Del Ⅱ Qi Sui Zhu Shui-gips hemmer AQP1- og MAPK-signalering reduserer leverskade indusert av cirrhotic ascites

Resultater

1. Cirrhotic ascites lesjoner.

Som vist i figur 1(a), er kjernen farget med hematoksylin i en distinkt blå farge. Komponentene i cytoplasma og ekstracellulær matriks ble farget med eosin i forskjellige røde nyanser. Hepatocyttene i modellgruppen viste alle steatose, de pseudolobulære strukturene var tydelige i prøvene fra den fjerde uken, og prøvene fra den sjette uken viste sklerotiske nekrotiske trekk med uorganisert hepatocyttarrangement, hepatocyttdegenerasjon og nekrose, den åpenbare spredningen av fibrøst bindevev , og omfattende dannelse av pseudolobulære strukturer. Etter ti uker pluss tre dager med injeksjon av karbontetraklorid-olivenolje økte rottene i modellgruppen sakte kroppsvekten, og etter den første uken begynte en signifikant forskjell i kroppsvekt å vises mellom kontrollgruppen og modellgruppen ( P < 0.001), og abdominalomkretskoeffisienten (abdominalomkrets/kroppsvekt) ble beregnet og fant at rottene i kontrollgruppen økte abdominalomkretsen og kroppsvekten normalt. Tvert imot, bukomkretsen til modellrottene fortsatte å øke med tiden. Økningen i abdominal omkrets var signifikant større i modellgruppen enn i kontrollgruppen ved uke 3 (Figur 1(b)). Dermed kan cirrhotic ascites føre til en unormal økning i abdominal omkrets og alvorlig skade på leveren hos rotter.

2. QSZSP lindrer visceral skade forårsaket av cirrhotic ascites.

Som vist i figur 2, i cirrhose-modellgruppen, ble leverstrukturen forstyrret og omfattende vakuolar-lignende degenerasjon kunne sees, og nyrevevsskade, glomerulær hypertrofi, økning i stroma i thylakoidregionen, inflammatorisk celleinfiltrasjon, glomerulær epitel. celleløsning, og nyretubuli ble utvidet; peritoneal mesothelial celler ble økt, submesothelial stroma ble fortykket, og peritoneal vev ble fortykket. Etter fire ukers behandling med høydose QSZSP var levervevsstrukturen intakt, med sentrerte kjerner og rødfarget cytoplasma; de fleste glomeruli hadde normal struktur og normale tubuli; peritoneal mesothelial celler ble kastet, og peritoneal vevstykkelse ble redusert sammenlignet med modellgruppen

3. QSZSP regulerer leverfunksjonsrelaterte faktorer hos rotter med cirrhotic ascites.

Som vist i figur 3, var konsentrasjonene av TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na og Ca i modellgruppen signifikant høyere (P < 0.0{{5} }1) enn de i kontrollgruppen og ble signifikant redusert etter behandling med høye doser QSZSP. Konsentrasjonene av ALB i modellgruppen var signifikant lavere (P < 0,001) enn de i kontrollgruppen, og konsentrasjonene deres ble signifikant økt (P < 0,001) etter behandling med høy dose QSZSP. Ved å kombinere de to ovennevnte resultatene, kan det bli funnet at QSZSP kan modulere leverfunksjonsrelaterte faktorer for å lindre lever-, nyre- og peritoneal skade forårsaket av cirrhotic ascites.

4. QSZSP Regulerer AQP1-proteinuttrykk i leveren, nyrene og bukhinnen.

Som vist i figur 4, fører cirrhotic ascites til unormalt høyt uttrykk av AQP1-protein i leveren, nyrene og bukhinnen hos rotter (P < 0.001). Sammenlignet med modellgruppen ble AQP1-proteinekspresjonen redusert etter behandling med lav dose QSZSP og signifikant redusert (P < 0,001) etter behandling med høy dose QSZSP, men AQP1-proteinekspresjonen i lever, nyre og peritoneum var fortsatt høyere enn i kontrollgruppen på dette tidspunktet. QSZSP var i stand til å hemme AQP1 protein høyt uttrykk forårsaket av cirrhotic ascites.

5. QSZSP hindrer MAPK-signalveien.

Som vist i figur 5 ble aktiveringen av p-ERK, p-JNK og p-p38 i modellgruppen påvist samtidig i leveren, nyrene og bukhinnen. Proteinekspresjonen av p-ERK, p-JNK og p-p38 ble redusert etter QSZSP-behandling, og p-ERK, p-JNK og p-p38 proteinekspresjonsnivåer var signifikant lavere (P < 0. 001) etter en høydose QSZSP-behandling enn de i modellgruppen.

6. QSZSP induserer abdomenomkrets hos rotter med cirrhotic ascites.

Som vist i figur 6, etter fire ukers behandling, er modellgruppens rottekroppsvekt alltid lavere enn de tre andre gruppene, og etter behandling med QSZSP i høy dose viste rotter med cirrhotic ascites en signifikant økning i kroppsvekt, og Kroppsvekten til rotter i lavdosebehandlingsgruppen QSZSP var også høyere enn for modellgruppen (Figur 6(a)). Interessant nok viste rottene i QSZSP høydosegruppen en synkende trend i abdominal omkrets sammen med en økning i kroppsvekt, og etter fire ukers behandling var rottene i QSZSP høydosegruppen signifikant lavere enn modellgruppen. Kombinert med resultatene av HE-farging kan det tyde på at QSZSP lindret organskaden forårsaket av cirrhotic ascites og reduserte den unormale veksten av abdominal omkrets.

Diskusjon

Cirrhosis ascites er et patologisk fenomen med væskeansamling i bukhulen forårsaket av en kombinasjon av faktorer under den dekompenserte fasen av cirrhose og er den vanligste første hendelsen i den dekompenserte fasen av cirrhose. Det gir ikke bare uutholdelige smerter til pasienter med leversykdom og reduserer livskvaliteten betydelig, men forårsaker også vann-elektrolyttforstyrrelser og forringelse av kroppens indre miljø, noe som kan føre til alvorlige komplikasjoner som leverencefalopati, blødninger fra øvre gastrointestinale og hepatorenalt syndrom, og er en av hovedfaktorene som fører til død hos pasienter med leversykdom [31, 32]. Studier har vist at pasienter med cirrhotic ascites har en 3-års morbiditet og dødelighet på 50 prosent og en 5-års overlevelsesrate på bare 5–10 prosent [33]. Denne studien fant ikke bare at cirrhotic ascites førte til alvorlig lever-, peritoneum- og nyreskade, men fant også at rotter med cirrhotic ascites hadde redusert vektøkning og overdreven vekst i abdominal omkrets (Figur 1). Etter 4 ukers behandling begynte rottene å gå opp i vekt og abdominalomkretsen ble redusert (Figur 6).

Klikk her for å fåfordelene med Cistanche

Tie et al. [29] fant at i prostatakreftceller, hypoksi-indusert AQP1-proteinoppregulering på ap38-avhengig måte at AQP1 ble indusert av hypoksi på transkripsjonsnivå, og at AQP1-regulering i PC-3M var avhengig på kalsium, PKC og p38MAPK samt oksygenspenning. AQP1 er mye uttrykt i lymfekar, kapillærer og endotelceller i små vener og er distribuert i leveren, bukhinnen, nyrene, pleura, luftveiene, fordøyelseskanalen fra spiserøret til tykktarmen, hjertemuskelen, glatt muskulatur og hjernen [ 24]. Huebert et al. [34] fant at i de tidlige stadiene av leverfibrose økte AQP1-ekspresjon på levervevscellemembraner tilsvarende ettersom graden av leverfibrose utviklet seg. Liu et al. [30, 35] fant at peptidoglykan er en hemmer av p38 MAPK-transduksjonsveien og lipopolysakkarid er en hemmer av p38/JNK/ERK-banen som til slutt virker på AQP1-genet og forårsaker nedregulering av AQP1-ekspresjon i humane pleurale mesotelreduksjonsceller og at i AQP1 er uttrykk doseavhengig og tidsavhengig. I denne studien var QSZSP i stand til å hemme AQP1-proteinhøyt uttrykk forårsaket av cirrhotic ascites i "leverperitoneum-nyre"-aksen til cirrhotic ascites-rotter. QSZSP var i stand til å hemme AQP1 protein høyt uttrykk forårsaket av cirrhotic ascites, og MAPK signalveien i "lever peritoneum-nyre" aksen ble også hemmet på dette tidspunktet. Dette viste at aktiveringen av MAPK-signalveien var involvert i organskade i "lever-peritoneum-nyre"-aksen til cirrhotic ascites-rotter og var assosiert med AQP1. Til slutt ble det funnet at de behandlede rottene hadde lavere Cr og TBiL og signifikant høyere ALB i serum, noe som, kombinert med økningen i kroppsvekt etter behandling, indikerte at QSZSP hadde en viss effekt på å forbedre livskvaliteten.

Cistanche ekstrakt

Men for behandling av pasienter med cirrhotic ascites, vil medisin øke vanninntaket, noe som motsier prinsippet om vannbegrensning i denne sykdommen; spesielt, for pasienter med et stort antall ascites, vil medisinadministrasjon ytterligere øke pasientens abdominale distensjonssymptomer, og deres etterlevelse er dårlig. Kinesisk medisin er en viktig ekstern behandlingsmetode i TCM, som kan løse motsetningen mellom tradisjonell kinesisk medisin og behandling av cirrhotic ascites med vannrestriksjon og kan virke direkte på det syke området. Utviklingen av formuleringsprosessen, kvalitetsstandarden og sikkerheten til gelformen av QSZSP har blitt fullført i forrige fase [36–39].

Tidligere studier på mekanismen for ascitesdannelse i skrumplever har hovedsakelig fokusert på den patologiske rollen til leveren og nyrene, slik som endring av portalhemodynamikk ved skrumplever, vann- og natriumretensjonseffekten av nyrene, eller de hormonelle endringene som utløses av begge , neglisjerer rollen til bukhinnen og rollen til lever-peritoneum-nyre som en organisk helhet i dannelsen av ascites ved cirrhose.

Cistanche pulver

Basert på den forrige studien tok denne studien utgangspunktet i den patologiske karakteren av vannmetabolismeforstyrrelser i cirrhotic ascites og var den første til å foreslå hypotesen om at "lever-peritoneum-nyre"-aksen er en funksjonell akse for vannmetabolisme som er involvert i "produksjon-absorpsjon-utmattelse" av peritonealvæske med aquaporins-protein som det vanlige materialgrunnlaget og spiller en nøkkelrolle i dannelsen av cirrhotic ascites. Det ble bevist at QSZSP kan hemme aktiveringen av MAPK-signalveien og beskytte leverfunksjonen hos cirrhotic ascites-rotter, og det ble funnet at AQP1 av "lever-peritoneal-nyre"-aksen spiller en tilretteleggende rolle i prosessen med ascites i cirrhose ascites. Studien viste også at QSZSP regulerer AQP1-uttrykk i "lever-peritoneal-nyre"-aksen, og oppnår dermed den terapeutiske effekten av å blokkere ascites. QSZSP hemmer AQP1-ekspresjon i leveren, bukhinnen og nyrene, og reduserer dermed abdominal omkrets. Denne prosessen er relatert til hemming av MAPK-veiaktivering av QSZSP.

Mange studier har funnet at MAPK-signalveien er involvert i reguleringen av ascites ved cirrhose. I denne studien fant vi at aktiveringen av MAPK-signalveien ble hemmet etter QSZSP-behandling, men hvorvidt QSZSP retter seg mot MAPK-signalveien for behandling av cirrhotic ascites er ukjent i denne studien. Som en begrensning av denne studien vil kanskje målrettingsforholdet til MAPK-signalveien i QSZSP for behandling av cirrhotic ascites bli verifisert in vitro i fremtidige studier av leveren.

Konklusjon

QSZSP hemmer MAPK-aktivering og AQP1-proteinuttrykk i "lever-peritoneal-nyre"-aksen for å lindre ascitesskade ved skrumplever.

Effektene av Cistanche

Effekten av Cistanche tubulosa på leverskade forårsaket av cirrhotic ascites

Skrumplever er en kronisk leversykdom som kan føre til ulike komplikasjoner, inkludert ascites, som refererer til opphopning av væske i bukhulen. Cirrhotic ascites forårsaker ofte leverskade, noe som fører til høy sykelighet og dødelighet. Cistanche tubulosa (CT) er en tradisjonell kinesisk urtemedisin som har blitt brukt til å behandle lever- og nyresykdommer i mange år. Nyere studier har antydet at CT-ekstrakt kan ha ulike terapeutiske egenskaper, som antiinflammatoriske, antioksidant- og immunmodulerende effekter. Dessuten har CT-ekstrakt vist seg å ha beskyttende effekter på flere organer som leveren og hjertet. Derfor har forskere undersøkt om CT-ekstrakt kan ha et terapeutisk potensial ved cirrhotic ascites-indusert leverskade. Foreløpige studier i dyremodeller har vist at behandling med CT-ekstrakt førte til betydelige reduksjoner i leverskademarkører og forbedrede leverfunksjonsindikatorer. CT-ekstrakt kan utøve disse gunstige effektene gjennom sin evne til å redusere betennelse og oksidativt stress, samt fremme vevsregenerering. Det er imidlertid nødvendig med ytterligere forskning for å bestemme sikkerheten og effekten av CT-ekstrakt i menneskelige forsøk.

Referanser

[28] E. McCoy og H. Sontheimer, "MAPK induserer AQP1-ekspresjon i astrocytter etter skade," Glia, vol. 58, nei. 2, s. 209–217, 2010.

[29] L. Tie, N. Lu, XY Pan, et al., "Hypoksi-indusert oppregulering av aquaporin-1-protein i prostatakreftceller på en 38-avhengig måte," Cellular Physiology and Biochemistry: International Journal of Experimental Cellular Physiology, Biochemistry, and Pharmacology, vol. 29, nei. 1-2, s. 269–280, 2012.

[30] L. Liu og C. Xie, "Effekter av nedregulering av aquaporin1 av peptidoglykan og lipopolysakkarid via MAPK-veier i MeT-5A-celler," Lung, vol. 189, nr. 4, s. 331–340, 2011.

[31] J. Uriz, A. C´ardenas og V. Arroyo, "Patofysiologi, diagnose og behandling av ascites ved cirrhosis," Best Practice & Research Clinical Gastroenterology, vol. 14, nei. 6, s. 927–943, 2000.

[32] W. Hou og AJ Sanyal, "Ascites: diagnose and management," Medical Clinics of North America, vol. 93, nei. 4, s. 801–817, 2009.

[33] BS Sandhu og AJ Sanyal, "Management of ascites in cirrhosis," Clinics in Liver Disease, vol. 9, nei. 4, s. 715–732, 2005.

[34] RC Huebert, MM Vasdev, U. Shergill, et al., "Aquaporin-1 letter angiogen invasjon i den patologiske neovaskulaturen som følger med cirrhose," Hepatology, vol. 52, nei. 1, s. 238–248, 2010.

[35] L. Liu, L. Du, Y. Chen et al., "Nedregulering av Aquaporin1 (AQP1) av peptidoglykan via p38 MAPK-veier i primære rottepleurale mesothelceller," Experimental Lung Research, vol. 40, nei. 4, s. 145–153, 2014.

[36] QH Yuehong, "Studie om etanolekstraksjonsprosess for Qisui Zhushui gelkrem," Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 30, nei. 10, s. 150–152, 2014.

[37] MD Qiu Hua, X. Liu og Y. Guo, "Studie på vannekstraksjonsteknologien til Qisui Zhushui gelsalve," Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, vol. 21, nei. 2, s. 60–63, 2015.

[38] WN Qiu Hua, X. Liu, D. Mao, X. Xing og Y. Guo, "Studies on the quality standard of the Qishui Zhushui gel ointments," Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, vol. 18, nei. 3, s. 540–544, 2016.

[39] MD Qiu Hua, X. Liu og Y. Guo, "Matriseformuleringen av Qishui Zhushui gel salver optimalisert gjennom den ortogonale testen," Guangxi Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 37, nei. 5, s. 4, 2014.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 min Li 2 Yong Lin Huang 3 og Zhen Heng Song 3

1 Hepatologisk avdeling, det første tilknyttede sykehuset ved Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning, Kina

2 Institutt for medisinsk laboratorium, det første tilknyttede sykehuset ved Guangxi universitet for kinesisk medisin, Nanning, Kina

3 Institutt for hepatologi, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning, Kina