for å regulere HPA-aksens funksjon og betennelse.

TG(totalt glykosider)og HT hemmer tryptofan-kynurenin-metabolismen hos CUMS-rotter

Effektene av TG(totalt glykosider)og HT på nivåene av tryptofan og kynurenin i serumet til rotter, så vel som uttrykket av IDO1 i tykktarmen og hippocampus, ble bestemt. Som vist i fig. 7 og fig. 8, sammenlignet med kontrollgruppen, ble nivået av tryptofan i serumet betydelig redusert i CUMS-gruppen, i motsetning til det økte nivået av kynurenin og kynurenin-til-tryptofan-forholdet (Kyn /Trp) og IDO1-proteinekspresjon i tykktarmen og hippocampus. Sammenlignet med CUMS-gruppen var serum Kyn/Trp i FLX-gruppen betydelig redusert (p< 0.05).="" tg="">(totalt glykosider)og HT-behandling resulterte i en signifikant økning i serumtryptofannivået hos CUMS-rotter (p < {{0}}.05),="" og="" en="" reduksjon="" i="" nivåene="" av="" serum="" kynurenin="" og="" kyn/trp="" (p="">< 0,05).="" i="" tillegg="" hemmet="" tg="" signifikant="" ekspresjonen="" av="" ido1-protein="" i="" tykktarmen="" til="" cums-rotter="" (p="">< 0,05),="" mens="" en="" ikke-signifikant="" forskjell="" i="" uttrykket="" av="" ido1-protein="" i="" hippocampus="" ble="" observert="" mellom="" cums-="" og="" tg-gruppene.="" imidlertid="" var="" effekten="" av="" ht="" på="" uttrykket="" av="" ido1-protein="" i="" tykktarmen="" og="" hippocampus="" i="" motsetning="" til="" tg,="" noe="" som="" indikerer="" at="" tg="" og="" ht="" hemmet="" tryptofan-kynurenin-metabolismen="" ved="" å="" redusere="" uttrykket="" av="" ido1="" i="" henholdsvis="" tykktarmen="" og="" hippocampus="" til="" cums-rotter.="">

Diskusjon

I denne studien ble to forskjellige dyremodeller brukt for å screene for bioaktive forbindelser i CT(Cistanchetubulosa)som lindrer depresjonslignende atferd for første gang. TP og TO var mest sannsynlig ineffektive ingredienser i CTE, mens TG(totalt glykosider)utviste mest potensial i behandlingen av depresjon. Tidligere studier på CT(Cistanchetubulosa), i tillegg tilCistancheplanter, har stort sett fokusert på bioaktivitetene til fenyletanoidglykosider med det høyeste innholdet og neglisjert viktigheten av iridoidglykosider og andre mindre rikelige ingredienser. Interessant nok viste studien vår at fenyletanoid- og iridoidglykosider viste synergistiske effekter på hyperaktiviteten til HPA-aksen, alvorlig perifer og neural betennelse og mangler i hippocampus 5-HT og BDNF, som kan være den kritiske årsaken til det fordelaktige antidepressivet. effekt av TG(totalt glykosider). Disse resultatene antyder videre multikomponent- og multitarget-egenskapene til urtemedisin og minner oss om at bestanddelene med lavere nivåer, til og med sporingredienser, også kan spille en nøkkelrolle i farmakologiske effekter.

Kronisk stress induserer hyperaktiviteten til HPA-aksen, som fremmer utbruddet av depresjon, samt undertrykkelse av HPG-aksen via redusert GnRH-frigjøring og/eller hypofysefølsomhet av GnRH (Kirby et al., 2009). I mellomtiden er cAMP og cGMP viktige mellomliggende knutepunkter som stolte på mange nevrotransmittere og hormoner for å utøve sine fysiologiske effekter (Siawrys et al., 2002). Nyere studier har konsekvent vist at forekomsten av nyre-yang-mangel er nært knyttet til dysfunksjon av hypothalamus-hypofyse-målkjertelaksen (Zhang et al., 2019). Ved nyre-yang-mangelsyndrom er det også observert markerte reduksjoner i serumnivåene av cAMP og cAMP/cGMP. I denne studien fant vi at TG(totalt glykosider)kunne hemme nivåene av serum CORT, CRF og ACTH, og øke serum-T- og GnRH-innhold i CUMS-rotter, noe som indikerer gjenoppretting av HPA- og HPG-aksedysfunksjon etter TG-administrasjon. I tillegg har TG(totalt glykosider)reverserte en signifikant reduksjon i nivået av serum cAMP/cGMP hos rotter utsatt for CUMS. Dermed den potensielle underliggende mekanismen til CT(Cistanchetubulosa) i behandling av depresjon og nyre-yang-mangel kan være delvis lik og fortjener å bli utforsket videre. Dessuten er produksjonen av seksuell lyst og atferd en kompleks nevral refleksprosess. Kjønnshormoner er viktige kilder til sentral seksuell spenning og mangel på kjønnshormoner kan forårsake mindre seksuell lyst eller seksuell dysfunksjon (Holloway og Wylie, 2015). Spesielt hemmer overdreven 5-HT frigjøringen av GnRH, som er en dominerende årsak til forekomsten av kronisk seksuell dysfunksjon etter langtidsbehandling med SSRI (Prasad et al., 2015). I vår studie var fluoksetin (representativ for SSRI) ineffektivt i HPG-aksens dysfunksjon. Imidlertid, selv om TG(totalt glykosider)betydelig forbedret nivået av 5-HT i hippocampus, lignende endringer i serum T- og GnRH-nivåer ble også observert, og dermed forbedret undertrykkelsen av HPG-aksen. Disse resultatene viser den klare fordelen med CT(Cistanchetubulosa) i behandling av depresjon, og den iboende mekanismen som er ansvarlig for disse effektene må studeres videre.

Økende bevis har vist at tarmen er et potensielt mål for behandling av kroniske sykdommer ved bruk av naturlige forbindelser med lav biotilgjengelighet (Zhou et al., 2020). Nyere forskning (Wei et al., 2019) har indikert at CUMS-behandling induserer fekale mikrobiomendringer og tarmbarrieredefekter, som letter bakteriell invasjon i tykktarmsslimhinnen og forverrer betennelsesreaksjoner i tykktarmen. I samsvar med denne rapporten, viste resultatene våre at 4 uker med CUMS-eksponering induserte en omfattende utarming av begercelleantall og slimlagtykkelse i rottetykktarmen, samt utbruddet av tarmbarriereforstyrrelser representert ved økt tarmpermeabilitet, som ble bestemt av måling av ZO-1-proteinet. I tillegg ble økt uttrykk for pro-inflammatoriske faktorer (som TNF- og IFN-) observert i tykktarmen. Følgelig indikerte disse funnene at selv om ingen åpenbar histologisk skade ble indusert, initierte CUMS-behandling kolonbetennelse og forstyrrelse av tarmbarrieren. Tidligere studier har rapportert at CT utøvde forbedret effekt for å forhindre DSS-indusert kolitt hos mus (Jia et al., 2014). Inkonsekvent, TG(totalt glykosider)ble også vist å lindre lavgradig betennelse i tykktarms- og tarmbarriereforstyrrelser hos CUMS-rotter, noe som understreker potensialet for klinisk behandling av tykktarmsbetennelsesrelaterte sykdommer.

Omfattende studier har også vist at forholdet mellom kommensal tarmmikrobiota, HPA-aksen og betennelse er komplekst og spiller en avgjørende rolle i utviklingen av depresjon (Misiak, et al., 2020). Endringer i sammensetningen av tarmmikrobiota kan bidra til økt frigjøring av cytokiner og syntese av små bioaktive molekyler (Du et al., 2020). Visse cytokiner (som TNF-) kan passere gjennom blod-hjerne-barrieren og er potente aktivatorer av HPA-aksen (Misiak et al., 2020). I sin tur kan hyperaktiveringen av HPA-aksen bidra til tarmmikrobiota dysbiose, kronisk betennelse i tykktarmen og endret tarmpermeabilitet (Misiak et al., 2020). I samsvar med tidligere studier er TG-medisinert modifikasjon av tarmmikrobiotaen sannsynligvis ansvarlig for dens forbedrende effekt på depresjon. Vi observerte at TG(totalt glykosider)reverserte mengden av mikrobielle taxaer på forskjellige nivåer hos rotter utsatt for CUMS til et nivå som ligner på kontrollene. Spesielt ble de viktigste endrede slektene som tilhører familien Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae og Muribaculaceae funnet å være sterkt korrelert med HPA-aksen og betennelse. I samsvar med resultatene våre har familie Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae og Muribaculaceae blitt rapportert å spille en viktig rolle i å opprettholde slimhinnebarriereintegritet og forekomst av betennelse (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Derfor antok vi at TG kunne moderere forekomsten av noen slekter tildelt familien Erysipelotrichacea, Peptococcaceae og Muribaculaceae, og deretter lindre lavgradig betennelse i tykktarmen, hyperaktivitet av HPA-aksen og forstyrrelse av slimhinnebarriereintegritet. Interessant nok var det i vår studie at bare én slekt kalt nor ank_f_Muribaculaceae var korrelert med 5-HT og BDNF i hippocampus. Den spesifikke mekanismen for forholdet er fortsatt uklar og må undersøkes nærmere. Ellers tyder funnene også på at det er ekstremt vanskelig for flertallet av de endrede slektene forårsaket av TG å direkte påvirke nivåene av 5-HT i hippocampus. For å forklare hvordan endringer i sammensetningen av tarmmikrobiota påvirker nivået av hippocampus 5-HT etter TG-behandling, fanget det intrikate forholdet mellom tryptofanmetabolisme, HPA-aksen, inflammatoriske cytokiner og 5-HT vår oppmerksomhet. Tryptofan er en essensiell aminosyre for mennesker, og mindre enn 1 prosent brukes i proteinsyntese, hvor majoriteten (over 90 prosent) blir omdannet av IDO1 og tryptofan 2,3-dioksygenase 2 (TDO2) til kynureniner, og ca. 5 prosent blir drevet av tryptofanhydroksylase nedover serotoninbanen (Duan, et al. 2018). Nivået av 5-HT i hjernen avhenger i stor grad av tilgjengeligheten av perifer tryptofan, gitt at tryptofan transporteres inn i hjernen via nøytrale aminosyretransportører (Duan et al., 2018). IDO1, det hastighetsbegrensende enzymet i det første trinnet av kynurenin-veien, induseres primært av IFN- og andre pro-inflammatoriske cytokiner, som IL-1 og TNF- (Kennedy et al., 2017), som ble vist å være assosiert med tarmmikrobiota i vår studie. Som rapportert metaboliseres mer tryptofan gjennom kynurenin-veien, og reduserer derved konkurransedyktig konverteringen av tryptofan til 5-HT, og kobler til den reduserte 5-HT som vanligvis finnes ved depresjon (O'Mahony et al., 2015). Dermed er lavere tryptofannivåer og høyere Kyn/Trp vanlig og sammenfaller med økt risiko for depressiv stemning. Etter TG-administrasjon ble overekspresjonen av IDO1 i tykktarmen hemmet, noe som resulterte i økte serumtryptofannivåer og en reduksjon i serum Kyn/Trp, som avslørte den potensielle koblingen mellom tarmmikrobiota og hippocampus 5-HT-nivå påvirket av TG. I mellomtiden er BDNF, et nevrotrofinfamiliemedlem, avgjørende for celledifferensiering, nevronal overlevelse, synapsedannelse og nevroplastisitetsprosesser ved depresjon (Greenberg et al., 2009). Nyere studier har vist at BDNF har blitt funnet å være nært assosiert med tarmslimhinnebarrierefunksjon og tarmmikrobiota (Maqsood og Stone, 2016). I tillegg har endringene i tarmmikrobiota blitt rapportert å ha potensial til å øke nivåene av BDNF-uttrykk og dermed påvirke utviklingen av depressiv-lignende atferd (Du et al., 2020). I likhet med 5-HT-variasjon var det imidlertid ekstremt umulig for de fleste endrede slekter forårsaket av TG i vår studie å direkte påvirke nivåene av BDNF i hippocampus, og den iboende molekylære forbindelsen og mekanismen trenger ytterligere undersøkelse.

I kontrast, HT, en tarmmikrobiota-metabolitt av TG(totalt glykosider), viste også en antidepressiv effekt i denne studien, som er i samsvar med dens fordelaktige nevrobeskyttende aktivitet (Hu et al., 2014). Bekymringsfullt kan HT også moderere pro-inflammatoriske cytokiner, HPA- og HPG-akserelaterte hormoner og hippocampus 5-HT-konsentrasjoner til et nivå som ligner på kontrollene i CUMS-rotter, mens de fleste av de endrede mikrobielle slektene påvirket av HT hadde svake korrelasjoner med de ovennevnte fysiologiske indeksene, noe som tyder på at tarmmikrobiotaen kanskje ikke er målet for den antidepressive aktiviteten til HT. Videre undertrykte HT overekspresjonen av IDO1 i hippocampus, men ikke tykktarmen, ledsaget av økte serumtryptofannivåer. Forekomsten av de tilsynelatende forskjellene mellom TG(totalt glykosider)og HT kan skyldes den utmerkede absorpsjonen av HT i blodet og kapasiteten for HT til å krysse blod-hjerne-barrieren (Robles-Almazan et al., 2018), noe som også indikerer at den sterke metabolske kapasiteten til tarmmikrobiotaen er spesielt viktig i den antidepressive aktiviteten til TG, i tillegg til dens fysiologiske funksjoner. Derfor har vi foreløpig bevist at den toveis interaksjonen mellom fytokjemikaliene og tarmmikrobiota spiller en kritisk rolle i behandlingen av depresjon med TG-administrasjon (som vist i fig. 9).

Konklusjon

Oppsummert, TG(totalt glykosider)var hovedsakelig ansvarlig for den antidepressive aktiviteten til CT(Cistanchetubulosa), som gjenspeiles i de synergistiske effektene av fenyletanoid- og iridoidglykosider på hyperaktivering av HPA-aksen, alvorlig perifer og nevrale betennelse og mangler i 5-HT og BDNF i hippocampus. Videre den potensielle molekylære mekanismen til den antidepressive effekten av TG(totalt glykosider)ble oppnådd gjennom toveis interaksjon mellom fytokjemikalier og tarmmikrobiota. I tillegg, forbedring av den undertrykte HPG-aksen og syklisk nukleotidabnormitet av TG(totalt glykosider)og HT, som ikke ble regulert av behandling med SSRI representert av fluoksetin, indikerte den klare fordelen med CT i behandlingen av depresjon. Slike modulasjoner representerer en lovende strategi for behandling av depresjon ved bruk av CT(Cistanchetubulosa) og lignende tradisjonelle urtemedisiner.

Forfatterbidrag

XL, YP og LF designet eksperimentene og analyserte data. LF og JW utførte eksperimentet og analyserte data. LF og XL utarbeidet manuskriptet. PM bidro til dyreforsøket og prøvetestingen, og LZ bidro til analysen av tarmmikrobiotasammensetningen. Alle data ble generert internt, og ingen papirfabrikk ble brukt. Alle forfattere er enige om å være ansvarlige for alle aspekter av arbeidet for å sikre integritet og nøyaktighet.

Erklæring om konkurrerende interesse

Forfatterne erklærer at det ikke er noen interessekonflikter.

Anerkjennelser

Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra National Key Research and Development Project (2017YFC1702400).

Tilleggsmateriell

Tilleggsmateriale knyttet til denne artikkelen finner du i nettversjonen på doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.

Fra: 'totale glykosider fra stammer avCistanchetubulosalindre depresjonslignende atferd: toveis interaksjon mellom fytokjemikalier og tarmmikrobiotaLi Fan, et al

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471