Bestemme Acteosid og Echinacoside av Cistanche Tubulosa

[Abstrakt]Mål: Å bygge metoden for bestemmelse (effektivitetskomponent stateside og echinacea-side) i Cistanche Tubulosa ved høyytelses væskekromatografi. For å sammenligne hovedkomponentinnholdet i to habitater, fire verter og fire partier i Cistanche tubulosa. For å gi vitenskapelig bevis for deg - bruken av typene Cistanche tubulosa. Metoder: Bruk av Kromasil C18 (4,6 mm×250 mm, 5 μm) kromatografisk kolonne; Mobil fase: metanol, acetonitril-1 prosent eddiksyre (14∶9∶77); Strømningshastighet: 1.0 mL·min-1; Deteksjonsbølgelengde på 334 nm; Kolonnetemperaturen var 30 grader. Resultater: To komponenter hadde et godt lineært område av standardkurven i testen (r=0.999,9). Gjennomsnittlig utvinningsgrad er 96,89 prosent og 100,7 prosent, og RSD-prosenten var 0,91 prosent og 1,96 prosent. Resultatene av analysen viste at det var en signifikant forskjell mellom innholdet av hovedeffektkomponenter (stateside og echinacoside) i forskjellige regioner, batcher og verter i Cistanche tubulosa. Konklusjon: Metoden er enkel, nøyaktig og reproduserbar. Det gir det eksperimentelle grunnlaget for den medisinske verdien av Cistanche tubulosa.

[Søkeord] Cistanche tubulosa; Acteosid; Echinacoside; innholdsbestemmelse

Cistanche deserticola-eksperiment

Klikk her for å se Cistanche-produkter

【Be om mer】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Cistanche deserticola ble først spilt inn i "Shennong Materia Medica Classic" og er et av de mest brukte legemidlene i nyreforsterkende og yang-forsterkende resepter. De siste årene har den storstilte utgravningen av Cistanche deserticola ført til en rask reduksjon av ville ressurser. Som erstatning for Cistanche deserticola har den rørformede blomsten Cistanche deserticola produsert i Xinjiang stått for 60 prosent av landets forsyning.

Cistanche pulver

Fenyletanolglykosider som echinacoside og ergosterolglykosider er en av de viktigste farmakologiske komponentene i Cistanche tubulosa. Echinoside har nevrobeskyttende effekter [3], osteoprotektive effekter [4] og anti-aldringseffekter [5]. Ergosterosid har effekten av å forbedre hukommelsessvikt, behandle Alzheimers sykdom og ha androgenlignende effekter. Tubular Cistanche: også kjent som Hongliu Dayun, vert for forskjellige planter av Tamarix L. [8-9]. Forfatteren brukte HPLC-metoden for å bestemme innholdet av de to ovennevnte komponentene i Cistanche deserticola. Bestemmelsesmetoden og resultatene gir et vitenskapelig grunnlag for kvalitetskontrollen og den medisinske verdien av dette legemidlet.

Fenyletanolglykosid er den viktigste aktive komponenten i Cistanche deserticola

1 Instrument og testmedisin

Reagens og testmedikament: Echinacetin (batchnummer 111670-200401), ergosterol (batchnummer 111530-200505), referansestoff levert av China Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products. Acetonitril og metanol er kromatografisk rene, mens vann er ultrarent vann; Alle andre reagenser er analytisk rene. Alle medisinske materialer av Cistanche deserticola ble samlet inn og identifisert av professor Ju Aihua fra Inner Mongolia Medical University. Instrument: American Agilent 1100 høyytelses væskekromatografi.

2 Metoder og resultater

2.1 Kromatografiske forhold og systemtilpasningstest

Kromatografikolonne: Kromasil C18 kromatografikolonne (4,6 mm × 250 mm,5 μm); Mobil fase: acetonitrilmetanol 1 prosent eddiksyreløsning (9:14:77); Deteksjonsbølgelengden er 334 nm; Strømning hastighet: 1,0 mL · min-1; Kolonnetemperatur 30 grader ; Injeksjonsvolum 20 μ L. Det teoretiske antallet plater bør ikke være mindre enn 5000 basert på beregningen av echinacea-glykosider. Separasjonsgraden til de to farmakologiske komponentene er bra, med en separasjonsgrad større enn 1,5 fra tilstøtende topper. (Se figur 1-3)

Figur 1 Kromatogram av Echinacetin-referansesubstans

Figur 2 Kromatogram av ergosterolreferansestoff

Figur 3 Kromatogram av Cistanche deserticola

2.2 Klargjøring av prøveløsning

Vei nøyaktig ca. 0,5 g Cistanche deserticola-pulver (siktet gjennom en 60 mesh sikt) og plasser det i en 100 ml brun konisk kolbe. Tilsett nøyaktig 50 ml mobil fase, vei massen, soniker i 40 minutter og plasser den ved romtemperatur; Vei massen igjen, bruk mobilfasen for å kompensere for vekttapet, rist godt, filtrer, ta filtratet igjen, og sett det til side.

2.3 Tilberedning av referanseløsning

Vei nøyaktig en passende mengde echinacetin og ergosterolreferansematerialer, og tilsett mobil fase for å forberede en løsning som inneholder henholdsvis ca. {{0}},14 mg Echinacetin og 0,10 mg ergosterol per 1 ml.

2.4 Lineær forholdsinspeksjon

Vei nøyaktig henholdsvis 6,4 mg echinacea-referansesubstans og 3.0 mg ergosterolreferansesubstans, plasser dem i en 10 ml målekolbe, fortynn dem med mobil fase og rist dem jevnt; Sug nøyaktig 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 og 3.0 mL henholdsvis i en 5 mL målekolbe, fortynn til skalaen med mobil fase og rist opp; Absorber henholdsvis 20 μ Injiser L-prøve og mål i henhold til de kromatografiske betingelsene ovenfor. Y-aksen representerer topparealet, og X-aksen representerer injeksjonsvolumet. Tegn en standardkurve. De målte dataene viser at mengden Echinacetin er 0,26 μ g-7,75 μ Det er en god lineær sammenheng mellom toppareal og injeksjonsvolum mellom g, og regresjonsligningen er Y=831.41X21. 88, R2=0.9999; Mengden ergosterolglykosid er 0,30 μ g-7.50 μ Det er en god lineær sammenheng mellom toppareal og injeksjonsvolum mellom g, og regresjonsligningen er Y=671.53X pluss 158.71, R{ {39}}.9999.

Echinoside, den viktigste kjemiske komponenten i Cistanche deserticola

2.5 Presisjonstest

Vei nøyaktig 0,5 g av det medisinske pulveret ovenfor, klargjør testløsningen i henhold til metoden beskrevet i "2.2", injiser 6 påfølgende ganger, og noter topparealene til de 2 komponentene. RSD-prosenten av topparealet til echinacosiden er 1,46 prosent; Innholdet av ergosterolglykosid er 1,62 prosent.

2.6 Stabilitetstest

Ta {{0}},5 g prøvepulver og klargjør testløsningen i henhold til metoden beskrevet i "2.2". Injiser prøven ved 0, 1, 2, 4, 8 og 12 timer etter klargjøring. Resultatene viste at RSD-prosenten av topparealet til Echinacetin var 1,5 prosent; Innholdet av ergosterolglykosid er 2,0 prosent.

2.7 Repeterbarhetstest

Vei nøyaktig 6 prøver av pulver fra samme batch produsert i Minfeng, Hotan, Xinjiang, hver veier omtrent 0,5g. Klargjør og mål topparealet i henhold til metoden under "2.2". Beregn RSD-prosenten av topparealet til echinacoside i 6 prøver som 1,85 prosent og ergosterol som 1,93 prosent.

2.8 Prøvetilsetning og gjenopprettingstest

Vei nøyaktig 6 medisinske pulverprøver fra samme parti produsert i Minfeng, Hotan, Xinjiang, med hver prøve som veier omtrent 0,1 g. Tilsett en viss mengde Echinacetin og ergosterol, og klargjør testløsningen i henhold til metoden beskrevet i "2.2". Gjennomsnittlig utvinningsgrad var henholdsvis 96,89 prosent og 100,7 prosent, med RSD-prosent på henholdsvis 0,91 prosent og 1,96 prosent. (Se tabeller 1-2)

Tabell 1 Resultater av ananasjuice glukosid utvinningstest

Tabell 2 Resultater av ergosterolglykosid utvinningstest

2.9 Prøvebestemmelse

Ta det medisinske pulveret av Cistanche deserticola fra hvert rør og bruk i henhold til metoden i "2.2". De målte resultatene er vist i tabell 3.

Tabell 3 Bestemmelse av Echinacetin og Ergosterosid i Cistanche deserticola

3 Diskusjon

3.1 Valg av mobil fase

To sett med mobile faser ble sammenlignet: 1) metanolacetonitril 1 prosent eddiksyreløsning (14:9:77); (2) Metanol: 1 prosent maursyre (21,5:78,5). Resultatene viste at eluering med mobil fase (1) resulterte i moderat relativ retensjonstid, færre urenhetstopper og god separasjon av de to komponentene.

3.2 Valg av uttaksforhold

Effekten av ulike ekstraksjonsmetoder (varmetilbakeløp, ultralyd) og ekstraksjonstider (40 min, 50 min) på innholdet av aktive ingredienser ble sammenlignet ved bruk av mobil fase som ekstraksjonsløsningsmiddel. Til slutt ble det funnet at selv om det høyeste innholdet ble målt etter oppvarming og tilbakeløp i 50 minutter, var det ikke noe valg på grunn av dårlig toppform. Innholdet målt med ultralyd i 40 minutter og ultralyd i 50 minutter er likt, så ultralyd i 40 minutter ble valgt som ekstraksjonsbetingelse.

3.3 Forskning har vist

Kinesisk urt cistanche

At ulike verter og habitater har betydelige forskjeller i innholdet av echinacosid og ergosterol i Cistanche deserticola, noe som indikerer at kvaliteten på det medisinske materialet er betydelig påvirket av lokalisering og vert. Derfor er den systematiske studien av korrelasjonen mellom opprinnelsen, vert og kvaliteten på det medisinske materialet til Cistanche tubulosa av stor betydning for å velge de optimale vertsplantene og evaluere kvaliteten på Cistanche tubulosa.

henvisning

[1] Chen Fei, Chen Zhuo, Xing Xuefei, et al. Forskningsfremgang på Cistanche deserticola [J]. Drug Evaluation Research, 2013, 36 (6): 469-475

[2] Song Hailong, Jia Xiaoguang, Xie Haihui. Forskningsfremgang på de kjemiske komponentene i Cistanche tubulosa [J]. Xinjiang Tradisjonell kinesisk medisin, 2010, 28 (01): 76-78

[3] ZHU M,LUC,LIW. Forbigående eksponering for echinacosid er tilstrekkelig til å aktivere Trk-signalering og beskytte nevronale celler fra rotenon [J].J Neurochem, 2013,124(4): 571-580. [4] LIF YANG X,YANG Y,etal.Antiosteoporotisk aktivitet av echinacoside hos ovariektomiserte rotter [J].Phytomedicine, 2013,20(6):549-557.

[5] XIE H, ZHU H, CHENG C, et al. Echinacoside forsinker cellulær senescens av humane fibroblastiske celler MRC-5[J]. Pharmazie,2009,64(11):752-754.

[6] Park Jinghua, Pu Xiaoping, Ma Jian, et al. Forbedringen av skopolamin-indusert hukommelsesakkvisisjonsforstyrrelse av coeliaosid [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2001, 17 (6): 625-626

[7] Lai Qinghai, Wang Linlin, Ding Hui, et al. Forskningsfremgang på behandling av osteoporose med Cistanche deserticola [J]. Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, 2016, 18 (3): 102-104

[8] Wang Changlin, Guo Yuhai, Tu Pengfei, et al. RAPD-analyse av parasittiske Cistanche deserticola på forskjellige arter av Tamarix [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2009, 34 (3): 264-268

[9] Huang Xiaofang, Xu Rong, Chen Jun, et al. Forskningsstatus og utsikter på habitatkarakteristikker, parasittiske mekanismer og næringstransport av Cistanche deserticola [J] Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2012, 37 (19): 2831-2835